專利名稱：光葉眼子菜快速繁殖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及水生植物的組織培養(yǎng)方法，尤其涉及一種光葉眼子菜(Potamogton lucens Linn)快速繁殖的方法，屬于生物技術(shù)在水體植被恢復(fù)和水景布置中生產(chǎn)種苗的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
光葉眼子菜屬眼子菜科眼子菜屬，以其葉黃綠或帶亮綠色供觀賞，而且較抗污染，是生物食物鏈中的重要植物資源，又是水體植被恢復(fù)中的主要水生植物。光葉眼子菜的葉子呈長橢圓形、卵狀橢圓形至披針狀橢圓形，無柄或具短柄，有時柄長可達2厘米；葉片長2～18厘米，寬0.8～3.5厘米，質(zhì)薄，先端尖銳，常具0.5～2厘米長的芒狀尖頭，基部楔形，邊緣淺波狀，疏生細微鋸齒；葉脈5～9條，在清水中栩栩如生。
在自然界中繁殖系數(shù)低，如利用常規(guī)的分株法繁殖，形成不了規(guī)?；a(chǎn)，難以滿足水體植被恢復(fù)的需求。
組織培養(yǎng)作為生物技術(shù)領(lǐng)域中的一種重要手段，利用植物細胞的全能性，如莖尖、嫩芽等組織，通過離體培養(yǎng)，產(chǎn)生愈傷組織、分化成苗、誘導(dǎo)生根，從而形成植物的無性系快速繁殖的植株。雖然組織培養(yǎng)是一種比較成熟的技術(shù)，其基本培養(yǎng)基一般采用MS，但對不同植物，從產(chǎn)生愈傷組織、分化成苗、誘導(dǎo)生根的不同生長階段需要不同的營養(yǎng)配置，以及不同的生長條件。因此對光葉子菜的組織培養(yǎng)，也需要特殊的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種光葉眼子菜快速繁殖的方法。
為了達到上述目的，本發(fā)明包括下列步驟①取光葉眼子菜地下莖尖作為培養(yǎng)物；②將培養(yǎng)物消毒處理；③接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)；④轉(zhuǎn)接于分化與增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)；⑤或?qū)⒐馊~眼子菜芽分株，可作為新的光葉眼子菜培養(yǎng)物，重復(fù)步驟④可得到大量的光葉眼子菜芽；或?qū)⒐馊~眼子菜芽轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，即得到光葉眼子菜苗。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點和積極效果1、本發(fā)明的誘導(dǎo)培養(yǎng)基、分化與增殖培養(yǎng)基及生根培養(yǎng)基是最適合光葉眼子菜三個不同生長階段——誘導(dǎo)培養(yǎng)、分化與增殖及生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方。
2、一個光葉眼子菜地下莖尖經(jīng)反復(fù)增殖，一年可繁殖上萬株種苗，為水體植被恢復(fù)和水景布置提供大量的種苗。
具體實施例方式
下面結(jié)合實施例詳細說明1、所述的步驟①取長度為1～2厘米的光葉眼子菜地下莖尖作為光葉眼子菜培養(yǎng)物。
2、所述的步驟②將光葉眼子菜培養(yǎng)物用流水沖冼30～50分鐘后，取出用75％的酒精棉球擦洗光葉眼子菜培養(yǎng)物的表面，再用0.1％的氯化汞浸泡消毒5～8分鐘，然后取出用無菌水沖洗4～6次，每次2～4分鐘；3、所述的步驟③將經(jīng)步驟②處理的光葉眼子菜培養(yǎng)物接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)的溫度23～25℃，光照10～12h/d，光照強度1000Lx；培養(yǎng)20～30天，光葉眼子菜培養(yǎng)物開始萌動、生長；誘導(dǎo)培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入0.1毫克KT(6-呋喃氨基嘌呤)、0.1毫克2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸)、30克蔗糖、6克瓊脂；其中每升MS基本培養(yǎng)基含NH4NO3(硝酸銨) 1650毫克KNO3(硝酸鉀) 1900毫克CaCI2·2H2O(二水氯化鈣) 440毫克MgSO4·7H2O(硫酸鎂) 370毫克KH2PO4(磷酸二氫鉀) 170毫克KI(碘化鉀) 0.83毫克H3BO3(硼酸) 6.2毫克MnSO4·4H2O(硫酸錳) 22.3毫克ZnSO4·7H2O(硫酸鋅) 8.6毫克Na2MoO4·2H2O(鉬酸鈉) 0.25毫克CuSO4·5H2O(硫酸銅) 0.025毫克CoCI2·6H2O(氯化鈷) 0.025毫克FeSO4·7H2O(硫酸亞鐵)27.8毫克乙二胺四乙酸二鈉37.3毫克肌醇100毫克煙酸0.5毫克鹽酸吡哆醇 0.5毫克鹽酸硫胺素 0.1毫克甘氨酸 2毫克余者為水；4、所述的步驟④將經(jīng)步驟③培養(yǎng)的光葉眼子菜培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接于分化與增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度25～28℃，光照10h/d，光照強度2000Lx；培養(yǎng)30～40天長出許多光葉眼子菜芽；分化與增殖培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入1毫克BA(6-芐基腺嘌呤)、0.1毫克NAA(萘乙酸)、30克蔗糖、6克瓊脂；5、所述的步驟⑤
若將步驟④的光葉眼子菜芽分株，可作為新的光葉眼子菜培養(yǎng)物，重復(fù)步驟④可得到大量的光葉眼子菜芽；若將步驟④的光葉眼子菜芽轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，培養(yǎng)溫度24～26℃，光照12h/d，光照強度3000Lx；培養(yǎng)25～30天即得到光葉眼子菜苗；生根培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入1升蒸餾水、4毫克BA(6-芐基腺嘌呤)、4毫克IAA(萘乙酸)、40克蔗糖、12克瓊脂。
由此可見，實施本發(fā)明，可在短期內(nèi)得到大量的光葉眼子菜試管苗。
權(quán)利要求
1.一種光葉眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于包括下列步驟①取光葉眼子菜地下莖尖作為培養(yǎng)物；②將培養(yǎng)物消毒處理；③接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)；④轉(zhuǎn)接于分化與增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)；⑤或?qū)⒐馊~眼子菜芽分株，可作為新的光葉眼子菜培養(yǎng)物，重復(fù)步驟④可得到大量的光葉眼子菜芽；或?qū)⒐馊~眼子菜芽轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，即得到光葉眼子菜苗。
2.按權(quán)利要求1所述的一種光葉眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于所述的步驟①是取長度為1～2厘米的光葉眼子菜地下莖尖作為光葉眼子菜培養(yǎng)物。
3.按權(quán)利要求1所述的一種光葉眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于所述的步驟②是將光葉眼子菜培養(yǎng)物用流水沖冼30～50分鐘后，取出用75％的酒精棉球擦洗光葉眼子菜培養(yǎng)物的表面，再用0.1％的氯化汞浸泡消毒5～8分鐘，然后取出用無菌水沖洗4～6次，每次2～4分鐘。
4.按權(quán)利要求1所述的一種光葉眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于所述的步驟③是將經(jīng)步驟②處理的光葉眼子菜培養(yǎng)物接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)的溫度23～25℃，光照10～12h/d，光照強度1000Lx；培養(yǎng)20～30天形成愈傷組織；誘導(dǎo)培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入0.1毫克6-呋喃氨基嘌呤、0.1毫克2，4-二氯苯氧乙酸、30克蔗糖、6克瓊脂；其中每升MS基本培養(yǎng)基含NH4NO31650毫克KNO31900毫克CaCI2·2H2O 440毫克MgSO4·7H2O 370毫克KH2PO4170毫克KI 0.83毫克H3BO36.2毫克MnSO4·4H2O 22.3毫克ZnSO4·7H2O 8.6毫克Na2MoO4·2H2O 0.25毫克CuSO4·5H2O 0.025毫克CoCI2·6H2O 0.025毫克FeSO4·7H2O 27.8毫克乙二胺四乙酸二鈉37.3毫克肌醇100毫克煙酸0.5毫克鹽酸吡哆醇 0.5毫克鹽酸硫胺素 0.1毫克甘氨酸 2毫克余者為水。
5.按權(quán)利要求1所述的一種光葉眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于所述的步驟④是將經(jīng)步驟③培養(yǎng)的光葉眼子菜培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接于分化與增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度25～28℃，光照10h/d，光照強度2000Lx；培養(yǎng)30～40天長出許多光葉眼子菜芽；分化與增殖培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入1毫克6-芐基腺嘌呤、0.1毫克萘乙酸、30克蔗糖、6克瓊脂。
6.按權(quán)利要求1所述的一種光葉眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于所述的步驟⑤是將步驟④的光葉眼子菜芽轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，培養(yǎng)溫度24～26℃，光照12h/d，光照強度3000Lx；培養(yǎng)25～30天即得到光葉眼子菜苗；生根培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入1升蒸餾水、4毫克BA、4毫克IAA、40克蔗糖、12克瓊脂。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種光葉眼子菜快速繁殖的方法，涉及水生植物的組織培養(yǎng)方法。本發(fā)明包括下列步驟①取光葉眼子菜地下莖尖作為培養(yǎng)物；②將培養(yǎng)物清洗處理；③接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)；④轉(zhuǎn)接于分化與增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)；⑤或?qū)⒐馊~眼子菜芽分株，可作為新的光葉眼子菜培養(yǎng)物，重復(fù)步驟④可得到大量的光葉眼子菜芽；或?qū)⒐馊~眼子菜芽轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，即得到光葉眼子菜苗。本發(fā)明具有誘導(dǎo)培養(yǎng)、分化與增殖及生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方，可快速繁殖光葉眼子菜，一棵光葉眼子菜地下莖尖一年可繁殖上萬株種苗，為水體植被恢復(fù)和水景布置提供大量的種苗。
文檔編號A01G7/00GK1930953SQ20061012476
公開日2007年3月21日 申請日期2006年10月13日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月13日
發(fā)明者趙家榮, 劉艷玲, 徐立銘 申請人:中國科學(xué)院武漢植物園