專利名稱：一種用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及花卉培育方法，具體為一種用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法。
背景技術(shù)：
隨著人們生活水平的提高，人們對鮮切花的數(shù)量和質(zhì)量的要求都在不斷的提高，而百合作為全世界最主要的鮮切花之一更是如此，百合花姿雅致，葉片青翠娟秀，莖干亭亭玉立，是名貴的切花新秀，其色澤鮮艷，是盆栽、切花和點綴庭園的名貴花卉，在園林中，適合布置成專類花園，如巧妙地利用不同種類自然花期之差異及種與品種。目前，我國在百合繁殖栽培方面的脫毒技術(shù)和規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)都比較落后，不能在全國的廣大地區(qū)普遍栽培，對進入家庭和高級場所都存在繁殖和栽培技術(shù)不過關(guān)的問題，每年需從國外進口百合種球8000萬粒以上，進行鮮切花生產(chǎn)不但浪費了大量的外匯，而且常常受到外商的制約。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法，可以大量生產(chǎn)出無病毒、優(yōu)質(zhì)種苗種球，并通過低溫處理打破休眠、調(diào)整花期，實現(xiàn)正常開花。
本發(fā)明的技術(shù)方案是一種用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將從荷蘭引進的1代生產(chǎn)用商品種球放入恒溫22～25℃下，待芽長到1cm～2cm時，移入35～45℃的溫度下處理20～40天，此時芽長約5～6cm左右；2)將莖尖取下進行常規(guī)消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.1～0.5mm左右的莖尖分生組織；3)在MS培養(yǎng)基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤(BA)0.1～1.0mg/l、萘乙酸(NAA)0.1～1.0mg/l、蔗糖20～50g/l，再加入1～1000μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑(ribavirin)均勻混合得百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基，將莖尖分生組織接種于百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基進行誘導(dǎo)，35～45天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將3～5個芽分成一小塊接種于和誘導(dǎo)一樣的培養(yǎng)基上進行擴繁，擴繁周期為30～35天；
5)當擴繁達到一定數(shù)量后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養(yǎng)基母液+吲哚丁酸(IBA)0.2～1.0mg/l+蔗糖15～30g/l的生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6～6.5g/l，將1/2MS培養(yǎng)基母液和IBA均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養(yǎng)基；將叢生狀小苗繼續(xù)接入擴繁的培養(yǎng)基中進行擴繁，生根時間約10～20天左右，大部分苗已長出2～3條0.5～1.5cm長左右的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行3～5天的瓶煉(將培養(yǎng)容器直接拿到室外，在溫度25℃左右放置)后取出，洗凈附著在根部的培養(yǎng)基(即步驟5)中生根培養(yǎng)基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶1.5～3.5的移栽基質(zhì)中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平(在室外自然條件下降到正常室外濕度)；7)培養(yǎng)成苗后，將成活的百合苗移栽入隔離區(qū)，即移栽到網(wǎng)室內(nèi)進行種球培養(yǎng)(為防止病毒感染，用32目的網(wǎng)保護，空氣和陽光可以進入，網(wǎng)室溫度范圍為20～25℃)，按生產(chǎn)中正常肥水管理，經(jīng)過兩年后，周徑達到12～20cm，便可成為商品種球。
8)將商品種球置于5～10℃的低溫下處理6～8周時間后，即可移栽到鮮切花生產(chǎn)基地，進行鮮切花生產(chǎn)。
本發(fā)明IBA、NAA、BA均為植物激素。
本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明提供了一種新的脫毒技術(shù)和一套成熟、完整的切花百合種球規(guī)?；a(chǎn)的方法，通過熱處理、莖尖分生組織培養(yǎng)、化學(xué)藥劑處理三種方法相結(jié)合，可以使影響切花百合生產(chǎn)的主要四種病毒(百合無癥狀病毒、百合黃瓜花葉病毒、煙草環(huán)斑病毒、郁金香碎色病毒)脫毒達到100％；通過低溫處理種球，打破休眠，實現(xiàn)正常開花；通過組織培養(yǎng)的方法，進行無病毒種苗的大量生產(chǎn)，從脫毒種苗生產(chǎn)到大田種球的培育，從種球采收到采后處理，形成了一套完整、成熟的技術(shù)和工藝，實現(xiàn)了切花百合種球大規(guī)模工廠化生產(chǎn)。
具體實施例方式
實施例1用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將從荷蘭引進的1代生產(chǎn)用商品種球放入恒溫25℃下，待芽長到2cm時，移入45℃的溫度下處理40天，此時芽長約6cm左右；2)將莖尖取下進行常規(guī)消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.5mm左右的莖尖分生組織；3)在MS培養(yǎng)基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤(BA)1.0mg/l、萘乙酸(NAA)1.0mg/l、蔗糖50g/l，再加入200μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑(ribavirin)均勻混合得百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基，將莖尖分生組織接種于百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基進行誘導(dǎo)，45天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將5個芽分成一小塊接種于和誘導(dǎo)一樣的培養(yǎng)基上進行擴繁，擴繁周期為35天；5)當擴繁達到一定數(shù)量后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養(yǎng)基母液+吲哚丁酸(IBA)1.0mg/l+蔗糖30g/l的生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6.5g/l，將1/2MS培養(yǎng)基母液和IBA均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養(yǎng)基；將叢生狀小苗繼續(xù)接入擴繁的培養(yǎng)基中進行擴繁，生根時間約10天左右，大部分苗已長出3條1.5cm長左右的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行5天的瓶煉(將培養(yǎng)容器直接拿到室外，在溫度25℃左右放置)后取出，洗凈附著在根部的培養(yǎng)基(即步驟5)所述生根培養(yǎng)基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶2的移栽基質(zhì)中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平(在室外自然條件下降到正常室外濕度)；7)培養(yǎng)成苗后，將成活的百合苗移栽入隔離區(qū)，即移栽到網(wǎng)室內(nèi)進行種球培養(yǎng)(為防止病毒感染，用32目的網(wǎng)保護，空氣和陽光可以進入，網(wǎng)室溫度為20℃，按生產(chǎn)中正常肥水管理，經(jīng)過兩年后，周徑達到20cm，便可成為商品種球。
8)將商品種球置于-8℃的低溫下處理8周時間后，即可移栽到鮮切花生產(chǎn)基地，進行鮮切花生產(chǎn)。
實施例2與實施例1不同之處是用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將商品種球放入恒溫22℃下，待芽長到1cm時，移入40℃的溫度下處理20天，此時芽長約5cm；2)將莖尖取下進行常規(guī)消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.1mm的莖尖分生組織；3)在MS培養(yǎng)基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤0.1mg/l、萘乙酸0.1mg/l、蔗糖20g/l，再加入20μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均勻混合得百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基，將莖尖分生組織接種于百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基進行誘導(dǎo)，35天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將3個芽分成一小塊接種于和步驟3)一樣的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行擴繁，擴繁周期為30天；5)擴繁后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養(yǎng)基母液+吲哚丁酸0.2mg/l+蔗糖15g/l的生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6g/l，將1/2MS培養(yǎng)基母液和吲哚丁酸均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養(yǎng)基；將叢生狀小苗繼續(xù)接入擴繁的培養(yǎng)基中進行擴繁，生根時間約20天，大部分苗已長出2條0.5cm長的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行3天的瓶煉后取出，洗凈附著在根部的培養(yǎng)基(即步驟5)所述生根培養(yǎng)基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶3的移栽基質(zhì)中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平；7)培養(yǎng)成苗后，將成活的百合苗移栽到網(wǎng)室內(nèi)進行種球培養(yǎng)，網(wǎng)室溫度為24℃，按生產(chǎn)中正常肥水管理，經(jīng)過兩年后，周徑達到12cm，便可成為商品種球；8)將商品種球置于2℃的低溫下處理6周時間后，即可移栽到鮮切花生產(chǎn)基地，進行鮮切花生產(chǎn)。
實施例3與實施例1不同之處是用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將商品種球放入恒溫23℃下，待芽長到1.5cm時，移入35℃的溫度下處理30天，此時芽長約5.5cm；2)將莖尖取下進行常規(guī)消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.2mm的莖尖分生組織；3)在MS培養(yǎng)基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤0.5mg/l、萘乙酸0.5mg/l、蔗糖30g/l，再加入800μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均勻混合得百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基，將莖尖分生組織接種于百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基進行誘導(dǎo)，40天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將4個芽分成一小塊接種于和步驟3)一樣的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行擴繁，擴繁周期為32天；5)擴繁后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養(yǎng)基母液+吲哚丁酸0.5mg/l+蔗糖20g/l的生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6.2g/l，將1/2MS培養(yǎng)基母液和吲哚丁酸均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養(yǎng)基；將叢生狀小苗繼續(xù)接入擴繁的培養(yǎng)基中進行擴繁，生根時間約15天，大部分苗已長出2條1.0cm長的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行4天的瓶煉后取出，洗凈附著在根部的培養(yǎng)基(即步驟5)所述生根培養(yǎng)基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶2.5的移栽基質(zhì)中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平；7)培養(yǎng)成苗后，將成活的百合苗移栽到網(wǎng)室內(nèi)進行種球培養(yǎng)，網(wǎng)室溫度為21℃，按生產(chǎn)中正常肥水管理，經(jīng)過兩年后，周徑達到15cm，便可成為商品種球；8)將商品種球置于-1℃的低溫下處理7周時間后，即可移栽到鮮切花生產(chǎn)基地，進行鮮切花生產(chǎn)。
實施例4與實施例1不同之處是用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法，其特征在于具體步驟如下1)將商品種球放入恒溫24℃下，待芽長到2cm時，移入40℃的溫度下處理25天，此時芽長約6cm；2)將莖尖取下進行常規(guī)消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.3mm的莖尖分生組織；3)在MS培養(yǎng)基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤0.8mg/l、萘乙酸0.6mg/l、蔗糖40g/l，再加入500μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均勻混合得百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基，將莖尖分生組織接種于百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基進行誘導(dǎo)，40天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將3個芽分成一小塊接種于和步驟3)一樣的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行擴繁，擴繁周期為30天；5)擴繁后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養(yǎng)基母液+吲哚丁酸0.6mg/l+蔗糖25g/l的生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6g/l，將1/2MS培養(yǎng)基母液和吲哚丁酸均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養(yǎng)基；將叢生狀小苗繼續(xù)接入擴繁的培養(yǎng)基中進行擴繁，生根時間約18天，大部分苗已長出3條1.0cm長的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行5天的瓶煉后取出，洗凈附著在根部的培養(yǎng)基(即步驟5)所述生根培養(yǎng)基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶1.5的移栽基質(zhì)中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平；
7)培養(yǎng)成苗后，將成活的百合苗移栽到網(wǎng)室內(nèi)進行種球培養(yǎng)，網(wǎng)室溫度為22℃，按生產(chǎn)中正常肥水管理，經(jīng)過兩年后，周徑達到18cm，便可成為商品種球；8)將商品種球置于-5℃的低溫下處理6周時間后，即可移栽到鮮切花生產(chǎn)基地，進行鮮切花生產(chǎn)。
實施例5與實施例1不同之處是用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將商品種球放入恒溫25℃下，待芽長到2cm時，移入36℃的溫度下處理20天，此時芽長約6cm；2)將莖尖取下進行常規(guī)消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.5mm的莖尖分生組織；3)在MS培養(yǎng)基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤0.3mg/l、萘乙酸0.5mg/l、蔗糖30g/l，再加入5μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均勻混合得百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基，將莖尖分生組織接種于百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基進行誘導(dǎo)，45天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將5個芽分成一小塊接種于和步驟3)一樣的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行擴繁，擴繁周期為35天；5)擴繁后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養(yǎng)基母液+吲哚丁酸0.6mg/l+蔗糖15g/l的生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6g/l，將1/2MS培養(yǎng)基母液和吲哚丁酸均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養(yǎng)基；將叢生狀小苗繼續(xù)接入擴繁的培養(yǎng)基中進行擴繁，生根時間約16天，大部分苗已長出3條0.5cm長的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行5天的瓶煉后取出，洗凈附著在根部的培養(yǎng)基(即步驟5)所述生根培養(yǎng)基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶3.5的移栽基質(zhì)中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平；7)培養(yǎng)成苗后，將成活的百合苗移栽到網(wǎng)室內(nèi)進行種球培養(yǎng)，網(wǎng)室溫度為25℃，按生產(chǎn)中正常肥水管理，經(jīng)過兩年后，周徑達到20cm，便可成為商品種球；8)將商品種球置于1℃的低溫下處理8周時間后，即可移栽到鮮切花生產(chǎn)基地，進行鮮切花生產(chǎn)。
權(quán)利要求
1.一種用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法，其特征在于具體步驟如下1)將商品種球放入恒溫22～25℃下，待芽長到1cm～2cm時，移入35～45℃的溫度下處理20～40天，此時芽長約5～6cm；2)將莖尖取下進行常規(guī)消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.1～0.5mm的莖尖分生組織；3)在MS培養(yǎng)基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤0.1～1.0mg/l、萘乙酸0.1～1.0mg/l、蔗糖20～50g/l，再加入1～1000μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均勻混合得百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基，將莖尖分生組織接種于百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基進行誘導(dǎo)，35～45天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將3～5個芽分成一小塊接種于和步驟3)一樣的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行擴繁，擴繁周期為30～35天；5)擴繁后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養(yǎng)基母液+吲哚丁酸0.2～1.0mg/l+蔗糖15～30g/l的生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6～6.5g/l，將1/2MS培養(yǎng)基液和吲哚丁酸均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養(yǎng)基；將叢生狀小苗繼續(xù)接入擴繁的培養(yǎng)基中進行擴繁，生根時間約10～20天，大部分苗已長出2～3條0.5～1.5cm長的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行3～5天的瓶煉后取出，洗凈附著在步驟5)所述生根培養(yǎng)基，栽入珍珠巖和草炭土為1∶1.5～3.5的移栽基質(zhì)中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平；7)培養(yǎng)成苗后，將成活的百合苗移栽到網(wǎng)室內(nèi)進行種球培養(yǎng)，網(wǎng)室溫度范圍為20～25℃，按生產(chǎn)中正常肥水管理，周徑達到12～20cm后，便可成為商品種球；8)將商品種球置于5～10℃的低溫下處理6～8周時間后，即可進行鮮切花生產(chǎn)。
2.按照權(quán)利要求1所述的用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法，其特征在于步驟7)所述網(wǎng)室的網(wǎng)孔目數(shù)為32目。
全文摘要
本發(fā)明公開一種用于生產(chǎn)鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將商品種球移入35～45℃的溫度下處理20～40天；2)取莖尖分生組織；3)將莖尖分生組織接種于百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基進行誘導(dǎo)35～45天后，分化大量的叢生芽；4)將叢生芽接種于百合誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行擴繁；5)進行生根培養(yǎng)；6)將生根苗進行瓶煉后取出，洗凈附著于根部的培養(yǎng)基，栽入移栽基質(zhì)中；7)將成活的百合苗移栽到網(wǎng)室內(nèi)進行種球培養(yǎng)成為商品種球；8)將商品種球置于低溫下處理，即可進行鮮切花生產(chǎn)。本發(fā)明通過組織培養(yǎng)的方法，進行無病毒種苗的大量生產(chǎn)，從脫毒種苗生產(chǎn)到大田種球的培育，從種球采收到采后處理，實現(xiàn)了切花百合種球大規(guī)模工廠化生產(chǎn)。
文檔編號A01H4/00GK1602676SQ0313503
公開日2005年4月6日 申請日期2003年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月29日
發(fā)明者潘利軍, 張明瀚, 王際軒, 赫英勇, 候春萍, 魏永祥 申請人:潘利軍