專利名稱：雙極性反式類胡蘿卜素鹽及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及雙極性反式類胡蘿卜素鹽化合物、其溶解方法、其制備方法及其使用方法。這些雙極性反式類胡蘿卜素鹽(BTCS)化合物有益于提高包括人在內(nèi)的哺乳動物中紅細(xì)胞與機(jī)體組織之間氧的擴(kuò)散性。
背景技術(shù)：
類胡蘿卜素是一類由類異戊二烯單元組成的碳?xì)浠衔?，所述類異戊二烯單元在該分子的中心以其排列被反轉(zhuǎn)的方式相連。該分子的主鏈(骨架)由共軛的碳-碳雙鍵和單鍵組成，且還可以具有側(cè)基。盡管曾經(jīng)認(rèn)為類胡蘿卜素的骨架含有40個(gè)碳，但很長一段時(shí)間以來，已認(rèn)識到類胡蘿卜素也可以具有含有少于40個(gè)碳原子的碳骨架。環(huán)繞碳-碳雙鍵的4個(gè)單鍵都位于同一平面。如果側(cè)基在該碳-碳雙鍵的同一側(cè)，所述基團(tuán)被稱為順式；如果它們位于該碳-碳鍵的異側(cè)，它們被稱為反式。由于存在大量的雙鍵，因此類胡蘿卜素產(chǎn)生幾何(順式/反式)異構(gòu)現(xiàn)象的可能性很大，且容易在溶液中發(fā)生異構(gòu)化。最近的一系列書是對類胡蘿卜素的許多特性等的極好的參考書目(″Carotenoids″，G.Briton、S.Liaaen-Jensen和H.Pfander編輯，Birkhauser Verlag，Basel，1995，在此以參考的方式將其全文并入本文中)。
許多類胡蘿卜素是非極性的，因此不溶于水中。這些化合物非常疏水，這使得難以對它們進(jìn)行配制以用于生物學(xué)用途，因?yàn)闉榱巳芙馑鼈儽仨毷褂糜袡C(jī)溶劑而不是水性溶劑。其它類胡蘿卜素是單極性的，并具有表面活性劑的特性(疏水部分和親水性極性基團(tuán))。這樣，這些化合物被吸引到水溶液的表面而不是溶解在大量液體中。存在少量的天然雙極性類胡蘿卜素化合物，這些化合物含有中心疏水部分以及兩個(gè)極性基團(tuán)，這兩個(gè)極性基團(tuán)各在該分子的一個(gè)末端。已有報(bào)道(″Carotenoids″，卷1A，283頁)類胡蘿卜素硫酸鹽在水中具有顯著的溶解度，達(dá)到了0.4mg/ml。其它可以被認(rèn)為是雙極性的類胡蘿卜素也同樣不是非常溶于水。這些雙極性的類胡蘿卜包括二醛和二酮。也已報(bào)道了藏花酸的聯(lián)吡啶鹽，但是其在室溫在水中的溶解度小于1mg/ml。其它雙極性類胡蘿卜素的例子是藏花酸和藏花素(兩者都是在香料藏花中發(fā)現(xiàn)的)。但是，藏花酸只微溶于水。實(shí)際上，在所有的雙極性胡蘿卜素中，只有藏花素在水中顯示出顯著的溶解度。
美國專利4,176,179；4,070,460；4,046,880；4,038,144；4,009,270；3,975,519；3,965,261；3,853,933和3,788,468涉及藏花酸的各種用途。
美國專利5,107,030涉及制備2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯二醛及其衍生物的方法。
美國專利6,060,511涉及反式藏花酸鈉(TSC)及其用途。該TSC是通過將天然存在的藏花與氫氧化鈉反應(yīng)并隨后通過提取而制備的。
在Roy等，Shock 10，213-217(1998)中，出血大鼠(55％血量)在出血結(jié)束后給予反式藏花酸鈉(TSC)丸劑，30分鐘后再給予鹽水。全部經(jīng)TSC處理的動物都存活下來，而所有對照都死亡。在TSC組中全身氧耗增加，在約15分鐘后達(dá)到正常靜止值的75％。
Laidig等，J Am Chem.Soc.120，9394-9395(1998)涉及TSC的計(jì)算模型。通過以水分子環(huán)繞在模擬的TSC分子周圍對該TSC分子進(jìn)行“水合”。水在TSC附近的重排使得氧分子可以更容易地通過該系統(tǒng)進(jìn)行擴(kuò)散。計(jì)算的擴(kuò)散性增加了約30％，這與在體外以及動物實(shí)驗(yàn)中獲得的結(jié)果相一致。
在Singer等，Crit Care Med 28，1968-1972(2000)中，TSC改善了血液動力學(xué)狀態(tài)并在急性缺氧的大鼠模型中延長了大鼠的存活。用低氧濃度(10％)的空氣混合物誘導(dǎo)缺氧10分鐘后給予動物鹽水或TSC。缺氧導(dǎo)致了血流減少，和堿缺失的增加。對照組的6只動物中僅有2只存活下來。處理組都存活下來，并在超過兩小時(shí)的時(shí)間內(nèi)具有良好的血液動力學(xué)穩(wěn)定性，其后再緩慢下降。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及雙極性反式類胡蘿卜素鹽(BTCS)化合物以及此類化合物的合成，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)YZ-TCRO-ZY其中Y＝陽離子；Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架。
本發(fā)明還涉及個(gè)別BTCS化合物的組合物(包括TSC的組合物)，其中出現(xiàn)在可見波長范圍內(nèi)的BTCS組合物的水溶液的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度大于7.0，優(yōu)選大于7.5，最優(yōu)選大于8。
本發(fā)明還涉及一種治療多種疾病的方法，該方法包括對需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY。
本發(fā)明還包括溶解和合成具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY的化合物的幾種方法。
本發(fā)明還涉及一種用于輸送本發(fā)明的化合物的吸入器。
具體實(shí)施例方式
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一類新的類胡蘿卜素和與類胡蘿卜素相關(guān)的化合物。這些化合物被稱為“雙極性反式類胡蘿卜素鹽”(BTCS)。
本發(fā)明的化合物本發(fā)明涉及一類化合物，即雙極性反式類胡蘿卜素鹽，其允許疏水性類胡蘿卜素或與類胡蘿卜素相關(guān)的骨架溶解于水溶液中；以及制備它們的方法。這些鹽的陽離子可以有很多種，但優(yōu)選鈉或鉀(它們在大多數(shù)生物系統(tǒng)中被發(fā)現(xiàn))。共同擁有的美國專利6,060,511描述了一種用于從藏花開始制備反式藏花酸鈉(TSC，一種BTCS)的提取方法，在此以參考的方式將其全文并入本文中。
雙極性反式類胡蘿卜素鹽的通用結(jié)構(gòu)為YZ-TCRO-ZY其中Y(在兩末端可以相同或不同)＝陽離子，優(yōu)選Na+、K+或Li+。Y優(yōu)選是一價(jià)金屬離子。Y也可以是有機(jī)陽離子，例如R4N+、R3S+，其中R是H或CnH2n+1，其中n為1～10，優(yōu)選1～6。例如，R可以是甲基、乙基、丙基或丁基。
Z(在兩末端可以相同或不同)＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)。選擇性地包括類胡蘿卜素(或與類胡蘿卜素相關(guān)的化合物)上的末端碳，該基團(tuán)可以是羧基(COO-)或CO基團(tuán)。該基團(tuán)也可以是硫酸根基團(tuán)(OSO3-)或單磷酸根基團(tuán)(OPO3-)、(OP(OH)O2-)、二磷酸根基團(tuán)、三磷酸根基團(tuán)或它們的組合。
TCRO＝直鏈的反式類胡蘿卜素或與類胡蘿卜素相關(guān)的骨架(優(yōu)選少于100個(gè)碳)，其具有側(cè)基(在下文定義)且典型地包含“共軛的”或交替的碳-碳雙鍵和單鍵(在一個(gè)實(shí)施方式中，如在番茄紅素中，TCRO未完全共軛)。所述側(cè)基典型地為甲基，但也可以是如以下所討論的其它基團(tuán)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，該骨架的各單元在該分子的中心以其排列被反轉(zhuǎn)的方式相連。環(huán)繞碳-碳雙鍵的4個(gè)單鍵都位于同一平面。如果側(cè)基在該碳-碳雙鍵的同一側(cè)，則被稱為順式；如果側(cè)基位于該碳-碳雙鍵的異側(cè)，則被稱為反式。本發(fā)明的化合物是反式的。順式異構(gòu)體通常是有害物并使得擴(kuò)散性不增加。在一個(gè)實(shí)施方案中，可以使用其骨架保持直鏈的反式異構(gòu)體。
反式類胡蘿卜素或與類胡蘿卜素相關(guān)的骨架的例子有 其中側(cè)基X(可以相同或不同)是氫原子(H)；或具有10個(gè)或少于10個(gè)碳(優(yōu)選4個(gè)碳或少于4個(gè)碳)的直鏈或支鏈基團(tuán)，該基團(tuán)選擇性地包含鹵素；或鹵素。X的實(shí)例有甲基(CH3)；乙基(C2H5)；含有鹵素的烷基(C1～C10)例如CH2Cl；或鹵素如Cl或Br。側(cè)基X可以相同或者不同，但是所使用的X基團(tuán)必須維持骨架為直鏈。
盡管自然界存在許多類胡蘿卜素，但是不存在類胡蘿卜素鹽。共同擁有的美國專利6,060,511涉及反式藏花酸鈉(TSC)。該TSC是通過將天然存在的藏花與氫氧化鈉反應(yīng)并隨后通過提取而制備，所述提取主要選擇反式異構(gòu)體。
BTCS的順式和反式異構(gòu)體的存在可以通過觀測溶解于水溶液中的類胡蘿卜素樣品的紫外線-可見光譜來確定。給定光譜后，出現(xiàn)在416nm～423nm(數(shù)字取決于所使用的溶劑)的可見波長范圍內(nèi)的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在250nm～256nm的紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度的值可以被用來確定反式異構(gòu)體的純度水平。當(dāng)BTCS溶解于水中時(shí)，可見波長范圍的最高峰將位于約421nm處，UV波長范圍的峰將位于約254nm處。根據(jù)M.Craw和C.Lambert，Photochemistry and Photobiology，卷38(2)，241-243(1983)(在此以參考的方式將該文獻(xiàn)全文并入到本文中)，計(jì)算結(jié)果(在那種情形下對藏花酸進(jìn)行了分析)為3.1，在純化后該結(jié)果增至6.6。
使用被設(shè)計(jì)用于UV和可見波長范圍的樣品池對共同擁有的美國專利6,060,511的反式藏花酸鈉(通過將天然存在的藏花與氫氧化鈉反應(yīng)并隨后通過進(jìn)行主要選擇反式異構(gòu)體的提取而制備的TSC)進(jìn)行所述Craw和Lambert分析，所得值平均約為6.8。對本發(fā)明的合成TSC進(jìn)行該檢測，所述比值大于7.0(例如7.0～8.5)，優(yōu)選大于7.5(例如7.5～8.5)，最優(yōu)選大于8。對于根據(jù)實(shí)施例5的改進(jìn)方法合成的TSC，該比值大于7.4(例如7.4～8.5)。所合成的物質(zhì)是“更純的”或高度純化的反式異構(gòu)體。
最近已經(jīng)發(fā)現(xiàn)TSC在室溫的水溶性為約10mg/ml，這對于含有如此長的疏水部分的分子來說是很值得關(guān)注的。還發(fā)現(xiàn)TSC增加了氧通過液體的擴(kuò)散性。
美國專利6,060,511描述了一種自藏花開始來制備TSC的提取方法；但是，其它雙極性類胡蘿卜素鹽不能使用相同的程序來制備，這是因?yàn)槭褂貌鼗▋H允許單個(gè)類胡蘿卜素骨架插入到鹽中。
在本文中所公開的發(fā)明使得可以合成一整類的化合物含有多種類胡蘿卜素和與類胡蘿卜素相關(guān)的骨架的雙極性反式類胡蘿卜素鹽。此類化合物溶于水溶液中并具有有利的生物學(xué)用途，例如導(dǎo)致氧的利用增加。這一增加被認(rèn)為是該雙極性反式類胡蘿卜素的疏水部分(骨架)影響水分子的結(jié)合的能力所致。這有效地使得氧分子在那一區(qū)域更為迅速地?cái)U(kuò)散。
溶解本發(fā)明的化合物和組合物本發(fā)明使得反式類胡蘿卜素或與類胡蘿卜素相關(guān)的骨架分子能溶于水溶液中。以下將敘述新的溶解方法。所述方法適用于任何雙極性反式類胡蘿卜素鹽及其組合物。
含有BTCS的鹽水灌注液輸注大量(估計(jì)的失血量的3倍)的等滲鹽水(也稱為生理鹽水)作為出血性休克的治療方法。所述等滲鹽水中每升水含有9克NaCl，使得其一旦被輸注到體內(nèi)不破壞血漿的離子強(qiáng)度。將TSC添加到該鹽水中已經(jīng)顯示出產(chǎn)生了更佳的輸注液，但是不能簡單地將TSC粉末與所述鹽水混合來制備這樣的溶液。無論添加多少TSC，約50％的TSC溶解于生理鹽水中(最多每毫升幾毫克)，這意味著仍然存在未溶解的TSC顆粒。為了預(yù)防這一點(diǎn)，可以通過添加超出需要量兩倍的TSC制備母液，然后離心出未溶解的顆粒。母液的實(shí)際組成可以使用UV-可見分光術(shù)鑒定。該母液可以被添加到生理鹽水中，且TSC保持溶解狀態(tài)。
這一方法可以用于將BTCS溶解在其它類型的氯化鈉溶液以及諸如KCl、Na2SO4、乳酸鹽等其它鹽的溶液中。少量，例如1mg/ml～3mg/ml可以以這種方式加入溶液中。
碳酸鈉稀溶液溶解BTCSBTCS例如TSC溶解在極度稀的碳酸鈉溶液中?？梢灾鸬翁砑酉〉睦?.00001M～0.001M的碳酸鈉溶液至去離子水中直至pH為8.0(去離子水的pH值通常為5～6)。比方說，50ml去離子水僅需要幾滴極度稀的碳酸鈉。該碳酸鈉-去離子水溶液能夠完全溶解大量的TSC(約10mg/ml)，鑒于BTCS的類胡羅卜素部分的疏水性，這是值得關(guān)注的。
BTCS可以作為粉末與無菌瓶裝的碳酸鈉水溶液一起提供。然后可將這一濃縮液進(jìn)行直接注射(可以注射非常少量的具有比血漿更低的離子強(qiáng)度的溶液)，或該濃縮液可以被添加到生理鹽水中然后再進(jìn)行注射。如果將TSC溶解于碳酸鈉-水溶劑中，然后添加更多相同的溶劑，則TSC保持在溶液中。
在另一實(shí)施方案中，使用碳酸氫鈉代替碳酸鈉。也可以使用導(dǎo)致去離子水具有堿性pH值的鹽。
用這一程序可以獲得5mg/ml～10mg/ml的類胡蘿卜素骨架濃度。
水溶解BTCS盡管TSC溶于水中(自來水、蒸餾水、去離子水)，但這些溶液只在調(diào)節(jié)pH值使得該溶液呈堿性時(shí)才穩(wěn)定。TSC在去離子水(存在極少量的Na+離子)比在正常水中更易溶。BTCS例如TSC只溶解于適度去離子的水中，如果將純凈的去離子水添加到該溶液中，所述TSC將沉淀出來。BTCS只溶解于適度去離子的水中，但是如果未將pH值調(diào)節(jié)至微堿性，額外的去離子水可以導(dǎo)致BTCS的沉淀。
溶解BTSC的其它方法所述BTCS可以被配制在增強(qiáng)輸送的輸送系統(tǒng)中。參見以下本發(fā)明的化合物的配制。
本發(fā)明的雙極性反式類胡蘿卜素鹽的合成以下闡述的是可用于合成雙極性反式類胡蘿卜素鹽的新的合成方法。在合成的各步驟中可以有本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的變化。
A.TSC合成可以通過將含有共軛碳-碳雙鍵的對稱型C10二醛(2，7-二甲基辛-2，4，6-三烯-1，8-二醛)與[3-甲酯基-2-丁烯-1-亞基]三苯基正膦相偶聯(lián)而合成反式藏花酸鈉(TSC)。這導(dǎo)致形成了藏花酸的反式二甲酯。該二甲酯然后通過皂化作用被轉(zhuǎn)化成為最終的TSC產(chǎn)物。典型地，皂化是通過用氫氧化鈉水溶液或溶于THF(四氫呋喃)中的氫氧化鈉來處理酯完成的；但是，在這種情形下這些方法沒有產(chǎn)生最佳的結(jié)果。在這種情形下，可以通過將所述酯與NaOH/甲醇溶液反應(yīng)而非常好地完成皂化。皂化后，通過真空干燥回收所述TSC。
在這一合成中所使用的C10二醛和三苯基正膦反應(yīng)物可以經(jīng)由不同的途徑制備。例如，利用Wittig化學(xué)法，從溴乙酸乙酯和呋喃開始制備所述C10二醛。惕各酸是用于制備所需正膦的起始物質(zhì)?？梢酝ㄟ^將不同長度的反應(yīng)物(例如C14二醛和三苯基正膦)連接在一起來制備不同長度的類胡蘿卜素骨架。這一程序?qū)е滦纬闪瞬煌姆词诫p極性類胡蘿卜素鹽。也可以進(jìn)行變化以獲得不同的側(cè)基(TSC的側(cè)基有甲基)。
以這種方式制備的TSC在室溫以＞10mg/ml的水平溶于水中(用碳酸鈉的極度稀釋液將pH值調(diào)節(jié)至8.0)。其它雙極性反式類胡蘿卜素鹽在室溫可溶于具有中性或更高pH值的水中。本申請所使用的“可溶于”意指在室溫每ml水中溶解的量超過5mg(如以前所提及的那樣，類胡蘿卜素參考書目指出0.4mg/ml是“非常顯著的溶解度”，但是這低于本發(fā)明所定義的溶解度)。
B.常規(guī)合成類胡蘿卜素或與類胡蘿卜素相關(guān)的結(jié)構(gòu)可以以下方式構(gòu)建 (3-甲酯基-2-丁烯-1-亞基)三苯基正膦(或當(dāng)X不是甲基時(shí)的相關(guān)化合物)是將類異戊二烯單元(或與類異戊二烯相關(guān)的單元)添加到對稱型類胡蘿卜素(或與類胡蘿卜素相關(guān)的化合物)的兩端的關(guān)鍵前體。這一過程可以被無限重復(fù)。例如，使用上述的化學(xué)方法，反式藏花酸二甲酯可以被還原成相應(yīng)的對稱型二醛。該二醛可以與過量的(3-甲酯基-2-丁烯-1-亞基)三苯基正膦反應(yīng)以提供相應(yīng)的二酯。這一合成順序可以反復(fù)地進(jìn)行重復(fù)。
經(jīng)改良的合成2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯二醛(2，7-二甲基辛-2，4，6-三烯-1，8-二醛)為了合成TSC的關(guān)鍵中間體。這一關(guān)鍵的前體有3個(gè)雙鍵，因此可能存在幾種異構(gòu)體。對于TSC而言，全反式異構(gòu)體(E，E，E-異構(gòu)體)是必需的。常規(guī)合成途徑包括11個(gè)步驟，產(chǎn)率相對較低，且在幾個(gè)步驟中選擇性低(參見實(shí)施例1)。結(jié)果，必需伴隨著該途徑使用柱層析來純化幾種中間體。
經(jīng)改良的合成途徑要簡單很多(參見以下的反應(yīng)圖式)。美國專利5,107,030(在此，以參考的方式將全部內(nèi)容并入到本文中)中所描述的三步方法提供了所述二醛的幾何異構(gòu)體的混合物(美國專利5,107,030未注意到這一混合物)。在實(shí)施例1中所描述的本發(fā)明的方法中，通過幾次重結(jié)晶從甲醇或乙酸乙酯中獲得了96％～97％的所需異構(gòu)體(全反式或E，E，E-異構(gòu)體)，產(chǎn)率為59％。
本發(fā)明的改良的合成方法包括通過在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，采用亞磺?RSO2H，其中R是C1～C10的直鏈或支鏈烷基或芳基(帶有取代基的苯基))例如對甲苯亞磺酸，將殘留的二醛的異構(gòu)體混合物通過異構(gòu)化轉(zhuǎn)化為所需的反式醛(E，E，E)，所述溶劑例如1，4-二噁烷、四氫呋喃或其中的烷基為C1～C10的直鏈或支鏈烷基中的一個(gè)或兩個(gè)的二烷基醚。獲得了純的所需二醛的額外8％的產(chǎn)率，將最后一個(gè)步驟的總體產(chǎn)率從59％提高到了67％。這一產(chǎn)率的提高十分重要。這一異構(gòu)化步驟可以加到美國專利5,107,030的方法的第三個(gè)步驟中以獲得更高的產(chǎn)率。
改良的合成途徑 兩種不需要的異構(gòu)體 將不需要的二醛異構(gòu)化為所需二醛 可以通過將二酯溶解在甲醇中，然后添加堿例如NaOH(此時(shí)BTCS的Y是Na+)來完成皂化。或者，可以將所述二酯溶解在已含有堿的甲醇中。典型地，NaOH是水溶液(20重量％～60重量％)，但也可以是固體?？商娲状加糜谌芙馑龆サ挠幸掖?、丙醇和異丙醇?？梢栽诟鞣N商業(yè)途徑中完成皂化?？梢允褂靡幌嗷騼上囿w系(一種有機(jī)相和一種水相)。
也可以根據(jù)上述的方法合成反式藏花酸。
此外，與已經(jīng)對TSC的報(bào)道那樣，這些BTCS化合物增加了氧通過水的擴(kuò)散性(這也將取決于插入到終產(chǎn)物中的疏水部分的特性，例如碳鏈長度)，因?yàn)轭惡}卜素骨架與水的疏水作用被認(rèn)為是導(dǎo)致了擴(kuò)散性的增加。
本發(fā)明的化合物的配制雙極性反式類胡蘿卜素鹽的濃縮液可以如上述那樣通過將其溶解在碳酸鈉的極度稀釋液中來制備。所得到的混合物然后可以那種方式被使用，或者可以用生理鹽水或其它水溶劑進(jìn)一步稀釋。此外，雙極性類胡蘿卜素鹽的溶液可以通過將該雙極性類胡蘿卜素鹽直接溶解在鹽溶液中并隨后除去任何不溶解的物質(zhì)來制備。
所述雙極性反式類胡蘿卜素鹽的干燥形式在室溫是穩(wěn)定的，并可以被長期儲存。優(yōu)選地，這種鹽的制劑，如果是口服制劑，其在腸道中被吸收而不是在胃中被吸收。
盡管可以單獨(dú)施用本發(fā)明的化合物，它們也可以作為一種藥物制劑的一部分而施用。這種制劑可以包括本領(lǐng)域技術(shù)人員所已知的藥學(xué)上可接受的載體以及其它治療劑(參見下文)。優(yōu)選地，該制劑不包括抑制本發(fā)明的化合物提高氧的擴(kuò)散能力的化合物。
本發(fā)明的化合物和組合物的適當(dāng)劑量將取決于被治療情況的嚴(yán)重性。對于“治療有效”的劑量，其必須具有所需的效果，即增加氧的擴(kuò)散性。這將反過來使得與氧相關(guān)的參數(shù)朝著正常值回歸。
可以通過任何適當(dāng)?shù)耐緩竭M(jìn)行施用，所述途徑包括口、鼻、局部、胃腸外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮內(nèi)和骨內(nèi)(intraosseus))、陰道或直腸。優(yōu)選的施用途徑將取決于詳細(xì)情況。在緊急情況下優(yōu)選用吸入途徑進(jìn)行治療，此時(shí)BTCS必需非常迅速地進(jìn)入血流中。所述制劑因此包括了那些適于經(jīng)此類途徑施用的制劑(待霧化的液體或粉末)。將意識到優(yōu)選的途徑可以例如隨著患者的狀況和年齡而發(fā)生變化。所述制劑可以方便地以單位劑型例如片劑和持續(xù)釋放膠囊劑存在，并可以通過藥劑學(xué)領(lǐng)域所公知的方法進(jìn)行制備和施用。所述制劑可用于BTCS的即釋或緩釋或控釋。參見例如WO 99/15150的控釋制劑(在此以參考的方式將其全文并入本文中)。
適于口服施用的本發(fā)明的制劑可以獨(dú)立單位的形式例如丸劑、膠囊劑、扁囊劑或片劑，以粉末劑或顆粒劑的形式，或以溶液、懸浮液或乳劑的形式存在。適于口服施用的制劑進(jìn)一步包括錠劑、軟錠劑和在適當(dāng)?shù)幕|(zhì)或液體載體中施用的吸入霧劑。用于局部施用到皮膚上的制劑可以是包含活性劑和藥學(xué)上可接受的載體的軟膏、乳膏、凝膠和糊劑的形式或存在于透皮的貼劑中。
其中載體為固體的適于鼻內(nèi)施用的制劑包括可以通過鼻通道快速吸入而施用的特定尺寸的粉末?？梢允┯闷渲休d體為液體的合適制劑，例如鼻內(nèi)噴霧或滴液。
適于腸胃外施用的制劑包括水性或非水性的無菌注射液，所述注射液可以包含抗氧化劑、緩沖液、抑菌劑和使得該制劑與意向受體的血液等滲的溶質(zhì)以及水性或非水性的無菌懸浮液，所述懸浮液可以包括懸浮劑和增稠劑。所述制劑可以存在于單位劑量或多劑量的容器中，例如密封的安瓿和小瓶；且可以被凍干，只需要在施用前即刻添加無菌液態(tài)載體例如注射用水。注射液和懸浮液可以從無菌的粉末、顆粒和片劑制得。
本發(fā)明的化合物和組合物的用途很多種狀態(tài)受到氧到機(jī)體組織的輸送的控制或介導(dǎo)。本發(fā)明的化合物和組合物可以以相同的有效量用于與藏花酸的所述藥學(xué)應(yīng)用相同的藥學(xué)應(yīng)用中；參見美國專利4,176,179；4,070,460；4,046,880；4,038,144；4,009,270；3,975,519；3,965,261；3,853,933和3,788,468；這些文獻(xiàn)以參考的方式在此全文并入本文中。
已經(jīng)顯示出TSC使得氧通過水溶液的擴(kuò)散性增加了約30％。TSC增加了缺氧后的哺乳動物中的存活率、增加了缺氧或生理應(yīng)激后的氧耗、增加了缺氧后的血壓、減少了缺氧后血液酸中毒(即減少了血液堿不足、增加了血液pH值和降低了血漿乳酸水平)、減少了缺氧后的器官損傷(例如肝臟、腎損傷)。因此，本發(fā)明的化合物對于治療以低氧(缺氧)為特征的哺乳動物(包括人類)疾病/不適例如其中有呼吸道疾病、出血性休克和心血管疾病、多器官衰竭(例如由于ARDS膿毒或出血性休克所致)、慢性腎衰竭、動脈粥樣硬化、氣腫、哮喘、高血壓、腦水腫、乳頭狀瘤、脊髓損傷、中風(fēng)等是有用的。本發(fā)明的化合物對于治療具有上述疾病/不適的患病危險(xiǎn)的哺乳動物也是有用的。其它雙極性反式類胡蘿卜素鹽具有相似的特性。這樣的化合物也可與其它通常建議用于增加機(jī)體中氧利用的方法例如氧療以及血紅蛋白或碳氟化合物一起聯(lián)合使用。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在施用氧的同時(shí)將BTCS施用給患者?；蛘?，可以一起給予血紅蛋白或碳氟化合物、和BTSC。在這些情形中，實(shí)現(xiàn)了累加效應(yīng)。
這些鹽中的任一種用于治療所需的最小劑量是氧的擴(kuò)散性增加時(shí)的劑量。本發(fā)明的化合物的有效劑量將取決于所治療的狀態(tài)、該狀態(tài)的嚴(yán)重性、各哺乳動物患者所表現(xiàn)出的階段和個(gè)體特征。但是，劑量將在每公斤體重約0.001mg～約500mg活性化合物的范圍內(nèi)變化，優(yōu)選在約每公斤體重0.01mg～30mg的范圍內(nèi)變化。優(yōu)選靜脈內(nèi)施用，但也可以使用其它注射途徑例如肌內(nèi)、皮下或經(jīng)吸入。可以進(jìn)行透皮輸送或骨內(nèi)輸送，也可以使用口服施用。
呼吸道疾病雙極性反式類胡蘿卜素鹽也可用于治療急性和慢性呼吸失調(diào)。這些被描述成其中動脈氧分壓降低的狀態(tài)，例如其值為60mm Hg～70mm Hg而不是90mm Hg～100mm Hg的正常值。這種急性和慢性呼吸失調(diào)包括氣腫、極性肺損傷(ALI)、極性呼吸窘迫綜合癥(ARDS)、慢性阻塞性肺疾患(COPD)和哮喘。
當(dāng)血液中的氧分壓低(這是氣腫、ARDS和COPD的癥狀)時(shí)，TSC提高了血液中的氧分壓值。提高血液中的氧分壓減輕了氣腫、ARDS和COPD的許多癥狀。TSC并不治療病因但是緩解了由于根本病因引起的氧化性應(yīng)激和損傷。
出血性休克出血性休克以氧耗減少為標(biāo)志。雙極性反式類胡蘿卜素鹽通過使得更多氧從紅細(xì)胞擴(kuò)散到組織中而增加機(jī)體的氧耗。已顯示TSC增加處于出血性休克的大鼠的氧耗，而且也顯示其抵消休克的其它癥狀。本發(fā)明的化合物使得低血壓升高、使加快的心率降低并使在休克過程中發(fā)展的血液酸中毒狀況逆轉(zhuǎn)。本發(fā)明的化合物還降低出血性休克后的器官損傷。
本發(fā)明的化合物可以通過吸入、注射或添加至標(biāo)準(zhǔn)復(fù)蘇液(林格氏乳酸鹽或生理鹽水)中來施用以用于治療出血性休克。
心血管疾病在西方文明中，導(dǎo)致死亡的首要原因是缺血性心臟病。死亡可以由心臟收縮能力的逐漸衰退或常常由于心臟突然停止跳動引起。心臟性猝死(SCD)包括從癥狀開始后的60秒起至隨后24小時(shí)的一段時(shí)期。這些死亡通常是急性冠狀動脈閉塞(阻塞)或心室纖維性顫動(可由閉塞導(dǎo)致)的結(jié)果。
當(dāng)供給心肌的氧不足時(shí)存在心肌缺血。當(dāng)冠狀動脈血流量非常低時(shí)，心肌不能行駛功能并死亡。該肌肉面積被稱為被梗塞。最經(jīng)常地，冠狀動脈血流量減少是由于發(fā)生在冠狀動脈中的動脈粥樣硬化所導(dǎo)致的。缺血導(dǎo)致機(jī)械性能和電性能被削弱和肌肉細(xì)胞損傷，這可能導(dǎo)致致死性心率不齊，稱為心室纖維性顫動(VF)。在心室纖維性顫動中，心臟心室的電活性是無序的，所產(chǎn)生的心電圖的節(jié)律無規(guī)律且沒有可識別的圖形。心室纖維性顫動常常伴隨著心肌缺血和梗塞發(fā)生，且?guī)缀蹩偸切呐K性猝死的原因。雙極性反式類胡蘿卜素鹽在治療心肌缺血中是有利的。通常是心肌梗塞的先兆的動脈粥樣硬化和充血性心臟衰竭也可以用這些鹽來治療。
缺血雙極性反式類胡蘿卜素鹽在治療其它形式的缺血(組織或器官的血流量不足)例如腎、肝臟、脊髓和腦的缺血(包括休克)也是有利的。
手術(shù)手術(shù)經(jīng)常涉及到失血或動脈鉗夾(例如旁路手術(shù))，這可能引起缺血。雙極性反式類胡蘿卜素鹽作為用于手術(shù)的預(yù)處理或作為手術(shù)過程中或手術(shù)后的處理是有利的。
高血壓高血壓或血壓過高通常與心血管疾病相關(guān)。本發(fā)明的化合物可用以降低血壓。
機(jī)能增強(qiáng)BTCS增強(qiáng)需氧代謝，增加在步行、跑步、舉重等過程中的氧耗，也增加了耐受性。
創(chuàng)傷性腦損傷創(chuàng)傷性腦損傷之后的缺血使得腦損傷加重。BTCS增加撞擊損傷(局部或擴(kuò)散性損傷)后在腦組織中的氧水平。撞擊損傷的例子包括汽車/摩托車事故和跌倒。當(dāng)使用高氧治療時(shí)，BTCS也增加了到達(dá)正常腦組織的氧量。
阿爾茨海默氏病在阿爾茨海默氏病中，BTCS增加腦的氧耗水平，因此減輕了阿爾茨海默氏病的癥狀。血流量和氧耗下降至低于在非癡呆的老年人中所觀察到的水平的約30％，Wurtman，Scientific American，卷252，1985。
BTCS所導(dǎo)致的腦中的氧耗水平的增加也減少了記憶喪失。
糖尿病
BTCS對于治療糖尿病的并發(fā)癥例如潰瘍、壞疽和糖尿病性視網(wǎng)膜病是有益的。用高壓氧呼吸處理能更好地治愈糖尿病性足部潰瘍，M.Kalani等，Journal of Diabetes & Its Complications，Vol 16，No.2，153-158，2002。
BTCS同樣有助于與低氧壓力有關(guān)的糖尿病性視網(wǎng)膜病的并發(fā)癥，Denninghoff等，Diabetes Technology & Therapeutics，Vol.2，No.1，111-113，2000。
其它用途雙極性反式類胡蘿卜素鹽也能用于治療脊髓損傷、腦水腫、貧血和皮膚乳頭狀瘤。在所有情形中，它們都減輕了病情，使病情緩解。據(jù)信這是使用雙極性反式類胡蘿卜素鹽所導(dǎo)致的氧耗增加的結(jié)果。
此外，雙極性反式類胡蘿卜素鹽也能用以增加其它生理學(xué)上的重要分子例如葡萄糖、CO2或NO的擴(kuò)散。BTCS也清除衍生于氧的自由基。
* * * * *以下實(shí)施例是說明性的，而非對本發(fā)明的組合物和方法的限制。其它對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見的通常發(fā)生的對眾多條件和參數(shù)的適當(dāng)修改和適應(yīng)性變化也在本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)。
實(shí)施例實(shí)施例1反式藏花酸鈉的合成 通過將含有共軛碳-碳雙鍵的對稱型C10二醛與[3-甲酯基-2-丁烯-1-亞基]三苯基正膦相偶聯(lián)而合成了反式藏花酸鈉。然后將這一產(chǎn)物用NaOH/甲醇溶液進(jìn)行皂化。
將溶解于乙酸乙酯中的三苯膦(trephenylphosphine，濃度為約2mol/L)緩慢添加到溴乙酸乙酯中。分離并用堿處理后，可以用碘甲烷對該產(chǎn)物進(jìn)行處理，接著用堿處理以形成正膦。在該情形中，待形成類胡蘿卜素骨架的基本化合物可以自環(huán)狀化合物例如呋喃開始制備。呋喃與溴和甲醇反應(yīng)，隨后經(jīng)過選擇性脫質(zhì)子化步驟形成單醛。該單醛隨后與正膦相偶聯(lián)。酸性條件使其它二甲縮醛基團(tuán)脫保護(hù)以提供游離的醛。這一化合物隨后再次與上述相同的正膦反應(yīng)以產(chǎn)生二乙基二酯。該酯基被還原為醇，并隨后進(jìn)行氧化(例如用MnO2氧化)得到二醛形式的C10骨架。該二醛隨后與由惕各酸制備的正膦進(jìn)行反應(yīng)。在酸性條件下用甲醇對所述惕各酸進(jìn)行酯化以產(chǎn)生甲酯，隨后進(jìn)行溴化步驟。結(jié)果形成了烯丙型溴化物異構(gòu)體，并可利用結(jié)晶將其分離出來。隨后用氫氧化鈉處理所需溴化物而得到所需正膦。然后將該正膦和所述C10二醛溶解在溶劑例如甲苯或苯中，并進(jìn)行回流。除去溶劑后，所得產(chǎn)物以粉末的形式被分離出來并隨后用40％的NaOH/甲醇混合物進(jìn)行皂化以形成TSC。
***按17個(gè)步驟的合成順序制備反式藏花酸鈉1(TSC)，總產(chǎn)率為1.5％。以溴乙酸乙酯、呋喃和惕各酸作為起始物質(zhì)制備到了總量4.1g的TSC。
從藏花酸二甲酯的皂化而合成了反式藏花酸鈉(TSC)，所述藏花酸二甲酯的制備是基于由Buchta和Andree1所報(bào)道的總合成。制備藏花酸二甲酯后的合成策略是基于對稱型C10二醛(2，7-二甲基辛-2，4，6-三烯-1，8-二醛)與(3-甲酯基-2-丁烯-1-亞基)三苯基正膦的偶聯(lián)。
盡管最初Buchta和Andree的文章1的標(biāo)題為“The Total Synthesis oftrans-2，2-Bisdimethyl-crocetin-dimethyl ester and trans-Crocetin-dimethylester″，但該文章并未報(bào)道試驗(yàn)細(xì)節(jié)以及產(chǎn)率。經(jīng)過對文獻(xiàn)的廣泛檢索后發(fā)現(xiàn)了適于生成C10二醛和正膦的各步驟的程序。最后，以溴乙酸乙酯、呋喃和惕各酸作為起始物質(zhì)按17步驟的順序制備到了總產(chǎn)率為1.5％的TSC。
利用Wittig化學(xué)方法從溴乙酸乙酯2和呋喃3制備所述C10對稱型二醛。用三苯基膦和碘甲烷處理溴乙酸乙酯以提供正膦6 a.TPP、EtOAc，92％；b.1N NaOH、CH2Cl2；c.CH3I、CH2Cl2；d.1NNaOH、CH2Cl2。
第一步的產(chǎn)率相當(dāng)高，為92％。在該順序中后續(xù)步驟的定量由于正膦4和膦鎓鹽5的特性因而很復(fù)雜。這兩種化合物都是非常粘的漿液，當(dāng)在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中進(jìn)行濃縮時(shí)產(chǎn)生大量的泡沫。這兩種化合物可以被方便地作為二氯甲烷溶液進(jìn)行處理，正膦6的總產(chǎn)率從定性方面來說是可接受的(估計(jì)為超過75％)。
用溴將呋喃開環(huán)以提供富馬醛雙(二甲縮醛)8。3
e.Br2、MeOH、Na2CO3，77％；f.大孔樹脂(Amberlyst)15、H2O、丙酮，72％。
在酸性條件下對雙(二甲縮醛)8單脫保護(hù)4生成了醛9，然后將該醛9與正膦6偶聯(lián)以45％的產(chǎn)率提供10。使用酸性條件對二甲縮醛10脫保護(hù)。用正膦6處理11生成二酯12。所述酯基團(tuán)被DIBAL-H還原為醇并隨后用MnO2進(jìn)行氧化以生成C10二醛14。通過NMR(核磁共振)數(shù)據(jù)確定14的反式立體化學(xué)。特別地，該化合物的C2對稱性提供了13C核磁共振譜中的5個(gè)期望的共振，且1H核磁共振譜在δ9.54(1H)、7.07(2H)和1.95(3H)處顯示出信號。
g.CH2Cl2，45％；h.大孔樹脂15、H2O、丙酮，42％～65％；i.6，CH2Cl2，50％～81％；j.DIBAL-H己烷，75％～81％；k.MnO2、丙酮，26％～58％。
步驟h～k中的產(chǎn)率范圍反映了從最初的試研究到規(guī)模反應(yīng)在分離上的改進(jìn)。
惕各酸15在4個(gè)步驟的順序中被轉(zhuǎn)化為正膦20。對15的Fisher酯化提供了甲酯16。與NBS的反應(yīng)提供了59％的γ-溴代惕各酸甲酯、和26％的α-溴代惕各酸甲酯的混合物，并且其余物質(zhì)為未反應(yīng)的起始物質(zhì)?；谝褕?bào)道的文獻(xiàn)5期望能形成區(qū)域異構(gòu)體。在以下步驟中，將磷鎓鹽的α/γ混合物重結(jié)晶以提供所需的γ-膦鎓溴化物19(6)。隨后用氫氧化鈉處理得到正膦20。
I.H2SO4、MeOH，42％；m.NBS、苯甲酰過氧化物，59％；n.TPP、C6H6，40％；o.NaOH、H2O，81％。
正膦20和C10二醛14通過在苯中回流而相互偶聯(lián)6。藏花酸二甲酯21以紅色粉末的形式被分離出來。甲酯的皂化被證明比預(yù)期的要困難得多。用2eq.(當(dāng)量)NaOH的THF/H2O溶液于室溫對酯21進(jìn)行處理和回流并未使原料發(fā)生改變。溶解度看上去是一個(gè)很重要的問題，因此添加了吡啶。這確實(shí)溶解了大多數(shù)的固體，但是使吡啶和2.5N NaOH的混合物進(jìn)行回流沒有產(chǎn)生產(chǎn)物。標(biāo)準(zhǔn)的THF/2.5N NaOH皂化條件對所述酯也沒有影響。最后，用40％的NaOH/甲醇回流過夜證明是成功的，生成了橙色固體的TSC 1。

p.C6H6，回流，33％～38％；q.MeOH、40％的NaOH水溶液(aq.NaOH)，58％～65％。
嘗試將TSC溶解以得到1H核磁共振譜。但是，TSC事實(shí)上不能溶于大多數(shù)的常用有機(jī)溶劑(氯仿、DMSO、吡啶、甲醇、丙酮和冰醋酸)中。通過紅外線(IR)、紫外線(UV)、高壓液相色譜(HPLC)和元素分析對從這一程序制備的TSC進(jìn)行表征。IR顯示于1544cm-1和1402cm-1處的特征性吸光度(與共軛的羧酸鹽相一致)。UV和HPLC與真實(shí)的TSC相一致7。元素分析給出了滿意值。
該反應(yīng)順序的總產(chǎn)率為1.5％(基于呋喃)。
將該合成詳述于下所有試劑和化學(xué)制品都購自Aldrich或Sigma，且除非特別指出以接收時(shí)的狀態(tài)使用。溶劑購自Fisher Scientific，為ACS試劑或HPLC級且沒有進(jìn)一步純化即使用。無水溶劑以Sure/SealTM瓶裝形式購自Aldrich，并且直接使用而未進(jìn)一步純化。去離子水獲自室內(nèi)Culligan水處理系統(tǒng)。
在Mel-Temp II上獲得熔點(diǎn)并未校正。在Perkin-Elmer 1600FTIR分光光度計(jì)上測定紅外光譜。使用5mm多核探針在JEOL FX90Q分光計(jì)上測定核磁譜，所述探針根據(jù)樣本的特性具有內(nèi)部或外部氘鎖。質(zhì)子和碳核磁共振化學(xué)位移被分別指定為相對于TMS或氘代溶劑。磷核磁共振譜通常在質(zhì)子去偶模式中進(jìn)行，該模式中以5％的磷酸水溶液的同軸插入管作為外標(biāo)。
在配備有火焰離子化檢測器和Hewlett Packard 3394A積分儀的Varian 3700氣相色譜儀上通過氣相色譜進(jìn)行常規(guī)分析以評估反應(yīng)進(jìn)程或估計(jì)產(chǎn)物組成。用氦載氣將1微升溶液注入到15米的DB5柱(0.53mmID和1.5μm膜厚)上，應(yīng)用溫度程序，以20℃/分鐘，從50℃升溫到250℃，并于250℃保持10分鐘。典型地，注射器和檢測器的溫度通常設(shè)定為250℃。
在Baker-flex 2.5cm×7.5cm硅膠平板上進(jìn)行薄層層析，所述平板根據(jù)檢測方法的不同具有或不具有熒光指示劑(1B2或1B2-F)。通過紫外線檢測展開板上的組分。
元素分析由Quantitative Technologies，Inc.，Whitehouse，N.J進(jìn)行。
三苯基正膦(4)2(ACL-G29-1)將三苯膦(235.6g，0.90mol)溶解在EtOAc(540ml)中。所有固體全部溶解需要大約30分鐘。該過程是吸熱的(當(dāng)環(huán)境溫度為20℃時(shí)，溶液冷卻至13℃)。在1.5小時(shí)的時(shí)期內(nèi)逐滴加入于EtOAc(400ml)中的溴乙酸乙酯溶液(100ml，0.90mol)。在添加的過程中形成了白色的沉淀物。于環(huán)境溫度(18℃)攪拌過夜(20h)。
通過用大量的Et2O真空過濾漂洗將固體收集起來。于45℃在真空中干燥過夜以生成3的白色固體356.3g，產(chǎn)率為92.6％(0.83mol)。1H核磁共振與文獻(xiàn)報(bào)道值一致。
將該固體溶解在二氯甲烷(3L)中，并用1M NaOH(3.6L)在12L的燒瓶中劇烈振蕩45分鐘進(jìn)行處理。有機(jī)層被分離出來，用額外的二氯甲烷(2×1L)萃取水相。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并濃縮直至剩下約1L的量。取出少量物質(zhì)并通過1H核磁共振進(jìn)行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與文獻(xiàn)報(bào)道值是一致的。
碘化三苯基膦鎓(5)2(ACL-G29-2)當(dāng)在冰浴中冷卻反應(yīng)瓶時(shí)，用碘甲烷(64.0ml，1.03mol)處理來自ACL-G29-1的物質(zhì)。當(dāng)添加結(jié)束時(shí)(1h)，通過TLC(硅膠，10％MeOH/CHCl3)對反應(yīng)混合物進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示殘留了相當(dāng)大量的起始物質(zhì)。除去冰浴，1.5h后通過TLC對反應(yīng)混合物進(jìn)行檢測，基于主要條帶(起始物條帶(s.m.streaked))的密實(shí)性，看上去反應(yīng)是完全的。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上將反應(yīng)混合物濃縮，當(dāng)大多數(shù)溶劑被除去時(shí)，產(chǎn)物開始起泡沫并蔓延至蒸汽管。產(chǎn)生的膦鎓鹽5是一種非常粘稠的漿液，其以二氯甲烷溶液的形式保存以有利于處理。由于5的特性，該物質(zhì)未定量。
三苯基正膦(6)2(ACL-G29-2A)
一部分5溶解在CH2Cl2(350ml)中，并與1M NaOH(500ml)劇烈攪拌45分鐘。有機(jī)層被分離出來，用CH2Cl2(2×100ml)提取水相。將合并的有機(jī)層干燥(MgSO4)并濃縮以生成8.0g黃色固體6。1H核磁共振譜與文獻(xiàn)報(bào)道值相一致。
富馬醛雙(二甲縮醛)(8)3(ACL-G29-3)將無水MeOH(650ml)與呋喃(88.0g，1.29mol)的溶液在氮?dú)庵欣鋮s至-45℃。在2.5小時(shí)期間以維持-45℃的速率逐滴地加入溴溶液(68.0ml，1.32mol)。允許該紅色的溶液在2.5小時(shí)期間溫度提升至-10℃，并再保持2小時(shí)。該反應(yīng)混合物是淡琥珀色。添加5g Na2CO3生成了相當(dāng)大量的溢出氣體和4℃的放熱。用干冰將該反應(yīng)混合物冷卻，將剩余的Na2CO3(總量210g)在50分鐘期間內(nèi)加入。于-10℃保持過夜后(11小時(shí))，去除冷浴且允許所述反應(yīng)混合物升溫至室溫并攪拌20小時(shí)。
通過真空過濾將鹽除去，用維格羅柱真空蒸餾濾出液直至大約除去150ml濾出液。額外的鹽被沉淀出來并引起蒸餾罐猛烈暴沸。過濾后，再蒸餾另外150ml，更多的鹽從溶液中沉淀出來。劇烈的暴沸再次是一個(gè)問題。將蒸餾釜冷卻、過濾，用Et2O(400ml)對濾液進(jìn)行處理并通過真空過濾將沉淀物除去。收集到至少120g的鹽(早期產(chǎn)生的鹽不經(jīng)定量而丟棄)。于25℃用水抽氣機(jī)將大多數(shù)Et2O在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去。用維格羅柱重新進(jìn)行蒸餾，收集到175.2g(產(chǎn)率76.9％)清晰、無色的液體8，沸點(diǎn)86-92℃/9托(文獻(xiàn)為85-90℃/15托)。1H核磁共振譜與所期望的產(chǎn)物一致。GC分析81.9％純。
富馬醛單(二甲縮醛)(9)4(ACL-G29-4)將富馬醛雙(二甲縮醛)8(5.29g，0.03mol)溶解在丙酮(120ml)中。相繼加入H2O(1.80ml)和大孔樹脂15(1.20g)。將該混合物劇烈攪拌5分鐘，然后進(jìn)行過濾以除去樹脂。在這段時(shí)間中，溶液從無色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于室溫濃縮，淺褐色殘留物在kugelrohr(37℃/200毫托)上蒸餾以生成2.80g黃色液體9，產(chǎn)率71.8％。當(dāng)最初蒸餾釜發(fā)生暴沸時(shí)，丟失了少量的物質(zhì)。1H核磁共振譜與所期望產(chǎn)物一致，GC分析指示為80％純。
(ACL-G29-7)將富馬醛雙(二甲縮醛)8(72.1g，0.41mol)溶解在丙酮(1600ml)中。添加H2O(25.0ml)和大孔樹脂15(16.7g，用丙酮預(yù)洗滌)。將該混合物劇烈攪拌5分鐘，然后進(jìn)行過濾以除去酸性樹脂。該反應(yīng)混合物呈淺黃色，較先前大規(guī)模制備物更加淺。GC分析顯示為34.5％的產(chǎn)物和46.1％起始物。用樹脂再處理5分鐘。GC分析顯示為59.5％的產(chǎn)物和21.7％起始物。用樹脂再處理10分鐘(總時(shí)間為20分鐘)。GC分析顯示73.9％的產(chǎn)物和2.0％起始物。于室溫下，將濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行濃縮以提供一種褐色的油54g。真空蒸餾生成了一種黃綠色的油34.48g。GC分析顯示為64.7％純(8.22分鐘)，帶有17.5％(9.00分鐘)和6.9％(9.14分鐘)的主要雜質(zhì)。凈回收產(chǎn)量為22.3g(0.17mol)。通過GC對前餾分進(jìn)行分析，結(jié)果顯示是非常不干凈的物質(zhì)。
(ACL-G29-13)將大孔樹脂15(8.61g)在丙酮(100ml)中攪動30分鐘并通過過濾進(jìn)行收集。將縮醛8(35.0g，0.16mol)溶解在乙腈(620ml)中，并同時(shí)進(jìn)行機(jī)械攪拌，加入酸性樹脂和去離子水(10.0ml，0.55mol)。通過TLC(10∶3，正己烷∶Et2O)對該反應(yīng)過程進(jìn)行監(jiān)控，15分鐘后大多數(shù)的起始物質(zhì)已被轉(zhuǎn)化。20分鐘后，僅檢測到微量的二甲縮醛。通過過濾將樹脂除去，并在40℃的溫度在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上對濾液進(jìn)行濃縮。將該粗制產(chǎn)物加載到Biotage柱(7.5×9.0cm)上，用含有15％Et2O的己烷進(jìn)行洗脫以得到產(chǎn)物19.8g，產(chǎn)率65％。
6，6-二甲氧基-2-甲基己-2，4-二烯酸酯(10)2(ACL-G29-5)將內(nèi)鎓鹽6(7.80g，22mmol)溶解在二氯甲烷(65ml)中。加入富馬醛單(二甲縮醛)9(2.80g，17mmol)溶液并將該溶液攪拌過夜。于減壓條件下，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑。粗產(chǎn)品的1H核磁共振指示存在所需產(chǎn)物。一旦靜止下來就生成晶體(推測為氧化三苯基膦)。將該固體(通過真空過濾干燥后為14.1g)在石油醚中混為漿液并進(jìn)行過濾。將濾液濃縮以生成一種帶有固體沉淀物的黃色的油，將該沉淀物溶解于二氯甲烷(15ml)中并在Biotage 4cm×7.5cm柱上進(jìn)行色譜，用二氯甲烷進(jìn)行洗脫以生成了1.8g黃色的油10，產(chǎn)率為50％。該黃色的油的1H核磁共振譜與文獻(xiàn)報(bào)道值相一致，但是殘留了微量的二氯甲烷(0.75eq)，因此將該物質(zhì)置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上45分鐘。質(zhì)量減少至1.5g，產(chǎn)率40.6％，且二氯甲烷共振消失。GC分析的主要峰產(chǎn)生在12.6分鐘，87.5％(50℃，保持5min，20℃/min升溫至250℃的最終溫度)。
(ACL-G29-6)將內(nèi)鎓鹽6的溶液(59.2g，0.16mmol)溶解在二氯甲烷(650ml)中，將該溶液在冰浴中冷卻并加入9(25.7g，0.19mol)的溶液。將該溶液攪拌過夜使冰浴得以融化。TLC(正己烷∶Et2O，10∶3)表明至少有3種其它的化合物展開后與產(chǎn)物非?？拷帯Ｍㄟ^GC分析對醛進(jìn)行檢測的結(jié)果表明為50％純。將溶劑除去以生成固體/油的混合物。
(ACL-G29-8)將內(nèi)鎓鹽6(59.2g，0.16mmol)和縮醛9(0.19mol)在二氯甲烷(1.1L)中偶聯(lián)并如上述進(jìn)行處理得到80g黃綠色的油。將一部分粗反應(yīng)混合物(最初的80g中的4.13g)置于庫式蒸餾器(kugelrohr)上并在50℃/250毫托的條件下進(jìn)行蒸餾。濃縮獲得2.28g的無色的油，1H核磁共振表明其為初始的醛，而1.85g的產(chǎn)物10仍保留在蒸餾釜中。在50℃/200毫托的條件下進(jìn)行庫式(kugelrohr)蒸餾從大量的粗產(chǎn)物中除去揮發(fā)性成分(凈重35g)。
2-甲基-6-氧代-己-2，4-二烯酸乙酯(11)2(ACL-G29-9)將來自試驗(yàn)蒸餾釜的縮醛10(ACL-G29-8，1.85g，9mmol)溶解在丙酮(33ml)中。加入去離子水(0.50ml)和大孔樹脂15(0.35g，以丙酮預(yù)洗滌)。攪拌該混合物20分鐘。過濾并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上進(jìn)行濃縮以生成1.53g黃綠色的油。在4.5cm×7cm的Biotage柱上進(jìn)行色譜，并用含有15％Et2O的己烷進(jìn)行洗脫。這一體系提供的是不完全的分離，但是分離出0.32g的主要產(chǎn)物，并對之進(jìn)行分析；1H核磁共振譜與文獻(xiàn)值相一致，IR(1711，1682cm-1)與所需產(chǎn)物相一致。GC 95.6％。回收到另外的0.35g產(chǎn)物，但是其或多或少地?fù)诫s有極性物質(zhì)。1H核磁共振譜顯示為相當(dāng)干凈的物質(zhì)。GC 90.6％。產(chǎn)率42％。
2，7-二甲基辛-2，4，6-三烯-1，8-二酸二乙酯(12)2(ACL-G29-10)將來自G29-9的醛11(0.65g，3.5mmol)溶解在二氯甲烷中并進(jìn)行磁性攪拌。加入內(nèi)鎓鹽(1.59g，4.4mmol)。該淡黃綠色溶液在幾分鐘內(nèi)變?yōu)樯畎档狞S色。10分鐘后進(jìn)行TLC，結(jié)果表明起始物質(zhì)幾乎被完全消耗。攪拌20小時(shí)后，通過部分填充硅膠的移液管對反應(yīng)混合物(褐色的溶液)過濾。將濾液濃縮以產(chǎn)生褐色的固體。用少量CHCl3將該固體溶解在含有5％Et2O的己烷中。在4cm×7.5cm的Biotage柱上進(jìn)行色譜，用含有5％Et2O的己烷進(jìn)行洗脫。分離出0.45g白色結(jié)晶固體的主要產(chǎn)物，產(chǎn)率50％。1H核磁共振譜與文獻(xiàn)報(bào)道數(shù)據(jù)相一致。
(ACL-G29-14)色譜純化后，如上所述制備21.8g的額外量的12，產(chǎn)率為81.6％。1H核磁共振譜與所需產(chǎn)物相一致。
2，7-二甲基辛-2，4，6-三烯-1，8-二醇(13)2(ACL-G29-11)將二酯12(0.45g，1.8mmol)溶解在無水己烷(15.0ml)中。看上去好像一些物質(zhì)溶解了，但是該混合物非?；鞚?。當(dāng)在-78℃浴中冷卻該混合物時(shí)，更多的物質(zhì)開始從溶液中顯露出來。將純的DIBAL-H(2.50ml)溶解在無水己烷中(總體積10.0ml)，并且當(dāng)在干冰浴中冷卻所述二酯時(shí)其中的一部分(大約2ml)被不明顯地虹吸到反應(yīng)混合物中。添加額外量的DIBAL-H溶液直至添加的總量達(dá)5.0ml(6.7mmol)。將該CO2浴升溫。攪拌2小時(shí)50分鐘后，TLC表明所述二酯被完全消耗。浴溫被調(diào)節(jié)至-20℃，允許在20分鐘內(nèi)升溫至0℃。用H2O/硅膠(2ml/7g)混合物處理30分鐘。加入K2CO3和MgSO4。過濾以除去固體并用二氯甲烷進(jìn)行徹底漂洗。進(jìn)行濃縮以生成0.14g的白色固體，產(chǎn)率50％。注TLC Rf＝0.21(5％MeOH/CHCl3)極性很強(qiáng)。用二氯甲烷漂洗可能不足以回收到全部產(chǎn)物。1H核磁共振譜與文獻(xiàn)報(bào)道值相一致。
(ACL-G29-15)將所述二酯(5.4g，21mmol)溶解在無水己烷中(175ml，低溶解度)，在-78℃浴中進(jìn)行冷卻并用DIBAL-H溶液(14.5ml，50ml無水己烷中)處理35分鐘。在添加過程中觀察到氣體劇烈產(chǎn)生。所得漿液的顏色最初從白色變?yōu)榘迭S色，當(dāng)加入額外的DIBAL-H時(shí)，樣色變淺。在2小時(shí)內(nèi)使升溫至-40℃，然后轉(zhuǎn)移至-28℃浴中過夜。用H2O/硅膠(4ml/14.4g)的均質(zhì)混合物處理該反應(yīng)混合物30分鐘。加入MgSO4(7.5g)和K2CO3(5.1g)，并將該反應(yīng)混合物從冷卻浴中移走。攪拌20分鐘，然后在燒結(jié)的玻璃漏斗中進(jìn)行過濾。用二氯甲烷洗滌所得固體，這使得形成相當(dāng)大量的沉淀物。當(dāng)放置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上時(shí)進(jìn)行升溫而溶解了沉淀出的固體。用EtOAc(4×75ml)洗滌殘留在燒結(jié)的玻璃漏斗上的固體并濃縮濾液。
CH2Cl2漂洗提供了1.7g淺黃色固體，1H核磁共振與文獻(xiàn)報(bào)道值相一致；EtOAc漂提供了1.0g乳白色的固體，1H核磁共振與文獻(xiàn)報(bào)道值相一致；共回收了2.7g，產(chǎn)率75％。
(ACL-G29-17)于N2中將所述二酯(16.4g，6.5mmol)在無水己烷(500ml)進(jìn)行攪拌，并冷卻至-78℃。在1小時(shí)期間加入DIBAL-H(45ml，253mmol)的己烷(150ml)溶液。使升溫至-30℃并攪拌過夜(總時(shí)間17.5小時(shí))。加入H2O/硅膠(12.3g/43.7g)的均質(zhì)混合物，手動渦旋該混合物45分鐘。加入K2CO3(15.5g)和MgSO4(23.5g)。再渦旋30分鐘。在燒結(jié)的玻璃漏斗中進(jìn)行過濾，用二氯甲烷進(jìn)行漂洗(形成ppt級，推測是由蒸發(fā)式冷卻所致)，并濃縮濾液。用EtOAc(約100ml一份，總體積2L)洗滌該固體幾遍并與原始濾液合并。濃縮以生成8.9g的黃色固體，粗產(chǎn)率81％。1H核磁共振譜與所需產(chǎn)物相一致。
2，7-二甲基辛-2，4，6-三烯-1，8-二醛(14)2(ACL-G29-12)
在N2中在冰浴中冷卻MnO2(7.80g，90mmol)漿液。通過移液管加入作為丙酮溶液(5.0ml)的二醇13(0.14g，0.8mmol)溶液。將額外的2.0ml丙酮用以漂洗燒瓶并完成轉(zhuǎn)移。攪拌該反應(yīng)混合物的同時(shí)允許冰浴融化過夜。通過過濾經(jīng)Hyflo將固體除去并進(jìn)行濃縮以產(chǎn)生黃色固體。用最小量的CHCl3將該物質(zhì)溶解在10％的Et2O/己烷中，并將其施加到硅膠柱(30mm×190mm)上并用10％的Et2O/己烷洗脫。當(dāng)洗脫該產(chǎn)物時(shí)，可以跟蹤作為黃色帶的該產(chǎn)物，分離到37mg淺黃色固體14，產(chǎn)率26％。1H核磁共振譜與文獻(xiàn)報(bào)道值相一致。
(ACL-G29-16)在N2中在冰浴中冷卻二醇13(2.70g，16mmol)的丙酮(500ml)溶液，在20分鐘期間內(nèi)一份一份地加入MnO2(60.0g，0.69mol。當(dāng)將該反應(yīng)混合物攪拌過夜時(shí)，允許冰浴融化。經(jīng)Hyflo過濾該反應(yīng)混合物，并濃縮濾液以產(chǎn)生1.6g的黃色固體，粗產(chǎn)率61％。1H核磁共振譜與文獻(xiàn)報(bào)道值相一致。將該粗制的黃色固體溶解在二氯甲烷中(同時(shí)添加少量含有10％Et2O的己烷)，并裝填到4×7.5cm Biotage硅膠柱上。先用含有10％醚的己烷(1L)洗脫，然后用極性增強(qiáng)的含有15％Et2O己烷(1L)和含有20％Et2的己烷(0.5L)洗脫。回收到1.0g黃色固體，產(chǎn)率38％。1H核磁共振譜與所需產(chǎn)物相一致。
(ACL-G29-21)在N2中在冰浴中冷卻溶于丙酮(500ml)中的二醇(9.31g，60mmol)溶液。加入MnO2(100g，1.15mol)，并攪拌該反應(yīng)混合物過夜同時(shí)允許冰浴融化。24小時(shí)后通過紅外線檢測，發(fā)現(xiàn)形成了顯著量的產(chǎn)物，但仍存在相當(dāng)多的醇。添加額外50g氧化劑并繼續(xù)再攪拌過夜。過濾一部分的反應(yīng)混合物并通過1H核磁共振進(jìn)行檢測，根據(jù)起始物質(zhì)的消耗，該反應(yīng)看上去已經(jīng)完成。經(jīng)Hyflo墊過濾余下的反應(yīng)混合物，并用丙酮徹底地漂洗。濃縮以生成深黃色的固體。與40ml苯共沸后于40℃在真空中干燥5小時(shí)，然后于室溫過夜?；厥樟繛?.28g，產(chǎn)率58％。1H核磁共振和紅外線光譜與所需產(chǎn)物相一致。
惕各酸甲酯(16)
在裝有架設(shè)的攪拌器、冷凝器和溫度計(jì)的2L的三頸燒瓶中，將溶于900ml甲醇中的惕各酸15(89.8g；0.9mol)和5ml濃硫酸(0.09mol)溶液加熱回流20小時(shí)。將該溶液冷卻至25℃，并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于30℃和27in Hg真空的條件下氣提過量的甲醇。對回收的甲醇蒸餾物的GLC分析表明產(chǎn)物位于塔頂餾分(overheads)中。將所得的兩相、淺褐色濃縮物溶解在500ml乙醚中，并相繼用250ml水、250ml 10％碳酸氫鈉水溶液和250ml飽和鹽水洗滌。通過無水碳酸鉀干燥該醚溶液，將其過濾并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于25℃和17in Hg真空的條件下氣提以生成43.6g(產(chǎn)率42％)接近無色的油的粗惕各酸甲酯。GLC分析顯示出了一種主要的揮發(fā)性產(chǎn)物，相對起始的惕各酸的滯留時(shí)間3.8分鐘其滯留時(shí)間為2.7分鐘。在CDCl3中進(jìn)行的質(zhì)子核磁共振顯示出了伴隨微量的乙醚污染的期望信號1.79ppm(d，3H)，1.83(s，3H)，3.73(s，3H)，6.86(q，6.6Hz)。IR(純KBr)在1718cm-1處的酯羰基。該油的使用與在下一步驟中的使用相同。
γ-溴惕各酸甲酯(17)5在配備有高架攪拌器、溫度計(jì)和冷凝器的1L的四頸燒瓶中，將溶于500ml四氯化碳中的粗制惕各酸甲酯(43.6g；0.38mol)、N-溴丁二酰亞胺(68g；0.38mol)和70％的苯甲酰過氧化物(5.34g；0.015mol)的攪拌混合物加熱回流兩小時(shí)。冷卻至20℃后，吸濾出不溶的丁二酰亞胺(38.1g，100％回收)。用250ml水洗滌濾液3次，通過MgSO4干燥，然后在25℃、26in Hg真空的條件下于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上進(jìn)行氣提以生成78.8g的黃色的油。在CDCl3中對該油進(jìn)行的質(zhì)子核磁共振產(chǎn)生了復(fù)雜的核磁共振譜。用于所需γ-溴代酯的亞甲基質(zhì)子被歸屬于以4.04ppm(8.6Hz)為中心的雙峰，而α-溴代異構(gòu)體的相同質(zhì)子被歸屬于4.24ppm處的單峰。這些信號的質(zhì)子積分以及從1.6ppm至2.0ppm的甲基多重峰暗示了以下組成(mol％)γ-溴代酯59％α-溴代酯26％起始物質(zhì)15％
將這一粗制的油不進(jìn)行任何純化而用于下一步驟中。
也僅使用0.87當(dāng)量的N-溴丁二酰亞胺，以0.05mol的規(guī)模，在其他條件相同的情況下進(jìn)行這一反應(yīng)?；谄滟|(zhì)子核磁共振譜，估計(jì)這一粗制的油的組分為52％的γ-溴代酯、24％的α-溴代酯和23％未反應(yīng)的惕各酸甲酯。對這一油進(jìn)行的GLC分析略更復(fù)雜，顯示出了其它的次要成分。
γ-溴惕各酸甲酯的三苯基膦鎓鹽(19)6在配備有溫度計(jì)、100ml的恒壓加料漏斗和連接到靜態(tài)氮系統(tǒng)的冷凝器的2L的四頸燒瓶中，在1.75小時(shí)期間內(nèi)逐滴加入溶于350ml苯中的三苯基膦(95g；0.36mol)來處理溶于350ml苯中的粗制γ-溴惕各酸甲酯(78.8g)的攪拌溶液。在其它環(huán)境條件下，該混合物的溫度是放熱的從24℃稍升至27℃。添加后，劇烈攪拌該反應(yīng)混合物過夜以提供一種白色固體的漿液，該漿液含有粘附到所述燒瓶壁上的微黃色的膠。將該白色固體吸濾到燒結(jié)的玻璃漏斗上，而不破壞所述微黃色的膠。用100ml苯洗滌所述燒瓶兩次并將洗滌液傾倒在過濾器上。用50ml苯洗滌濾餅，然后用50ml己烷洗滌濾餅兩次。在環(huán)境溫度下將濕濾餅在真空烘箱中干燥5.5小時(shí)。在加熱的條件下將干燥的白色粉末[93g；mp＝125℃(分解(dec.))]溶解在150ml乙腈中得到清澈的黃色溶液。將300ml乙酸乙酯添加到這一熱溶液中，在添加了約100ml乙酸乙酯后該產(chǎn)物開始結(jié)晶。將燒瓶保存在冰箱中過夜。吸濾產(chǎn)物并用最小量的比例為1∶2的乙腈和乙酸乙酯溶液洗滌；45.0g，mp＝187℃～190℃(分解)，文獻(xiàn)mp＝183℃(分解)。
從10ml乙腈和20ml乙酸乙酯中重結(jié)晶反應(yīng)燒瓶中的膠粘固體。同樣，額外的固體從苯母液中過夜沉淀出來。以相同的方式過濾和重結(jié)晶這些固體。將兩個(gè)樣本都冷凍2小時(shí)，并進(jìn)行吸濾以得到額外13.3g的產(chǎn)物。
在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上氣提該苯濾液，將黃色的油溶解在10ml乙腈中，并用20ml乙酸乙酯進(jìn)行沉淀。將漿液保存在冰箱中過夜以得到作為白色固體的額外產(chǎn)物；4.6g，m.p.185℃～187℃(分解)。所需的作為白色固體的膦鎓鹽的總產(chǎn)量為62.9g或基于粗制惕各酸甲酯的產(chǎn)率為36.2％。質(zhì)子核磁共振(CDCl3，TMS)ppm 1.55(d，4Hz，3H)，3.57(s，3H)，4.9(dd，15.8和7.9Hz，2H)，6.55(寬q，6.6-7.9Hz，1H)，7.4-7.9(m，15H)。質(zhì)子去偶的磷核磁共振(CDCl3，5％H3PO4水溶液同軸外標(biāo))22.08ppm。局部碳核磁共振(CDCl3)CO2CH3(166.6ppm，d，JCP＝3Hz)，烯屬CH(117.5ppm，d，JCP＝86.1Hz)，CO2CH3(52.0ppm)，Ph3P-CH2(25.4ppm，d，JCP＝50.6Hz)和CH3(13.4ppm，d，JCP＝2.4Hz)。部分IR(KBr片)酯羰基在1711cm-1處。
三苯基正膦(20)6在25℃在配備有架設(shè)的攪拌器、加料漏斗和溫度計(jì)的5L的五頸燒瓶中，將溶于250ml水中的氫氧化鈉(5.12g；0.128mol)溶液在41分鐘期間逐滴加入到劇烈攪拌的溶于2,500ml水中的γ-溴惕各酸甲酯的三苯基膦鎓鹽(58.3g；0.128mol)溶液中。在室溫下攪拌該黃色的漿液10分鐘，然后進(jìn)行吸濾。用1,800ml水洗滌濾餅，然后用氮?dú)鈱釉谶^濾器上充分干燥。然后于室溫和27”Hg真空的條件下，將該黃色的固體在真空干燥器中在P2O5上干燥過夜，得到35.3g(產(chǎn)率73.7％)。mp＝145℃-150℃。文獻(xiàn)mp＝145℃-165℃。在CDCl3中進(jìn)行的質(zhì)子去偶的磷核磁共振顯示出位于17.1ppm和21.1ppm處的兩個(gè)峰，比率為93∶7。質(zhì)子核磁共振(CDCl3，TMS)ppm 1.89(s，3H)，3.58(s，3H)，7.3-7.8(m，17H)。在這核磁共振譜中也能在1.74ppm處看見一個(gè)小但卻可檢測到的單峰，該單峰歸屬于雜質(zhì)。這一固體不進(jìn)行純化而用于下一步驟中。
藏花酸二甲酯(21)6(ACL-G29-18)將二醛14(0.48g，2.9mmol)加入100ml的圓底燒瓶中。加入20ml苯并通過磁力攪拌將固體溶解。加入內(nèi)鎓鹽，用額外的10ml苯將該化合物洗滌到該燒瓶中。升溫進(jìn)行劇烈回流6小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻過夜。與文獻(xiàn)報(bào)道相反，形成非常少量的固體。濃縮該反應(yīng)混合物，將殘余物溶解于30ml MeOH中并煮沸30分鐘。一冷卻至室溫就通過真空過濾收集固體。通過將20mg該固體溶解到0.5ml CDCl3中制備核磁共振樣本，有些令人吃驚的是這必需用加熱槍升溫以完全溶解。記錄1H核磁共振譜并發(fā)現(xiàn)該共振譜與所需產(chǎn)物相一致。剩下的物質(zhì)被溶解在熱的苯中并進(jìn)行過濾，將濾液濃縮并溶解于MeOH中，在冰浴中冷卻并收集到334mg紅色固體，產(chǎn)率33％。這一物質(zhì)并未顯示出比最初分離到的物質(zhì)更易溶。
(ACL-G29-18A)在N2中將二醛14(5.78g，35mmol)溶解在300ml苯中。加入內(nèi)鎓鹽20(35.3g，94mmol)，將混合物升溫回流6小時(shí)，形成暗紅色的溶液。將該反應(yīng)混合物冷卻過夜后，通過真空過濾收集紅色固體并用甲醇進(jìn)行漂洗。將其轉(zhuǎn)移至500ml RBF中并以約65ml甲醇回流30min。冷卻并收集紅色固體。用冷的甲醇漂洗并在真空中進(jìn)行干燥以得到3.00g紅色固體21。1H核磁共振和IR譜與所需產(chǎn)物相一致。
在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮最初的濾液(來自反應(yīng)混合物)，將深色殘留物溶于100ml甲醇中并回流40分鐘。在冰浴中冷卻并通過真空過濾收集到紅色固體。用冷的甲醇漂洗并在真空中進(jìn)行干燥，得到1.31g紅色固體21。1H核磁共振譜與所需產(chǎn)物相一致。
將濾液合并、濃縮，并溶于75ml甲醇中，于室溫放置過夜。通過真空過濾回收紅色固體0.38g。1H核磁共振譜與所需產(chǎn)物相一致。
在所述濾液中形成了更多固體。通過真空過濾進(jìn)行分離以得到0.127g紅色固體。IR結(jié)果由于前面相一致?？偦厥?.89g，產(chǎn)率39％。
用THF/NaOH進(jìn)行皂化嘗試(ACL-G29-19)加入于THF(2ml)和1N NaOH(0.56ml，2eq)中的二酯21(100mg，0.28mmol)的攪拌懸浮液。在室溫下攪拌過夜。TLC只顯示出起始物質(zhì)。升溫進(jìn)行回流，幾小時(shí)后未發(fā)生變化。加入6ml THF以試圖溶解更多的固體，但這似乎并不起作用。繼續(xù)回流過夜。加入更多THF(約6ml，TLC只顯示出起始物質(zhì))，再回流過夜。濃縮并通過1H核磁共振進(jìn)行檢測，結(jié)果只顯示起始物質(zhì)(基于甲基和甲酯的綜合考慮)。溶解在10ml吡啶中，同時(shí)在加熱罩中進(jìn)行升溫。加入2.5N NaOH(1.0ml)。幾分鐘后該暗橙色溶液變?yōu)樯罴t色。移去加熱罩，開始形成固體，重新加上罩30分鐘，然后在室溫?cái)嚢柽^夜。在高度真空中進(jìn)行濃縮。殘留物不溶于氯仿、DMSO、吡啶，微溶于水。IR(石蠟糊)顯示出起始材料的C＝O吸光特性。
用2.5N NaOH和THF進(jìn)行皂化(ACL-G29-20)將二酯21(37mg，0.10mmol)稱重并加入燒瓶中并在4ml乙醚中進(jìn)行攪拌。溶劑呈橙色時(shí)仍存在固體。加入1ml的2.5N NaOH并升溫以進(jìn)行回流。半小時(shí)后，大多數(shù)醚已蒸發(fā)。用THF(3ml)替換該醚，并繼續(xù)回流幾小時(shí)。通過真空過濾收集固體，用去離子水漂洗然后在真空烘箱中進(jìn)行干燥。IR只顯示出起始物質(zhì)。
用40％NaOH進(jìn)行皂化(1)(ACL-G29-22)將二酯21(32mg，8.9mmol)稱重并加入燒瓶中并在甲醇(1.5ml)中進(jìn)行攪拌。溶劑呈橙/紅色時(shí)仍存在固體。加入1.5ml 40％NaOH并升溫以進(jìn)行回流17小時(shí)。冷卻至室溫后，通過真空過濾收集橙色固體并用去離子水進(jìn)行漂洗。于40℃條件下，在真空中進(jìn)行干燥以得到21mg橙色粉末1，產(chǎn)率59％。IR(KBr片)3412cm-1，1544cm-1，1402cm-1，該化合物可能是吸濕性的，高磁場羰基位移與共軛作用相一致。
(ACL-G29-22A)用35mg二酯1重復(fù)回流15小時(shí)。在冰浴中冷卻該反應(yīng)混合物，通過真空過濾進(jìn)行收集并用冷卻的去離子水進(jìn)行洗滌。于40℃條件下在真空中進(jìn)行干燥。回收到25.5mg橙色固體1，產(chǎn)率65％。
(ACL-G29-23)將二酯21(0.48g，1.3mmol)溶于甲醇(15.0ml)和40％氫氧化鈉(15.0ml)中并加熱以進(jìn)行回流。大約2小時(shí)后，該非均相的紅色混合物變?yōu)槌壬?小時(shí)后停止加熱，使該混合物冷卻過夜。通過真空過濾收集橙色固體并用冷卻的去離子水進(jìn)行洗滌。在真空中進(jìn)行干燥，得到0.36g松散的橙色固體，產(chǎn)率68％。
(ACL-G29-24)
將二酯21(1.10g，3.1mmol)置于100ml的回收瓶中并在甲醇(20ml)和40％NaOH(20ml)中加熱回流12小時(shí)。在冰浴中冷卻后，通過真空過濾收集橙色固體并用去離子水進(jìn)行漂洗。在真空中進(jìn)行干燥得到1.4g產(chǎn)物，產(chǎn)率100％。C20H22O4Na2-0.4H2O的分析計(jì)算值C，63.29；H，6.05；Na，12.11；H2O，1.90。實(shí)測值C，63.41；H，6.26；Na，11.75；H2O，1.93。
(ACL-G29-25)在甲醇(80ml)和40％NaOH(60ml)中將二酯21(3.00g，8.4mmol)回流12小時(shí)。如上述分離到2.7g橙色固體產(chǎn)物，產(chǎn)率80％。C20H22O4Na2-0.4H2O的分析計(jì)算值C，63.29；H，6.05；Na，12.11；H2O，1.90。實(shí)測值C，63.20；H，6.00；Na，11.93；H2O，1.81。將樣本ACL-G29-23、ACL-G29-24和ACL-G29-25在瑪瑙研缽上研磨并將它們合并為ACL-G29-A。
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實(shí)施例2反式降胭脂樹酸(norbixinate)鉀的合成 通過將含有共軛的碳-碳雙鍵的對稱型C20二醛與[1-(乙酯基)亞甲基]三苯基正膦相偶聯(lián)合成反式降胭脂樹酸鉀。該化合物的制備與先前所列的對反式藏花酸鈉的制備相類似，不同之處在于用合適的環(huán)狀結(jié)構(gòu)替換起始物質(zhì)呋喃。然后用KOH/甲醇溶液對這一產(chǎn)物進(jìn)行皂化。
實(shí)施例3更長的BTCS的合成 通過將含有共軛的碳-碳雙鍵的對稱型C10二醛加入到過量的[3-甲酯基-2-丁烯-1-亞基]三苯基正膦中來合成上述化合物。該化合物的制備與先前所列的對反式藏花酸鈉的制備相類似，不同之處在于用合適的環(huán)狀結(jié)構(gòu)替換起始物質(zhì)呋喃。然后用例如色譜這樣的程序分離該反式40-碳產(chǎn)物。然后用NaOH/甲醇溶液對這一產(chǎn)物進(jìn)行皂化。
實(shí)施例4通過吸入施用TSC經(jīng)吸入途徑對大鼠施用TSC。直接將TSC送入10只大鼠的肺部。這是通過將管子插入到氣管中并用約3ml～6ml的空氣對0.2ml的TSC溶液(溶于稀碳酸鈉溶液中的TSC)進(jìn)行霧化完成的。對于所有的研究劑量(0.5mg/kg～2mg/kg)，在給藥后1分鐘內(nèi)約20％的藥物存在于血流中。對于0.8mg/kg～1.6mg/kg的劑量，所述藥物在血流中存在至少2小時(shí)。
實(shí)施例5改良的合成方法2-丁烯基-1，4-二膦酸四乙酯的制備
給250ml的三頸燒瓶配備涂覆有特氟隆的熱電偶、60ml的恒壓添料漏斗和簡單的蒸餾頭。在氮?dú)猸h(huán)境中，用受JKem控制器控制的加熱罩于140℃加熱純的亞磷酸三乙酯(59ml；0.344mol)。在93分鐘的期間內(nèi)，在134℃～144℃的條件下，逐滴加入反式1，4-二氯-2-丁烯(26.9g；0.215mol)和亞磷酸三乙酯(35ml；0.204mol)的溶液。然后將該澄清的溶液在氮?dú)庵杏?40℃保存。37分鐘后，對于1ml乙酸乙酯中的等分試樣(1滴)進(jìn)行氣相色譜分析，結(jié)果顯示出所需產(chǎn)物、中間產(chǎn)物和兩種起始物質(zhì)。
于140℃進(jìn)行15.5小時(shí)后，等分試樣(0.5ml EtOAc中的1滴)的氣相色譜分析顯示出所需產(chǎn)物，且沒有可檢測到的起始二氯化物或中間產(chǎn)物。16小時(shí)后，在氮?dú)庵袑⒃摐\黃色溶液冷卻至室溫。在帶有雙球式接收器的庫式蒸餾器中對該淺黃色的油進(jìn)行蒸餾，并在于25℃～100℃和0.1托～0.2托的條件下在干冰-丙酮浴中將球式接收器進(jìn)一步進(jìn)行冷卻以獲得作為前餾分的無色的油(14.8g)。氣相色譜顯示在庫式蒸餾罐中僅有產(chǎn)物。在140℃和0.1托～0.15托的條件下在庫式蒸餾器中對這一淺琥珀色的油進(jìn)行蒸餾而得到66.45g的無色油形式的蒸餾物(產(chǎn)率94.1％)。氣相色譜顯示只有一種揮發(fā)性組分。GC-MS分析表明這一組分即為所需產(chǎn)物，在328m/z處給出小的分子離子峰，在191m/z處給出基礎(chǔ)離子峰(PO3Et2的丟失)。質(zhì)子核磁共振與所需產(chǎn)物相一致。碳核磁共振與所需雙(膦酸二酯)相一致，顯示出僅有與烯丙基碳的遠(yuǎn)程偶合(W-偶合)和正常碳-磷偶合。
罐中的殘留物為0.8g淺黃色的油。
1，1，8，8-四甲氧基-2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯的制備
在氮?dú)猸h(huán)境中，相繼用無水碳酸鉀(10.2g；73.8mmol)和粉末狀氫氧化鈉(1.25g；31.2mmol)處理于10ml甲苯和10ml環(huán)己烷中的反式-2-丁烯基-1，4-二膦酸四乙酯(3.3g；10.0mmol)、丙酮醛二甲縮醛(2.6ml；21.5mmol)的磁力攪拌混合物。該溶液立即變?yōu)辄S色。在氮?dú)庵杏诃h(huán)境溫度攪拌所得漿液。該反應(yīng)緩慢放熱，在約25分鐘后達(dá)到最高值38℃。同樣，形成了膠粘的沉淀物，其阻礙了磁力攪拌。2.5小時(shí)后，該黃橙色溶液的等分試樣(0.5ml甲苯中的1滴)的氣相色譜顯示出兩種起始物質(zhì)和3種其它新成分。
在環(huán)境溫度于16.75小時(shí)后，該橙色溶液的等分試樣(0.5ml甲苯中的1滴)的氣相色譜顯示僅有少量的起始雙(膦酸二酯)。在冰浴中冷卻所得的具有膠粘物的橙色混合物(不能攪拌)，并用100ml的10％NaCl水溶液使其停止反應(yīng)。通過使用刮鏟將固體溶解在該水溶液中。然后用200ml的比例為1∶1的醚∶己烷進(jìn)行提取。用10％NaCl水溶液(200ml)洗滌有機(jī)層，然后再用飽和鹽水(100ml)進(jìn)行洗滌。通過Na2SO4干燥該無色有機(jī)層。氣相色譜顯示出3種主要組分，沒有可檢測到的起始物質(zhì)雙(膦酸二酯)。薄層層析顯示出兩個(gè)主要斑點(diǎn)和一個(gè)次要斑點(diǎn)。吸濾除去Na2SO4并用醚進(jìn)行洗滌。于35℃在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮濾液而得到1.8g無色的油。GC-MS分析顯示這3種主要的揮發(fā)性組分是異構(gòu)產(chǎn)物，在256m/z處給出分子離子峰，在75m/z處給出基礎(chǔ)離子峰[(MeO)2CH+]。質(zhì)子核磁共振的結(jié)果與伴隨有其它未鑒定的雜質(zhì)的異構(gòu)產(chǎn)物的混合物相一致。粗產(chǎn)物的產(chǎn)率＝70.3％。
1，1，8，8-四甲氧基-2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯的制備
相繼用無水碳酸鉀(196g；1.42mol)和粉末狀氫氧化鈉(24.0g；0.60mol)處理于200ml甲苯和200ml環(huán)己烷中的反式-2-丁烯基-1，4-二膦酸四乙酯(63.2g；0.19mol)、丙酮醛二甲縮醛(50ml；0.41mol)的機(jī)械攪拌混合物。該溶液立即變?yōu)辄S色。在氮?dú)庵杏诃h(huán)境溫度攪拌所得漿液。該反應(yīng)在約11分鐘后放熱至61℃，在冰浴中冷卻該攪拌混合物使溫度降至35℃。在29℃～35℃的條件下4.7小時(shí)后，等分試樣(0.5ml甲苯中的3滴)的氣相色譜分析顯示沒有起始的二(膦酸酯)。約5小時(shí)后，在冰浴中將該混合物冷卻至13℃，并當(dāng)溫度升至30℃時(shí)加入10％氯化鈉水溶液(400ml)。加入更多的10％氯化鈉水溶液(1,500ml)，并用3,000ml的比例為1∶1的醚∶己烷提取該混合物。用10％氯化鈉水溶液(2×1,000ml)洗滌帶色的黃色有機(jī)層，然后用飽和鹽水(1,000ml)進(jìn)行洗滌。通過Na2SO4將該帶色的黃色有機(jī)層干燥，過濾并于30℃在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上進(jìn)行濃縮而得到43.4g淺黃色的油。氣相色譜顯示出3種主要組分，其包含該混合物的89％，而沒有可檢測到的起始二(膦酸酯)。TLC分析顯示出一種主要組分和3種次要組分。
質(zhì)子核磁共振顯示出異構(gòu)產(chǎn)物和甲苯。在50℃和0.2托的條件下在庫式蒸餾器上對該油進(jìn)行進(jìn)一步的蒸發(fā)30分鐘，得到31.9g的產(chǎn)物。質(zhì)子核磁共振顯示出異構(gòu)的二(縮醛)產(chǎn)物而沒有可檢測到的甲苯。
產(chǎn)率＝65.5％。
以更高的有效負(fù)載制備2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯二醛
在氮?dú)猸h(huán)境中，用受Jkem控制器通過涂覆有特氟隆的熱電偶控制的加熱罩在45℃條件下加熱于四氫呋喃(160ml)、水(80ml)和冰醋酸(320ml)中的粗制1，1，8，8-四甲氧基2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯異構(gòu)體(31.9g；124.4mmol)的磁力攪拌溶液(9:03am)。約30分鐘后，該混合物放熱達(dá)最高溫度54℃，然后回到45℃的設(shè)定值。3小時(shí)后，等分試樣(0.5mlTHF中的3滴)氣相色譜顯示出一些殘留的起始物質(zhì)、兩種主要產(chǎn)物和一種次要產(chǎn)物。在冰浴中將該黃色的反應(yīng)溶液冷卻至21℃，然后用4∶1的醚∶二氯甲烷(2,000ml)進(jìn)行稀釋。然后相繼用20％NaCl水溶液(2,000ml×2)、4∶1的20％NaCl水溶液∶1M的NaOH水溶液(2,000ml×3)1和20％的NaCl水溶液(1,000ml×2)洗滌這一溶液(注1頭兩次洗滌顯然除去了乙酸，因?yàn)閜H值呈中性。第三次洗滌變?yōu)榧t色且仍為堿性，這表明除去了副產(chǎn)物)。通過MgSO4將黃色有機(jī)層干燥，過濾并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上進(jìn)行濃縮而得到18.9g黃色固體。氣相色譜顯示出一種主要成分和一種次要成分起始二(縮醛)。TLC分析顯示出一個(gè)主要斑點(diǎn)和幾個(gè)次要的、極性更強(qiáng)的雜質(zhì)。將該固體溶解在250ml回流甲醇中、冷卻至室溫然后在冰浴中冷卻1小時(shí)。對該漿液吸濾得到14.15g的黃色柔軟針狀物。氣相色譜顯示出95∶5的異構(gòu)的二醛的混合物。用200ml回流甲醇對該固體再次進(jìn)行重結(jié)晶，冷卻至室溫，然后在冰箱中冷卻過夜。
吸濾所述漿液并用制冷器冷凍過的甲醇進(jìn)行洗滌而得到11.2g黃色針狀物。氣相色譜顯示出97∶3的異構(gòu)的二醛的混合物。TLC分析顯示出一個(gè)斑點(diǎn)。于45℃的條件下，將該針狀物在真空烘箱中干燥160分鐘直至重量恒定為10.75g。
未校正的mp＝154℃～156℃。文獻(xiàn)2-mp＝161℃～162℃(注2Dictionary of Organic Compounds，第10版2，Sept，2002)。質(zhì)子核磁共振和碳核磁共振與所需的對稱型二醛一致。
將兩份來自重結(jié)晶的甲醇濾液合并在一起。薄層層析圖顯示出產(chǎn)物和其他的雜質(zhì)。將濾液濃縮，并收集如下幾個(gè)收獲物。

收獲物2和3將這些合并的收獲物溶解在20ml的回流乙酸乙酯中，冷卻到室溫，然后在制冷器中冷卻1小時(shí)。吸濾所述漿液并用制冷器冷凍過的乙酸乙酯進(jìn)行洗滌而得到1.95g黃色針狀物。氣相色譜顯示出86∶14的異構(gòu)體混合物。將該固體在乙酸乙酯(10ml)中進(jìn)行重結(jié)晶而得到1.55g黃色針狀物。氣相色譜顯示出92∶8的異構(gòu)體比率。從乙酸乙酯(10ml)進(jìn)行第3次重結(jié)晶提供了1.25g黃色針狀物。mp＝152℃～154℃。氣相色譜顯示出96∶4的異構(gòu)體比率。質(zhì)子核磁共振確認(rèn)為所需二醛。GC-MS分析與所需二醛相一致，顯示出164m/z處的明顯的M+離子峰和91m/z處的基礎(chǔ)離子峰。
將乙酸乙酯濾液與來自甲醇濾液的黃色固體(收獲物4)合并在一起，并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上進(jìn)行濃縮而得到6.0g的黃色固體。氣相色譜顯示出比例為53∶34的兩種異構(gòu)體的混合物及其他雜質(zhì)。
將該固體溶解在100ml二氯甲烷中，并加入Davisil級643硅膠(35.5g)。于35℃在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上對該混合物進(jìn)行氣提。然后將硅膠及其吸附的物質(zhì)加入Biotage系統(tǒng)的進(jìn)樣組件，所述系統(tǒng)已包含玻璃棉的塞子和一層沙。然后用濾紙蓋住所述硅膠。用溶劑混合物將Biotage 75S柱預(yù)濕，所述混合物的徑向壓力為35psi以及溶劑壓為20psi。用85∶15的正己烷∶乙酸乙酯(6,000ml)洗脫所述柱。獲取包括預(yù)濕階段在內(nèi)的1,000ml空隙體積?；诒訉游龇治鍪占⒑喜⒌玫?50ml餾分。如下述，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于35℃濃縮這些餾分。

餾分5-10在正己烷中將所述黃色固體漿液化并進(jìn)行吸濾而得到2.5g淺黃色的固體。氣相色譜顯示出比率為67∶33的二醛異構(gòu)體混合物。
96％～97％的E，E，E-二醛的總產(chǎn)量＝10.75+1.25＝12.0g(產(chǎn)率58.8％)。
用對甲苯亞磺酸將2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯二醛異構(gòu)化

在氮?dú)猸h(huán)境中，加熱回流2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯二醛及其非所需異構(gòu)體(2.5g；15.2mmol)的2∶1異構(gòu)混合物、4-甲苯亞磺酸(0.35g；2.2mmol)和50ml無水1，4-二噁烷15分鐘。將一等分試樣(7滴)稀釋在0.5ml的比例為4∶1的醚∶二氯甲烷中，并通過K2CO3進(jìn)行干燥。氣相色譜顯示出所需異構(gòu)體和其非所需異構(gòu)體的91∶9的混合物。
在室溫冷卻過夜后，將所得漿液溶解在100ml的比例為4∶1的醚∶二氯甲烷中，并相繼用水(50ml×3)、0.2M的NaOH水溶液(50ml)、水(50ml×2)和飽和鹽水(50ml×3)洗滌。在分層后，將剩余的廢液層(rag layer)溶解在二氯甲烷中。通過MgSO4將合并的有機(jī)層干燥，過濾并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于40℃進(jìn)行濃縮而得到2.2g橙色固體。氣相色譜顯示出所需二醛與非所需異構(gòu)體的比率為93∶7。將該固體在己烷中漿液化，并進(jìn)行吸濾以提供2.15g的橙色固體。通過冷卻至30℃～40℃然后置于制冷器中冷卻1小時(shí)將這一固體從20ml回流乙酸乙酯中重結(jié)晶。對該漿液進(jìn)行吸濾并用制冷器冷凍過的乙酸乙酯進(jìn)行洗滌而得到1.65g黃橙色的針狀物。mp＝158℃～160℃。文獻(xiàn)mp＝161℃～162℃。氣相色譜顯示出所需二醛與非所需異構(gòu)體的比率為96∶4。質(zhì)子核磁共振和碳核磁共振與所需的二醛異構(gòu)體相一致。
產(chǎn)率＝66％。
用亞硫酰氯在甲醇中按比例放大制備惕各酸甲酯 在130分鐘的期間內(nèi)，逐滴加入純亞硫酰氯(397ml；5.44mol)處理于3,000ml甲醇中的惕各酸(397.35g；3.97mol)的機(jī)械攪拌溶液，不進(jìn)行外部冷卻，80分鐘后溫度從14℃上升至50℃。一等分試樣的氣相色譜顯示已完全轉(zhuǎn)化為酯，沒有可檢測到的惕各酸。在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)后，在大氣壓條件下通過鍍銀的帶真空夾層的Vigreux柱(400mm×20mm)對該溶液進(jìn)行蒸餾。2小時(shí)內(nèi)，罐溫為58℃～63℃時(shí)收集主要處于57℃～61℃的冷凝物630ml。氣相色譜顯示在蒸餾物中存在大量的甲酯。
用效率較低的柱(30cm×2cm w/凹槽更少)交換所述Vigreux柱以加速蒸餾速度。在2.25小時(shí)內(nèi)，在罐溫為69℃～71℃時(shí)，收集頭溫為65℃～69℃的蒸餾物1,300ml。氣相色譜顯示在蒸餾物中存在顯著的甲酯。繼續(xù)常壓蒸餾直至罐溫達(dá)到87℃，在此期間在2小時(shí)內(nèi)收集頭溫為69℃～83℃的蒸餾物975ml。氣相色譜顯示，與更早期的餾分相比該蒸餾物中存在顯著更大量的甲酯。
用醚(300ml和200ml)提取罐中的黃色兩相混合物，通過K2CO3進(jìn)行干燥，過濾和在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于25℃濃縮而得到132.6g的橙色油(產(chǎn)率29.3％)。氣相色譜顯示出產(chǎn)物。質(zhì)子核磁共振和碳核磁共振與帶有微量乙醚的所需產(chǎn)物相一致。該醚冷凝物的氣相色譜顯示在塔頂餾分中存在一些甲酯。
蒸餾物3在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于25℃濃縮第3種甲醇蒸餾物(975ml)而得到兩相混合物(100ml～150ml)。用醚(100ml和50ml)提取該混合物，通過K2CO3進(jìn)行干燥。
蒸餾物2在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于25℃濃縮第2種甲醇蒸餾物(1,300ml)而得到兩相混合物(30ml～50ml)。用醚(2×50ml)提取該混合物，通過K2CO3進(jìn)行干燥。
將蒸餾物2和蒸餾物3的濃縮的醚提取物合并，吸濾并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于25℃濃縮而得到77.3g無色的油。
質(zhì)子核磁共振和碳核磁共振與以前的所需甲酯的光譜相匹配。
總產(chǎn)量＝132.6+77.3＝209.9g(46.3％)。
或者，1)惕各酸甲酯可從Alfa、Lancaster或Acros商購。和2)可以根據(jù)JOC，64，8051-8053(1999)進(jìn)行試驗(yàn)以制備膦鎓鹽。
惕各酸甲酯的溴化 用1L的庫式球形接收器在5L的反應(yīng)燒瓶與回流冷凝器間加熱回流(78℃～81℃)于2,000ml四氯化碳中的惕各酸甲酯(209.9g；1.84mol)、N-溴丁二酰亞胺(327.5g；1.84mol)和70％苯甲酰過氧化物(3.2g；0.009mol)的機(jī)械攪拌混合物。2小時(shí)后，停止回流，取下加熱罩并關(guān)閉攪拌器。所有固體都漂浮在CCl4溶液上，這表明丁二酰亞胺帶有的NBS可忽略不計(jì)。在冰浴中將該漿液冷卻至20℃并進(jìn)行吸濾以提供180.7g的乳白色固體。不進(jìn)行洗滌。用水(1L×3)洗滌該黃色濾液，通過MgSO4進(jìn)行干燥。氣相色譜顯示出起始物質(zhì)惕各酸甲酯和兩種一溴化物的比率約為1∶2∶1并帶有其他次要組分。
濾除MgSO4后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于35℃濃縮該淺黃色濾液而得到327.1g淺黃色的油。質(zhì)子核磁共振和氣相色譜表明存在以下組成

調(diào)整進(jìn)行50％分析的所需產(chǎn)物的產(chǎn)率＝46.0％。
該油的使用與在下一步驟中的使用相同。
以稍高的有效負(fù)載使γ-溴代惕各酸甲酯與三苯基膦在乙腈中進(jìn)行按比例放大反應(yīng)

在氮?dú)猸h(huán)境中，在5L的四頸燒瓶中，機(jī)械攪拌于1,300ml無水乙腈中的γ-溴代惕各酸甲酯(322.6g；85％烯丙型溴化物；1.42mol)的粗制混合物。
在4小時(shí)的期間內(nèi)逐滴添加2,000ml溶于乙酸乙酯中的三苯基膦(387.0g；1.48mol)溶液。在添加過程中，在頭75分鐘添加了約40％后溫度從22℃升至最高溫度30℃。在120分鐘期間添加了約60％的三苯基膦溶液后，溶液變得渾濁，并在后續(xù)添加中持續(xù)將固體沉淀出來。添加后，用乙酸乙酯(600ml)漂洗漏斗并將之追加入反應(yīng)混合物中。在環(huán)境溫度下攪拌該乳狀的漿液過周末。
吸濾該白色漿液并用2∶1的乙酸乙酯∶乙腈(150ml×3)洗滌濾餅。于40℃在真空干燥箱中干燥該白色固體(352.55g)4小時(shí)(2小時(shí)后恒重)，得到322.55g產(chǎn)物。mp＝187℃～188℃(分解)。文獻(xiàn)mp＝183℃(分解)。質(zhì)子核磁共振和碳核磁共振與以前的所需膦鎓鹽的光譜相符。LC-MS分析顯示出一種主要組分，其在正離子模式(positive mode)中的電噴射質(zhì)譜與所需膦鎓鹽相一致，提供375m/z處的分子離子峰。磷核磁共振顯示出在22.0ppm處的單磷信號。
基于起始物質(zhì)惕各酸甲酯的產(chǎn)量＝100×322.55/(455.32×1.84×322.6/327.1)＝39.0％。
(3-甲酯基-2-Z-丁烯-1-亞基)三苯基正膦的制備 于23℃，在32分鐘的期間內(nèi)，用溶于500ml水中的氫氧化鈉(13.6g；0.34mol)溶液滴加處理于3,400ml去離子水中的(3-甲酯基-2-E-丁烯-1-亞基)三苯基溴化膦鎓(154.8g；0.34mol)的機(jī)械攪拌的少量漿液，沒有明顯的放熱，但立即沉淀出淺黃色的固體。攪拌15分鐘后，吸濾該淺黃色漿液，用水(1,500ml)進(jìn)行洗滌并吸干而得到151.7g淡黃色固體。在真空烘箱中于35℃～45℃(3:50pm)將這一固體干燥過夜。
在真空烘箱中于35℃～45℃干燥22.5小時(shí)后，達(dá)到恒重107.8g。mp＝144℃～160℃，文獻(xiàn)mp＝145℃～165℃。考慮到在核磁共振場強(qiáng)度方面的差異，質(zhì)子核磁共振與以前的所需內(nèi)鎓鹽的能譜相類似。碳核磁共振顯示出50.2ppm和11.8ppm處的具有復(fù)雜的芳香族區(qū)域的甲基碳，沒有烯屬碳和內(nèi)鎓鹽碳的明顯信號。
產(chǎn)率＝84.7％。
藏花酸二甲酯的試驗(yàn)制備 在氮?dú)猸h(huán)境中，將在苯(128ml)中的(3-甲酯基-2-Z-丁烯-1-亞基)三苯基正膦(12.8g；34.2mmol)和2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯二醛(2.1g，12.8mmol)的機(jī)械攪拌混合物使用計(jì)時(shí)器加熱回流6小時(shí)。
在冰浴中冷卻所得漿液40分鐘，進(jìn)行吸濾，用苯進(jìn)行洗滌并吸干以融化凍結(jié)的苯而得到2.1g紅色固體。TLC分析顯示出單個(gè)黃色斑點(diǎn)。在40℃～45℃，在真空烘箱中干燥該固體70分鐘，得到1.85g產(chǎn)物(產(chǎn)率40.5％)。未校正mp＝210℃～213℃。文獻(xiàn)3mp＝214℃～216℃。(注3E.Buchta & F.Andree，Chem Ber，93，1349(1960))。質(zhì)子核磁共振與以前藏花二甲酸在90MHz設(shè)備上的光譜相類似。碳核磁共振顯示出全部11個(gè)獨(dú)特的碳信號，這些碳信號具有所需二甲酯的正確化學(xué)位移，并具有一個(gè)次要的雜質(zhì)信號，該雜質(zhì)信號可能是殘留的苯。電噴射質(zhì)譜顯示出片段的分解和重組。
TLC分析表明紅色濾液含有額外的產(chǎn)物氧化三苯基膦和一種Rf略低于所分離的固體的橙色組分。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于35℃濃縮該紅色濾液而得到13.2g紅色固體。在甲醇(25ml)中加熱回流該固體。然后在冰浴中冷卻所得漿液，60分鐘后進(jìn)行吸濾并用甲醇進(jìn)行洗滌得到0.6g紅色固體。在真空烘箱中于45℃干燥所述固體135分鐘，得到0.5g產(chǎn)物。mp＝203℃～208℃。質(zhì)子核磁共振顯示出帶有殘留雜質(zhì)的所需二酯。碳核磁共振顯示僅有所需產(chǎn)物的信號。TLC分析顯示出不均勻的產(chǎn)物斑點(diǎn)。
將濾液濃縮并保存。
藏花酸的二甲酯的二次制備 在氮?dú)猸h(huán)境中，將2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯二醛(11.95g；12.8mmol)作為一個(gè)部分地添加到溶于400ml苯中的(3-甲酯基-2-Z-丁烯-1-亞基)三苯基正膦(73.0g；195.0mmol)的機(jī)械攪拌漿液中，然后追加330ml苯。用計(jì)時(shí)器加熱回流所得的褐色漿液6小時(shí)，并在氮?dú)猸h(huán)境中將其冷卻至室溫過夜。
將所得漿液在冰浴中冷卻至6℃～10℃，吸濾并用苯(50ml×2)洗滌而得到10.05g的紅色固體。TLC分析顯示出單個(gè)的黃色斑點(diǎn)。將該固體在真空烘箱中于40℃干燥(9:00am)3.5小時(shí)，沒有重量損失，得到10.05g產(chǎn)物(產(chǎn)率38.7％)。mp＝211℃～214℃。文獻(xiàn)mp＝214℃～216℃。質(zhì)子核磁共振和碳核磁共振與以前的所需藏花酸的二甲酯的光譜相符。
在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于40℃濃縮該紅色濾液而得到84.4g紅色固體。TLC分析與試驗(yàn)操作結(jié)果相似。在165ml回流甲醇中通過用磁力攪拌使該固體漿液化。然后在冰浴中冷卻所得漿液2.5小時(shí)，吸濾并用最小量甲醇進(jìn)行洗滌而得到10.5g橙色糊狀物。TLC分析顯示出單個(gè)的黃色斑點(diǎn)。將該糊狀物在真空烘箱中于45℃干燥190分鐘，得到5.6g產(chǎn)物。mp＝201℃～208℃。核磁共振顯示出具有未知芳香族雜質(zhì)的所需二酯。
將這一不純的固體和兩種來自早期實(shí)驗(yàn)的其他類似固體共6.5g溶解在回流氯仿(75ml)中，用甲醇稀釋并在冰箱中冷卻過夜。
將該漿液進(jìn)行吸濾，并用最小量的甲醇進(jìn)行洗滌，而得到6.1g紅色結(jié)晶固體。在真空烘箱中于45℃干燥該固體3小時(shí)直至恒重為4.25g。mp＝211℃～213℃。質(zhì)子核磁共振和碳核磁共振顯示出其他烯屬或芳香族雜質(zhì)。將該固體溶解在回流甲苯中(150ml)中，并在冰箱中最終冷卻130分鐘。對該漿液進(jìn)行吸濾并用甲苯進(jìn)行洗滌得到2.05g紅色固體。在真空烘箱中于45℃干燥該固體50分鐘至沒有重量改變，得到2.05g產(chǎn)物。mp＝214℃～216℃。質(zhì)子核磁共振顯示出具有一些殘留甲苯的所需藏花酸二甲酯和可忽略不計(jì)的非所需異構(gòu)體雜質(zhì)。碳核磁共振顯示出不帶有可檢測到的非所需異構(gòu)體雜質(zhì)的所需藏花酸二甲酯和2～3種與甲苯一致的新殘留信號。產(chǎn)率＝45.5％。
藏花酸二鈉鹽的制備 將藏花酸二甲酯(13.95g；39.1mmol)、40重量％氫氧化鈉水溶液(273ml；3.915mol)和甲醇(391ml)的機(jī)械攪拌漿液使用計(jì)時(shí)器于74℃回流加熱12小時(shí)。
通過布式漏斗用濾紙和燒結(jié)的玻璃漏斗吸濾該橙色漿液。緩慢過濾4(注4到濾干后使得過濾器被阻塞為止通過燒結(jié)玻璃過濾較快。但是，水洗使得過濾器不被阻塞)。將該燒結(jié)玻璃漏斗中的漿液添加到布式漏斗中的固體上。用水(100ml×3)洗滌該橙色的糊狀物，然后用甲醇進(jìn)行洗滌(50ml×3)。在真空烘箱中于45℃～50℃干燥該橙色的糊狀物。
21小時(shí)后，該橙色凝塊重24.25g。用刮鏟將該物質(zhì)粉碎成粉并在真空烘箱中于45℃～50℃干燥。
共干燥65.5小時(shí)后，橙色粉末的量為23.1g。其紅外線光譜相對于所報(bào)道的TSC的紅外線光譜顯示出額外的帶，尤其是在3424cm-1和1444cm-1處顯示出大帶。質(zhì)子核磁共振未顯示出甲酯的證據(jù)。但是，烯屬和甲基區(qū)的整合被分開，這可能是由于相位調(diào)整問題。
假設(shè)是由于氫氧化鈉而超重，在400ml去離子水中磁力攪拌該橙色固體35分鐘。對該漿液進(jìn)行吸濾并用去離子水(50ml×2)洗滌濾餅。以提供橙色的糊狀物。將該物質(zhì)在真空烘箱中于45℃～50℃干燥直至恒重。約7小時(shí)后，將該固體壓碎并粉碎成粉，并在真空烘箱中于45℃進(jìn)一步干燥過夜。
于45℃干燥21小時(shí)后，固體量為13.25g。進(jìn)一步粉碎成粉并在真空烘箱中于45℃干燥后，固體量為13.15g。其紅外線光譜與報(bào)道的紅外線光譜相一致。質(zhì)子核磁共振產(chǎn)生的質(zhì)子核磁共振譜與二鈉鹽相一致。HPLC分析顯示出可能具有一種次要雜質(zhì)的一種主要組分。該主要組分的電噴射負(fù)離子質(zhì)譜與所需藏花酸二鈉鹽相一致。碳核磁共振顯示出藏花酸二鈉鹽的全部10個(gè)獨(dú)特的碳信號，這驗(yàn)證了該分子的對稱性。
水、氫氧化鈉和甲醇的最初濾液在水洗滌過程中沉淀出更多固體。吸濾該漿液，用水進(jìn)行洗滌而得到橙色的糊狀物。將該糊狀物在真空烘箱中于45℃干燥18.5小時(shí)而得到0.65g橙色固體。其光譜數(shù)據(jù)與所需藏花酸二鈉鹽相一致。將該固體與第一收獲物合并到一起。
產(chǎn)量＝13.15+0.65＝13.8g(94.8％)。
第一收獲物的元素分析顯示出的所需產(chǎn)物的值是不可接受的，這表明藏花酸二鈉鹽被氫氧化鈉所污染。
藏花酸二鈉鹽的水洗滌將藏花酸二鈉鹽(13.6g)在150ml去離子水中漿液化，并于室溫磁力攪拌1小時(shí)。將該漿液吸濾到Buchner漏斗上。然后用水洗滌該橙色糊狀物并監(jiān)測該橙色濾液的pH。
用橡皮塞在過濾器上將該橙色糊狀物吸干。將該糊狀物在真空中于25℃～55℃干燥5.5小時(shí)而得到11.2g松散的橙色固體。將該固體粉碎成粉，轉(zhuǎn)移到瓶子中，并在真空烘箱中于45℃干燥過夜。
所得量＝11.1g?；厥章剩?1.6％。其紅外光譜和質(zhì)子核磁共振譜與以前的所需藏花酸二鈉鹽的紅外光譜和質(zhì)子核磁共振譜相符。HPLC分析顯示出420nm處的單個(gè)組分，其于負(fù)離子模式中的電噴射質(zhì)譜與藏花酸相一致。
碳核磁共振顯示出所有10個(gè)獨(dú)特的碳信號，其具有所需藏花酸二鈉鹽的正確的化學(xué)位移。元素分析給出了所需產(chǎn)物的可接受數(shù)據(jù)。
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實(shí)施例6根據(jù)所述改良的合成方法制備的TSC的純度鑒定對于根據(jù)實(shí)施例5的方法合成的TSC物質(zhì)，利用紫外-可見分光光度計(jì)測定到的在421nm處的吸光度與在254nm處的吸光度的比例為11.1。
實(shí)施例7TSC的口服施用當(dāng)在大鼠中經(jīng)口服施用(經(jīng)過管飼技術(shù))TSC時(shí)，顯示TSC會被吸收到血流中。在兩只大鼠中，發(fā)現(xiàn)在給予后的15分鐘～30分鐘時(shí)有1％～2％的給予劑量存在于血流中?？诜盏淖畲罅繉?shí)際發(fā)生在該時(shí)間之前。
對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，顯而易見的是可以不偏離本發(fā)明所公開的內(nèi)容而對本發(fā)明的化合物和組合物以及相關(guān)的方法進(jìn)行大量的改動和添加。
權(quán)利要求
1.一種具有以下結(jié)構(gòu)的化合物YZ-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中Y是選自Na+、K+或Li+的一價(jià)金屬離子，或選自R4N+或R3S+的有機(jī)陽離子，其中R是H或CnH2n+1，其中n為1～10。
3.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中Z選自羧基(COO-)基團(tuán)、硫酸根基團(tuán)(OSO3-)或單磷酸根基團(tuán)(OPO3-)、(OP(OH)O2-)、二磷酸根基團(tuán)、三磷酸根基團(tuán)或它們的組合。
4.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中TCRO具有含有碳原子的共軛的碳-碳雙鍵和單鍵，其中環(huán)繞碳-碳雙鍵的4個(gè)單鍵都位于同一平面，且所述化合物是直鏈的。
5.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中TCRO是 其中X可以相同或不同，且X是H；選擇性地包含鹵素的具有10個(gè)或少于10個(gè)碳的直鏈或支鏈基團(tuán)；或鹵素。
6.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中TCRO是 其中X可以相同或不同，且X是H；選擇性地包含鹵素的具有10個(gè)或少于10個(gè)碳的直鏈或支鏈基團(tuán)；或鹵素。
7.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中TCRO是 其中X可以相同或不同，且X是H；選擇性地包含鹵素的具有10個(gè)或少于10個(gè)碳的直鏈或支鏈基團(tuán)；或鹵素。
8.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中的TCRO是 其中X可以相同或不同，且X是H；選擇性地包含鹵素的具有10個(gè)或少于10個(gè)碳的直鏈或支鏈基團(tuán)；或鹵素。
9.一種溶解BTCS的方法，所述BTCS具有以下結(jié)構(gòu)YZ-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，該方法包括以下步驟a)制備碳酸鈉或碳酸氫鈉的稀溶液，b)將所述稀溶液添加到去離子水中以將pH提高至7或7以上，c)將BTCS添加到步驟b)的溶液中。
10.一種溶解BTCS的方法，所述BTCS具有以下結(jié)構(gòu)YZ-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，該方法包括以下步驟a)將BTCS添加到鹽溶液中，b)除去未溶解的物質(zhì)。
11.一種溶解BTCS的方法，所述BTCS具有以下結(jié)構(gòu)YZ-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，該方法包括以下步驟a)將堿添加到水中以制備堿性溶液，b)將BTCS添加到所述溶液中。
12.一種溶解BTCS的方法，所述BTCS具有以下結(jié)構(gòu)YZ-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，該方法包括以下步驟a)制備去離子水，b)將BTCS添加到步驟a)的溶液中。
13.如權(quán)利要求9、10、11或12所述的方法，其中所述化合物是反式藏花酸鈉。
14.一種增加氧在哺乳動物中的擴(kuò)散性的方法，該方法包括給哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述施用是通過吸入施用。
16.一種治療呼吸道疾病的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
17.一種治療氣腫的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
18.一種治療出血性休克的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
19.一種治療心血管疾病的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
20.一種治療動脈粥樣硬化的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
21.一種治療哮喘的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
22.一種治療脊髓損傷的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
23.一種治療腦水腫的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
24.一種治療乳頭狀瘤的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
25.一種治療缺氧的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
26.一種合成BTCS化合物的方法，所述BTCS化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，該方法包括以下步驟a)將含有共軛的碳-碳雙鍵的對稱型二醛與三苯基正膦相偶聯(lián)，b)對步驟a)的產(chǎn)物進(jìn)行皂化。
27.如權(quán)利要求26所述的方法，其中步驟a)的偶聯(lián)是利用[3-甲酯基-2-丁烯-1-亞基]三苯基正膦進(jìn)行的。
28.如權(quán)利要求26所述的方法，其中利用NaOH和甲醇的溶液對步驟a)的產(chǎn)物進(jìn)行皂化。
29.如權(quán)利要求26所述的方法，其中在步驟a)之后為對偶聯(lián)反應(yīng)的所需產(chǎn)物進(jìn)行分離的步驟。
30.一種對含有共軛的碳-碳雙鍵的對稱型二酯進(jìn)行皂化以形成BTCS的方法，該方法包括以下步驟a)用選自甲醇、乙醇、丙醇和異丙醇的化合物溶解所述含有共軛的碳-碳雙鍵的對稱型二酯，和b)將步驟a)的溶液與堿混合。
31.如權(quán)利要求30的方法，其中所述堿選自NaOH、KOH和LiOH。
32.如權(quán)利要求30所述的方法，其中用甲醇和NaOH對所述二酯進(jìn)行皂化。
33.根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法合成的BTCS化合物。
34.一種BTCS組合物，其中出現(xiàn)在可見波長范圍內(nèi)的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度大于7.5。
35.一種TSC組合物，其中出現(xiàn)在可見波長范圍內(nèi)的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度大于7.5。
36.一種增加氧在哺乳動物中的擴(kuò)散性的方法，該方法包括給哺乳動物施用治療有效量的BTCS，其中該BTCS出現(xiàn)在可見波長范圍內(nèi)的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度大于7.5。
37.一種治療氣腫的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的BTCS，其中該BTCS出現(xiàn)在可見波長范圍內(nèi)的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度大于7.5。
38.一種治療出血性休克的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的BTCS，其中該BTCS出現(xiàn)在可見波長范圍內(nèi)的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度大于7.5。
39.如權(quán)利要求36、37或38所述的方法，其中所述BTCS是TSC。
40.一種增加氧在哺乳動物中的擴(kuò)散性的方法，該方法包括通過吸入給哺乳動物施用治療有效量的TSC。
41.一種吸入器，該吸入器包含具有以下結(jié)構(gòu)的BTCS化合物YZ-TCRO-ZY其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架。
42.如權(quán)利要求40所述的吸入器，其中所述BTCS化合物是TSC。
43.一種將烯二醛的異構(gòu)混合物轉(zhuǎn)化為全反式醛的方法，該方法包括在溶劑中用亞磺酸對所述二醛的異構(gòu)混合物進(jìn)行異構(gòu)化。
44.如權(quán)利要求43所述的方法，其中所述亞磺酸具有式RSO2H，其中R是C1至C10的直鏈或支鏈烷基或芳基。
45.如權(quán)利要求43所述的方法，其中所述溶劑選自1，4-二噁烷、四氫呋喃或其中烷基為C1至C10的直鏈或支鏈烷基的二烷基醚。
46.如權(quán)利要求43所述的方法，其中所述亞磺酸是對甲苯亞磺酸，所述溶劑是1，4-二噁烷。
47.如權(quán)利要求43所述的方法，其中所述烯二醛是2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯二醛。
48.如權(quán)利要求43所述的方法，其中所述烯二醛是2，7-二甲基-2，4，6-辛三烯二醛，所述亞磺酸是對甲苯亞磺酸且所述溶劑是1，4-二噁烷。
49.一種治療缺血的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
50.一種治療創(chuàng)傷性腦損傷的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架，其中所述化合物不是TSC。
51.一種提高哺乳動物的機(jī)能的方法，該方法包括對所述哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架。
52.一種治療糖尿病的并發(fā)癥的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架。
53.一種治療阿爾茨海默氏病的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的化合物，該化合物具有式Y(jié)Z-TCRO-ZY，其中Y＝陽離子，Z＝與所述陽離子相結(jié)合的極性基團(tuán)，和TCRO＝反式類胡蘿卜素骨架。
54.一種治療哺乳動物中缺血的方法，該方法包括給哺乳動物施用治療有效量的BTCS，其中該BTCS出現(xiàn)在可見波長范圍內(nèi)的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度大于7.5。
55.一種治療創(chuàng)傷性腦損傷的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的BTCS，其中該BTCS出現(xiàn)在可見波長范圍內(nèi)的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度大于7.5。
56.一種提高機(jī)能的方法，該方法包括給哺乳動物施用有效量的BTCS，其中該BTCS出現(xiàn)在可見波長范圍內(nèi)的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度大于7.5。
57.一種治療糖尿病的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的BTCS，其中該BTCS出現(xiàn)在可見波長范圍內(nèi)的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度大于7.5。
58.一種治療阿爾茨海默氏病的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的BTCS，其中該BTCS出現(xiàn)在可見波長范圍內(nèi)的最高峰的吸光度除以出現(xiàn)在紫外線波長范圍內(nèi)的峰的吸光度大于7.5。
59.如權(quán)利要求54、55、56、57或58所述的方法，其中所述BTCS是TSC。
60.一種治療、預(yù)防由哺乳動物的手術(shù)引起的缺血或減少由哺乳動物的手術(shù)引起的缺血的量的方法，該方法包括在手術(shù)前、手術(shù)過程中或手術(shù)后給哺乳動物施用治療有效量的BTCS。
全文摘要
本發(fā)明涉及反式類胡蘿卜素鹽化合物、其制備方法、其溶解方法及其使用方法。這些化合物有益于提高包括人在內(nèi)的哺乳動物中紅細(xì)胞與機(jī)體組織間氧的擴(kuò)散性。
文檔編號A01N37/00GK1842512SQ03826969
公開日2006年10月4日 申請日期2003年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月25日
發(fā)明者約翰·L·蓋納, 雷蒙德·C·格拉比克 申請人:擴(kuò)散藥品有限公司