專(zhuān)利名稱(chēng)::含有新型淀粉的小麥及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域:
:本發(fā)明涉及一種在小麥的胚乳中不表達(dá)顆粒性淀粉合成酶及淀粉合成酶II型蛋白質(zhì)的小麥。.
背景技術(shù):
淀粉是葡萄糖通過(guò)a-1,4鍵連接形成的直鏈狀的直鏈淀粉和具有通過(guò)a-l,6鍵形成的分支結(jié)構(gòu)的支鏈淀粉這2種成分的混合物。上述成分在各種酶的作用下被合成,在谷物中蓄積在種子的胚乳部分。已知直鏈淀粉通過(guò)顆粒性淀粉合成酶基因編碼的顆粒結(jié)合型淀粉合成酶被合成。另一方面,支鏈淀粉通過(guò)多個(gè)酶的作用被合成。上述酶為(可溶性)淀粉合成酶I型、(可溶性)淀粉合成酶II型、(可溶性)淀粉合成酶III型、分支酶、脫支酶等。另外,淀粉以高度結(jié)晶化顆粒的形式儲(chǔ)藏在植物中。通過(guò)向其中加入水進(jìn)行加熱,使得淀粉顆粒逐漸膨脹,在某一溫度(糊化峰溫度)下,結(jié)晶結(jié)構(gòu)同時(shí)崩潰,成為糊狀(糊化)。之后,通過(guò)冷卻,糊化淀粉的粘性逐漸增大,發(fā)生凝膠化(老化)。上述特性以及直鏈淀粉和支鏈淀粉的含量比因植物種類(lèi)的不同而有較大差異已經(jīng)是公知的。淀粉是植物中的儲(chǔ)藏物質(zhì),同時(shí)對(duì)于動(dòng)物也是重要的能源之一。才聶耳又淀粉時(shí),不僅可以加工含有淀粉的谷粒,將其制成食品加以利用,而且,可以利用上述特性,將其用作增稠劑、保水劑、凝膠形成劑等添加劑。另一方面,在工業(yè)上也從很早開(kāi)始就將其用作糊或膜的原料。另外,對(duì)實(shí)施化學(xué)或物理修飾的加工淀粉等也存在大量的需求。淀粉占據(jù)儲(chǔ)藏器官(種子或塊莖)重量的大部分,淀粉特性變化時(shí),對(duì)利用上述器官得到的上述制品的食感、或加工性等產(chǎn)生較大影響,因此,對(duì)開(kāi)發(fā)具有多種特性的淀粉的需要很高。上述淀粉的特性因植物種類(lèi)的不同而差異較大。但是,同一植物品種內(nèi)的淀粉的多樣性,通常由于直鏈淀粉含量不同而導(dǎo)致物性變化。例如,在小麥中,如果是通常類(lèi)型的淀粉,直鏈淀粉含量大約為30%左右,已知有含量20%左右的低直鏈淀粉系統(tǒng)。低直鏈淀粉類(lèi)小麥淀粉與通常類(lèi)型相比優(yōu)選用作面條等面用粉,商業(yè)上也廣泛栽培。另外,已知水稻或玉米中蓄積直鏈淀粉含量極低的粘性淀粉的類(lèi)型,中村等人(專(zhuān)利文獻(xiàn)l)首次培育了糯小麥(glutinouswheat),與通常類(lèi)型相比具有獨(dú)特的加工性和食感。直鏈淀粉含量作為表示淀粉特性的特征之一,經(jīng)常被討論,但在同一植物品種內(nèi),直鏈淀粉含量之外的多樣性低。因此,來(lái)自小麥的淀粉或含有該淀粉的小麥粉為多樣性低的物質(zhì),由于商品品種單一,所以市場(chǎng)已經(jīng)成熟。因此只要能夠開(kāi)發(fā)出蓄積具有新型特性的淀粉的小麥,就能夠開(kāi)發(fā)出具有與現(xiàn)有不同的特征的改良制品或新型用途,因此人們迫切期待開(kāi)發(fā)出上述小麥。已有報(bào)道指出,作為具有新型特性的小麥的制作例,山守等人開(kāi)發(fā)出淀粉合成酶II型缺失的小麥系統(tǒng),所述淀粉合成酶II型是合成支鏈淀粉支鏈的酶之一(參見(jiàn)非專(zhuān)利文獻(xiàn)l)。也有報(bào)道指出上述小麥中以高含量蓄積直鏈淀粉,但關(guān)于其他特性的研究幾乎沒(méi)有進(jìn)行,也未實(shí)現(xiàn)實(shí)用化。在小麥中,直鏈淀粉通過(guò)顆粒性淀粉合成酶基因編碼的顆粒性淀粉合成酶蛋白質(zhì)合成。作為異源六倍體的小麥染色體中存在同源染色體A、B、D3個(gè)基因組。通常情況下,存在3種顆粒性淀粉合成酶基因,由上述基因表達(dá)顆粒性淀粉合成酶(顆粒性淀粉合成酶-Al、顆粒性淀粉合成酶-Bl、顆粒性淀粉合成酶-Dl)。但是,也存在因基因組DNA上產(chǎn)生的變異而使得蛋白質(zhì)未被表達(dá)的類(lèi)型,其表達(dá)的組合包含野生型共有8種。與此相應(yīng)在直鏈淀粉含量方面存在顯著差異也是已知的,缺失1至2種的小麥系統(tǒng)為低直鏈淀粉系統(tǒng),3種全部缺失的類(lèi)型為糯小麥。作為簡(jiǎn)便地識(shí)別上述缺失類(lèi)型的方法,已經(jīng)確立了直接解析在胚乳中表達(dá)的蛋白質(zhì)的方法和以基因組DNA序列為基礎(chǔ)進(jìn)行調(diào)查的方法(例如參見(jiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)1及非專(zhuān)利文獻(xiàn)2)。另一方面,作為參與支鏈淀粉的支鏈合成的酶之一,已知有淀粉合成酶II型蛋白質(zhì),由存在于7A、7B、7D染色體上的3種淀粉合成酶II型基因編碼(淀粉合成酶II型-Al、淀粉合成酶II型-Bl、淀粉合成酶II型-Dl)。對(duì)于淀粉合成酶II型蛋白質(zhì),本發(fā)明人等也已經(jīng)開(kāi)發(fā)出了識(shí)別缺失類(lèi)型的方法。使用此方法,淀粉合成酶II型蛋白質(zhì)的表達(dá)類(lèi)型也可以分為8類(lèi),但沒(méi)有充分研究各個(gè)類(lèi)型中淀粉特性的多樣性。專(zhuān)利文獻(xiàn)l:特開(kāi)平6-125669號(hào)公才艮非專(zhuān)利文獻(xiàn)l:Yamamoriet.al.,Theor.Appl.Genet(2000)101:21-29非專(zhuān)利文獻(xiàn)2:Nakamuraet.Al.,(2002)Genome45:1150_1156
發(fā)明內(nèi)容鑒于此,本發(fā)明的目的在于通過(guò)控制上述酶的表達(dá),提供蓄積新型特性的淀粉的小麥。為了得到具有新型特性的小麥,進(jìn)行了潛心的研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn),通過(guò)使特定的基因變異,并且控制特定的蛋白質(zhì)的表達(dá),能夠得到生淀粉分解率非常高的小麥及糊化淀粉粘度非常低的小麥。即,本發(fā)明提供一種下述蛋白質(zhì)全部不表達(dá)的小麥(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-Bl蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-Dl蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。本發(fā)明提供一種小麥,所述小麥不具有上述蛋白質(zhì)(1)(6)具有的酶活性的全部。本發(fā)明提供一種小麥,所述小麥中蓄積的淀粉的30重量%以上不形成粒徑lO^im以上的淀#分顆粒。本發(fā)明提供一種小麥,其中,在支鏈淀粉的支鏈中,聚合度70以下的支鏈中,聚合度為35的支鏈的數(shù)量的比例為1.5%以上。本發(fā)明提供一種小麥,生淀粉通過(guò)淀粉酶的分解率為80%以上。另外,本發(fā)明提供一種小麥,其中上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的1個(gè)以上不表達(dá),并且上述蛋白質(zhì)(4)至(6)中的1個(gè)以上不表達(dá)(但不包括只有蛋白質(zhì)(2)、(4)及(5)同時(shí)不表達(dá)的小麥。)。本發(fā)明提供一種小麥,所述小麥不具有上述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的1種以上酶活性,并且不具有上述蛋白質(zhì)(4)至(6)所具有的酶活性中的1種以上酶活性(但,不包括僅不具有蛋白質(zhì)(2)、(4)及(5)所具有的酶活性的小麥)。本發(fā)明提供一種小麥,其中上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的任意2種不表達(dá),并且上述蛋白質(zhì)(4)至(6)中的1種以上不表達(dá)。本發(fā)明提供一種小麥,所述小麥不具有上述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2種酶活性,并且不具有上述蛋白質(zhì)(4)至(6)所具有的酶活性中的l種以上酶活性。本發(fā)明提供一種小麥,其中上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的2種以上不表達(dá),并且上述蛋白質(zhì)(4)至(6)中的2種以上不表達(dá)。本發(fā)明提供一種小麥,所述小麥不具有上述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的2種以上酶活性,并且不具有上述蛋白質(zhì)(4)至(.6)所具有的酶活性中的2種以上酶活性。本發(fā)明提供一種小麥,其中上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的任意2種不表達(dá),并且上述蛋白質(zhì)(4)至(6)全部不表達(dá)。本發(fā)明提供一種小麥,所述小麥不具有上述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2種酶活性,并且不具有上述蛋白質(zhì)(4)至(6)所具有的酶活性中的酶活性的全部。本發(fā)明提供一種小麥,所述小麥中上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的2種以上不表達(dá),并且相比顆粒性淀粉合成酶蛋白質(zhì)表達(dá)的組合與上述小麥相同、蛋白質(zhì)(1)至(3)全部表達(dá)的小麥,淀粉糊化后的粘度較小。本發(fā)明提供一種小麥,所述小麥中上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的2種以上不表達(dá),并且相比顆粒性淀粉合成酶蛋白質(zhì)表達(dá)的組合與所述小麥相同、蛋白質(zhì)(1)至(3)全部表達(dá)的小麥,淀粉糊化后的耐老化性提高。另外,本發(fā)明提供一種特定小麥的篩選方法,其特征在于包括以下步驟,檢測(cè)下述基因變異體(7)至(9)中的1種以上的步驟(7)在序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因中,至少在位置124~412的堿基缺失及/或取代的淀粉合成酶II型-Al基因變異體;(8)在序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因中,至少在位置61456146之間插入1個(gè)以上堿基的淀粉合成酶II型-Bl基因變異體;及(9)在序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因中,至少在位置25902652的堿基缺失的淀粉合成酶II型-Dl基因變異體;及檢測(cè)以下蛋白質(zhì)(4)至(6)中的1種以上的步驟(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-131基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。本發(fā)明提供一種小麥,其在除去胚的成熟種子中含有0.1重量%以上葡萄糖。本發(fā)明提供一種小麥,其在除去胚的成熟種子中含有0.1重量%以上麥芽糖。本發(fā)明提供一種小麥,其在除去胚的成熟種子中含有1重量%以上蔗糖。此處,所謂成熟種子是指"穗頭黃化,麥粒達(dá)到蠟狀的硬度"(轉(zhuǎn)作全書(shū)第1巻麥(農(nóng)文協(xié)編)88頁(yè))時(shí)期的種子,并且沒(méi)有發(fā)芽征兆。本發(fā)明提供一種小麥,在支鏈淀粉的葡萄糖支鏈中,聚合度60以下的支鏈中,聚合度25的支鏈的數(shù)量的比例為3%以上。本發(fā)明提供一種食品,所述食品含有上述小麥或來(lái)自上述小麥的淀粉。本發(fā)明提供一種工業(yè)制品,所述工業(yè)制品含有上述小麥或來(lái)自上述小麥的淀粉。本發(fā)明提供一種制品,所述制品利用上述小麥或來(lái)自上述小麥的淀粉加工而成。具體實(shí)施方式本發(fā)明的小麥不表達(dá)下述的全部蛋白質(zhì)(l)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-B1蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-Dl蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。作為序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì)(1)的例子,可以舉出序列號(hào)2記載的序列表示的淀粉合成酶II型_Al蛋白質(zhì)或與序列號(hào)2記載的序列的同源性為90。/。以上的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì)。此處,使用Genetyx(Genetyx社)進(jìn)行同源性計(jì)算。作為序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-Bl蛋白質(zhì)(2)的例子,可以舉出序列號(hào)4記載的序列表示的淀粉合成酶II型-81蛋白質(zhì)或與序列號(hào)4記載的序列的同源性為90%以上的淀粉合成酶II型-Bl蛋白質(zhì)。作為序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-Dl蛋白質(zhì)(3)的例子,可以舉出序列號(hào)6記載的序列表示的淀粉合成酶II型-Dl蛋白質(zhì)或與序列號(hào)6記載的序列的同源性為卯%以上的淀粉合成酶II型-Dl蛋白質(zhì)。作為由序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì)(4)的例子,可以舉出序列號(hào)8記載的序列表示的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì)或與序列號(hào)8記載的序列的同源性為90%以上的顆粒性淀粉合成酶-A1蛋白質(zhì)。作為由序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-B1基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì)(5)的例子,可以舉出序列號(hào)10記載的序列表示的顆粒性淀粉合成酶-B1蛋白質(zhì)或與序列號(hào)10記載的序列的同源性為90%以上的顆粒性淀粉合成酶-B1蛋白質(zhì)。作為由序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-D1基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)(6)的例子,可以舉出序列號(hào)12記載的序列表示的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)或與序列號(hào)12記載的序列的同源性為90%以上的顆粒性淀粉合成酶-D1蛋白質(zhì)。通過(guò)檢測(cè)編碼上述蛋白質(zhì)(1)~(6)的基因的有無(wú)及變異,能夠確認(rèn)上述蛋白質(zhì)(1)(6)未表達(dá)。作為確認(rèn)上述蛋白質(zhì)(1)(6)未表達(dá)的方法,只要是能夠檢測(cè)基因序列的變異的方法即可,可以為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的任何方法,例如可以舉出PCR法等。對(duì)PCR法沒(méi)有特別限制,可以使用公知的各種改良方法,如果舉例的話,可以舉出除一對(duì)引物、模板(被檢)DNA之外還混合Tris-HC1、KC1、MgCl2、各dNTP、TaqDNA聚合酶等試劑類(lèi)而形成的PCR反應(yīng)液。PCR的1次循環(huán)由熱變性、引物的退火、DNA聚合酶作用下的DNA合成反應(yīng)3個(gè)步驟構(gòu)成。各步驟由于需要各不相同的反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間,所以要根據(jù)需要增幅的DNA區(qū)域的堿基序列和其長(zhǎng)度,設(shè)定適當(dāng)?shù)姆秶?。用于上述操作的熱循環(huán)儀(thermalcycler)在市場(chǎng)上有售。如果對(duì)TaqDNA聚合酶、MgCl2濃度或反應(yīng)循環(huán)數(shù)等優(yōu)選的PCR條件進(jìn)行研究、或使用嵌套式PCR(nestedPCR),則能夠進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度。PCR反應(yīng)物可以使用免疫反應(yīng)進(jìn)行鑒定,也可以釆用任意方法進(jìn)行鑒定,使其進(jìn)行電泳,必要時(shí)使用陽(yáng)性對(duì)照或陰性對(duì)照,電泳像中能夠確認(rèn)清楚的條帶時(shí),就可以確認(rèn)在被檢物中存在檢測(cè)物質(zhì)(顆粒性淀粉合成酶基因及淀粉合成酶II型基因變異的小麥)。作為PCR中使用的引物,只要能夠檢測(cè)出編碼上述蛋白質(zhì)(1)~(6)的基因的變異即可,可以使用任意引物。作為淀粉合成酶II型基因變異體,本發(fā)明人等發(fā)現(xiàn)了(7)在序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因中,至少位置124412的堿基缺失及/或取代的淀粉合成酶II型-Al基因變異體(序列號(hào)27);(8)在序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因中,至少在位置61456146之間插入1個(gè)以上堿基的淀粉合成酶II型-Bl基因變異體(序列號(hào)28);及(9)在序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因中,至少位置2590~2652的堿基缺失的淀粉合成酶II型-Dl基因變異體(序列號(hào)29)。因此,作為能夠檢測(cè)序列號(hào)i的淀粉合成酶n型-ai基因變異的引物,例如可以舉出(i)其3'末端在序列號(hào)i的淀粉合成酶n型-ai基因區(qū)域的位置124的上游進(jìn)行雜交的引物、和其5'末端在序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因區(qū)域的位置412的下游進(jìn)行雜交的引物的組合;(ii)其3'末端在序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因區(qū)域的位置412的下游跨越缺失部分124-412進(jìn)行雜交的引物、和其5'末端在序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因區(qū)—域的位置412的下游進(jìn)行雜交的引物的組合;及(iii)其3'末端在序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因區(qū)域的位置124的上游進(jìn)行雜交的引物、和其5'末端在序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因區(qū)域的位置124的上游跨越缺失部分124412進(jìn)行雜交的引物的組合。并且,上迷(i)、(ii)、(iii)引物優(yōu)選設(shè)計(jì)成能夠特異性地檢出淀粉合成酶II型-Al基因區(qū)域。具體而言,是設(shè)計(jì)成與來(lái)自其他基因組的淀粉合成酶II型基因區(qū)域(淀粉合成酶II型-Bl、淀粉合成酶II型-Dl)完全不匹配的區(qū)域的引物。具體而言,可以舉出含有序列號(hào)13或14中任一個(gè)所記載的序列的引物、和含有序列號(hào)15至17中任一個(gè)所記載的序列的引物的組合。另外,作為能夠檢測(cè)出序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因的變異的引物,例如可以舉出(i)其3'末端在序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-B1基因區(qū)域的位置6145的上游進(jìn)行雜交的引物、和其5'末端在序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-B1基因區(qū)域的位置6146的下游進(jìn)行雜交的引物的組合;(ii)其3'末端與在序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因區(qū)域的位置61456146之間插入的石威基進(jìn)行雜交的引物、和其5'末端在序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因區(qū)域的位置6146的下游進(jìn)行雜交的引物的組合;(iii)其3'末端在序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因區(qū)域的位置6145的上游進(jìn)行雜交的引物、和其5'末端與在序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因區(qū)域的位置61456146之間插入的堿基進(jìn)行雜交的引物的組合;及(iv)其3'末端與在序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因區(qū)域的位置61456146之間插入的堿基進(jìn)行雜交的引物、和其5'末端在序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因區(qū)域的位置61456146之間插入的堿基進(jìn)行雜交的引物的組合。并且,上述(i)、(ii)、(iii)、(iv)引物優(yōu)選設(shè)計(jì)成能夠特異性地檢出淀粉合成酶II型-Bl基因區(qū)域。具體而言,是設(shè)計(jì)成與來(lái)自其他基因組的淀粉合成酶II型基因區(qū)域(淀粉合成酶II型-ai、淀粉合成酶n型-Di)完全不匹配的區(qū)域的引物。具體而言,可以舉出含有序列號(hào)18或20中任一個(gè)所記載的序列的引物、和含有序列號(hào)21至23中任一個(gè)所記載的序列的引物的組合。另夕卜,作為能夠檢測(cè)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因變異的引物,例如可以舉出(i)其3'末端在序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因區(qū)域的位置2590的上游進(jìn)行雜交的引物、和其5'末端在序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因區(qū)域的位置2652的下游進(jìn)行雜交的引物的組合;(ii)其3'末端在序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-D1基因區(qū)域的位置2652下游;夸越缺失部分25902652進(jìn)行雜交的引物、和其5'末端在序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因區(qū)域的位置2652的下游進(jìn)行雜交的引物的組合;(iii)其3'末端在序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因區(qū)域的位置2590的上游進(jìn)行雜交的引物、和其5'末端在序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因區(qū)域的位置2590的上游跨越缺失部分25902652進(jìn)行雜交的引物的組合;并且,上述(i)、(ii)、(iii)引物優(yōu)選設(shè)計(jì)成能夠特異性地檢測(cè)淀粉合成酶II型-Dl基因區(qū)域。具體而言,是設(shè)計(jì)成與來(lái)自其他基因組的淀粉合成酶n型基因區(qū)域(淀粉合成酶n型-Al、淀粉合成酶II型-Bl)完全不匹配的區(qū)域的引物。具體而言,可以舉出含有序列號(hào)24或25中任一個(gè)所記載的序列的引物、和含有序列號(hào)26中的任一個(gè)所記載的序列的引物的組合。另外,作為檢測(cè)出編碼上述蛋白質(zhì)(4)(6)的基因的變異的方法,可以4吏用Nakamuraet.A1.,(2002)Genome45:1150—1156記載的方法。并且,作為檢測(cè)編碼上述蛋白質(zhì)(1)(6)的基因的變異的方法,除PCR法之外,還可以舉出LAMP法、NASBA法、LCR法、SDA法、RCR法、TMA法、通過(guò)RT-PCR進(jìn)行的mRNA的定性或定量法等。只要為能夠檢測(cè)該基因序列的變異的方法即可,可以使用任意方法,作為一例,可以舉出LAMP法,以Notomi等人的報(bào)告(Notomiet.al.,NucleicAcidsResearch(2000).28,No.12,e63)中給出的方法為參考,設(shè)計(jì)引物。此時(shí),希望檢測(cè)出的序列是(1)的序列時(shí),可以將包括序列號(hào)13的位置124至412的區(qū)域作為檢測(cè)區(qū)域,設(shè)計(jì)引物。另夕卜,希望檢測(cè)的序列是(2)的序列時(shí),可以將序列號(hào)14的位置6145至6146的序列的一部分作為檢測(cè)區(qū)域,設(shè)計(jì)引物。另外,希望檢測(cè)的序列是區(qū)域,設(shè)計(jì)引物。除了設(shè)計(jì)的引物之外,還加入反應(yīng)必需的模板DNA溶液、dNTP、BstDNA聚合酶、及其他反應(yīng)所必需的試劑,在65。C下進(jìn)行反應(yīng),采用適當(dāng)?shù)姆椒z測(cè)產(chǎn)物,由此能夠進(jìn)行淀粉合成酶II型基因變異小麥的檢測(cè)、或淀粉合成酶II型基因類(lèi)型小麥的判定。即使采用其他的方法,也可同樣地按照操作手冊(cè)來(lái)制備檢測(cè)系統(tǒng),進(jìn)行相同的檢測(cè)、判定。另外,作為確.認(rèn)上述蛋白質(zhì)(1)~(3)未表達(dá)的方法,可以舉出山守等的報(bào)告(Yamamoriet.al.,Theor.Appl.Genet(2000)101:21-29)中記載的方法。作為確認(rèn)上述蛋白質(zhì)(4)~(6)不表達(dá)的方法,也可以使用特開(kāi)平6-125669號(hào)中記載的方法。上述本發(fā)明的小麥中,蓄積的淀粉的30重量%以上不形成粒徑為10pm以上的淀粉顆粒。使用電子顯^1鏡或光學(xué)顯微鏡,觀察小麥種子胚乳的剖面,計(jì)算一定面積內(nèi)lOiam以上粒子占一定面積的比例,由此,可以計(jì)算出形成粒徑為10[mi以上的淀4分顆粒比例?;蛘?,通過(guò)在淀粉精制過(guò)程中,分離不形成淀粉顆粒的級(jí)分和淀粉顆粒級(jí)分,測(cè)定其干燥重量,進(jìn)行計(jì)算。通過(guò)降低形成粒徑為10pm以上的淀粉顆粒的比例,可以使其容易被淀粉酶、支鏈淀粉酶等淀粉分解酶消化,成為易消化性淀粉。使用上述淀粉時(shí),能夠提供易于被消化、容易被體內(nèi)吸收的食品。另外,由于淀粉形成淀粉顆粒之類(lèi)高級(jí)結(jié)構(gòu)(結(jié)晶化),所以即使在沸水中加熱,也不完全糊化,但為本發(fā)明類(lèi)型的淀粉時(shí),由于不形成高級(jí)結(jié)構(gòu),因此,能夠在較短時(shí)間、較低溫度下實(shí)現(xiàn)糊化,是適合在更低溫度下、短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行處理的材料。如果能夠在低溫、短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行加熱處理,則具有能夠顯著地降低加熱對(duì)其他材料的影響、或者實(shí)現(xiàn)節(jié)能等優(yōu)點(diǎn)。并且,由于不形成粒子,所以?xún)?yōu)選作為膜等的原材料使用。'并且,上述本發(fā)明的小麥,在支鏈淀粉支鏈中,聚合度70以下的鏈中聚合度35的葡萄糖支鏈的數(shù)量的比例為1.5%以上。優(yōu)選為3%以上。另外,上述本發(fā)明的小麥,聚合度60以下的鏈中,聚合度25的葡萄糖支鏈的數(shù)量的比例為3%以上。優(yōu)選為5%以上。通過(guò)具有上述鏈長(zhǎng)分布,能夠使淀粉的結(jié)構(gòu)發(fā)生較大變化。實(shí)際上,本發(fā)明通過(guò)制成上述類(lèi)型的淀粉,能夠不形成淀粉顆粒,并且使結(jié)構(gòu)上的特性較大地改變。實(shí)際上,不能形成淀粉顆粒的糖成分作為由平滑連續(xù)層構(gòu)成的基底物質(zhì)蓄積,在淀粉精制過(guò)程中,形成凝膠樣層等,對(duì)物性給與多方面影響。在通常淀粉精制過(guò)程中幾乎未見(jiàn)凝膠樣物質(zhì)蓄積,可以將其用作例如膜之類(lèi)工業(yè)制品的原料。另外,由于上述凝膠樣物質(zhì)保水力非常高,所以也能夠期待用作保水劑等。或者,也可以用作表面的涂布劑。需要說(shuō)明的是,支鏈淀粉是由a-1,4鍵連接成直鏈的葡萄糖鏈通過(guò)用a-1,6鍵形成分支后鍵合而構(gòu)成的巨大分子,支鏈淀粉分子之間,其分子量、分支的數(shù)量、長(zhǎng)度均呈現(xiàn)多樣性。所以,本發(fā)明所示的支鏈淀粉的葡萄糖支鏈的鏈長(zhǎng)分布,表示蓄積在種子中的所有支鏈淀粉的平均分布。并且,上述本發(fā)明的小麥的生淀教、在淀粉酶作用F的分解率為80%以上。優(yōu)選為90%以上。熱作用下不糊化的生淀粉狀態(tài)下的分解性提高,使上述淀粉即使不進(jìn)行加熱處理也能高效且容易地被消化吸收?;蛘咭部梢杂米魃锓纸庑运芰系脑稀A硗?,本發(fā)明的其他小麥不具有下述蛋白質(zhì)所具有的酶活性的全部,即(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-B1基因編碼的淀粉合成酶II型-Bl蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶工I型-Dl蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。如上所述,上述(1)(3)的蛋白質(zhì)通常參與支鏈淀粉的支鏈(通過(guò)a-1,6鍵形成分支的葡萄糖聚合物)的合成、特別是參與聚合度為中等程度的鏈(聚合度為1525左右的鏈)的合成。因此,一般認(rèn)為該蛋白質(zhì)的酶活性為識(shí)別基質(zhì)ADP-葡萄糖和支鏈淀粉,并與其結(jié)合,使葡萄糖從ADP-葡萄糖鍵合到支鏈淀粉的支鏈的末端。另一方面,認(rèn)為上述(4)(6)的蛋白質(zhì)基本上參與直鏈淀粉的合成。因此,一般認(rèn)為酶活性為識(shí)別基質(zhì)ADP-葡萄糖和直鏈淀粉,并與其結(jié)合,使葡萄糖從ADP-葡萄糖附加到延長(zhǎng)中的直鏈淀粉的末二山順。為了確認(rèn)上述(1)(6)蛋白質(zhì)的酶活性,可以使用常用的任何方法。舉出一例,從種子中精制上述酶,加入為基質(zhì)的[U-14C]ADP-葡萄糖或糖原或者支鏈淀粉,再加入用于調(diào)整反應(yīng)條件的成分,進(jìn)行反應(yīng)。一定時(shí)間的反應(yīng)完成時(shí),通過(guò)加熱至100度使酶失活,使用陰離子交換柱除去未反應(yīng)的[U-14C]ADP-葡萄糖后,使用液態(tài)閃爍計(jì)數(shù)管計(jì)測(cè)糖原或支鏈淀粉中含有的[U-14C]ADP-葡萄糖的量。作為其他方法,也可以使用下述方法,即,將從種子中粗精制得到的蛋白質(zhì)級(jí)分或淀粉級(jí)分(蛋白質(zhì)含量5-10(ig)在從常用的SDS-PAGE中除去SDS和|3-巰基乙醇的條件下進(jìn)行丙烯酰胺凝膠電泳。將分離結(jié)束的凝膠浸漬在由50mM甘氨酸、1OOmM硫酸銨、5nMj3-巰基乙醇、5mMMgCl2、0.5mg/ml牛血清白蛋白、0.01mg/ml糖原或直鏈淀粉、4mMADP-葡萄糖構(gòu)成的溶液中,放置4小時(shí)至12小時(shí)。之后,加入由0.2%碘、0.02%碘化鉀構(gòu)成的溶液,進(jìn)行染色,判定酶活性。另外,也可以使用如上所述確認(rèn)蛋白質(zhì)自身表達(dá)的方法、或識(shí)別使酶失活的基因組DNA上的變異的方法。在(1)至(3)的蛋白質(zhì)中,所謂使酶失活的基因組DNA上的變異,可以舉出在為酶基質(zhì)的ADP-葡萄糖或支鏈淀粉的識(shí)別、鍵合部位上的變異、或在將葡萄糖轉(zhuǎn)移至支鏈淀粉非還原末端的活性中心部位的變異、或存在于N末端的信號(hào)序列部位的變異等。在(4)(6)的蛋白質(zhì)中,所謂使酶失活的基因組DNA的變異,可以舉出為酶基質(zhì)的ADP-葡萄糖或直鏈淀粉的識(shí)別、鍵合部位的變異、或在將葡萄糖轉(zhuǎn)移至直鏈淀粉非還原末端的活性中心部位的變異等。特別是,在通過(guò)放射線照射或給與變異原性化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行變異誘導(dǎo)處理時(shí),可能產(chǎn)生伴有僅1個(gè)殘基氨基酸fU戈的變異。上述情況下通過(guò)SDS-PAGE確認(rèn)時(shí),通常難于識(shí)別,因此適用確認(rèn)DNA上的變異的方法。確認(rèn)DNA序列上的變異的方法如上所述。另外,本發(fā)明的其他小麥不表達(dá)上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的1個(gè)以上,并且不表達(dá)上述蛋白質(zhì)(4)至(5)中的1個(gè)以上(但是不包括只有蛋白質(zhì)(2)、(4)及(5)同時(shí)不表達(dá)的小麥。)。上述小麥,與現(xiàn)有小麥中蓄積的淀粉相比較,蓄積了被賦予新型特性的淀粉。作為新型特性,例如可以舉出糊化液的粘度、糊化峰溫度、耐老化性、凍結(jié)融解耐性、消化酶的分解性等的改變。特別是,在本發(fā)明中,發(fā)現(xiàn)通過(guò)缺失1個(gè)以上淀粉合成酶II型蛋白質(zhì),與不缺失類(lèi)型相比糊化度升高,糊化液的粘度降低,老化度降低。另外發(fā)現(xiàn),通過(guò)同時(shí)使1個(gè)以上顆粒性淀粉合成酶缺失,能夠顯著地改變上述效果。上述小麥中蓄積的淀粉,在糊化后冷卻的時(shí)間點(diǎn),可蓄積與現(xiàn)有相比糊化度高的淀粉或粘度低的淀粉、或耐老化性提高的淀粉。特別是,上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的1個(gè)不表達(dá),且上述蛋白質(zhì)(4)至(6)中的2個(gè)不表達(dá)的小麥,與(1)至(3)全部表達(dá)、(4)至(6)中的2個(gè)不表達(dá)的小麥的淀粉相比,糊化后的耐老化性、凍結(jié)融解耐性顯著改善?;蛘?,上述(1)至(3)蛋白質(zhì)中的2個(gè)不表達(dá)、且上迷蛋白質(zhì)(4)至(6)全部不表達(dá)的小麥,糊化液的粘度非常低。為了確認(rèn)上述小麥,可以使用檢測(cè)編碼上述蛋白質(zhì)(1)至(6)的基因的有無(wú)及變異,進(jìn)行確認(rèn)的方法,也可以使用確認(rèn)蛋白質(zhì)自身表達(dá)的方法?;蛘咭部梢允褂脤⒂尚蛄刑?hào)1至11記載的基因序列表達(dá)的RNA進(jìn)行精制、定性或定量的方法。優(yōu)選上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的任意2個(gè)不表達(dá),并且上述蛋白質(zhì)(4)至(6)中的1個(gè)以上不表達(dá)的小麥。上述小麥,特別是糊化后的粘度與現(xiàn)有小麥相比顯著降低。此特征,在(1)至(3)蛋白質(zhì)中的2個(gè)不表達(dá)、且上述蛋白質(zhì)(4)至(6)全部不表達(dá)的小麥中特別顯著。另外,優(yōu)選上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的2個(gè)以上不表達(dá),并且上述蛋白質(zhì)(4)至(6)中的2個(gè)以上不表達(dá)的小麥。上述小麥,特別是糊化后的耐老化性與現(xiàn)有小麥相比有所提高。此特征,在上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的任意2個(gè)不表達(dá)、且上述蛋白質(zhì)(4)至(6)全部不表達(dá)的小麥中特別顯著。本發(fā)明的其他小麥不具有上述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的1種以上酶活性,并且不具有上述蛋白質(zhì)(4)至(6)所具有的酶活性中的1種以上酶活性(但,不包含只不顯示蛋白質(zhì)(2)、(4)及(5)所具有的酶活性的小麥。)。較優(yōu)選不具有上述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的2種以上酶活性,并且不具有上述蛋白質(zhì)(4)至(6)所具有的酶活性中的2種以上酶活性的小麥。進(jìn)一步優(yōu)選不具有上述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2種酶活性,并且不具有上述蛋白質(zhì)(4)至(6)所具有的酶活性中的1個(gè)以上酶活性的小麥。更優(yōu)選不具有上述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2種酶活性,并且不具有上述蛋白質(zhì)(4)至(6)所具有的酶活性的全部的小麥。另外,通過(guò)使小麥的上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的2個(gè)以上不表達(dá),與顆粒性淀粉合成酶蛋白質(zhì)的表達(dá)組合與上述小麥相同、蛋白質(zhì)(1)至(3)全部表達(dá)的小麥相比較,使淀粉糊化后的粘度降低。另外,通過(guò)使小麥的上述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的2個(gè)以上不表達(dá),與顆粒性淀粉合成酶蛋白質(zhì)的表達(dá)組合與上述小麥相同、蛋白質(zhì)(1)至(3)全部表達(dá)的小麥相比較,使淀粉糊化后的耐老化性提高。由此可知,可以通過(guò)使用下述步驟來(lái)篩選特定的小麥,即檢測(cè)上述基因變異體(7)至(9)中的1個(gè)以上的步驟、及檢測(cè)上述蛋白質(zhì)(4)至(6)中的l個(gè)以上的步驟。此處,作為特定小麥,可以舉出生淀粉的分解率為80%以上的小麥,即完全不具有上述(1)至(6)蛋白質(zhì)的小麥?;蛘?,可以舉出糊化液的粘度非常低的小麥,即上述(1)至(3)蛋白質(zhì)中的(1)及(2)未表達(dá)、且(4)至(6)蛋白質(zhì)均未表達(dá)的小麥。本發(fā)明的小麥或來(lái)自本發(fā)明小麥的淀粉可以用于食品中。作為上述食品,可以舉出使用普通小麥粉(包含全粒粉)或淀粉的食品等。例如可以舉出用作焙烤食品(Bakeryfoods)、面條類(lèi)、糕點(diǎn)類(lèi)、油炸食品、燒烤食品、豆沙點(diǎn)心、漢堡等的材料。由該小麥得到的面粉或淀粉可以直接使用,也可以與其他粉類(lèi)混合使用。另外,也可以用作酒精飲料等的發(fā)酵原料、用于氨基酸或多糖等的微生物生產(chǎn)的原料。作為利用本發(fā)明的小麥制作的焙烤食品,例如可以舉出主食面包、法式面包、面包巻、帶餡面包等面包類(lèi),酵母油炸甜圏餅等油炸面包類(lèi)、饅頭類(lèi)、披薩餅等意大利餡餅類(lèi)、松糕等蛋糕類(lèi),小甜餅、餅干等烘焙食品類(lèi)等。制作上述焙烤食品時(shí)使用的來(lái)自本發(fā)明小麥的面粉,可以使用經(jīng)過(guò)通常的制粉步驟除去麥麩等成分的面粉,也可以使用未分開(kāi)的全粒粉。作為用于制作上述焙烤食品的焙烤食品用面粉,可以直接使用從本發(fā)明小麥得到的上述面粉,優(yōu)選與其他面粉混合使用。所謂其他面粉,可以舉出強(qiáng)力粉、中力粉、薄力粉等小麥粉,或者不分類(lèi)的來(lái)自小麥的面粉、黑麥粉、米粉、淀粉等。本發(fā)明的焙烤食品可以如下制作,即,在由本發(fā)明的小麥得到的面粉或與其他面粉的混合面粉中配合酵母、碳酸氫鈉等化學(xué)膨脹劑、酵母食品、食鹽、糖類(lèi)、油脂類(lèi)、雞蛋、乳制品、水等通常焙烤食品制作中使用的各種副原料,將所得物混煉做成生面團(tuán),通過(guò)發(fā)酵等使其膨化,或直接焙烤或油炸制作焙烤食品。制作本發(fā)明的焙烤食品時(shí),可以使用通常采用的生產(chǎn)方法、制作裝置、凍結(jié)方法、凍結(jié)裝置中的任意一種。另外,必要時(shí)可以加入維生素、礦物營(yíng)養(yǎng)素等添加劑。如上所述制作的含有來(lái)自本發(fā)明小麥的面粉的焙烤食品,甘甜、風(fēng)味獨(dú)特、香氣十足、有咬勁兒。上述特征在只使用來(lái)自本發(fā)明小麥的面粉時(shí)也能獲得,可以與其他面粉混合使用獲得該特征,優(yōu)選含有0.160質(zhì)量份、更優(yōu)選含有0.550質(zhì)量份來(lái)自本發(fā)明小麥的面粉。.另外,本發(fā)明的小麥或來(lái)自本發(fā)明小麥的淀粉可以用于工業(yè)制品。作為上述工業(yè)制品,可以舉出粘度穩(wěn)定劑、保水劑、膠體穩(wěn)定劑、糊、粘合劑等。另外,本發(fā)明的小麥或來(lái)自本發(fā)明小麥的淀粉可以加工利用。例如可以舉出通過(guò)酸或堿、或者酶處理生成糊精,將此糊精用于粘合劑、纖維、膜等的方法。另外,該糊精中的水溶性級(jí)分可以作為難消化性糊精用作整腸作用等優(yōu)異的功能性食品?;蛘呤蛊渑c各種無(wú)機(jī)、有機(jī)酸反應(yīng),形成淀粉酯加以利用。特別是與磷酸反應(yīng)得到的磷酸淀粉作為增稠劑是有用的。另外,蛋白質(zhì)(1)(6)都不表達(dá)的小麥,與普通小麥相比,糖含量增加。具體而言,除去胚的成熟種子中含有0.1重量%以上的葡萄糖。優(yōu)選除去胚的成熟種子中含有0.3重量%以上的葡萄糖。更優(yōu)選除去胚的成熟種子中^^有0.5重量%以上的葡萄糖。另外,除去胚的成熟種子中含有0.1重量%以上的麥芽糖。優(yōu)選除去胚的成熟種子中含有0.3重量%以上的麥芽糖。更優(yōu)選除去胚的成熟種子中含有0.5重量%以上的麥芽糖。另外,除去胚的成熟種子中含有1重量%以上的蔗糖。優(yōu)選除去胚的成熟種子中含有3重量%以上的蔗糖。更優(yōu)選除去胚的成熟種子中含有5重量%以上的蔗糖。作為種子中葡萄糖、麥芽糖及蔗糖含量的測(cè)定方法,只要為用于從種子中提取低分子糖進(jìn)行分析的方法即可,可以使用任意方法。作為從種子中回收低分子糖的方法,可以將種子粉碎后,用水提取、用80%乙醇提取、用DMSO提取等,但操作中為了明確地區(qū)分淀粉或多糖與在淀粉酶等酶的作用下夯解生成的糖,優(yōu)選在淀粉酶不發(fā)揮作用的條件下進(jìn)行提取、測(cè)定。另外,本發(fā)明為小麥胚乳部分以高含量蓄積糖的小麥,所以其測(cè)定中優(yōu)選使用從種子顆粒中除去胚的部分作為樣品。作為提取的樣品所含的低分子糖的鑒定、定量的方法,可以使用下述方法中的任意一種,即,使用毛細(xì)管電泳的方法、或者使用HPLC的方法、利用酶、化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行的測(cè)定方法等。本發(fā)明的小麥中還包括下述小麥,即,通過(guò)使上述小麥與其他品種雜交得到的Fl子代進(jìn)一步進(jìn)行自身受精或者與一方的親代系統(tǒng)進(jìn)行回交,導(dǎo)入其它有用的形質(zhì)而得到的小麥。例如,可以使通常所知的耐病性高的品種和上述小麥雜交,所得的Fl子代與親代系統(tǒng)中耐病性高的品種進(jìn)行回交。對(duì)于所得子代的個(gè)體,根據(jù)上述方法,篩選出顆粒性淀粉合成酶和淀粉合成酶II型的各蛋白質(zhì)以所期望的組合表達(dá)的個(gè)體。對(duì)于篩選出的個(gè)體,通過(guò)進(jìn)一步反復(fù)回交和篩選,能夠賦予耐病性高的品種所期望的淀粉特性。或者,以進(jìn)行回交的親代系統(tǒng)作為上述小麥,使用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行篩選,由此也能夠賦予上述小麥耐病性。作為其它有用形質(zhì),可以舉出面筋特性、耐倒伏性、秋播性、春播性、多收性、耐低溫性、耐穗發(fā)芽性、制粉適應(yīng)性等,但并不限定于此。實(shí)施例1、樣品本發(fā)明開(kāi)發(fā)的小麥系統(tǒng)的顆粒性淀粉合成酶及淀粉合成酶n型蛋白質(zhì)的類(lèi)型,與作為比較對(duì)照的標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)(類(lèi)型(i))或者親代系統(tǒng)(類(lèi)型(ii)及類(lèi)型(iii))一同示于表l。本發(fā)明中作為親代系統(tǒng)使用的小麥系統(tǒng)是將東北農(nóng)業(yè)研究中心培育的小麥品種乙女糯(顆粒性淀粉合成酶缺失型、淀粉合成酶n型蛋白質(zhì)為野生型)和外來(lái)品種雜交,用其F5子代的種子篩選顆粒性淀粉合成酶缺失的系統(tǒng)(類(lèi)型(ii))。另一方的親代泉統(tǒng),使用該所培育的淀粉合成酶n型蛋白質(zhì)缺失系統(tǒng)。此系統(tǒng)順次雜交作為通常所知系統(tǒng)的關(guān)東79號(hào)(淀粉合成酶II型-B1缺失型)和作為外國(guó)品種的Turkey116(淀粉合成酶II型-Dl缺失型)、Chosen57(淀粉合成酶II型-Al缺失型)3品種,篩選淀粉合成酶II型完全缺失的系統(tǒng)(類(lèi)型(iii))。小麥的栽培、雜交按照規(guī)定方法進(jìn)行。雜交為親代系統(tǒng)的2品種,得到F1子代。使其自身受精得到F2或者得到之后的子代,通過(guò)二維電泳確認(rèn)顆粒性淀粉合成酶的有無(wú),并通過(guò)PCR法分辨淀粉合成酶II型基因的基因型(野生型或變異型),由此從其中篩選出所期望的小麥系統(tǒng)。作為比較對(duì)照使用的小麥系統(tǒng),使用作為一般栽培流通的品種的農(nóng)林61號(hào)(類(lèi)型(i))。[表l]表l通過(guò)雜交獲得的各種子系統(tǒng)的基因類(lèi)型顆粒性淀粉合成酶-Al顆粒性淀粉合成酶-B1顆粒性淀粉合成酶-D1淀粉合成酶n型-Al淀粉合成酶n型-Bl淀粉合成酶II型-Dl備注(i)o〇〇〇〇〇野生型(ii)XXX〇〇〇(iv)~(x)的親代系統(tǒng)(m)〇〇〇XXX(iv)~(x)的親代系統(tǒng)(iv)XX〇〇〇〇(v)X〇X〇X〇(vi)XXXXX〇(vii)XXXXX(viii)X〇X〇xX(ix)XX〇〇XX(X)XXX〇XX顆粒性淀粉合成酶的野生型、缺失型通過(guò)淀粉鍵合蛋白質(zhì)的二維電'泳進(jìn)4亍確^人。方法ip下所示。從成熟種子中除去胚,粉碎后通過(guò)60pm的篩子得到粉末,備用。以每20mg粉lmL的比例加入冷卻的SDS緩沖液(0.1MTris-HC1(pH6.8)、2.3%SDS、5%卩-巰基乙醇、10%甘油),均化2分鐘。過(guò)濾此懸濁液后,將濾液以15000rpm離心5分鐘,除去上清液,再加入SDS緩沖液使其懸法,進(jìn)行離心。將此操作重復(fù)3次后,加入蒸餾水,將相同的操作重復(fù)2次,除去上清液,將回收的淀粉層自然千燥,制成精制淀;盼。為通常類(lèi)型的淀粉時(shí),在上述淀粉的精制中,加入SDS緩沖液,過(guò)濾后,在離心階4殳大部分淀:粉沉淀,由此形成淀4分顆粒層,與上層的水層明顯分開(kāi)。本發(fā)明的類(lèi)型(vii)小麥在此階段認(rèn)為是淀粉顆層的部分僅極少量沉淀,在其上層大量地蓄積了由白濁不定形的凝膠樣物質(zhì)構(gòu)成的層,并且在其上層形成水層。除去水層后,混合為糖成分的此凝膠樣層和最下層的淀粉顆粒層,之后的操作與上述精制方法相同。每10mg此精制淀粉,加入300^1的Lysis緩沖液(8MUra、2%NonidetP—40、2%ampholine(pH3.5—10)、5%(3—5乾基乙醇、5%聚乙烯吡咯烷酮),在100度的熱水中加熱處理2分鐘。用冰冷卻10分鐘后,將淀^分凝膠化液在4度下以15000轉(zhuǎn)離心10分鐘,將200fil其上清液用于二維電泳。一維電泳進(jìn)行3.5%丙烯酰胺凝膠構(gòu)成的IEF,二維電泳進(jìn)行15%雙丙烯酰胺凝膠構(gòu)成的SDS-PAGE。顆粒性淀粉合成酶檢測(cè)結(jié)果如圖1所示。在圖1A所示位置分別檢測(cè)出顆粒性淀粉合成酶-Al、Bl、Dl,類(lèi)型(vii)小麥系統(tǒng)中全部條帶都未檢出(圖1B)。因此,類(lèi)型(vii)的小麥完全缺失顆粒性淀粉合成酶。.淀粉合成酶II型的確認(rèn),使用已經(jīng)由本發(fā)明人等開(kāi)發(fā)(特愿2004-153904)的方法。方法如下所示。使種子發(fā)芽,4吏用Qiagen社制DNeasyplantmini試劑盒,對(duì)來(lái)自幼葉的基因組DNA進(jìn)行處理。耳又100mg發(fā)芽種子的幼葉,在液氮中磨石爭(zhēng)成粉末狀。將磨碎的樣品移至1.5mi試管中,之后加入試劑盒中附帶的緩沖液APl和RNase溶液,在65度下加熱10分鐘。然后加入緩沖液AP2,在冰上放置5分鐘后,通過(guò)離心操作除去析出的沉淀物。在上清液中加入緩沖液AP3混合,之后全部用于minispincolumn,進(jìn)行離心操作,使DNA吸附在膜上。用緩沖液AW洗滌2次后,加入緩沖液AE,放置5分鐘,通過(guò)離心回收DNA溶液。采用PCR法確認(rèn)編碼3個(gè)淀粉合成酶II型的基因序列上產(chǎn)生的序列變異。所用引物序列如下所示。淀粉合成酶II型-AlSSIIAF1:GCGTTTACCCCACAGAGC(序列號(hào)13)SSIIAR1:ACGCGCCATACAGCAAGTCATA(序列號(hào)n)淀粉合成酶II型-Bl:SSIIBF1:ATTTCTTCGGTACACCATTGGCTA(序列號(hào)20)SSIIBR1:TGCCGCAGCATGCC(序歹'J號(hào)23)淀粉合成酶II型-DlSSIIBF1:GGGAGCTGAAATTTTATTGCTTATTG(序列號(hào)24)SSIIBR1:TCGCGGTGAAGAGAACATGG(序列號(hào)26)PC版應(yīng)液如下進(jìn)行調(diào)制。反應(yīng)中使用LATaq(TACARABio公司)。引物使用FASMAC社制引物。10xLATaq緩沖液2|ildNTP0,2mMMg(Cl)22.25mM引物l0.25pM引物20.25|liM基因組DNAlng/pxlEATaq0.025U"總計(jì)20^1PCR擴(kuò)增裝置使用GeneAmpPCRSystem9700(AppliedBiosystems^/^司),反應(yīng)條件如下i殳定。第l步98。C5min第2步98'C30sec(40次循環(huán))65。C30sec74。Clmin第3步74。C5min第4步4'C將PCR擴(kuò)增反應(yīng)液供給到3%瓊脂糖凝膠電泳后,進(jìn)行溴化乙錠染色,通過(guò)確認(rèn)由各引物產(chǎn)生的最適大小的DNA擴(kuò)增條帶,判定樣品中有無(wú)野生型及變異型基因。類(lèi)型(i)的對(duì)照品種及類(lèi)型(vii)小麥的基因型判定的結(jié)果如圖2所示。類(lèi)型(vii)中,3個(gè)淀粉合成酶II型基因全部為變異型。由此可知,類(lèi)型(vii)的小麥完全缺失顆粒性淀粉合成酶及淀粉合成酶II型。(通過(guò)SDS-PAGE確認(rèn)淀粉合成酶II型和顆粒性淀粉合成酶缺失)通過(guò)SDS-PAGE確認(rèn)各樣品中的淀粉合成酶II型蛋白質(zhì)和顆粒性淀粉合成酶蛋白質(zhì)的表達(dá)。每lmg由類(lèi)型(i)、類(lèi)型(ii)、類(lèi)型(iii)及類(lèi)型(vii)精制的淀粉中加入14)ilSDS緩沖液,煮沸5分鐘后,冰浴冷卻2分鐘。4。C下以15,000rpm離心5分鐘后,回收上清液,作為SDS-PAGE用樣品。SDS-PAGE中,<吏用丙烯酰胺溶液終濃度為12.5%的丙烯酰胺凝膠,丙烯酰胺溶液是丙烯酰胺和亞甲基雙丙晞酰胺以30:0.135的比率混合得到的混合物,除此之外根據(jù)規(guī)定方法進(jìn)行電泳。泳動(dòng)后蛋白質(zhì)的檢測(cè)使用銀染色試劑盒(第一化學(xué)藥品)。根據(jù)上述結(jié)果,也可以確認(rèn)類(lèi)型(vii)中不具有淀粉合成酶II型及顆粒性淀粉合成酶蛋白質(zhì)(圖13)。2、蓄積的淀粉中未形成粒徑10)im以上的淀粉顆粒的淀粉的比例計(jì)算蓄積的淀粉中未形成粒徑10)im以上的淀粉顆粒的淀粉的比例時(shí),在上述淀粉的精制中,用SDS緩沖液洗滌和用水洗滌后,用刮刀分離凝膠樣層和最下層的淀粉顆粒層。將各級(jí)分移至預(yù)先稱(chēng)重的1.5ml試管中,測(cè)定濕重。通過(guò)自然干燥使樣品干燥后,測(cè)定干燥重量。為通常類(lèi)型的淀粉時(shí),淀粉顆粒層約100%,幾乎不形成凝膠樣層。與此相反,來(lái)自本發(fā)明的類(lèi)型(vii)小麥的淀粉顆粒層的干燥重量為22mg,相對(duì)于此,凝膠樣層的干燥重量為13mg。因此,回收的淀粉級(jí)分的總重量中所含的凝膠樣層的重量為約37%。3、電子顯微鏡觀察用類(lèi)型(vii)小麥系統(tǒng)生產(chǎn)的種子的電子顯微鏡照片如圖3所示。將成熟小麥種子粗粉碎,用電子顯微鏡(Keyence社)觀察其斷裂面。與類(lèi)型(i)的野生型淀粉比較,類(lèi)型(vii)的淀粉顆粒為扁圓形,數(shù)量也少,大部分由平滑的基底物質(zhì)構(gòu)成。4、鏈長(zhǎng)分布解析4.1構(gòu)成類(lèi)型(i)、類(lèi)型Ui)、類(lèi)型及類(lèi)型(vii)淀粉中所含支鏈淀粉的葡萄糖支鏈的鏈長(zhǎng)分布解析結(jié)果如圖4~6所示。方法如下所示。秤量精制淀粉,每lmg淀粉加入60pL的250mMNaOH,煮沸20分鐘,使其完全糊化。冷卻后,加入乙酸1.9)iL、50mM乙酸鈉緩沖液(pH4.0)240jiL、2%疊氮化鈉3.75(iL后,加入l(iL異淀粉酶(Nacalai社),在37。C下邊攪拌邊反應(yīng)16小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后,煮沸20分鐘,酶失活后,在20。C下以14000rpm離心2分鐘,取得上清液,加入樹(shù)脂(Bio-Rad社制),進(jìn)行脫離子。離心使樹(shù)脂沉淀后,將上清液移至新的試管中,采用Park-Johnson法的改良法(生物化學(xué)實(shí)—驗(yàn)法19"淀粉.相關(guān)糖質(zhì)實(shí)驗(yàn)法"中村道德■貝沼圭二編學(xué)會(huì)出版中心,P123)對(duì)通過(guò)酶處理生成的寡糖的濃度進(jìn)行定量。適當(dāng)?shù)叵♂屧嚇尤芤?,?0)il稀釋溶液中,加入25)^1的0.1%鐵氰化鉀和25^1氰化鉀溶液nf0.48gNa2CO3、0.92gNaHC03、0.065gKCN溶解于水中,配成100ml的溶液),力口栓密封,在沸水中加熱15分鐘。之后,冰上冷卻10分鐘,加入125(il的0.3%鐵明礬溶液(將1.5gFe'NH4(S04)2H20溶解于500ml的50mM硫酸中所得的溶液),在室溫下放置20分鐘后,測(cè)定715nm處的吸光度。對(duì)濃度在0至1OmM之間改變的葡萄糖溶液進(jìn)行相同的處理,根據(jù)測(cè)定值制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,使用該標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)試樣溶液中的還原末端基團(tuán)進(jìn)4亍定量。分別量耳又各樣品大約5nmo1,進(jìn)行真空離心干燥,作為鏈長(zhǎng)分布解析用試樣。鏈長(zhǎng)分布解析中使用Beckman社制PA糖鏈解析試劑盒。向千燥的樣品中力口入2(il麥芽糖質(zhì)量控制/遷移率標(biāo)記物(maltosequantitativecontrol/mobilitymarker),再進(jìn)行真空離心干燥。向干燥的樣品中加入1M氰基硼氫化鈉溶液2pL,再加入APTS標(biāo)記試劑。在37°C下于暗處反應(yīng)4小時(shí),加入46)iL蒸餾水,停止反應(yīng)。進(jìn)而,從此樣品中取出5|iL,用蒸餾水稀釋至40倍,制成測(cè)定用樣品。葡萄糖聚合度不同的寡糖的分離定量,使用Beckman社毛細(xì)管電泳裝置PACEsystem5000。分離用毛細(xì)管使用eCAPN-CHO毛細(xì)管,在高壓下經(jīng)5秒鐘注入樣品后,使用eCAP糖分析凝膠緩沖液,在30kV下進(jìn)行電泳30分鐘。根據(jù)所得的峰圖語(yǔ),計(jì)算葡萄糖聚合度3以上70以下的寡糖的各峰面積,以峰面積的總和為100%,求出各峰所占面積的比例。以由類(lèi)型(i)的小麥系統(tǒng)得到的圖案為標(biāo)準(zhǔn),將從各樣品對(duì)應(yīng)的峰的比例中減去相當(dāng)于類(lèi)型(i)的峰的比例得到的值,制成圖表。類(lèi)型(Vii)與為標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)的類(lèi)型(i)相比,聚合度3至10的葡萄糖側(cè)鏈的比例顯著增力p,相反聚合度11至24的葡萄糖側(cè)鏈的比例降低(圖4)。顯然不同于為親代系統(tǒng)的類(lèi)型(ii)(圖5)或者類(lèi)型(iii)(圖6)的圖。認(rèn)為特別是直鏈淀粉含量為1%以下且聚合度為3至5的葡萄糖側(cè)鏈的比例降低使得不能得到淀粉顆粒結(jié)構(gòu)的糖成分構(gòu)成平滑的基底物質(zhì)。4.2從種子中除去胚,用乳棒和乳缽粉碎后,移至1.5ml試管中。每lmg粉碎的種子重量加入50fil的10(T/。DMSO。加栓密封,煮沸30分鐘,使其完全糊化,經(jīng)離心除去不溶性成分。向20^1所得樣品溶液中加入0.5M乙酸鈉緩沖液(pH4.0)2^1、7單位異淀粉酶(Nacalai社),用水混合至100fi1(反應(yīng)l)。同時(shí),此反應(yīng)液中使用經(jīng)預(yù)先煮沸而失活的異淀粉酶,對(duì)該樣品進(jìn)行處理,作為用于測(cè)定樣品中預(yù)先含有的游離狀態(tài)寡糖的樣品(反應(yīng)2)。在37。C下反應(yīng)16小時(shí)以上,之后煮沸5分鐘,使異淀粉酶失活,對(duì)于反應(yīng)l,通過(guò)反應(yīng)生成的葡萄糖支《連的濃度,可以根據(jù)Park-Johnson法的改良法(上述)進(jìn)行計(jì)算,將相當(dāng)于10nmol寡糖的溶液量進(jìn)行真空離心干燥。對(duì)于反應(yīng)2,將與反應(yīng)l中所求出的溶液量相等量的溶液進(jìn)行干燥。之后,加入1M氰基硼氫化鈉(THF中)溶液2pl,再加入2)il的APTS標(biāo)記試劑,在暗處于60。C下反應(yīng)90分鐘。加入46|11水,停止反應(yīng),再用水稀釋至40倍,制成測(cè)定用樣品。按照與上述相同的方法進(jìn)行使用PACEsystem5000的解析。從由反應(yīng)l得到的各葡萄糖支鏈的峰面積值中減去由反應(yīng)2得到的對(duì)應(yīng)峰的面積值,由此計(jì)算出通過(guò)異淀粉酶處理生成的葡萄糖支鏈的值。計(jì)算出聚合度1以上、60以下的支鏈的面積值,以總和為100%,求出各峰所占的面積的比與類(lèi)型(i)相比,類(lèi)型(Vii)中聚合度2至5的支鏈的比例明顯增力口(圖7及8)。實(shí)施例的圖4是對(duì)聚合度3以上的支鏈的解析,本實(shí)施例中,不使用與聚合度2的峰重疊的麥芽糖質(zhì)量控制/遷移率標(biāo)記物進(jìn)行解析,聚合度2的支鏈的峰面積也變得清楚。結(jié)果為類(lèi)型Uii)中聚合度2的峰也比類(lèi)型(i)顯著增高。另外,類(lèi)型(ii)的支鏈淀粉具有與類(lèi)型(i)幾乎相同的結(jié)構(gòu)(圖5),支鏈淀粉的鏈長(zhǎng)結(jié)構(gòu)幾乎沒(méi)有變化。與此相反,與類(lèi)型(ii)粘性相同的類(lèi)型(vi)、(x)(圖12)與類(lèi)型(ii)相比聚合度約為2至10的支鏈的比例增加,聚合度為11至25的鏈減少。表明在支鏈淀粉結(jié)構(gòu)中存在變化,結(jié)果DSC中的糊化峰溫度降低,糊化后溶液粘度下降?!?、直鏈淀粉含量的測(cè)定方法測(cè)定各小麥系統(tǒng)的淀粉中直鏈淀粉含量。測(cè)定方法如下所示。每lmg精制淀粉,加入25iil乙醇,再加入1M氫氧化鈉溶液225ju1,在沸水中加熱10分鐘,使淀粉糊化。用水將此糊化液稀萍奪10倍,分耳又50pl用于測(cè)定。向其中加入lM乙酸10ji1、碘液20(il、水920pl,充分混合,在27度T》丈置20分鐘后,測(cè)定620nm處的吸光/復(fù)。另外,將來(lái)自馬4i、薯的直鏈淀粉作為制作標(biāo)準(zhǔn)曲線用試樣,來(lái)自糯玉米(Waxycorn)的淀粉(不含直鏈淀粉的淀粉)作為空白,將上述淀粉進(jìn)行相同的處理。從各試樣的吸光度中減去由糯玉米求出的吸光度的值,套用到標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)據(jù)中,由此測(cè)定各試樣的直鏈淀粉含量。6、生淀4分在a-淀粉酶作用下的分解對(duì)生淀粉經(jīng)a-淀粉酶處理而消化產(chǎn)生的分解性進(jìn)行如下研究。實(shí)施的方法,按照以"淀粉.相關(guān)糖質(zhì)實(shí)驗(yàn)法、P189P192"為參考經(jīng)改良的方法進(jìn)行。秤量來(lái)自類(lèi)型(i)、(ii)、(iii)、(vii)小麥系統(tǒng)的生淀粉,用水調(diào)制成為1%懸濁液。將平均20)LiL此懸濁液分為3瓶(I、II、III),I和II中加入0.8M乙酸緩沖液(pH6.0)230|iL。m中加入10(iL的2MNaOH后,在50。C下加熱5分鐘,制成完全糊化的淀粉樣品。用20jiL的1M乙酸中和后,加入0.8M乙酸緩沖液(pH6.0)200pL。之后,向I、III中加入a-淀粉酶(Megazyme社制)IOU。向II中等量加入將相同的a-淀粉酶煮沸20分鐘失活的溶液。全部樣品在40。C下邊攪拌邊進(jìn)行反應(yīng)。12小時(shí)后,將反應(yīng)液用水稀釋5倍,保存在4。C下4吏反應(yīng)停止。經(jīng)a-淀4分酶處理生成的寡糖采用上述Park-Johnson法的改良法進(jìn)行定量。根據(jù)下式計(jì)算生淀粉的分解率。(I-II)/(III-II)*1007、糊化度對(duì)加熱糊化后,冷卻至室溫時(shí)的溶液白濁程度及糊化度進(jìn)行調(diào)查。方法采用以"淀粉.相關(guān)糖質(zhì)實(shí)驗(yàn)法、P189P192"為參考改良的方法如下進(jìn)行。秤量類(lèi)型(i)、(iii)、(iv)、(v)的精制淀粉,用水調(diào)制成為1%的懸濁液。將平均20)iL此懸濁液分成3瓶(I、II、III)、I和II煮沸20分鐘,冷卻至室溫。通過(guò)目測(cè)確認(rèn)此時(shí)各樣品的白濁程度。然后,在4。C下保存2小時(shí)后,加入0.8M乙酸緩沖液(pH6.0)230|iL。in中加入10pL的2MNaOH后,煮沸5分鐘,冷卻至室溫后,用lM乙酸20(iL中和,之后加入200)iL的0.8M乙酸緩沖液(pH6.0)。然后,向I、m中各加入f3-淀粉酶(SIGMA社制)及支鏈淀粉酶(Pullulanase)(林原生物化學(xué)研究所制)5pL。向II中等量加入將同種酶煮沸20分鐘使其失活的溶液。全部樣品在40。C下邊攪拌邊進(jìn)行反應(yīng)。30分后,將反應(yīng)液用水稀釋5倍,在4。C下進(jìn)行保存,使反應(yīng)停止。經(jīng)酶處理生成的寡糖根據(jù)上述Park-Johnson法的改良法進(jìn)行定量。計(jì)算各樣品的寡糖濃度后、根據(jù)下式計(jì)算糊化度。(1-II)/(III-II)*1008、粘度來(lái)自各小麥系統(tǒng)的淀粉糊化后,測(cè)定冷卻至60度時(shí)的溶液的粘度。測(cè)定方法如下所示。種量精制淀粉,用蒸餾水配制成4%淀粉懸濁液。在沸水中煮沸20分鐘,保存在6(TC下。將100(iL此糊液移至垂直豎立的內(nèi)徑lmm的3皮璃管中,測(cè)定液面前端落下5cm的距離所需要的時(shí)間。另一方面,將糯玉米(豐年社制)調(diào)制成由2%起間隔0.5%直至7.5%的各種濃度的淀粉溶液,將上述淀粉溶液相同地進(jìn)行糊化、保溫,與上述相同地測(cè)定落下速度,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。另一方面,使糯玉米以相同的濃度,通過(guò)快速粘度分析4義(RapidViscoAnalyser)測(cè)定糊化后6(TC下的粘度,使用其制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過(guò)在使用糯玉米制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線中套用來(lái)自各種小麥的淀粉溶液在60。C下的落下速度,計(jì)算相對(duì)粘度。9、糊化后的凍結(jié)融解耐性如下進(jìn)行凍結(jié)融解耐性的研究。在各試樣的精制淀粉中加入水,制成5%的淀粉懸濁液。煮沸20分鐘,將淀粉懸濁液糊化后,冷卻至室溫,首先觀察此時(shí)糊化液的狀態(tài)。冷卻至室溫,白濁化,得到凝膠化樣品,根據(jù)其程度評(píng)價(jià)為"高,,、"中,,、"低,,。另外,未見(jiàn)白濁和凝膠化的樣品評(píng).價(jià)為"未白濁,,。將上述糊液或者凝膠化的樣品在-80。C下冷凍1小時(shí)后,在25度下融解30分鐘,將此操作重復(fù)10次后,觀察樣品狀態(tài)。在第IO次的融解結(jié)束時(shí)凝力交化的樣品評(píng)價(jià)為"x,,,凝膠化程度低的樣品評(píng)價(jià)為"△",幾乎未見(jiàn)凝膠化的樣品評(píng)價(jià)為"O,'。各類(lèi)型小麥的淀粉的上述特性評(píng)價(jià)結(jié)果匯總于下表2中。[表2]表2淀粉的特性<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>對(duì)于類(lèi)型(vii)進(jìn)行闡述,如上所述由于糖成分不能取得淀粉顆粒結(jié)構(gòu),所以一般認(rèn)為易于受到a-淀粉酶之類(lèi)分解酶的影響,生淀粉的分解性顯著增加。以上述糖成分為主要成分的類(lèi)型(Vii)小麥系統(tǒng)在作為食品使用時(shí)的加工性、或者消化性方面,可以提供與現(xiàn)有完全不同的應(yīng)用方法。具體而言,可以舉出易消化性面包、面條、或者點(diǎn)心類(lèi)等。另外,優(yōu)選用作飼料用作物。另外,與形成淀粉顆粒的系統(tǒng)相比,加工時(shí)的糊化能量非常少即可。即,可以在低溫下烹調(diào),將加熱給與其它食物成分的影響抑制在最小限度。總之由于糊化后的凍結(jié)融解耐性也十分優(yōu)異,所以特別適用于冷藏、冷凍保存用食品。進(jìn)而,類(lèi)型(Vii)淀粉在淀粉精制時(shí)吸水性與其他淀粉相比非常高。吸水量高時(shí),作為凝膠化劑使用時(shí),用少量即可吸收大量水分?;蛘哂糜诠麅鰻钍称窌r(shí)也可以用少量進(jìn)行調(diào)制。另外,還可以用于難消化性淀粉的制作。已知直鏈淀粉的含量因合成其的顆粒性淀粉合成酶基因的組合不同而不同。另一方面,如上所述使淀粉合成酶II型全部缺失時(shí),與野生型相比直鏈淀粉含量顯著增加(類(lèi)型(iii))。由此可知,顆粒性淀粉合成酶的組合相同時(shí),同時(shí)使淀粉合成酶II型缺失1至2個(gè)時(shí),表觀直鏈淀粉含量增加,但實(shí)際上表觀直鏈淀粉含量為幾乎相同程度的值(比較類(lèi)型(iv)和類(lèi)型(ix)、類(lèi)型(V)和類(lèi)型(Viii)),或雖然少數(shù)但有降低傾向(未給出數(shù)據(jù))。耐老化性("白濁程度,,高的類(lèi)型耐性差)的研究中,即使顆粒性淀粉合成酶的類(lèi)型相同,同時(shí)使淀粉合成酶II型缺失時(shí),耐性也將提高(比較類(lèi)型(iv)和類(lèi)型(ix)、類(lèi)型(V)和類(lèi)型(Vii))、糊化后的糊液的相對(duì)粘度降低(比較類(lèi)型(ii)和類(lèi)型(Vi)、(Vii))。由此可知,通過(guò)不僅使顆粒性淀粉合成酶缺失,而且同時(shí)使l個(gè)以上的淀粉合成酶II型缺失,能夠制作直鏈淀粉含量與現(xiàn)有各種低直鏈淀粉含量小麥程度相同且耐老化性提高的小麥,或者糊化后的糊液粘度降低的小麥。另外,在使淀粉合成酶II型缺失2個(gè)以上時(shí)具有更大的效果。低直鏈淀粉小麥作為面條用粉廣為使用,糊化、老化特性的改良可以給上述用途帶來(lái)改善效果。另外,也可以用于餃子、饅頭等的皮等。另外,本發(fā)明的類(lèi)型(Vi)小麥?zhǔn)穷w粒性淀粉合成酶全部缺失、淀粉合成酶II型只表達(dá)1個(gè)的類(lèi)型,與類(lèi)型(ii)小麥相比,粘度顯著降低。已知類(lèi)型(ii)小麥糊化后冷卻時(shí)的糊液的粘度低,類(lèi)型(Vi)具有粘度低于上述粘度水平的新型特性。以上數(shù)據(jù)表明,可以篩選出蓄積下述類(lèi)型的淀粉的小麥系統(tǒng),即目前根據(jù)有無(wú)顆粒性淀粉合成酶的表達(dá)進(jìn)行的小麥系統(tǒng)的篩選無(wú)法篩選出的類(lèi)型。本發(fā)明提供一種含有新型淀粉的六倍體小麥,應(yīng)用本發(fā)明可以制作具有相同效果的四倍體小麥。很早以前人們就已經(jīng)知道由六倍體小麥和四倍體小麥的雜交后代可以得到四倍體小麥。因此顆粒性淀粉合成酶和淀粉合成酶II型以所期望的組合表達(dá)的本發(fā)明小麥和四倍體小麥雜交,通過(guò)組合上述篩選方法,可以從其后代中,篩選出以所期望組合具有顆粒性淀粉合成酶和淀粉合成酶II型的四倍體小麥。四倍體小麥可以舉出硬質(zhì)小麥等。10、麥芽^f唐及葡萄糖含量的測(cè)定測(cè)定使用的種子樣品,與糖含量測(cè)定用樣品不同,事先輕度粉碎,135°C下干燥2小時(shí),由干燥前后的重量變化事先計(jì)算出水分含量。將類(lèi)型(i)及類(lèi)型(vii)小麥的除去了胚的成熟種子在液氮中磨碎,每10mg重量的磨碎的粉加入lnil的DMSO充分混合,一邊經(jīng)常攪拌一邊l爭(zhēng)置于室溫下。1.5小時(shí)后以13,000rpm離心5分鐘,將上清;良移至新試管中。煮沸10分鐘后,準(zhǔn)確量取一定量,進(jìn)行真空干燥(DMSO提取樣品)。另外,將類(lèi)型(i)及類(lèi)型(vii)小麥的除去了胚的干燥種子在液氮中磨碎后,每10mg重量的粉加入lml的80。/Q乙醇,密閉煮沸20分鐘。冷卻后,以10,000rpm離心5分鐘,準(zhǔn)確量取一定量,進(jìn)行真空干燥(乙醇才是取樣品)。與纟連長(zhǎng)分布解析中所述方法相同地在上述樣品中加入1M氰基硼氫化鈉溶液2(il、APTS標(biāo)記試劑2(il,.在37。C下于暗處反應(yīng)4小時(shí)后,加入46jil蒸餾水,使反應(yīng)停止。進(jìn)而用蒸餾水稀茅奪至40倍,作為測(cè)定測(cè)定。以預(yù)先使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制成的標(biāo)準(zhǔn)曲線為基礎(chǔ),根據(jù)葡萄糖及麥芽糖的峰面積計(jì)算濃度,計(jì)算每單位種子干燥重量的各糖濃度,進(jìn)行樣品間的比專(zhuān)交。11、蔗糖含量的測(cè)定將類(lèi)型(i)及類(lèi)型(Vii)小麥的除去了胚的成熟種子在液氮中磨碎后,每10mg重量的粉加入lml的80。/c)乙醇,加蓋密閉,煮沸20分鐘。冷卻后,以10,000rpm離心5分鐘,準(zhǔn)確量取一定量上清液,進(jìn)行真空干燥。加入與干燥前的體積相同的量的滅菌水,溶解樣品后,通過(guò)0.45pm的過(guò)濾器過(guò)濾,進(jìn)而將用截留分子量10,000的超濾膜過(guò)濾得到的樣品作為蔗糖測(cè)定溶液。樣品中的蔗糖含量的分析使用HewlettPackard社制HP毛細(xì)管電泳裝置,使用市售的緩沖液(用于HPCE的堿性陰離子緩沖液(Agilent社))及毛細(xì)管(CE標(biāo)準(zhǔn)毛細(xì)管(50fim、104cm)(Agilent社))進(jìn)行分離。參照預(yù)先使用市售蔗糖制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣品中的蔗糖含量,進(jìn)行樣品間的比較。(糖含量測(cè)定的結(jié)果)與作為與商業(yè)上廣為使用的小麥類(lèi)型相同的類(lèi)型(i)相比,類(lèi)型(vii)中葡萄糖的含量至少為5倍以上、麥芽糖的含量至少為i(H咅以上、蔗糖的含量至少為2倍以上。另外,類(lèi)型(vii)的種子含有上述糖至吃起來(lái)感覺(jué)甘甜的水平,是現(xiàn)有類(lèi)型中沒(méi)有的新型特征。'通過(guò)增加糖含量,將本發(fā)明小麥加工成食品時(shí)不僅不需要添加新的糖成分,而且也可以用作供給糖自身的原材料。12、糊化特性(DSC)將從各小麥中精制的淀粉分別稱(chēng)量約3mg,加入3倍量的水,加水半曰以上。將此樣品封入密封盒中,采用示差掃描熱量測(cè)定計(jì),以5。C/min的速度從30。C升溫至105。C,測(cè)定糊化開(kāi)始溫度(TO)、糊化峰溫度(Tp)、糊化終止溫度(Tc)、及焓。結(jié)果,為類(lèi)型(vii)的親代系統(tǒng)的類(lèi)型(ii)與為野生型的類(lèi)型(i)相比,TO升高,為另一方親代系統(tǒng)的類(lèi)型(iii)的TO降低。與其相對(duì),類(lèi)型(Vii)顯示比為親代系統(tǒng)的類(lèi)型(iii)更低的糊化峰溫度。盡管如此,焓值與類(lèi)型(iii)相比仍變大,是非常特征性的特性。另外,眾所周知3個(gè)顆粒性淀粉合成酶全部缺失的粘型淀粉(類(lèi)型(ii)),與3個(gè)顆粒性淀粉合成酶都存在的類(lèi)型(i)相比,糊化峰溫度升高。與其相對(duì),類(lèi)型(Vi)雖然是無(wú)直鏈淀粉的類(lèi)型,但與類(lèi)型(i)相比糊化峰溫度仍然降低。通過(guò)不僅使顆粒性淀粉合成酶缺失,而且同時(shí)使2個(gè)淀粉合成酶II型缺失,能夠使糊化峰溫度或焓降低。DSC測(cè)定時(shí)的糊化A,溫度降低時(shí),在較低溫度下就可以糊化,不僅對(duì)加工性產(chǎn)生較大影響,而且可以進(jìn)行與不適于加熱的材料等的加工。并且在較低溫度下進(jìn)行糊化時(shí),更易被淀粉酶等分解,由此,使游離的糖感覺(jué)更加甘甜,也給與食物味道較大影響。[表3<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>13、可溶性聚葡萄糖(watersolublepolyglucan,WSP)含量的測(cè)定將除去胚的成熟種子石皮石爭(zhēng),使用通過(guò)65pm尼龍網(wǎng)的級(jí)分。將回收的級(jí)分在甲醇中煮沸15分鐘后,離心回收沉淀部分。再用90%甲醇洗滌此沉淀,離心回收后,干燥測(cè)定重量。秤量約50mg的樣品,每lmg加入20(il水,邊在室溫下攪拌20分鐘,邊提取可溶性聚葡萄糖。600xg離心20分鐘,分別回收可溶性級(jí)分和不溶性級(jí)分。其中不溶性級(jí)分再次用水提取,回收可溶性級(jí)分和不溶性級(jí)分。將第1次和第2次的可溶性級(jí)分混合,用于之后的操作。為了除去蛋白質(zhì),向混合的可溶性級(jí)分中加入三氯乙酸(TCA)使終濃度為5%,在冰上靜置3.5小時(shí)。經(jīng)2,400xg離心10分鐘除去沉淀的蛋白質(zhì)層,向上清液中加入3倍量的甲醇,y吏wsp沉淀,離心回收后,干燥,測(cè)定重量。在上述水不溶性級(jí)分中加入1050pl水,懸濁后,加入150[il曱苯,攪拌l小時(shí),進(jìn)行除蛋白質(zhì)處理。700xg離心10分鐘,回收沉淀。再將除蛋白質(zhì)處理重復(fù)2次,最后回收的沉淀用水洗滌3次,用曱醇洗滌l次后,真空干燥,測(cè)定重量。各樣品均通過(guò)將水不溶性級(jí)分的重量和wsp重量的總和作為總糖量的重量,計(jì)算wsp重量相對(duì)于此的比率(圖i4)。相對(duì)于類(lèi)型(i)、(ii)、(m),類(lèi)型(vii)中wsp的含量明顯地增加。14、焙烤食品制造焙烤食品時(shí),使用本發(fā)明小麥中的類(lèi)型(vii)。每100g收獲的成熟種子,加入1.5ml水充分混合,混料30分鐘后,使用Brabender社制TestmillQuadrumatJr.制粉,得到小麥粉。此時(shí)的有效利用率為46重量%。以下,按照表4及表5給出的比例和下述制作步驟制作主食面包?;旌媳?中除起酥油(shortening)以外的原料,用混合機(jī)低速混合1分鐘、高速混合2分鐘(27°C)。停止混合加入起酥油后,再低速混合1分鐘、高速混合3分鐘,使揉捏后的生面團(tuán)在27。C、濕度75%下發(fā)酵90分鐘。翻揉面團(tuán)后,再于相同條件下發(fā)酵30分鐘,分割成100g,制成圓形,放置20分鐘。用模整形后,在38。C、濕度85%的發(fā)酵室中進(jìn)行40分鐘焙烘而制成(205°C、20分鐘)。上述條件下制作的主食面包的味道及食感由10名評(píng)價(jià)人員(panelists)進(jìn)行評(píng)價(jià)。根據(jù)表6給出的項(xiàng)目和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn),按5階萃史進(jìn)行評(píng)價(jià),計(jì)算各項(xiàng)目的平均值。合計(jì)此平均值,作為各試驗(yàn)區(qū)的綜合評(píng)價(jià)(表7)。根據(jù)上述結(jié)果可以確認(rèn),使用由本發(fā)明小麥得到的面粉,能夠制作出甘甜、香氣、味道等風(fēng)味很強(qiáng)的焙烤食品。另外,制作焙烤食品時(shí),優(yōu)選使用O.l~60質(zhì)量份,更優(yōu)選使用0.550質(zhì)量份。[表4]表4<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>[表5]表5<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>*數(shù)值單位為質(zhì)量份。*來(lái)自本發(fā)明小麥的面粉,使用通過(guò)Bmbender公司制Testmill粉碎得到的粉。*強(qiáng)力粉使用Eagle(日本制粉(抹))、薄力粉使用Heart(日本制粉(林))。[表6]表6主食面包的官能評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)表香氣5.有芳香的濃郁的香氣。4.有較濃的香氣。3.能夠聞到香氣。2.無(wú)香氣。1.有難聞氣味。食感5.口感非常好。4.口感好。3.口感一般。2.口感稍差。1.口感差,殘留在嘴中。味道5.味道強(qiáng)、有風(fēng)味。4.味道稍強(qiáng)。3.味道淡。2.無(wú)味道。1.無(wú)味道、有酸味。甘甜5.感覺(jué)非常甜。4.感覺(jué)較強(qiáng)的甜味。3.感覺(jué)稍稍有點(diǎn)甜。2.感覺(jué)很微弱的甜味。1.完全沒(méi)甜味。[表7]表7官能^<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>[圖1A]類(lèi)型(i)的通過(guò)二維電泳得到的電泳結(jié)果的模式圖。[圖1B]類(lèi)型(Vii)的二維電泳結(jié)果。[圖2]進(jìn)行類(lèi)型(i)的對(duì)照品種及類(lèi)型(vii)小麥的基因型判定的結(jié)果。[圖3]用類(lèi)型(Vii)的小麥系統(tǒng)生產(chǎn)的種子的電子顯微鏡照片。[圖4]構(gòu)成來(lái)自類(lèi)型(vii)系統(tǒng)的淀粉中的支鏈淀粉的葡萄糖側(cè)鏈鏈長(zhǎng)分布解析結(jié)果((vii)-(i))。[圖5]構(gòu)成來(lái)自類(lèi)型(ii)系統(tǒng)的淀粉中的支鏈淀粉的葡萄糖側(cè)鏈鏈長(zhǎng)分布解析結(jié)果((ii)-(i))。[圖6]構(gòu)成來(lái)自類(lèi)型(iii)系統(tǒng)的淀粉中的支鏈淀粉的葡萄糖側(cè)鏈鏈長(zhǎng)分布解析結(jié)果((iii)-(i))。[圖7]構(gòu)成來(lái)自類(lèi)型(i)系統(tǒng)的淀粉中的支鏈淀粉的葡萄糖側(cè)鏈鏈長(zhǎng)分布解析結(jié)果。[圖8]構(gòu)成來(lái)自類(lèi)型(vii)系統(tǒng)的淀粉中的支鏈淀粉的葡萄糖側(cè)鏈的鏈長(zhǎng)分布解析結(jié)果。[圖9]為表示成熟種子中葡萄糖含量的圖。[圖IO]為表示成熟種子中麥芽糖含量的圖。[圖ll]為表示成熟種子中蔗糖含量的圖。[圖12]構(gòu)成來(lái)自類(lèi)型(x)系統(tǒng)的淀粉中的支鏈淀粉的葡萄糖側(cè)鏈鏈長(zhǎng)分布解析結(jié)果。[圖13]為通過(guò)SDS-PAGE進(jìn)行的電泳結(jié)果。[圖14]為表示成熟種子中可溶性聚葡萄糖含量的圖。權(quán)利要求1、一種小麥,其不表達(dá)下述全部蛋白質(zhì)(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-A1基因編碼的淀粉合成酶II型-A1蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-B1基因編碼的淀粉合成酶II型-B1蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-D1基因編碼的淀粉合成酶II型-D1蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-A1基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-A1蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-B1基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-B1蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-D1基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-D1蛋白質(zhì)。2、一種小麥,其中不具有下述蛋白質(zhì)所具有的酶活性的全部(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-Bl蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-Dl蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);,(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及,(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。3、一種小麥,其中蓄積的淀粉的30重量%以上不形成粒徑lOpm以上的淀4分顆粒。4、一種小麥,在支鏈淀粉的葡萄糖支鏈中,聚合度70以下的支鏈中,聚合度為35的支鏈的數(shù)量的比例為1.5%以上。5、一種小麥,生淀粉在淀粉酶作用下的分解率為80%以上。6、一種小麥,其中,下述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的1種以上不表達(dá),并且下述蛋白質(zhì)(4)至(6)中的1種以上不表達(dá),但不包括只有蛋白質(zhì)(2)、(4)及(5)同時(shí)不表達(dá)的小麥,(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-Bl蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-D1蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。7、一種小麥,所述小麥不具有下述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的l種以上酶活性,并且不具有下述蛋白質(zhì)(4)至(6)所具有的酶活性中的1種以上酶活性,但不包括只不具有蛋白質(zhì)(2)、(4)及(5)所具有的酶活性的小麥,(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-Bl蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-Dl蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。8、一種小麥,其中下述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的任意2種不表達(dá),并且下述蛋白質(zhì)(4)至(6)中的1種以上不表達(dá),(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3'的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-B1蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-D1蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。9、一種小麥,不具有下述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2種酶活性,并且不具有下述蛋白質(zhì)(4)至(6)所具有的酶活性中的1種以上酶活性,(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-B1蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-D1蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。10、一種小麥,其中下述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的任意2種不表達(dá),并且下述蛋白質(zhì)(4)至(6)都不表達(dá),(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-Bl蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-Dl蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。11、一種小麥,不具有下述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2種酶活性,并且不具有下述蛋白質(zhì)(4)至(6)所具有的酶活性的全部,(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-B1蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-Dl蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。12、一種小麥,其中下述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的2種以上不表達(dá),并且下述蛋白質(zhì)(4)至(6)中的2種以上不表達(dá),(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-B1蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-D1蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。13、一種小麥,不具有下述蛋白質(zhì)(1)至(3)所具有的酶活性中的2種以上酶活性,并且不具有下述蛋白質(zhì)(4)至(6)所具有的酶活性中的2種以上酶活性,(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶n型-bi基因編碼的淀粉合成酶n型-B1蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-D1蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。14、一種小麥,是下述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的2種以上不表達(dá)的小麥,相比顆粒性淀粉合成酶蛋白質(zhì)的表達(dá)組合與所述小麥相同、蛋白質(zhì)(1)至(3)全部表達(dá)的小麥,其淀粉糊化后的粘度較小,(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因編碼的淀粉合成酶II型-A1蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-B1蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-D1蛋白質(zhì)。15、一種小麥,是下述蛋白質(zhì)(1)至(3)中的2種以上不表達(dá)的小麥,相比顆粒性淀粉合成酶蛋白質(zhì)的表達(dá)組合與所述小麥相同、蛋白質(zhì)(1)至(3)全部表達(dá)的小麥,其淀粉糊化后的耐老化性提高,(1)序列號(hào)i的淀粉合成酶n型-ai基因編碼的淀粉合成酶n型-Al蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因編碼的淀粉合成酶II型-Bl蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因編碼的淀粉合成酶II型-D1蛋白質(zhì)。16、一種小麥,其除去胚的成熟種子中含有0.1重量%以上葡萄17、一種小麥,其除去胚的成熟種子中含有0.1重量%以上麥芽糖。18、一種小麥,其除去胚的成熟種子中含有1重量%以上蔗糖。19、一種小麥,在支鏈淀粉的葡萄糖支鏈中,聚合度60以下的支鏈中,聚合度25的支鏈的數(shù)量的比例為3%以上。20、一種食品,所述食品含有權(quán)利要求1~19中任一項(xiàng)所述的小麥或來(lái)自所述小麥的淀粉。21、如權(quán)利要求20所述的食品,所述食品為焙烤食品。22、一種工業(yè)制品,所述工業(yè)制品含有權(quán)利要求1~19中任一項(xiàng)所述的小麥或來(lái)自所述小麥的淀粉。23、一種制品,所述制品利用權(quán)利要求119中任一項(xiàng)所述的小麥或來(lái)自所述小麥的淀粉進(jìn)行加工。24、一種特定小麥的篩選方法,其特征在于包括以下步驟,檢測(cè)下述基因變異體(7)至(9)中的1種以上的步驟(7)在序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-Al基因中,至少位置124412的堿基缺失及/或取代的淀粉合成酶II型-Al基因變異體;(8)在序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-Bl基因中,至少在位置61456146之間插入1個(gè)以上i威基的淀粉合成酶II型-Bl基因變異體;及(9)在序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-Dl基因中,至少位置25902652的堿基缺失的淀粉合成酶II型-Dl基因變異體;以及檢測(cè)以下蛋白質(zhì)(4)至(6)中的l種以上的步驟(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-Al基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Al蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-Bl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Bl蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-Dl基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-Dl蛋白質(zhì)。全文摘要本發(fā)明的目的在于提供一種通過(guò)抑制上述酶的表達(dá)而蓄積新型特性的淀粉的小麥。本發(fā)明提供一種下述蛋白質(zhì)全部不表達(dá)的小麥(1)序列號(hào)1的淀粉合成酶II型-A1基因編碼的淀粉合成酶II型-A1蛋白質(zhì);(2)序列號(hào)3的淀粉合成酶II型-B1基因編碼的淀粉合成酶II型-B1蛋白質(zhì);(3)序列號(hào)5的淀粉合成酶II型-D1基因編碼的淀粉合成酶II型-D1蛋白質(zhì);(4)序列號(hào)7的顆粒性淀粉合成酶-A1基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-A1蛋白質(zhì);(5)序列號(hào)9的顆粒性淀粉合成酶-B1基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-B1蛋白質(zhì);及(6)序列號(hào)11的顆粒性淀粉合成酶-D1基因編碼的顆粒性淀粉合成酶-D1蛋白質(zhì)。文檔編號(hào)A01H5/00GK101170899SQ200680015220公開(kāi)日2008年4月30日申請(qǐng)日期2006年5月2日優(yōu)先權(quán)日2005年5月2日發(fā)明者P·L·弗林坦,中村俊樹(shù),安田秀世,新畑智也,栗本洋一,瀨戶(hù)泰裕,石原義和,石川吾郎,米丸淳一,齊藤美香申請(qǐng)人:日本制粉株式會(huì)社;獨(dú)立行政法人農(nóng)業(yè)·食品產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究機(jī)構(gòu)