專利名稱：刺五加在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及魚類飼料添加劑，更具體涉及一種刺五加在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用，用作魚類免疫增強劑，以提高魚體的抗病能力。
背景技術(shù)：
隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，養(yǎng)殖動物的疾病已成為一個制約本行業(yè)發(fā)展的突出問題。就傳染性疾病而言，其種類就十分復(fù)雜，有細菌性疾病，病毒性疾病，寄生蟲疾病以及真菌性疾病。目前，對于養(yǎng)殖魚類疾病的防治主要有以下幾種措施生態(tài)防治；藥物防治；接種疫苗。
這些措施當(dāng)中，生態(tài)防治的作用非常有限，常常也難以做到；藥物防治技術(shù)雖然比較有效，也是當(dāng)前采用的主要方式，但是它的副作用也突出，比如，耐藥菌的產(chǎn)生，藥物殘留，以及對環(huán)境的污染等。現(xiàn)在化學(xué)藥物的使用即將受到非常嚴格的限制；而疫苗由于是只針對魚體的特異性免疫系統(tǒng)，對病原的針對性太強，一種疫苗只能預(yù)防一種疾病，所以在生產(chǎn)實踐中其作用也極為有限。何況目前商用疫苗種類很少，加上缺乏簡易的疫苗接種措施，所以據(jù)統(tǒng)計疫苗的使用水平只有不到1％的水平，多數(shù)疾病仍無法用疫苗來預(yù)防。
現(xiàn)在雖然已經(jīng)有免疫增強劑在局部領(lǐng)域使用，但是目前常用的是粗制酵母多糖或藻類多糖。由于缺乏足夠的基礎(chǔ)研究，在使用劑量和使用方案等方面單憑經(jīng)驗而定，效果不夠理想甚至?xí)鸬椒醋鳛?。由于上述原因，我國水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的疾病仍然頻繁在各地發(fā)生，造成了巨大的經(jīng)濟損失。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種刺五加在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用，將刺五加的有效成分提取物作為飼料添加劑在淡水魚類養(yǎng)殖中的應(yīng)用，工藝簡便，資源豐富，成本低，有效地提高了魚體的抗病能力。
為了達到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案中草藥是我國醫(yī)學(xué)中的重要資源。刺五加[Acanthopanax senticocus(Rupr.etmaxim.)harms]為五加科植物。用其干燥根及根莖。春秋二季采挖。別名五加皮、刺拐棒。
刺五加的根及根皮中的有效成分除醇溶性的刺五加甙(Eleutherosides)A、B、B1、C、D、E等一類成分外，還有另一類成分—多糖類水溶性多糖和堿溶性多搪，這些都是刺五加的有效成份。刺五加甙A，B，C，D，E的結(jié)構(gòu)式是 刺五加甙A、B、B1、C、D、E植物形態(tài)植物形態(tài)落葉灌木，高1～6m。莖密生細長倒刺。掌狀復(fù)葉互生，小葉5，稀4或3，邊緣具尖銳重鋸齒或鋸齒。傘形花序頂生，單一或2～4個聚生，花多而密；花萼具5齒；藥瓣5，卵形；雄蕊5，子房5室。漿果狀核果近球形或卵形，后具5棱，有宿存花柱。花期6～7月，果期7～9月。
藥材性狀本品根莖呈結(jié)節(jié)狀不規(guī)則圓柱形，直徑1.4-4.2cm。根呈多圓柱形，多扭曲不直，長3.5-12cn，，直徑0.3-1.5cm；表面灰褐色或黑褐色，粗糙，有細縱溝及皺紋，皮較薄，有的剝落，剝落處呈灰黃色。質(zhì)硬，斷面黃白色，纖維性。有特異香氣，味微辛，稍苦、澀。以香氣濃者為佳。
藥材鑒別本根的橫切面木栓層為數(shù)十列細胞。皮層菲薄，散有分泌道；薄壁細胞大多含草酸鈣簇晶，直徑11-64μm。韌皮部外側(cè)散有較多纖維束，向內(nèi)漸稀少；分泌類圓形或橢圓形，徑向25-51μm，切向48-97μm；薄壁細胞含簇晶。形成層成環(huán)。木質(zhì)部占大部分，射線寬1-3列細胞；導(dǎo)管壁較薄，大多數(shù)個相聚；木纖維發(fā)達。根莖的橫切面韌皮部纖維束較根為多，有髓部。
有效成份的提取按常規(guī)水煮乙醇沉淀法制備刺五加粗制浸膏。但應(yīng)避免在強酸、強堿中提取。取1000克刺五加置連續(xù)回流提取器中，加5-10升70-80％的乙醇，加熱連續(xù)回流提取，將提取液濃縮成浸膏即得。將該浸膏按一定比例均勻地混入飼料中，制成顆粒，可直接投喂。如果將該浸膏再用10-20倍的水提取一次，其提取液可用于腹腔注射試驗。
效果證明從醫(yī)學(xué)上被證明具有免疫促進作用的幾種中藥當(dāng)中，篩選出了刺五加。經(jīng)研究證明，刺五加對鯉魚具有以下幾方面的功效可以激活補體的代償途徑；具有提高魚體抗細菌和寄生蟲感染的能力；具有抗應(yīng)激的功效。因此具有提高機體非特異性免疫功能的能力，從而提高機體對多種疾病的抵抗能力，減少疾病的發(fā)生。也就是說，在預(yù)防疾病方面具有廣譜作為。經(jīng)研究獲得以下結(jié)果1)腹腔注射該中藥的水溶性提取物3天后，2mg/fish和4mg/fish的劑量可以提高鯽魚對Aeromonas hydrophila感染的抗性，保護率分別為66％和85％。
2)體內(nèi)和體外試驗都表明該水溶性提取物具有顯著的激活補體代償途徑活性的作用。
3)體外試驗表明，10mg/ml的劑量可以顯著地激活血清對原本耐血清殺滅的Aeromonas hydrophila的殺滅作用。
4)將該中藥的乙醇提取物加入餌料中投喂試驗魚2周(日劑量為40mg/kg和200mg/kg)，血清溶菌酶的活性雖有升高，但不顯著(p＞0.05)。但是對各投喂組的試驗魚進行腹腔疫苗接種試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)高劑量組比對照組或低劑量組的抗體滴度顯著升高，說明該中藥可改善疫苗的免疫效果。不過，體表粘液中的抗體水平?jīng)]有顯著變化。
5)腹腔注射水溶性提取物可以降低鯽魚的應(yīng)激反應(yīng)，應(yīng)激后對照魚血漿中的平均皮質(zhì)激素水平為104ng/ml，而服藥物的對照組激素水平只有38.4ng/ml。
6)以40mg/kg和200mg/kg的劑量飼喂鯽魚8周，未出現(xiàn)任何中毒反應(yīng)，體重增加還略高于對照組。這說明長期飼喂刺五加對魚類是安全的。
這些研究結(jié)果表明，這種中藥對異育銀鯽的非特異性免疫和特異性免疫功能都具有促進作用，是一種有很好的漁用免疫增強劑和抗應(yīng)激劑。
事實上，刺五加不僅對所研究過的鯽魚和草魚有免疫增強作用，而且對其它淡水和海水養(yǎng)殖的魚類，特別是鯉科魚類以及養(yǎng)殖的兩棲動物鱉都有很好的免疫促進作用。這是因為這些動物都具有發(fā)達的、類似于哺乳動物的免疫系統(tǒng)，包括特異性和非特異性免疫系統(tǒng)。而且多糖和刺五加甙的活性也不受海水明顯的影響。
1.刺五加及提取物作為飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用；2.刺五加及提取物作為飼料添加劑在草魚(Ctenopharyngodon idellus Cuvieret Valenciennes)的飼料中的應(yīng)用；3.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鯉魚的飼料中的應(yīng)用；4.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鯽魚的飼料中的應(yīng)用；5.刺五加及提取物作為飼料添加劑在烏鱧(Ophicephalus argus Cantor)的飼料中的應(yīng)用；6.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鱉的飼料中的應(yīng)用；7.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鯰魚(Silurus lanzhouensis Chen)的飼料中的應(yīng)用；8.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鳊魚[包括團頭魴(Megalobramaamblycephala Yih)]的飼料中的應(yīng)用；9.刺五加及提取物作為飼料添加劑在石斑魚的飼料中的應(yīng)用；10.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鱸魚的飼料中的應(yīng)用；11.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鯛魚的飼料中的應(yīng)用；12.刺五加及提取物作為飼料添加劑在魳魚的飼料中的應(yīng)用；13.刺五加及提取物作為飼料添加劑在黃魚的飼料中的應(yīng)用；14.刺五加及提取物作為飼料添加劑在羅非魚的飼料中的應(yīng)用。
以上所述“刺五加及其各種提取物”包括刺五加原料藥物以及含有刺五加甙和多糖的各種提取物。
本發(fā)明具有以下幾方面的優(yōu)點1.刺五加具有豐富的資源刺五加主要生于低山、丘陵閹葉林或針閑混交林的林下、林繞，喜溫暖、濕潤氣候，耐寒，地下莖發(fā)達.對土壤要求不嚴。東北、華北、陜西、四川及朝鮮、俄羅斯遠東地區(qū)均有分布。中國東北地區(qū)野生資源豐富，蘊藏量大，也可以人工栽培。
2.免疫增強劑在抗病方面具有廣譜性 魚類疾病的發(fā)生主要是環(huán)境、病原和魚體三者間相互作用的結(jié)果。魚體在不良環(huán)境條件下，遭受巨大的環(huán)境脅迫，產(chǎn)生持續(xù)而強烈的應(yīng)激反應(yīng)。在應(yīng)激狀態(tài)下，魚體的免疫系統(tǒng)會受到明顯的抑制，從而抗病力下降，對各類病原，包括細菌、真菌、病毒和寄生蟲等的敏感性升高，最終是疾病頻繁發(fā)生。然而，如果能正確地使用有效的免疫增強劑，可望提高魚體的非特異免疫機能，減少各類病原對機體的入侵，提高魚體的抗病能力。
3.中草藥對人、對魚無毒無害 目前的魚類防病技術(shù)主要有兩種化學(xué)藥物和疫苗。其中占絕對主要地位的還是各種化學(xué)藥物，然而使用化學(xué)藥物不僅常常達不到預(yù)期效果，而且副作用太大，正受到限制而要減少使用。也嚴重影響了我國水產(chǎn)品的外貿(mào)出口。然而，刺五加作為一種中草藥，對使用對象和環(huán)境沒有任何毒副作用，也不存在耐藥性的問題，更不會對出口產(chǎn)生影響。
4.刺五加在祖國藥學(xué)中作為藥物應(yīng)用已有悠久的歷史，在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)上也受到重用，對人體沒有任何毒副作用，不存在象化學(xué)藥物那樣在魚體內(nèi)殘留繼而對消費者的健康造成威脅的可能。
5.本發(fā)明的產(chǎn)品制備工藝簡便 作為漁用飼料添加劑采用乙醇一步法提取再干燥濃縮即可。
6.有研究表明，刺五加不僅具有增強免疫機能和提高抗應(yīng)激的作用，在醫(yī)學(xué)上刺五加具有廣泛而有益的藥理作用，例如調(diào)節(jié)內(nèi)分泌和抗腫瘤的作用。由于環(huán)境污染日益嚴重，魚類的腫瘤病也越來越常見，使用刺五加對此可望有預(yù)防作用。此外，刺五加在醫(yī)學(xué)臨床上廣泛用于神經(jīng)衰弱、糖尿病、動脈硬化、風(fēng)濕癥、風(fēng)濕性心臟病、心血管病.并做為強壯及營養(yǎng)預(yù)防藥物。
具體實施例方式
實施例1、 取刺五加，置連續(xù)回流提取器中，加7倍量的75％乙醇，加連續(xù)回流提取，至取提取液1ml，加10％α-萘酚的乙醇溶液不顯反應(yīng)為止。提取液濃縮成5％的浸膏，再行干燥成粉備用。將上述粉劑按一定比例添加到魚類飼料中，制成顆粒即可使用。
實施例2、先將的刺五加的根、莖用5-7倍量的90-100℃水?dāng)嚢杞?-5小時，2-3次，再用0.5N NaOH抽提。合并兩種抽提液，除去殘渣后，上清液中加入乙醇至80％，沉淀得到粗制刺五加浸膏，或進一步干燥制成粉，即可按適當(dāng)比例添加到魚類飼料當(dāng)中使用。而含有乙醇的上清液可回流再用。
權(quán)利要求
1.刺五加及提取物作為飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用。
2.刺五加及提取物作為飼料添加劑在草魚的飼料中的應(yīng)用。
3.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鯉魚的飼料中的應(yīng)用。
4.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鯽魚的飼料中的應(yīng)用。
5.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鱉的飼料中的應(yīng)用。
6.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鯰魚的飼料中的應(yīng)用。
7.刺五加及提取物作為飼料添加劑在石斑魚的飼料中的應(yīng)用。
8.刺五加及提取物作為飼料添加劑在鱸魚的飼料中的應(yīng)用。
9.刺五加及提取物作為飼料添加劑在黃魚的飼料中的應(yīng)用。
10.刺五加及提取物作為飼料添加劑在羅非魚的飼料中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了刺五加在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用。刺五加的提取物在適當(dāng)劑量下,具有增強淡水或海水養(yǎng)殖魚類免疫系統(tǒng)、特別是非特異性免疫功能的作用,可廣泛性地降低養(yǎng)殖魚類對各類病原性疾病的抵抗力,提高養(yǎng)殖成活率。此外,刺五加對魚體還具有抗應(yīng)激作用,從而增強魚體對環(huán)境脅迫的適應(yīng)能力。刺五加及其提取物是一種無毒、無害、無污染的飼料添加劑。本發(fā)明制備方法易行,生產(chǎn)工藝簡單。
文檔編號A01K61/00GK1377574SQ0211583
公開日2002年11月6日 申請日期2002年5月14日 優(yōu)先權(quán)日2002年5月14日
發(fā)明者李愛華, 王文博, 蔡桃珍, 吳玉深 申請人:中國科學(xué)院水生生物研究所