專利名稱：酶法測定乙酰乙酸試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種酶法測定乙酰乙酸試劑盒。
糖尿病酮癥酸中毒是臨床常見病、多發(fā)病，原因是血酮體增高引起，乙酰乙酸是酮體重要組成部分，占酮體總量20％，酮癥診斷治療不及時將有生命危險，乙酰乙酸測定有顯色法、氣相色譜法、放射化學(xué)法、毛細(xì)管等速電泳法等。顯色法是用硝普鈉與乙酰乙酸反應(yīng)產(chǎn)生紫紅色半定量測定，放射化學(xué)法因有射線，化驗品難于接受，毛細(xì)管等速電泳操作時間長，復(fù)雜不適于批量檢測。氣相色譜特導(dǎo)性差。目前，在《臨床化學(xué)診斷方法大全》中介紹了酶法測定乙酰乙酸方法，但未涉及乙酰乙酸試劑盒，文獻(xiàn)介紹的方法只能現(xiàn)配現(xiàn)用，不能長期保存，本試劑盒可冷藏保存一年以上，長期使用。
本發(fā)明的目的在于提供一種長期保存的酶法測定乙酰乙酸試劑盒。
本發(fā)明技術(shù)方案一種酶法測定乙酰乙酸試劑盒，其特征在于含有磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉、乙二胺四乙酸二鈉、β-羥丁酸脫氫酶、氯化鎂、疊氮鈉、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸、硫酸銨。
本發(fā)明的有益效果本發(fā)明配方中乙二胺四乙酸二鈉可洛合重金屬離子，防止對酶的破壞，氯化鎂做酶的激活劑、疊氮鈉可防腐，本試劑盒使用的保護(hù)劑能有效穩(wěn)定酶與輔酶活性。試劑抗干擾能力強(qiáng)，中等程度溶血，乳靡血，血糖20mmol/l以下，膽紅素100umol/l以下對測定不產(chǎn)生干擾，凍干試劑冷藏一年，試劑盒中酶活力小于5％，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(還原型輔酶I)破壞小于10％，本試劑盒線性范圍達(dá)5.0mmol/l，正常參考范圍0.038-0.286mmol/l，回收率96.5-103.8％，變異系數(shù)CV＝5.7％，X＝0.26mmol/l，SD＝0.015，n＝20。溶解后室溫穩(wěn)定72小時，冷藏穩(wěn)定二周。
下面詳述本發(fā)明的實(shí)施例。
取超純蒸餾水，用前將水加熱至沸，密封備用。將磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉、乙二胺四乙酸二鈉、氯化鎂、疊氮鈉、硫酸銨加前面所述的蒸餾水調(diào)PH值6.4，然后加β-羥丁酸脫氫酶，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，此時磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉為82毫摩爾/升，乙二胺四乙酸二鈉22毫摩爾/升，氯化鎂5.5毫摩爾/升，疊氮鈉0.020毫摩爾/升，硫酸胺55毫摩爾/升，β-羥丁酸脫氫酶30國際單位/升，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸2.0毫摩爾/升，將試劑溶液分裝成5-10毫升/瓶，經(jīng)低溫冷凍干燥后，水份小于3％，使用時加5-10毫升蒸餾水，溶解后即可使用。
權(quán)利要求
1.一種酶法測定乙酰乙酸試劑盒，其特征在于含有磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉、乙二胺四乙酸二鈉、β-羥丁酸脫氫酶、氯化鎂、疊氮鈉、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸、硫酸銨。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶法測定乙酰乙酸試劑盒，其特征在于各組分含量的摩爾比為磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉80-100、乙二胺四乙酸二鈉20-30、氯化鎂5.0-7.0、疊氮鈉0.018-0.030、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸1.8-4.0、硫酸銨50-100。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種酶法測定乙酰乙酸試劑盒,解決了現(xiàn)有測定試劑不易保存的問題。本發(fā)明技術(shù)方案:一種酶法測定乙酰乙酸試劑盒,其特征在于:含有磷酸氫二鈉－磷酸二氫鈉、乙二胺四乙酸二鈉、β－羥丁酸脫氫酶、氯化鎂、疊氮鈉、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸、硫酸銨,本發(fā)明保存時間長,使用方便。
文檔編號C12Q1/32GK1277356SQ9911296
公開日2000年12月20日 申請日期1999年5月28日 優(yōu)先權(quán)日1999年5月28日
發(fā)明者于永光, 周艷春 申請人:哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院