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      一種通過(guò)體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法

      文檔序號(hào):383675閱讀:304來(lái)源:國(guó)知局
      專(zhuān)利名稱(chēng):一種通過(guò)體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及一種通過(guò)體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法。
      背景技術(shù)
      大花蕙蘭(Cymbidium hybridum),有“蘭花之王”稱(chēng)譽(yù),在所有的觀賞洋蘭中,大花蕙蘭的平均市場(chǎng)售價(jià)最高。大花蕙蘭種苗傳統(tǒng)繁殖方式為分株繁殖或用組織培養(yǎng)以芽增方式快繁,繁殖系數(shù)較低,周期較長(zhǎng),尤其是工廠化生產(chǎn)條件下,優(yōu)良品種的快繁有較高的種苗生產(chǎn)成本,較難在較短時(shí)間內(nèi)形成規(guī)模產(chǎn)量。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明提供了一種通過(guò)體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法,它極大地節(jié)約了生產(chǎn)成本,縮短了繁殖周期,解決了大花蕙蘭優(yōu)良品種在較短時(shí)間內(nèi)難以形成規(guī)模產(chǎn)量的問(wèn)題。
      本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案如下一種通過(guò)體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法,它采用如下步驟步驟一,采取正在生長(zhǎng)中的未展葉新芽消毒處理后,在顯微鏡下剝?nèi)∏o尖,在無(wú)菌條件下,將莖尖接種于培養(yǎng)基上,建立無(wú)菌體系;步驟二,切取無(wú)菌體系幼苗的莖段,在適宜的激素組合和適宜的培養(yǎng)基上,誘導(dǎo)體細(xì)胞胚胎的發(fā)生;步驟三,對(duì)體胚進(jìn)行切傷處理后,接種在適宜的培養(yǎng)基上快速大量增殖;步驟四,將得到的足夠數(shù)量的體細(xì)胞胚團(tuán),在適宜的分化培養(yǎng)基上培育成完整的小植株;步驟五,將得到的足夠數(shù)量的小植株培養(yǎng)至狀苗后出瓶移栽;步驟六,對(duì)小苗進(jìn)行正常管理,培育至成品花。
      在繁殖前需要對(duì)快繁的大花蕙蘭品種存檔保存親本圖像資料。步驟一中所述的對(duì)未展葉新芽進(jìn)行消毒的過(guò)程為首先流水沖洗10min后,75%酒精表面滅菌5~8s,無(wú)菌水沖凈,然后在3%次氯酸鈉溶液中浸10min,無(wú)菌水沖洗3~5遍后。步驟一中莖尖接種的培養(yǎng)基為大花蕙蘭組培芽增殖培養(yǎng)基。
      采用如上技術(shù)方案,本發(fā)明利用細(xì)胞全能性的原理,使大花蕙蘭種苗在規(guī)模生產(chǎn)時(shí)直接以體細(xì)胞胚胎發(fā)生的方式進(jìn)行,較短時(shí)間內(nèi)得到大量單細(xì)胞起源的、同步性好的胚性細(xì)胞和兩極性的胚狀體,進(jìn)而得到大量個(gè)體間遺傳背景一致、無(wú)性系變異小的完整植株,從而解決了在較短時(shí)間內(nèi)形成規(guī)模產(chǎn)量的問(wèn)題,極大地節(jié)約了生產(chǎn)成本,縮短了繁殖周期。
      具體實(shí)施例方式
      本發(fā)明為一種通過(guò)體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法,它采用如下步驟步驟一,采取正在生長(zhǎng)中的未展葉新芽,首先用流水沖洗10min后,75%酒精表面滅菌5~8s,無(wú)菌水沖凈,然后在3%次氯酸鈉溶液中浸10min,無(wú)菌水沖洗3~5遍后,在顯微鏡下剝?nèi)∏o尖,在無(wú)菌條件下,將莖尖接種于大花蕙蘭組培芽增殖培養(yǎng)基,建立無(wú)菌體系;步驟二,切取無(wú)菌體系幼苗的莖段,在激素組合和適宜的培養(yǎng)基上,誘導(dǎo)體細(xì)胞胚胎的發(fā)生,選取不同發(fā)育階段的體胚細(xì)胞團(tuán),用鋒利的單面刀片切割成0.2cm×0.2cm×0.2cm的材料塊,材料用FAA(70%)固定,注射器抽氣,正丁醇逐級(jí)脫水,石蠟透入包埋,常規(guī)石蠟切片,切片厚度8-10μm,番紅-固綠對(duì)染,顯微鏡下觀察照相,建立檔案;步驟三,對(duì)體胚進(jìn)行切傷處理后,接種在適宜的培養(yǎng)基上快速大量增殖;步驟四,將得到的足夠數(shù)量的體細(xì)胞胚團(tuán),在適宜的分化培養(yǎng)基上培育成完整的小植株;步驟五,將得到的足夠數(shù)量的小植株培養(yǎng)至狀苗后出瓶移栽;步驟六,對(duì)小苗進(jìn)行正常管理,培育至成品花。
      本發(fā)明在繁殖前選擇需要快繁的大花蕙蘭品種,用數(shù)碼相機(jī)拍照,存檔保存親本圖像資料;
      權(quán)利要求
      1.一種通過(guò)體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法,它采用如下步驟步驟一,采取正在生長(zhǎng)中的未展葉新芽消毒處理后,在顯微鏡下剝?nèi)∏o尖,在無(wú)菌條件下,將莖尖接種于培養(yǎng)基上,建立無(wú)菌體系;步驟二,切取無(wú)菌體系幼苗的莖段,在適宜的激素組合和適宜的培養(yǎng)基上,誘導(dǎo)體細(xì)胞胚胎的發(fā)生;步驟三,對(duì)體胚進(jìn)行切傷處理后,接種在適宜的培養(yǎng)基上快速大量增殖;步驟四,將得到的足夠數(shù)量的體細(xì)胞胚團(tuán),在適宜的分化培養(yǎng)基上培育成完整的小植株;步驟五,將得到的足夠數(shù)量的小植株培養(yǎng)至狀苗后出瓶移栽;步驟六,對(duì)小苗進(jìn)行正常管理,培育至成品花。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法,其特征是在繁殖前需要對(duì)快繁的大花蕙蘭品種存檔保存親本圖像資料。
      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法,其特征是步驟一中所述的對(duì)未展葉新芽進(jìn)行消毒的過(guò)程為首先用流水沖洗10min后,75%酒精表面滅菌5~8s,無(wú)菌水沖凈,然后在3%次氯酸鈉溶液中浸10min,無(wú)菌水沖洗3~5遍后。
      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法,其特征是步驟一中莖尖接種的培養(yǎng)基為大花蕙蘭組培芽增殖培養(yǎng)基。
      全文摘要
      本發(fā)明公開(kāi)了一種通過(guò)體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法,它采用如下步驟步驟一,采取正在生長(zhǎng)中的未展葉新芽消毒處理后,在顯微鏡下剝?nèi)∏o尖,在無(wú)菌條件下,將莖尖接種于培養(yǎng)基上,建立無(wú)菌體系;步驟二,切取無(wú)菌體系幼苗的莖段,在適宜的激素組合和適宜的培養(yǎng)基上,誘導(dǎo)體細(xì)胞胚胎的發(fā)生;步驟三,對(duì)體胚進(jìn)行切傷處理后,接種在適宜的培養(yǎng)基上快速大量增殖;步驟四,將得到的足夠數(shù)量的體細(xì)胞胚團(tuán),在適宜的分化培養(yǎng)基上培育成完整的小植株;步驟五,將得到的足夠數(shù)量的小植株培養(yǎng)至狀苗后出瓶移栽;步驟六,對(duì)小苗進(jìn)行正常管理,培育至成品花。
      文檔編號(hào)A01G1/00GK1994069SQ20061016152
      公開(kāi)日2007年7月11日 申請(qǐng)日期2006年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月27日
      發(fā)明者李 杰 申請(qǐng)人:李 杰
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