專利名稱：紫莖澤蘭鏈格孢菌代謝物用于生物除草的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明為紫莖澤蘭鏈格孢菌的代謝產(chǎn)物用于生物除草的方法，屬于微生物應(yīng)用于農(nóng)業(yè)植物保護(hù)、防除農(nóng)作物雜草的技術(shù)領(lǐng)域，專用于農(nóng)田、草坪、果園、路埂地雜草的防除。
由于轉(zhuǎn)基因抗除草劑作物的大面積推廣使用，傳統(tǒng)的選擇性強(qiáng)、殺草譜窄、緩效、殘留期長(zhǎng)的化學(xué)除草劑將逐漸被淘汰，而致力于發(fā)展殺草迅速、殺草譜廣、低毒、低殘留、不易導(dǎo)致雜草抗藥性的化學(xué)除草劑品種，通過培育轉(zhuǎn)基因抗性作物獲得大面積推廣，這是目前生物除草劑源除草劑研究的主要方向。
以微生物的代謝產(chǎn)物或從微生物中分離得到的植物毒素作為除草劑治理雜草是生物除草劑研究或開發(fā)的熱點(diǎn)之一，主要集中在土壤中的放線菌和植物病原真菌上。比如由鏈霉菌產(chǎn)生的雙丙氨膦(Bialaphos)、除莠霉素A(Herbimycin A)、殺草菌素(Herbicidin)和茴香霉素(Amismycin)等，鏈格孢菌產(chǎn)生的AAL毒素、騰毒素(Tentoxin)、交鏈孢酸(Alternaricacid)和柑桔交鏈孢菌素(ACRL)等，凹臍蠕孢菌產(chǎn)生的水稻胡麻病菌毒素(Ophiobolins)、色醇(Tryptophol)和Resorcylides等。根據(jù)雙丙氨膦結(jié)構(gòu)模擬合成的廣譜型除草劑草丁膦已經(jīng)廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因抗草丁膦油菜等作物田。
關(guān)于鏈格孢菌產(chǎn)生的代謝物的除草活性已有些報(bào)道，發(fā)明人此前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該菌的粗代謝物可以用于控制雜草，并獲得了中國(guó)發(fā)明專利專利號(hào)ZL00112560.5。本發(fā)明是進(jìn)一步將粗代謝進(jìn)行純化、分離、鑒定出的純物質(zhì)。但是，有關(guān)利用從粗代謝物中純化分離出單體毒素控制雜草，僅AAL-toxin毒素的殺草方法申請(qǐng)了專利，在該專利中，曾提及含有該毒素的粗提物的除草活性，其主要有這些特征是主要針對(duì)某些闊葉雜草如龍葵、曼佗羅、弗吉尼亞合萌、大果田菁等，對(duì)禾本科雜草幾乎無(wú)效；粗提物是以固體培養(yǎng)基如玉米粉或大米進(jìn)行固體培養(yǎng)后，經(jīng)水洗過濾而獲得的過濾液，具活性的濃度在1000ppm以上等。因而，沒有本發(fā)明殺草譜寬，與本發(fā)明明顯不同。
從鏈格孢菌固體和液體培養(yǎng)物中分離得到具有除草活性的酰胺類物質(zhì)細(xì)交鏈孢菌酮酸(Tenuazonic acid)、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(結(jié)構(gòu)式)(Iso-tenuazonic acid)，它們互為同分異構(gòu)體。細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸的物理化學(xué)性質(zhì)參數(shù)分子式為C10H15NO3，是一種無(wú)色粘滯的油狀物；細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鈣和細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鈣、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鎂、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合銅等鹽為不定形粉末；極易溶于甲醇、乙酸乙酯、二甲亞砜等有機(jī)溶劑，在氯仿、苯、冰乙酸、丙酮中溶解不好，在石油醚等低極性的溶劑中溶解性差。
細(xì)交鏈孢菌酮酸(Tenuazonic acid)(左)、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(Iso-tenuazonic acid)(右)的結(jié)構(gòu) 細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鎂 細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鈣不僅在鏈格孢菌中發(fā)現(xiàn)了細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)，且在蘋果、胡椒、番茄、小麥、高粱、向日葵種子、胡蘿卜、油菜種子、橄欖、柑桔、煙草和水稻等和水稻病原真菌Aspergillus flavus、Pyricularia oryzae、爪哇酒曲霉(Eleusine coracana Gaertn.)等微生物及干木薯、番茄制品等食品中也發(fā)現(xiàn)了細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)的存在。細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸的活性已有些報(bào)道，細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸能感染水稻植株和煙草形成棕色病斑，能使番茄葉片嚴(yán)重失綠并壞死，還能抑制番茄、水稻、小麥、黑麥和萵苣幼苗的生長(zhǎng)；細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸還能抑制胡蘿卜種子的萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)；細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸在10-4M濃度下可以抑制寄生雜草Striga hermonthica種子50％左右的萌發(fā)。但關(guān)于用細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸莖葉處理，直接殺死生長(zhǎng)中的雜草，而不僅僅通過抑制種子萌發(fā)的方法防除雜草；殺除的雜草種類也完全不同與報(bào)道中的寄生雜草Striga hermonthica，而是涉及到幾乎農(nóng)田發(fā)生的所有主要雜草，其防除名錄見后，這是沒有查到申請(qǐng)了專利或見報(bào)道的；特別是細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鈣、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鎂、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合銅、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鐵為新化學(xué)結(jié)構(gòu)。這些是本專利發(fā)明的創(chuàng)新性之所在。
本發(fā)明是利用具有植物毒素活性的鏈格孢菌代謝產(chǎn)物細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類作為生物源化學(xué)除草劑，用于生物除草。我國(guó)目前尚未有一種生物源除草劑產(chǎn)業(yè)化，客觀上發(fā)展生物源除草劑技術(shù)，并推動(dòng)其產(chǎn)業(yè)化，將改變我國(guó)目前除草劑的產(chǎn)品結(jié)構(gòu)，農(nóng)藥化工的產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，全面提升科技含量。該化合物殺草迅速，通?？梢栽谔幚碇?4小時(shí)左右表現(xiàn)明顯的受害癥狀，3-5天殺死雜草。殺草譜(范圍)廣泛，細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸能安全有效地控制禾本科雜草馬唐、稗草、牛筋草、狗尾草、看麥娘、日本看麥娘、菵草、野燕麥、早熟禾、硬草、棒頭草、長(zhǎng)芒棒頭草，闊葉雜草紫莖澤蘭、鐵莧菜、鱧腸、反枝莧、豬殃殃、大巢菜、鴨舌草、節(jié)節(jié)菜、水莧菜、馬齒莧、播娘蒿、薺菜、鴨跖草、遏藍(lán)菜、小花糖芥、碎米薺、婆婆納、粘毛卷耳和莎草牛毛氈、異型莎草、碎米莎草、飄拂草發(fā)生于農(nóng)田中的主要雜草。
該發(fā)明涉及的化合物活性高，在低至5-70μg/g濃度就具有十分明顯的活性，因而是高效生物源化學(xué)除草劑。
此外，對(duì)環(huán)境污染小，殘留少，在使用進(jìn)入土壤后，幾乎沒有活性，很快鈍化。因而，考慮到其是生物源，具有相當(dāng)高的環(huán)境安全性。
本發(fā)明鏈格孢菌的代謝產(chǎn)物細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類用于生物除草的方法，其內(nèi)容和實(shí)施方案如下
細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類用于控制雜草的方法為將固體或液體培養(yǎng)鏈格孢菌所得的粗代謝產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析和薄層色譜制備純化得到的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)，在5-500μg/g濃度(或加入少量助劑)之間，可在5天內(nèi)對(duì)雜草和一些作物表現(xiàn)出明顯的植物毒性，并能殺死雜草，這些雜草包括了主要的闊葉雜草、禾草和莎草。
根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鹽類為細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鈣、細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂、細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸銅、細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鐵、細(xì)交鏈孢菌酮酸、細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鈉、細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鉀、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鈣、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鎂、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合銅、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鐵。
根據(jù)權(quán)利要求1所述的鏈格孢菌代謝物細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類用于生物除草的方法，其殺草的主要種類為禾本科雜草馬唐、稗草、牛筋草、狗尾草、看麥娘、日本看麥娘、菵草、野燕麥、早熟禾、硬草、棒頭草、長(zhǎng)芒棒頭草；闊葉雜草紫莖澤蘭、鐵莧菜、鱧腸、反枝莧、豬殃殃、大巢菜、鴨舌草、節(jié)節(jié)菜、水莧菜、馬齒莧、播娘蒿、薺菜、鴨跖草、遏藍(lán)菜、小花糖芥、碎米薺、婆婆納、粘毛卷耳和莎草牛毛氈、異型莎草、碎米莎草、飄拂草等發(fā)生于農(nóng)田中的主要雜草，表明該物質(zhì)具有廣譜性。
根據(jù)權(quán)利要求1所述的鏈格孢菌代謝物細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類用于生物除草的方法，其對(duì)雜草和作物的植物毒性特征為對(duì)雜草幼苗作莖葉處理時(shí)，處理12小時(shí)后引起雜草明顯的受害癥狀，接觸藥液處的莖和葉失綠白化、萎蔫、干枯，直至全株死亡。對(duì)成長(zhǎng)植株，可以引起莖、葉出現(xiàn)褐色病斑，并壞死。在雜草三葉期前進(jìn)行施藥處理為最佳處理期。
根據(jù)權(quán)利要求1所述的鏈格孢菌粗代謝物細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類用于生物除草的方法，其助劑的特征為表面活性劑、植物源助劑、增效劑以及滲透劑，主要種類為JFC、SDL、吐溫-80、十二烷基磺酸鈉、農(nóng)升GL-110、CGN-3、氮酮、小4204、SDP。
根據(jù)權(quán)利要求1所述的鏈格孢菌代謝物細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類用于生物除草的方法，其對(duì)雜草的作用機(jī)制是細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)使葉片的光合放氧速率和表觀量子效率明顯降低，作用位點(diǎn)在類囊體膜上，主要抑制光系統(tǒng)II的電子傳遞活性。
發(fā)明人在對(duì)紫莖澤蘭的生物防治研究過程中發(fā)現(xiàn)了野外紫莖澤蘭的自然發(fā)病現(xiàn)象，故對(duì)其寄生真菌進(jìn)行分離鑒定研究，經(jīng)過對(duì)多各菌株的致病性和產(chǎn)毒特性的篩選研究，獲得了鏈格孢菌(Alternaria alternata(Fr.)Keissler)菌株501，對(duì)其生物學(xué)特性、培養(yǎng)方法、大批量生產(chǎn)工藝、致病性及致病機(jī)理進(jìn)行了深入的研究，發(fā)現(xiàn)其致病的主要作用機(jī)理是致病植物毒素的產(chǎn)生。通過對(duì)鏈格孢菌經(jīng)液體培養(yǎng)后濾除活菌后的培養(yǎng)殘液，測(cè)試培養(yǎng)殘液、提取的粗毒素，發(fā)現(xiàn)在1-1000μg/ml以內(nèi)就能使雜草產(chǎn)生明顯的毒害癥狀，引起毒害癥狀的最快時(shí)間在5小時(shí)，2天內(nèi)可以完全殺死雜草。通過對(duì)經(jīng)固體或液體培養(yǎng)鏈格孢菌株獲得的粗代謝產(chǎn)物進(jìn)行硅膠柱層析分離和薄層色譜制備，分離純化得到細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行生物活性測(cè)試，發(fā)現(xiàn)在5-800μg/g濃度之間，對(duì)雜草和一些作物有明顯的植物毒性。測(cè)試發(fā)現(xiàn)用該物質(zhì)對(duì)紫莖澤蘭、馬唐、無(wú)芒稗和鱧腸(對(duì)后三者的處理加入少量助劑)作莖葉處理有很好的防除效果；該物質(zhì)能有效抑制馬唐、無(wú)芒稗等雜草子實(shí)胚根和胚芽的發(fā)生，影響其發(fā)芽率；對(duì)幾種作物大豆、水稻、小麥和玉米的子實(shí)胚根和胚芽的發(fā)生有一定的影響。
將經(jīng)PDA培養(yǎng)的菌種培養(yǎng)物小塊，接種到下列液體培養(yǎng)基之一PSK培養(yǎng)基200g土豆水煮過濾液(四層紗布過濾)，30g蔗糖，1gK2HPO4，加水至1L。
SCSC培養(yǎng)基15g玉米粉+15g黃豆粉，30g蔗糖，3gCaCO3，加水至1L。
或?qū)⑸鲜雠囵B(yǎng)基中培養(yǎng)的菌種再轉(zhuǎn)接到固體培養(yǎng)基RHWH中RHWH培養(yǎng)基50g米糠+50g麥麩+33.3ml水液體培養(yǎng)是將接種后的三角瓶在23-26℃溫度下，黑暗或12小時(shí)光照/12小時(shí)黑暗交替，震蕩(110轉(zhuǎn)/分鐘)培養(yǎng)5-8天，將培養(yǎng)液用濾紙過濾，濾液經(jīng)大孔樹脂吸附，乙醇解吸，減壓濃縮，乙酸乙酯萃取濃縮得粗毒素。固體培養(yǎng)是將接種后的不銹鋼籮筐在23-26℃溫度下，黑暗或12小時(shí)光照/12小時(shí)黑暗交替，培養(yǎng)8-10天，60℃下烘干后，在培養(yǎng)干物中按培養(yǎng)干物∶水∶乙酸乙酯為2∶1∶10(m/v/v，單位ml或g)的比例加入水和乙酸乙酯，減壓(0.1Mpa)蒸餾得餾分，然后常壓蒸餾濃縮得粗毒素。細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類的制備是將上述的粗毒素進(jìn)行多次硅膠柱層析分離，后經(jīng)TLC多次制備純化，在酸性條件下得到細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸橙黃色液體，在中性或堿性條件下可以分別得到細(xì)交鏈孢菌酮酸鈣、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鈣、細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂、細(xì)交鏈孢菌酮酸鈉、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鈉、細(xì)交鏈孢菌酮酸鉀、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鉀、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鈣、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鎂不定形固體粉末。經(jīng)分別在細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸液體提取物中加醋酸銅和醋酸鐵可以分別獲得細(xì)交鏈孢菌酮酸銅、異細(xì)交鏈孢菌酮酸銅、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合銅、細(xì)交鏈孢菌酮酸鐵、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鐵、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鐵。
用少量甲醇溶解細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)，用蒸餾水分別配制成5-40μg/g濃度的溶液，用紫莖澤蘭葉片針刺法做致病性檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)隨著濃度的升高，細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸對(duì)紫莖澤蘭葉片的致病性增加，在40μg/g濃度下，48小時(shí)后其在紫莖澤蘭葉片上形成的病斑為4.9625mm。
在35μg/g的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鈉混合溶液中加入0.1％濃度的助劑，助劑主要有JFC、SDL、吐溫-80、十二烷基磺酸鈉、農(nóng)升GL-110、CGN-3、氮酮、小4204、SDP，按平皿離體葉段點(diǎn)滴篩選助劑對(duì)該物質(zhì)藥效的發(fā)揮的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)供試的8種助劑能不同程度地提高細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸對(duì)馬唐葉片的致病作用，十二烷基磺酸鈉的效果最好，它能使細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸在馬唐葉片上充分延展開，提高滲透能力，促進(jìn)藥劑在體內(nèi)的傳導(dǎo)，增效作用顯著。氮酮和小4204的增效作用也較強(qiáng)。
設(shè)計(jì)兩種配方I.十二烷基磺酸鈉+氮酮+小4204+35μg/g的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)溶液；II.十二烷基磺酸鈉+氮酮+TFC+35μg/g的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)溶液，利用平皿葉片點(diǎn)滴法將兩種配方分別點(diǎn)滴在馬唐成熟葉段上，兩種配方都大大的提高了藥效，分別約為5倍和6倍。
用配方II對(duì)溫室盆缽種植的三葉期農(nóng)田雜草，馬唐、牛筋草、稗草、鱧腸、鐵莧菜、小藜、鴨趾草、水花生、反枝莧、打碗花、苦苣菜等雜草進(jìn)行莖葉處理，對(duì)于某些雜草，處理后12小時(shí)即可見對(duì)雜草有明顯傷害作用，雜草葉片萎蔫，2-3天后葉片失綠白化，直至干枯死亡。
用5-70μg/g的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)溶液處理馬唐、無(wú)芒稗、硬草、鱧腸、大巢菜、小麥、玉米、大豆、水稻的子實(shí)，對(duì)馬唐、無(wú)芒稗、水稻和小麥的子實(shí)發(fā)芽率；馬唐、無(wú)芒稗、水稻和玉米子實(shí)胚根的伸長(zhǎng)；水稻和小麥子實(shí)胚芽的伸長(zhǎng)有顯著的抑制作用。
細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)對(duì)雜草的作用機(jī)制是它能影響植物的光合作用，使葉片的光合放氧速率和表觀量子效率明顯降低，其作用位點(diǎn)在類囊體膜上，主要抑制兩個(gè)光系統(tǒng)的電子傳遞活性，但并不影響類囊體中膜蛋白的合成和降解，尤其是對(duì)于光合系統(tǒng)II中的角蛋白。
本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)和積極效果如下1)鏈格孢菌粗代謝產(chǎn)物用于生物除草，已經(jīng)獲得專利，但是，先前的專利中沒有涉及到有效成分的具體物質(zhì)結(jié)構(gòu)，不利于在應(yīng)用過程中有效控制其活性成分的含量和產(chǎn)品質(zhì)量，本發(fā)明是在先前專利基礎(chǔ)上進(jìn)一步深入研究，獲得的進(jìn)展，分離、純化、鑒定出活性物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，可以經(jīng)濃縮、純化，提高產(chǎn)品的有效性和殺草效果，顯著降低了用量。
2)細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸的物質(zhì)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，易于人工模擬合成，由于本發(fā)明明確了對(duì)農(nóng)田雜草具有廣譜殺草活性，可以為化學(xué)合成結(jié)構(gòu)類似的化學(xué)除草劑提供模板。細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鈣、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鎂、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合銅、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鐵是首次報(bào)道的新化合物，其具有的生物學(xué)活性對(duì)研究化合物的生理活性機(jī)制，對(duì)化學(xué)合成除草劑有積極的參考價(jià)值。
已經(jīng)報(bào)道的具有除草活性的鏈格孢菌毒素如騰毒素(Tentoxin)、交鏈孢酸(Alternaricacid)和柑桔交鏈孢菌素(ACRL)的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，人工模擬合成相對(duì)困難，且成本較高。
3)已經(jīng)報(bào)道細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸對(duì)水稻、番茄、小麥、黑麥、萵苣、煙草等作物的葉導(dǎo)致褐色病斑，抑制其幼苗的生長(zhǎng)，此外，報(bào)道對(duì)寄生雜草獨(dú)角金的種子萌發(fā)有抑制活性，但是，沒有見對(duì)農(nóng)田主要雜草具有殺滅作用，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸特別是其鹽類具有廣譜殺除農(nóng)田雜草的活性，在最低5μg/g的低濃度下就能對(duì)紫莖澤蘭、馬唐等雜草造成毒害作用，作用迅速，用量低，對(duì)環(huán)境污染小，因而是高效生物源化學(xué)除草劑，這發(fā)展了對(duì)這類物質(zhì)在生物除草上的利用價(jià)值和應(yīng)用前景。由于該物質(zhì)的作用迅速，可以作為百草枯和草甘膦兩種大量應(yīng)用滅生性除草劑的替代品。百草枯的環(huán)境毒性較高屬中毒，而草甘膦的作用緩慢，殺滅雜草的最快速度也在10天以上。
現(xiàn)有技術(shù)中鏈格孢菌代謝物AAL-Toxin用于除草，主要針對(duì)某些闊葉雜草如龍葵、曼佗羅、弗吉尼亞合萌、大果田菁等，對(duì)禾本科雜草幾乎無(wú)效；本發(fā)明可以用于控制發(fā)生于農(nóng)田主要的雜草包括馬唐、稗草、牛筋草、狗尾草、看麥娘、日本看麥娘、菵草、野燕麥、早熟禾、硬草、棒頭草、長(zhǎng)芒棒頭草，闊葉雜草紫莖澤蘭、鐵莧菜、鱧腸、反枝莧、豬殃殃、大巢菜、鴨舌草、節(jié)節(jié)菜、水莧菜、馬齒莧、播娘蒿、薺菜、鴨跖草、遏藍(lán)菜、小花糖芥、碎米薺、婆婆納、粘毛卷耳和莎草牛毛氈、異型莎草、碎米莎草、飄拂草。
4)以細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)做莖葉處理可以防除絕大多數(shù)的農(nóng)田主要雜草，使用方便，可以見草殺草。此外，對(duì)環(huán)境污染小，殘留少，在使用進(jìn)入土壤后，很快鈍化，因而，考慮到其是生物源，具有相當(dāng)高的環(huán)境安全性。
實(shí)施例實(shí)施例1將紫莖澤蘭(Eupatorium adenophorum Spreng.)自然致病菌——鏈格孢菌(Alternariaalternata(Fr.)Keissler)的21株自然變異菌株在PDA培養(yǎng)基上，25℃黑暗培養(yǎng)三天后置于15W紫外燈下30cm處，12小時(shí)照射/12小時(shí)黑暗交替培養(yǎng)7天，用無(wú)菌水沖洗得孢子溶液，接種105個(gè)孢子于80mlPSK培養(yǎng)基中，25℃，100r/min培養(yǎng)6天，培養(yǎng)液濾紙過濾后，在121℃下，滅菌20分鐘得到無(wú)菌濾液。取紫莖澤蘭第三片葉子，先用自來(lái)水沖洗干凈，再用0.1％HgCl2處理35min，無(wú)菌水清洗3次，用滅菌的濾紙吸干葉表面水分；在葉背面離葉緣1-2cm處針刺造成輕微傷害，分別吸取無(wú)菌濾液20μl滴于針刺處，在25±1℃下，光照時(shí)間12h后，測(cè)量病斑直徑，置于解剖鏡下，測(cè)定病斑的直徑大小，最后統(tǒng)計(jì)分析，確定菌株的產(chǎn)毒能力差異，結(jié)果見表2。
表2表明菌株NEW、新402、新501和安501四個(gè)菌株的致病力均顯著高于其它菌株，其中NEW菌株的致病力最強(qiáng)，其中的致病毒素應(yīng)該是最高的，可作為產(chǎn)毒菌株培養(yǎng)用于毒素生產(chǎn)。
表2 21個(gè)菌株P(guān)SK培養(yǎng)濾液致病力比較菌株病斑直徑(mm)5％差異水平 1％差異水平NEW 5.138 aA新4024.963 aAB新5014.669 bB501 4.6235bBA婆 2.5865cCB2.401 cd CD原5032.3135dCDE501-12.212 de DE402 2.1525de DE501-42.002 ef EF501-J1.785 fF501-51.764 fF馬A 1.141 gGqs-503 1.092 gGQZ-101 1.015 gGAW 0.91 gGLS 0.5775hHI501-30.5565hHI501-20.4165hi HIYN 0.3745hi HICK 0.1855iI實(shí)施例2將501菌株接種在SCSC液體培養(yǎng)基中，于溫度為25±1℃、光照為12h/d、搖速為110rpm/min的條件下培養(yǎng)5-7天。將培養(yǎng)液用濾紙過濾，濾液經(jīng)高速離心，取上清液用0.45μm微孔薄膜過濾，得無(wú)菌濾液。100-200目的層析用硅膠柱層析，按極性由弱到強(qiáng)的順序用不同的溶劑系統(tǒng)不連續(xù)梯度洗脫。
洗脫溶劑系統(tǒng)的加入順序?yàn)槭兔选兔选靡宜嵋阴ィ?∶1→石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1→石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1→石油醚∶乙酸乙酯＝1∶3→石油醚∶乙酸乙酯＝1∶5→乙酸乙酯∶甲醇＝5∶1→乙酸乙酯∶甲醇＝3∶1→乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1→乙酸乙酯∶甲醇＝1∶3→乙酸乙酯∶甲醇＝1∶5→甲醇。
(2)第2次硅膠柱層析(方法同上)將1次硅膠柱層析石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1和石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1洗脫下來(lái)的有生物活性的部位分別再次上100-200目硅膠柱，溶劑系統(tǒng)進(jìn)一步細(xì)化，先后為石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1→石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1→石油醚∶乙酸乙酯＝3∶2→石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1→乙酸乙酯→乙醇，常壓濃縮后用水稀釋一定的倍數(shù)檢測(cè)生物活性，有活性部位依預(yù)知檢測(cè)硅膠板上的展開情況合并，備TLC制備分離。
將柱層析得到的有活性部位物質(zhì)用適量乙酸乙酯溶解，用點(diǎn)樣用毛細(xì)管點(diǎn)條斑于TLC制備板的基部，用展開劑展開后，分別刮下裝柱，用乙酸乙酯或乙醇沖洗至無(wú)物質(zhì)流出為止，改變層析條件，跟蹤活性物質(zhì)，反復(fù)制備，在酸性條件下常壓濃縮得到橙黃色液體，在中性或堿性條件下常壓濃縮得到無(wú)定形橙色固體粉末。
實(shí)施例3用少量甲醇溶解細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸混合物后，用蒸餾水分別配制5μg/g、10μg/g、15μg/、20μg/g、25μg/g、30μg/g、35μg/g、40μg/g濃度的溶液，同時(shí)設(shè)相當(dāng)濃度的甲醇溶劑對(duì)照和清水對(duì)照，用紫莖澤蘭葉片針刺法做致病性檢測(cè)，每處理重復(fù)6次以上，25℃，自然光照下保濕放置48h后用顯微測(cè)微尺測(cè)量病斑直徑。
表3表明細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸混合物對(duì)紫莖澤蘭有較高的致病性，在5μg/g的濃度條件下就可見明顯的植物毒性，與無(wú)菌濾液的毒性相當(dāng)，但與對(duì)照相比差異極顯著(P＜0.01)。
表3不同濃度的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸對(duì)紫莖澤蘭的致病性檢測(cè)的方差分析結(jié)果處理平均值(mm)5％差異1％差異清水CK 0.27675 hH溶劑CK 0.288hH無(wú)菌濾液 0.7065 gG5μg/g 0.798gFG10μg/g0.972fF15μg/g1.197eE20μg/g1.31 de DE25μg/g1.434dD30μg/g4.316667 cC35μg/g4.688889 bB40μg/g4.9625 aA實(shí)施例3用少量甲醇溶解細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂和細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根鎂后，加蒸餾水分別配制50μg/g濃度的溶液，同時(shí)設(shè)相當(dāng)濃度的甲醇溶劑對(duì)照和清水對(duì)照，用紫莖澤蘭葉片針刺法做致病性檢測(cè)，每處理重復(fù)6次以上，25℃，自然光照下保濕放置48h后用顯微測(cè)微尺測(cè)量病斑直徑。
表3表明細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂和細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鎂對(duì)紫莖澤蘭均有較高的致病性，在50μg/g的濃度條件下就可見明顯的植物毒性，明顯高于無(wú)菌濾液的毒性，相比差異極顯著(P＜0.01)。
表3不同濃度的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸對(duì)紫莖澤蘭的致病性檢測(cè)的方差分析結(jié)果處理平均值(mm) 5％差異 1％差異清水CK 0.27675bB溶劑CK 0.288 bB無(wú)菌濾液0.7065 bB細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂2.78 aA異細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂 2.972 aA細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異3.197 aA細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鎂實(shí)施例4分別用0.1％濃度的TFC、SDL、吐溫-80、十二烷基苯磺酸鈉、農(nóng)升GL-110、CGN-3、氮酮、小4204和35μg/g濃度的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)混合物溶液混合，按平皿離體葉段點(diǎn)滴篩選助劑的方法比較8種供試助劑的增效作用差異。同時(shí)設(shè)清水對(duì)照CK0、0.1％濃度的助劑對(duì)照CK1和35μg/g濃度的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)溶液對(duì)照CK2，每處理重復(fù)6次。對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，分析結(jié)果見表4，表4結(jié)果表明供試的8種助劑能不同程度地提高粗毒素對(duì)馬唐葉片的致病作用，其中助劑十二烷基苯磺酸鈉效果是最好的，它能使粗毒素在馬唐葉片上充分延展開，提高滲透能力，促進(jìn)藥劑在體內(nèi)的傳導(dǎo)，增效作用明顯。助劑G(氮酮)和H(小4204)的增效作用也較強(qiáng)。
表4不同助劑的增效作用差異0.1％濃度 JFCSDL吐溫-80十二烷基 農(nóng)升 CGN-3 氮酮 小4204苯磺酸鈉 GL-110CK0(mm)0 0 0 0 0 0 0 0CK1(mm)0 0 0 0 0 0 0 0CK2(mm)3.882353 3.882353 3.882353 3.882353 3.882353 3.882353 3.882353 3.882353處理(mm) 4.64.7 5.655556 12.8757.9 4.485714 11.0714311.6實(shí)施例5利用平皿葉片點(diǎn)滴法將設(shè)計(jì)好的兩種配方分別點(diǎn)滴于馬唐成熟葉段上，設(shè)清水對(duì)照CK0、助劑對(duì)照CK1和35μg/g濃度的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)混合物溶液對(duì)照CK2。每處理重復(fù)16次。配方中各種助劑的濃度皆為0.1％。處理結(jié)果見表3。
配方I助劑D+助劑G+助劑H+35μg/g濃度的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)混合物溶液；配方II助劑D+助劑G+助劑A+35μg/g濃度的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)混合物溶液對(duì)結(jié)果進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表5。從表5中分析的結(jié)果我們可發(fā)現(xiàn)配方I提高了細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸(鹽)混合物藥效的5倍左右，但不如配方II，配方II的增效作用更加明顯，提高藥效在6倍以上，配方II的增效作用極顯著(P＜0.01)高于配方I。
表5兩種配方對(duì)馬唐離體葉片毒性的方差分析處理平均病斑直徑(單位mm)5％差異1％差異CK0 0d DCK1 I 0d DCK1 II 0d DCK2 3.88 c C配方I 18.28b B配方II 30.26a A實(shí)施例6用實(shí)施例4中配方II對(duì)溫室盆缽種植的三葉期雜草幼苗進(jìn)行莖葉處理。用藥量以雜草莖葉表面濕潤(rùn)為度，每處理重復(fù)3次，同時(shí)設(shè)清水CK1和助劑CK2，2d后統(tǒng)計(jì)發(fā)病情況。病害情況的統(tǒng)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)見表6。統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表7。
從表7中可以看出用配II可以防除農(nóng)田主要的禾本科雜草、莎草、闊葉草馬唐、牛筋草、稗草、鱧腸、鐵莧菜、小藜、鴨趾草、水花生、反枝莧、打碗花、苦苣菜等，施藥期宜在幼苗三葉期前。
表6評(píng)價(jià)配方引起雜草莖葉病害嚴(yán)重程度的標(biāo)準(zhǔn)病害級(jí)別傷害程度4植株完全死亡3植株莖葉2/3干枯2植株莖葉1/2干枯1植株莖葉1/3干枯0植株完好，無(wú)任何傷害表7配方II對(duì)雜草作莖葉處理的結(jié)果科名植物種類 CK1 CK2配方II禾本科 牛筋草002狗尾草003馬唐 004稗草 003薏苡 002莧科反枝莧002水花生004
刺莧001錦葵科木槿002苘麻001蓼科 酸模葉蓼003羊蹄000扛板歸 003水蓼003齒果酸模002大戟科鐵莧菜 002馬鞭草科 牡荊001大麻科葎草001唇形科白蘇001一串紅 000寶蓋草 001薺苧001玄參科婆婆納 001波斯婆婆納 000鴨跖草科 鴨跖草 004火柴頭 004旋花科打碗花 004馬蹄筋 001牽牛002菊科 萬(wàn)壽菊 001蒼耳002小飛蓬 002鱧腸003苦苣菜 003馬蘭004黃鵪菜 001續(xù)斷菊 001白日菊 001一年蓬 003美洲豚草001天明精 000紫莖澤蘭004豆科 三葉草 001薔薇科蛇莓001葡萄科烏斂莓 002爬山虎 002藜科 小藜002酢漿草科 酢漿草 004車前科車前000莎草科莎草003異型莎草004水虱草 003實(shí)施例7少量甲醇溶解不同的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鹽后，用蒸餾水分別配制5μg/ml、50μg/ml和500μg/ml的三個(gè)濃度的溶液，對(duì)溫室盆缽種植的三葉期馬唐和鱧腸幼苗進(jìn)行噴霧法莖葉處理。用藥量以雜草莖葉表面濕潤(rùn)為度，每處理重復(fù)3次，同時(shí)設(shè)清水CK，2d后統(tǒng)計(jì)發(fā)病情況，病害情況的統(tǒng)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)見表6，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表8。
表8不同的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鹽對(duì)雜草作莖葉處理的結(jié)果鹽類 雜草CK 5μg/ml 50μg/ml 500μg/ml細(xì)交鏈孢菌酮酸鈣 馬唐0 1 4 4鱧腸0 1 3 4細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂 馬唐0 1 4 4鱧腸0 1 3 4細(xì)交鏈孢菌酮酸銅 馬唐0 1 4 4鱧腸0 0 2 4細(xì)交鏈孢菌酮酸鐵 馬唐0 1 4 4鱧腸0 0 2 4細(xì)交鏈孢菌酮酸鈉 馬唐0 1 4 4鱧腸0 1 3 4細(xì)交鏈孢菌酮酸鉀 馬唐0 1 4 4鱧腸0 1 3 4異細(xì)交鏈孢菌酮酸 馬唐0 1 3 4鈣 鱧腸0 1 3 4異細(xì)交鏈孢菌酮酸 馬唐0 1 3 4鎂 鱧腸0 1 2 4異細(xì)交鏈孢菌酮酸 馬唐0 1 2 4銅 鱧腸0 0 3 4異細(xì)交鏈孢菌酮酸 馬唐0 1 3 4鐵 鱧腸0 0 2 4異細(xì)交鏈孢菌酮酸 馬唐0 1 4 4鈉 鱧腸0 1 4 4異細(xì)交鏈孢菌酮酸 馬唐0 1 3 4鉀 鱧腸0 1 4 4細(xì)交鏈孢菌酮酸 馬唐0 1 3 4根·異細(xì)交鏈孢菌酮鱧腸0 1 3 4酸根二合鈣細(xì)交鏈孢菌酮酸 馬唐0 1 3 4根·異細(xì)交鏈孢菌酮鱧腸0 1 3 4酸根二合鎂細(xì)交鏈孢菌酮酸 馬唐0 1 2 4根·異細(xì)交鏈孢菌酮鱧腸0 1 3 4酸根二合銅細(xì)交鏈孢菌酮酸 馬唐0 1 2 3根·異細(xì)交鏈孢菌酮鱧腸0 1 2 3酸根二合鐵從表8中可以看出，細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鹽在50μg/ml至500μg/ml間可以有效地防除具有代表性的禾草馬唐和闊葉雜草，并建議施藥期宜在幼苗三葉期前。
實(shí)施例8少量甲醇溶解細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸混合物后，用蒸餾水分別配制5μg/ml、8.75μg/ml、17.5μg/ml、35μg/ml、70μg/ml濃度的溶液，作馬唐、無(wú)芒稗、硬草、鱧腸、大巢菜、小麥、玉米、大豆、水稻子實(shí)的發(fā)芽抑制作用試驗(yàn)。子實(shí)先用自來(lái)水沖洗凈后，再用0.1％HgCl2處理3-5min，無(wú)菌水清洗干凈后用滅過菌的吸水紙吸干表面水分。每處理重復(fù)3次，每次重復(fù)除小麥、玉米、大豆和水稻用子實(shí)30粒外，其它植物子實(shí)用100粒，同時(shí)設(shè)清水對(duì)照CK。試驗(yàn)在直徑9cm培養(yǎng)皿中進(jìn)行，每個(gè)培養(yǎng)皿中藥液或?qū)φ瘴镔|(zhì)的用量為5ml，置于25℃光照培養(yǎng)箱中，保持光照12h/d，小麥、玉米、大豆和水稻5d后，其它植物10d后計(jì)算發(fā)芽率(以胚根與子實(shí)等長(zhǎng)為發(fā)芽)，分別測(cè)量芽長(zhǎng)和根長(zhǎng)，結(jié)果見表9。
表9不同濃度的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸混合物對(duì)雜草和作物子實(shí)萌發(fā)的影響CK 5μg/g 8.75μg/g 17.5μg/g 35μg/g 70μg/g發(fā)芽率％ 733618 9 0 0馬唐胚根長(zhǎng)度cm4.01 1.08 0.400 0 0胚芽長(zhǎng)度cm1.28 0.75 0.950.810.230發(fā)芽率％ 807347 22 14 17無(wú)芒稗 胚根長(zhǎng)度cm2.91 0.52 0.060 0 0胚芽長(zhǎng)度cm4.16 4.12 3.122.462.181.89發(fā)芽率％ 929292 85 65 7硬草胚根長(zhǎng)度cm5.95 6.88 5.352.570 0胚芽長(zhǎng)度cm6.50 7.53 7.586.552.240.60發(fā)芽率％ 808487 78 34 0鱧腸胚根長(zhǎng)度cm0.82 0.92 0.920.320.060胚芽長(zhǎng)度cm0.99 1.03 1.040.550.220發(fā)芽率％ 817353 33 10 0大巢菜 胚根長(zhǎng)度cm0.52 0.42 0.460.390.130胚芽長(zhǎng)度cm1.65 1.21 1.220.420.040發(fā)芽率％ 100 100 98 89 59 0小麥胚根長(zhǎng)度cm4.68 5.01 2.541.470.080胚芽長(zhǎng)度cm3.81 4.58 2.562.000.600發(fā)芽率％ 989875 78 78 75玉米胚根長(zhǎng)度cm8.28 6.44 4.761.520.840.35胚芽長(zhǎng)度cm2.71 3.42 2.722.261.661.82發(fā)芽率％ 7595100 90 95 75
大豆 胚根長(zhǎng)度cm5.513.13 4.485.663.04 0胚芽長(zhǎng)度cm4.383.65 4.302.473.79 3.72發(fā)芽率％ 90 60 52 0 0 0水稻 胚根長(zhǎng)度cm2.020.60 0.590 0 0胚芽長(zhǎng)度cm1.151.02 0.670 0 0表9結(jié)果顯示，在特定濃度下，細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸混合物對(duì)馬唐、無(wú)芒稗等雜草，對(duì)水稻、小麥等作物子實(shí)的萌發(fā)具有抑制作用，而對(duì)大豆子實(shí)萌發(fā)的影響較小，這可以作為細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸作為生物除草劑除草的施用范圍的依據(jù)。
權(quán)利要求
1.細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類用于控制雜草的方法為將固體或液體培養(yǎng)鏈格孢菌所得的粗代謝產(chǎn)物經(jīng)柱層析和薄層色譜制備純化得到的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類，在5-800μg/g濃度，莖葉噴霧雜草，可在5天內(nèi)使雜草表現(xiàn)出明顯的毒害癥狀，并殺死雜草，添加合適的助劑增加其殺草活性。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鹽類為細(xì)交鏈孢菌酮酸鈣、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鈣、細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鎂、細(xì)交鏈孢菌酮酸銅、異細(xì)交鏈孢菌酮酸銅、細(xì)交鏈孢菌酮酸鐵、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鐵、細(xì)交鏈孢菌酮酸鈉、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鈉、細(xì)交鏈孢菌酮酸鉀、異細(xì)交鏈孢菌酮酸鉀，以及新化合物細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鈣、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鎂、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合銅、細(xì)交鏈孢菌酮酸根·異細(xì)交鏈孢菌酮酸根二合鐵。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鏈格孢菌代謝物細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類用于生物除草的方法，其殺草的主要種類為主要的闊葉雜草、禾草和莎草，表明該物質(zhì)具有廣譜性。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鏈格孢菌粗代謝物細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其鹽類用于生物除草的方法，添加合適的助劑增加其殺草活性，其助劑的特征為十二烷基磺酸鈉、農(nóng)升GL-110、氮酮、小4204。
全文摘要
本發(fā)明為紫莖澤蘭鏈格孢菌的代謝產(chǎn)物細(xì)交鏈孢菌酮酸、異細(xì)交鏈孢菌酮酸及其主要鹽類用于控制雜草的方法，屬于微生物應(yīng)用于農(nóng)業(yè)植物保護(hù)領(lǐng)域；用5－800μg/g濃度莖葉噴霧處理農(nóng)田的主要闊葉草、禾草和莎草，迅速導(dǎo)致雜草受害，直至萎蔫，干枯死亡，具有廣譜、快速、高效的殺草活性；加合適的助劑增加了殺草活性。
文檔編號(hào)A01M21/00GK1644046SQ20051003826
公開日2005年7月27日 申請(qǐng)日期2005年1月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月28日
發(fā)明者強(qiáng)勝, 董云發(fā), 安傳福, 周兵, 朱云枝, 陳世國(guó), 戴新賓, 戴寶江, 蔡建國(guó) 申請(qǐng)人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué), 南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司