專利名稱：抗一種或多種病原體的組合物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有拮抗微生物和鹽的組合物。本發(fā)明還涉及所述組合物作為生物殺蟲劑的用途。
背景技術(shù)：
動物包括人和植物的病原感染，例如真菌感染，在世界范圍內(nèi)的生產(chǎn)能力中產(chǎn)生重大的損失。大量的病原體對農(nóng)作物和收獲產(chǎn)品中的重要經(jīng)濟損失負責。例如，青霉菌(Penicillium)和葡萄孢菌(Botrytis)種對重要的經(jīng)濟損失負責。這些種在食物中的普遍存在是特別的問題。一些種產(chǎn)生毒素并且可以使食物變成不可食用的或甚至是危險的。青霉菌(Penicillium)的種可以引起嚴重的果實腐爛，例如在蘋果(蘋果屬(Malus))、梨(梨屬(Pyrus))和檸檬(柑桔屬(Citrus spp))上。
抗病原體的殺蟲劑在本領(lǐng)域中是眾所周知的并且已經(jīng)廣泛使用了多年。用于動物和植物中真菌和細菌感染的預(yù)防的和/或處理的處理方法一般涉及抗真菌和抗細菌的農(nóng)用化學(xué)品的施用或更加環(huán)境友好的基于生物防治試劑的生物殺蟲劑的使用。出于一些原因，例如殘留減少、環(huán)境關(guān)注、耐化學(xué)殺蟲劑病原體菌株的出現(xiàn)或者化學(xué)殺蟲劑的使用限制，對于超過化學(xué)防治的生物防治的興趣正在快速增長。
作為生物防治試劑，對于病原體拮抗的微生物是已知的。已經(jīng)公布了涉及包含抗植物病原體的酵母的或其它微生物的組合物使用的文獻，其中EP 1238587在其實施例中公開了具有高濃度CaCl22％(20g/l)的包含拮抗微生物的組合物?？梢砸肳O 99/62340、WO 99/62341、美國專利號5,525,132、美國專利號5,741,699、美國專利號6,060,429、WO 00/44230、美國專利號5,288,488和美國專利號5,780,023作為其它實例。
已經(jīng)成功地使用了抗由病原體引起的植物疾病的細菌、真菌和酵母中的多種微生物。商業(yè)的生物防治產(chǎn)品例如AspireTM(Candida oleophilaMontrocher，I-182)和BiosaveTM(丁香假單胞菌(丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae))van Hall，Esc-11)曾經(jīng)和已經(jīng)分別從Ecogen Inc.(Longhorn，PA)和Ecoscience Corp.(Worcester，MA)可得到并且特別使用在收獲后的蘋果上抗損傷疾病。
然而經(jīng)常發(fā)現(xiàn)這些生物殺蟲劑不是足夠有效的。這些依賴于單一拮抗劑使用的第一代生物防治產(chǎn)品已經(jīng)被批評在商業(yè)條件下使用時不提供穩(wěn)定并可靠的防護活性。為了改善它們的防治真菌并特別是擴展青霉(Penicillium expansum)感染的天然性能，降低操作體積和成本，已尋找了新的刺激劑。
事實上，更有效的組合物能夠在每次處理使用更少的拮抗微生物的量，而不降低抗病原體的組合物的功效并且不限制所述組合物抗病原體的功效的持續(xù)時間，并且因此達到收益的經(jīng)濟閾值。
考慮到上述，本發(fā)明的主要目的是提供適于抗由病原體引起的對植物、其產(chǎn)物和動物產(chǎn)生的疾病例如由霉菌誘導(dǎo)的疾病使用的新組合物。本發(fā)明的另一個目的是提供至少如本領(lǐng)域技術(shù)水平同樣有效的組合物。本發(fā)明的更進一步的目的是提供包含較低濃度的拮抗微生物同時具有類似或更好的抗病原體功效的組合物。
發(fā)明概述在第一方面中，本發(fā)明提供了適于抗一種或多種病原體使用的新組合物，所述組合物包含至少一種拮抗微生物和至少一種選自包含式(1)化合物，磷酸鹽，硫酸鹽，抗壞血酸、異檸檬酸、檸蘋酸、乳葡糖酸(lactogluconicacids)的鹽的組的鈣、鈉或鉀鹽，和/或其衍生物， 其中A是選自Ca、K或Na的陽離子，優(yōu)選Ca或K，更優(yōu)選Ca，其中a、b、c和d是1至3的整數(shù)，條件是a×b＝c×d，并且R1選自-O-、-OH或 n是0至5的整數(shù)，R2選自H、-OH、-CH3、-CO2-、-CH2-OH、-CH2-CO2-，R3選自H或-CH2-COO-，并且R4選自H、-NH2或OH，其中當n是1時，如果R4是H，則R3不是H并且R2不是-CH3。
特別是，本發(fā)明涉及適于抗一種或多種病原體使用的組合物，所述組合物包含至少一種拮抗微生物和至少一種選自下列的鹽硫酸鈣、單堿價磷酸鈣Ca(H2PO4)2、二堿價磷酸鈣(CaHPO4)、三堿價磷酸鈣(Ca3(PO4)2)、碳酸鈣(CaCO3)、碳酸氫鈣(Ca(HCO3)2)、醋酸鈣、乙酸鈣(calcium ethanoate)、甘油酸鈣、乳酸鈣、谷氨酸鈣、赤蘚糖酸鈣(calcium erythronate)、calciumtheonate、核糖酸鈣、阿拉伯糖酸鈣(calcium arabinoate)、木糖酸鈣(calciumxylonate)、來蘇糖酸鈣(calcium lyxonate)、阿洛糖酸鈣(allonate calcium)、阿卓糖酸鈣(altronate calcium)、葡萄糖酸鈣、甘露糖酸鈣(calciummannoate)、古洛糖酸鈣、艾杜糖酸鈣、半乳糖酸鈣、塔羅糖酸鈣(calciumtalonate)、阿洛庚糖酸鈣(calcium alloheptonate)、阿卓庚糖酸鈣(calciumaltroheptonate)、葡庚糖酸鈣、甘露庚糖酸鈣、古洛庚糖酸鈣(calciumguloheptonate)、艾杜庚糖酸鈣(calcium idoheptonate)、半乳庚糖酸鈣(calciumgalactoheptonate)、塔羅庚糖酸鈣(calcium taloheptonate)、丙醇二酸鈣、蘋果酸鈣、酒石酸鈣、檸檬酸鈣、糖二酸鈣、半乳糖二酸鈣、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)、抗壞血酸鈣、異檸檬酸鈣、或二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)。
根據(jù)本發(fā)明的實施方案，所述至少一種拮抗微生物選自包含細菌、真菌和酵母的組。在特定的實施方案中，所述拮抗微生物選自包含下列的組土壤桿菌屬物種(Agrobacterium spp.)、白粉寄生菌屬物種(Ampelomycesspp.)、短梗霉菌屬物種(Aureobasidium spp)；芽孢桿菌屬物種(Bacillus spp.)、布勒擔孢酵母屬物種(Bulleromyces spp.)、假絲酵母屬物種(Candida spp.)、毛殼菌屬物種(Chaetomium spp.)、盾殼霉菌屬物種(Coniothyrium spp.)、隱球酵母屬物種(Cryptococcus spp.)、德巴利酵母屬物種(Debaryomyces spp.)、德克酵母屬物種(Dekkera spp.)、歐文氏菌屬物種(Erwinia spp.)、Exophiliaspp.、粘帚霉屬物種(Gliocladium spp.)、漢遜酵母(Hansenula spp.)、伊薩酵母屬物種(Issatchenkia spp.)、克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces spp.)、馬利亞霉屬物種(Mariannaea spp.)、Metschnikovia spp.、微結(jié)節(jié)菌屬物種(Microdochium spp.)，青霉菌屬物種(Penicillium spp.)、Phlebiopsis spp.；畢赤酵母屬物種(Pichia spp.)、假單胞菌屬物種(Pseudomonas spp.)、Pseudozyma spp.、紅酵母屬物種(Rhodotorula spp.)、酵母屬物種(Saccharomyces spp.)、擲孢酵母屬物種(Sporobolomyces spp.)、鏈霉菌屬物種(Streptomyces sp.)、Talaromyces spp.、木霉菌屬物種(Trichoderma spp.)、Ulocladium spp.、接合酵母屬物種(Zygosaccharomyces spp.)，優(yōu)選放射形土壤桿菌(Agrobacterium radiobacter)，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)，地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)，短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)，Candidaoleophila、Candida saitoana、清酒假絲酵母(Candida sake)、Candida tenius、產(chǎn)朊假絲酵母(Candida utilis)、Coniothyrium minitans、淺白隱球酵母(Cryptococcus albidus)、胡蘿卜軟腐歐文氏菌(Erwinia carotovora)、Gliocladium catenalatum、綠粘帚霉(Gliocladium virens)、Hanseniasporauvarum、耐熱克魯維酵母(Kluyveromyces thermotolerance)、Metschnikoviafuucticola、Metschnikowia reukafii、Microdochium dimerum、草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)、Phlebiopsis gigantean、異常畢赤酵母(Pichiaanomala)、季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、洋蔥假單胞菌(Pseudomonas cepacia)、綠針假單胞菌(Pseudomonas chlororaphis)、熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)、丁香假單胞桿菌(Pseudomonassyringae)、Pseudozyma flocullosa、粘紅酵母(Rhodotorula glutinis)、粘質(zhì)紅酵母(Rhodotorula mucilaginosa)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、灰綠鏈霉菌(Streptomyces griseoviridis)、黃色蠕形霉(Talaromyces flavus)、深綠木霉(Trichoderma atroviride)、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、多孢木霉(Trichoderma polysporum)、綠色木霉(Trichoderma viride)、Ulocladiumatrum。
在本發(fā)明的實施方案中，在本組合物中要使用的至少一種鹽是鈣鹽。在優(yōu)選實施方案中，所述鹽是葡萄糖酸鈣、檸檬酸鈣、碳酸鈣、乳酸鈣、碳酸氫鈣、單堿價磷酸鈣Ca(H2PO4)2、二堿價磷酸鈣(CaHPO4)、三堿價磷酸鈣(Ca3(PO4)2)、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)、抗壞血酸鈣。
發(fā)現(xiàn)所述鹽在拮抗微生物的生物活性上具有出乎意料的增強性質(zhì)。聯(lián)合(association)是特別有活性的，甚至在低鹽濃度下即低于5g/l。所述聯(lián)合顯示比單獨使用微生物更有效。對于相同量的鹽，本發(fā)明的發(fā)明人獲得了相比當與所述拮抗微生物一起使用高濃度CaCl22％(20g/l)時類似的功效。根據(jù)本發(fā)明的組合物在低劑量的鹽即低于5g/l下顯示出乎意料地非常好的功效，并且相比于包含高濃度CaCl22％(20g/l)的含有拮抗微生物的組合物顯示類似或更好的功效。針對由植物和/或動物病原體引起的疾病，本組合物具有改善的和/或更長的的功效。例如，針對由或者在收獲后或者在植物生命周期期間定居植物部位的霉菌引起的疾病，本組合物是特別有效的。
所述聯(lián)合顯示比單獨使用微生物更有效。本組合物可以使用更低的微生物量和/或更低的鹽量，同時具有類似的或甚至更好的抗病原體功效。
本組合物用于抗一種或多種能夠?qū)χ参锘騽游锇ㄈ艘鸺膊〉牟≡w。所述病原體可以是真菌、酵母、細菌和病毒。
根據(jù)本發(fā)明的組合物特別用于抗能夠?qū)χ参锊牧弦鸺膊〉牟≡w。如這里所用的術(shù)語“植物”包括全部植物、植物部位、果實和其它植物相關(guān)的材料。植物的無限制的實例包括選自包含下列植物部位的組的植物材料果實例如物種蘋果屬物種(Malus spp.)，梨屬物種(Pyrus spp.)，柑橘屬物種(Citrus spp.)(例如柑桔、檸檬、葡萄柚、柑橘)，和作物例如物種番茄、青椒(bell pepper)、黃瓜、葡萄藤和草莓)；塊根作物(例如，馬鈴薯、胡蘿卜)；熱帶水果(例如，芒果、香蕉、番石榴、菠蘿、鱷梨)；瓜果，和開花植物及其它裝飾作物。根據(jù)本發(fā)明的組合物的功效優(yōu)于在相同濃度下單獨用拮抗微生物獲得的功效并且類似于用微生物在高濃度CaCl2(2％重量/體積)下獲得的功效。
本發(fā)明也涉及由對植物材料病原體引起的疾病的生物防治方法，所述方法包含將根據(jù)本發(fā)明的組合物施用到所述植物材料的步驟。
本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的組合物作為生物殺蟲劑(biopesticide)的施用，優(yōu)選作為生物殺真菌劑、生物殺病毒劑和/或作為生物殺細菌劑，并且涉及包含根據(jù)本發(fā)明的組合物的生物殺蟲劑的制造方法。
本發(fā)明還將在下文中詳細公開。給出將進一步支持描述的實例。
詳細描述本發(fā)明涉及用于防治真菌和細菌植物病原體的組合物和方法。特別是，本發(fā)明涉及適于抗一種或多種病原體使用的新組合物，所述組合物包含至少一種拮抗微生物和至少一種選自包含式(1)化合物，磷酸鹽，硫酸鹽，抗壞血酸、異檸檬酸、檸蘋酸、乳葡糖酸(lactogluconic acids)的鹽的組的鈣、鈉或鉀鹽，和/或其衍生物和/或其混合物， 其中A是選自Ca、K或Na的陽離子，優(yōu)選Ca或K，更優(yōu)選Ca，其中a、b、c和d是1至3的整數(shù)，條件是a×b＝c×d，并且R1選自-O-、-OH或 n是0至5的整數(shù)，R2選自H、-OH、-CH3、-CO2-、-CH2-OH、-CH2-CO2-，R3選自H或-CH2-COO-，并且R4選自H、-NH2或OH，其中當n是1時，如果R4是H，則R3不是H并且R2不是-CH3。意外地發(fā)現(xiàn)所述組合物的組合得到優(yōu)于單獨的拮抗微生物的防治。
在特定實施方案中，包含所述至少一種鹽的量在0.005和5g/l重量/體積之間，優(yōu)選在0.01和4g/l重量/體積之間，更優(yōu)選在0.1和3g/l重量/體積之間，更優(yōu)選在0.01和2.5g/l重量/體積之間，并且還更優(yōu)選在0.1和2.2g/1重量/體積之間。在另一個實施方案中，以從103to 10111cfu/ml范圍內(nèi)的濃度施用所述拮抗微生物，優(yōu)選從104至1010cfu/ml。適合的濃度的另一個實例包括當所述拮抗微生物是真菌時是105至108cfu/ml并且優(yōu)選微生物的濃度是從106至108cfu/ml，當所述拮抗微生物是細菌時是105至1011，并且優(yōu)選109至1011。
根據(jù)優(yōu)選實施方案，所述鹽選自包含下列鹽的組硫酸鹽、磷酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、醋酸鹽、乙酸鹽(ethanoate salt)、甘油酸鹽、谷氨酸鹽、erythronate鹽、theonate鹽、核糖酸鹽(ribonate salt)、阿拉伯糖鹽(arabinoatesalt)、木糖酸鹽、來蘇糖酸(lyxonate)鹽、阿洛糖酸鹽(allonate salt)、阿卓糖酸鹽(altronate salt)、葡糖酸鹽、甘露糖酸鹽(mannoate salt)、古洛糖酸鹽(gulonate salt)、艾杜糖酸鹽(idonate salt)、半乳糖酸鹽(galactonate salt)、塔羅糖酸鹽(talonate salt)、阿洛庚糖酸鹽(alloheptonate salt)、阿卓庚糖酸鹽(altroheptonate salt)、葡庚糖酸鹽(glucoheptonate salt)、甘露庚糖酸鹽(mannoheptonate salt)、古洛庚糖酸鹽(guloheptonate salt)、艾杜庚糖酸鹽(idoheptonate salt)、半乳庚糖酸鹽(galactoheptonate salt)、塔羅庚糖酸鹽(taloheptonate salt)、丙醇二酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、糖二酸鹽、半乳糖二酸鹽、乳酸鹽、乳葡糖酸鹽(lactogluconate salt)、抗壞血酸鹽、異檸檬酸鹽、和二甲基蘋果酸鹽(citramalate salt)。
所述鹽可以是在水合形態(tài)下或者是無水的。當然，本組合物也可以含有鹽和/或其聚合物的混合物。
在本發(fā)明的實施方案中，要在本組合物中使用的鹽是鈣鹽。
根據(jù)優(yōu)選實施方案，所述鹽選自包含下列鹽的組硫酸鈣、單堿價磷酸鈣Ca(H2PO4)2、二堿價磷酸鈣(CaHPO4)、三堿價磷酸鈣(Ca3(PO4)2)、碳酸鈣(CaCO3)、碳酸氫鈣(Ca(HCO3)2)、醋酸鈣、乙酸鈣(calcium ethanoate)、甘油酸鈣、谷氨酸鈣、赤蘚糖酸鈣(calcium erythronate)、calcium theonate、核糖酸鈣、阿拉伯糖酸鈣(calcium arabinoate)、木糖酸鈣(calcium xylonate)、來蘇糖酸鈣(calcium lyxonate)、阿洛糖酸鈣(calcium allonate)、阿卓糖酸鈣(altronate calcium)、葡萄糖酸鈣、甘露糖酸鈣(calcium mannoate)、古洛糖酸鈣、艾杜糖酸鈣、半乳糖酸鈣、塔羅糖酸鈣(calcium talonate)、阿洛庚糖酸鈣(calcium alloheptonate)、阿卓庚糖酸鈣(calcium altroheptonate)、葡庚糖酸鈣、甘露庚糖酸鈣、古洛庚糖酸鈣(calcium guloheptonate)、艾杜庚糖酸鈣(calcium idoheptonate)、半乳庚糖酸鈣(calcium galactoheptonate)、塔羅庚糖酸鈣(calcium taloheptonate)、丙醇二酸鈣、蘋果酸鈣、酒石酸鈣、檸檬酸鈣、糖二酸鈣、半乳糖二酸鈣、乳酸鈣、乳葡糖酸鈣(calciumlactogluconate)、抗壞血酸鈣、異檸檬酸鈣、和二甲基蘋果酸鈣(calciumcitramalate)，及其混合物。意外地發(fā)現(xiàn)所述組合物是水果和蔬菜中收獲后疾病的特別有效的抑制劑。已經(jīng)意外地并出乎意料地發(fā)現(xiàn)如上定義的至少一種鹽與根據(jù)本發(fā)明的至少一種拮抗微生物的使用促進植物病原體的改進防治。如這里所述的鹽和所述拮抗微生物的組合提供水果的主要收獲后腐爛的有效防治并且得到比單獨使用相同濃度拮抗劑更佳的防治或者得到比高量的CaCl2(2％)與所述微生物的使用類似的防治。所述組合物特別具有抗真菌和抗細菌的活性。
根據(jù)本發(fā)明的實施方案，所述至少一種拮抗微生物選自包含細菌、真菌和酵母的組。在特定的實施方案中，所述拮抗微生物選自包含下列微生物的組土壤桿菌屬物種(Agrobacterium spp.)、白粉寄生菌屬物種(Ampelomyces spp.)、短梗霉菌屬物種(Aureobasidium spp)、芽孢桿菌屬物種(Bacillus spp.)、布勒擔孢酵母屬物種(Bulleromyces spp.)、假絲酵母屬物種(Candida spp.)、毛殼菌屬物種(Chaetomium spp.)、盾殼霉菌屬物種(Coniothyrium spp.)、隱球酵母屬物種(Cryptococcus spp.)、德巴利酵母屬物種(Debaryomyces spp.)、德克酵母屬物種(Dekkera spp.)、歐文氏菌屬物種(Erwinia spp.)、Exophilia spp.、粘帚霉屬(Gliocladium spp.)、漢遜酵母(Hansenula spp.)伊薩酵母屬物種(Issatchenkia spp.)、克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces spp.)、馬利亞霉屬物種(Mariannaea spp.)、Metschnikoviaspp.、微結(jié)節(jié)菌屬物種(Microdochium spp.)、青霉菌屬物種(Penicillium spp.)、Phlebiopsis spp.；畢赤酵母屬物種(Pichia spp.)、假單胞菌屬物種(Pseudomonas spp.)、Pseudozyma spp.、紅酵母屬物種(Rhodotorula spp.)、酵母屬物種(Saccharomyces spp.)、擲孢酵母屬物種(Sporobolomyces spp.)、鏈霉菌屬物種(Streptomyces sp.)、Talaromyces spp.、木霉菌屬物種(Trichoderma spp.)、Ulocladium spp.、接合酵母屬物種(Zygosaccharomycesspp.)。
在特定的實施方案中，所述拮抗微生物優(yōu)選選自放射形土壤桿菌(Agrobacterium radiobacter)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、Candidaoleophila、Candida saitoana、清酒假絲酵母(Candida sake)、Candida tenius、產(chǎn)朊假絲酵母(Candida utilis)、Coniothyrium minitans、淺白隱球酵母(Cryptococcus albidus)、胡蘿卜軟腐歐文氏菌(Erwinia carotovora)、Gliocladium catenalatum、綠粘帚霉(Gliocladium virens)、Hanseniasporauvarum、耐熱克魯維酵母(Kluyveromyces thermotolerance)、Metschnikoviafructicola、Metschnikowia reukafii、Microdochium dimerum、草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)、Phlebiopsis gigantean、異常畢赤酵母(Pichiaanomala)、季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、洋蔥假單胞菌(Pseudomonas cepacia)、綠針假單胞菌(Pseudomonas chlororaphis)、熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)、丁香假單胞桿菌(Pseudomonassyringae)、Pseudozyma flocullosa、粘紅酵母(Rhodotorula glutinis)、粘質(zhì)紅酵母(Rhodotorula mucilaginosa)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、灰綠鏈霉菌(Streptomyces griseoviridis)、黃色蠕形霉(Talaromyces flavus)、深綠木霉(Trichoderma atroviride)、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、多孢木霉(Trichoderma polysporum)、綠色木霉(Trichoderma viride)、或Ulocladium atrum..
在本發(fā)明的實施方案中，所述酵母是Candida oleophila或異常畢赤酵母(Pichia anomala)。Candida oleophila菌株可以是由下列組成的菌株形式Candida oleophila Montrocher菌株O，于1997年6月17日以MUCL-40564保藏在BBCMTM/MUCL Culture Collection of the Mycothèque de l’UniversitéCatholique de Louvain，和Candida oleophila Montrocher可商購菌株I-182。
在實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含一種鹽與一種拮抗微生物的組合，所述組合選自CaHPO4+丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae)、Ca3(PO4)3+丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae)、Ca(CO3)+丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae)、Ca(HCO3)2+丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae)、醋酸鈣+丁香假單胞桿菌(Pseudomonassyringae)、谷氨酸鈣+丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae)、CaHPO4+枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、Ca3(PO4)3+枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、Ca(CO3)+枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、Ca(HCO3)2+枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、醋酸鈣+枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、谷氨酸鈣+枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、CaHPO4+短小芽孢桿菌(Bacilluspumilis)、Ca3(PO4)3+短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、Ca(CO3)+短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、Ca(HCO3)2+短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、醋酸鈣+短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、谷氨酸鈣+短小芽孢桿菌(Bacilluspumilis)、CaHPO4+Candida oleophila、Ca3(PO4)3+Candida oleophila、Ca(CO3)+Candida oleophila、Ca(HCO3)2+Candida oleophila、醋酸鈣+Candida oleophila、谷氨酸鈣+Candida oleophila、CaHPO4+Candidasaitoana、Ca3(PO4)3+Candida saitoana、Ca(CO3)+Candida saitoana、Ca(HCO3)2+Candida saitoana、醋酸鈣+Candida saitoana、谷氨酸鈣+Candida saitoana、CaHPO4+清酒假絲酵母(Candida sake)、Ca3(PO4)3+清酒假絲酵母(Candida sake)、Ca(CO3)+清酒假絲酵母(Candida sake)、Ca(HCO3)2+清酒假絲酵母(Candida sake)、醋酸鈣+清酒假絲酵母(Candida sake)、谷氨酸鈣+清酒假絲酵母(Candida sake)、CaHPO4+克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces sp.)、Ca3(PO4)3+克魯維酵母屬物種(Kluyveromyce sp.)、Ca(CO3)+克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces sp.)、Ca(HCO3)2+克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces sp.)、醋酸鈣+克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces sp.)、谷氨酸鈣+克魯維酵母屬物種(Kluyveromycessp.)、CaHPO4+Metschnikovia fructicola、Ca3(PO4)3+Metschnikoviafructicola、Ca(CO3)+Metschnikovia fructicola、Ca(HCO3)2+Metschnikoviafructicola、醋酸鈣+Metschnikovia fructicola、谷氨酸鈣+Metschnikoviafructicola、CaHPO4+Microdochium sp.、Ca3(PO4)3+Microdochium sp.、Ca(CO3)+Microdochium sp.、Ca(HCO3)2+Microdochium sp.、醋酸鈣+Microdochiutm sp.、谷氨酸鈣+Microdochium sp.、CaHPO4+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、Ca3(PO4)3+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、Ca(CO3)+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、Ca(HCO3)2+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、醋酸鈣+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、谷氨酸鈣+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、CaHPO4+季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、Ca3(PO4)3+季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、Ca(CO3)+季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、Ca(HCO3)2+季也蒙畢赤酵母(Pichiaguilliermondii)、醋酸鈣+季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、谷氨酸鈣+季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、CaHPO4+深綠木霉(Trichoderma atroviride)、Ca3(PO4)3+深綠木霉(Trichoderma atroviride)、Ca(CO3)+深綠木霉(Trichoderma atroviride)、Ca(HCO3)2+深綠木霉(Trichoderma atroviride)、醋酸鈣+深綠木霉(Trichoderma atroviride)、谷氨酸鈣+深綠木霉(Trichoderma atroviride)、CaHPO4+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、Ca3(PO4)3+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、Ca(CO3)+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、Ca(HCO3)2+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、醋酸鈣+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、谷氨酸鈣+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、CaHPO4+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、Ca3(PO4)3+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、Ca(CO3)+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、Ca(HCO3)2+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、醋酸鈣+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、谷氨酸鈣+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、CaHPO4+綠色木霉(Trichoderma viride)、Ca3(PO4)3+綠色木霉(Trichoderma viride)、Ca(CO3)+綠色木霉(Trichoderma viride)、Ca(HCO3)2+綠色木霉(Trichoderma viride)、醋酸鈣+綠色木霉(Trichoderma viride)或谷氨酸鈣+綠色木霉(Trichoderma viride)。
在另一個實施方案中，所述組合選自葡萄糖酸鈣+丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae)、葡萄糖酸鈣+枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、葡萄糖酸鈣+短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、葡萄糖酸鈣+Candidaoleophila、葡萄糖酸鈣+Candida saitoana、葡萄糖酸鈣+清酒假絲酵母(Candida sake)、葡萄糖酸鈣+克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces sp.)、葡萄糖酸鈣+Metschnikovia fructicola、葡萄糖酸鈣+Microdochium sp.、葡萄糖酸鈣+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、葡萄糖酸鈣+季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、酒石酸鈣+丁香假單胞桿菌(Pseudomonassyringae)、檸檬酸鈣+丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae)、乳葡糖酸鈣(calcium Iactogluconate)+丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae)、抗壞血酸鈣+丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae)、異檸檬酸鈣+丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae)、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae)、酒石酸鈣+枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、檸檬酸鈣+枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、抗壞血酸鈣+枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、異檸檬酸鈣+枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、酒石酸鈣+短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、檸檬酸鈣+短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、抗壞血酸鈣+短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、異檸檬酸鈣+短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、二甲基蘋果酸鈣(calciumcitramalate)+短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、酒石酸鈣+Candidaoleophila、檸檬酸鈣+Candida oleophila、葡萄糖酸鈣+深綠木霉(Trichoderma atroviride)、葡萄糖酸鈣+哈茨木霉(Trichodermaharzianum)、葡萄糖酸鈣+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、葡萄糖酸鈣+綠色木霉(Trichoderma viride)、或酒石酸鈣+深綠木霉(Trichodermaatroviride)。
在另一個實施方案中，所述組合選自乳葡糖酸鈣(calciumlactogluconate)+Candida oleophila、抗壞血酸鈣+Candida oleophila、異檸檬酸鈣+Candida oleophila、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+Candida oleophila、酒石酸鈣+Candida saitoana、檸檬酸鈣+Candidasaitoana、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+Candida saitoana、抗壞血酸鈣+Candida saitoana、異檸檬酸鈣+Candida saitoana、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+Candida saitoana、酒石酸鈣+清酒假絲酵母(Candida sake)、檸檬酸鈣+清酒假絲酵母(Candida sake)、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+清酒假絲酵母(Candida sake)、抗壞血酸鈣+清酒假絲酵母(Candida sake)、異檸檬酸鈣+清酒假絲酵母(Candida sake)、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+清酒假絲酵母(Candida sake)、酒石酸鈣+克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces sp.)、檸檬酸鈣+克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces sp.)、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces sp.)、抗壞血酸鈣+克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces sp.)、異檸檬酸鈣+克魯維酵母屬物種(Kluyveromyces sp.)、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+克魯維酵母屬物種(Kluyveromycessp.)、酒石酸鈣+Metschnikovia fructicola、檸檬酸鈣+Metschnikoviafructicola、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+Metschnikovia fructicola、抗壞血酸鈣+Metschnikovia fructicola、異檸檬酸鈣+Metschnikoviafructicola、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+Metschnikovia fructicola、酒石酸鈣+Microdochium sp.、檸檬酸鈣+Microdochium sp.、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+Microdochium sp.、抗壞血酸鈣+Microdochiumsp.、異檸檬酸鈣+Microdochium sp.、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+Microdochium sp.、酒石酸鈣+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、檸檬酸鈣+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、抗壞血酸鈣+異常畢赤酵母(Pichiaanomala)、異檸檬酸鈣+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+異常畢赤酵母(Pichia anomala)、酒石酸鈣+季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、檸檬酸鈣+季也蒙畢赤酵母(Pichiaguilliermondii)、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、抗壞血酸鈣+季也蒙畢赤酵母(Pichiaguilliermondii)、異檸檬酸鈣+季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+季也蒙畢赤酵母(Pichiaguilliermondii)、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+深綠木霉(Trichoderma atroviride)、抗壞血酸鈣+深綠木霉(Trichoderma atroviride)、異檸檬酸鈣+深綠木霉(Trichoderma atroviride)、二甲基蘋果酸鈣(calciumcitramalate)+深綠木霉(Trichoderma atroviride)、酒石酸鈣+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、檸檬酸鈣+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、抗壞血酸鈣+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、異檸檬酸鈣+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、酒石酸鈣+多孢木霉(Trichodermapolysporum)、檸檬酸鈣+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、抗壞血酸鈣+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、異檸檬酸鈣+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+多孢木霉(Trichoderma polysporum)、酒石酸鈣+綠色木霉(Trichoderma viride)、檸檬酸鈣+綠色木霉(Trichoderma viride)、乳葡糖酸鈣(calciumlactogluconate)+綠色木霉(Trichoderma viride)、抗壞血酸鈣+綠色木霉(Trichoderma viride)、異檸檬酸鈣+綠色木霉(Trichoderma viride)、或二甲基蘋果酸鈣(calcium citramalate)+綠色木霉(Trichoderma viride)。
本發(fā)明也包含含有如上在這里描述的至少一種拮抗微生物和至少兩種鹽的組合物。本發(fā)明也包含含有如上在這里描述的至少兩種拮抗微生物和至少一種鹽的組合物。
如說明書和后附權(quán)利要求中所用，單數(shù)形式的“一(a)”、“一(an)”和“the”包括復(fù)數(shù)的所指事物，除非上下文另外清楚地指示。經(jīng)由實例，“一種化合物”指一種化合物或多于一種化合物。
通過邊界點的數(shù)字范圍的列舉包括全部整數(shù)數(shù)字和，在適當時，包含在那個范圍內(nèi)的分數(shù)(例如1至5可以包括1、1.1、1.15、1.2、1.3、1.4、1.5、2、2.75、3、3.80、4、和5)。
如這里所用，術(shù)語“衍生物”指的是化學(xué)衍生物，例如溶劑合物、水合物立體異構(gòu)形式、外消旋混合物、和酯。如這里所用并且除非另外表明，術(shù)語“溶劑合物”包括可以通過所述鹽和適合無機溶劑(例如水合物)或有機溶劑的任何組合，例如但不限于醇類、酮類、酯類等。
如這里所述的鹽的全部立體異構(gòu)體包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，作為純的化合物還有其混合物。單獨的對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體及其組合和混合物全部由本發(fā)明所包括。將這里所提及的鹽和中間體的純立體異構(gòu)形式限定為基本上無其它對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體形式的所述化合物或中間體的相同基本分子結(jié)構(gòu)的同分異構(gòu)體。
如這里所用，術(shù)語“增強化合物”指的是能夠增強微生物生物學(xué)性質(zhì)的化合物。例如，它可以促進拮抗微生物抗能夠?qū)χ参锊牧弦鸺膊〉牟≡w的生物學(xué)性質(zhì)。
如這里所用，術(shù)語“拮抗微生物”指的是對于病原體是拮抗劑的微生物，所述病原體例如能夠?qū)χ参锘騽游锇ㄈ艘鸺膊〉牟≡w。在優(yōu)選實施方案中所述微生物是對病原體的拮抗劑，所述病原體例如對植物材料引起疾病的病原體。這類拮抗微生物可以選自包含細菌、真菌和酵母的組。
如這里所用，術(shù)語“生物殺蟲劑”包括生物殺真菌劑、生物殺細菌劑和生物殺病毒劑。
本發(fā)明的組合物除所述鹽和所述微生物外還可以包含至少一種甘露聚糖和/或其衍生物。所述甘露聚糖的量可以在0.001％和2％重量/體積的范圍內(nèi)，優(yōu)選在0.001％和0.2％重量/體積的范圍內(nèi)。
本發(fā)明因此提供可以用作植物和動物抗微生物感染的處理中的植物藥物和藥物組合物的組合物，所述微生物感染包括細菌、酵母、真菌、病毒和原生動物感染。
特別是，本組合物針對由植物材料的病原體引起的疾病顯示改善的功效，例如由定居植物部位的霉菌引起的疾病，或者在收獲之后或者在植物生命周期期間。可以由本組合物抑制的植物病原體的例舉性種類包括，但不限于，鏈格孢屬物種(Alternaria spp.)、殼二孢屬物種(Ascochyta spp.)、曲酶屬物種(Aspergillus spp.)、葡萄孢屬物種(Botrytis spp.)、尾孢屬物種(Cercospora spp.)、支孢屬物種(Cladosporium spp.)、麥角屬物種(Clavicepsspp.)、刺盤孢屬物種(Colletotrichum spp.)、白粉菌屬物種(Erysiphe spp.)、鐮孢屬物種(Fusarium spp.)、地霉屬物種(Geotrichum spp.)、吉爾霉屬物種(Gilbertella spp.)、盤長孢屬物種(Gloeosporium spp.)、長蠕孢屬物種(Helminthosporium spp.)、叢梗孢屬物種(Monilia spp.)、鏈核盤菌屬物種(Monilinia spp.)、Mucov spp.、叢赤殼屬物種(Nectria spp.)、青霉菌屬物種(Penicillium spp.)、霜霉屬物種(Peronospora spp.)、無柄盤菌屬物種(Peziculaspp.)、擬莖點霉屬物種(Phomopsis spp.)、疫霉屬物種(Phytophthora spp.)、單軸霉屬物種(Plasmopara spp.)、叉絲單囊殼屬物種(Podosphaera spp.)、Pseudocercosporium spp.、柄銹菌屬物種(Puccinia spp.)、絲核菌屬物種(Rhizoctonia spp.)、根霉屬物種(Rhizopus spp.)、Rynchosporium spp.、核盤霉屬物種(Sclerotinia spp.)、殼針孢屬物種(Septoria spp.)、單絲殼屬物種(Sphaerotheca spp.)、鉤絲殼屬物種(Uncinula spp.)、黑粉菌屬物種(Ustilagospp.)、黑星菌屬物種(Venturia spp.)、輪枝孢屬物種(Verticillium spp.)、和細菌或病毒的病原體。在特定實施方案中，所述植物病原體可以選自包含下列微生物的組鏈格孢(Alternaria alternata)、殼二孢屬物種(Ascochyta sp.)、黃曲霉(Aspergillus flavus)、黑曲霉(Aspergillus niger)、蔥腐葡萄孢(Botrytisalii)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、蠶豆葡萄孢(Botrytis fabae)、尾孢屬物種(Cercospora sp.)、枝孢屬物種(Cladosporium sp.)、麥角菌(Clavicepspurpurea)、刺盤孢屬物種(Colletotrichum sp.)、甜菜白粉菌(Erysiphe betae)、禾白粉菌(Erysiphe graminis)、尖鐮孢(Fusarium oxysporum)、白地霉(Geotrichum candidum)、Gilbertella persicovia、懿長孢(Gloeosporiumperennans)、果生盤長孢(Gloeosporium fructigenum)、長蠕孢屬物種(Helminthosporium sp.)、叢梗孢屬物種(Monilia sp.)、Monilinia fructicola、核果鏈盒盤菌(Monilinia laxa)、Mucov sp.、朱紅叢赤殼(Nectriacinnabarina)、指狀青霉(Penicillium digitatum)、擴展青霉(Penicilliumexpansum)、意大利青霉(Penicillium italicum)、霜霉屬物種(Peronosporasp.)、Pezicula malicorticas、Phomopsis viticola、致病疫霉(Phytophthorainfestans)、葡萄生單軸霉(Plasmopara viticola)、白叉絲單囊殼(Podosphaeraleucotricha)、Pseudocercosporium sp.、禾柄銹菌(Puccinia graminis)、絲核菌屬物種(Rhizoctonia sp.)、少根根霉(Rhizopus arrhizus)、匍枝根霉(Rhizopusstolonifer)、Rynchosporium sp.、蔥核盤菌(Sclerotinia Cepivorum)、核盤菌(Sclerotinia sclerotiorum)、Septoria apicola、單絲殼屬物種(Sphaerothecasp.)、葡萄鉤絲殼(Uncinula necator)、黑粉菌屬物種(Ustilago sp.)、蘋果黑星菌(Venturia inaequalis.)；黃萎輪枝孢(Verticillium albo-atrum)、和大麗花輪枝孢(Verticillium dahliae)。在特定實施方案中所述植物病原體可以選自包含下列微生物的組葡萄孢屬物種(Botrytis spp.)、青霉菌屬物種(Penicillium spp.)、無柄盤菌屬物種(Pezicula spp.)、和根霉屬物種(Rhizopusspp.)。例如所述病原體可以是灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、指狀青霉(Penicillium digitatum)、擴展青霉(Penicillium expansum)、意大利青霉(Penicillium italicum)、無柄盤菌屬物種(Pezicula spp.)、和根霉屬物種(Rhizopus spp.)。
在優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明的組合物特別用作生物殺蟲劑。
根據(jù)本發(fā)明，可以提供如這里所述的拮抗微生物和鹽和/或其衍生物作為如所述的微生物和鹽的混合物。根據(jù)本發(fā)明的另一個實施方案，可以提供如這里描述的拮抗微生物和鹽作為單獨的未混合的制劑，將其混合用于制備本組合物。例如這里所述的拮抗微生物和鹽可以存在于單獨包裝或以預(yù)備混合形式一起包裝在試劑盒中。如這里所述的拮抗微生物和鹽可以存在于作為單獨未混合制劑或一起在一種制劑的試劑盒中。
本發(fā)明還包括制造根據(jù)本發(fā)明的組合物的方法，所述方法包含將如這里所述的至少一種拮抗微生物與至少一種鹽混合的步驟。
本發(fā)明的另一個方面是包含如這里所述的至少一種拮抗微生物和至少一種鹽的組合物和/或其衍生物，用于同時、單獨或順序施用到要處理的受試者。
如這里所用術(shù)語“受試者”包括，要處理的植物或動物包括人。在本發(fā)明的實施方案中，所述受試者是植物例如植物材料。
本發(fā)明的又另一個方面是用于處理植物材料的方法，所述方法包含將有效量的本發(fā)明的至少一種拮抗微生物和如這里所述的至少一種鹽和/或其衍生物同時、單獨或順序施用到所述植物。
通過同時施用指的是將如這里所述的拮抗微生物和鹽同時施用到所述植物。例如作為如這里所述的拮抗微生物和鹽的混合物，或者包含所述的拮抗微生物和如這里所述的鹽的組合物。
通過單獨施用指的是將所述拮抗微生物和鹽同時或基本同時施用到所述植物。將拮抗微生物和鹽作為單獨的未混合的制劑施用。例如，所述拮抗微生物和鹽可以存在于單獨包裝的試劑盒中。
所述拮抗微生物在如這里所述的至少一種鹽存在下防治植物病原體的增強性能是特別出乎意料的。本發(fā)明提供包含更低濃度拮抗微生物同時延長所述組合物抗所述病原體的持續(xù)時間的生物殺蟲劑組合物。
而且，本發(fā)明也涉及，相比于單獨的微生物的功效，如這里所述的鹽用作增強包含至少一種拮抗微生物的組合物功效的化合物。鹽例如葡萄糖酸鈣、醋酸鈣、檸檬酸鈣、碳酸鈣、碳酸氫鈣、磷酸鈣、乳酸鈣、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)、抗壞血酸鈣，顯示特別促進包含至少一種微生物的組合物的生物抗病原體功效。
本發(fā)明也涉及如這里所述的至少一種鹽用作用于在不降低所述組合物抗病原體功效的情況下降低拮抗微生物濃度的增強化合物。本發(fā)明還涉及如這里所述的至少一種鹽用作用于降低拮抗微生物濃度同時延長所述組合物抗病原體功效持續(xù)時間的增強化合物。
在所述方法中，促進所述微生物或微生物基組合物的生物學(xué)性質(zhì)可以包含在不降低所述組合物抗病原體功效的情況下降低拮抗微生物的濃度。增強并擴大所述生物學(xué)性質(zhì)也可以包含將低拮抗微生物的濃度同時延長所述組合物抗病原體功效的持續(xù)時間。因為本組合物的意外增加的效果，本發(fā)明可以施用更低濃度的組合物。
本發(fā)明也涉及通過施用有效量的新組合物用于處理植物材料例如水果和蔬菜的方法，用于防治收獲后疾病。
本發(fā)明也涉及促進組合物中生物殺真菌劑、生物殺細菌劑和/或生物殺病毒劑的性質(zhì)的方法，所述方法包含至少將如這里所述的作為增強化合物的鹽加入到所述組合物。更具體而言，本發(fā)明包含如這里所述的至少一種鹽和/或其衍生物作為增強生物殺真菌劑、生物殺細菌劑和/或生物殺病毒劑性質(zhì)的化合物的使用。
本發(fā)明也提供用于抗一種或多種病原體使用的組合物，所述組合物包含根據(jù)本發(fā)明的組合物和至少一種農(nóng)用化學(xué)化合物。在本發(fā)明的實施方案中，所述農(nóng)用化學(xué)化合物可以選自包含殺真菌劑、殺細菌劑、殺線蟲劑、殺蟲劑、除草劑等的組。
本發(fā)明也涉及用于促進組合物中至少一種農(nóng)用化學(xué)品性質(zhì)的方法，所述方法包含將作為增強化合物的如這里所述的至少一種鹽加入到所述組合物。更具體而言，本發(fā)明包括如這里所述的至少一種鹽和/或其衍生物作為增強至少一種農(nóng)用化學(xué)化合物性質(zhì)的化合物的使用。例如，可以通過加入如這里所述的至少一種鹽促進化學(xué)化合物的殺蟲劑性質(zhì)。本發(fā)明因此也提供用于抗一種或多種病原體使用的組合物，所述組合物包含如這里所述的至少一種鹽和/或其衍生物和農(nóng)用化學(xué)化合物。在本發(fā)明的實施方案中，所述農(nóng)用化學(xué)化合物可以選自包含殺真菌劑、殺細菌劑、殺線蟲劑、殺蟲劑、除草劑等的組。
將通過實施本發(fā)明的一些方法的說明進一步闡明本發(fā)明。
實施例1包括在本發(fā)明組合物中的鹽和拮抗微生物列在表1和2中。
表1 表2
本發(fā)明包括一種或多種1至43的鹽與一種或多種a至ii的拮抗微生物的任何組合。在實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含一種鹽與一種拮抗微生物的組合，所述組合選自包含下列組合的組1+a，2+a，3+a，4+a，5+a，6+a，7+a，8+a，9+a，10+a，1+b，2+b，3+b，4+b，5+b，6+b，7+b，8+b，9+b，10+b，1+c，2+c，3+c，4+c，5+c，6+c，7+c，8+c，9+c，10+c，1+d，2+d，3+d，4+d，5+d，6+d，7+d，8+d，9+d，10+d，1+e，2+e，3+e，4+e，5+e，6+e，7+e，8+e，9+e，10+e，1+f，2+f，3+f，4+f，5+f，6+f，7+f，8+f，9+f，10+f，1+g，2+g，3+g，4+g，5+g，6+g，7+g，8+g，9+g，10+g，1+h，2+h，3+h，4+h，5+h，6+h，7+h，8+h，9+h，10+h，1+i，2+i，3+i，4+i，5+i，6+i，7+i，8+i，9+i，10+i，1+j，2+j，3+j，4+j，5+j，6+j，7+j，8+j，9+j，10+j，1+k，2+k，3+k，4+k，5+k，6+k，7+k，8+k，9+k，10+k，1+l，2+l，3+l，4+l，5+l，6+l，7+l，8+l，9+l，10+l，1+m，2+m，3+m，4+m，5+m，6+m，7+m，8+m，9+m，10+m，1+n，2+n，3+n，4+n，5+n，6+n，7+n，8+n，9+n，10+n，1+o，2+o，3+o，4+o，5+o，6+o，7+o，8+o，9+o，10+o，1+p，2+p，3+p，4+p，5+p，6+p，7+p，8+p，9+p，10+p，1+q，2+q，3+q，4+q，5+q，6+q，7+q，8+q，9+q，10+q，1+r，2+r，3+r，4+r，5+r，6+r，7+r，8+r，9+r，10+r，1+s，2+s，3+s，4+s，5+s，6+s，7+s，8+s，9+s，10+s，1+t，2+t，3+t，4+t，5+t，6+t，7+t，8+t，9+t，10+t，1+u，2+u，3+u，4+u，5+u，6+u，7+u，8+u，9+u，10+u，1+v，2+v，3+v，4+v，5+v，6+v，7+v，8+v，9+v，10+v，1+w，2+w，3+w，4+w，5+w，6+w，7+w，8+w，9+w，10+w，1+x，2+x，3+x，4+x，5+x，6+x，7+x，8+x，9+x，10+x，11+a，12+a，13+a，14+a，15+a，16+a，17+a，18+a，11+b，12+b，13+b，14+b，15+b，16+b，17+b，18+b，11+c，12+c，13+c，14+c，15+c，16+c，17+c，18+c，11+d，12+d，13+d，14+d，15+d，16+d，17+d，18+d，11+e，12+e，13+e，14+e，15+e，16+e，17+e，18+e，11+f，12+f，13+f，14+f，15+f，16+f，17+f，18+f，11+g，12+g，13+g，14+g，15+g，16+g，17+g，18+g，11+h，12+h，13+h，14+h，15+h，16+h，17+h，18+h，11+i，12+i，13+i，14+i，15+i，16+i，17+i，18+i，11+j，12+j，13+j，14+j，15+j，16+j，17+j，18+j，11+k，12+k，13+k，14+k，15+k，16+k，17+k，18+k，11+l，12+l，13+l，14+l，15+l，16+l，17+l，18+l，11+m，12+m，13+m，14+m，15+m，16+m，17+m，18+m，11+n，12+n，13+n，14＋n，15+n，16+n，17+n，18+n，11＋o，12+o，13+o，14+o，15+o，16+o，17+o，18+o，1+aa，2+aa，3+aa，4+aa，5+aa，6+aa，7+aa，8+aa，9+aa，10+aa，1+bb，2+bb，3+bb，4+bb，5+bb，6+bb，7+bb，8+bb，9+bb，10+bb，1+cc，2+cc，3+cc，4+cc，5+cc，6+cc，7+cc，8+cc，9+cc，10+cc，1+dd，2+dd，3+dd，4+dd，5+dd，6+dd，7+dd，8+dd，9+dd，10+dd，1+ee，2+ee，3+ee，4+ee，5+ee，6+ee，7+ee，8+ee，9+ee，10+ee，1+ff，2+ff，3+ff，4+ff，5+ff，6+ff，7+ff，8+ff，9+ff，10+ff，1+gg，2+gg，3+gg，4+gg，5+gg，6+gg，7+gg，8+gg，9+gg，10+gg，1+hh，2+hh，3+hh，4+hh，5+hh，6+hh，7+hh，8+hh，9+hh，10+hh，1+ii，2+ii，3+ii，4+ii，5+ii，6+ii，7+ii，8+ii，9+ii，10+ii，11+aa，12+aa，13+aa，14+aa，15+aa，16+aa，17+aa，18+aa，11+bb，12+bb，13+bb，14+bb，15+bb，16+bb，17+bb，18+bb，11+cc，12+cc，13+cc，14+cc，15+cc，16+cc，17+cc，18+cc，11+dd，12+dd，13+dd，14+dd，15+dd，16+dd，17+dd，18+dd，11+ee，12+ee，13+ee，14+ee，15+ee，16+ee，17+ee，18+ee，11+ff，12+ff，13+ff，14+ff，15+ff，16+ff，17+ff，18+ff，11+gg，12+gg，13+gg，14+gg，15+gg，16+gg，17+gg，18+gg，11+hh，12+hh，13+hh，14+hh，15+hh，16+hh，17+hh，18+hh，11+ii，12+ii，13+ii，14+ii，15+ii，16+ii，17+ii，18+ii and 11+p.
在另一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含一種鹽與一種拮抗微生物的組合，所述組合選自包含下列組合的組12+p，13+p，14+p，15+p，16+p，17+p，18+p，11+q，12+q，13+q，14+q，15+q，16+q，17+q，18+q，11+r，12+r，13+r，14+r，15+r，16+r，17+r，18+r，11+s，12+s，13+s，14+s，15+s，16+s，17+s，18+s，11+t，12+t，13+t，14+t，15+t，16+t，17+t，18+t，11+u，12+u，13+u，14+u，15+u，16+u，17+u，18+u，11+v，12+v，13+v，14+v，15+v，16+v，17+v，18+v，11+w，12+w，13+w，14+w，15+w，16+w，17+w，18+w，11+x，12+x，13+x，14+x，15+x，16+x，17+x，18+x，19+a，20+a，21+a，22+a，23+a，24+a，25+a，26+a，27+a，28+a，29+a，30+a，19+b，20+b，21+b，22+b，23+b，24+b，25+b，26+b，27+b，28+b，29+b，30+b，19+c，20+c，21+c，22+c，23+c，24+c，25+c，26+c，27+c，28+c，29+c，30+c，19+d，20+d，21+d，22+d，23+d，24+d，25+d，26+d，27+d，28+d，29+d，30+d，19+e，20+e，21+e，22+e，23+e，24+e，25+e，26+e，27+e，28+e，29+e，30+e，19+f，20+f，21+f，22+f，23+f，24+f，25+f，26+f，27+f，28+f，29+f，30+f，19+g，20+g，21+g，22+g，23+g，24+g，25+g，26+g，27+g，28+g，29+g，30+g，19+h，20+h，21+h，22+h，23+h，24+h，25+h，26+h，27+h，28+h，29+h，30+h，19+i，20+i，21+i，22+i，23+i，24+i，25+i，26+i，27+i，28+i，29+i，30+i，19+j，20+j，21+j，22+j，23+j，24+j，25+j，26+j，27+j，28+j，29+j，30+j，19+k，20+k，21+k，22+k，23+k，24+k，25+k，26+k，27+k，28+k，29+k，30+k，19+l，20+l，21+l，22+l，23+l，24+l，25+l，26+l，27+l，28+l，29+l，30+l，19+m，20+m，21+m，22+m，23+m，24+m，25+m，26+m，27+m，28+m，29+m，30+m，19+n，20+n，21+n，22+n，23+n，24+n，25+n，26+n，27+n，28+n，29+n，30+n，19+o，20+o，21+o，22+o，23+o，24+o，25+o，26+o，27+o，28+o，29+o，30+o，19+p，20+p，21+p，22+p，23+p，24+p，25+p，26+p，27+p，28+p，29+p，30+p，19+q，20+q，21+q，22+q，23+q，24+q，25+q，26+q，27+q，28+q，29+q，30+q，19+r，20+r，21+r，22+r，23+r，24+r，25+r，26+r，27+r，28+r，29+r，30+r，19+s，20+s，21+s，22+s，23+s，24+s，25+s，26+s，27+s，28+s，29+s，30+s，19+t，20+t，21+t，22+t，23+t，24+t，25+t，26＋t，27+t，28+t，29+t，30+t，19+u，20+u，21+u，22+u，23+u，24+u，25+u，26+u，27+u，28+u，29+u，30+u，19+v，20+v，21+v，22+v，23+v，24+v，25+v，26+v，27+v，28+v，29+v，30+v，19+w，20+w，21+w，22+w，23+w，24+w，25+w，26+w，27+w，28+w，29+w，30+w，19+x，20+x，21+x，22+x，23+x，24+x，25+x，26+x，27+x，28+x，29+x，30+x，，31+a，32+a，33+a，34+a，35+a，36+a，37+a，38+a，39+a，40+a，41+a，42+a，31+b，32+b，33+b，34+b，35+b，36+b，37+b，38+b，39+b，40+b，41+b，42+b，31+c，32+c，33+c，34+c，35+c，36+c，37+c，38+c，39+c，40+c，41+c，42+c，31+d，32+d，33+d，34+d，35+d，36+d，37+d，38+d，39+d，40+d，41+d，42+d，31+e，32+e，33+e，34+e，35+e，36+e，37+e，38+e，19+aa，20+aa，21+aa，22+aa，23+aa，24+aa，25+aa，26+aa，27+aa，28+aa，29+aa，30+aa，19+bb，20+bb，21+bb，22+bb，23+bb，24+bb，25+bb，26+bb，27+bb，28+bb，29+bb，30+bb，19+cc，20+cc，21+cc，22+cc，23+cc，24+cc，25+cc，26+cc，27+cc，28+cc，29+cc，30+cc，19+dd，20+dd，21+dd，22+dd，23+dd，24+dd，25+dd，26+dd，27+dd，28+dd，29+dd，30+dd，19+ee，20+ee，21+ee，22+ee，23+ee，24+ee，25+ee，26+ee，27+ee，28+ee，29+ee，30+ee，19+ff，20+ff，21+ff，22+ff，23+ff，24+ff，25+ff，26+ff，27+ff，28+ff，29+ff，30+ff，19+gg，20+gg，21+gg，22+gg，23+gg，24+gg，25+gg，26+gg，27+gg，28+gg，29+gg，30+gg，19+hh，20+hh，21+hh，22+hh，23+hh，24+hh，25+hh，26+hh，27+hh，28+hh，29+hh，30+hh，19+ii，20+ii，21+ii，22+ii，23+ii，24+ii，25+ii，26+ii，27+ii，28+ii，29+ii，30+ii，31+aa，32+aa，33+aa，34+aa，35+aa，36+aa，37+aa，38+aa，39+aa，40+aa，41+aa，42+aa，31+bb，32+bb，33+bb，34+bb，35+bb，36+bb，37+bb，38+bb，39+bb，40+bb，41+bb，42+bb，31+cc，32+cc，33+cc，34+cc，35+cc，36+cc，37+cc，38+cc，39+cc，40+cc，41+cc，42+cc，31+dd，32+dd，33+dd，34+dd，35+dd，36+dd，37+dd，38+dd，39+dd，40+dd，41+dd，42+dd，31+ee，32+ee，33+ee，34+ee，35+ee，36+ee，37+ee and 38+ee.
在另一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含一種鹽和一種拮抗微生物的組合，所述組合選自包含下列組合的組39+e，40+e，41+e，42+e，31+f，32+f，33+f，34+f，35+f，36+f，37+f，38+f，39+f，40+f，41+f，42+f，31+g，32+g，33+g，34+g，35+g，36+g，37+g，38+g，39+g，40+g，41+g，42+g，31+h，32+h，33+h，34+h，35+h，36+h，37+h，38+h，39+h，40+h，41+h，42+h，31+i，32+i，33+i，34+i，35+i，36+i，37+i，38+i，39+i，40+i，41+i，42+i，31+j，32+j，33+j，34+j，35+j，36+j，37+j，38+j，39+j，40+j，41+j，42+j，31+k，32+k，33+k，34+k，35+k，36+k，37+k，38+k，39+k，40+k，41+k，42+k，31+l，32+l，33+l，34+l，35+l，36+l，37+l，38+l，39+l，40+l，41+l，42+l，31+m，32+m，33+m，34+m，35+m，36+m，37+m，38+m，39+m，40+m，41+m，42+m，31+n，32+n，33+n，34+n，35+n，36+n，37+n，38+n，39+n，40+n，41+n，42+n，31+o，32+o，33+o，34+o，35+o，36+o，37+o，38+o，39+o，40+o，41+o，42+o，31+p，32+p，33+p，34+p，35+p，36+p，37+p，38+p，39+p，40+p，41+p，42+p，31+q，32+q，33+q，34+q，35+q，36+q，37+q，38+q，39+q，40+q，41+q，42+q，31+r，32+r，33+r，34+r，35+r，36+r，37+r，38+r，39+r，40+r，41+r，42+r，31+s，32+s，33+s，34+s，35+s，36+s，37+s，38+s，39+s，40+s，41+s，42+s，31+t，32+t，33+t，34+t，35+t，36+t，37+t，38+t，39+t，40+t，41+t，42+t，31+u，32+u，33+u，34+u，35+u，36+u，37+u，38+u，39+u，40+u，41+u，42+u，31+v，32+v，33+v，34+v，35+v，36+v，37+v，38+v，39+v，40+v，41+v，42+v，31+w，32+w，33+w，34+w，35+w，36+w，37+w，38+w，39+w，40+w，41+w，42+w，31+x，32+x，33+x，34+x，35+x，36+x，37+x，38+x，39+x，40+x，41+x，42+x，39+ee，40+ee，41+ee，42+ee，31+ff，32+ff，33+ff，34+ff，35+ff，36+ff，37+ff，38+ff，39+ff，40+ff，41+ff，42+ff，31+gg，32+gg，33+gg，34+gg，35+gg，36+gg，37+gg，38+gg，39+gg，40+gg，41+gg，42+gg，31+hh，32+hh，33+hh，34+hh，35+hh，36+hh，37+hh，38+hh，39+hh，40+hh，41+hh，42+hh，31+ii，32+ii，33+ii，34+ii，35+ii，36+ii，37+ii，38+ii，39+ii，40+ii，41+ii，42+ii.
實施例2
實施例2闡明了下列事實通過使用本發(fā)明的組合物可以獲得良好的保護作用，所述組合物包含如這里所定義的鹽例如葡萄糖酸鈣(CG)和抗由蘋果屬種的水果上霉菌引起的收獲后疾病活性的拮抗酵母。
植物材料從比利時的用標準栽培慣例保養(yǎng)的商業(yè)果園收獲蘋果(蘋果(Malusdomestica)Borkh栽培品種Golden)并放置在正規(guī)的長期貯藏庫中。使用商業(yè)類別I的水果。它們是從批發(fā)商購買并于使用前在4±1℃的低溫房間中貯藏最多15天。
病原體最初從比利時Gembloux的蘋果分離出擴展青霉(Penicilliumexpansum)(藍色霉菌)菌株。將來自病原體的分生孢子以懸浮液形式放在甘油溶液(25％)中并貯藏在-70℃。從這個貯藏的材料出發(fā)，在25℃將真菌菌株轉(zhuǎn)移到PDA培養(yǎng)基。在無菌的Tween 20水溶液(0.05％)中制備分生孢子懸浮液，并且利用Bürker細胞(Bürker cell)調(diào)節(jié)到所需濃度(106孢子/ml)。
拮抗微生物拮抗酵母菌株是以編號40564保藏在BBCMTM/MUCL CultureCollection of the Mycothèque de l’Université Catholique de Louvain的Candida oleophila Montrocher，下文中稱為“菌株O”。
該拮抗酵母菌株是從蘋果表面分離出并貯藏在-70℃的甘油溶液(25％)中。在使用前，將所述酵母菌株以24小時的間隔在PDA(馬鈴薯DextroseAgar)上連續(xù)再培養(yǎng)三次。在第三世代，將酵母細胞從培養(yǎng)基除去并懸浮在等滲水(NaCl 0.85％)中。在建立微生物懸浮液吸光度(在595nm)和相同的懸浮液鋪到PDA上的菌落形成單位(cfu)的關(guān)系的回歸線之后，將懸浮濃度調(diào)節(jié)到所需的值。
處理通過在次氯酸鈉(10％的商售產(chǎn)品)中浸漬2分鐘將水果消毒。將它們在無菌水中漂洗并在分層流動中干透，之后通過從沿著所述水果的一側(cè)的表面相距4-5cm的三個部位除去4mm直徑且2-3mm深的組織塊。
通過施用40μl的本領(lǐng)域技術(shù)水平的組合物或根據(jù)本發(fā)明的組合物處理所述傷口。
在塑料盒中的24h在20℃的培育期之后，將所述傷口用40μl各自病原體的分生孢子懸浮液接種。在25℃培育所述水果。
在所述病原體接種后7天以后測量圍繞所述傷口發(fā)展的損傷直徑。每次處理使用至少五個水果(15個傷口)。大多數(shù)時間，每次處理使用15個水果和45個傷口。
利用下式從接種時間后由水果腐爛劑引起的損傷直徑計算由不同處理提供的保護百分比DT-DXDT×100=Y%]]>其中Y是保護百分比；DT是未處理的對照的平均損傷直徑并且DX是處理的水果的平均損傷直徑。
在受控的條件下評價根據(jù)本發(fā)明的組合物抗由擴展青霉(P.expansum)引起的收獲后蘋果腐爛的效果。
在本說明書的下面部分中，GC代表一水合物形式的葡萄糖酸鈣(CAS號299-28-5)，食品級，Jungbunzlauer，Germany。CN代表硝酸鈣(四水合物)，98％，VWR。這些產(chǎn)品本身是已知的并且是商購的。
在第一組的實驗中，將菌株O的標準組合物用作對照。菌株O使用的標準濃度是每毫升107菌落形成單位(cfu/ml)，而將濃度為105cfu/ml視為亞最佳的。事實上，在表3中可以看到，當單獨使用菌株O用這個濃度獲得的結(jié)果(按照如上定義計算的保護百分比表示)不令人滿意。
表3 針對擴展青霉(Penicillium expansum)的保護
根據(jù)本發(fā)明，意外地發(fā)現(xiàn)，包含亞最佳濃度為105cfu/ml的菌株O和2g/l CG的組合物改善了所述保護。
此外，發(fā)現(xiàn)，包含亞最佳濃度為105cfu/ml的菌株O和或者1.2g/l或者2.4g/l硝酸鈣的組合物在保護所述水果抗擴展青霉中比只含有菌株O的組合物，或者比根據(jù)本發(fā)明實施方案的組合物即包含菌株O和2g/l的CG有較差的效果。
在蘋果上的第二組實驗中，其結(jié)果在表4中給出，將菌株O的標準組合物用作了對照。
表4
在第一個組合物中，使用的菌株O的濃度是107cfu/ml的標準濃度，而在第二個中，使用的濃度是105cfu/ml的亞最佳濃度。
此外，意外地發(fā)現(xiàn)，包含105cfu/ml的亞最佳濃度的菌株O和2g/l CG的組合物改善了水果針對所述病原體的保護。
在蘋果上的第二組實驗中，其結(jié)果在表5中給出，將菌株O的標準組合物用作了對照。
表5
根據(jù)本發(fā)明，CG的加入可以將菌株O的濃度降低百倍到105cfu/ml同時獲得比107cfu/ml的標準濃度更佳的且增強的抗擴展青霉的功效。這個結(jié)果闡明了根據(jù)本發(fā)明的組合物的顯著特性。
實施例3植物材料如實施例2中所述的蘋果(蘋果(Malus domestica)Borkh栽培品種Golden)。
病原體如實施例2中所述的擴展青霉(Penicillium expansum)。
拮抗微生物拮抗酵母菌株是如實施例2中所述的Candida oleophila。
處理如實施例2中所述將蘋果損傷并且通過施用包含根據(jù)本發(fā)明的鹽、105cfu的C.oleophila的組合物，或本領(lǐng)域技術(shù)水平的組合物處理。使用的所述鹽是葡萄糖酸鈣(CG)、檸檬酸三鈣(TC)、碳酸鈣(CCa)、乳酸鈣(CL)、乳葡糖酸鈣(calcium lactogluconate)(CLG)、抗壞血酸鈣(CA)在培育后，用擴展青霉接種傷口。將所述水果進一步保溫。在接種所述病原體后的7天之后測量在所述傷口周圍發(fā)展的損傷的直徑。如實施例2中所述計算由不同處理提供的保護百分比。表6a和6b中顯示了來自兩組實驗的拮抗劑和鹽的組合對蘋果腐爛的保護效果的結(jié)果。將菌株O(107)的標準組合物用作對照。
表6a
表6b
根據(jù)本發(fā)明，不同鹽的加入可以將菌株O的濃度降低百倍到105cfu/ml同時獲得比單獨的菌株O更佳的保護。
在蘋果上的另一組實驗中，表7中給出了其結(jié)果，將菌株O的標準組合物用作對照，并且使用的鹽是葡萄糖酸鈣(CG)檸檬酸三鈣(TC)和碳酸鈣(CCa)。
Table 7
拮抗微生物與根據(jù)本發(fā)明的不同鹽的組合可以將菌株O的濃度降低百倍到105cfu/ml同時獲得比107cfu/ml的濃度更佳的且增強的抗擴展青霉的功效。這個結(jié)果闡明了根據(jù)本發(fā)明的組合物的顯著特性。
另外，相比于用于獲得相等保護的現(xiàn)有技術(shù)的CaCl2量，根據(jù)本發(fā)明的組合物可以顯著降低需要的鹽量。
實施例4植物材料如實施例2中所述的蘋果(蘋果(Malus domestica)Borkh栽培品種Golden)。
病原體如實施例2中所述的擴展青霉(Penicillium expansum)。
拮抗微生物拮抗酵母菌株是如實施例2中所述的Candida oleophila。
處理如實施例2中所述將蘋果損傷并且通過施用包含根據(jù)本發(fā)明的鹽和105cfu的C.oleophila的組合物，或本領(lǐng)域技術(shù)水平的組合物處理。
在培育后，用擴展青霉接種傷口。將所述水果進一步保溫。在接種所述病原體后的7天之后測量在所述傷口周圍發(fā)展的損傷的直徑。如實施例2中所述計算由不同處理提供的保護百分比。表8中顯示了結(jié)果。將菌株O的標準組合物用作對照。使用的鹽是葡萄糖酸鈣(CG)、碳酸鈣(CCa)、碳酸氫鈣(CBC)、單堿價磷酸鈣(CPM)、和三堿價磷酸鈣(CPT)。
表8
在相同的實驗中，在接種所述病原體后的11天之后測量在所述傷口周圍發(fā)展的損傷的直徑。如實施例2中所述計算由不同處理提供的保護百分比。結(jié)果表示在表9中。將菌株O(107)的標準組合物用作對照。使用的鹽是葡萄糖酸鈣(CG)、碳酸鈣(CCa)、碳酸氫鈣(CBC)、單堿價磷酸鈣(CPM)、和三堿價磷酸鈣(CPT)。
表9
從表8和9的結(jié)果可以看出，當與以相同濃度單獨使用所述拮抗微生物時相比，葡萄糖酸鈣、碳酸鈣、碳酸氫鈣、單堿價磷酸鈣、和三堿價磷酸鈣提供抗擴展青霉的良好保護。
實施例4植物材料如實施例2中所述的蘋果(蘋果(Malus domestica)Borkh栽培品種Golden)。
病原體灰葡萄孢(Botrytis cinerea)。
拮抗微生物拮抗酵母菌株是如實施例2中所述的Candida oleophila。
處理如實施例2中所述將蘋果損傷并且通過施用包含根據(jù)本發(fā)明的鹽和105cfu的C.oleophila的組合物，或本領(lǐng)域技術(shù)水平的組合物處理。
在培育后，用擴展青霉接種傷口。將所述水果進一步保溫。在接種所述病原體后的5天之后測量在所述傷口周圍發(fā)展的損傷的直徑。如實施例2中所述計算由不同處理提供的保護百分比。表10中顯示了結(jié)果。將菌株O的標準組合物用作對照。使用的鹽是葡萄糖酸鈣(CG)、檸檬酸三鈣(TC)、檸檬酸鉀(PC)、谷氨酸鈣(CGt)。
表10
結(jié)論這些實施例中給出的全部結(jié)果顯示，根據(jù)本發(fā)明的組合物表明比相同施用濃度下使用的含有微生物菌株的本領(lǐng)域技術(shù)水平的組合物提供更高的功效。通過本實施例清楚地表明在所述拮抗微生物的保護特性上的如這里所述鹽的驚人特性。利用下列鹽與C.oleophila的組合獲得了非常好的結(jié)果葡萄糖酸鈣、檸檬酸鈣、檸檬酸鉀、谷氨酸鉀、單堿價磷酸鈣、三堿價磷酸鈣、碳酸鈣、碳酸氫鈣、抗壞血酸鈣、乳酸鈣或乳葡糖酸鈣(calciumlactogluconate)。
本發(fā)明中使用的鹽是出人意料好的促進化合物，它可以在不降低所述組合物抗病原體功效的情況下降低拮抗微生物的濃度。它們也可以降低拮抗微生物的濃度同時延長所述組合物抗病原體功效的持續(xù)時間。
權(quán)利要求
1.用于抗一種或多種病原體的組合物，所述組合物包含至少一種拮抗微生物和至少一種鹽，所述鹽選自硫酸鈣、單堿價磷酸鈣Ca(H2PO4)2、二堿價磷酸鈣(CaHPO4)、三堿價磷酸鈣(Ca3(PO4)2)、碳酸鈣(CaCO3)、碳酸氫鈣(Ca(HCO3)2)、醋酸鈣、乙酸鈣、甘油酸鈣、乳酸鈣、谷氨酸鈣、赤蘚糖酸鈣、calcium theonate、核糖酸鈣、阿拉伯糖酸鈣、木糖酸鈣、來蘇糖酸鈣、阿洛糖酸鈣、阿卓糖酸鈣、葡萄糖酸鈣、甘露糖酸鈣、古洛糖酸鈣、艾杜糖酸鈣、半乳糖酸鈣、塔羅糖酸鈣、阿洛庚糖酸鈣、阿卓庚糖酸鈣、葡庚糖酸鈣、甘露庚糖酸鈣、古洛庚糖酸鈣、艾杜庚糖酸鈣、半乳庚糖酸鈣、塔羅庚糖酸鈣、丙醇二酸鈣、蘋果酸鈣、酒石酸鈣、檸檬酸鈣、糖二酸鈣、半乳糖二酸鈣、乳葡糖酸鈣、抗壞血酸鈣、異檸檬酸鈣、或二甲基蘋果酸鈣。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述鹽的量包含在0.005和5g/l之間，優(yōu)選在0.01和4g/l重量/體積之間，更優(yōu)選在0.1和3g/l重量/體積之間，更優(yōu)選在0.01和2.5g/l重量/體積之間，并且還更優(yōu)選在0.1和2.2g/l重量/體積之間。
3.根據(jù)任一項在前權(quán)利要求的組合物，其中所述至少一種拮抗微生物選自包含細菌、真菌和酵母的組。
4.根據(jù)任一項在前權(quán)利要求的組合物，其中所述拮抗微生物選自包含下列微生物的組土壤桿菌屬物種(Agrobacterium spp.)、白粉寄生菌屬物種(Ampelomyces spp.)、短梗霉菌屬物種(Aureobasidium spp)；芽孢桿菌屬物種(Bacillus spp.)、布勒擔孢酵母屬物種(Bulleromyces spp.)、假絲酵母屬物種(Candida spp.)、毛殼菌屬物種(Chaetomium spp.)、盾殼霉菌屬物種(Coniothyrium spp.)、隱球酵母屬物種(Cryptococcus spp.)、德巴利酵母屬物種(Debaryomyces spp.)、德克酵母屬物種(Dekkera spp.)、歐文氏菌屬物種(Erwinia spp.)、Exophilia spp.、GliocIadium spp.、漢遜酵母(Hansenula spp.)伊薩酵母屬物種(Issatchenkia spp.)、克魯維酵母屬物種(Kluyveromycesspp.)、馬利亞霉屬物種(Mariannaea spp.)、Metschnikovia spp.、微結(jié)節(jié)菌屬物種(Microdochium spp.)、青霉菌屬物種(Penicillium spp.)、Phlebiopsis spp.；畢赤酵母屬物種(Pichia spp.)、假單胞菌屬物種(Pseudomonas spp.)、Pseudozyma spp.、紅酵母屬物種(Rhodotorula spp.)、酵母屬物種(Saccharomyces spp.)、擲孢酵母屬物種(Sporobolomyces spp.)、鏈霉菌屬物種(Streptomyces sp.)、Talaromyces spp.、木霉菌屬物種(Trichoderma spp.)、Ulocladium spp.、和接合酵母屬物種(Zygosaccharomyces spp.)，優(yōu)選放射形土壤桿菌(Agrobacterium radiobacter)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilis)、Candida oleophila、Candida saitoana、清酒假絲酵母(Candida sake)、Candidatenius、產(chǎn)朊假絲酵母(Candida utilis)、Coniothyrium minitans、淺白隱球酵母(Cryptococcus albidus)、胡蘿卜軟腐歐文氏菌(Erwinia carotovora)、Gliocladium catenalatum、綠粘帚霉(Gliocladium virens)、Hanseniasporauvarum、耐熱克魯維酵母(Kluyveromyces thermotolerance)、Metschnikoviafructicola、Metschnikowia reukafii、Microdochium dimerum、草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)、Phlebiopsis gigantean、異常畢赤酵母(Pichiaanomala)、季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)、洋蔥假單胞菌(Pseudomonas cepacia)、綠針假單胞菌(Pseudomonas chlororaphis)、熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)、丁香假單胞桿菌(Pseudomonassyringae)、Pseudozyma flocullosa、粘紅酵母(Rhodotorula glutinis)、粘質(zhì)紅酵母(Rhodotorula mucilaginosa)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、酵母屬灰綠鏈霉菌(Saccharomyces Streptomyces griseoviridis)、黃色蠕形霉(Talaromyces flavus)、深綠木霉(Trichoderma atroviride)、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、多孢木霉(Trichoderma polysporum)、綠色木霉(Trichoderma viride)、和Ulocladium atrum。
5.根據(jù)任一項在前權(quán)利要求的組合物，其中所述拮抗微生物以從103至1011cfu/ml，優(yōu)選從104至1010cfu/ml的范圍內(nèi)的濃度應(yīng)用。
6.用于抗病原體的根據(jù)任一項在前權(quán)利要求的組合物，所述病原體能夠?qū)χ参锊牧弦鸺膊　?br> 7.根據(jù)權(quán)利要求6的組合物，其中所述植物材料選自包含包括下列物種的組蘋果屬物種(Malus spp.)，梨屬物種(Pyrus spp.)，包括柑桔、檸檬、葡萄柚、柑橘的柑橘屬物種(Citrus spp.)；例如物種番茄、青椒、黃瓜、葡萄藤和草莓的作物；包括馬鈴薯、胡蘿卜的塊根作物；包括芒果、香蕉、番石榴、菠蘿、鱷梨的熱帶水果；瓜果，和開花植物及其它裝飾作物。
8.根據(jù)任一項在前權(quán)利要求的組合物，其中所述病原體選自包含下列微生物的組鏈格孢屬物種(Alternaria spp.)、殼二孢屬物種(Ascochytaspp.)、曲酶屬物種(Aspergillus spp.)、葡萄孢屬物種(Botrytis spp.)、尾孢屬物種(Cercospora spp.)、支孢屬物種(Cladosporium spp.)、麥角屬物種(Claviceps spp.)、刺盤孢屬物種(Colletotrichum spp.)、白粉菌屬物種(Erysiphe spp.)、鐮孢屬物種(Fusarium spp.)、地霉屬物種(Geotrichum spp.)、吉爾霉屬物種(Gilbertella spp.)、盤長孢屬物種(Gloeosporium spp.)、長蠕孢屬物種(Helminthosporium spp.)、叢梗孢屬物種(Monilia spp.)、鏈核盤菌屬物種(Monilinia spp.)、Mucov spp.、叢赤殼屬物種(Nectria spp.)、青霉菌屬物種(Penicillium spp.)、霜霉屬物種(Peronospora spp.)、無柄盤菌屬物種(Pezicula spp.)、擬莖點霉屬物種(Phomopsis spp.)、疫霉屬物種(Phytophthoraspp.)、單軸霉屬物種(Plasmopara spp.)、叉絲單囊殼屬物種(Podosphaeraspp.)、Pseudocercosporium spp.、柄銹菌屬物種(Puccinia spp.)、絲核菌屬物種(Rhizoctonia spp.)、根霉屬物種(Rhizopus spp.)、Rynchosporium spp.、核盤霉屬物種(Sclerotinia spp.)、殼針孢屬物種(Septoria spp.)、單絲殼屬物種(Sphaerotheca spp.)、鉤絲殼屬物種(Uncinula spp.)、黑粉菌屬物種(Ustilago spp.)、黑星菌屬物種(Venturia spp.)、輪枝孢屬物種(Verticilliumspp.)，和細菌或病毒病原體。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的組合物，其中所述病原體選自由下列微生物組成的組鏈格孢(Alternaria alternata)、殼二孢屬物種(Ascochyta sp.)、黃曲霉(Aspergillus flavus)、黑曲霉(Aspergillus niger)、蔥腐葡萄孢(Botrytis alii)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、蠶豆葡萄孢(Botrytis fabae)、尾孢屬物種(Cercospora sp.)、枝孢屬物種(Cladosporium sp.)、麥角菌(Clavicepspurpurea)、刺盤孢屬物種(Colletotrichum sp.)、甜菜白粉菌(Erysiphe betae)、禾白粉菌(Erysiphe graminis)、尖鐮孢(Fusarium oxysporum)、白地霉(Geotrichum candidum)、Gilbertella persicovia、懿長孢(Gloeosporiumperennans)、果生盤長孢(Gloeosporium fructigenum)、長蠕孢屬物種(Helminthosporium sp.)、叢梗孢屬物種(Monilia sp.)、Monilinia fructicola、核果鏈盒盤菌(Monilinia laxa)、Mucov sp.、朱紅叢赤殼(Nectriacinnabarina)、指狀青霉(Penicillium digitatum)、擴展青霉(Penicilliumexpansum)、意大利青霉(Penicillium italicum)、霜霉屬物種(Peronosporasp.)、Pezicula malicorticas、Phomopsis viticola、致病疫霉(Phytophthorainfestans)、葡萄生單軸霉(Plasmopara viticola)、白叉絲單囊殼(Podosphaeraleucotricha)、Pseudocercosporium sp.、禾柄銹菌(Puccinia graminis)、絲核菌屬物種(Rhizoctonia sp.)、少根根霉(Rhizopus arrhizus)、匍枝根霉(Rhizopusstolonifer)、Rynchosporium sp.、蔥核盤菌(Sclerotinia Cepivorum)、核盤菌(Sclerotinia sclerotiorum)、Septoria apicola、單絲殼屬物種(Sphaerothecasp.)、葡萄鉤絲殼(Uncinula necator)、黑粉菌屬物種(Ustilago sp.)、蘋果黑星菌(Venturia inaequalis.)；黃萎輪枝孢(Verticillium albo-atrum)、和大麗花輪枝孢(Verticillium dahliae)。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9的組合物，其中所述病原體選自包含下列微生物的組葡萄孢屬物種(Botrytis spp.)、青霉菌屬物種(Penicillium spp.)、無柄盤菌屬物種(Pezicula spp.)和根霉屬物種(Rhizopus spp.)。
11.包含至少一種拮抗微生物和至少一種鹽和/或其衍生物的組合物用于同時、單獨或順序施用到要處理的植物，其中所述鹽選自硫酸鈣、單堿價磷酸鈣Ca(H2PO4)2、二堿價磷酸鈣(CaHPO4)、三堿價磷酸鈣(Ca3(PO4)2)、碳酸鈣(CaCO3)、碳酸氫鈣(Ca(HCO3)2)、醋酸鈣、乙酸鈣、甘油酸鈣、乳酸鈣、谷氨酸鈣、赤蘚糖酸鈣、calcium theonate、核糖酸鈣、阿拉伯糖酸鈣、木糖酸鈣、來蘇糖酸鈣、阿洛糖酸鈣、阿卓糖酸鈣、葡萄糖酸鈣、甘露糖酸鈣、古洛糖酸鈣、艾杜糖酸鈣、半乳糖酸鈣、塔羅糖酸鈣、阿洛庚糖酸鈣、阿卓庚糖酸鈣、葡庚糖酸鈣、甘露庚糖酸鈣、古洛庚糖酸鈣、艾杜庚糖酸鈣、半乳庚糖酸鈣、塔羅庚糖酸鈣、丙醇二酸鈣、蘋果酸鈣、酒石酸鈣、檸檬酸鈣、糖二酸鈣、半乳糖二酸鈣、乳葡糖酸鈣、抗壞血酸鈣、異檸檬酸鈣、或二甲基蘋果酸鈣。
12.用于由對植物材料病原體引起的疾病的生物防治方法，所述方法包含將如權(quán)利要求1至11中任一項所限定的組合物應(yīng)用到所述植物材料的步驟。
13.用于制造如權(quán)利要求1至11中任一項所限定的組合物的方法，所述方法包含將至少一種拮抗微生物與至少一種鹽和/或其衍生物混合的步驟。
14.如權(quán)利要求1至11中任一項所限定的組合物作為生物殺蟲劑的用途。
15.鹽作為用于增強包含至少一種拮抗微生物的組合物功效的化合物的用途，其中所述鹽選自硫酸鈣、單堿價磷酸鈣Ca(H2PO4)2、二堿價磷酸鈣(CaHPO4)、三堿價磷酸鈣(Ca3(PO4)2)、碳酸鈣(CaCO3)、碳酸氫鈣(Ca(HCO3)2)、醋酸鈣、乙酸鈣、甘油酸鈣、乳酸鈣、谷氨酸鈣、赤蘚糖酸鈣、calcium theonate、核糖酸鈣、阿拉伯糖酸鈣、木糖酸鈣、來蘇糖酸鈣、阿洛糖酸鈣、阿卓糖酸鈣、葡萄糖酸鈣、甘露糖酸鈣、古洛糖酸鈣、艾杜糖酸鈣、半乳糖酸鈣、塔羅糖酸鈣、阿洛庚糖酸鈣、阿卓庚糖酸鈣、葡庚糖酸鈣、甘露庚糖酸鈣、古洛庚糖酸鈣、艾杜庚糖酸鈣、半乳庚糖酸鈣、塔羅庚糖酸鈣、丙醇二酸鈣、蘋果酸鈣、酒石酸鈣、檸檬酸鈣、糖二酸鈣、半乳糖二酸鈣、乳葡糖酸鈣、抗壞血酸鈣、異檸檬酸鈣、或二甲基蘋果酸鈣。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于抗一種或多種植物病原體的組合物，所述組合物包含如權(quán)利要求1所定義的至少一種拮抗微生物和至少一種鹽。本發(fā)明還涉及所述組合物作為生物殺蟲劑的用途。
文檔編號A01P1/00GK101031203SQ200580032458
公開日2007年9月5日 申請日期2005年9月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月24日
發(fā)明者菲利普·皮若, 穆罕默德·海塞姆·吉賈克里 申請人:生物耐克斯特公司