專利名稱：一種用于器官移植的灌洗保存液的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種器官移植技術，尤其是指一種對器官進行灌洗，以便于保存，并提高存活率的灌洗液。
背景技術：
器官移植被稱為“21世紀醫(yī)學之巔”。在跨入新世紀之際，器官移植又進入了一個蓬勃發(fā)展的新時期。據(jù)全球移植中心名錄(WTCD)的統(tǒng)計，迄今已有60余萬名身患不治之癥者，通過器官移植獲得了第二次生命。他們在移植器官后，全身健康，過著與正常人一樣的生活；心理健康，工作精力充沛；育齡婦女能懷孕生育，少年兒童能健康成長。為了使器官移植有更好的前景，各國科學工作者們正孜孜不倦地在探索新的領域。為開拓器官來源，正在開展利用動物器官的異種移植研究；創(chuàng)制各種新的器官保存液。
我國自70年代開展臨床器官移植以來，技術隊伍不斷擴大，水平亦逐年提高，在腎移植、肝移植、脾移植等多個方面都取得了驕人的成績，并且逐漸形成了自己的特色。因此，引起了國際學術界的廣泛關注。
自從1983年多倫多肺移植組成功進行人類單肺移植，1986年成功進行雙肺移植以來，全世界應用肺移植技術治療終末期肺部疾病的病例迅速增加，據(jù)國際心肺移植協(xié)會登記2000年全世界單肺移植7420，雙肺移植5420例。平均一年存活率超過87％，三年存活率超過60％，五年存活率超過45％，七年存活率超過35％。
亞洲地區(qū)肺移植相對落后。肺移植在國內開展時間不長，僅北京安貞醫(yī)院報告2例長期生存。目前除安貞醫(yī)院的病例外，國內尚無存活的肺移植病例。我國肺移植工作落后于國際水平的因素很多，其中選擇適當?shù)墓嘧⒁阂约胺喂嘧⒈４婕夹g一直是實驗及臨床研究的焦點，它是減少肺再灌注損傷(Ischemia-reperfusion injury)的關鍵。
肺移植術后影響早期肺功能的因素很多。在臨床實驗中應用很多不同的肺保存技術，有的已經成功，但沒有一個是理想的技術。應用改良Euro-Collins液或UW(威斯康辛大學)液體進行肺動脈灌注，目前也僅能保存4-6h，即缺血時間最長不得超過6h，因此不甚理想。近年研究并試用的灌洗液還有LPD(低鉀右旋糖酐)，有多家報道其肺保存作用較Euro-Collins液、UW(威斯康辛大學)液更好，認為它能更好地保護肺泡毛細血管內皮細胞，但即便如此，仍然不是一種可以在臨床上廣泛應用的理想的灌洗液，這些因素導致供肺的運轉、手術的安排乃至手術操作都受到嚴重限制，成為肺移植發(fā)展的重要障礙。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于尋求一種用于器官移植的灌洗保存液，這種灌洗液能有效提高移植器官的存活率。
其主要技術方案是在灌洗液中含有鉀3.5～6(毫摩爾/升)，鈉130～168(毫摩爾/升)，鎂0.8～2.5(毫摩爾/升)，氯100～110(毫摩爾/升)，磷酸鹽30～40(毫摩爾/升)，硫酸鹽3.5～5.5(毫摩爾/升)，前列腺素E1 100～150(毫克/升)，棉子糖30～50(毫摩爾/升)，低分子右旋糖酐40 20～40(克/升)。
為進一步提高灌洗液的效果還可在灌洗液中添加谷光甘肽3～5(毫摩爾/升)；腺苷5～8(毫摩爾/升)；別嘌呤醇1～3(毫摩爾/升)；地塞米松5～10(毫克/升)。
其中鉀、鈉、鎂、氯、磷酸鹽及硫酸鹽主要用于模擬細胞外液的環(huán)境，調整Ph值，以便更好地保護供體器官；前列腺素E1用于擴張肺動脈；棉子糖用來取代葡萄糖作為附加的滲透支持；谷光甘肽、腺苷、別嘌呤醇為氧自由基，對肺缺血灌注損傷的發(fā)生起到重要的作用，谷光甘肽與別嘌呤醇均可明顯減少肺缺血灌注損傷；地塞米松用于抗炎癥，減少器官排斥；低分子右旋糖酐40用于改善循環(huán)。
我們在大量動物實驗上研究并試用WXC液，該技術在動物實驗上已顯示出較好的肺保存效果，實驗研究顯示肺安全保存時間超過24小時，較之EURO-COLLINS溶液在90分鐘的缺血豬模型中有更好的表面物質活性。目前臨床應用于肺移植，顯示優(yōu)于Eurolollins液，體現(xiàn)在WXC增強最初的氣體交換，減少術后機械通氣時間，術后死亡率減少，增強了術后肺功能(PO2/FiO2比)，預防缺血再灌注損傷的發(fā)生。
過去十年間，移植肺的匱乏是臨床肺移植的主要限制性因素。大多數(shù)供體肺由于水腫、人工吸引和由于腦死亡、供者的維持性通氣導致的肺炎而出現(xiàn)低氧和肺部浸潤。近來的研究證明，部分先前認為“不合適移植”的肺也可被成功移植。然而，大多數(shù)此類肺仍不能被成功獲取并移植。因而采用挽救這些移植物的手段或使用在移植后能減輕缺血——再灌注損傷的新方法來改善目前困擾臨床肺移植供體來源缺乏的問題，還有很長的一段路要走。肺保存技術已成為肺移植的限制因素，因此WXC灌注液對在我國開展肺移植有非常重要的意義。
國外三種灌洗液成分與WXC灌洗液比較

注1、ECEuro-Collins液；2、UW威斯康星大學液；3、LPD低鉀右旋糖酐液；4、WXC中國無錫液，即本發(fā)明的灌洗液。
與國外三種保存液比較，WXC能預防細胞水腫，保存液的成功之處與其它灌注液的區(qū)別在于①不含葡萄糖，而用一種大分子量的Raffinose棉子糖作為附加的滲透支持；②含有前列腺素E1擴張肺動脈；③氧自由基對肺缺血灌注損傷的發(fā)生起到重要的作用，谷胱甘肽(GSH)和別嘌呤醇均可明顯減少肺缺血灌注損傷。
器官保存液的質量可直接影響供體器官的質量與移植后的效果。WXC為一種成功的器官保存液，符合下述5條器官保存液的質量要求。
1、適當?shù)膒H值。有關保存液的pH值尚無統(tǒng)一標準，通常器官保存液的Ph值約在7.0～7.4，但要考慮低溫的影響，因氫離子濃度隨溫度而變化。防止細胞內酸中毒是器官保存良好的先決條件，有研究證明，肝、胰用Ph值為7.9～8.3的保存液可明顯改善保存效果，肺用Ph值為7.50～7.70的保存液可明顯改善保存效果。
2、適宜的滲透濃度，高滲性可防止細胞水腫。
3、無雜質、無熱原、無細菌污染，因為器官保存液是用于供體器官初期原位灌注和隨后的冷保存，在質量上應同輸液制劑一樣無菌、無熱原。然而在制備過程中，要經過許多步驟才能完成，這就要求生產過程中嚴格控制細菌的污染，所有容器及封裝材料必須清理處理。
4、性能穩(wěn)定，在已消毒條件下，有效期為1～2年，如出現(xiàn)渾濁、結晶析出應棄之不用。另外，有部分具有藥理活性的成分、生物制劑應在灌注前臨時加入，以便保證保存液質量。
5、實用性，配制方法簡便，藥源供應足，價格低廉，便于推廣應用。
灌洗液的配制方法如下按配方稱取藥品，用適量蒸餾水攪拌溶解，再加水至足量，取少量液體測其pH值、滲透濃度及電解質濃度，再用垂熔玻璃濾器過濾(以濾孔大小分號，號碼愈大，孔徑越小，5號以上可除菌)，濾液經灌裝，放薄膜，蓋橡皮塞，壓鋁蓋，最后高壓消毒滅菌，成品抽樣作細菌培養(yǎng)，對整批保存液逐瓶進行澄明度檢查，凡發(fā)現(xiàn)異物，均剔出作廢，合格品才能作保存液。
具體實施例方式
實施例一在灌洗液中含有鉀3.5(毫摩爾/升)，鈉140(毫摩爾/升)，鎂1.2(毫摩爾/升)，氯100(毫摩爾/升)，磷酸鹽30(毫摩爾/升)，硫酸鹽3.5(毫摩爾/升)，前列腺素E1 110(毫克/升)，棉子糖30(毫摩爾/升)，低分子右旋糖酐40 30(克/升)，谷光甘肽4(毫摩爾/升)，腺苷6(毫摩爾/升)，別嘌呤醇2(毫摩爾/升)，地塞米松8(毫克/升)。
實施例二在灌洗液中含有鉀5.0(毫摩爾/升)，鈉130(毫摩爾/升)，鎂1.2(毫摩爾/升)，氯110(毫摩爾/升)，磷酸鹽40(毫摩爾/升)，硫酸鹽4.5(毫摩爾/升)，前列腺素E1 150(毫克/升)，棉子糖50(毫摩爾/升)，低分子右旋糖酐40 20(克/升)，谷光甘肽5(毫摩爾/升)，腺苷8(毫摩爾/升)，別嘌呤醇3(毫摩爾/升)，地塞米松10(毫克/升)。
實施例三在灌洗液中含有鉀6.0(毫摩爾/升)，鈉150(毫摩爾/升)，鎂2.5(毫摩爾/升)，氯108(毫摩爾/升)，磷酸鹽38(毫摩爾/升)，硫酸鹽5.5(毫摩爾/升)，前列腺素E1 130(毫克/升)，棉子糖35(毫摩爾/升)，低分子右旋糖酐40 25(克/升)，谷光甘肽3.5(毫摩爾/升)，腺苷7(毫摩爾/升)，別嘌呤醇1.5(毫摩爾/升)，地塞米松9(毫克/升)。
實施例四在灌洗液中含有鉀4.0(毫摩爾/升)，鈉168(毫摩爾/升)，鎂1.0(毫摩爾/升)，氯103(毫摩爾/升)，磷酸鹽33(毫摩爾/升)，硫酸鹽4.0(毫摩爾/升)，前列腺素E1 140(毫克/升)，棉子糖45(毫摩爾/升)，低分子右旋糖酐40 35(克/升)，谷光甘肽4.5(毫摩爾/升)，腺苷5.5(毫摩爾/升)，別嘌呤醇2.5(毫摩爾/升)，地塞米松6(毫克/升)。
實施例五在灌洗液中含有鉀5.5(毫摩爾/升)，鈉135(毫摩爾/升)，鎂1.6(毫摩爾/升)，氯106(毫摩爾/升)，磷酸鹽36(毫摩爾/升)，硫酸鹽3.7(毫摩爾/升)，前列腺素E1 108(毫克/升)，棉子糖42(毫摩爾/升)，低分子右旋糖酐40 38(克/升)，谷光甘肽3.2(毫摩爾/升)，腺苷6.5(毫摩爾/升)，別嘌呤醇1.2(毫摩爾/升)，地塞米松7(毫克/升)。
實施例六在灌洗液中含有鉀3.0(毫摩爾/升)，鈉140(毫摩爾/升)，鎂1.2(毫摩爾/升)，氯100(毫摩爾/升)，磷酸鹽30(毫摩爾/升)，硫酸鹽3.5(毫摩爾/升)，前列腺素E1 110(毫克/升)，棉子糖30(毫摩爾/升)，低分子右旋糖酐40 30(克/升)。
權利要求
1.一種用于器官移植的灌洗保存液，其特征是在灌洗液中含有鉀3.5～6(毫摩爾/升)，鈉130～168(毫摩爾/升)，鎂0.8～2.5(毫摩爾/升)，氯100～110(毫摩爾/升)，磷酸鹽30～40(毫摩爾/升)，硫酸鹽3.5～5.5(毫摩爾/升)，前列腺素E1 100～150(毫克/升)，棉子糖30～50(毫摩爾/升)，低分子右旋糖酐40 20～40(克/升)。
2.根據(jù)權利要求1所述的灌洗液，其特征是在灌洗液中含有谷光甘肽3～5(毫摩爾/升)。
3.根據(jù)權利要求1所述的灌洗液，其特征是在灌洗液中含有腺苷5～8(毫摩爾/升)。
4.根據(jù)權利要求1所述的灌洗液，其特征是在灌洗液中含有別嘌呤醇1～3(毫摩爾/升)。
5.根據(jù)權利要求1所述的灌洗液，其特征是在灌洗液中含有地塞米松5～10(毫克/升)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種器官移植技術，尤其是指一種對器官進行灌洗，以便于保存，并提高存活率的灌洗液。它模擬細胞外液的環(huán)境，其主要技術方案是在灌洗液中含有鉀3.5～6(毫摩爾/升)，鈉130～168(毫摩爾/升)，鎂0.8～2.5(毫摩爾/升)，氯100～110(毫摩爾/升)，磷酸鹽30～40(毫摩爾/升)，硫酸鹽3.5～5.5(毫摩爾/升)，前列腺素El 100～150(毫克/升)，棉子糖 30～50(毫摩爾/升)，低分子右旋糖酐 4020～40(克/升)。這種灌洗液能延長移植器官的保存時間，提高移植器官的存活率，最大可能的保存移植器官的功能。
文檔編號A01N1/02GK1415200SQ02138519
公開日2003年5月7日 申請日期2002年10月29日 優(yōu)先權日2002年10月29日
發(fā)明者陳靜瑜 申請人:陳靜瑜