專利名稱：固態(tài)酶配制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型的固態(tài)酶配制劑，其包含下述組分的混合物至少ー種鹽穩(wěn)定的酶組合物、至少ー種微粒狀載體和至少ー種疏水性液體。另外,本發(fā)明涉及生產(chǎn)此類固態(tài)酶配制劑的方法以及包含此類酶配制劑的動物飼料、食品和食品添加物。
背景技術(shù)：
通過現(xiàn)有技術(shù)獲知了許多固態(tài)酶組合物，它們通過，例如噴霧干燥液體酶溶液制備。進(jìn)一歩公知的是，在此類噴霧干燥過程中酶的穩(wěn)定性可通過添加穩(wěn)定鹽，如例如硫酸鎂 而顯著提高。因此，按照此類方式生產(chǎn)的固態(tài)酶組合物即使在噴霧干燥后還具有較高的酶活性百分比。例如，在EP-A-O 758 018中描述了儲存穩(wěn)定且加工穩(wěn)定的固態(tài)酶組合物，它們通過干燥包含至少ー種酶和水溶性無機(jī)鹽的溶液獲得。該文獻(xiàn)所述的酶組合物優(yōu)選用作固態(tài)動物飼料組合物的添加劑。為了生產(chǎn)此類添加酶的動物飼料組合物，期望酶盡可能均勻地分布在最終的飼料制劑中。由于干的酶制劑中包含高濃度的酶，因此基于飼料組合物的總重量，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于I重量％的添加量通常完全足以為飼料組合物提供期望的酶活性。但是，要求的酶添加量越低，在最終飼料制劑中均勻分布酶活性越難以實(shí)現(xiàn)。當(dāng)然，在生產(chǎn)要添加的高度濃縮固態(tài)酶組合物在其中盡可能均勻分布的食品和食品添加物時(shí)也觀察到同樣的困難。因此，本發(fā)明的目的是尋找一種能夠使基本僅包含酶和穩(wěn)定載體的高度濃縮固態(tài)酶組合物形成下述形態(tài)的方法確保在食品和飼料中的劑量均勻且可再現(xiàn)。同時(shí)，本發(fā)明還應(yīng)該保證使用的配制劑因此具有良好的加工性能，例如產(chǎn)生灰塵的趨勢降低、良好的流變性能和較窄的粒度分布。發(fā)明概述所述目的已經(jīng)令人驚訝地通過提供一種固態(tài)酶配制劑實(shí)現(xiàn)，其中所述的固態(tài)酶制劑通過混合鹽穩(wěn)定酶的微粒狀組合物、微粒狀載體和疏水性液體獲得。尤其冷人驚奇的是，本發(fā)明生產(chǎn)的固態(tài)配制劑特別易于處理，原因在于它們顯示出高度的分離穩(wěn)定性、極其低的起塵傾向，以及無論是否添加疏水性液體都具有優(yōu)異的流變性能。


圖I以流程圖為基礎(chǔ)顯示了本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方案，特別是固態(tài)木聚糖酶配制劑的生產(chǎn)。為此，將含木聚糖酶的液態(tài)濃縮物與硫酸鎂混合，在噴霧設(shè)施中干燥，得到包含木聚糖酶的穩(wěn)定化粉末，并且可同時(shí)獲得附聚的顆粒，例如粒徑約50-250 u m的顆粒。下一歩，將含木聚糖酶的干燥粉末與固態(tài)的有機(jī)載體混合并且，同時(shí)或然后，用豆油噴霧。這樣就生產(chǎn)出具有低起塵傾向和高分離穩(wěn)定性的含木聚糖酶的配制劑。圖2說明了本發(fā)明優(yōu)選的其它固態(tài)酶配制劑的生產(chǎn)，依照不同的實(shí)施方案，所述配制劑包含木聚糖酶和葡聚糖酶混合物。依照方法方案(a)，該方法由葡聚糖酶與木聚糖酶的液態(tài)混合濃縮物開始，而在方法方案(b)中，該方法首先由液態(tài)葡聚糖酶濃縮物開始。依照方法方案(a)，葡聚糖酶與木聚糖酶的混合濃縮物按照上文圖I所述干燥并且與有機(jī)載體混合并且用豆油噴霧。與之不同，依照方法方案(b)，首先處理液態(tài)的葡聚糖酶濃縮物以按照與上文關(guān)于木聚糖酶濃縮物相似的方式生成含葡聚糖酶的粉末。將該粉末與依照圖I制備的木聚糖酶粉末混合，同時(shí)與有機(jī)載體混合并且用豆油噴霧，同樣生產(chǎn)出包含木聚糖酶和葡聚糖酶的酶配制劑。所得的含葡聚糖酶和木聚糖酶的固態(tài)酶配制劑同樣以非常低的起塵傾向和高分離穩(wěn)定性為特征。發(fā)明詳述a)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案本發(fā)明涉及固態(tài)酶配制劑，其包含下述組分的混合物a)至少ー種酶和至少ー種ー價(jià)或ニ價(jià)金屬陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的至少ー種微粒狀酶組合物，b)至少ー種生理 上相容的微粒狀無機(jī)或有機(jī)載體和c)至少ー種具有粘合性能的疏水性液體，特別是熔點(diǎn)在-60° C至30° C范圍內(nèi)，尤其在-50至0° C范圍內(nèi)，例如-40至-5° C或-30至-10° C的疏水性液體。本發(fā)明尤其涉及包含下述組分的酶配制劑a) ー種微粒狀酶組合物，其包含一種與至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽混合的酶；或b) ー種微粒狀酶組合物，其包含至少兩種彼此不同且與至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽混合的酶；或c)至少兩種彼此不同的微粒狀酶組合物，所述兩種組合物的差別在于它們包含至少ー種不同的酶，每種組合物中的酶以與至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽混合的形式存在。特別地，本發(fā)明涉及酶配制劑，其中載體與酶組合物的中值粒徑比在約0. 125-8范圍內(nèi)，特別是0. 25-4或0. 5-2或1-1. 5。所用酶組合物與所用載體的中值粒度應(yīng)該在約50-500 y m范圍內(nèi)，或150-350 u m。有利地，酶組合物與載體的混合比設(shè)定在約1:1000-1:5重量份，或1:500-1:10或1:100-1:20范圍內(nèi)。疏水性液體的比例基于所述酶配制劑總重量為0. 1-5重量％、0. 2-2重量％、0. 3-1. 5 重量 ％ 或 0. 3-0. 7 重量 ％。在依照本發(fā)明使用的酶組合物中，鹽的比例基于所述酶組合物總重量為1-30重量％、5-25重量％或10-20重量％。所述酶組合物中酶蛋白質(zhì)的百分比為約0. 01-99重量％，如例如，0. 01-80重量％、10-80重量％、20-75重量％或30-60重量％。除至少ー種酶和至少ー種鹽之外，所述酶組合物還可以包含其它的組分。這些組分可用作粘合劑(例如聚合物或糖)、填料(例如石灰、壤土、碳水化合物、糖、淀粉)、染料或其它的穩(wěn)定劑。此類其它組分本身可由現(xiàn)有技術(shù)獲知并且是本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員公知的。本發(fā)明酶混合物的殘余水分在5-30重量％范圍內(nèi)，如例如，5-20重量％，或7_16
重量％。
本發(fā)明不限于任何規(guī)定的酶。但是，具體地，適合使用的酶選自水解酶(EC3.)、特別是糖苷酶(EC3. 2. I)、肽酶(EC3. 4)，尤其是，木聚糖酶、葡聚糖酶(半纖維素酶)、纖維素酶、蛋白酶、角蛋白酶、淀粉酶、肽酶和它們的混合物。在優(yōu)選的酶配制劑中，所述酶選自內(nèi)-1，4-3 -木聚糖酶(EC3. 2. I. 8)、內(nèi)-I, 4-3 -葡聚糖酶(EC3. 2. I. 4)和它們的混合物。本發(fā)明還涉及進(jìn)一歩具有至少ー種下述性能的酶配制劑
a)重量分析測定的粉塵值(依照實(shí)施例描述的方法)在0-0. 5、或0. 001-0. 3、或0. 01-0. 2重量％范圍內(nèi)；b)堆積密度在 200-700、300-500 或 350_450g/l 范圍內(nèi)(依照 DIN ENIS060 的規(guī)定限定)；c)流動性(通過Schulze環(huán)剪切試驗(yàn)測定)具有3_30、5_15或6_10范圍內(nèi)的ffc值。本發(fā)明特別涉及酶配制劑，該配制劑包含下述組分的混合物a)至少ー種酶組合物，其中酶組分選自按照上文所述的木聚糖酶、葡聚糖酶和它們的混合物，所述酶組分為與硫酸鎂混合的，其中硫酸鎂的比例基于所述干燥酶組合物總重量為約5-25重量％，或15-20重量％ ；b)至少ー種小麥粗粉麩(Weizengriepkleietriiger)載體，酶組合物與載體的
混合比在1:5-1:500或1:10-1:100范圍內(nèi)；c)植物油，比例基于所述酶配制劑總重量為約0. 1-1重量％,或0. 3-0. 6重量％,酶組合物和載體的中值粒度在約100-500、或150-350 iim，并且木聚糖酶的比例為約3000-30000、或5200-18000、或5400-9000TXU/g配制劑，葡聚糖酶的比例為約2000-20000、或2200-10000TCU/g配制劑。木聚糖酶的百分比為約1_20重量％，優(yōu)選2_10重量％，尤其2. 5-5重量％，并且葡聚糖酶的重量百分比為約0. 01-10重量％，優(yōu)選0. 1-6重量％，尤其0. 2-2重量％。特別優(yōu)選包含上述類型酶組合物并且其中的酶組分為木聚糖酶的配制劑。特別優(yōu)選包含上述類型酶組合物并且其中的酶組分為葡聚糖酶的配制劑。特別優(yōu)選包含上述類型酶組合物并且其中的酶組分為木聚糖酶與葡聚糖酶的混合物的配制劑。特別優(yōu)選包含兩種不同酶的酶組合物并且其中一種酶組分為葡聚糖酶、另ー種為木聚糖酶的配制劑。本發(fā)明還涉及ー種生產(chǎn)根據(jù)上述定義的固態(tài)酶配制劑的方法，其中將至少ー種包含至少ー種酶和至少ー種ー價(jià)或ニ價(jià)金屬陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的微粒狀酶組合物與生理上相容的微粒狀無機(jī)或有機(jī)載體混合，并且將該混合物用疏水性液體(依照上述定義具有的熔點(diǎn)在-60 30 ° C范圍內(nèi))濕潤。特別地，本發(fā)明涉及這樣的方法，其中a)提供ー種包含ー種酶、特別是木聚糖酶或葡聚糖酶的微粒狀酶組合物，所述酶為與至少ー種ー價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的混合物；或b)提供ー種包含至少兩種彼此不同的酶的微粒狀酶組合物，所述酶選自木聚糖酶和葡聚糖酶，且以與至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的混合物提供；或
c)提供至少兩種彼此不同的微粒狀酶組合物，所述兩種組合物的不同之處在于它們包含至少ー種不同的酶，并且每種組合物中的酶以與至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的混合物存在。優(yōu)選的方法是那些通過將其中引入了至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的含酶液體噴霧干燥或噴霧干燥并附聚來獲得所述酶組合物的方法。另外，優(yōu)選的方法是這樣的方法，通過將其中引入了至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的至少兩種包含不同酶的液體噴霧干燥或噴霧干燥并附聚來獲得至少兩種彼此不同的酶的酶組合物，并且a)將所述至少兩種酶組合物各自與微粒狀無機(jī)或有機(jī)載體混合，或b)將微粒狀無機(jī)或有機(jī)載體與所述至少兩種酶組合物混合；并且將依照方案a)或方案b)制備的混合物用疏水性液體濕潤。
·
所用的含酶液體包含至少ー種木聚糖酶、至少一種葡聚糖酶或它們的混合物。具體地，在所用酶組合物中鹽的比例基于所述酶組合物總重量為1-30重量％，或約10-25重量％，或15-20重量％。另外，特別使用這樣的載體和酶組合物，其中中值粒徑之比在約0. 125-8范圍內(nèi)，優(yōu)選 0. 25-4，或 0. 5-2，或 1-1. 5。所用酶組合物和所用載體的中值粒度為約50-500 ii m，或150-350 U m。酶組合物與載體的混合比在約1:1000-1:5，或1:500-1:10，或1:100-1:20范圍內(nèi)。根據(jù)顆粒的尺寸，中值粒度可通過篩分分析(例如使用振動篩機(jī)，來自Retsch的Vibro VS1000型)或通過激光衍射(例如使用來自Malvern的Mastersizer)確定。疏水性液體的比例基于所述酶配制劑總重量為0. 1-5重量％,或0. 2-2重量％、
0.3-1. 5 重量 ％ 或 0. 3-0. 7 重量 ％。本發(fā)明特別涉及一種制備包含至少ー種選自木聚糖酶、葡聚糖酶和其混合物的酶的固態(tài)酶配制劑的方法，其中a)將至少一種含酶液體噴霧干燥或噴霧干燥并附聚以得到至少ー種酶組合物，其中的酶組分選自木聚糖酶、葡聚糖酶和它們的混合物，并且該酶組分以與硫酸鎂的混合物形式存在于所述液體中，硫酸鎂的比例基于干燥酶組合物總重量為約10-25重量％ ；b)將所獲得的酶組合物與微粒狀無機(jī)或有機(jī)載體混合；并且c)用熔點(diǎn)在-60和30° C之間的疏水性液體濕潤所述的酶/載體混合物。優(yōu)選的方法方案包括a)提供ー種包含至少ー種與硫酸鎂混合的木聚糖酶的微粒狀酶組合物；或b)提供ー種包含至少ー種與硫酸鎂混合的葡聚糖酶的微粒狀酶組合物；或c)提供ー種包含與硫酸鎂混合的至少ー種木聚糖酶和至少ー種葡聚糖酶的微粒狀酶組合物；或d)提供至少兩種彼此不同的微粒狀酶組合物，其中一種組合物包含至少ー種木聚糖酶，其他組合物包含至少ー種葡聚糖酶，并且每種組合物中的酶與硫酸鎂的混合物存在。在本發(fā)明方法的特別實(shí)施方案中，將酶組合物與至少ー種小麥粗粉麩載體混合，酶組合物與載體的混合比例為1:5-1:500，或1:10-1:100。混合期間，特別加入植物油，添加比例基于酶配制劑最終重量為約0. 1-1重量％，或0. 3-0. 6重量％。所用酶組合物和所用載體的中值粒度特別為約100-500 i! m，或150-40 u m,并且木聚糖酶的比例為約5000-30000、或5200-10000、或5400-9000TXU/g配制劑和/或葡聚糖酶的比例為約2000-10000、或2200-6000TCU/g配制劑。本發(fā)明還涉及根據(jù)上述定義的干燥酶配制劑用于生產(chǎn)食品、食品添加物或動物飼料的用途。本發(fā)明還涉及包含根據(jù)上述定義的干燥酶配制劑的動物飼料、食品或食品添加物；特別是以約0.001-1重量％的比例包含本發(fā)明酶配制劑的動物飼料。b)酶根據(jù)本發(fā)明使用的酶不受任何限制并且可源于天然或重組酶。所述酶可以是來自植物、真菌、細(xì)菌或酵母的酶。優(yōu)選源自微生物的酶，例如源自真菌、細(xì)菌或酵母。酶可通過公知技術(shù)由各自微生物獲得，其中所述的公知技術(shù)一般包括使產(chǎn)酶微生物在合適的營養(yǎng)培養(yǎng)基中發(fā)酵，然后通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)從發(fā)酵培養(yǎng)基中分離出酶或酶濃縮物。 如果需要的話，為調(diào)節(jié)酶溶液或酶濃縮物的pH，可將常規(guī)物質(zhì)如緩沖劑、堿、酸加入配制劑；優(yōu)選的pH為3. 5-7，特別優(yōu)選3. 5-5，尤其是4-4. 5。另外，可以使用酶的突變體或顯示高熱穩(wěn)定性的酶，如例如W095/2997、97/00020、97/20920,97/22691,98/28410 或 03/062409 中所建議。但是，根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選使用具有木聚糖酶活性的多肽、葡聚糖酶活性的多肽和它們的混合物作為酶。bl)具有木聚糖酶活性的多肽這樣的酶有EC 3. 2. I. 8類的酶，其法定名稱為內(nèi)-1,4-0-木聚糖酶。系統(tǒng)名稱是1，4-0 -D-木聚糖木聚糖水解酶。米用的其他名稱為內(nèi)-(1-4)-0 _木聚糖酶；(1-4)-0 -木聚糖4-木聚糖酶；內(nèi)-1，4-木聚糖酶；木聚糖酶；& -I, 4-木聚糖酶；內(nèi)-1，4-木聚糖酶；內(nèi)-P -1，4-木聚糖酶；內(nèi)-1，4- & -D-木聚糖酶；1，4- P -木聚糖木聚糖水解酶木聚糖酶；3-1，4-木聚糖木聚糖水解酶；內(nèi)-1,4-0-木聚糖酶；3-D-木聚糖酶。所述酶催化木聚糖中1，4-P-D-木糖苷鍵的內(nèi)水解。木聚糖酶可源自例如細(xì)菌，如例如梭菌屬(Clostridium)、鏈霉菌屬(Streptomyces)、類芽抱桿菌屬(Paenibacillus)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、嗜熱子囊菌屬(Thermoascus)、棲熱袍菌屬(Thermotoga)、芽孢桿菌屬(Bacillus),和，例如，源自下列菌株的木聚糖酶Bacillus halodurans、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)、Bacillus agaradhaerens、環(huán)狀芽抱桿菌(Bacillus circulans)、多粘芽抱桿菌(Paenibacillus polymyxa)、芽抱桿菌屬(Bacillus sp.，)、嗜熱脂肪芽抱桿菌(Bacillusstearothermophilus)或枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)。真菌木聚糖酶源自例如酵母和絲狀真菌，如例如源自下列屬曲霉菌屬(Aspergillus)、短梗霉屬(Aureobasidium)、裸孢殼屬(Emericella)、鏈孢霉屬(Fusarium)、頂襄殼屬(Gaeumannomyces)、腐放鄭屬(Humicolaノ、香燕ノ禹(Lentinula)、稻痕病菌(Magnaporthe)、新麗鞭毛菌(Neocallimastix)、諾卡土壤菌屬(Nocardiopsis)、厭氧真菌(Orpinomyces)、擬青霉(Paecilomyces)、青霉屬(Penicillium)、畢赤酵母屬(Pichia)、酵母菌屬(Saccharomyces)、裂裙菌屬(Schizophyllum)、踩節(jié)菌屬(Talaromyces)、嗜熱真菌屬(Thermomyces)、木霉屬(Trichoderma),如例如,Talaromycesemersonii o木聚糖酶的活性按照本身公知的方法確定,如例如Engelen等人在Journal ofAOAC International第79卷第5期，第1019頁(1996)描述的方法。與其中描述的方法不同，用源自小麥的阿糖基木聚糖(Megazyme, article P-ffAXY, Ireland)替代源自斯卑爾脫燕麥的木聚糖底物(Serva Feinbiochemia GmbH u. Co.，Heidelberg)。各種情況下通過經(jīng)至少12小時(shí)將IOOOg無結(jié)塊的阿糖基木聚糖溶于100. OOml水中制備新鮮的底物溶液。b2)具有葡聚糖酶活性的多肽內(nèi)切葡聚糖酶歸類為EC3. 2. I. 4并且經(jīng)常稱作纖維素酶。其它的名稱為內(nèi)-葡聚糖酶、內(nèi)-1,4-0-葡聚糖酶、纖維素A或羧甲基纖維素酶。酶催化纖維中的1，4-P-D-糖苷鍵以及P-D-葡聚糖內(nèi)的1，4-鍵的內(nèi)水解，其中P-D-葡聚糖還包含1，3-鍵。葡聚糖酶可源自例如細(xì)菌，如例如源自芽孢桿菌屬(BaciIIus)、梭菌屬 (Clostridium)、類芽抱桿菌(Paenibacillus)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、鏈霉菌屬(Streptomyces)、嗜熱子囊菌屬(Thermoascus)、棲熱袍菌屬(Thermotoga)。真菌葡聚糖酶源自例如酵母和絲狀真菌，如例如源自下列屬曲霉菌屬(Aspergillus)、短梗霉屬(Aureobasidium)、裸孢殼屬(Emericella)、鏈孢霉屬(Fusarium)、頂囊殼屬(Gaeumannomyces)、腐質(zhì)霉屬(Humicola)、香燕屬(Lentinula)、稻痕病菌(Magnaporthe)、新麗鞭毛菌(Neocallimastix)、諾卡土壤菌屬(Nocardiopsis)、厭氧真菌(Orpinomyces)、擬青霉(Paecilomyces)、青霉屬(Penicillium)、畢赤酵母屬(Pichia)、酵母菌屬(Saccharomyces)、裂裙菌屬(Schizophyllum)、踩節(jié)菌屬(Talaromyces)、嗜熱真菌屬(Tnermomyces)、木霉屬(Trichoderma)，5ロ例如，Talaromyces emersonii。葡聚糖酶的活性依照本身公知的方法確定，并且例如Engelen等人描述在Journal of AOAC International第79卷第5期，第1019頁(1996)中。與其中描述的方法不同，用源自大麥的￠-葡聚糖(Megazyme, articleP-BGBM, Ireland)替代源自大麥的3 _ 葡聚糖底物(Sigma Chemical Co.，St. Louis, M0:No. G-6513)。各種情況下都通過下述步驟制備新鮮的底物溶液首先將0. 750g葡聚糖懸浮于20ml水中，接著通過加入20ml氫氧化鈉溶液(2mol/l)并同時(shí)攪拌15分鐘進(jìn)行溶解；加入42. 5ml檸檬酸溶液(lmol/1)，利用氫氧化鈉溶液(2mol/l)或檸檬酸溶液(lmol/1)在40. (TC +/-0. 1°C下將pH調(diào)整為
3.50+/-0. 03 ;冷卻到室溫后，用水將混合物配至100. 00ml。c)穩(wěn)定鹽可以提及的合適穩(wěn)定鹽的實(shí)例為無機(jī)鹽或有機(jī)鹽。特別是金屬鹽，尤其是有機(jī)酸的堿金屬和堿土金屬鹽，如例如具有1-8個碳原子的一價(jià)或ニ價(jià)羧酸的Mg、Ca、Zn、Na、K鹽，如例如檸檬酸鹽、こ酸鹽、甲酸鹽和氫甲酸鹽(Hydrogenformiate),還有無機(jī)鹽,如例如Mg、Ca、Zn、Na、K的硫酸鹽、碳酸鹽、娃酸鹽或磷酸鹽；堿土金屬氧化物，例如CaO和MgO ;無機(jī)緩沖劑，如堿金屬磷酸氫鹽，特別是鈉和鉀的磷酸氫鹽，如例如K2HPO4,KH2PO4和Na2HPO4。特別優(yōu)選按照基于酶組合物的所示重量比例使用下列鹽硫酸鋅(0.5-10，或 3-8 重量 ％)，硫酸鈣(1-30，或10-25 重量 ％)，硫酸鎂(5-30，或10-25 重量 ％)，
硫酸鈉(1-30，或10-20 重量 ％)。d)合適的載體載體材料的實(shí)例是碳水化合物，特別是糖類以及淀粉類，例如源自玉米、稻、馬鈴薯、小麥和木薯；改性淀粉，例如辛烯基琥珀酸酐；纖維素和微晶纖維素；無機(jī)礦物或壤土，例如粘土、煤、硅藻土、硅酸、滑石和高嶺土 ；粗粒小麥粉，例如小麥粗粉，麩，如小麥麩或小麥粗粉，面粉；鹽如金屬鹽，特別是有機(jī)酸的堿金屬和堿土金屬鹽，例如Mg、Ca、Zn、Na、K的檸檬酸鹽、こ酸鹽、甲酸鹽和氫甲酸鹽，無機(jī)鹽，例如Mg、Ca、Zn、Na、K的硫酸鹽、碳酸鹽、硅酸鹽或磷酸鹽；堿土金屬氧化物如CaO和MgO ;無機(jī)緩沖劑如堿金屬的磷酸氫鹽，特別是鈉和鉀的磷酸氫鹽，例如K2HP04、KH2PO4和Na2HPO415e)合適的疏水性液體可以提及的合適疏水性液體的實(shí)例為原則上所有的(熔點(diǎn)在-60到30° C范圍內(nèi)，具有疏水性分子結(jié)構(gòu)部分的)疏水性液體都可以使用，但是前提是它們適合用作食品或飼料添加剤。優(yōu)選天然存在的植物或動物液體，如磷脂和一 _、ニ -和三酰甘油酯和它們的混合物。可以提及的非限定性實(shí)例為大豆卵磷脂，植物油如葵花油、玉米胚芽油、豆油、棕 桐油、菜籽油、棕櫚殼油、棉籽油、花生油、巴巴蘇油、薊油以及動物油如例如魚油。f)配制劑的生產(chǎn)本發(fā)明酶配制劑使用本身公知的現(xiàn)有技術(shù)方法制備，如例如下述文獻(xiàn)所描述的萬法Mollet 等人，F(xiàn)ormulierungstecnnik [Formulation technique], 2000, VerlagWiiey-VCH, Weinheim,或 Heinze, Handouch der Agglomerationstecnnik[Handbook ofagglomeration technique], 2000, Verlag Wiley-VCH, Weinheim。fl)干燥為了通過干燥產(chǎn)生鹽穩(wěn)定的，優(yōu)選附聚的酶組合物，可以考慮各種技術(shù)，例如，特別地，-噴霧干燥，-流化床?；?，-流化床附聚，-流化噴霧干燥器(FSD)技術(shù)，-來自Glatt 的 Procell 技術(shù)(W02004/108911)。干燥可以連續(xù)或間歇進(jìn)行。如果合適的話，在干燥后，干燥的產(chǎn)物必須進(jìn)ー步篩分、研磨或附聚。所述步驟也可以組合。依照本發(fā)明用于噴霧干燥或附聚的酶溶液包含至少ー種溶解或懸浮在水相中的可用作食品添加劑或飼料添加劑的酶，如例如，可通過包括發(fā)酵和處理步驟的生產(chǎn)方法獲得的酶濃縮物。所述溶液具有的蛋白比例基于該溶液總重量為約1-50重量％，優(yōu)選約10-35重量％。pH—般為約3-9。除了上述鹽形式酶穩(wěn)定劑，如例如堿金屬或堿土金屬鹽，例如硫酸鈉或硫酸鎂之外，所述溶液還可以任選包含其他的常規(guī)添加劑?？梢蕴峒暗膶?shí)例為緩沖齊U，如例如磷酸鹽緩沖劑；穩(wěn)定劑，如例如こ醇或表面活性劑等。在所述酶溶液的粘合性能不足以確保顆粒在噴霧后粘結(jié)在一起的情況下，額外使用粘結(jié)劑是有利的。這樣避免了附聚體在干燥過程中再次崩解。在這種情況下，優(yōu)選將溶于或分散于水性介質(zhì)的粘結(jié)劑噴入流化床。所述粘結(jié)劑可以溶于要噴入的酶溶液中進(jìn)行噴霧或者與之分開地噴霧，時(shí)間上可以同時(shí)或者錯開。可以提及的合適粘結(jié)劑的實(shí)例為碳水化合物溶液，如例如葡萄糖、蔗糖、糊精，特別是糖醇，如例如甘露醇的溶液，或聚合物溶液，如例如羥丙基甲基纖維素(HPMC)、聚こ烯基吡咯烷酮(PVP)、聚こ烯醇(PVA)、こ氧基化纖維素(EC)、こ基纖維素或丙基纖維素的溶液。通過有目標(biāo)地選擇噴入的粘結(jié)劑的量和粘合性能，能夠獲得不同大小和強(qiáng)度的附聚體。
如果粘結(jié)劑以和酶的混合物的形式噴霧，粘結(jié)劑的比例通常基于所述溶液總重量為約0. 5-20重量％，優(yōu)選約1-10重量％。如果粘結(jié)劑作為單獨(dú)的溶液噴霧，溶液中的粘結(jié)劑比例基于所述溶液總重量為約1-30重量％。這種情況下，粘結(jié)劑同樣溶于水性介質(zhì)，優(yōu)選滅菌軟化水。常規(guī)添加剤，如例如緩沖劑或增溶劑同樣可以存在。依照本發(fā)明，粘結(jié)劑在最終產(chǎn)物(即酶組合物)中的比例為0-約20重量％，例如約1-6重量％。最佳量還取決于所選擇的粘結(jié)劑類型。液態(tài)酶制劑的噴霧干燥可以常規(guī)方式進(jìn)行。為此，將所述酶溶液泵送到噴霧塔的霧化器中。霧化通過，例如壓カ噴嘴(單流體噴嘴)、雙流體噴嘴或離心霧化器進(jìn)行。液滴借助通入噴霧干燥器中的熱空氣流干燥。當(dāng)使用離心霧化器時(shí)，干燥優(yōu)選以同向流動進(jìn)行。使用噴嘴的情況下，所述干燥還可以逆流或混合向流動的方式進(jìn)行。粉末可以由塔部排放或者其通過空氣流夾帶并在旋風(fēng)分離機(jī)和/或過濾器中分離出。根據(jù)產(chǎn)物和程序，可能需要后干燥，其可以通過法蘭連接在噴霧干燥器上的內(nèi)流化床或外部流化床進(jìn)行。噴霧干燥的產(chǎn)物可隨后在流化床中附聚。為此將粉狀材料，例如通過上述噴霧干燥獲得的酶粉，裝入流化床干燥器中。進(jìn)行渦流處理，例如通過送入預(yù)熱空氣。將例如含酶溶液或粘結(jié)劑溶液噴到流化床上，結(jié)果裝入的粉末被所述溶液濕潤并因其粘合性促進(jìn)附聚。噴到流化床的操作可從頂(頂噴法)或底部(底噴法)開始。與此同時(shí)，同時(shí)或半連續(xù)地(即間隔一定時(shí)間)從流化床排出部分(Teilmenge)附聚體。對排放物進(jìn)行分類，利用例如篩子進(jìn)行。產(chǎn)生的粗材料可以研磨并連續(xù)再循環(huán)到流化床內(nèi)。細(xì)小部分，例如來自過濾系統(tǒng)的廢氣，同樣可連續(xù)再循環(huán)。依照另ー種方法方案，本發(fā)明酶附聚體的生產(chǎn)可以連續(xù)地進(jìn)行，更精確地，通過將干燥的粉狀物料，如例如干燥的酶粉連續(xù)送入流化床干燥器。對此特別適合的干燥器是具有多個噴霧區(qū)和多個適當(dāng)?shù)母稍飬^(qū)的流化床干燥器。在第一區(qū)，裝入干燥酶粉，渦流處理，噴入酶溶液和/或粘結(jié)劑。將在該區(qū)形成的附聚體轉(zhuǎn)移到下一區(qū)。相同或不同組成的酶溶液和/或粘結(jié)劑溶液同樣可噴入該區(qū)和任選ー個或多個其他區(qū)。噴施的酶溶液或粘結(jié)劑溶液中的水通過送入空氣流除去，該空氣流是所有區(qū)共有的或単獨(dú)送入的，其是適當(dāng)加熱的。在最后區(qū)的ー個或多個中，可進(jìn)ー步進(jìn)行后干燥。產(chǎn)物排放區(qū)也在此處。產(chǎn)物的后處理如上所述進(jìn)行。另ー種優(yōu)選的方法方案包括將酶溶液噴霧干燥并結(jié)合了隨后使噴霧干燥的酶粉末附聚。這些操作可間歇或連續(xù)進(jìn)行。優(yōu)選連續(xù)程序。此類方法可使用常規(guī)的噴霧干燥設(shè)備進(jìn)行。但是，它們可以有利地在被稱為FSD(Fluidized Spray Dryer(流化噴霧干燥機(jī)))、SBD(Spray Bed Dryer(噴霧床干燥機(jī)))或MSD(Multi Stage Dryer (多級干燥機(jī)))的設(shè)備中進(jìn)行。
在這種情況下，如果所獲得的粉末中的細(xì)小部分要再循環(huán)(例如于旋風(fēng)分離器或過濾器中沉淀后)回干燥器的潮濕區(qū)，則將其早在噴霧干燥器內(nèi)再混入處理程序。然后在流化床的其他階段進(jìn)行實(shí)際的附聚。該階段可集成到噴霧干燥器內(nèi)(內(nèi)流化床)或者可以在獨(dú)立的設(shè)備中進(jìn)行(附加的流化床)。如果需要的話，可以在干燥的同時(shí)將其他的酶溶液、另外包含粘結(jié)劑的酶溶液或僅溶解或懸浮形式的粘結(jié)劑注射到流化床中以促進(jìn)附聚。適合附聚的粘結(jié)劑實(shí)例為羥丙基甲基纖維素、聚こ烯吡咯烷酮、聚こニ醇和聚氧こ烯與聚氧丙烯的嵌段聚合物。但是，エ藝參數(shù)優(yōu)選以下述方式設(shè)定附聚體的產(chǎn)生中不需要其他添加。注入的液體組成和量取決于所噴溶液的粘合性能、要獲得的附聚體尺寸和エ藝條件。取決于噴入量，可能需要在其他階段進(jìn)行后干燥。然后按照前述方式后處理產(chǎn)物。在噴霧干燥的酶具有高熱不穩(wěn)定性的情況下，在本發(fā)明方法期間控制產(chǎn)物溫度尤其重要。應(yīng)該選擇盡可能低的溫度，因?yàn)殡S著溫度的提高和/或噴霧干燥和附聚方法的持續(xù)，活性損失加劇。一般地，噴霧干燥中產(chǎn)物溫度，也就是噴霧干燥的固態(tài)粉末溫度，為約40-750C，特別是低于約70°C，常常低于60°C。在流化床中停留的時(shí)間越長，應(yīng)該選擇越低的溫度。流化床中附聚和干燥期間的產(chǎn)物溫度,也就是流化床中附聚體的溫度，在較長的·設(shè)備停留時(shí)間內(nèi)應(yīng)選擇較低，其值為約30-70°C，特別是低于約60°C，優(yōu)選低于50°C。為了進(jìn)一歩降低殘余水分含量，可能需要進(jìn)行后干燥步驟。在后干燥期間，產(chǎn)物溫度也應(yīng)該在上述范圍內(nèi)，尤其為50°C或更低。后干燥將本發(fā)明制劑中殘余水分含量降低到低于約20重量％，優(yōu)選約5-17重量％的值。附聚和后干燥期間的干燥通過使用預(yù)熱的送入空氣實(shí)現(xiàn)。送入空氣的溫度可根據(jù)所選預(yù)定產(chǎn)物溫度、空氣速率和噴霧速率變化，通常為30-180°C。后干燥在較低溫度下進(jìn)行，也就是說在約35-55°C進(jìn)行。附聚的持續(xù)時(shí)間同樣取決于所選的批量大小，但在30分鐘至數(shù)小時(shí)范圍內(nèi)。f2)酶配制劑的制備利用本身公知的混合技木，將噴霧干燥，任選附聚的預(yù)制產(chǎn)物(干燥的酶組合物)與上述載體材料混合。為此，將酶制劑加入載體中，例如分批加入，并且如果必要的話，混合一定時(shí)間，例如1-5分鐘，直到達(dá)到均勻分布。然后加入疏水性液體。該疏水性液體可以在混合操作期間噴在、滴加或倒在混合物上或混合物中。在加入完成后，繼續(xù)混合操作，例如5-45分鐘，直到該油均勻分布。所獲得的產(chǎn)物具有非常低的粉塵比例。通常不需要其他的處理步驟。多種類型的混合器適合所述混合，如例如錐形螺桿混合器(例如來自Nauter)、梨頭混合器(例如來自L6dige)、雙軸混合器。混合時(shí)間取決于選擇的混合器類型并且可能不同。g)食品和飼料組合物依照本發(fā)明生產(chǎn)的酶配制劑特別適合添加到食品和飼料。所述配制劑特別適合用作混合物形式的動物飼料添加劑，其中所述動物飼料混合物具有符合FMV(German feed regulation(德國飼料條例))的植物或動物源單組份飼料，如例如谷類副產(chǎn)品、小麥飼料粉、麥麩；提取粉、酒糟、榨糖后甜菜廢絲、魚粉、肉和骨粉；和/或符合FMV的礦物單組份飼料，如例如，碳酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、丙酸鹽。同樣適合的為谷類，如例如小麥、黒麥、大麥、燕麥、玉米、粟或黑小麥；谷類副產(chǎn)品(碾磨副產(chǎn)品)，例如麩、粗粒小麥麩、小麥粗粉麩、飼料粉或帶麩粗粉；制油副產(chǎn)品(提取粉、壓榨粉、油柏)；制糖副產(chǎn)品(糖漿、甜菜絲渣、飼料糖、渣、馬鈴薯淀粉、玉米筋、小麥筋)；發(fā)酵エ業(yè)副產(chǎn)品，啤酒酒糟、酵母、麥芽、啤酒酒糟水；以及動物和其他飼料，如血液干粉、魚粉、壓榨果汁、馬鈴薯蛋白質(zhì)。實(shí)驗(yàn)部分制備實(shí)施例Vl :木聚糖酶配制劑a)在4-10° C下，在干物質(zhì)含量為約20-35重量％、pH為3. 5-5.0和活性為60000-100000TXU/g的木聚糖酶含水濃縮物中溶入基于所述濃縮物為10-20 重量％的七水
合硫酸鎂。b)為了干燥和附聚，利用頂噴法通過雙流體噴嘴將步驟a)獲得的酶組合物噴入來自Niro-Aeromatic的Aeromat MP-1型實(shí)驗(yàn)室流化床中。該流化床的塑料錐具有直徑IlOmm的氣體分布板和具有12%開放表面積的多孔板。向所述流化床供入速率為50m3/h的空氣，送入空氣的溫度為40-100° C。調(diào)節(jié)送入空氣的溫度，以使流化床中產(chǎn)物的溫度保持在大約45° C。噴霧時(shí)間為240分鐘。隨后，以30° C的速率為50m3/h的空氣渦流冷卻產(chǎn)物。c)篩分步驟b)獲得的酶組合物。篩除細(xì)小和粗材料，以獲得粒度分布為100 Ii m-400 V- m的適用部分。這樣得到的產(chǎn)物具有下述特征數(shù)據(jù)組成
木聚糖酶(千物質(zhì))65重量％
硫酸鎂(MgSO4)20重量0/
殘余水分15重量％
活性2浦 000-300 OOOTXll/g
外觀(顯微鏡)包含多個初級顆粒的附聚體
中值粒徑171 Jimd)為了制備酶配制劑，將小麥粗粉麩(675. Sg)裝入實(shí)驗(yàn)室混合器(L6dige)中并且在室溫以170rpm均化。在這些條件下，將21g步驟C)得到的酶組合物加入混合器并且混合5分鐘。之后，通過吸移管緩慢地滴入3. 5g豆油，接著后混合30分鐘。這樣得到的產(chǎn)物具有下述特征數(shù)據(jù)組成小麥粗粉麩(干物質(zhì))90重量％ 酶組合物(來自C))3重量％ 豆油0.5重量％ 殘余水分6.5重量％
活性5 000-7000TXU/g
中值粒徑337nm 制備實(shí)施例V2 :葡聚糖酶配制劑a)在4-10° C下，在干物質(zhì)含量為約20-35重量％、pH為3. 5-5.0和活性為150000-400000TCU/g的P -葡聚糖酶含水濃縮物中溶入基于所述濃縮物為10-20重量％的七水合硫酸鎂。b)為了干燥和附聚，利用頂噴法通過雙流體噴嘴將步驟a)獲得的酶組合物噴入來自Niro-Aeromatic的Aeromat MP-1型實(shí)驗(yàn)室流化床中。該流化床的塑料錐具有直徑IlOmm的氣體分布板和具有12%開放表面積的多孔板。向所述流化床供入速率50m3/h的空氣，并且送入空氣的溫度為40-100° C。控制送入空氣的溫度，以使流化床中產(chǎn)物的溫度保持在大約45° C。噴霧時(shí)間為240分鐘。隨后，以50m3/h的空氣渦流將產(chǎn)物冷卻到30° C。c)篩分步驟b)獲得的酶組合物。篩除細(xì)小和粗材料，以獲得粒度分布為100 Ii m-400 V- m的適用部分。這樣得到的產(chǎn)物具有下述特征數(shù)據(jù)組成
葡聚糖酶(干物質(zhì))65重量％
硫酸鎂(M^SO4)20重量％
殘余水分15重量0/?；钚?00 000-120 000 TGU/g外觀(顯微:鏡)包含多個初級顆粒的附聚體中值粒徑167jim d)為了生產(chǎn)酶配制劑，將小麥粗粉麩(693g)裝入實(shí)驗(yàn)室混合器(Iiidige)中并且在室溫以170rpm均化。在這些條件下，將3. 5g步驟c)得到的酶組合物加入混合器中并且混合5分鐘。之后，通過吸移管緩慢地滴入3. 5g豆油，接著后混合30分鐘。這樣得到的產(chǎn)物具有下述特征數(shù)據(jù)組成
小麥粗粉麩(千物質(zhì))92.5重量％醃組合物(來Ij C))0.5重量％豆油0.5重量0/O 殘余水分6.5重量％
活性1000-7000 TGU/g 中值粒徑321pm 制備實(shí)施例V3 :木聚糖酶/葡聚糖酶配制劑為了制備酶配制劑，將小麥粗粉麩^72g)裝入實(shí)驗(yàn)室混合器(Liidige)中并且在室溫以170rpm均化。在這些條件下，將21g制備實(shí)施例Vl步驟c)得到的酶組合物和3. 5g制備實(shí)施例V2步驟c)得到的酶組合物加入混合器中并且混合5分鐘。之后，通過吸移管緩慢地滴入豆油，接著后混合30分鐘。這樣得到的產(chǎn)物具有下述特征數(shù)據(jù)組成·
小麥粗撿麩(干物質(zhì))89.5重量％
酶組合物(來自Vl c))3重量％ 酶組合物(來自V2 C))0.5重量％ 豆油0.5重量％ 殘余水分6.5重量％
木聚糖酶活性5000-7000 TXlJZg 葡聚糖酶活性1000-7000 TGU/g
中值粒徑328fim制備實(shí)施例V4 :木聚糖酶/葡聚糖酶配制劑a)將干物質(zhì)含量為約20-35重量％、pH為3. 5-5. 0和活性為150000-400000TCU/g的P -葡聚糖酶含水濃縮物與干物質(zhì)含量為約20-35重量％、pH為3. 5-5. 0和活性為60000-100000TXU/g的木聚糖酶含水濃縮物按照1:8的比例混合。在4-10° C下，將基于所述濃縮物為10-30重量％的七水合硫酸鎂溶于該混合物。之后，按照制備實(shí)施例Vl的步驟b)_d)進(jìn)ー步處理步驟a)獲得的酶濃縮物。這樣得到的產(chǎn)物具有下述特征數(shù)據(jù)小麥粗粉麩(干物質(zhì))卿重量％ 酶組合物(來自C))3重量％ 豆油0.5重量％ 殘余水分6.5重量％
木聚糖酶活性5000-7000 TXlJ/g
葡聚糖酶活性1000-7000 TGlJ/g
中值粒徑343fim測試實(shí)施例I :粉塵值的測定
在添加和不添加油的條件下分別測定本發(fā)明混合物的粉塵值(基于產(chǎn)物總量的%)所述測定依照下述方法進(jìn)行將三個在測量中各自為10±0. 03g固體的試樣通過下落管長=60cm，直徑=3cm)緩慢地(大約2-3秒種)倒入容器(高20. 2cm,寬19. 5cm,長19. 5cm ;抽吸管設(shè)置在側(cè)壁的約13cm高度處并且與下落管呈直角(90° )地安裝)內(nèi)。利用通過抽吸管與容器連接的油泵，將形成的粉塵從容器吸出并且以恒定的速率(15±0.51/min)收集在過濾器上達(dá)I分鐘。為此，使用裝配有合適過濾器(例如Sartorius玻璃纖維預(yù)濾器，13400-37-S ;直徑35mm)的玻璃真空過濾器(直徑35mm，D2，50ml)。通過抽吸移出的粉塵量利用分析天平測定，以相對所用試樣的平均百分?jǐn)?shù)表示。根據(jù)所測定的粉塵百分比，試樣的起塵性可描述如下
檢塵值[%]說明
0-0.05基本無粉塵
0.05-0.25輕微形成粉塵
0.25-1.00形成粉塵
>1.00強(qiáng)烈地形成粉塵所用材料:木聚糖酶粉(XEA):活性229300TXU/g ;中值粒徑=171 ； (20重量％七水合硫酸鎂)；按照與制備實(shí)施例Vl類似的方式干燥，小麥粗粉鉄(WGK)(Hildebrandmiihlen);中值粒徑=370豆油混合試樣:將WGK裝入Iildige混合器內(nèi)，將SD粉加入其中并且在室溫下以170rpm預(yù)混5分鐘。將豆油加熱到大約80°C，通過細(xì)吸移管緩慢地滴入并且后混合30分鐘。各種情況下都制備IOOOg混合物。測定各種混合物以及純XEA和純WGK的粉塵值并且總結(jié)于下表試樣小麥粗 SD粉豆油理論活性粉塵注釋豆油
E5/051 粉麩(g) (g) (g) (TXlJ/g)值(％) (g)(%)
批次 I 967.3 32.7 0.0 75000.081 輕微形成0.0
粉塵
批次 2 962.3 32 7 50 75000.025 基本無粉0.5
塵
批次 3 957.3 32 7 10.0 7S00OOlS 基本無粉1.0
/N
WGK 純- 0.0 00 120 輕微形成 0.0·
粉塵
XEA -純 0.0 229300 0.049 基本無粉 0.0
塵發(fā)現(xiàn)本發(fā)明含油混合物的粉塵形成趨勢驚人地降低。另外，在目測檢驗(yàn)和光學(xué)顯微鏡研究所研究批次后，沒有發(fā)現(xiàn)在分離性能方面的差別(結(jié)果沒有顯示)。測試實(shí)施例2 測定流動性本發(fā)明酶配制劑的流動性能通過公知方法測定?，F(xiàn)有技術(shù)中，已經(jīng)描述了原則上適合的各種方法(參見 Schmitt 等人,Part. Part. Syst. Charact. 21 (2004) 403-410)。依照本發(fā)明，使用Schulze環(huán)剪切測試儀RST. 01_pc進(jìn)行測定。所述實(shí)驗(yàn)通過ASTMD6773方法(Schulze環(huán)剪切測試儀2002)進(jìn)行。使用下述測試參數(shù)試樣在測量池中的貯存時(shí)間0h溫度22°C相對空氣濕度70%固結(jié)カ(負(fù)荷)OI = 11. 18kPa。采用ASTM D6773方法，獲得的流動性ffe=8. 8。因此所述產(chǎn)物具有高流動性。
權(quán)利要求
1.ー種固態(tài)酶配制劑，其包含下述組分的混合物 a)至少ー種酶和至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的至少ー種微粒狀酶組合物，與 b)至少ー種微粒狀無機(jī)或有機(jī)載體和 c)至少ー種疏水性液體。
2.如權(quán)利要求I所述的酶配制劑，其包含 a)微粒狀酶組合物，其包含與至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽混合的酶；或 b)微粒狀酶組合物，其包含至少兩種彼此不同且與至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽混合的酶；或 c)至少兩種彼此不同的微粒狀酶組合物，所述兩種酶組合物的差別在于它們包含至少ー種不同的酶，每種組合物中的酶以與至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的混合物存在。
3.如權(quán)利要求I或2所述的酶配制劑，載體與酶組合物的中值粒徑之比在約0.125-8范圍內(nèi)。
4.如權(quán)利要求3所述的酶配制劑，其中酶組合物和載體的中值粒度彼此獨(dú)立地各自在約50-500 u m范圍內(nèi)。
5.如前述權(quán)利要求中任意ー項(xiàng)所述的酶配制劑，其中酶組合物與載體的混合比在約1:1000-1:5重量份范圍內(nèi)。
6.如前述權(quán)利要求中任意ー項(xiàng)所述的酶配制劑，其中疏水性液體的比例基于所述酶配制劑總重量為0. 1-5重量％。
7.如前述權(quán)利要求中任意ー項(xiàng)所述的酶配制劑，其中鹽在所述酶組合物中的比例基于所述酶組合物總重量為1-30重量％。
8.如前述權(quán)利要求中任意ー項(xiàng)所述的酶配制劑，其中所述酶選自木聚糖酶、葡聚糖酶、纖維素酶、蛋白酶、角蛋白酶、淀粉酶和它們的混合物。
9.如權(quán)利要求8所述的酶配制劑，其中所述酶選自內(nèi)-1，4-0-木聚糖酶(EC3.2. I. 8)、內(nèi)-1，4-3 -葡聚糖酶(EC 3. 2. I. 4)和它們的混合物。
10.如前述權(quán)利要求中任意ー項(xiàng)所述的酶配制劑，其進(jìn)ー步具有至少ー項(xiàng)下述性能 a)重量分析的粉塵值在0.001-0. 2%范圍內(nèi)； b)堆積密度在200-700g/l范圍內(nèi)； c)流動性ff。(通過Schulze環(huán)剪切試驗(yàn)測定)在3-30范圍內(nèi)。
11.如前述權(quán)利要求中任意ー項(xiàng)所述的酶配制劑，所述配制劑包含下述組分的混合物 a)至少ー種酶組合物，其中的酶組分選自木聚糖酶、葡聚糖酶和它們的混合物，所述酶組分為與硫酸鎂混合的，其中硫酸鎂的比例基于干燥酶組合物總重量為約5-25重量％ ； b)至少ー種小麥粗粉麩載體，酶組合物與載體的混合比在1:5-1:500范圍內(nèi)；和 c)植物油，其比例基于所述酶配制劑最終重量為約0.1-1重量％， 酶組合物和載體的中值粒度在約150-500 iim范圍內(nèi)，木聚糖酶的比例為約3000-30000TXU/g配制劑且葡聚糖酶的比例為約2000_20000TCU/g配制劑。
12.如權(quán)利要求11所述的酶配制劑，其包含酶組合物，其中的酶組分為木聚糖酶。
13.如權(quán)利要求11所述的酶配制劑，其包含酶組合物，其中的酶組分為葡聚糖酶。
14.如權(quán)利要求11所述的酶配制劑，其包含酶組合物，其中的酶組分為木聚糖酶與葡聚糖酶的混合物。
15.如權(quán)利要求11所述的酶配制劑，其包含兩種不同酶的酶組合物，其中的一種酶組分為葡聚糖酶，另ー種為木聚糖酶。
16.一種制備如前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的固態(tài)酶配制劑的方法，其包括將至少ー種包含至少ー種酶和至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的微粒狀酶組合物與至少ー種微粒狀無機(jī)或有機(jī)載體混合，并且將該混合物用疏水性液體濕潤。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其包括 a)提供包含酶的微粒狀酶組合物，所述酶為與至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的混合物；或 b)提供包含至少兩種彼此不同酶的微粒狀酶組合物，所述酶為與至少ー種ー價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的混合物；或 c)提供至少兩種彼此不同的微粒狀酶組合物，所述兩種組合物的不同之處在于它們包含至少ー種不同的酶，并且每種組合物中的酶以與至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的混合物存在。
18.如權(quán)利要求16、17a)或17b)中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述酶組合物通過將其中引入了至少ー種一價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的含酶液體噴霧干燥或噴霧干燥并附聚而獲得。
19.如權(quán)利要求16或17c)所述的方法，其中通過將其中引入了至少ー種ー價(jià)或ニ價(jià)陽離子的有機(jī)或無機(jī)鹽的至少兩種包含不同酶的液體噴霧干燥或噴霧干燥并附聚來獲得至少兩種彼此不同的酶的酶組合物，并且 a)將所述至少兩種酶組合物各自與微粒狀無機(jī)或有機(jī)載體混合，或 b)將微粒狀無機(jī)或有機(jī)載體與所述至少兩種酶組合物混合；并且 將依照方案a)或方案b)制備的混合物用疏水性液體濕潤。
20.如權(quán)利要求16-19中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的含酶液體包含至少ー種木聚糖酶、至少一種葡聚糖酶或它們的混合物。
21.如權(quán)利要求16-20中任意一項(xiàng)所述的方法，其中鹽在所用酶組合物中的比例基于所述酶組合物總重量在1-30重量％范圍內(nèi)。
22.如權(quán)利要求16-21中任意一項(xiàng)所述的方法，其中使用載體和酶組合物，它們中值粒徑之比在約0. 125-8范圍內(nèi)。
23.如權(quán)利要求22所述的方法，其中酶組合物和載體的中值粒度彼此獨(dú)立地各自在約50-500 u m范圍內(nèi)。
24.如權(quán)利要求16-23中任意一項(xiàng)所述的方法，其中酶組合物與載體的混合比設(shè)定在約1:1000-1:5范圍內(nèi)。
25.如權(quán)利要求16-24中任意一項(xiàng)所述的方法，其中疏水性液體的比例基于所述酶配制劑總重量為0. 1-5重量％。
26.一種制備包含至少ー種選自木聚糖酶、葡聚糖酶和它們的混合物的酶的固態(tài)酶配制劑的方法，其包括 a)將至少一種含酶液體噴霧干燥或噴霧干燥并附聚以產(chǎn)生至少ー種酶組合物，其中的酶組分選自木聚糖酶、葡聚糖酶和它們的混合物，并且所述酶組分以與硫酸鎂的混合物存在于所述液體中，硫酸鎂的比例基于干燥酶組合物總重量為約5-25重量％ ； b)將所獲得的酶組合物與微粒狀無機(jī)或有機(jī)載體混合；并且 c)用疏水性液體濕潤所述酶/載體混合物。
27.如權(quán)利要求26所述的方法， a)提供包含至少ー種與硫酸鎂混合的木聚糖酶的微粒狀酶組合物；或 b)提供包含至少ー種與硫酸鎂混合的葡聚糖酶的微粒狀酶組合物；或 c)提供包含與硫酸鎂混合的至少ー種木聚糖酶和至少ー種葡聚糖酶的微粒狀酶組合物；或 d)提供至少兩種彼此不同的微粒狀酶組合物，其中一種組合物包含至少ー種木聚糖酶，其他組合物包含至少ー種葡聚糖酶，并且每種組合物中的酶均以與硫酸鎂的混合物存在。
28.如權(quán)利要求26或27所述的方法，其中將酶組合物與至少ー種小麥粗粉麩載體混合，酶組合物與載體的混合比在1:5-1:1000范圍內(nèi)。
29.如權(quán)利要求26或27所述的方法，其中將兩種不同的酶組合物與至少ー種小麥粗粉麩載體混合，酶組合物與載體的混合比在1:5-1:1000范圍內(nèi)。
30.如權(quán)利要求26-29中任意一項(xiàng)所述的方法，其中混合期間添加植物油，添加比例基于所述酶配制劑最終重量為約0. 1-1重量％。
31.如權(quán)利要求26-30中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所用酶組合物與所用載體的中值粒 度彼此獨(dú)立地各自在約150-500 ii m范圍內(nèi)。
32.如權(quán)利要求26-31中任意一項(xiàng)所述的方法，其中木聚糖酶的比例為約3000-30000TXU/g配制劑和/或葡聚糖酶的比例為約2000_20000TCU/g配制劑。
33.如權(quán)利要求1-15中任意一項(xiàng)所述的干燥酶配制劑或依照權(quán)利要求16-32中任意一項(xiàng)獲得的干燥酶配制劑用于生產(chǎn)食品、食品添加物或動物飼料的用途。
34.包含如權(quán)利要求1-15中任意一項(xiàng)所述的干燥酶配制劑或依照權(quán)利要求16-32中任意一項(xiàng)制備的干燥酶配制劑的動物飼料、食品或食品添加物。
35.包含如權(quán)利要求1-15中任意一項(xiàng)所述的干燥酶配制劑或依照權(quán)利要求16-32中任意一項(xiàng)制備的干燥酶配制劑的動物飼料。
36.如權(quán)利要求35所述的動物飼料，其中以約0.001-1重量％的比例包含所述酶配制 齊U。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新型固態(tài)酶配制劑，其包含下述組分的混合物至少一種鹽穩(wěn)定的酶組合物、至少一種微粒狀載體和至少一種疏水性液體。另外，本發(fā)明涉及制備此類固態(tài)酶配制劑的方法以及包含所述酶配制劑的動物飼料、食品和食品添加物的方法。
文檔編號A23K1/165GK102742732SQ20121024930
公開日2012年10月24日 申請日期2007年3月9日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月10日
發(fā)明者J·布勞恩, M·洛沙德伊特, R·貝茨, W·貝萊蒂爾 申請人:巴斯夫歐洲公司