專利名稱：瑞香狼毒中殺蟲活性物質(zhì)的制備及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種瑞香狼毒活性物質(zhì)在農(nóng)藥中的用途，屬于農(nóng)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
由于化學(xué)農(nóng)藥長期不合理使用，帶來了諸多弊端，如造成環(huán)境污染，對非靶標(biāo)生物的直接毒害，害蟲易產(chǎn)生抗藥性等。近來年，隨著IPM理論的實(shí)施、可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略的發(fā)展和人類對自身健康要求的提高，環(huán)境兼容性好、安全、低殘留、經(jīng)濟(jì)的生物農(nóng)藥的研究與開發(fā)日益受到人們的重視，正逐漸為市場所接受。植物農(nóng)藥正成為創(chuàng)制新農(nóng)藥的研究熱點(diǎn)。
瑞香狼毒(StellerachanlaejastneL.)，紅狼毒、綿大戩、一把香、紅火柴頭、斷腸草。蒙古名達(dá)倫-圖茹。為瑞香科狼毒屬植物，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，與大戟科植物狼毒大戟，月腺大戟同作狼毒入藥，其性味苦平、有毒，有逐水祛痰，破積殺蟲之功效。民間用其水煎液治療胃癌、腸癌、水氣腫脹、淋巴結(jié)核、骨結(jié)核和肺結(jié)核等。近年來，狼毒己成為中國草地危害較為嚴(yán)重的植物之一。據(jù)報(bào)道，狼毒的根可以用來制成生物農(nóng)藥-植物殺蟲劑，這種殺蟲劑對害蟲有觸殺、熏蒸及胃毒作用。并且具有藥效快，有效期長，高效低毒，無殘留，不污染環(huán)境，不破壞生態(tài)平衡，無抗藥性等優(yōu)點(diǎn)。解慶珂報(bào)道用狼毒溶液噴霧，可防治菜青蟲、蚜蟲、大豆食心蟲、棉紅蜘蛛、夜盜蟲、松峭蛾、松毛蟲、松葉蜂等，用狼毒制劑還可殺蚊、驅(qū)蠅、滅蛆，對臭蟲、虱子及跳蚤均有特效，可用來防治農(nóng)作物、飼料牧草、果樹、蔬菜及森林害蟲。
瑞香狼毒提取物在農(nóng)藥領(lǐng)域的研究很多，比如張國洲等，但主要停留在乙醇提取物對菜粉蝶幼蟲的觸殺等，目前未見使用正己烷提取物的報(bào)道，且報(bào)道的的提取物活性成分部明確。目前，從瑞香狼毒中主要分得即黃酮類和香豆素類化合物；另外劉桂芳等從瑞狼毒中還分出β-谷甾醇，胡蘿卜甙(Daucosterol)等化合物。馮寶民、裴月湖、韓冰，“瑞香狼毒化學(xué)成分研究”，沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，17(4)，p258-259公開了鑒定的三個(gè)化合物，其中包括化合物A1，5-二苯基-3-羥基-1-戊酮，但是沒有指出該化合物的用途。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案在于提供一種瑞香狼毒正己烷提取物在殺蟲農(nóng)藥中的用途。所述瑞香狼毒正己烷提取物中含有化合物A、B中的一種或多種。
化合物A 1，5-二苯基-3-羥基-1-戊酮 化合物B 4-羥基倍半萜烯丙酯本發(fā)明還提供了以瑞香狼毒正己烷提取物、化合物A、化合物B為主要活性成分的農(nóng)藥。所述農(nóng)藥可以是由瑞香狼毒正己烷提取物為活性成分制備而成，它含有正己烷提取物2000～3000mg/L，或500～1000mg/L的化合物A；或1500～2000mg/L的化合物B。
其中，所述的正己烷提取物是由如下方法制備將瑞香狼毒根粉用7～15倍量無水乙醇浸泡、提取、濃縮，再以正己烷萃取、濃縮得正己烷提取物。
所述化合物A和/或B的制備方法如下其中固定相為硅膠H；a、大柱粗分固定相硅膠H；流動相用正己烷-乙酸乙酯(體積比為20~1∶1)、正己烷-乙酸乙酯-二氯甲烷(體積比為1∶1∶1)；柱徑12cm，常規(guī)濕法裝柱，硅膠高度約15cm，以流程一中的正己烷萃取物為分離樣品，每次上樣量25g，流速10ml/min，梯度洗脫，分三段收集得大柱段1、段2、段3，各段用薄層檢測并進(jìn)行生物活性測定?；钚暂^強(qiáng)部分作為下一步驟起始樣品進(jìn)一步細(xì)分。
b、中柱細(xì)分固定相硅膠H，柱徑5cm，常規(guī)濕法裝柱，硅膠柱高約40cm，將活性較高的大柱粗分樣品段2、段3上中柱，每次上樣5g；流速2.5ml/min，流動相用正己烷-乙酸乙酯(體積比為10～1∶1)、正己烷-乙酸乙酯-二氯甲烷(體積比為1∶1∶1)、二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(體積比為10∶10∶2)；梯度洗脫，分部收集，經(jīng)薄層層析檢測后合并Rf值相同流分，得到三個(gè)流分，中柱段1、段2、段3進(jìn)行生物活性測定，選擇生物活性高的流分，進(jìn)行下一步柱層析細(xì)分。
c、小柱細(xì)分固定相硅膠H，柱徑3cm，常規(guī)濕法裝柱，硅膠柱高約40cm，將活性最高的中柱樣品段2上柱，每次上樣2g；流動相用正己烷-乙酸乙酯(體積比為4∶1)、二氯甲烷-乙酸乙酯(體積比為1∶1)；梯度洗脫，經(jīng)薄層層析檢測后合并，用于生物活性測定，得小柱段2的生物活性最高。在段2中仍有2條譜帶，改變洗脫劑條件無法分離，故采用反相柱層析進(jìn)行下一步的分離。
d、反相硅膠柱分離固定相反相硅膠，柱徑2cm，常規(guī)濕法裝柱，硅膠柱高約30cm，將活性最高的較純的樣品小柱段2上柱，每次2g；流動相甲醇-水-四氫呋喃(體積比為(10～20)∶(2～5)∶(3～7))、甲醇-四氫呋喃(體積比為1∶1)；梯度洗脫，經(jīng)反相薄層檢測后合并相同流分，濃縮得單一譜帶樣品A與B，反復(fù)改變?nèi)軇l件進(jìn)行薄層檢測確定純度。
本發(fā)明提供的瑞香狼毒正己烷提取物的制備方法中，乙醇滲透性強(qiáng)，易于滲入植物組織，有效組分提取完全，同時(shí)乙醇(尤其是熱乙醇)溶解性能好，除此之外無水乙醇還有價(jià)格低廉、易于回收、對人體毒性小等突出優(yōu)點(diǎn)，大規(guī)模提取時(shí)無疑是上選。瑞香狼毒根的正己烷萃取產(chǎn)物尚包括較多的組分，象這樣復(fù)雜的化合物的分離比較麻煩，采用分段柱層析具有節(jié)約溶劑、硅膠、節(jié)省人力，分離效果較好等優(yōu)點(diǎn)。首先進(jìn)行大柱初分可以進(jìn)行粗略分類，去除一些永久吸附雜質(zhì)，實(shí)驗(yàn)表明，大柱初分對粗分提取物分段效果十分理想，一步即可將有效成分純度提高4倍以上，同時(shí)樣品體積的減少亦有利于下步的進(jìn)一步純化。中柱細(xì)分采用梯度洗脫，最后采用小柱的梯度洗脫，并且進(jìn)行反相硅膠柱的分離得到純品化合物A和B。
菜粉蝶Pieris rapae Linnaeus，英文名cabbage butterfly，俗名菜白蝶、白蝴蝶，幼蟲別名菜青蟲。屬鱗翅目粉蝶科，對農(nóng)業(yè)構(gòu)成較大危害的菜青蟲即是菜粉蝶的幼蟲。菜青蟲在啃食綠色蔬菜的葉片的同時(shí)，不僅造成缺口和蟲糞污染，還傳播大白菜軟腐病等病菌，害蟲高發(fā)期甚至可將蔬菜全部吃光，僅留葉柄，嚴(yán)重影響蔬菜質(zhì)量。長期以來對這種害蟲的防治，主要依賴化學(xué)農(nóng)藥，不但殺傷了大量天敵，且造成菜青蟲抗藥性增強(qiáng)，以至于不得不加大用藥量與次數(shù)，形成惡性循環(huán)，造成蔬菜中農(nóng)藥殘留量大，影響蔬菜質(zhì)量，危及人體健康等。
試驗(yàn)證明，本發(fā)明提供的瑞香狼毒正己烷提取物稀釋30倍時(shí)，72h內(nèi)的對菜青蟲校正死亡率為100％，觸殺活性的致死中濃度(LC50)是812.1mg/L；在測試拒食率的時(shí)候，正己烷萃取物的拒食中濃度(AFC50)是4006mg/L，說明狼毒對菜青蟲具有較強(qiáng)的毒殺和拒食活性。經(jīng)過進(jìn)一步分離獲得了有效成分，化合物A1，5-二苯基-3-羥基-1-戊酮(1，5-Diphenyl-3-Hydroxy-1-Pentanone)，其對菜青蟲的觸殺活性為483.4mg/L(LC50)；和化合物B4-羥基倍半萜烯丙酯(4-Hydroxy-Sesquiterpene-Propylene-Es ter)，其對菜青蟲的觸殺活性為530.3mg/L(LC50)。
總之，本發(fā)明提供的農(nóng)藥藥效快，有效期長，質(zhì)量可控，為農(nóng)業(yè)提供了一種高效低毒，無殘留，不污染環(huán)境的新的選擇，可防治菜青蟲、蚜蟲、大豆食心蟲、棉紅蜘蛛、夜盜蟲、松峭蛾、松毛蟲、松葉蜂等，還可殺蚊、驅(qū)蠅、滅蛆，對臭蟲、虱子及跳蚤也有特效。


圖1本發(fā)明瑞香狼毒提取物制備示意圖；圖2瑞香狼毒有效活性成分的分離純化示意圖；圖3化合物A的1H核磁共振譜圖；圖4化合物B的1H核磁共振譜圖。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1瑞香狼毒提取物的制備及觸殺活性測定瑞香狼毒采自四川省若爾蓋草原，采集回來的新鮮瑞香狼毒根洗凈曬干，用粉碎機(jī)粉碎，得到絨毛狀狼毒粉。
稱取一定量瑞香狼毒根干粉，加入10倍質(zhì)量的無水乙醇浸泡后提取濃縮，再分別以不同極性溶劑正己烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇作分級萃取，獲得不同極性提取物，重復(fù)3次至萃取充分，合并相同萃取液。
根據(jù)張宗炳介紹的方法，同時(shí)采用拒食活性和觸殺活性測定毒力首先在郊外未施用過農(nóng)藥的菜地中采集菜青蟲，仔細(xì)挑選蟲體大小適中的健康3齡個(gè)體供實(shí)驗(yàn)使用。
將所得樣品與二甲基亞砜、乳油以1∶1∶2(質(zhì)量比)的比例，用超聲波充分乳化混勻，水稀釋定容作為處理液，備用。對照液以雙蒸水∶二甲基亞砜∶乳油＝1∶1∶2(質(zhì)量比)的比例配制，水稀釋定容備用。
測試萃取物對菜青蟲的拒食活性將新鮮甘藍(lán)葉片用圓形打孔器(直徑2cm)打成葉碟，將處理液和對照液按梯度稀釋。給處理組中的菜青蟲飼喂處理液處理過的葉碟，對照組飼喂對照液處理過的葉碟。選用3齡菜青蟲，每組20頭蟲，重復(fù)3次。將菜葉及菜青蟲放入鋪有濾紙的φ15培養(yǎng)皿中，合上養(yǎng)蟲籠防止菜青蟲爬失，置室溫(25℃)，分別于處理后24h、48h和72h時(shí)觀察，用坐標(biāo)紙記錄取食面積。
測試萃取物對菜青蟲的觸殺活性采用浸蟲法，將試蟲放于濾網(wǎng)中浸于按梯度稀釋的處理液及對照液中，3s后取出，待蟲體表面藥液晾干，將試蟲放于養(yǎng)蟲籠中。均飼喂?jié)崈舾仕{(lán)葉片。選用3齡蟲，饑餓6h，每組20頭蟲，重復(fù)3次。分別于處理后24h、48h和72h觀察，記錄死亡情況。


活性結(jié)果見表1。并測定24h拒食率。
表1 不同SCEE萃取物對菜青蟲的觸殺、拒食活性

從表1可以看出，正己烷萃取物的觸殺活性最高，72h致死中濃度(LC50)為812.1mg/L，甲醇萃取物其次；在測試拒食率的時(shí)候，正己烷萃取物的生物活性最強(qiáng)，其次是氯仿萃取物，然后是甲醇萃取物、乙酸乙酯萃取物依次減弱。因此，下一步以正己烷萃取物為起點(diǎn)通過正相硅膠柱分離純化。
實(shí)施例2瑞香狼毒滅蟲活性物質(zhì)的層析分離純化用薄層層析硅膠GF254作吸附層析固定相，在薄層自動鋪板儀上按常規(guī)方法鋪板。薄板尺寸5×10(cm)，硅膠厚度0.25mm。鋪好的板子放入烘箱中105℃烘半個(gè)小時(shí)，冷卻后存放在干燥器中待用。用點(diǎn)樣毛細(xì)管點(diǎn)樣，分別以正己烷、氯仿、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇等溶劑的不同組成不同比例的混和溶劑為展開劑展層，展層后以254nm紫外分析燈照射和碘粉蒸氣、硫酸-乙醇顯色三種方法結(jié)合檢測譜帶。選擇分離效果好，不拖尾的溶劑條件供柱層析參考。
大柱粗分大柱初分中，選擇正己烷-乙酸乙酯(體積比為20∶1)作為起始洗脫劑，采用梯度洗脫，逐漸增加極性，至正己烷-乙酸乙酯-二氯甲烷(體積比為1∶1∶1)。收集的各段洗脫流分經(jīng)濃縮后，薄層檢測及生物活性測定。
表2 大柱層析流分對菜青蟲的觸殺、拒食活性

段1約含有3條譜帶，段2約含有3條譜帶，段3約含有3條譜帶，后兩者有1條交叉譜帶。生物活性測定結(jié)果表明，段2表現(xiàn)較好的活性，所以，合并段2、段3，進(jìn)一步分離純化。
中柱細(xì)分采用正己烷-乙酸乙酯(體積比為10∶1、4∶1、1∶1)、正己烷-乙酸乙酯-二氯甲烷(體積比為1∶1∶1)、二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(體積比為10∶10∶2)；梯度洗脫，分部收集，分得3個(gè)流分，各流分經(jīng)薄層檢測及生物活性測定；段1約含有2條譜帶，段2約含有3條譜帶，段3約含有2條譜帶。段1、段2有一條譜帶交叉，而后兩者也有一條譜帶交叉。
活性結(jié)果如表3
表3 中柱層析流分對菜青蟲的觸殺、拒食活性

結(jié)果顯示，段2具有較好的生物活性，繼續(xù)進(jìn)行小柱分離純化。
小柱細(xì)分采用正己烷-乙酸乙酯(體積比為4∶1)、二氯甲烷-乙酸乙酯(體積比為1∶1)，梯度洗脫，獲得三個(gè)流分。各流分經(jīng)薄層檢測和生物活性測定，結(jié)果如下表4 小柱層析流分對菜青蟲的觸殺、拒食活性

段1約含有1條譜帶，段2有2條譜帶，段3有2條譜帶。段2、段3有交叉譜帶。結(jié)合生物活性測定，將段2再上反相硅膠柱，進(jìn)行一下步的分離提純。
反相硅膠柱分離采用甲醇-水-四氫呋喃(體積比為16∶4∶5)、甲醇-四氫呋喃(體積比為1∶1)；梯度洗脫，反相硅膠薄板檢測，展開劑為甲醇-水-四氫呋喃(體積比為16∶4∶5)，檢測結(jié)果如下通過反相硅膠柱，從小柱的段2中又分離得到A、B兩個(gè)純品。測定生物活性結(jié)果如下表5 樣品A、B對菜青蟲的觸殺、拒食活性

由表5可知，兩樣品均顯示了較好的殺蟲活性，72h時(shí)，樣品A觸殺活性的致死中濃度(LC50)是530.3mg/L，；72h，樣品B的觸殺活性的致死中濃度(LC50)是483.4mg/L。同時(shí)，顯示了較強(qiáng)的拒食活性。
實(shí)施例3活性物質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定化合物A化合物A為淡黃色油狀物，易溶于石油醚、氯仿、乙酸乙酯等有機(jī)溶劑，紫外分析燈下在硅膠GF254薄層上呈藍(lán)紫色斑點(diǎn)。波譜數(shù)據(jù)分析如下Uvλmax(甲醇)nm；283.0，309.0(弱)。紫外吸收峰309.0nm處的弱峰為(羰基)的n→π*躍遷，紫外吸收峰283.0為π→π*的躍遷。
IR v max cm-13400.81(羥基，鈍型峰)，3027.84(苯環(huán)氫)，2930.28，2858.62(飽和氫)，1682.26(羰基)，1598.67，1581.49，1496.20，1450.86，753.90，699.65(單取代苯環(huán))。
1H-NMR(CDCl3，600Hz)δppm1.90(2H，dm)為4位H，δ2.83(2H，dm)，為5位H，δ3.13(2H，M)，為2位H，δ3.95(1H，m)為羥基H，δ4.25(1H，m)為3位H，δ7.19(1H，m寬q，)為4”位H，δ7.24(2H，寬q，)為2”，6”位H，δ7.30(2H，t)為3”，5”位H，δ7.47(2H，t，J＝7.8Hz)為3’，5’位H，δ7.59(1H，t，J＝7.8Hz)為4’位H，δ7.94(2H，t，J＝7.8Hz)為2’，6’位H。
(1)δ值根據(jù)shoolery公式δ(CH2)＝0.23+∑δ，根據(jù)公式δ(苯環(huán)氫)＝7.27-∑Si計(jì)算各H的化學(xué)位移值，再與實(shí)測值比較如下表6.δ值比較 由上表可知，苯環(huán)氫化學(xué)位移實(shí)測值與計(jì)算值較為符合，由于羥基和羰基的影響，亞甲基以及次甲基上的氫均向低場移動，但都在各自化學(xué)位移之內(nèi)。對于羥基氫，由于樣品采用乙醇提取，因此可能與樣品發(fā)生締合，故使得譜圖上出現(xiàn)裂分。
(2)J偶合及H個(gè)數(shù)δ＝1.90處是兩組多重峰，分別是4位的2個(gè)氫受5位2個(gè)氫及3位氫影響裂分；δ＝2.83處是兩組多重峰，分別為5位氫的2個(gè)氫受4位2個(gè)氫和苯環(huán)上氫的影響裂分。δ＝3.13是四組雙重峰，為2位氫受3位碳上氫以及苯環(huán)上的氫影響裂分，δ＝4.25為一組多重峰，為3位氫受2位和4位氫兩種環(huán)境不同的氫影響而產(chǎn)生的多重裂分峰。芳環(huán)氫δ7.10～7.26處為2”，4”，6”H重疊在一起的寬峰，H個(gè)數(shù)為3，δ＝7.30處為3”，5”兩個(gè)H受兩旁H裂分為三重峰。δ7.47為3’，5’處受兩旁H裂分的1∶2∶1三重峰，δ＝7.59為4’位受3’，5’兩位2個(gè)H(A2系統(tǒng))裂分的三重峰。δ＝7.94處位2’，6’H受3’或5’H裂分位1∶1的二重峰。
13C-NMR(CDCl3，400Hz)δppm31.807(C-5)，38.081(C-4)，44.976(C-2)，67.645(C-3)，107.919～178.415(12C，苯環(huán)上的C信號)，200.887(羰基碳)13C具體分析羰基碳化學(xué)位移值在200處，可以確定為酮基，印證了紅外譜中的羰基峰。根據(jù)公式δ(芳環(huán)C)＝128.5+∑Ai，δ(烷烴C)＝-2.6+∑nijAj+∑Si計(jì)算各碳的化學(xué)位移值，再與實(shí)測值比較，結(jié)果如下
表7δ值比較 由上表可知，各化學(xué)位移值與計(jì)算值較符合，由于受羰基和羥基的影響而稍有偏移，但卻在各自化學(xué)位移的正常范圍內(nèi)。
根據(jù)質(zhì)譜分析，得分子式為C17H18O2。不飽和度Ω＝1+n4+(n3-n1+3n5)/2＝1+17-18/2＝9綜合光譜及波譜分析，化合物A為1，5-二苯基-3-羥基-1-戊酮，與通過有機(jī)合成的方法得到產(chǎn)品鑒定結(jié)果相同。
化合物B化合物B為淺乳黃色晶體，易溶于石油醚、氯仿、乙酸乙酯等有機(jī)溶劑，在紫外燈下不顯色，在碘蒸氣和硫酸-乙醇溶劑中顯色。波譜數(shù)據(jù)分析如下Uvλmax(甲醇)nm208.0，285.0(弱)。可初步推測其中含有醛酮得羰基或共軛羰基。
IR v max cm-13368.34，3306.58處有寬峰，(υ-OH伸縮振動峰，由于羰基間存在氫鍵，使譜帶移向低頻，并且峰形變寬)2920.33，2853.16(υC＝C-H，S)，1711.63(υc＝0，S)，1463.69，1411.79，1379.10(δCH，m)，1258.50，1072.94(υc＝0，m)，723.96(δCH，w)1H-NMR(CDCl3，600Hz)δppm0.89(m)為甲基氫，2.35(t)為 受旁邊亞甲基影響裂分為三重峰。在1.20～2.10處有多組峰，為亞甲基或次甲基氫的峰。
13C-NMR(CDCl3，400HZ)δppm179.408為 129.237，127.991為雙鍵碳。26左右為五元環(huán)以上環(huán)烷烴，14為甲基碳。
EI-MSm/z(％)根據(jù)同位素及M+離子分析，查Beyon表得分子式為C18H32O3.Ω＝1+n4+1/2(n3-n1+3n5)＝1+18-32/2＝3.有M-17[--OH(R)]， 確定化合物B結(jié)構(gòu)為4-羥基倍半萜烯丙酯(4-Hydroxy-Sesquiterpene-propylene-ester)， 實(shí)施例4本發(fā)明農(nóng)藥的制備將本發(fā)明正己烷提取物100g與二甲亞砜、乳油以質(zhì)量比1∶1∶2混合，用超聲波充分乳化混合均勻，即得抗菜青蟲農(nóng)藥。使用時(shí)用水稀釋至33-50L，使提取物濃度為2000-3000mg/L左右。
實(shí)施例5本發(fā)明農(nóng)藥的制備將本發(fā)明化合物12.5g與二甲亞砜、乳油以質(zhì)量比1∶1∶2混合，用超聲波充分乳化混合均勻，即得抗菜青蟲農(nóng)藥。使用時(shí)用水稀釋至12.5-25L，使化合物A的濃度為500-1000mg/L左右。
實(shí)施例6本發(fā)明農(nóng)藥的制備將本發(fā)明化合物25g與二甲亞砜、乳油以質(zhì)量比1∶1∶2混合，用超聲波充分乳化混合均勻，即得抗菜青蟲農(nóng)藥。使用時(shí)用水稀釋至12.5-17L，使化合物B濃度為1500-2000mg/L左右。
綜上所述，本發(fā)明提供的瑞香狼毒正己烷提取物、化合物A、化合物B等都對對菜青蟲具有較強(qiáng)的毒殺和拒食活性，以其為殺蟲活性物質(zhì)的農(nóng)藥具有藥效快，有效期長，質(zhì)量可控的特點(diǎn)，為農(nóng)業(yè)提供了一種高效低毒，無殘留，不污染環(huán)境的新的殺蟲農(nóng)藥選擇。
權(quán)利要求
1.瑞香狼毒正己烷提取物在殺蟲農(nóng)藥中的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求2所述用途，其特征在于所述的殺蟲農(nóng)藥是抗菜青蟲農(nóng)藥。
3.一種殺蟲農(nóng)藥，它是由瑞香狼毒正己烷提取物為活性成分制備而成，它含有正己烷提取物2000～3000mg/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的殺蟲農(nóng)藥，其特征在于所述的正己烷提取物是由如下方法制備將瑞香狼毒根粉用7～15倍量無水乙醇浸泡、提取、濃縮，再以正己烷萃取、濃縮得正己烷提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的殺蟲農(nóng)藥，其特征在于所述瑞香狼毒正己烷提取物中含有化合物A、B中的一種或兩種 化合物A 1，5-二苯基-3-羥基-1-戊酮 化合物B 4-羥基倍半萜烯丙酯。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的殺蟲農(nóng)藥，其特征在于瑞香狼毒正己烷提取物中含有500～1000mg/L的化合物A。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的殺蟲農(nóng)藥，其特征在于瑞香狼毒正己烷提取物中含有1500～2000mg/L的化合物B。
8.根據(jù)權(quán)利要求5-7任一項(xiàng)所述的殺蟲農(nóng)藥，其特征在于化合物A和/或B的制備方法如下其中固定相為硅膠H；a、大柱粗分流動相體積比為20～1∶1的正己烷-乙酸乙酯，梯度洗脫，最后以體積比為1∶1∶1的正己烷-乙酸乙酯-二氯甲烷清柱，分三段收集得大柱段1、段2、段3樣品；b、中柱細(xì)分a步驟所得段2、段3樣品上中柱；流動相體積比為10～1∶1正己烷-乙酸乙酯、體積比為1∶1∶1正己烷-乙酸乙酯-二氯甲烷、體積比為10∶10∶2二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇；梯度洗脫，分部收集，得到三個(gè)流分，中柱段1、段2、段3；c、小柱細(xì)分將b步驟樣品段2上柱；流動相體積比為4∶1正己烷-乙酸乙酯、體積比為1∶1二氯甲烷-乙酸乙酯；梯度洗脫，得到三個(gè)流分，小柱段1、段2、段3；d、反相硅膠柱分離固定相反相硅膠，將c步驟樣品小柱段2上柱；流動相體積比為(10～20)∶(2～5)∶(3～7)的甲醇-水-四氫呋喃、體積比為1∶1甲醇-四氫呋喃；梯度洗脫，經(jīng)反相薄層檢測后合并相同流分，濃縮分別得化合物A與B。
9.權(quán)利要求5所述的化合物A或/和B在制備殺蟲農(nóng)藥中的用途。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述用途，其特征在于所述的殺蟲農(nóng)藥是抗菜青蟲農(nóng)藥。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種瑞香狼毒正己烷萃取物和進(jìn)一步分離得到的活性化合物A、B在農(nóng)藥中的應(yīng)用。以菜青蟲為靶標(biāo)昆蟲，生物活性測試結(jié)果表明狼毒正己烷萃取物在稀釋30倍時(shí)，對菜青蟲72h內(nèi)的校正死亡率為100％；化合物A1，5－二苯基－3－羥基－1－戊酮(1，5－Diphenyl－3－Hydroxy－1－Pentanone)，其對菜青蟲的觸殺活性為483.4mg/L(LC
文檔編號A01N37/02GK1714641SQ20051002133
公開日2006年1月4日 申請日期2005年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月27日
發(fā)明者侯太平, 肖波, 張可君, 陳琳, 魯韜 申請人:四川大學(xué)