專利名稱：稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種應(yīng)用稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法。
背景技術(shù)：
藏紅花為鳶尾科(Iridaceae)番紅花屬多年生草本植物，又名番紅花、西紅花。原產(chǎn)于西班牙、希臘南歐各國以及伊朗等地，經(jīng)印度傳入我國西藏，目前在我國的浙江、江蘇、山東、北京等地都有栽培(成都中醫(yī)學(xué)院，中藥學(xué)鑒定，1977，271-273；江蘇中醫(yī)學(xué)院編，中藥大詞典(下冊)19772671)。一方面，藏紅花(saffron，Crocussativus L.)在傳統(tǒng)和現(xiàn)代醫(yī)藥上具有很高的藥用價值，研究表明藏紅花可以用于鎮(zhèn)靜、祛痰、刺激、解痙，還可用于胃痛、春藥、調(diào)經(jīng)，以及用于治療痢疾、麻疹、發(fā)熱黃疸、肝脾腫大、泌尿道感染、糖尿病，作冒險作流產(chǎn)藥等，在歐洲和亞洲還廣泛使用藏紅花作為婦科良藥。另一方面，藏紅花作為一種珍貴調(diào)味劑、香料和染料在歐洲的應(yīng)用已經(jīng)有幾百年的悠久歷史(Warburg E F，Endeavour，1957，16，209)，另外藏紅花可用于開發(fā)功能性食品、天然色素、保健性化裝品等；還可以把藏紅花作為觀賞植物栽培。更為有意義的是近幾年來，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)藏紅花柱頭中的一些化學(xué)物質(zhì)，如藏紅花素可以從分子水平抑制原癌基因的啟動以及癌細(xì)胞DNA和RNA合成，因而藏紅花已成為新型抗癌藥物的研究熱點(Escribano，Cancer Letter，1996，100，1913-1918；Wang CJ等，Molecular Carcinogenesis，1996，17，235-240)。
我國盡管擁有豐富的藥用植物資源，但是隨著人類和社會對植物藥的需求與日俱增，藥用植物資源面臨著巨大壓力。一些中藥材資源逐年萎縮，成為稀有瀕危植物，從而影響到中醫(yī)臨床用藥及制藥企業(yè)的生產(chǎn)。藥用藏紅花的資源就極其有限，我國歷來都是進口供藥用，生產(chǎn)1公斤的藏紅花需要150000～200000朵花，還要經(jīng)過400個小時以上的人工勞動，致使藏紅花的價格極其昂貴，每公斤達到2000美圓左右(PlessnerD，E.BI等，1989，Israel J Botany，38，1-7)，一直被譽為“植物黃金”。由于種源少、適宜栽培的地區(qū)有限、條件苛刻等因素，進行引種栽培僅可以提供少量商品；另外，傳統(tǒng)的藏紅花栽培生產(chǎn)容易發(fā)生萎蔫，感染病原微生物，繼而腐爛，造成產(chǎn)量和質(zhì)量的下降；同時我國藏紅花有性不孕，栽培條件下不能結(jié)實，靠球莖繁殖，在栽培過程中球莖越種越小，小球莖開花少而且花小，甚至不開花，從而失去藥用價值，因此若單用傳統(tǒng)的球莖繁殖方法，繁殖速度慢，因此不能滿足市場的需求，出現(xiàn)了供不應(yīng)求的局面。
通過植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)來生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物是解決這一問題的一個較好的方法，目前已有報道，通過植物細(xì)胞工程的途徑使得紫草、人參根、青蒿、毛地黃等瀕危中草藥植物達到中試和工業(yè)化規(guī)模(Curtin M E，Biotechnology，1983，1，649-657)。
同樣，國內(nèi)外的研究者也試圖通過植物細(xì)胞工程的各種途徑來解決藏紅花資源短缺的問題，如以藏紅花的半個子房為外植體，將其培養(yǎng)在添加植物激素6-BA和NAA的MS植物培養(yǎng)基上，可以獲得花柱-柱頭狀物的再生，而再生的柱頭可以產(chǎn)生藏紅花素類物質(zhì)；再如以藏紅花的花為外植體，將其培養(yǎng)在添加植物激素6-Ki和2，4-D的MS植物培養(yǎng)基上，可以獲得產(chǎn)生藏紅花素的紅色愈傷組織，但是在應(yīng)用過程中常出現(xiàn)藏紅花的愈傷組織或花柱-柱頭狀物生長緩慢、易褐化或藏紅花素含量低等問題(Dufrene C.等，Enzyme and Microbial Technology，1999，24，453-462；Loskutov，AV等，In Vitro Cell Dev.Biol.(Plant)，1999，35200-205)。
稀土元素一般是指元素周期表中的鑭系元素和與鑭系元素化學(xué)性質(zhì)相似的鈧、釔等元素的總稱。我國是世界上稀土資源最豐富的國家，約占世界總儲量的80％，為了充分利用這一資源，我國的科技工作者從1972年起開始稀土農(nóng)用的研究，并確認(rèn)稀土元素是植物生長和發(fā)育的有益元素。目前稀土元素已經(jīng)應(yīng)用于幾十種農(nóng)作物，并在一些中草藥的種植中得到應(yīng)用。應(yīng)用的實踐表明稀土元素能夠?qū)θ藚?、枸杞、杜仲等中草藥有增產(chǎn)、抗病等作用，并能夠提高中草藥有效成分的含量和降低中草藥的殘留農(nóng)藥(陳浩等，廣東微量元素科學(xué)，2001，8(3)，1)。稀土元素對于體外培養(yǎng)動物細(xì)胞的研究較為廣泛，稀土元素對于植物細(xì)胞的培養(yǎng)的研究報道也逐年增加。這些研究報道表明稀土元素對植物細(xì)胞的生長和次生代謝產(chǎn)物的積累有一定的促進作用，如低濃度的Eu3+促進大黃愈傷組織的生長(魯科寬等，北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，1997，29，289)，La對紅豆杉細(xì)胞的生長及紫杉醇的合成有一定的促進作用(元英進等，中國稀土學(xué)報，1998，16，56)，稀土元素可以部分或全部代替外源激素對雪蓮細(xì)胞生長和黃酮類合成合成的促進作用(Xiaofan Yuan et al，Biotechnology Letters，2002，24，1889)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服已有技術(shù)的藏紅花細(xì)胞生長緩慢、容易褐化、藏紅花素含量低的缺陷，從而提供一種應(yīng)用稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法。該方法通過利用稀土元素的植物激素、消除自由基等作用，為應(yīng)用植物細(xì)胞工程方法大規(guī)模生產(chǎn)藏紅花素提供基礎(chǔ)，從而從根本上解決藏紅花素資源短缺的問題。
本發(fā)明的目的是通過如下的技術(shù)方案實現(xiàn)的本發(fā)明提供一種應(yīng)用稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法，包括如下步驟1)將藏紅花的愈傷組織接種到含0.005～0.3mM的稀土元素的常規(guī)植物細(xì)胞培養(yǎng)基上，并添加0.1～2.0mg/g的細(xì)胞分裂素和0.5～6mg/g的細(xì)胞生長素，于15～30℃下培養(yǎng)15～30天；2)將步驟1)培養(yǎng)的愈傷組織接種到含0.005～0.3mM稀土元素的常規(guī)植物細(xì)胞培養(yǎng)基，并添加0.1～2.0mg/g的細(xì)胞分裂素和0.5～6mg/g的細(xì)胞生長素，于15～30℃下培養(yǎng)15～50天。
所述步驟1)的藏紅花的愈傷組織為藏紅花的球莖、芽、葉子或花以常規(guī)方法處理形成的藏紅花的愈傷組織。
所述步驟1)的稀土元素為Nd、La、Ce，或La2O3、CeO2、Pr6O11、Sm2O3組成的混合稀土元素，各組分的摩爾比為100～355∶10～275∶1～30∶1～40。
所述步驟2)的稀土元素為Ce、La，或La2O3、CeO2、Pr6O11、Sm2O3組成的混合稀土元素，各組分的摩爾比為100～355∶10～275∶1～30∶1～40。
所述步驟1)和步驟2)的細(xì)胞分裂素為6-芐氨基嘌呤(以下簡稱6-BA)或激動素(以下簡稱Ki)。
所述步驟1)和步驟2)的細(xì)胞生長素為2，4-二氯苯氧乙酸(以下簡稱2，4-D)或萘乙酸(以下簡稱NAA)。
所述步驟1)和步驟2)的常規(guī)植物細(xì)胞培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基、B5培養(yǎng)基或N6培養(yǎng)基。其中，MS培養(yǎng)基是含鹽量較大的培養(yǎng)基，含有高濃度的硝酸鹽、鉀離子和銨離子，微量元素的種類較全，其組分可參見Murashige T，Skoog，F(xiàn)A，1962，Physiol.Plant 15473-479所述。B5培養(yǎng)基是含硝酸鉀較高的培養(yǎng)基，含鹽量也較高，其組分可參見Gamborg OL，Miller RA，Ojima K 1968，Exp.Cell Res.50151-158所述。N6培養(yǎng)基的組分可參見Nitsch JP Nitsch C，1969，，Science 16385-87所述。
使用本發(fā)明提供的方法的優(yōu)益之處在于促進了藏紅花細(xì)胞生長，在相同的培養(yǎng)時間，可以比已有技術(shù)獲得更多的藏紅花細(xì)胞的生物量，藏紅花素含量也顯著提高，而且得到的藏紅花素不容易褐化。
具體實施方案實施例1、用自來水洗凈藏紅花球莖表面的泥土，去掉皮膜，若有病斑用解剖刀去掉病斑，再用蒸餾水沖洗2次，經(jīng)濾紙吸干，用70wt％酒精浸泡30秒鐘，使用含有2wt％活性氯的次氯酸鈉溶液消毒15分鐘，再用無菌水洗滌5次，最后用無菌濾紙吸干球莖表面的水分，用解剖刀將洗滌好的球莖切成約1平方厘米的小塊，分別接種于含0.25mg/g 2，4-D，和2.0mg/g 6-BA植物激素的MS植物培養(yǎng)基上，放置于21±0.3℃人工氣候箱或27±1℃的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)14～20天，可以獲得藏紅花的球莖愈傷組織。
將形成的藏紅花球莖愈傷組織接種到含0.05mM La的MS植物細(xì)胞培養(yǎng)基上，并添加2.0mg/g 2，4-D(即2，4-二氯苯氧乙酸)和0.5mg/g 6-BA(即6-芐氨基嘌呤)，于22℃培養(yǎng)20天，獲得17g/L的愈傷組織。
將此愈傷組織轉(zhuǎn)接到含0.05mM Ce，0.5mg/g 2，4-D和0.5mg/g 6-BA的B5植物細(xì)胞培養(yǎng)基上，于22℃培養(yǎng)25天。使用HPLC(高壓液相色譜)方法測量藏紅花素的含量，此方法如王春芳在藥物分析雜志，1997，17(5)321中所述，測得使用本發(fā)明方法培養(yǎng)得到的藏紅花素的含量為0.32％，w/w。
而同樣條件下，只是不加稀土元素作為對照組，培養(yǎng)的愈傷組織生物量為12g/L，藏紅花素的含量為0.11％，w/w?？梢钥闯?，使用本發(fā)明方法培養(yǎng)的愈傷組織生物量比對照組提高40％，藏紅花素的含量比對照組提高190％。
實施例2、將實施例1中得到的藏紅花球莖形成的愈傷組織接種到含0.005mM La，0.5mg/gNAA(即萘乙酸)，和0.5mg/g 6-BA的MS培養(yǎng)基上，于30℃培養(yǎng)25天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高25～36％。
將培養(yǎng)25天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到含0.02mM Ce，0.5mg/g 2，4-D和2mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于15℃培養(yǎng)25天，藏紅花素的含量比對照組提高40～50％。
實施例3、
按實施例1的方法誘導(dǎo)藏紅花的花形成愈傷組織。
將藏紅花的花形成的愈傷組織接種到含0.015mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝255∶175∶3∶10)，0.5mg/gNAA，和0.5mg/g6-BA的MS培養(yǎng)基上于18℃培養(yǎng)25天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高30～36％。
將培養(yǎng)25天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到含0.03mM Ce，2mg/g NAA和0.5mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于18℃培養(yǎng)25天，藏紅花素的含量比對照組提高60～80％。
實施例4、按實施例1的方法誘導(dǎo)藏紅花的芽形成愈傷組織。
將藏紅花芽形成的愈傷組織接種到含0.02mM La，2.0mg/g NAA，和2.0mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于21℃培養(yǎng)25天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高25～35％。
將培養(yǎng)25天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到含0.035mM Ce，1mg/g 2，4-D和1mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于21℃培養(yǎng)25天，藏紅花素的含量比對照組提高150～180％。
實施例5、按實施例1的方法誘導(dǎo)藏紅花的葉子形成愈傷組織。
將藏紅花葉子形成的愈傷組織接種到含0.03mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝355∶175∶3∶1)，2.0mg/g NAA，和2.0mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于26℃培養(yǎng)30天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高10～20％。
將培養(yǎng)30天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到含0.02mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2Pr6O11∶Sm2O3＝355∶175∶3∶1)，2mg/g 2，4-D和2mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于26℃培養(yǎng)25天，藏紅花素的含量比對照組提高170～180％。
實施例6、按實施例5的方法誘導(dǎo)藏紅花的葉子形成愈傷組織。
將藏紅花葉子形成的愈傷組織接種到含0.02mM La，0.01mM Ce，2.0mg/g NAA和2.0mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于28℃培養(yǎng)25天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高40～55％。
將培養(yǎng)25天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到含0.03mM La，0.02mM Ce，6mg/g 2，4-D和0.1mg/g6-BA的B5培養(yǎng)基上，于28℃培養(yǎng)25天，藏紅花素的含量比對照組提高90～110％。
實施例7、按實施例1的方法誘導(dǎo)藏紅花的花形成愈傷組織。
將藏紅花的花形成的愈傷組織接種到含0.3mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝255∶275∶3∶1)，0.5mg/gNAA，和0.5mg/g 6-BA的MS培養(yǎng)基上，于22℃培養(yǎng)25天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高20～30％。
將培養(yǎng)25天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到含0.3mM Ce，2mg/g 2，4-D和0.5mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于22℃培養(yǎng)25天，藏紅花素的含量比對照組提高40-50％。
實施例8、按實施例1的方法誘導(dǎo)藏紅花的花形成愈傷組織。
將藏紅花的花形成的愈傷組織接種到含0.005mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝255∶275∶3∶1)，0.5mg/gNAA，和0.5mg/g 6-BA的MS培養(yǎng)基上，于30℃培養(yǎng)25天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高10～20％。
將培養(yǎng)25天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到含0.005mM Ce，2mg/g 2，4-D和0.5mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于30℃培養(yǎng)25天，藏紅花素的含量比對照組提高15-25％。
實施例9、按實施例1的方法誘導(dǎo)藏紅花的芽形成愈傷組織。
將藏紅花的花形成的愈傷組織接種到含0.15mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝100∶175∶3∶1)，0.5mg/g NAA，和0.5mg/g 6-BA的MS培養(yǎng)基上，于15℃培養(yǎng)25天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高10～20％。
將培養(yǎng)25天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到含0.15mM Ce，2mg/g 2，4-D和0.5mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于15℃培養(yǎng)25天，藏紅花素的含量比對照組提高25-50％。
實施例10、將實施例1中得到的藏紅花球莖形成的愈傷組織接種到含0.005mM Nd，0.5mg/gNAA，和0.1mg/g 6-BA的N6培養(yǎng)基上，于23℃培養(yǎng)15天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高25～36％。
將培養(yǎng)25天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到0.02mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝255∶275∶3∶1)，0.5mg/g 2，4-D和2mg/g 6-BA的N6培養(yǎng)基上，于15℃培養(yǎng)15天，藏紅花素的含量比對照組提高40～50％。
實施例11、將實施例1中得到的藏紅花球莖形成的愈傷組織接種到含0.005mM Ce，6mg/gNAA，和2mg/gKI的N6培養(yǎng)基上，于30℃培養(yǎng)15天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高25～36％。
將培養(yǎng)25天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到0.02mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝100∶175∶30∶1)，0.5mg/g 2，4-D和0.1mg/g Ki的B5培養(yǎng)基上，于25℃培養(yǎng)50天，藏紅花素的含量比對照組提高40～50％。
實施例12、按實施例1的方法誘導(dǎo)藏紅花的花形成愈傷組織。
將藏紅花的花形成的愈傷組織接種到含0.3mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝255∶10∶1∶40)，0.5mg/gNAA，和0.5mg/g 6-BA的MS培養(yǎng)基上，于25℃培養(yǎng)25天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高20～30％。
將培養(yǎng)25天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到含0.3mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝355∶10∶1∶10)，2mg/g 2，4-D和0.5mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于25℃培養(yǎng)25天，藏紅花素的含量比對照組提高40-50％。
實施例13、按實施例1的方法誘導(dǎo)藏紅花的芽形成愈傷組織。
將藏紅花的花形成的愈傷組織接種到含0.15mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2Pr6O11∶Sm2O3＝255∶175∶30∶40)，0.5mg/gNAA，和0.5mg/g 6-BA的MS培養(yǎng)基上，于30℃培養(yǎng)25天，獲得的愈傷組織的生物量比不加稀土元素的對照組提高10～20％。
將培養(yǎng)25天后的愈傷組織轉(zhuǎn)接到0.15mM混合稀土元素(其組成與摩爾比為是La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝255∶175∶30∶40)，2mg/g 2，4-D和0.5mg/g 6-BA的B5培養(yǎng)基上，于25℃培養(yǎng)25天，藏紅花素的含量比對照組提高25-50％。
權(quán)利要求
1.一種應(yīng)用稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法，包括如下步驟1)將藏紅花的愈傷組織接種到含0.005～0.3mM的稀土元素的常規(guī)植物細(xì)胞培養(yǎng)基上，并添加0.1～2.0mg/g的細(xì)胞分裂素和0.5～6mg/g的細(xì)胞生長素，于15～30℃下培養(yǎng)15～30天；2)將步驟1)培養(yǎng)的愈傷組織接種到含0.005～0.3mM稀土元素的常規(guī)植物細(xì)胞培養(yǎng)基，并添加0.1～2.0mg/g的細(xì)胞分裂素和0.5～6mg/g的細(xì)胞生長素，于15～30℃下培養(yǎng)15～50天。
2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法，其特征在于，所述步驟1)的藏紅花的愈傷組織為藏紅花的球莖、芽、葉子或花以常規(guī)方法處理形成的藏紅花的愈傷組織。
3.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法，其特征在于，所述步驟1)的稀土元素為Nd、La或Ce，或La2O3、CeO2、Pr6O11和Sm2O3組成的混合稀土元素，各組分的摩爾比為La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝100～355∶10～275∶1～30∶1～40。
4.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法，其特征在于，所述步驟2)的稀土元素為Ce或La，或La2O3、CeO2、Pr6O11和Sm2O3組成的混合稀土元素，各組分的摩爾比為La2O3∶CeO2∶Pr6O11∶Sm2O3＝100～355∶10～275∶1～30∶1～40。
5.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法，其特征在于，所述步驟1)和步驟2)的細(xì)胞分裂素為6-芐氨基嘌呤或激動素。
6.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法，其特征在于，所述步驟1)和步驟2)的細(xì)胞生長素為2，4-二氯苯氧乙酸或萘乙酸。
7.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法，其特征在于，所述步驟1)和步驟2)的常規(guī)植物細(xì)胞培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基、B5培養(yǎng)基或N6培養(yǎng)基。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種應(yīng)用稀土元素促進藏紅花細(xì)胞生長和提高藏紅花素含量的方法。該方法將藏紅花的愈傷組織接種到含有稀土元素、細(xì)胞分裂素和細(xì)胞生長素的植物細(xì)胞培養(yǎng)基上，于15℃～30℃下培養(yǎng)15～30天；將得到的愈傷組織再一次接種到含有稀土元素、細(xì)胞分裂素和細(xì)胞生長素的植物細(xì)胞培養(yǎng)基上，于15℃～30℃下培養(yǎng)15～50天。使用本方法促進了藏紅花細(xì)胞生長，在相同的培養(yǎng)時間，可以比已有技術(shù)獲得更多的藏紅花細(xì)胞的生物量，藏紅花素含量也顯著提高，而且得到的藏紅花素不容易褐化。
文檔編號A01H4/00GK1570087SQ0314609
公開日2005年1月26日 申請日期2003年7月22日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月22日
發(fā)明者王玉春, 陳書安, 王曉東, 趙兵, 袁曉凡 申請人:中國科學(xué)院過程工程研究所