專利名稱：納米硒棗苗工廠化快速高效育苗技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是納米硒功能保健棗苗工廠化快速高效育苗技術(shù)。
背景技術(shù)：
當(dāng)前，國(guó)際國(guó)內(nèi)果樹生產(chǎn)中，為了克服病毒和類菌質(zhì)體病害對(duì)果樹生產(chǎn)帶來的威脅，對(duì)無病毒的培養(yǎng)愈來愈受到重視。特別是在大果型、鮮食型和晚熟耐貯型棗樹的快速發(fā)展，對(duì)具有功能保健棗苗需求量大，供不應(yīng)求的情況下，利用棗細(xì)胞的全能性和再生性，通過組織培養(yǎng)、綠枝扦插等方法快速繁殖，實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)更具有特殊應(yīng)用價(jià)值。
生物有機(jī)態(tài)納米硒較無機(jī)化合硒，具有高生物活性和高安全性特點(diǎn)，將在免疫調(diào)節(jié)、抗氧化能力、抗癌、防衰及″現(xiàn)代文明病″發(fā)揮預(yù)防和醫(yī)療功能。納米硒具有促進(jìn)棗細(xì)胞生長(zhǎng)，增強(qiáng)抗氧化能力和抗逆性作用。因此，棗是納米硒的理想生物載體。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用組織培養(yǎng)和綠技扦插相配套的工廠化快速繁殖技術(shù)生產(chǎn)無病毒棗苗，以期提高納米硒功能保健棗的產(chǎn)量和質(zhì)量，滿足因缺硒而引起的各種″現(xiàn)代病″患者的預(yù)防和輔助醫(yī)療需求。
本發(fā)明將提供生產(chǎn)20萬株工廠化快速育苗技術(shù)，其特征在于包括無病毒組培試管苗與綠枝扦插相配套的快繁育苗技術(shù)。
1、組織培養(yǎng)快速育苗的生產(chǎn)流程與技術(shù)。
(1)建立優(yōu)異棗種質(zhì)采穗圃。是由4個(gè)棗樹種質(zhì)所組成，即①棗種質(zhì)(I)干、鮮兼用種。柱形、平均果重24g，制干率50％，含糖量68％，葉厚，卵園形，抗逆性強(qiáng)；②棗種質(zhì)(II)晚熟鮮食種。園形，平均果重14.7g，果肉細(xì)致，含糖量32.6％，質(zhì)優(yōu)。種仁飽滿，葉長(zhǎng)園，花萼長(zhǎng)與寬相近，10月中下旬成熟；③棗種質(zhì)(III)特大果型鮮食種。橢園形，平均果重36g，葉長(zhǎng)卵園形。有效花期70～80天，結(jié)果早，精品率高，增產(chǎn)潛力大。36℃高溫正常生長(zhǎng)，-25℃安全越冬，適應(yīng)性強(qiáng)；④棗種質(zhì)(V)制干棗，柱形，果皮厚，深紅色，含糖量73％，制干率58％。核內(nèi)無仁，葉厚，長(zhǎng)卵園?？购怠⒑?、病蟲、裂果，耐瘠薄、貯運(yùn)。
(2)準(zhǔn)備車間①培養(yǎng)基的制備。按每100升培養(yǎng)基可接種繼代增殖芽1.2～1.5萬計(jì)，10萬支試管苗需要1800～2000升培養(yǎng)基。
②初代培養(yǎng)。剪取棗頭枝頂芽2cm，清水沖洗數(shù)小時(shí)→無菌水沖洗→70％乙醇滅菌5～10分鐘→5％次氯酸納滅菌10～20分鐘→0.1％Hgci2消毒8分鐘→無菌沖洗4～5次。在無菌條件下剝?nèi)×隧斞壳o尖0.1～0.8m.m的生長(zhǎng)點(diǎn)，帶芽莖尖接種在Ms+6-BA0.5～2.4mg/∠+kT02～1.5mg/∠+納米Se0.1～1.5mg/∠+抗壞血酸50～100mg/∠+2，4-D0.1～0.8mg/∠誘導(dǎo)培養(yǎng)基。抑制因酚類氧化所造成褐變污染，應(yīng)及時(shí)將培養(yǎng)成活的組織塊，移到成份相同的新鮮培養(yǎng)基上成為無菌試管苗，進(jìn)行初代培養(yǎng)。
(3)繼代快繁車間。初期急需擴(kuò)繁基礎(chǔ)芽量。轉(zhuǎn)接在Ms+6-BA0.8～1.9mg/∠+IBA0.2～1.5mg/∠+納米Se0.1～2.5mg/∠+3％蔗糖種殖培養(yǎng)基，進(jìn)行從芽增殖，加大增殖系數(shù)。繼代周期應(yīng)＜30天，每次繼代增殖系數(shù)＞5，通常增殖系數(shù)掌握在3～8。增殖系數(shù)＜3，生產(chǎn)率過低，生產(chǎn)成本提高；增殖系數(shù)＞8，增殖芽過多，可生根的壯苗減少，難以獲得優(yōu)質(zhì)苗，直接影響生根質(zhì)量和成活率。在繼代增殖4～5代后，開始邊增殖，邊誘導(dǎo)生根。
(4)誘導(dǎo)生根車間。采用1/2Ms+納米Se0.1～6mg/∠+IBA0.2～2.4mg/∠+IAA0.2～1.5mg/∠+3％蔗糖，PH5.8～6.7的生根培養(yǎng)基，生根溫度23～26℃。暗培養(yǎng)3～5天，每日13小時(shí)，光照強(qiáng)度1200～2600Ix。繼代后，所形成能誘導(dǎo)生根的綠莖與繼代增殖芽的比例不應(yīng)少于1∶3，每次繼代后，可供生根誘導(dǎo)的至少應(yīng)有1/3的芽抽生綠莖(大于1～2cm)。叢芽增殖后，必須通過壯苗培養(yǎng)取得更高比例的可誘導(dǎo)生根的綠莖，后期基礎(chǔ)芽量出現(xiàn)過剩，應(yīng)增加可供誘導(dǎo)生根的綠莖比例。誘導(dǎo)生根以20～30天為宜。生根時(shí)間長(zhǎng)，極易污染培養(yǎng)基，且發(fā)根不齊影響棗苗的整齊度，給集中移栽帶來困難，發(fā)根太少，降低成活率，生根率低，加大經(jīng)營(yíng)成本，對(duì)規(guī)模生產(chǎn)不利。
(5)馴化練苗車間(溫室)。試管苗每株已有3～4條根，根長(zhǎng)1cm，根系健壯，苗色由淺綠轉(zhuǎn)變成深綠時(shí)，應(yīng)及時(shí)轉(zhuǎn)移至冬暖大棚(溫室)，鍛煉3天后，開瓶取苗，洗凈根部瓊脂，試管苗由異養(yǎng)轉(zhuǎn)為自養(yǎng)。因此，培育壯苗是工廠化的關(guān)鍵。采取固體壯苗方法。先在10～100mg/∠的IAA液蘸3秒鐘，栽入蛭石基質(zhì)或直接栽植畦面(通透性良好的肥沃壤土)。栽前，用0.3％高錳酸鉀液消毒后，澆透水；栽后，用800倍多菌靈噴灑。環(huán)境濕度應(yīng)保持在90％以上，采取微膜復(fù)蓋+50％遮陽網(wǎng)保濕，移栽初期，每日噴水5～6次，一周后3～4次，每隔3天補(bǔ)充一次1/4Ms營(yíng)養(yǎng)液，每周噴一次多菌靈液。環(huán)境溫度控制，掌握日溫25℃，夜溫12～20℃，光照強(qiáng)度2600lx，每日光照13小時(shí)。10～12天撤蓋膜，3周撤遮陽網(wǎng)。再用120～300mg/∠GA3噴施幼苗，可縮短緩苗期，提高成活率。
溫室練苗應(yīng)＜40天。2月下旬移植營(yíng)養(yǎng)缽(塑制8×8CM)或直栽苗圃，3月有新生芽長(zhǎng)出便可轉(zhuǎn)栽苗圃，分批移栽馴化至8月。
(6)苗圃培育壯苗。選擇地勢(shì)平坦，灌排方便的肥沃疏松壤土地作苗圃，667M2施優(yōu)質(zhì)廄肥5000Kg，精細(xì)整地。地溫15℃后，將3～4月試管苗按667M2栽植8000株(營(yíng)養(yǎng)缽)，采取寬窄行種植，株行距因地而異，行向南北，鋪地膜增溫保墑。追肥3次(萌芽、開花前和幼果膨大)，結(jié)合追肥澆水4～5次，根外追肥4次，第一年不追化肥。及時(shí)中耕、防治蚜蟲等病蟲，當(dāng)年可長(zhǎng)到80～100CM，已達(dá)商品苗規(guī)格。
2、綠枝扦插快繁育苗技術(shù)(1)扦插苗床的置備。苗床長(zhǎng)25M，寬2M，高25cm。床內(nèi)鋪凈河沙15～20cm。上復(fù)塑料拱棚。澆透水→曝曬干透→澆透水→噴0.1％高錳酸鉀消毒滅菌液。
(2)培育二年生優(yōu)異種質(zhì)苗(兼作二級(jí)采穗圃)。6月從圃內(nèi)原種一代或原種二代植株，選取健壯半木質(zhì)化棗頭，截成15cm技段，每段保留2～3片完整葉，上端距頂芽1cm平剪，下剪成馬蹄形，速蘸生根液3～5秒鐘，立即全光照霧插苗床(深3～5cm)，迅速噴霧3～5秒鐘，噴霧時(shí)間依溫度而定，葉面水膜面積＞1/2～1/3。生根后不再噴霧，練苗1～2周后移栽苗圃，精心管理與苗圃要求相同。
本法可同時(shí)生產(chǎn)10～12萬個(gè)綠枝插穗成苗。實(shí)現(xiàn)快速高效繁殖，提供成活率高的無病毒原種棗苗，大幅度降低生產(chǎn)成本。
四、實(shí)施范例1、組培試管苗工廠化育苗技術(shù)(1)準(zhǔn)備車間
①培養(yǎng)基的制備。按每100升培養(yǎng)基可接種繼代增殖芽1.2～1.5萬個(gè)。10萬支試管苗需準(zhǔn)備1800～2000升培養(yǎng)基。
②從優(yōu)異棗種質(zhì)(I)號(hào)株，采0.6mm以下莖尖，經(jīng)嚴(yán)格滅菌消毒后，接種在Ms+6-BA0.5～2.4mg/∠+KT 0.2～1.5mg/∠+納米Se0.1～1.5mg/∠+抗壞血酸50～100mg/∠+2，4-D0.1～0.8mg/∠+3％蔗糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基，經(jīng)采取防褐變方法后進(jìn)行初代培育。
(2)繼代快繁車間。莖尖長(zhǎng)成幼苗后，轉(zhuǎn)接在Ms+6-BA0.8～1.9mg/∠+IBA0.2～1.5mg/∠+納米Se 0.1～2.5mg/∠+3％蔗糖增殖培養(yǎng)基，增殖溫度26～28℃光照強(qiáng)度1200～2000，每日光照12小時(shí)。繼代周期應(yīng)＜30天，增殖系數(shù)控制在3～8，在繼代4～5代后，采取邊增殖邊誘導(dǎo)生根。
(3)誘導(dǎo)生根車間。采用1/2Ms+納米0.1～6mg/∠+IBA 0.2～24mg/∠+IAA0.2～1.5mg/∠+3％蔗糖，PH5.8～6.7生根培養(yǎng)基，生根溫度23～26℃，暗培養(yǎng)3～5天，每日13小時(shí)，光照強(qiáng)度1200～2600，每次繼代后，至少有1/3以上芽已抽生綠莖(＞1～2cm)可供誘導(dǎo)生根，試管苗生根每批需40天左右。
(4)馴化練苗車間(溫室)。培育壯苗是試管苗移出后，由異養(yǎng)轉(zhuǎn)換為自養(yǎng)的關(guān)鍵。試管苗生根后，苗葉由淺綠轉(zhuǎn)成深綠色，及時(shí)移入溫室，經(jīng)3天練苗后，洗凈根部瓊脂，先在10～100mg/∠IAA液蘸根3秒鐘，隨即栽入蛭石基質(zhì)或直接栽植畦面。栽前，用0.3％高錳酸鉀消毒后，澆透水，栽后，再噴800倍多菌靈液。用50％遮陽網(wǎng)+微膜復(fù)蓋保濕(＞90％)，在日溫25℃，夜溫在12～20℃，光照強(qiáng)度2600，每日光照13小時(shí)，移栽初期，每日噴水5～6次，一周后3～4次，隔3日補(bǔ)一次1/4Ms營(yíng)養(yǎng)液，每周噴一次多菌靈液，10～12天撤復(fù)膜，3周撤遮陽網(wǎng)。條件允許時(shí)，加設(shè)地?zé)峋€或用馬糞溫床，提高地溫，誘發(fā)新生不定根，再用120～300mg/∠GA3噴灑幼苗，可縮短緩苗期，提高成活率。
溫室馴化練苗＜40天。2月下旬移植營(yíng)養(yǎng)體(塑制8×8cm)，3月有新葉長(zhǎng)出便可栽入苗圃，分批移栽練苗至8月。
(5)苗圃培育壯育。667M2施優(yōu)質(zhì)廄肥5000Kg，栽8000營(yíng)養(yǎng)缽苗，采取寬窄行種植，株行距因地制宜，行向南北，鋪地膜，追肥3次(萌芽、開花前、幼苗膨大)結(jié)合追肥澆水4～5次，噴葉面肥4次，第一年不追化肥。及時(shí)防治蚜蟲等病蟲、中耕。當(dāng)年可長(zhǎng)到80～100cm商品苗。
2、綠枝扦手插速育苗技術(shù)(1)扦插苗床的置備。苗床長(zhǎng)25M，寬2M，高25cm。床內(nèi)鋪15～20cm凈河沙。上復(fù)塑料拱棚，澆透水→曝曬干透→澆透水→噴消毒滅菌液。
(2)培育二年生優(yōu)異種質(zhì)苗(兼作二級(jí)采穗圃)。6月從圃內(nèi)原種一代或原種二代植株，選取健壯半木質(zhì)化棗頭，截成15cm技段，每段保留2～3片完整葉，上端距頂芽1cm平剪，下剪成馬蹄形，速蘸生根液3～5秒鐘，立即全光霧插苗床(深3～5cm)，迅速噴霧3～5秒鐘，噴霧時(shí)間依溫度而定，葉面水膜面積＞1/2～1/3。生根后不再噴霧，練苗1～2周后移栽苗圃，精心管理與苗圃要求相同。
本法可同時(shí)生產(chǎn)10～12萬個(gè)綠枝插穗苗。實(shí)現(xiàn)快速繁殖，提供成活率高的無病毒原種棗苗，大幅度降低生產(chǎn)成本。
權(quán)利要求
1.一種納米硒棗苗組織培養(yǎng)的工廠化生產(chǎn)技術(shù)，其特征是由組織培養(yǎng)試管苗和綠枝扦插相配套的工廠化快凡高效技術(shù)，生產(chǎn)無病毒納米硒棗苗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述組織培養(yǎng)工廠化快繁技術(shù)，其生產(chǎn)流程的特征是(1)優(yōu)異棗種質(zhì)采穗圃。是由4個(gè)棗種質(zhì)所組成，即①棗種質(zhì)(I)干、鮮兼用種。柱形、平均果重24g，制干率50％，含糖量68％，棗核溝紋深，葉厚，卵園形；②棗種質(zhì)(II)晚熟鮮食種。園形，平均果重14.7g，果肉細(xì)致，含糖量32.6％，質(zhì)優(yōu)。棗核溝紋淺，種仁飽滿。葉長(zhǎng)園，花萼長(zhǎng)與寬相近。10月中、下旬成熟；③棗種質(zhì)(III)鮮食特大果型。橢園形，平均果重36g。葉長(zhǎng)卵園。有效花期70-80天，結(jié)果早，精品率高，增產(chǎn)潛力大。36℃高溫正常生長(zhǎng)，-25℃安全越冬，適應(yīng)性強(qiáng)；④棗種質(zhì)(V)制干棗。柱形，果皮厚，深紅色，含糖量73％，制干率58％。核內(nèi)無仁。葉厚，長(zhǎng)卵園。抗寒、旱、病蟲、裂果，耐瘠薄、貯運(yùn)。(2)準(zhǔn)備車間。剝?nèi)?.1-1.5mm棗頭莖尖，經(jīng)嚴(yán)格消毒后，接種在MS+6-BA0.5～2.4mg/L+KT0.2～1.5mg/L+納米se0.1～1.5mg/4+2，4-D0.1～0.8mg/L+抗壞血酸50～100mg/L。抑制因酚類氧化所造成褐變污染，進(jìn)行初代培養(yǎng)。(3)繼代快繁車間初期，急需擴(kuò)繁基礎(chǔ)芽量，轉(zhuǎn)接MS+6-BA0.8～1.9mg/L+IBA0.2～1.5mg/L+納米se0.1～2.5mg/L+3％蔗糖的增殖培養(yǎng)基。繼代周期＜30天，增殖系數(shù)3-8，繼代增殖4-5代后，邊增殖，邊誘導(dǎo)生根。(4)誘導(dǎo)生根車間。采取1/2MS+納米se0.1～6mg/L+IBA0.2～2.4mg/L+IAA0.2～1.5mg/L+3％蔗糖，PH5.8～6.7的生根培養(yǎng)基.培養(yǎng)溫度23～26％℃，暗培養(yǎng)3～5天，每日13小時(shí)，光照強(qiáng)度1200～2600lx(勒克司)。每次繼代后，可供誘導(dǎo)生根至少應(yīng)有1/3芽抽出綠莖(＞1～2cm)。(5)馴化練苗車間(溫室)。試管苗已有3～4條根，根莖1cm，根健壯，葉色由淺綠色轉(zhuǎn)為深綠色時(shí)，應(yīng)移入溫室鍛練3天。培育壯苗是工廠化關(guān)鍵。根洗凈后，先在10～100mg/LIAA液蘸根3秒鐘，移入蛭石基質(zhì)，或直接畦面栽植，微膜復(fù)蓋+50％遮陽網(wǎng)，保濕(＞90％)，在日溫25℃，夜溫12～20℃每日13小時(shí)，光強(qiáng)2600lx。(6)苗圃培育壯苗。667m2優(yōu)質(zhì)廄肥5000kg，栽8000營(yíng)養(yǎng)缽苗，采取寬窄行種植，株行距因地制宣。鋪地膜，追肥3次(萌芽、開花前和幼果膨大)結(jié)合追肥澆水4-5次。噴葉面肥4次(第一年不宜追化肥)。行向南北，加強(qiáng)肥水管理，及時(shí)中耕、防治蚜蟲等病蟲。當(dāng)年可長(zhǎng)成80～100cm商品苗。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述，綠枝扦插快繁育苗技術(shù)，其特征是(1)扦插苗床置備。苗床長(zhǎng)25m，寬2m，高25cm。床內(nèi)鋪15～20cm凈河沙，澆透水后曝曬，干透后再澆透水，用0.1％高錳酸鉀液消毒再噴800倍多菌液。(2)培育二年生優(yōu)異種質(zhì)棗樹(兼作二級(jí)采穗圃)。6月從圃中原種一代或二代植株，選取健壯半木質(zhì)化棗頭，剪掉二次枝，截成15cm枝段，每段留2～3葉，上端距頂芽1cm，下端剪成馬蹄形，蘸生根液(IAA800～1500mg/∠+NAA1500～2000mg/∠3～5秒鐘，立即全光霧插(深3～5cm)后，噴霧(3～5秒鐘)，葉面水膜面積應(yīng)＞1/2～1/3，生根后停止噴霧，練苗1～2周后，轉(zhuǎn)到苗圃，精心管理。本法可同時(shí)生產(chǎn)綠枝插穗苗10～12萬株。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種果樹的組織培養(yǎng)快繁育苗技術(shù)，尤其是涉及保健棗苗的組織培養(yǎng)和綠枝扦插相配套的工廠化快繁高效技術(shù)。根據(jù)生物工程原理，建立優(yōu)異種質(zhì)采穗圃，通過改良培養(yǎng)基的配制，經(jīng)莖尖初代培養(yǎng)，繼代快速增殖、誘導(dǎo)生根、馴化練苗和培育壯苗等生產(chǎn)流程，結(jié)合運(yùn)用優(yōu)異棗種質(zhì)的二年生原種一代或二代植株，進(jìn)行綠枝扦插，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化工廠快速高效育苗。本發(fā)明的工廠化快速育苗技術(shù)，具有科技含量高，培養(yǎng)基配方科學(xué)，生產(chǎn)流程先進(jìn)，繁殖效率高，經(jīng)濟(jì)效益好的特點(diǎn)。是優(yōu)良果樹高速育苗的首選，可為大規(guī)模保健棗基地建設(shè)，年提供10萬株脫毒優(yōu)質(zhì)商品苗和10－12萬株無病毒健壯綠枝扦插棗苗。生產(chǎn)納米硒功能保健棗，將會(huì)在抗癌、防衰及因缺硒而導(dǎo)致的各種“現(xiàn)代病”發(fā)揮預(yù)防和輔助醫(yī)療功效。
文檔編號(hào)A01H4/00GK1689401SQ20041001917
公開日2005年11月2日 申請(qǐng)日期2004年5月1日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月1日
發(fā)明者余華盛 申請(qǐng)人:余華盛