專利名稱：殺蟲制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在殺蟲制劑中適于用作活性劑的殺蟲活性化合物的組合、制劑本身以及這些制劑作為殺蟲劑，特別是在防治所有虱目、蚤目和蜱螨目害蟲品種上的多種應(yīng)用。上述應(yīng)用包括防治家畜上的上述外寄生虱目、蚤目和蜱螨目害蟲以及上述制劑防治上述害蟲的家庭和農(nóng)業(yè)應(yīng)用，所述家畜包括但不局限于綿羊、牛、家禽、豬、山羊、駱駝(camelids)、馬、狗和貓。
背景技術(shù)：
歷史上，對家畜和作物最大的危害是由害蟲如昆蟲、真菌、線蟲和微生物造成的，并且繼續(xù)由它們來危害。特別是昆蟲，其代表了一個重要因素，占據(jù)了所有活生物體的大多數(shù)，構(gòu)成了所有動物品種的大約72％。約1％的昆蟲被認為是害蟲，因為它們侵襲人類和/或家畜，給人類、動物和植物傳播病害，摧毀作物、物品和建筑并競爭食物和其它的必需品。據(jù)估計由于昆蟲的存在造成了世界范圍巨大的農(nóng)業(yè)損失。
家畜包括有農(nóng)業(yè)價值的動物如綿羊、牛、馬、山羊、豬和其它反芻動物以及單胃動物，它們幾乎總是遭到害蟲活動的侵襲，這些害蟲包括昆蟲、害螨、蜱螨目、蚤目、虱目和食毛目。外寄生蟲如蜱、虱和蚤刺激動物，以低質(zhì)量的畜皮、羊毛或綿羊皮、低質(zhì)量的肉類/組織、重量的減少、甚至由于動物攜帶有害寄生蟲而死亡的形式造成經(jīng)濟損失。
由昆蟲所造成的人類和動物病害所帶來的損失也是巨大的。事實上，昆蟲被認為是人類和高級動物的超過250種病原病毒的載體，蚊子傳播疾病如瘧疾和淋巴絲蟲病所造成的人類死亡數(shù)目是巨大的。蒼蠅也傳播人類和動物相關(guān)的病害如砂眼、錐蟲病和河盲。
但是，在接近一百萬節(jié)肢動物包括虱、蜱、蠅和螨中，只有一小部分需要進行防治。迄今，防治昆蟲和其它害蟲，特別是在有關(guān)家畜(如綿羊、牛、山羊、馬和豬)上防治的主要方法是施用合成的化學(xué)殺蟲劑組合物。據(jù)估計世界上有至少35,000種由化學(xué)藥品作為活性成分的制劑化的殺蟲劑產(chǎn)品。上述殺蟲劑產(chǎn)品包括抗菌劑、殺幼蟲劑、殺蟲劑、動物藥浴劑、殺害鳥劑和消毒劑。
20世紀40年代以來化學(xué)殺蟲劑的廣泛應(yīng)用導(dǎo)致了大量問題的產(chǎn)生，包括廣泛的昆蟲抗性、次要害蟲的出現(xiàn)、對人和動物健康的危害以及對魚和鳥類的有害影響、環(huán)境污染和新殺蟲劑經(jīng)濟成本的增長。
許多昆蟲種類對某些殺蟲劑產(chǎn)生了抗性，因此在防治實踐中需要進行更換。曾經(jīng)寬的害蟲譜變成了多抗性。昆蟲基因組中具有長期效應(yīng)的抗性基因成功的排除了再利用殺蟲劑來防治帶有抗性基因的昆蟲種群。
農(nóng)藥殘留以及它們隨后的許多潛在的對人類、動物和環(huán)境的危險也被視為是由使用化學(xué)藥品所造成的主要問題之一，特別是那些含有有機磷酸酯或人工合成擬除蟲菊酯作活性劑的制劑。除了微生物殺蟲劑外，幾乎所有的殺蟲劑都導(dǎo)致了多種化學(xué)藥品及其降解產(chǎn)物或代謝產(chǎn)物的殘留，盡管進行了食品加工，但在食品中仍有可以可探測的量(ppb至ppm)存在?？紤]到農(nóng)場動物上殺蟲劑的使用，組織/肉類殘留也是一重要問題。
使用這些殺蟲劑所帶來的潛在人類危險包括對殺蟲劑的急性毒性反應(yīng)如中毒、皮膚和眼睛刺激，以及可能的長期影響如癌癥、出生缺陷、和生殖紊亂。急性吸入毒性和皮膚滲透也有潛在的危險。由于反復(fù)的暴露在化學(xué)藥品下，經(jīng)過一段時間后也會引起人類健康威脅。
特別地，目前使用的活性成分人工合成擬除蟲菊酯和有機磷酸酯通常用于殺蟲制劑中防治虱和蠅，特別是綿羊上的虱和蠅，這些活性成分對動物和施用它們的人類操作者都有毒。農(nóng)民或操作者手拿殺蟲劑濃縮物和使用大體積的經(jīng)稀釋的殺蟲劑時的暴露是一個需要關(guān)注的問題。另外，操作員可能不僅通過口，而且通過呼吸(如噴霧漂移)和皮膚吸收(偶爾溢出)而攝入殺蟲劑。使用有機磷酸酯要特別注意，偶然的暴露可造成急性和慢性神經(jīng)系統(tǒng)中毒。
因此，昆蟲和其它害蟲的防治尋求直接脫離單一的依賴于殺蟲劑，而轉(zhuǎn)向有利于環(huán)境的經(jīng)濟的昆蟲和害蟲防治(病蟲害綜合治理)。生物防治用例如病毒、細菌、真菌和原生動物的病原物侵染昆蟲，其使用得到了滿意的效果，因為這些微生物殺蟲劑對昆蟲害蟲是高選擇性的，并且不會留下毒性殘留。但是這些生物殺蟲劑也不是沒有問題，例如大范圍施用以及限定天敵/寄生蟲/病害時的困難。另外，它們還有殘效期短和極度特異性的缺點，限制了普遍使用。
近來在使用殺蟲劑的區(qū)域通過釋放不育的雄性昆蟲進行生物防治。最近也通過有害突變體如染色體易位的大量導(dǎo)入而使用了基因工程。但是，這種方法是非常昂貴的，在不育的雄性計劃釋放前需要嚴格的標(biāo)準。使大量昆蟲害蟲種群不育的化學(xué)不育劑也是公知的，但由于是強烈的致癌物質(zhì)，妨礙了它們的使用。
化學(xué)殺蟲劑的應(yīng)用和它們的環(huán)境和經(jīng)濟壽命，自然危害和持續(xù)殘留的長短以及害蟲抗性的增長，加上許多化學(xué)殺蟲劑的高毒性，促使人們尋找防治昆蟲和其它害蟲的新物質(zhì)或方法。
因此在殺蟲劑中需要用作活性劑的化合物和它們的組合，特別用來防治家畜或其環(huán)境上的昆蟲，所述化合物和組合在低劑量下就有效，有生物選擇性，對人類、作物、經(jīng)濟動物、水生生物和鳥類低毒并且高度安全。上述化合物和組合必須對環(huán)境安全，因此一定要證明它們對環(huán)境有低的影響，并且經(jīng)濟可行可大規(guī)模使用。另外，昆蟲或其它害蟲必須對上述化合物或組合沒有或幾乎沒有抗性。發(fā)酵產(chǎn)物A83543，也稱多殺菌素，包括土壤放線菌(Saccharopolysporaspinosa)制備的一族相關(guān)化合物(多殺菌素)。這些是由發(fā)酵產(chǎn)物自然衍生而來，相對于目前使用的有機衍生化合物(如人工合成擬除蟲菊酯、有機磷酸酯、有機氯和氨基甲酸酯)具有肯定的安全譜(positivesafety profile)，并且已經(jīng)表現(xiàn)出了良好的殺蟲活性。因此，“A83543化合物”與“多殺菌素和衍生物及其類似物”范圍相同，指包含與12元大環(huán)內(nèi)酯稠合的5，6，5-三環(huán)系、中性糖(2N，3N，4N-三-O-甲基鼠李糖)和氨基糖(forosamine)的成分。A83543的一族自然成分包括EPO專利申請No.0375316中所述的一類化合物，并具有下面的通式
其中R1是H或選自 ，R2、R4、R3、R5和R6是氫或甲基；或R1不是氫時的酸加成鹽。
來自A83543發(fā)酵產(chǎn)物的一族化合物如下所示，包括單獨的化合物A83543A、A83453B、A83543C、A83453D、A83543E、A83453F、A83543G、A83453H、A83543J、A83453L、A83543M、A83453N、A83543Q、A83453R、A83543S、A83453T、A83453U、A83543V、A83453W、A83453X。Boeck等人在US專利Nos 5,362,634、5,496,932和5,571,901中描述了多殺菌素A-H和J及其鹽，加入此處作為參考。Mynderse等人在US專利No，5,202,242中描述了多殺菌素L-N、它們的N-二甲基衍生物及其鹽，加入此處作為參考。Turner等人在US專利Nos 5,591,606、5,631,155和5,767,253中描述了多殺菌素Q-T、它們的N-二甲基衍生物及其鹽，也加入此處作為參考。多殺菌素K、O、P、U、V、W和Y由DeAmicis，C.V.等人在American Chemical Society’SymposiumSeries的論文中進行了描述Phytochemicals for pest Control(1997)，11章“Physical and Biological Properties of SpinosynsNovel Macrolide Pest-Control Agents from Fermentation”pp146-154。
多殺菌素A(A83543A)是第一個從土壤放線菌的發(fā)酵液體培養(yǎng)基中分離并鑒定的多殺菌素。隨后對發(fā)酵液體培養(yǎng)基的細查顯示土壤放線菌的母株(parentstrain)中產(chǎn)生了若干多殺菌素(A83543A-J)。比較多殺菌素A、多殺菌素B-J，氨基糖的氨基取代方式，在環(huán)系和中性糖上所選的位置不同。土壤放線菌的菌株所制備的多殺菌素混合物中主要成分是多殺菌素A(～85％)和多殺菌素D(～15％)。這兩種多殺菌素是目前公認的用作殺蟲劑的最強的活性成分。
與多殺菌素相似，大環(huán)內(nèi)酯先前也表現(xiàn)出良好的殺蟲效果。大環(huán)內(nèi)酯具有復(fù)合的環(huán)結(jié)構(gòu)，包括公知的驅(qū)蟲化合物如阿維菌素和米爾菌素(milbemycins)。阿維菌素由鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)的發(fā)酵產(chǎn)物中分離而來，伊維菌素通過改進阿維菌素所形成的半合成化合物。阿維菌素的基本結(jié)構(gòu)是16元內(nèi)酯環(huán)，添加了三個主要的取代基六氫苯并呋喃基、二糖基(C-13)和螺縮酮(spiroketal)環(huán)(C-17至C-28)。多拉菌素(Doramectin)是一種新阿維菌素。米爾菌素是其它的化合物不是阿維菌素，但可被認為屬于大環(huán)內(nèi)酯這一類化合物。米爾菌素在結(jié)構(gòu)上不同于阿維菌素的基團，主要是在C-13上缺少二糖基。米爾菌素D和米爾菌素5-肟就是兩種上述的大環(huán)內(nèi)酯。莫西菌素(moxidectin)由奈馬菌素(nemadectin)的發(fā)酵產(chǎn)物衍生而來，在C-23上有一甲肟(methoxime)取代基。
本發(fā)明屬于殺蟲化合物的增效組合，基于該增效組合的制劑和某些殺蟲活性劑的應(yīng)用以及它們在殺蟲制劑中，特別是在家畜上防治虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的應(yīng)用。
發(fā)明目的因此，本發(fā)明的一個目的是提供一種殺蟲組合物，對虱目、蚤目和蜱螨目害蟲有內(nèi)吸活性，是含有至少一種A83543化合物和至少一種大環(huán)內(nèi)酯的增效組合。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種殺蟲組合物，對家畜包括牛、駱駝、豬、狗、馬、貓、綿羊、山羊和家禽上的虱目、蚤目和蜱螨目害蟲有內(nèi)吸活性，是含有至少一種A83543化合物和至少一種大環(huán)內(nèi)酯的增效組合。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種或多種對虱目、蚤目和蜱螨目害蟲有內(nèi)吸活性的殺蟲制劑，含有至少一種A83543化合物和至少一種大環(huán)內(nèi)酯的增效組合作為主要活性成分，和至少一種可接受的載體或稀釋劑。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種或多種用于家畜包括牛、駱駝、豬、狗、馬、貓、綿羊、山羊和家禽上對虱目、蚤目和蜱螨目害蟲有內(nèi)吸活性的殺蟲制劑，含有至少一種A83543化合物和至少一種大環(huán)內(nèi)酯的增效組合作為主要活性成分，和至少一種可接受的載體或稀釋劑。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種在家畜包括牛、駱駝、豬、狗、馬、貓、綿羊、山羊和家禽上消滅和/或防治虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的方法，包括將殺蟲活性化合物組合單獨或與可接受的載體或稀釋劑一起使用或用藥于所述動物上，所述的殺蟲活性組合通過內(nèi)吸作用傳遞給所述的虱目、蚤目和蜱螨目害蟲。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種消滅和/或防治虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的方法，包括將殺蟲活性化合物組合單獨或與可接受的載體或稀釋劑一起用藥于上述動物上，所述的殺蟲活性組合對所述害蟲有內(nèi)吸作用。
此處所用的術(shù)語‘虱目’或‘虱目害蟲’定義為虱目昆蟲的成員，在其生活史的一個或多個齡期具有寄生性，包括幼蟲期(定義為幼蟲(若蟲)形式)、成蟲期或兩個齡期，還包括虱目昆蟲的卵期。
此處所用的術(shù)語‘蚤目’或‘蚤目害蟲’定義為蚤目昆蟲的成員，在其生活史的一個或多個齡期具有寄生性，包括幼蟲期(定義為幼蟲形式)、成蟲期或兩個齡期，還包括蚤目昆蟲的卵期。
此處所用的術(shù)語‘蜱螨目’或‘蜱螨目害蟲’定義為蜱螨目昆蟲的成員，在其生活史的一個或多個齡期具有寄生性，包括幼蟲期(定義為幼蟲(若蟲)形式)、成蟲期或兩個齡期，還包括蜱螨目昆蟲的卵期。
還要注意為了本申請，術(shù)語‘多殺菌素或類似物或其衍生物’定義為包括單個多殺菌素(A83543A-H，J-W或Y)、單個多殺菌素的N-二甲基或其它的衍生物、或其鹽、或其組合，與上文提到的文獻中的內(nèi)容一致，并加入此處作為參考。如上所述，此處所使用的術(shù)語“A83543化合物”指單個的多殺菌素、或類似物、衍生物或其鹽、或其組合。
所使用的術(shù)語‘防治或消滅’指活的昆蟲或蛛形綱(成蟲或幼蟲形式)害蟲數(shù)目的減少或能存活的昆蟲或蛛形綱卵數(shù)目的減少。減少的程度有賴于施用次數(shù)和所使用的活性成分。
此處所使用的術(shù)語‘有效量’指在經(jīng)過處理的昆蟲或蛛形綱種群中能夠引起可測量的減少的量。
本發(fā)明說明書所使用的詞‘載體’包括載體混合，也就是多于一種物質(zhì)的混合物。
此處所使用的術(shù)語‘增效’指在一組合成分中，組合的活性大于該組合中每個成分單獨活性之合。
此處所使用的術(shù)語‘大環(huán)內(nèi)酯’定義為米爾菌素和阿維菌素類的化合物，包括自然產(chǎn)生的化合物及其人工合成的衍生物，特別是此處和本領(lǐng)域所提到的。
此處所使用的術(shù)語‘家畜’定義為有農(nóng)業(yè)價值的動物和伴侶動物，包括但不局限于牛、駱駝、豬、狗、貓、綿羊、家禽、馬和山羊以及其它反芻動物和單胃動物。
此處所使用的術(shù)語‘內(nèi)吸活性’指只有當(dāng)存在于害蟲系統(tǒng)中時才具有的效果或效力，例如攝取或其它方式用藥后導(dǎo)致活性成分在害蟲的系統(tǒng)存在。該術(shù)語不是指在寄主家畜的系統(tǒng)中出現(xiàn)的效果或效力，只限制于在害蟲系統(tǒng)中出現(xiàn)的活性或效力。
發(fā)明概述本發(fā)明第一方面提供一種防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的活性組合物，所述組合物對所述的害蟲具有內(nèi)吸活性，包括至少一種A83543化合物和至少一種大環(huán)內(nèi)酯化合物的增效組合。
本發(fā)明第二方面提供一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的制劑，所述制劑包括有效量的本發(fā)明第一方面的內(nèi)吸活性組合物和可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
本發(fā)明第三方面提供一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的外用制劑，所述制劑包括有效量的本發(fā)明第一方面的內(nèi)吸活性組合物和可接受的載體。
本發(fā)明第四方面提供一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的殺蟲誘餌制劑，所述制劑包括有效量的本發(fā)明第一方面的內(nèi)吸活性組合物和可接受的載體。
本發(fā)明第五方面提供一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的口服用藥制劑，所述制劑包括有效量的本發(fā)明第一方面的內(nèi)吸活性組合物和可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
本發(fā)明第六方面提供一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的腸胃外用藥制劑，所述制劑包括有效量的本發(fā)明第一方面的內(nèi)吸活性組合物和可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
本發(fā)明第七方面提供一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的方法，所述方法包括在所述動物外表面的局部外用有效量的本發(fā)明第一方面的內(nèi)吸活性組合物，或本發(fā)明第二或第三方面的制劑。
本發(fā)明第八方面提供一種防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的方法，所述方法包括對所述害蟲直接施用有效量的本發(fā)明第一方面的內(nèi)吸活性組合物，或本發(fā)明第二或第四方面的制劑。
本發(fā)明第九方面提供一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的方法，所述方法包括對所述害蟲口服施用有效量的本發(fā)明第一方面的內(nèi)吸活性組合物，或本發(fā)明第二或第五方面的制劑。
本發(fā)明第十方面提供一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的方法，所述方法包括對所述害蟲腸胃外施用有效量的本發(fā)明第一方面的內(nèi)吸活性組合物，或本發(fā)明第二或第六方面的制劑。
本發(fā)明第十一方面提供本發(fā)明第一方面的內(nèi)吸活性組合物在制備防治或消滅家畜上的虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的藥劑中的應(yīng)用。
本發(fā)明第十二方面提供本發(fā)明第一方面的內(nèi)吸活性組合物在制備防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的誘餌制劑中的應(yīng)用。
本發(fā)明的另一方面提供在家畜上用于防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的本發(fā)明第一方面的活性組合物或本發(fā)明第一至第六任何一方面的制劑。
本發(fā)明的另一方面提供用于防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲所使用的本發(fā)明第一方面的活性組合物或本發(fā)明第四方面的制劑。
本發(fā)明斷定多殺菌素和大環(huán)內(nèi)酯能發(fā)現(xiàn)驚奇的增效交互作用。同時不想受到理論的限制，應(yīng)該注意，大環(huán)內(nèi)酯通過刺激抑制谷氨酸受體對昆蟲的神經(jīng)系統(tǒng)起主要作用，而多殺菌素則主要刺激昆蟲神元上的煙堿乙酰膽堿受體，造成神經(jīng)元的過度興奮。但是，多殺菌素和大環(huán)內(nèi)酯都對節(jié)肢動物神經(jīng)元上的伽馬氨基丁酸(GABA)門控氯化物通道有二次效應(yīng)，GABA是抑制性神經(jīng)遞質(zhì)。因此，當(dāng)多殺菌素與大環(huán)內(nèi)酯組合使用時可能對GABA受體有增效效果，從而對昆蟲的神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生影響，但這不涉及多殺菌素或大環(huán)內(nèi)酯的主要作用。
特別地，在本發(fā)明中當(dāng)多殺菌素和大環(huán)內(nèi)酯通過昆蟲攝取或其它的內(nèi)吸方式一起傳遞給虱目、蚤目和蜱螨目動物害蟲時驚奇的證明了有增效作用的產(chǎn)生。令人驚奇的是該效果在依賴于接觸如處理紙片或瞬時浸入處理溶液中的體外試驗中觀察不到。雖然不想受理論的限制，據(jù)推測該差別涉及作用機制和兩種化學(xué)藥劑的低蒸汽壓和不能輕易通過節(jié)肢動物表皮的本性。
一般地，本發(fā)明第一方面提供一種防治或消滅一般在家畜上的虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的活性組合物，所述組合物對所述的害蟲具有內(nèi)吸活性，是多殺菌素和大環(huán)內(nèi)酯化合物的增效組合，其中，多殺菌素大環(huán)內(nèi)酯化合物的范圍為1000∶1-1∶1000w/w。特別地，伊維菌素多殺菌素的比例在防治犬惡絲蟲(Dirofilaria immitis)或跳蚤的內(nèi)吸活性組合物中可以是1∶1000。
然而，據(jù)觀察增效作用在低比例下也能發(fā)生。因此，一般地，在本發(fā)明的內(nèi)吸活性組合物中，多殺菌素化合物大環(huán)內(nèi)酯化合物的范圍為100∶1-1∶100w/w。
又一般地，在本發(fā)明的內(nèi)吸活性組合物中，多殺菌素化合物大環(huán)內(nèi)酯化合物的范圍為10∶1-1∶10w/w。
再一般地，在本發(fā)明的內(nèi)吸活性組合物中，多殺菌素化合物大環(huán)內(nèi)酯化合物的范圍為9∶1-1∶9w/w。
更一般地，在本發(fā)明的內(nèi)吸活性組合物中，多殺菌素化合物大環(huán)內(nèi)酯化合物的范圍為8∶1-1∶8w/w。
又一般地，在本發(fā)明的內(nèi)吸活性組合物中，多殺菌素化合物大環(huán)內(nèi)酯化合物的范圍為7∶1-1∶7w/w。
又一般地，在本發(fā)明的內(nèi)吸活性組合物中，多殺菌素化合物大環(huán)內(nèi)酯化合物的范圍為6∶1-1∶6w/w。
更一般地，在本發(fā)明的內(nèi)吸活性組合物中，多殺菌素化合物大環(huán)內(nèi)酯化合物的范圍為5∶1-1∶5w/w。
更一般地，在本發(fā)明的內(nèi)吸活性組合物中，多殺菌素化合物大環(huán)內(nèi)酯化合物的范圍為4∶1-1∶4w/w。
最一般地，在本發(fā)明的內(nèi)吸活性組合物中，多殺菌素化合物大環(huán)內(nèi)酯化合物的范圍為3∶1-1∶3w/w。
又最一般地，在本發(fā)明的內(nèi)吸活性組合物中，多殺菌素化合物大環(huán)內(nèi)酯化合物的范圍為2∶1-1∶2w/w。
又最一般地，在本發(fā)明的內(nèi)吸活性組合物中，多殺菌素化合物大環(huán)內(nèi)酯化合物的比例為1∶1w/w。
本發(fā)明第一方面的一個實施方案提供一種內(nèi)吸活性組合物，是多殺菌素和阿維菌素的增效組合。
一般地，本發(fā)明第一方面的大環(huán)內(nèi)酯選自伊維菌素(EP295117中描述的22，23-二氫阿維菌素B1)、阿巴菌素(abamectin)、阿維菌素Ala、阿維菌素Alb、阿維菌素A2a、阿維菌素A2b、阿維菌素B1a、阿維菌素B1b、阿維菌素B2a、阿維菌素B2b。又一般地，本發(fā)明第一方面的大環(huán)內(nèi)酯選自以上自然產(chǎn)生的阿維菌素，但含有除了異丙基或(S)-仲丁基的25-取代基，在歐洲專利申請0214731、0284176、0308145、0317148、0335541和0340832中有描述。又一般地，本發(fā)明第一方面的大環(huán)內(nèi)酯可包括莫西菌素(和EP 259779A中公開的衍生物)、多拉菌素及其類似物(在EP0214731B中描述)、塞拉菌素(selamectin)、埃普利諾菌素(eprinomectin)、包括米爾菌素肟、米爾菌素D(抗生素B41D)及其類似物(描述在US 3,950,360中)的米爾菌素和奈馬菌素(在EP170006A中描述)。
更一般地，本發(fā)明第一方面的大環(huán)內(nèi)酯選自伊維菌素、莫西菌素、多拉菌素、塞拉菌素、米爾菌素肟、米爾菌素D、埃普利諾菌素和阿巴菌素(abamectin)。
又更一般地，本發(fā)明第一方面的大環(huán)內(nèi)酯是伊維菌素。
因此，更一般地，活性組合物是對虱目、蚤目和蜱螨目害蟲有內(nèi)吸活性的多殺菌素和伊維菌素的增效組合。
一般在本發(fā)明的制劑中，載體可不含水或含水，活性組合物懸浮、溶解或分散在載體中。又一般地，活性組合物可與制藥上或獸醫(yī)上可接受的稀釋劑或載體混合，稀釋劑或載體根據(jù)有關(guān)預(yù)定的用藥途徑和工藝上通常的實踐進行選擇。在一個實施方案中，本發(fā)明第三和第四方面制劑中所使用的載體或賦形劑包括粉末載體、溶劑、乳化劑、潤濕和分散劑以及水。特別地，在本發(fā)明第四方面的誘餌制劑中，載體或賦形劑包括食物源如血液或其它的組織提取液，一般還包括一種或多種酵母、糖、信息素、香料、香劑、溶劑、潤濕和分散劑。
另一實施方案中，本發(fā)明第五方面的口服給藥制劑中所使用的載體或賦形劑包括片劑賦形劑如淀粉或乳糖，膠囊賦形劑或通常用于溶液或懸浮液中的載體和賦形劑包括水、增香劑和著色劑。當(dāng)然，載體的選擇要基于活性組合物的兼容性，需要考慮的包括pH、水分含量和穩(wěn)定性。載體的選擇也要根據(jù)制劑的使用方式，例如是否對家畜局部用藥或口服或腸胃外對家畜給藥，或直接給藥，例如通過餌料對虱目、蚤目和蜱螨目害蟲用藥。
本發(fā)明第二至第六方面中任一方面的實施方案提供了防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的制劑，所述制劑包括(a)本發(fā)明第一方面0.1-40％重量的活性組合物和(b)60-99.9％重量的適合的載體。
一般在本發(fā)明制劑的每種劑量中，多殺菌素化合物和大環(huán)內(nèi)酯化合物中的每一種含有30μg-2g，更一般地，制劑中多殺菌素化合物和大環(huán)內(nèi)酯化合物中的每一種含有1mg-1g。
本發(fā)明第三方面的制劑一般是液體的，可制成濃縮物，然后使用前進行稀釋。
本發(fā)明第四方面的制劑是誘餌制劑，一般為固體，包括粉劑、顆粒劑或干燥劑的形式。又一般地，這種誘餌制劑也可以是液劑或糊劑的形式。
長期通常的實踐是局部使用含有活性殺蟲劑/驅(qū)蟲劑和載體/賦形劑的制劑來防治綿羊、牛和包括但不局限于山羊、豬和馬的其它家畜上外寄生蟲。因此一般地，本發(fā)明第三方面的制劑是傾注(pour-on)制劑，包括有效量的本發(fā)明第一方面的活性組合物和局部可接受的載體。
又一般地，局部使用制劑可以是噴劑或浸漬液或液劑如注射液體。
本發(fā)明第三方面的傾注制劑一般是液體，通常以行或點施用于家畜的外表，當(dāng)被上述虱目、蚤目和蜱螨目害蟲攝食時，例如取食經(jīng)過處理的家畜的表皮后，在上述害蟲中通過內(nèi)吸起作用，從而保護動物防治了虱目、蚤目和蜱螨目害蟲如蜱、跳蚤和虱子的若蟲和成蟲，也可以減少存活的虱目、蚤目和蜱螨目害蟲卵的數(shù)量。
當(dāng)制劑局部施用于局部區(qū)域，活性劑可在動物的表皮移動，從而遍及整個外表皮。
上述本發(fā)明第三方面的傾注制劑中的載體(這里也稱‘賦形劑’)經(jīng)過加工在動物的表皮上達到良好的皮膚展著性和/或滲透性。迄今，商品化的傾注制劑是懸浮劑、乳油或液劑，通常包含至少一種有機溶劑。上述傾注制劑的載體所通常使用的溶劑包括丙二醇、石蠟、異鏈烷烴、芳香烴、異丙基肉豆蔻酸酯(IPM)、二甘醇、醇和正丙醇。
值得注意的是本發(fā)明的局部施藥制劑可多種方式用來防治虱目、蚤目和蜱螨目的節(jié)肢動物。就本發(fā)明的局部施藥制劑來說，只純粹的留在家畜的外表皮上，它們就會對例如羽虱和其它以動物的表皮為食從而攝取內(nèi)吸活性制劑的害蟲產(chǎn)生效果。本發(fā)明的局部施藥制劑被局部施用后，至少部分的滲過動物的表皮，滲入胞外液，然后通過動物的淋巴系統(tǒng)排入血液中，這些制劑對吸血害蟲如跳蚤、蜱和一些虱子是有效的。這些害蟲如果取食了含有本發(fā)明內(nèi)吸活性組合物的血液就會被殺死。因此，本發(fā)明的局部施藥制劑既可以在寄主內(nèi)內(nèi)吸使用(通過滲入寄主動物的表皮)，又可在寄主的表面使用。
本發(fā)明第三方面的另一實施方案提供了在家畜上防治虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的傾注制劑，所述制劑包括(a)0.1-40％重量的至少一種本發(fā)明第一方面的活性劑，和(b)60-99.9％重量的適合的載體，選自TPM/醇、OP/IPM/OSU、和GTCC/PMP/CAP，其中TPM是三丙二醇甲醚；P是辛基棕櫚酸酯或2-乙基己基棕櫚酸酯，是一種良好的潤滑劑，也可用作潤膚劑和溶劑；P可被OS(辛基硬脂酸酯或2-乙基己基硬脂酸酯)取代；PM是異丙基肉豆蔻酸酯，具有良好的展著和潤膚特性，可用IPP或IPL替換使用；PP是異丙基棕櫚酸酯；PL是異丙基月桂酸酯；MP是PPG2肉豆蔻醚丙酸酯(myristyl ether propionate)，可迅速展著，提高其它材料的潤濕性；SU是二-2-乙基己基琥珀酸，提高親脂材料在皮膚上的潤濕和展著性；CS是異十六烷基硬脂酸酯，可用作潤膚劑、潤滑劑和展著劑；TCC是三辛酸/癸酸甘油酯，是活性物質(zhì)良好的載體或賦形劑；AP選自支鏈酯的混合物，可用作潤膚劑和展著劑；醇可以是苯甲醇、丙基醇、雙丙酮醇或其它適合的醇。
可在本發(fā)明制劑中使用的其它適合的載體包括有機和無機醇，包括丙二醇，通常用于伊維菌素的載體、乙醇、丙醇、苯甲醇、乙二醇和清潔劑。
一般地，本發(fā)明第三方面的制劑可以是粉劑、乳油、懸浮劑、噴劑、乳劑、泡沫、糊劑、氣霧劑、藥膏、油膏或凝膠。更一般地，制劑是液劑，一般是水溶性的。
一般地，本發(fā)明第二、三、五或六方面的制劑可有效的用于家畜如綿羊、牛、山羊、駱駝、豬、狗、貓、家禽和馬、其它反芻動物和單胃動物上。
一般地，本發(fā)明第四方面的誘餌制劑可直接用于虱目、蚤目和蜱螨目害蟲上。
一般地，本發(fā)明第三方面的傾注制劑可以一或幾行或點傾注于家畜的背部中線或肩上。更一般地，傾注制劑沿著動物背部的脊椎傾注。傾注制劑也可用其它常規(guī)方法用于動物上，包括在動物身上通過市售的涂抹器、通過注射器、噴涂或噴灑途徑涂上至少一小部分面積的浸漬材料。
一般地，對于家畜的局部施藥，每公斤動物體重大約0.1-2000mg活性組合物是有效的劑量。一般地，大約2-100mg的本發(fā)明第一方面的活性組合物施用到?；蚓d羊(每公斤體重)上。
一般地，本發(fā)明的制劑如傾注制劑，根據(jù)活性成分的效力加工成活性組合物的濃度約0.1-40％重量/體積，更一般的0.1-20％重量/體積，優(yōu)選的約0.5-5％。
一般地，本發(fā)明的活性組合物或制劑經(jīng)過加工使得A83543化合物和大環(huán)內(nèi)酯化合物中每一個的濃度約1-500ppm。更一般地，A83543化合物和大環(huán)內(nèi)酯化合物中每一個的濃度約1-300ppm。更一般地，A83543化合物和大環(huán)內(nèi)酯化合物中每一個的濃度范圍約1-100ppm。對于即將使用的制劑如稀釋的浸漬液和噴劑，1-500ppm濃度是最一般的。本發(fā)明傾注制劑的活性物質(zhì)一般的濃度為1-100g/L，更一般的5-50g/L，又更一般的10-25g/L。對于口服制劑如本發(fā)明的片劑和腸胃外制劑，一般的給藥劑量為每公斤動物體重0.01-50mg，更一般的0.1-20mg/kg。本發(fā)明的誘餌制劑，一般的濃度為0.05-1000mg/kg，更一般的1-100mg/kg。
一般地，為了有效防治虱目、蚤目和蜱螨目害蟲，只需要小體積的傾注制劑，例如每次使用0.5-80ml，對于大動物例如牛來說每次施用10-60ml是優(yōu)選的，對于小動物如綿羊、狗和貓來說每次施用1-20ml。
一般地，本發(fā)明第五方面的制劑為片劑、膠囊劑、丸劑、液劑、懸浮劑或其它的酏劑。制劑也可以是持續(xù)釋放劑。上述制劑可用常規(guī)方法根據(jù)制藥和獸醫(yī)上的工藝常用標(biāo)準來制備。一般地，膠囊劑、丸劑或片劑通過活性組合物與適合的分離的稀釋劑或載體混合制備，另外含有分解劑和/或粘合劑如滑石、淀粉或乳糖。
又一般地，本發(fā)明第六方面的制劑是活性組合的無菌水溶液或懸浮液，含有腸胃外可接受的載體水和任選的其它賦形劑例如鹽或葡萄糖。
在對虱目、蚤目和蜱螨目害蟲具有殺蟲活性的本發(fā)明制劑中，活性劑是至少一種選自多殺菌素化合物(包括多殺菌素)類的化合物和至少一種選自大環(huán)內(nèi)酯包括伊維菌素、阿巴菌素、莫西菌素、多拉菌素、埃普利諾菌素和米爾菌素的活性劑的組合。
本發(fā)明的制劑可適當(dāng)?shù)陌环N或多種不同的助劑成分如防腐劑、展著劑、增粘劑、活性物質(zhì)增溶劑如油酸和乳酸、粘度調(diào)節(jié)劑、UV阻斷劑或吸收劑、著色劑和穩(wěn)定劑如抗氧化劑。適合的表面活性劑包括陰離子、陽離子、非離子和兩性表面活性劑也可加入到本發(fā)明的傾注制劑中。
異丙基肉豆蔻酸酯(IPM)、異丙基棕櫚酸酯(IPP)、飽和C12-C18脂肪醇的辛酸/癸酸酯、油酸、油酸酯、油酸乙酯、甘油三酸酯、硅油和雙丙二醇單甲醚(DPM)是傾注制劑中常用的展著劑。
一般地，本發(fā)明第七至第十方面防治侵害家畜的蜱、虱、蚤和其它虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的方法，所述家畜包括但不局限于牛、綿羊、山羊、豬、馬、駱駝、狗、貓和家禽以及其它反芻動物和單胃動物。
一般地，本發(fā)明的活性組合物、制劑和方法對防治虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的幼蟲(包括若蟲)和成蟲是有效的。這些害蟲雖然一般在寄主家畜上出現(xiàn)，但不是必須的。
更一般地，本發(fā)明的活性組合物、制劑和方法對防治家畜上的虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的幼蟲和成蟲是有效的。又一般地，本發(fā)明的活性組合物、制劑和方法對于減少家畜上能存活的虱目、蚤目和蜱螨目害蟲卵的數(shù)量也是有效的。
更一般地，本發(fā)明的局部、口服或腸胃外制劑能防治綿羊上的羽虱(Bovicola Ovis)，防治牛、山羊和駱駝上類似的虱子，防治牛上的牛蜱(如Boophilus bovis)，防治狗、貓和其它家畜上的蚤目害蟲(貓櫛頭蚤極其它蚤)。又更一般地，本發(fā)明的局部、口服或腸胃外制劑能防治牛上的虱和蜱以及狗和貓上的蚤。
本發(fā)明的制劑根據(jù)公知的方法進行制備。制劑是液劑時，驅(qū)蟲劑/殺蟲劑與載體或賦形劑混合，需要時加熱并攪拌。輔料或助劑可加入到活性物質(zhì)和載體的混合物中或在載體加入前與活性物質(zhì)混合。
每次施用大環(huán)內(nèi)酯化合物和多殺菌素化合物中每一種含量為1ppm的本發(fā)明制劑，仍然能觀測到增效效果。
本發(fā)明的活性組合物和制劑對人類和動物以及作物和植物無毒，經(jīng)過制劑處理或用藥的動物上畜毛、畜皮和組織中的殘留環(huán)境上可以接受。另外對本發(fā)明方法和制劑的最后使用者無皮膚刺激或其它毒性。環(huán)境污染也很小。
更為有利的是所述多殺菌素和大環(huán)內(nèi)酯由于組合使用時的增效作用，在低濃度下就非常有效，本發(fā)明用于在家畜上防治虱目、蚤目和蜱螨目害蟲，多殺菌素化合物和大環(huán)內(nèi)酯單獨使用時，上述害蟲對它們存在一定的抗性。
通常，本發(fā)明第三方面的制劑和本發(fā)明的活性組合物通過外表/局部對家畜用藥。上述局部施藥可采取浸漬、淋浴、注射、噴灑、手工施用如撒粉、或其它放置或布置含有活性物質(zhì)制劑的方法。因此，本發(fā)明的活性組合物一般加工成許多局部用藥殺蟲制劑。
優(yōu)選的上述局部殺蟲制劑包括點注劑、傾注劑、噴劑、浸漬劑、粉劑、洗液、凝膠、藥膏、油膏、調(diào)味劑、擦毛劑、乳油、棒劑、肥皂、洗發(fā)劑、頸圈、裝飾物(medallions)、耳標(biāo)和頂帶。包含水和有機溶劑的基于乳劑和懸浮劑的傾注制劑是優(yōu)選的。如上所述，制劑可制成濃縮的形式，使用前再稀釋。
更優(yōu)選的是浸漬制劑、傾注制劑、注射流體制劑和注射/噴灑途徑制劑。
可濕性粉劑是本發(fā)明的另一制劑，通過混合活性物質(zhì)和粉劑載體來制備，潤濕并懸浮在水中?？杉尤氡砻婊钚詣?。由于它們的相對安全，可濕性粉劑可噴施到家畜的環(huán)境包括禽舍、畜欄、牛棚和豬圈中。
乳劑是本發(fā)明的另一制劑，是活性物質(zhì)在水不溶有機溶劑中的溶液，通常為1-40％，可含有任選的表面活性劑來促進乳化性、潤濕性和展著性。溶劑的選擇基于對植物、人類和動物的安全，揮發(fā)性、可燃性和成本。乳油水乳劑的噴灑可用于防治家庭中的虱目、蚤目和蜱螨目害蟲。
如上所述，本發(fā)明第五方面的制劑通過口服用藥，而本發(fā)明第六方面的制劑是腸胃外施藥，例如肌肉、皮下或靜脈。
本發(fā)明第五和第六方面的制劑可根據(jù)所要處理的寄主家畜的種類和體重變化有關(guān)活性組合物的重量。每公斤動物體重施用0.001mg-約50mg的制劑劑量，更一般的是每公斤動物體重施用0.01mg-約30mg的劑量，又更一般的每公斤動物體重施用0.1mg-約20mg的劑量?？蓡蝿┝炕蚨鄤┝渴┯?。更高和更低的劑量范圍也是本發(fā)明可以預(yù)期的。
本發(fā)明第四方面的誘餌制劑直接給藥于害蟲，而不是寄主家畜，通過害蟲攝食餌料來進行。
本發(fā)明第一方面活性組合物中的多殺菌素成分可以是單個的化合物、兩種或多種化合物的混合物、包含A83543A和A83543D中至少一種的混合物、或至少一種A83543化合物與制備多殺菌素所用發(fā)酵培養(yǎng)基的干燥部分的混合物。
本發(fā)明所使用的大環(huán)內(nèi)酯化合物包括上述公知的驅(qū)蟲化合物如阿維菌素和米爾菌素及其衍生物和類似物。如上所述，阿維菌素由鏈霉菌的發(fā)酵產(chǎn)物中分離而來，分離方法和構(gòu)成阿維菌素(另外稱為C-076化合物)的八個單獨成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)在英國專利說明書1573995中有詳細的描述。伊維菌素是由阿維菌素改進形成的半合成化合物。商品化的伊維菌素包括例如伊維菌素的25-異丙基類似物。鑒于本發(fā)明的制劑和本發(fā)明的方法，親脂性的阿維菌素可通過將阿維菌素溶解在有機溶劑如氯仿、二氯甲烷、丙酮和醇中來制備。上文所詳細討論的米爾菌素是另一種化合物，不是阿維菌素，但可被認為屬于大環(huán)內(nèi)酯這一類化合物中。米爾菌素在結(jié)構(gòu)上區(qū)別于阿維菌素組，主要是在C-13上沒有二糖基。上述化合物的例子描述在UK專利1390336和EP專利申請170006、254583、334484和410615中，加入此處作為參考。
多殺菌素化合物在本發(fā)明的活性劑、制劑和方法中也可以鹽的形式存在。這些鹽用鹽的標(biāo)準制備方法來制備。例如，多殺菌素A可與適合的酸中和形成酸加成鹽。本發(fā)明所使用的多殺菌素的酸加成鹽包括與下列酸所形成的鹽，有機或無機酸例如硫酸、鹽酸、磷酸、乙酸、琥珀酸、檸檬酸、乳酸、馬來酸、延胡索酸、膽酸、棕櫚酸(pamoic)、粘酸、谷氨酸、樟腦酸、戊二酸、乙醇酸、鄰苯二甲酸、酒石酸、甲酸、月桂酸、硬脂酸、水楊酸(salicyclic)、甲基磺酸、苯磺酸、山梨酸、苦味酸、安息香酸、肉桂酸等。
通常，A83543化合物的乳油包括溶解在惰性載體中的A83543化合物的常規(guī)濃縮物，該載體是與水混溶的溶劑或水不溶有機溶劑和乳化劑的混合物。所述多殺菌素優(yōu)選的濃度是1-500g/L，更優(yōu)選的濃度選自1-400g/L、1-350g/L、1-300g/L、1-250g/L、1-200g/L、1-150g/L、1-100g/L、1-90g/L、1-80g/L、1-70g/L、1-60g/L、1-50g/L、1-40g/L、1-30g/L、1-20g/L，又更優(yōu)選的是25g/L。所使用的有機溶劑包括芳香烴二甲苯和石油餾分。也可使用其它的有機溶劑，例如萜烯類溶劑，包括樹脂衍生物、脂肪酮如環(huán)己酮和復(fù)合醇如2-乙氧基乙醇。
乳油中的乳化劑可選自常規(guī)的包括烷基酚環(huán)氧乙烷加成物的非離子表面活性劑和包括烷基/芳基磺酸鹽的陰離子表面活性劑。
水懸浮劑(AS)包括水不溶多殺菌素活性化合物以約1-500g/L的濃度分散在水載體中的懸浮液，優(yōu)選的濃度選自約1-400g/L、約1-300g/L、約1-250g/L、約1-200g/L、約1-150g/L、約1-100g/L、約1-50g/L、約1-45g/L、約1-40g/L、約1-30g/L，更優(yōu)選的約25g/L。通常，通過將多殺菌素化合物研磨細，混入含有水和選自非離子型磺化木質(zhì)素和烷基磺酸酯表面活性劑的載體中來制備懸浮劑。也可加入惰性成分。
水懸浮劑和乳劑優(yōu)選用水進行稀釋以獲得本發(fā)明最后制劑中所要的多殺菌素濃度。在另一優(yōu)選的制劑中，一種或多種活性物質(zhì)可采用活性物質(zhì)的水溶液形式。將殺蟲劑噴到畜欄、牛棚和豬圈的表面是最常用的方法。噴霧或浸漬對于小的反芻動物來說是最常用的殺蟲劑施用方法，通常用水作為主要載體。
在本發(fā)明制劑特別是浸漬洗滌制劑中，多殺菌素化合物和大環(huán)內(nèi)酯化合物中的每一種優(yōu)選的濃度約500ppm或更少。更優(yōu)選地，每一種的濃度約400ppm或更少。又優(yōu)選地，每種的濃度約300ppm或更少，更優(yōu)選的200ppm或更少，又更優(yōu)選的100ppm或更少，最優(yōu)選的50ppm或更少。
實施本發(fā)明的最佳方案和其它方案本發(fā)明優(yōu)選的制劑可根據(jù)常規(guī)的方法來制備，下面是幾個實施例。制備本發(fā)明多殺菌素和伊維菌素組合的優(yōu)選方法是將組合共同加工或者每種化合物單獨加工然后再合并?；衔锷踔猎诮M合物以分離的兩相存在。例如增效組合物中一種活性化合物可在溶液中，另一種活性化合物在懸浮液中；然后，上述組合用來制備本發(fā)明適合的制劑。
實施例前言在試驗濃度下兩種殺蟲劑合并后的效果明顯大于每個單獨施用效果的合，產(chǎn)生了增效作用(或共增強作用)。例如，Sun和Johnson(1960)的方法“Analysis of joint action of insecticidesagainst house flies”J. Econ. Entomol 53887-892，需要計算共毒系數(shù)。共毒系數(shù)100只表示相加作用，而130或更高表示增效或增強。另外用廣義的線形模型方法可得到每種化學(xué)藥品的劑量反應(yīng)線(dose-response lines)。每種單個化學(xué)藥品的線根據(jù)獨立作用來預(yù)測組合的效果，即沒有增效或增強。預(yù)測的線與所觀察到的組合的效果進行比較，可看到明顯的增強作用。
大環(huán)內(nèi)酯通過刺激抑制谷氨酸受體對昆蟲的神經(jīng)系統(tǒng)起主要作用，而多殺菌素則主要刺激神經(jīng)元上的煙堿乙酰膽堿受體，造成神經(jīng)元的過度興奮。但是，多殺菌素和大環(huán)內(nèi)酯都對節(jié)肢動物神經(jīng)元上的伽馬氨基丁酸(GABA)門控氯化物通道有二次效應(yīng)，GABA是抑制神經(jīng)遞質(zhì)。因此，當(dāng)多殺菌素與大環(huán)內(nèi)酯組合使用時可能對GABA受體有增效效果，從而對昆蟲的神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生影響，但這不涉及多殺菌素或大環(huán)內(nèi)酯的主要作用。本研究的目的是驗證在虱目、蚤目和蜱螨目害蟲上的獸醫(yī)價值。
下面的實施例闡述了令人驚奇的結(jié)果，當(dāng)多殺菌素和大環(huán)內(nèi)酯以被害蟲攝食或內(nèi)吸的方式一起用于動物害蟲上時產(chǎn)生了增效作用。令人驚奇的是該效果在依賴于接觸如處理紙片或瞬時浸入處理溶液中的體外試驗中觀察不到。據(jù)推測該差別涉及作用機制和兩種化學(xué)藥劑的低蒸汽壓和不能輕易通過節(jié)肢動物表皮的本性。
實施例1用虱子研究多殺菌素和伊維菌素可能有增效作用的體外試驗材料和方法利用Rugg和Thompson(J Aust Ent Soc，1993；321-3)的方法，給4×15的一組虱子飼喂含有一定范圍濃度的多殺菌素或伊維菌素的磨碎的綿羊表皮48小時。48小時后測算死亡率，根據(jù)概率分析確定LC90值。虱子暴露在多殺菌素或伊維菌素的LC90濃度以及LC90的1/2、1/4和1/8濃度下。另外，虱子暴露在每種化學(xué)藥品的1∶1、1∶4、4∶1、9∶1和1∶9組合下，化學(xué)藥品的每種濃度是LC90的分數(shù)。
對于不均勻分布的二項數(shù)據(jù)利用對數(shù)函數(shù)的廣義線性模型方法來分析處理組。分析測定每種化學(xué)藥品或組合的劑量反應(yīng)線(根據(jù)對數(shù)劑量數(shù)值)。用劑量反應(yīng)線根據(jù)單獨作用預(yù)測組合的效果并與所觀察到的效果進行比較。
結(jié)果大部分供試的組合具有明顯的增效作用。增效最強的是4∶1和9∶1比例的多殺菌素∶伊維菌素。
對比實施例虱子的紙接觸試驗材料和方法在皮氏培養(yǎng)皿中的棉蕾上，4×10-13的一組虱子暴露在一定濃度范圍的多殺菌素或伊維菌素下。18小時后測算死亡率，根據(jù)概率分析確定LC90值。虱子暴露在多殺菌素或伊維菌素的LC90濃度以及LC90的1/2、1/4和1/8濃度下。另外，虱子暴露在每種化學(xué)藥品的1∶1、1∶4、4∶1、9∶1和1∶9組合下，化學(xué)藥品的每種濃度是LC90的分數(shù)。
結(jié)果該組中所有組合的測定效果都低于單獨作用下預(yù)測的效果，即不能證明有增效作用。
討論紙接觸試驗相對于攝食試驗的否定效果支持了兩種化學(xué)藥品必須通過害蟲的內(nèi)吸作用才能產(chǎn)生增效這一假說。
實施例2在跳蚤上研究多殺菌素和伊維菌素的增效體外試驗I)成蟲蚤的人造膜體系材料和方法由Wade和Georgi(J Med Entomol 1988；25186-190)設(shè)計的人造膜系統(tǒng)(人造狗)將血液飼喂成蟲蚤，適于檢測內(nèi)吸殺蟲劑的效果。一組25頭的跳蚤飼喂含有一定濃度范圍多殺菌素或伊維菌素的檸檬酸血液24小時。24小時后測算死亡率，根據(jù)概率分析確定LC90值。蚤暴露在多殺菌素或伊維菌素的LC90濃度以及LC90的1/2、1/4和1/8濃度下。另外，蚤暴露在每種化學(xué)藥品的1∶1、1∶4、4∶1、9∶1和1∶9組合下，化學(xué)藥品的每種濃度是LC90的分數(shù)。
結(jié)果供試的大多數(shù)組合表現(xiàn)出了明顯的增效作用。增效最顯著的是4∶1和9∶1比例的多殺菌素∶伊維菌素。
II)蚤幼蟲飼養(yǎng)研究材料和方法使用E1-Gazzar等人(J Med Entomol 1986；23651-654)的方法。一組50頭的幼蟲蚤取食含有一定濃度范圍多殺菌素或伊維菌素的幼蟲飼養(yǎng)培養(yǎng)基4周。4周后計算活的羽化出的成蟲、繭和死亡蛹的數(shù)目。測算幼蟲死亡率，根據(jù)概率分析確定LC90值。幼蟲暴露在多殺菌素或伊維菌素的LC90濃度以及LC90的1/2、1/4和1/8濃度下。另外，幼蟲暴露在每種化學(xué)藥品的1∶1、1∶4、4∶1、9∶1和1∶9組合下，化學(xué)藥品的每種濃度是LC90的分數(shù)。
結(jié)果供試的大多數(shù)組合表現(xiàn)出了明顯的增效作用。
實施例3在牛蜱上研究多殺菌素和伊維菌素增效作用的體外試驗I)幼蟲浸漬研究材料和方法使用Sabatini、Kemp等(Vet Parasitol 2001；9553-62)所描述的幼蟲浸漬試驗，只是幼蟲先干燥12小時，再浸漬在浸漬液中進行吸收。一組500頭的幼蟲浸漬在含有一定濃度范圍多殺菌素或伊維菌素的液體中20分鐘，然后轉(zhuǎn)移到紙盒中。24小時后測算死亡率，根據(jù)概率分析確定LC90值。蜱幼蟲暴露在多殺菌素或伊維菌素的LC90濃度以及LC90的1/2、1/4和1/8濃度下。另外，幼蟲暴露在每種化學(xué)藥品的1∶1、1∶4、4∶1、9∶1和1∶9組合下，化學(xué)藥品的每種濃度是LC90的分數(shù)。
結(jié)果供試的大多數(shù)組合表現(xiàn)出了明顯的增效作用。增效最顯著的是4∶1和9∶1比例的多殺菌素∶伊維菌素。
II)成蟲注射研究材料和方法吃飽的成蟲牛蜱注射2微升的一定濃度范圍的多殺菌素或伊維菌素。根據(jù)例如Sabatini和Kemp(Vet Parasitol 2001；9553-620)的標(biāo)準方法收集產(chǎn)卵和幼蟲孵化數(shù)據(jù)，用作計算LC90值。成蟲用多殺菌素或伊維菌素的LC90濃度以及LC90的1/2、1/4和1/8濃度注射。另外，成蟲用每種化學(xué)藥品的1∶1、1∶4、4∶1、9∶1和1∶9組合進行注射，化學(xué)藥品的每種濃度是LC90的分數(shù)。
結(jié)果供試的大多數(shù)組合表現(xiàn)出了明顯的增效作用。增效最顯著的是4∶1和9∶1比例的多殺菌素∶伊維菌素。
對比實施例沒有吸收浸漬液的蜱幼蟲浸漬試驗使用Sabatini、Kemp等(Vet Parasitol 2001；9553-62)所描述的幼蟲浸漬試驗。一組500頭的幼蟲浸漬在含有一定濃度范圍多殺菌素或伊維菌素的液體中20分鐘，然后轉(zhuǎn)移到紙盒中。24小時后測算浸漬死亡率，根據(jù)概率分析確定LC90值。蜱幼蟲暴露在多殺菌素或伊維菌素的LC90濃度以及LC90的1/2、1/4和1/8濃度下。另外，幼蟲暴露在每種化學(xué)藥品的1∶1、1∶4、4∶1、9∶1和1∶9組合下，化學(xué)藥品的每種濃度是LC90的分數(shù)。
結(jié)果觀察兩種化合物的劑量反應(yīng)關(guān)系。組合的測定效果低于單獨作用下所預(yù)測的效果，即不能證明有增效作用。
討論與幼蟲吸收試驗方法中的增效證據(jù)相比，浸漬試驗方法中沒有發(fā)生增效作用這一否定結(jié)果支持了兩種化學(xué)藥品必須通過蜱的內(nèi)吸作用才能發(fā)生增效這一假說。
多殺菌素伊維菌素增效制劑防治虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的實施例實施例4傾注制劑成分 g/L多殺菌素 20伊維菌素 5抗氧化劑如BHT 0.5Crodamol IPM 15Crodamol OSU 15Crodamol OP 加至100％制劑用涂藥器從頭頂?shù)交课舶脱貏游锏谋巢恐芯€施藥，通常用帶噴嘴的自動裝填劑量槍沿著背部撒一條窄或?qū)挼膸Щ蚓€。該制劑每公斤體重使用0.2mL。另外，每種體重等級使用一定的量，例如對于綿羊，小于30kg的動物用10mL，31-50kg的動物用15mL，51kg以上的動物用20mL。綿羊和其它產(chǎn)纖維動物應(yīng)在修剪或纖維收集的24小時內(nèi)處理。
實施例5膠懸劑，多殺菌素20g/L，伊維菌素5g/L活性化學(xué)藥品用球磨機研磨成細的顆粒。
％w/w多殺菌素 2伊維菌素 0.5丙二醇 10表面活性劑如Pluronic P123 2礦物增稠劑如Veegum 2Xanthum gum如Rhodopol 23 0.2殺菌劑如Agent Dowicil 75 0.2抗泡沫劑如Antifoam C 0.1去離子水 加至100％膠懸劑(SC)用水稀釋至1∶1000，用作浴液或浸漬液。化學(xué)藥品通過浸漬施到動物身上。另外，可通過淋浴浸漬或噴射途徑弄濕動物的皮膚。綿羊可用手動噴射桿吸取稀釋的化學(xué)藥品施到羊毛上進行處理。對于傷口涂劑，稀釋的化學(xué)藥品可注入傷口中。許多動物品種可通過噴灑稀釋的產(chǎn)品進行處理來防治侵染家畜的虱目、蚤目和蜱螨目害蟲。
實施例6乳油，多殺菌素20g/L，伊維菌素5g/L活性化學(xué)藥品用球磨機研磨成細的顆粒。
％w/w多殺菌素 2伊維菌素 0.5抗氧化劑如BHT0.510％的離子和非離子表面活性劑的混合物例如Toximul 3453F6.8Toximul 3454FA 3.2
芳香烴溶劑例如Solvesso 150 加至100％乳油(EC)用水稀釋至1∶1000，用作浴液或浸漬液?；瘜W(xué)藥品通過浸漬施到動物身上。另外，可通過淋浴浸漬或噴射途徑弄濕動物的皮膚。綿羊可用手動噴射桿吸取稀釋的化學(xué)藥品施到羊毛上進行處理。對于傷口涂劑，稀釋的化學(xué)藥品可注入傷口中。許多種動物可通過噴灑稀釋的產(chǎn)品進行處理來防治侵染家畜的虱目、蚤目和蜱螨目害蟲。
實施例7口服片劑，對于20公斤的狗，500mg片劑。
成分g/kg片劑內(nèi)核多殺菌素400伊維菌素40結(jié)合劑，如Povidone 24粘合劑/崩解劑，如羥基乙酸淀粉鈉 20潤滑劑如硬脂酸鎂7包衣成膜劑羥丙基甲基纖維素 25可塑劑如甘油4著色劑 20實施例8注射制劑成分g/L多殺菌素100伊維菌素20溶劑如丙二醇350溶劑如甘油甲醛 500防腐劑 0.1
抗氧化劑 0.1實施例9餌劑成分 g/kg多殺菌素 0.1伊維菌素 0.05研磨的干牛血 100研磨干燥的狗食物 400酵母 1防腐劑0.01蛭石 500
權(quán)利要求
1.一種防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的內(nèi)吸活性組合物，包括至少一種A83543化合物和至少一種大環(huán)內(nèi)酯的增效組合。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的活性組合物，其中A83543化合物大環(huán)內(nèi)酯的比例為1000∶1-1∶1000w/w。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的活性組合物，其中A83543化合物大環(huán)內(nèi)酯的比例為10∶1-1∶10w/w。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的活性組合物，其中所述的A83543化合物選自任一種多殺菌素化合物及其鹽，和包括多殺菌素的任何兩種或多種多殺菌素化合物的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的活性組合物，其中所述的大環(huán)內(nèi)酯選自伊維菌素、阿巴菌素、阿維菌素A1a、阿維菌素A1b、阿維菌素A2a、阿維菌素A2b、阿維菌素B1a、阿維菌素B1b、阿維菌素B2a、阿維菌素B2b、莫西菌素、多拉菌素、塞拉菌素、埃普利諾菌素和米爾菌素。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的活性組合物，其中所述的A83543化合物是多殺菌素，所述的大環(huán)內(nèi)酯是伊維菌素。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的活性組合物，其中所述的害蟲存在于家畜上。
8.一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的制劑，所述制劑包括有效量的權(quán)利要求1所述的內(nèi)吸活性組合物和可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的制劑，其中，活性組合物在制劑中的濃度約為0.1-40％重量/體積。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的制劑，其中的制劑口服施藥于一種或多種家畜上。
11.根據(jù)權(quán)利要求8的制劑，其中的制劑腸胃外施藥于一種或多種家畜上。
12.根據(jù)權(quán)利要求8的制劑，其中的制劑皮膚施藥于一種或多種家畜上。
13.根據(jù)權(quán)利要求8的制劑，其中的制劑是用于家畜上的局部施藥制劑，所述的局部施藥制劑選自點注劑、傾注劑、噴劑、浸漬劑、粉劑、洗液、凝膠、藥膏、油膏、調(diào)味劑、擦毛劑、乳油、棒劑、肥皂、洗發(fā)劑、頸圈、裝飾物、耳標(biāo)、浸漬制劑、噴射流體制劑、噴射/噴灑途徑制劑和頂帶。
14.根據(jù)權(quán)利要求8的制劑，其中所述的制劑是局部施用于家畜外表皮的傾注制劑。
15.根據(jù)權(quán)利要求8的制劑，其中，對于家畜的局部施藥每公斤動物體重約0.1-2000mg的活性劑是有效的。
16.一種防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的餌劑，所述制劑包括有效量的權(quán)利要求1所述的內(nèi)吸活性組合物和可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
17.一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的方法，所述方法包括向所述動物外表皮的至少一個局部區(qū)域外用有效量的權(quán)利要求1所述的活性組合物或權(quán)利要求8所述的制劑。
18.一種防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的方法，所述方法包括向所述害蟲施用有效量的權(quán)利要求1所述的活性組合物或權(quán)利要求8或權(quán)利要求16所述的制劑。
19.一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的方法，所述方法包括向所述動物口服施用有效量的權(quán)利要求1所述的活性組合物或權(quán)利要求8所述的制劑。
20.一種在家畜上防治或消滅虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的方法，所述方法包括向所述動物腸胃外施用有效量的權(quán)利要求1所述的活性組合物或權(quán)利要求8所述的制劑。
21.權(quán)利要求1所述活性組合物在制備家畜上預(yù)防或防治虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的藥物中的應(yīng)用。
22.權(quán)利要求1所述活性組合物在制備預(yù)防或防治虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的餌劑中的應(yīng)用。
23.在家畜上用于預(yù)防或防治虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的權(quán)利要求1所述的活性組合物或權(quán)利要求8所述的制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及防治或消滅一般在家畜上的虱目、蚤目和蜱螨目害蟲的活性組合物，包括至少一種A83543化合物和至少一種大環(huán)內(nèi)酯的增效組合。本發(fā)明還涉及活性組合物在殺蟲制劑中的應(yīng)用、制劑本身以及這些制劑作為殺蟲劑，特別是在防治所有虱目、蚤目和蜱螨目害蟲品種上的多種應(yīng)用。上述的應(yīng)用包括防治家畜上的上述外寄生虱目、蚤目和蜱螨目害蟲，所述家畜包括但不局限于綿羊、牛、家禽、豬、山羊、駱駝、馬、狗和貓。
文檔編號A01N45/02GK1547433SQ01823637
公開日2004年11月17日 申請日期2001年9月17日 優(yōu)先權(quán)日2001年9月17日
發(fā)明者L·B·羅維, J·T·羅斯維爾, L B 羅維, 羅斯維爾 申請人:伊萊利利公司