專利名稱：一種水稻外源dna浸胚育種法的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及農作物育種方法領域。
背景技術：
目前，農作物育種大多采取有性雜交育種方法，其不足之處在于當進行遠緣雜交時，往往難以成功，尤其是水稻與玉米之間的有性雜交幾乎是不可能的。
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的就是針對現有用常規(guī)有性雜交育種方法進行遠緣雜交時，往往難以成功之不足，而提供一種水稻外源DNA浸胚育種法。
本發(fā)明的優(yōu)點是它能使水稻與玉米的優(yōu)良性狀結合成一體，培育成具有玉米優(yōu)良性狀的水稻品種?？朔怂九c玉米之間有性雜交難以成功的缺點。
具體實施例方式
一、提取外源DNA將玉米品種慈利一斤白(慈利一斤白為湖南地方玉米品種)的種子萌發(fā)，產生3cm的幼葉，剪下幼葉，通過常規(guī)的植物DNA提取法(CTAB法)提取玉米總DNA，二、配制外源DNA溶液將上述玉米總DNA加水配制成濃度為80μg/ml的玉米DNA溶液，再在玉米DNA溶液中加入赤霉素(赤霉素的作用在于促使外源DNA進入受體細胞中)配制成赤霉素濃度為30ppm的外源DNA溶液，制成外源DNA溶液；三、導入外源DNA將200粒水稻品種湘早秈8號的米浸泡入上述外源DNA溶液內，在適合稻米發(fā)芽的溫度條件下，浸泡48小時；四、種植外源DNA浸胚第一代將經過外源DNA溶液浸泡過的稻米進行發(fā)芽后，植入稻田種植，即為外源DNA浸胚第一代；五、種植外源DNA浸胚第二代將外源DNA浸胚第一代的種子繼續(xù)種植，群體株數要在1萬株以上，即為外源DNA浸胚第二代，在第二代的群體株中選取萬分之幾的變異株；六、選育將在外源DNA浸胚第二代分離株中選取的變異株的種子繼續(xù)種植，即為外源DNA浸胚第三代，在第三代中會出現廣幅分離，是選種的關鍵世代，按育種目標選取優(yōu)株。并將優(yōu)株的種子繼續(xù)種植，培育成株系，即為外源DNA浸胚第四代。從第四代中選取的優(yōu)良株系，之后繁育成品系，至性狀穩(wěn)定，不再分離時，即成為含有外源DNA片段的新的水稻品種。
用本方法已成功選育出性狀穩(wěn)定的遺傳工程水稻1號、遺傳工程水稻2號和遺傳工程水稻3號。遺傳工程水稻3號高抗稻瘟病，米粒為紅色，且米粒沒有心、腹白，透明，故稱之為紅寶石米，其鐵、鈣、鋅、維生素B1、B2均高于普通秈稻、粳稻及黑米、紫米等有色米，為農業(yè)部頒標準一級優(yōu)質米，有較高的醫(yī)用保健和食品加工價值。遺傳工程水稻1號和遺傳工程水稻3號于1994年在云南麗江種植畝產達1000kg以上。遺傳工程水稻1號于1993年10月通過了湖南省科委組織的專家委員會的鑒定，鑒定認為“遺傳工程水稻1號根據DNA分子檢測研究，初步發(fā)現部分DNA片段，并已穩(wěn)定遺傳(已至七代)，同時細胞學鑒定以及解剖、農藝、生理生化的研究，觀察到遺傳工程水稻1號中有類似于玉米的某些特征和特性，遺傳工程水稻1號的獲得是外源DNA導入技術應用于水稻育種的一項重大科技成果，處于國際領先水平”。
權利要求
1.一種水稻外源DNA浸胚育種法，其特征在于其育種步驟為一、提取外源DNA將玉米種子萌發(fā)，產生幼葉，剪下幼葉，通過常規(guī)的植物DNA提取法提取玉米總DNA；二、配制外源DNA溶液將上述玉米總DNA加水配制成濃度為40-120μg/ml的玉米DNA溶液，再在玉米DNA溶液中加入赤霉素配制成赤霉素濃度為10-60ppm的外源DNA溶液，制成外源DNA溶液；三、導入外源DNA將稻米浸泡入上述外源DNA溶液內，在適合稻米發(fā)芽的溫度條件下，浸泡24-72小時；四、種植外源DNA浸胚第一代將經過外源DNA溶液浸泡過的稻米進行發(fā)芽后，植入稻田種植，即為外源DNA浸胚第一代；五、種植外源DNA浸胚第二代將外源DNA浸胚第一代的種子繼續(xù)種植，即為外源DNA浸胚第二代，在第二代的群體中選取變異株；六、選育將在外源DNA浸胚第二代群體中選取的變異株的種子繼續(xù)種植，然后在分離群體中選取優(yōu)株，并將優(yōu)株培育成株系，繼續(xù)種植，直至選取的優(yōu)株后代性狀穩(wěn)定，不再分離時，即成為具有外源DNA的新的水稻品種。
2.根據權利要求1所述的水稻外源DNA浸胚育種法，其特征在于玉米種子是玉米品種慈利一斤白的種子，稻米是水稻品種湘早秈8號的米。
全文摘要
一種水稻外源DNA浸胚育種法，其育種步驟為一、提取外源DNA；二、配制外源DNA溶液將上述玉米總DNA加水配制成濃度為40－120μg/ml的玉米DNA溶液，再在玉米DNA溶液中加入赤霉素配制成赤霉素濃度為10－60ppm的外源DNA溶液，制成外源DNA溶液；三、導入外源DNA將稻米浸泡入上述外源DNA溶液內；四、種植外源DNA浸胚第一代；五、種植外源DNA浸胚第二代；六、選育。本發(fā)明的優(yōu)點是它能使水稻與玉米的優(yōu)良性狀結合成一體，培育成具有玉米優(yōu)良性狀的水稻品種。克服了水稻與玉米之間有性雜交難以成功的缺點。
文檔編號A01C1/00GK1846477SQ20061001865
公開日2006年10月18日 申請日期2006年3月26日 優(yōu)先權日2006年3月26日
發(fā)明者萬文舉 申請人:潘典進