專(zhuān)利名稱(chēng)：食用菌液體菌種專(zhuān)用母種的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生產(chǎn)食用菌液體菌種所需的專(zhuān)用母種及其生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
目前，食用菌的生產(chǎn)已由傳統(tǒng)的固體菌種向液體菌種方向轉(zhuǎn)變，而已知的液體菌種生產(chǎn)均采用“一級(jí)斜面母種→一級(jí)搖瓶種→二級(jí)搖瓶種→培養(yǎng)罐培養(yǎng)(液體菌種)”的方法生產(chǎn)，但用這樣的方法生產(chǎn)液體菌種周期長(zhǎng)、成本高、投資大、易污染、成功率低；而采用“液體專(zhuān)用母種”→培養(yǎng)罐培養(yǎng)(液體菌種)”的方法進(jìn)行生產(chǎn)，同已知方法比周期短、成本低、技術(shù)簡(jiǎn)單、成功率高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是為了解決現(xiàn)有液體菌種生產(chǎn)存在的問(wèn)題而提供生產(chǎn)食用菌液體菌種所需的專(zhuān)用母種。
本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)，是將一級(jí)搖瓶種接入到固體母種培養(yǎng)基制成專(zhuān)用母種的方法，其中一、一級(jí)搖瓶種及專(zhuān)用母種培養(yǎng)基配方1、一級(jí)搖瓶種培養(yǎng)基按重量百分比①木腐菌培養(yǎng)基土豆20、紅糖1.0-1.5、葡萄糖1.0-1.5、麩皮3、蛋白胨0.15-0.3、磷酸二氫鉀0.2、硫酸鎂0.1、維生素B110毫克/升、余量為水，PH值6.5-7.0②草腐菌培養(yǎng)基土豆20、紅糖1.0-1.5、麩皮3.0-5.0、蛋白胨0.1-0.25、酵母膏0.1-0.2、磷酸二氫鉀0.2、硫酸鎂0.1、維生素B110毫克/升，余量為水，PH值7.0-7.52、專(zhuān)用母種配方按重量百分比①木腐菌配方硬雜木屑67-77、麩皮20-30、紅糖2、石膏1，PH值自然②草腐菌配方硬雜木屑42-52、谷粒30-40、麩皮15、紅糖2、石膏1，
PH值6.5-7.5。
二、生產(chǎn)一級(jí)搖瓶種及專(zhuān)用母種的方法1、生產(chǎn)一級(jí)搖瓶種①分裝把配制好的培養(yǎng)基按每瓶200-400毫升的裝量裝入1000毫升的三角瓶中，蓋上棉塞，綁上牛皮紙，②滅菌在121-126℃的條件下滅菌30分鐘，③接種待培養(yǎng)基溫度降至30℃以下時(shí)，即可接入經(jīng)篩選、提純、活化處理的一級(jí)斜面母種，每瓶接入2-3塊0.5-1.0cm2的菌塊，④培養(yǎng)將接完種的菌瓶在130-200轉(zhuǎn)/分的回旋式搖床上振蕩培養(yǎng)，在23℃-28℃條件下5-10天后制得一級(jí)搖瓶種，⑤菌種的篩選、提純、活化將普通的一級(jí)斜面母種接在搖瓶中振蕩培養(yǎng)7-10天，挑取懸浮在菌液上層、活力強(qiáng)壯、大小在2-3毫米左右的菌球接在斜面培養(yǎng)基上，待其長(zhǎng)到試管的1/3-2/3即可使用，2、生產(chǎn)專(zhuān)用母種①原料處理將顆粒狀木屑過(guò)20目篩，麩皮過(guò)40目篩，再進(jìn)行混合，②拌料把原料按配比加水拌勻，含水量在60-63％，③裝瓶把上述培養(yǎng)料裝入500毫升的三角瓶中，壓緊、壓平，每瓶裝料約450毫升或干料150克，蓋上棉塞，綁上牛皮紙，在121-126℃的條件下滅菌90分鐘，待溫度降至30℃以下時(shí)備用，④接種用滅好菌的吸管把培養(yǎng)好的一級(jí)搖瓶種接入到盛裝在三角瓶?jī)?nèi)滅好菌的固體培養(yǎng)基中，⑤培養(yǎng)在23-25℃的條件下避光培養(yǎng)，菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)后即可。
三、液體專(zhuān)用母種的使用(1)無(wú)菌水的制備取1000ml三角瓶裝750-780ml的水在121-126℃的條件下滅菌40分鐘。
(2)專(zhuān)用種的并瓶把長(zhǎng)好的專(zhuān)用母種用接種鉤在無(wú)菌條件下倒入無(wú)菌水瓶中制成菌懸液。
(3)接種把制備好的種子菌懸液在火圈的保護(hù)下接入到培養(yǎng)罐中，2-4天可制得液體菌種。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1、菌種質(zhì)量好、純度高、顆粒均勻、便于檢測(cè)，便于保藏運(yùn)輸，接種后萌發(fā)吃料快。
2、使用本菌種生產(chǎn)液體菌種可節(jié)省一次投資10000元左右，且每生產(chǎn)60升菌種節(jié)省成本144.56元。
3、使用專(zhuān)用母種生產(chǎn)液體菌種，其生產(chǎn)周期為已知生產(chǎn)方法的1/4。
4、使用專(zhuān)用母種生產(chǎn)液體菌種難度小、成功率高、風(fēng)險(xiǎn)性低。
5、液體專(zhuān)用母種的使用促進(jìn)了液體菌種技術(shù)的推廣和普及，有很強(qiáng)的實(shí)用價(jià)值，這一技術(shù)的使用，對(duì)促進(jìn)食用菌的工廠化、規(guī)?；a(chǎn)提供了保證。


圖1是本發(fā)明的液體專(zhuān)用母種生產(chǎn)工藝流程圖，表示液體菌種兩種不同生產(chǎn)工藝。
①用搖瓶種的生產(chǎn)工藝一級(jí)斜面母種→一級(jí)搖瓶種→二級(jí)搖瓶種→二級(jí)搖瓶種并瓶→培養(yǎng)罐培養(yǎng)(液體菌體)，②用液體專(zhuān)用母種的生產(chǎn)工藝液體專(zhuān)用母種→培養(yǎng)罐培養(yǎng)(液體菌種)。
具體實(shí)施例方式
黑木耳、雙孢菇液體菌種的生產(chǎn)過(guò)程A、生產(chǎn)專(zhuān)用母種一、一級(jí)搖瓶種及專(zhuān)用母種培養(yǎng)基配方I、一級(jí)搖瓶種培養(yǎng)基按重量百分比①木腐菌培養(yǎng)基土豆20、紅糖1.0-1.5、葡萄糖1.0-1.5、麩皮3、蛋白胨0.15-0.3、磷酸二氫鉀0.2、硫酸鎂0.1、維生素B110毫克/升、余量為水，PH值6.5-7.0②草腐菌培養(yǎng)基土豆20、紅糖1.0-1.5、麩皮3.0-5.0、蛋白胨0.1-0.25、酵母膏0.1-0.2、磷酸二氫鉀0.2、硫酸鎂0.1、維生素B110毫克/升，余量為水，PH值7.0-7.5II、專(zhuān)用母種配方按重量百分比
①木腐菌配方硬雜木屑67-77、麩皮20-30、紅糖2、石膏1，PH值自然②草腐菌配方硬雜木屑42-52、谷粒30-40、麩皮15、紅糖2、石膏1，PH值6.5-7.5；二、生產(chǎn)一級(jí)搖瓶種及專(zhuān)用母種的方法I、生產(chǎn)一級(jí)搖瓶種①分裝把配制好的培養(yǎng)基按每瓶200-400毫升的裝量裝入1000毫升的三角瓶中，蓋上棉塞，綁上牛皮紙，②滅菌在121-126℃的條件下滅菌30分鐘，③接種待培養(yǎng)基溫度降至30℃以下時(shí)，即可接入經(jīng)篩選、提純、活化處理的一級(jí)斜面母種，每瓶接入2-3塊0.5-1.0cm2的菌塊，④培養(yǎng)將接完種的菌瓶在130-200轉(zhuǎn)/分的回旋式搖床上振蕩培養(yǎng)，在23-28℃條件下5-10天后制得一級(jí)搖瓶種，⑤菌種的篩選、提純、活化將普通的一級(jí)斜面母種接在搖瓶中振蕩培養(yǎng)7-10天，挑取懸浮在菌液上層、活力強(qiáng)壯、大小在2-3毫米左右的菌球接在斜面培養(yǎng)基上，待其長(zhǎng)到試管的1/3-2/3即可使用。
II、生產(chǎn)專(zhuān)用母種①原料處理將顆粒狀木屑過(guò)20目篩，麩皮過(guò)40目篩再進(jìn)行混合，②拌料把原料按配比加水拌勻，含水量在60-63％，③裝瓶把上述培養(yǎng)料裝入500毫升的三角瓶中，壓緊、壓平，每瓶裝料約450毫升或干料150克，蓋上棉塞，綁上牛皮紙，在121-126℃的條件下滅菌90分鐘，④接種用滅好菌的吸管把培養(yǎng)好的一級(jí)搖瓶種接入到盛裝在三角瓶?jī)?nèi)滅好菌的固體培養(yǎng)基中，⑤培養(yǎng)在23-25℃的條件下避光培養(yǎng)，菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)后即可。
B、用專(zhuān)用母種生產(chǎn)黑木耳、雙孢菇液體菌種的方法一、培養(yǎng)罐液體菌種的配方1、黑木耳
土豆10％、紅糖1.5％、葡萄糖1％、麥麩4％、蛋白胨0.2％、KH2PO40.2％、MgSO40.1％、VB10mg/l、泡敵0.03％、酵母膏0.1％，余量為水，PH值7.5。
2、雙孢菇土豆10％、紅糖1.5％、葡萄糖1％、麥麩4％、蛋白胨0.2％、KH2PO40.2％、MgSO40.1％、VB10mg/l、泡敵0.03％、酵母膏0.1％，余量為水，PH值7.5。
二、培養(yǎng)基的配制1、土豆挖芽、去皮洗凈后切0.2-0.4cm的條或片煮至酥而不爛時(shí)，用6-8層紗布過(guò)濾取濾液。
2、麥麩加水?dāng)嚢枳灾蠓谐掷m(xù)20分鐘后用6-8層紗布過(guò)濾取濾液。
3、紅糖、葡萄糖溶水后過(guò)濾取濾液。
4、KH2PO4、MgSO4直接加水?dāng)嚢枞芑?br> 5、蛋白胨直接加入或在其它容器中溶后加入。
6、VB1碾成細(xì)末加入攪勻。
7、泡敵直接加入。
三、上料關(guān)閉進(jìn)氣閥和接種閥，將漏斗插入進(jìn)料口，用小鍋將料液分批分次倒入或用水泵抽入處理好的培養(yǎng)罐中，之后加入自來(lái)水調(diào)整料液至標(biāo)準(zhǔn)線(xiàn)(55～75升之間)，55升約在空氣分布器上面4～5cm處，最多可加料至距上封頭焊烽15-17cm的水平線(xiàn)，約75升，擰緊接種蓋，即可滅菌。
四、滅菌啟動(dòng)加熱棒加熱開(kāi)關(guān)，當(dāng)溫度達(dá)到121-126℃時(shí)維持35分鐘，在維持溫度的35分鐘的開(kāi)始、中間、最后時(shí)間點(diǎn)分別放料一次，每次放料3-5分鐘，三次共排料3-5升。當(dāng)滅菌時(shí)間到，報(bào)警器自動(dòng)報(bào)警，接上進(jìn)氣管。
五、降溫當(dāng)滅菌時(shí)間到，馬上通過(guò)冷水管向夾層內(nèi)通冷水降溫，當(dāng)溫度降到30℃以下時(shí)，即可準(zhǔn)備接種。
六、專(zhuān)用種的并瓶用1000ml的三角瓶盛裝750ml的水，在121-126℃的條件下滅菌40分鐘，待水溫降至30℃以下時(shí)在無(wú)菌室內(nèi)將專(zhuān)用母種在無(wú)菌條件下?lián)v碎并倒入到無(wú)菌水瓶中，制成菌懸液。
七、接種將火圈浸足酒精套在接種口上，點(diǎn)燃火圈，把接種口打開(kāi)，在火焰上方撥掉菌種瓶棉塞，把菌懸液倒入到培養(yǎng)罐內(nèi)，蓋好接種蓋，調(diào)整罐壓在0.02-0.03MPa即可。
八、培養(yǎng)接種后即可進(jìn)入培養(yǎng)狀態(tài)，一般說(shuō)來(lái)2-4天可長(zhǎng)好。
九、接種將培養(yǎng)好的液體菌種通過(guò)接種管接種槍注入式接種，菌袋表面噴灑一薄層，每袋接入15-20ml菌種。
權(quán)利要求
1.生產(chǎn)食用菌液體菌種所需專(zhuān)用母種的制備方法，其特征是將一級(jí)搖瓶種接入到固體母種培養(yǎng)基制成專(zhuān)用母種的方法，其中一、一級(jí)搖瓶種及專(zhuān)用母種培養(yǎng)基配方I、一級(jí)搖瓶種培養(yǎng)基按重量百分比①木腐菌培養(yǎng)基土豆20、紅糖1.0-1.5、葡萄糖1.0-1.5、麩皮3、蛋白胨0.15-0.3、磷酸二氫鉀0.2、硫酸鎂0.1、維生素B110毫克/升、余量為水，PH值6.5-7.0②草腐菌培養(yǎng)基土豆20、紅糖1.0-1.5、麩皮3.0-5.0、蛋白胨0.1-0.25、酵母膏0.1-0.2、磷酸二氫鉀0.2、硫酸鎂0.1、維生素B110毫克/升，余量為水，PH值7.0-7.5II、專(zhuān)用母種配方按重量百分比①木腐菌配方硬雜木屑67-77、麩皮20-30、紅糖2、石膏1，PH值自然②草腐菌配方硬雜木屑42-52、谷粒30-40、麩皮15、紅糖2、石膏1，PH值6.5-7.5；二、生產(chǎn)一級(jí)搖瓶種及專(zhuān)用母種的方法I、生產(chǎn)一級(jí)搖瓶種①分裝把配制好的培養(yǎng)基按每瓶200-400毫升的裝量裝入1000毫升的三角瓶中，蓋上棉塞，綁上牛皮紙，②滅菌在121-126℃的條件下滅菌30分鐘，③接種待培養(yǎng)基溫度降至30℃以下時(shí)，即可接入經(jīng)篩選、提純、活化處理的一級(jí)斜面母種，每瓶接入2-3塊0.5-1.0cm2的菌塊，④培養(yǎng)將接完種的菌瓶在130-200轉(zhuǎn)/分的回旋式搖床上振蕩培養(yǎng)，在23-28℃條件下5-10天后制得一級(jí)搖瓶種，⑤菌種的篩選、提純、活化將普通的一級(jí)斜面母種接在搖瓶中振蕩培養(yǎng)7-10天，挑取懸浮在菌液上層、活力強(qiáng)壯、大小在2-3毫米左右的菌球接在斜面培養(yǎng)基上，待其長(zhǎng)到試管的1/3-2/3即可使用。
II、生產(chǎn)專(zhuān)用母種①原料處理將顆粒狀木屑過(guò)20目篩，麩皮過(guò)40目篩再進(jìn)行混合，②拌料把原料按配比加水拌勻，含水量在60-63％，③裝瓶把上述培養(yǎng)料裝入500毫升的三角瓶中，壓緊、壓平，每瓶裝料約450毫升或干料150克，蓋上棉塞，綁上牛皮紙，在121-126℃的條件下滅菌90分鐘，④接種用滅好菌的吸管把培養(yǎng)好的一級(jí)搖瓶種接入到盛裝在三角瓶?jī)?nèi)滅好菌的固體培養(yǎng)基中，⑤培養(yǎng)在23-25℃的條件下避光培養(yǎng)，菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)后即可。
全文摘要
生產(chǎn)食用菌液體菌種所需的專(zhuān)用母種的制備方法，是將一級(jí)搖瓶種接入到固體母種培養(yǎng)基制成專(zhuān)用母種的方法，由一級(jí)搖瓶種培養(yǎng)基生產(chǎn)一級(jí)搖瓶種，再由專(zhuān)用母種配方生產(chǎn)專(zhuān)用母種。它以木屑、麩皮等分散性好，大小均勻的顆粒性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制成培養(yǎng)基，裝在500ml的三角瓶里經(jīng)滅菌后，將搖瓶種接入培養(yǎng)基而制得的。使用專(zhuān)用母種生產(chǎn)液體菌種，其生產(chǎn)周期為已知生產(chǎn)方法的1/4，使用本菌種生產(chǎn)液體菌種可節(jié)省一次投資1萬(wàn)元左右，每生產(chǎn)60升菌種節(jié)約成本145元，實(shí)現(xiàn)了食用菌生產(chǎn)的工廠化和規(guī)模化。
文檔編號(hào)A01G1/04GK101063086SQ20061004643
公開(kāi)日2007年10月31日 申請(qǐng)日期2006年4月24日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月24日
發(fā)明者劉永昶 申請(qǐng)人:劉永昶