專利名稱：：通過(guò)調(diào)節(jié)花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑的骨治療方法通過(guò)調(diào)節(jié)花生四蹄酸代謝或信號(hào)途徑的骨治療方法相關(guān)申請(qǐng)的交叉參者本申請(qǐng)要求2005年8月18日申請(qǐng)的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)No.60/709,838的優(yōu)先權(quán)，該美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)的全文為所有目的全部在此引入作為參考。發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明一般的涉及通過(guò)調(diào)節(jié)花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑加速或增強(qiáng)骨形成或骨折愈合，特別通過(guò)利用5-脂氧合酶活性抑制劑。發(fā)明背景骨折是一種常見(jiàn)的外傷。在美國(guó)每年大約報(bào)道有800-1000萬(wàn)例骨折，其中超過(guò)1百萬(wàn)需要住院治療。估計(jì)每年治療這些骨折的費(fèi)用超過(guò)200億美元。雖然這已經(jīng)是很驚人的，但是預(yù)期這些數(shù)字會(huì)由于人群的老化而增長(zhǎng)。而且，在軍事人員中，骨折是常見(jiàn)的訓(xùn)練損傷。骨折，典型地位于手臂和大腿，也是常見(jiàn)的戰(zhàn)斗創(chuàng)傷。除了外傷，骨折也可因疾病引起。骨質(zhì)疏松癥因成熟骨中骨礦物質(zhì)密度的降低引起，并且在最小限度的外傷之后導(dǎo)致骨折。這種疾病是普遍的，并且有巨大的經(jīng)濟(jì)影響。最常見(jiàn)的骨折發(fā)生在推骨、橈骨遠(yuǎn)端和髖部。估計(jì)三分之一的65歲以上的女性群體將發(fā)生稚骨骨折，其中部分是由于骨質(zhì)疏松癥引起的。而且，大約每三個(gè)婦女中有一個(gè)和每六個(gè)男性中有一個(gè)很可能由于極度老齡而發(fā)生髖部骨折。骨折愈合是一個(gè)復(fù)雜的組織再生過(guò)程，涉及響應(yīng)于生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、其他信號(hào)分子和機(jī)械環(huán)境的細(xì)胞遷移、增殖、細(xì)胞凋亡和分化。為了最佳的再生必須控制每個(gè)細(xì)胞過(guò)程的時(shí)間順序和程度。骨折愈合的正常事件在下面描述為分4個(gè)階段發(fā)生。在起始階段，血腫形成和局部組織缺氧是骨折愈合的起始的細(xì)胞和分子事件。第二階段，被稱為早期階段，特征為炎癥，隨后細(xì)胞在骨折部位快速積累。巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞在炎癥過(guò)程中在骨折部位的出現(xiàn)先于間充質(zhì)細(xì)胞在骨折部位的快速遷移和增殖。在第三階段，再生階段，軟骨內(nèi)骨化產(chǎn)生了新骨，新骨連接骨折。在這一點(diǎn)上，骨折的骨痂具有明確的形態(tài)。膜內(nèi)的骨化在骨痂外圍產(chǎn)生了骨膜骨的支持物。在骨痂中的間充質(zhì)細(xì)胞開(kāi)始在骨膜骨支持物的界面分化為軟骨細(xì)胞。每種新的軟骨細(xì)胞如希望的那樣發(fā)展為具有基質(zhì)沉積，緊接著基質(zhì)鈣化，產(chǎn)生鈣化的軟骨，然后為細(xì)胞凋亡。通道從骨膜骨支持物開(kāi)始形成為鈣化軟骨。骨。當(dāng)軟骨細(xì)胞分化從外圍發(fā)生到骨痂中心(骨折部位)時(shí)，緊跟著為通道形成，成骨細(xì)胞分化，和新骨形成，直到軟的骨痂被編織(woven)(未成熟的)骨取代。再生階段的血管生成是關(guān)鍵的。在再生階段產(chǎn)生的未成熟的編織骨在機(jī)械上不適于普通的承重。為補(bǔ)償編織骨的降低的機(jī)械性能，骨折骨痂具有顯著更大的直徑，其提供更大的結(jié)構(gòu)機(jī)械性能。最終為重塑階段，骨折骨痂直徑變小直到骨獲得其通常大小，同時(shí)通過(guò)提高材料機(jī)械性能維持骨的總體機(jī)械性能。這伴隨著用機(jī)械性強(qiáng)的薄片狀(成熟的)骨取代機(jī)械性較差的編織骨。在連續(xù)幾輪中，破骨細(xì)胞吸收編織骨，成骨細(xì)胞用薄片狀骨取代它。控制破骨細(xì)胞形成和功能的分子機(jī)理貫穿于RANKL-RANK途徑中，并且這種途徑在骨折愈合過(guò)程中被活化。通常通過(guò)骨折的閉合復(fù)位和患骨的固定來(lái)保守性治療骨折。在這樣的情況中，骨骼通過(guò)上述軟骨內(nèi)骨化途徑愈合。包括維生素C、維生素D和鈣在內(nèi)的適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)物有助于愈合。自從20世紀(jì)中期骨折的切開(kāi)復(fù)位和內(nèi)部固定變得普遍以來(lái)，骨折的治療沒(méi)有重大的進(jìn)展。提高骨折愈合的生長(zhǎng)因子治療的前景仍然沒(méi)有實(shí)現(xiàn)。不幸的是，許多骨折需要外科手術(shù)干預(yù)以提高愈合成功率并降低并發(fā)癥的可能性。只有一種被批準(zhǔn)的骨愈合的藥理學(xué)增強(qiáng)，那就是用重組骨形態(tài)發(fā)生蛋白BMP-2或BMP-7(OP-l)治療。這些生長(zhǎng)因子的應(yīng)用需要外科手術(shù)，并且由于費(fèi)用和由使用超生理學(xué)水平的生長(zhǎng)因子引起的未知的潛在副作用，BMP用作治療頑固性骨折的最后手段。典型的病人護(hù)理也涉及在治療過(guò)程中施用抗生素、鎮(zhèn)靜劑、NSAID、COX-2抑制劑或其他止痛藥。NSAID抑制環(huán)加氧酶，由此抑制花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素(PGD2、PGE2、PGF2a、PGI2、TXA2)。花生四烯酸也是白三烯(LTB4、LTC4、LTD4、LTE4)、月旨氧素(LXA4、LXB4)和5-鞋二十碳四烯酸(5-HETE)的前體。例如，5-脂氧合酶(5-LO)將花生四烯酸轉(zhuǎn)化為5-過(guò)氧羥基二十碳四烯酸(S-HpETE)。這是產(chǎn)生5-HETE、白三烯(LT)和脂氧素的代謝途徑的第一步。白三烯也是促炎性的，具有吸引嗜中性粒細(xì)胞并且導(dǎo)致毛細(xì)管滲透性的能力?；ㄉ南┧岽x途徑概括在圖1中。脂氧合酶是在植物和動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)的含非血紅素鐵的酶，催化某些聚不飽和脂肪酸例如脂和脂蛋白的氧化。已知幾種脂氧合酶，每種具有特有的氧化作用。哺乳動(dòng)物脂氧合酶根據(jù)被氧化的花生四烯酸中的位點(diǎn)來(lái)命名。例如，5-脂氧合酶將花生四晞酸轉(zhuǎn)化為5-過(guò)氧羥基二十碳四烯酸(5-HpETE),而12-脂氧合酶將花生四烯酸轉(zhuǎn)化為12-HpETE。5-脂氧合酶的活性需要一種通常被稱為FLAP(五脂氧合酶活化蛋白)的輔因子。白三烯合成被抑制FLAP的藥物(MK866)或缺乏FLAP的小鼠所降低。WO95/30419公開(kāi)了降低破骨細(xì)胞活性的5-LO抑制劑。破骨細(xì)胞活性的抑制抑制了骨吸收并且降低了人病理狀況中的骨損失。骨吸收是骨折愈合的必要部分，因?yàn)樗菍⑿滦纬傻墓侵厮転楦鼜?qiáng)硬、更成熟的骨所必需的。骨吸收的抑制預(yù)計(jì)將削弱正常骨折愈合的后續(xù)階段。Koivukangas等人，丄owg-^777a^m.m、/ra"owo/c/oc/ra"她c/o^s"c^/reve/7f/m"wrez>zClinicalOrthopaedicsandRelatedResearch408:268-278(2003)和Peter等人聯(lián)"0/a/^腦她yhafc/we/zea/Zwg朋(i6oweremoJe//wgc/og\y。JournalofOrthopaedicResearch14:74-79(1996)公開(kāi)了二膦酸鹽治療對(duì)于骨折愈合的效果。數(shù)據(jù)顯示削弱破骨細(xì)胞活性和骨重塑的二膦酸鹽治療不抑制骨折修復(fù)的起始階段，但削弱后續(xù)的骨重塑階段。揭示了二膦酸鹽對(duì)于骨折愈合的效果為保持包含機(jī)械上未成熟的編織骨而不是機(jī)械上成熟的薄片狀骨的大骨折骨痂。WO03/066048公開(kāi)了12/15-脂氧合酶抑制劑可用于防止骨損失或增加骨質(zhì)量。該公開(kāi)文本描述的數(shù)據(jù)顯示骨礦物質(zhì)密度在過(guò)量表達(dá)IL-4和用15-LO抑制劑處理的轉(zhuǎn)基因小鼠中保持。該公開(kāi)文本沒(méi)有公開(kāi)15-LO抑制劑可輔助骨折愈合或治療骨不連接。Traianedes，K.，等人，5-丄^pox少gewa5^mef"6o/zYe51/w/n'Z)z76owe/orm^/owW/ra.Endocrinology,139:3178-3184(1998)公開(kāi)了LTB4、5-HETE和LTD4(5-LO功能的全部產(chǎn)品)對(duì)于大鼠胚胎顱頂(成骨細(xì)胞)細(xì)胞的分化的效果。數(shù)據(jù)顯示5-HETE和LTB4在體外降低了骨結(jié)形成和堿性磷酸酶活性，但是LTD4沒(méi)有效果。來(lái)自一種體外器官培養(yǎng);f莫型的結(jié)果顯示了LTB4或5-HETE治療防止了BMP2誘導(dǎo)的小鼠顱頂層厚度增加。但是，該公開(kāi)文本沒(méi)有公開(kāi)使用任何5-LO抑制劑，也沒(méi)有公開(kāi)5-LO抑制將在培養(yǎng)的成骨細(xì)胞或在器官培養(yǎng)物中導(dǎo)致相同的效果。類似地，Ren和Dziak，o//ew&oWew^owoj化o6/"Wce〃/ro/i/bY7&ow.CalcifiedTissueInternational49:197-201(1991)公開(kāi)了LTB4處理在體外降低了初級(jí)大鼠顱頂(成骨細(xì)胞)培養(yǎng)物的增殖，但是LTB4在較高濃度(0.3-1微摩爾)時(shí)在體外可促進(jìn)建立的成骨細(xì)胞系(Saos-2和G292)的增殖。Ren和Dziak還公開(kāi)了LTC4對(duì)于初級(jí)大鼠成骨細(xì)胞或Saos-2細(xì)胞的增殖沒(méi)有效果，^旦是促進(jìn)了G292細(xì)胞的增殖。而且，Ren和Dziak公開(kāi)了用一種5-LO抑制劑(AA-861)處理Saos-2細(xì)胞對(duì)于Saos-2細(xì)胞增殖沒(méi)有效果。該公開(kāi)文本表明5-LO抑制對(duì)于骨生成應(yīng)該沒(méi)有效果。因此，很明顯非常期待加速或增強(qiáng)骨形成或骨折愈合的組合物和方法。概述本發(fā)明提供了通過(guò)施用降低5-脂氧合酶活性的化合物促進(jìn)骨生成，以治療骨折、骨質(zhì)缺損或通過(guò)誘導(dǎo)骨形成而治療的疾病的方法。在本發(fā)明的另一方面，本方法可進(jìn)一步包括一種附加活性劑例如環(huán)加氧酶活性調(diào)節(jié)劑。在一個(gè)方面，環(huán)加氧酶-2(COX-2)的活性被提高。在另一方面，環(huán)加氧酶-1(C0X-1)的活性被降低。在一個(gè)方面，本方法采用在體內(nèi)施用化合物。在另一方面，離體(exvivo)施用4匕合物。在一個(gè)方面，所述化合物是一種小分子。在另一方面，所述化合物是一種反義化合物。在另一方面，所述化合物是一種RNAi化合物。本發(fā)明的這些和其他方面在參考下面更詳細(xì)的描述和附圖后將成為明顯的。另外，在此說(shuō)明了多種參考文獻(xiàn)，其詳細(xì)描述了某種方法或組合物，并且因此全文引入作為參考。圖1概述了一種示例性的花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑。圖2闡明了通過(guò)改變環(huán)加氧酶活性或脂氧合酶活性而對(duì)花生四烯酸代謝的調(diào)節(jié)，以加速或增強(qiáng)骨形成。圖2A代表了該途徑的正常功能。圖2B顯示了COX-2活性的抑制導(dǎo)致過(guò)量的白三烯的產(chǎn)生，這損害了骨折愈合或其他骨生成過(guò)程中的骨形成。圖2C顯示了脂氧合酶活性的抑制導(dǎo)致過(guò)量的前列腺素產(chǎn)生，其加速或增強(qiáng)了骨折修復(fù)或其他骨生成過(guò)程的骨形成。圖3顯示了由5LO-A小鼠和一種正常小鼠(C57BL/6)形成的股骨骨折的系列X-射線。X-射線顯示了骨生成，并因此5LOV-小鼠中的骨折愈合加速。圖4闡明了在骨折開(kāi)始后28天和84天，在野生型(WT)和5-LO敲除小鼠(5LO-KO或5-LO-/-)中的骨折愈合的機(jī)械測(cè)試數(shù)據(jù)。轉(zhuǎn)矩峰值(圖4A)、剛度(圖4B)、最大剪應(yīng)力(圖4C)和剪切模量(圖4D)根據(jù)骨痂尺寸和轉(zhuǎn)矩相對(duì)于角移位的曲線計(jì)算。圖5闡明了在骨折后7、10、14和21天，野生型(WT)和5-LO敲除小鼠(5-LOKO或5丄0-/-)的骨折愈合的組織形態(tài)測(cè)定數(shù)據(jù)。左欄顯示了為新形成骨(礦化組織)的骨折骨痂面積百分比，右欄顯示了為軟骨的骨折骨痂面積百分比。圖6顯示了在COX-2敲除小鼠中骨折愈合顯著削弱，并且由于骨生成(新骨形成)的缺乏而發(fā)生愈合缺陷。圖6A顯示了來(lái)自X-射線的數(shù)據(jù)，圖6B和6C顯示了缺少功能性COX-l基因的小鼠中14天股骨骨折的組織學(xué)樣本。圖6D顯示了來(lái)自X-射線的數(shù)據(jù)，圖6E和6F顯示了在缺少功能性COX-2基因的小鼠中14天股骨骨折的組織學(xué)樣本。圖7闡明了在用5-LO抑制劑處理的大鼠中骨生成加速，導(dǎo)致骨折愈合快于未處理的大鼠。圖8闡明了用兩種不同的5-LO抑制劑處理的大鼠的骨生成加速，導(dǎo)致骨折愈合快于未處理的大鼠。圖8A、8B和8C顯示了來(lái)自載體對(duì)照(8A)、NDGA(8B)和AA-861(8C)的X-射線的數(shù)據(jù)。圖8D是顯示5-LO的抑制提高了骨折骨痂轉(zhuǎn)矩峰值的圖。發(fā)明詳述除非另外說(shuō)明，本發(fā)明的實(shí)施將采用本領(lǐng)域技術(shù)范圍內(nèi)的蛋白質(zhì)化學(xué)、生物化學(xué)、重組DNA技術(shù)和藥理學(xué)常少見(jiàn)方法。所述技術(shù)在文獻(xiàn)中充分說(shuō)明。見(jiàn)例如，T.E.Creighton,/Voto'rav;SVrac^msM/ectz/ar/VopeWes(W.H.FreemanandCompany,1993);A丄.Lehninger,^/oc/zem/s^jPublishers,Inc.,currentaddition);Sambrook,等人，Mo/ecw/"rC7om'"g:丄"6ora紐少M(fèi)aww"/(2ndEdition,1989);M"/zo^y五wz，o/ogy(S.ColowickandN.Kaplaneds.，AcademicPress,Inc.);iem/wgtow、尸/z"rmacew"ca/Sc/e"ces，18thEdition(Eastern,Pennsylvania:MackPublishingCompany,1990);Carey禾口Sundbergjc/vawcet/CVgam'cC7zew/Wr少3"五d.(PlenumPress)VolsAandB(1992)。所有的在此引用的出版物、專利和專利申請(qǐng)，無(wú)論是上文還是下文的，都全文在此引入作為參考。L定義在描述本發(fā)明時(shí)，將使用下面的術(shù)語(yǔ)，它們?nèi)缦滤径x。"調(diào)節(jié)花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑"的意思是利用一種藥物或化合物，該藥物或化合物抑制或促進(jìn)細(xì)胞或動(dòng)物內(nèi)花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑涉及到的任何酶或調(diào)節(jié)分子的活性或濃度。優(yōu)選的藥物或化合物可選自FLAP抑制劑例如BAYx1005、MK-886和MK-0591;5-月旨氧合酶抑制劑例如齊留通、BAY畫G576、RS國(guó)43,179、Wy-47,288、ABT-761、維生素A和BWA4C;白三烯受體拮抗劑例如扎魯司特、孟魯司特、普侖司特、ICI204,219、MK畫571、MK-679、ONO-RS-411、SK&F104,353和Wy-48，252;白三烯B4受體拮抗劑；白三烯C4合酶抑制劑；白三烯A4水解酶抑制劑；非甾體抗炎藥(NSAID),白三烯受體拮抗劑和白三烯類似物，調(diào)節(jié)白三烯形成和作用的化合物，影響環(huán)加氧酶活性的化合物，影響前列腺素活性的化合物例如受體激動(dòng)劑或拮抗劑，前列腺類似物，影響白三烯活性的化合物例如受體激動(dòng)劑或4吉抗劑，和白三烯類如乂物。"加速，，意思是與未治療的受試者或?qū)φ帐茉囌呦啾?，被治療的受試者的骨生成發(fā)生得更快并且骨愈合需要的時(shí)間縮短，或骨愈合得更快。"增強(qiáng)，，意思是與未治療的受試者或?qū)φ帐茉囌呦啾?，被治療的受試者的愈合骨具有提高的性能，例如更高的骨?qiáng)度。"骨折愈合"或"骨折修復(fù)"意思是，特別是，促進(jìn)骨折和骨質(zhì)缺損的愈合，提高愈合的骨折或部位的機(jī)械穩(wěn)定性。所述骨折可以是，例如，普通的、外傷性(傷殘性和非骨質(zhì)疏松性)骨折，由任何病因的骨質(zhì)疏松或骨質(zhì)減少引起的骨質(zhì)疏松性骨折，由佩吉特病引起的骨折，或由其他藥物的副作用所致骨損失引起的骨折，例如，在接受了高劑量的皮質(zhì)類固醇的病人中，由其他先天性或獲得性疾病例如成骨不全和乳癌引起的骨折，用于(例如)骨延長(zhǎng)和肢體延長(zhǎng)手術(shù)和治療骨折延遲的連接或不連接的外科手術(shù)產(chǎn)生的骨折(截骨術(shù))。本發(fā)明利用本領(lǐng)域熟練人員公知的技術(shù)通過(guò)加速或增強(qiáng)骨的形成而加強(qiáng)了骨折正常修復(fù)和固定后的骨折愈合。"骨形成"意思是在根據(jù)本發(fā)明的方法治療的受試者中，例如，在接受5-脂氧合酶抑制劑的受試者中，骨形成速度提高到超過(guò)未接受5-脂氧合酶抑制劑的受試者的骨形成速度。所述提高的骨形成在此用(例如)定量數(shù)字化形態(tài)測(cè)量法和骨形成的其他標(biāo)記來(lái)確定。骨形成包括用于脊柱融合和其他關(guān)節(jié)或骨關(guān)節(jié)強(qiáng)硬應(yīng)用的成骨過(guò)程，向假體裝置內(nèi)或周圍的骨形成，或加強(qiáng)存在的骨或替代缺失的骨或骨節(jié)段的骨形成。"骨生成，，意思是與骨折修復(fù)相關(guān)的骨的產(chǎn)生，由故意或非故意損害引起的缺損骨的修復(fù)，或用于融合一個(gè)以上的骨或骨節(jié)段的骨形成的誘導(dǎo)。"骨生成，，不包括與青少年正常骨生長(zhǎng)相關(guān)的骨形成。"骨生成"也不包括與正常骨動(dòng)態(tài)平衡相關(guān)的骨形成，其通常被稱為骨重塑，其中骨通過(guò)破骨細(xì)胞吸收骨而成骨細(xì)胞使新骨替代被吸收的骨的方法正常更新。"骨質(zhì)缺損，，意思是骨的損害以致骨的一部分被移除或缺失。所述骨質(zhì)缺損包括用于診斷或治療方法目的在骨中產(chǎn)生的不規(guī)則的洞、缺口或開(kāi)口，由骨外傷或疾病、刺傷引起的骨節(jié)段的喪失，等等。術(shù)語(yǔ)"調(diào)節(jié)，，指調(diào)節(jié)物對(duì)于花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑的影響。調(diào)節(jié)物可以是，例如能夠?qū)е抡{(diào)節(jié)的多肽、核酸、大分子、復(fù)合分子、小分子、化合物等(天然存在或非天然存在的)。通過(guò)包含在測(cè)量該途徑中酶活性的測(cè)試中，可以評(píng)價(jià)調(diào)節(jié)物作為功能性質(zhì)、生物活性或過(guò)程或其組合的(直接或間接)抑制劑或活化劑(例如，激動(dòng)劑、部分拮抗劑、部分激動(dòng)劑、反向激動(dòng)劑、拮抗劑等)的潛在活性。術(shù)語(yǔ)"有效量"或"藥物有效量"指提供期望的生物學(xué)結(jié)果的藥劑的充分量。該結(jié)果可以是疾病的體征、癥狀或病因的降低和/或緩和，或其他任何期望的生物系統(tǒng)的改變。例如，治療用途的"有效量"是包含提供以下效果所需的此處活性化合物的組合物的量骨生成和骨折修復(fù)愈合速度臨床上顯著的增加；軟骨缺損或疾病的逆轉(zhuǎn)；骨折不連接、遲延連接和牽拉骨生成中骨形成的刺激和/或增強(qiáng)；骨向假體裝置內(nèi)生長(zhǎng)的提高和/或加速；增強(qiáng)或加速的關(guān)節(jié)強(qiáng)硬、骨關(guān)節(jié)強(qiáng)硬或脊柱融合中的骨形成，為增強(qiáng)現(xiàn)存骨或取代缺失骨或骨節(jié)段的骨形成，例如在自體移植、異體移植或合成骨材料引入和牙體缺損修復(fù)中的骨形成。如此處所用的術(shù)語(yǔ)"治療"(treat)或"治療"(treatment)可互換使用，表示根據(jù)本發(fā)明方法施用一種或多種化合物以促進(jìn)骨生成以獲得期望的治療目的。該術(shù)語(yǔ)進(jìn)一步包括改善現(xiàn)存骨或軟骨缺損癥狀、防止其他癥狀、改善或防止癥狀的潛在代謝病因、和/或促進(jìn)骨生長(zhǎng)。如此處所用的"小分子"表示一種分子量小于大約500道爾頓的化學(xué)化合物。小分子不包括生物聚合物例如多肽和聚核苷酸。"藥學(xué)上可接受的"或"藥理學(xué)上可接受的"表示在生物學(xué)上或其他方面無(wú)害的物質(zhì)，即，該物質(zhì)可以給個(gè)體施用而不導(dǎo)致任何不期望的生物學(xué)效應(yīng)或以有害的方式與組合物中包含的任何成分相互作用。"生理學(xué)pH"或"在生理學(xué)范圍內(nèi)的pH"表示在大約7.2到8.0(含)范圍內(nèi)，更典型地在大約7.2到7.6(含)的范圍內(nèi)的pH。如此處所用的術(shù)語(yǔ)"受試者"包括哺乳動(dòng)物。哺乳動(dòng)物的例子包括，但不限于，哺乳動(dòng)物綱的任何成員人，非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物例如黑猩猩，和其他猿和猴種；農(nóng)畜例如牛、馬、綿羊、山羊、豬；家畜例如兔子、狗和貓；實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物包括嚙齒動(dòng)物，例如大鼠、小鼠和豚鼠，等等。該術(shù)語(yǔ)不表示特定的年齡或性別。本發(fā)明的化合物可以用于抑制或降低5-脂氧合酶、5-脂氧合酶和環(huán)加氧酶、和花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑中的其他酶和化合物的活性。在上下文中，酶活性的抑制和降低指測(cè)定的活性水平低于酶、細(xì)胞或受試者沒(méi)有用測(cè)試化合物進(jìn)行處理的對(duì)照試驗(yàn)。在特定實(shí)施方式人員將認(rèn)識(shí)到測(cè)定的活性至少降低或抑制20%、50%、75%、90%或100%或10%到100%之間的任意量對(duì)于特定應(yīng)用是優(yōu)選的。酶活性的抑制可通過(guò)任何機(jī)理，包括，例如，但不限于，降低酶的存在量，對(duì)催化活性的竟?fàn)幮曰蚍蔷範(fàn)幮砸种?，干擾酶和輔因子或輔助蛋白質(zhì)的相互作用，等等。另外，本發(fā)明的化合物還可用于提高C0X-2活性。在特定的實(shí)施方式中，酶活性的提高指測(cè)定的活性水平高于酶、細(xì)胞或受試者沒(méi)有用測(cè)試化合物進(jìn)行處理的對(duì)照試驗(yàn)。在特定實(shí)施方式中，測(cè)定的活性的提高是至少10%的提高。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到測(cè)定的活性至少^是高20%、50%、75%、90%或100%或在10%到100%之間或更高的任意量對(duì)于特定應(yīng)用是優(yōu)選的。酶活性的提高可通過(guò)任何機(jī)理，包括，例如但不限于，提高酶的存在量，或提高酶的轉(zhuǎn)化率，或改變其底物結(jié)合特性。提到酶5-脂氧合酶(5-LO)、COX-l和COX-2，包括表1中引用的示例性序列，其中的一些緊接在下表1之后提供，還有與示例性序列至少90%相同，或至少95%,或至少96%,或至少97%，或至少98%,或至少99%相同的序列，本領(lǐng)域普通4支術(shù)人員通過(guò)常M^序列比對(duì)算法例如BLAST就可確定這些序列。另外，還包括其他哺乳動(dòng)物同源物。所述同源物根據(jù)例如序列類似性、功能類似性和通過(guò)染色體定位而鑒別。除了蛋白質(zhì)序列以外，還提供了示例性的核酸序列，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)這些序列可以容易地獲得可用于根據(jù)本發(fā)明的方法抑制酶活性的反義和RNAi化合物的序列。用于實(shí)施本發(fā)明的反義化合物是本領(lǐng)域已知的，并且可通過(guò)商業(yè)途徑獲得，例如在Ding等人(1999)BBRCVol.261，pp.218-223(引入作為參考)中描述。表1-示例性序列<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>1.mRNA序列之間的類似性。2.蛋白質(zhì)序列之間的類似性。人5-脂氧合酶mRNA序列(GenBankRefS叫NM—000698)(SEQIDNO:1)1gccagggaccgcgctagatgcggacacctggaccgccgcg61ccgaggctcccggcgctcgctgctcccgcggcccgcgccatgccctcctacscggtcscc121gtggccactggcagccagtggttcgccggcactgacgactacatctacctcagcctcgtg181ggctcggcgggctgcsgcgaga_3gc3cctgctggac貼gcccttctacaacgacttcgag241cgtggcgcggtggattcatacgacgtgactgtggscgsggaactgggcgagatccagctg301gtcagaatcggtactggctgaatgacgactggtacctgaagtacatcacg361ctgaagacgccccacggggattcccctgctaccgctggatcaccggcgat421gtcgaggttgtcctgagggatggscgcgcaaagttggcccgagatgaccaaattcacatt481ctcaagcaacaccgacgtaaaacaatatcgatggatggag541tggaaccctggcttccccttgagcatcgatgccaaatgccacaaggatttaccccgtgat601atccagtttg巧gagtggactttgttctga6S1aacctgttcatcaaccgcttcatgcscatgttccagtcttcttggwtgacttcgccgac721tctttgtcaaactatttctggaatcactgg781csgg貼g3cctgatgtttggctaccagttcctgaatggctgcaaccctgtgttgatccgg841cgctgcacagagctgcccgagaagctcccggtgsccacgggtgcagcctg901gsigcggcagctcagcttggagcsggsggtccagcaagggaacattttcatcgtggacttt9S1gagctgctgg3tggc3tcgsacagacccctgcacactccagttcctggcc1021gctcccatctgcttgctgtattgtccccattgccatccag1081tcccgggagatgagaaccctattttcctcccttcggatgc1141tggcttttggccaaaatctgggtgcgttccagtgacttccacgtccaccagaccatcacc1201caccttctgcgaacacatctggtgtctgaggtttttggcattgcaatgtaccgccagctg1261cctgctgtgcaccccattttcaagctgctggtggcacacgtgagattcaccattgcaatc1321cccgtgagcagctcatctgcgagtgtggcctctttgacaaggccaacgcc1381scsgggggcggtgggcacgtgcagatggtgcagagggccatgsaggscctgacctatgcc1441tccctgtgctttcccgaggccatcsaggcccggggcatggagacatcccc1501tactacttctcgggctcctggttcacggcc1561gaggtggtagacatctactsicgagggcgaccaggtggtggsggaggaLcccggagctgcsg1621gacttcgtgaacgatgtctacgtgtacggcstgcggggccgcaagtcctcaggcttcccc1681aagtcggtcaagagccgggagcagctgtcggagtacctgaccgtggtgatcttcaccgcc1741tccgcccagcacgccgcggtcaacttcggccagtacgactggtgctcctggatccccaat1801gcgcccccaaccatgcgagccccgccaccgactgccaagggcgtggtgaccattgagcag1861atcgtggacacgctgcccgaccgcggccgctcctgctggcatctgggtgc巧tgtgggcg1921ctgagccagttccaggaaaacgagctgttcctgggcstgtacccagaagsgcattttatc1981gagaagcctgtgaaggaagccatggcccgattccgcaagaacctcgaggccattgtcagc2041gtgattgctgagcgcaacaagaagaagcag"ctgccatattactacttgtccccagaccgg2101attccgaacagtgtggccatctgagcacactgccagtctcactgtgggaaggccagctgc2161cccagccagatggactccagcctgcctggcaggctgtctggccaggcctc2221C3tCtCttCCtccgaggccagtacctttccatttattctttgatcttcagggaactgcat2281agattgatcaaagtgtaaacaccatagggacccattctacacagagcagg3Ctgc3csgc2341gtcctgtccacacccagctcagcatttccatcacgaccac2401tgatagatgtctattcttgttggagacatgggatgattattttctgttctatttgtgctt2461agtccaattccttgcaca±3gtaggtacccctattgaatg2521tggttgccatC3gttC3ttt人5一脂氧合酶蛋白質(zhì)序列(GenBankRefSeqNM—000698)(SEQIDNO:2)人FLAPmRNA序列(GenBankRefSeqNM001629)(SEQIDNO:3)1acttccccttcctgtacagggcaggttgtgcagctggaggctctctgggg61agcctgaagctaggcaatgttgtcctgttggccatcgtca121ccctcatcagcgtggtccagaatggattctttgcccataaagtggagcac181cccagaatgggaggagcttcgaacacttgcctttgagcgggtctacactg241ctgtgtagatgcgtaccccactttcctcgctgtgctctggtctgcggggc301tactttgcagccaagttcctgctgcgtttgctggactgatgtacttgttt361agtactttgtcggttacctacgcagagcacccctggctacatatttggga421actcttcctgttcctcatgtccgttgctggcatattcaactattacctca481tcttctttttcggaagtgsctttgaaaactacataaagacgatctccaccaccatctccc541ctctacttctcattccctaactctctgctgMtatggggttggtgttctc601tacctacaagtcatcataattcagctcttgagagcattctgctcttctttagstggctgt661aaatctattggccatctgggcttcacagcttgagttaaccttgcttttcc721tgatgtcatgtcagctccgccccttgaacatgaccgtggccccaaatttgctattcccat781gcattttgtttgtttcttcacttatcctgttctctgaagatgttttgtgaccaggtttgt841gttttcttaaaataaaatgcttt人FLAP蛋白質(zhì)序列(GenBankRefSeqNM—001629)(SEQIDNO:4)IKTISTTISPMjLjIP人COX-2mRNA序列(GenBankRefSeqNM00963)(SEQIDNO:5)1caattgtcstacgacttgcagtgagcgtcaggagcacgtccaggaactcctcagcagcgc61ctccttcagctccacagccagacgccctcagacagcaaagcctacccccgcgccgcgccc121tgcccgccgctcggatgctcgcccgcgccctgctgctgtgcgcggtcctggcgctcagcc181tccttgctgttCCC3CCC3tstgagtgtgg241gatt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tttgggctgcttcct1021gggctcatgctgtatgccacgctctggctacgtgagcacsaccgtgtgtgtgacctgctg1081accccacctggggcgatgagcagcttttccagscgacccgcctcatcctc1141ccatcaagattgtcatcgaggagtacgtgcagcagctgagtggctattttc1201ctgcagctgaaatttgacccagagctgctgttcggtgtccagttccaataccgcaaccgc1261attgccatggagttcaaccatctctaccactggcaccccctcatgcctgactccttcaag1321gtgggctcccaggagtacagctacgagcagttcttgttcaacacctccatgttggtggac1381tatggggttgaggccctggtggatgccttctctcgccagattgctggccggatcggtggg1441ggcaggaacstggaccaccacatcctgcatgtggctgtggatgtcatcagggagtctcgg1501gsgatgcggctgcagcccttcastgsgtaccgcaagaggtttggcatgaa3ccctsca_cc1561tccttccaggagctcgtagg3tggcagc3g1621gacattgatgcgttggagttctaccctggactgcttcttgtccaaactct1S81atctttggggagagtatgatagsgattggggctcccttttccctcaagggtctcctaggg17413atcccatctgttctccggaccgagcacatttggcggcgaggtgggcttt18013ac3ttgtC3agacggccacctggtctgccgacctgtccc1861tacgtttccttccgtgtgccggatgccagtggcctgctgtggagcgacca1921tccacagsgctctgaggggccattctggaggggagagctttgtgcttgtc1981attccagagtgctgaggccagggctgatggtcttaaatgctcattttctggtttggcstg2041gtgagtgttggggttgacatttagaactttaagtctcacccattatctggsatattgtga2101ttctgtttattcttccagaatgctgaactccttgttagcccttcagattgttaggagtgg2161ttctcatttggtctgcca_ga_a±actgggttctta_gttga_cgtcagatttc2221tggttgatttgtaacacagtcattctaggatgtggagctactgatgaaatctgctagaaa2281gttagggggttcttattttgtcttgactttctgattggtgattcaaagtg2341ttgtgttcctggctgatgatccagaacagtggctcgtatcccaaatctgtcagcatctgg2401ctgtctagsaitgtggatttgattcattttcctgttcagtggagacggaga2461tcctaaggtcgcattccctgaatctgtgcctgcactgagagggc33gg332521gtggggtgttcttcttgggaCCCCC3Ct33gaccctggtctgsggatgta2581gtgggctgtattcacgccattggttggaagctaccagagctctatccccatccaggtctt2641gactcatggcagctgtttctcatgaagctactttctaaagttacctgtta2701tatatctcttttggtcccatcctctaaagcagaggcaacactggaacatggctagccttt2761cttgtsgccstggctgggcgtgctagaggttgcagcatgagactttctgctgggatcctt2821gggcccatcactgtatagac3tgctacc3ctggtacttcctttctccctgcgggccaggc2881actgcccttttcaggaagctacccattgccccagacctgg2941attcagttcccaccatctgattcctccctt3001ggcacccggggaggagagcacatactgtgttccaatttcacgcttttaattctcatttgt3061tctcacaccaacagtgtgaagtgcgtggtataatctccatttcaaaacca3121ctcsgagtggtcgagtgacacacctcacgc巧gctgagtccagagcttgtgctcctcttg3181attcctggtttgactcagttccaggcctgatcttgcctgtctggctcsgg3241gaatggtggagtgtagcctcC3cctgatsttcaggctactcattcagtcccaaatatgta3301ttttcctaagtgtttactatgtgccagttcctgtsaca^ggtgtggggscscagcagtgag3361agacaaggttctgcccttatggagctcacactccagtggc3421atatacaaggtgagtgtgacttcccttcta3481accccctctgctctgtcctcccctattgcgctctcaagaccagagaccca3541tctcagggcagacagccctccactccagctctgagacccttttctcaggacctctgtagg3601cagcagagagggggtaagatgggaaggttcttcatgatcc3661acactttgggcttagtatttctcaggaagagctatggcccggggaaacts3721gagttcggtctgacagtccttggggttaagtctcctgtcttatggtccagaaactcctgt3781ttctccttsgttggctggaaactgctcccatcattccttctggcctctgc3841gaatgcaatccttccctgctcttgcagttgctctgacgtagaaagatccttcgggtgctg3901gaagtctccatgaa_g3gcttgtgtcctgtcctttcttgcagattctatttcccctcttct3961gctastscctcttactttgcttgagaatcctctcctttcttattaatttcagtcttggtg4021gttctatcaggggtgcattctggccaaggggtgggcctgtgaatcaatcctgggcsatca4081gacaccctcttggcccgtggagactgagstcactgactctgactcatccc4141cacagctggctctgacaiagatggtccatttgttcctgcttccgagatccccagggcagcc4201tggatccctgcccttctcaagactttagcttttccttccstccggtggcctattccagga4261attcctcttttgcttaaatcagttggagtttgtgtctgttgcttgtaatcaagcctttat4321ggctgctgggctgagtgacacaagcactttaatggcctggagggactttt4381gatgcaatcagacaagtgttcaccctcgagsagggtggatgacagggcsg4441ggcagaacgg3gg3ggctgcsgccgtggtccaaccaggag4501ctggggctaggggaagggctttgagggtgg3aggatggg3tgggttccag4561aggtattcctctctta^atgcaagtgcctagattaggtagactttgcttagtattgacaa4621ctgcacatgaaagttttgcaggctaaL3tgccttcttcaga4681gtgaagaatcttaatgcttgtaatttaaacatttgttcctggagttttgatttggtggat4741gtgatggttggttttatttgtcagtttggttgggctatagcacacagttatttaatcaaa4801cagtaatctaggtgtggctgtgaaggtattttgtagatgtgattaacatctacaatcagt4861tgactttaagtgaaagagattacttaaataatttgggtgagctgcacctgattagttgaa4921aggcctcaagaacaascactgcagtttcctggaaaagasgsaactttgcctcsagsctat4981agccatcgactcctgcctgagtttccagcctgctagtctgccctatggatttgaagtttg5041ccaaccccaacaattgtgtgaattaatttctaaaaataaagctatatacagcc人COX-l蛋白質(zhì)序列(GenBankRefSeqNM_000962)(SEQIDNO:8)SQDDGPAVERPSTELjn.5-脂氧合酶抑制劑申請(qǐng)人現(xiàn)發(fā)現(xiàn)抑制5-脂氧合酶的活性可促進(jìn)骨生成，可利用這一點(diǎn)加速和/或增強(qiáng)骨折的愈合，治療骨質(zhì)缺損，或通過(guò)誘導(dǎo)骨形成進(jìn)行治療。申請(qǐng)人的發(fā)現(xiàn)是基于他的如下假說(shuō)COX-2功能的喪失抑制骨折愈合的一種潛在的機(jī)理是通過(guò)將花生四烯酸分流到脂氧合酶途徑，結(jié)果形成異常高的抑制性5-HETE、LTB4或其他5-LO代謝物水平(圖2)。在正常的炎癥反應(yīng)例如骨折中，前列腺素和白三烯的合成達(dá)到平衡(圖2A)。不束縛于一種理論，發(fā)明人建立了一種理論，認(rèn)為抑制COX-2功能將花生四烯酸分流到脂氧合酶途徑產(chǎn)生過(guò)量的白三烯，因而損害了骨形成(圖2B)。相反，通過(guò)抑制5-脂氧合酶活性，花生四烯酸被分流到環(huán)加氧酶途徑產(chǎn)生過(guò)量的前列腺素，前列腺素加速或增強(qiáng)骨形成(圖2C)。為檢驗(yàn)這種潛在的機(jī)理，在5丄0-/-小鼠中評(píng)價(jià)了骨折愈合。申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)5-LO功能的喪失加速了愈合。對(duì)C57BL/6背景的年齡匹配的小鼠中骨折愈合的放射檢查顯示在5-LO-A小鼠中到骨折后2周時(shí)發(fā)生骨折連接，對(duì)比之下，在正常小鼠中在骨折3周以后發(fā)生(圖3)。而且，骨痂重塑顯著加速，因此，基于扭轉(zhuǎn)機(jī)械試驗(yàn)，5-LO-A骨痂重獲其起始結(jié)構(gòu)和材料特性比正常小鼠快得多(圖4和表2)。因此，5-LO功能的喪失加速并增強(qiáng)了骨折愈合和骨形成。4丐化樣品的組織學(xué)檢查支持了放射數(shù)據(jù)。正常和5-LO-A小鼠骨折的塑料包埋的鈣化切片用Stevenel，sblue和vanGieson，spicrofuchsin染色，顯示在5-LO-A小鼠中愈合僅僅2周之后骨折與鉤化組織連接，然而正常小鼠(C57BL/6)仍然具有軟骨質(zhì)的柔軟的骨痂。骨折骨痂區(qū)域的組織形態(tài)測(cè)定顯示軟骨區(qū)域在5-LO-A小鼠中骨折7天后達(dá)到頂峰，在正常小鼠中骨折IO天后(圖5和表3)。骨折骨痂中的新骨(鉤化組織)的測(cè)量顯示愈合7天后在5-LO-A中的新骨幾乎是兩倍，而且在第10天時(shí)有顯著更多的新骨(圖5和表2)。這些數(shù)據(jù)顯示了在5-LO-A小鼠中正常的(雖然顯著加速的)軟骨內(nèi)的骨化途徑用于愈合骨折。利用更年輕和更老的5-LO-A小鼠在不同遺傳背景下進(jìn)行的試驗(yàn)給出了同樣的結(jié)果5-LO-A功能喪失導(dǎo)致骨再生的力口速。這些試驗(yàn)的數(shù)據(jù)顯示了在5-LO-A小鼠中10天的骨折骨痂與正常小鼠中的14天的骨痂相等；14天5-LO-A骨痂與21天正常骨痂相等；并且1個(gè)月的5丄0-/-骨痂與3個(gè)月正常骨痂相等(圖3)。因此，5-LO功能的喪失加速和/或增強(qiáng)了骨折愈合的再生和重塑階段。在本發(fā)明的一個(gè)方面，抑制5-脂氧合酶活性的化合物加速和/或增強(qiáng)了骨折愈合或防止了骨吸收或促進(jìn)了骨形成，為治療人類疾病的努力提供了重要的益處。抑制5-脂氧合酶活性的化合物可用于，例如，治療由于外傷或由于骨質(zhì)疏松或骨關(guān)節(jié)炎引起的骨折的方法，治療佩吉特病的方法，治療其他疾病例如骨移植和與高骨折相關(guān)的疾病的方法，和需要骨形成的方法，例如脊柱融合，其他骨和關(guān)節(jié)強(qiáng)硬操作，骨或肢體延長(zhǎng)，骨結(jié)構(gòu)加強(qiáng)，向骨質(zhì)缺損中引入同種異體移植物、自體移植物或合成骨材料，骨向假體裝置內(nèi)或周圍生長(zhǎng)，和其他類似的程序?？捎糜趯?shí)施本發(fā)明方法的幾種5-脂氧合酶抑制劑和它們的給藥是已知的。5-脂氧合酶抑制劑可以是3-[1-(4-氯千基)-3-叔丁基-硫基-5-異丙基吲哚-2-基]-2，2-二曱基丙酸(MK886)或其衍生物；3-(l-(4-氯芐基)-3-(l-丁基-硫基)-5-(喹啉-2-基-曱氧基)-吲哚-2-基)-2，2-二曱基丙酸)(MK-591)或其衍生物；去曱二氬愈創(chuàng)木酸(NDGA)或其衍生物;2-(12-羥基十二碳-5,10-二炔基)-3，5，6-三曱基-l，4-苯醌(AA861)或其衍生物；或(N-(l-苯并(b)瘞吩-2-基乙基)-N-羥基脲)(齊留通)或其衍生物。衍生物包括例如，可用作5-脂氧合酶抑制劑的藥學(xué)上可接受的鹽、前藥，等等。示例性化合物的衍生物落在所要求的發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明中利用的其他5-脂氧合酶抑制劑包括馬索羅酚、替尼達(dá)普、flobufen、氯萘帕林、他戈利噪、AbbottA-121798、AbbottA國(guó)76745、AbbottA-78773、AbbottA畫79H5、AbbottABT761、DainipponAL國(guó)3264、BayerBay畫x誦1005、BioforBF-389、布那司特、CytomedCMI-392、TakedaCV-6504、磷酸依那扎群、LeoDenmarkETH-615、鹽酸氟卓斯汀、MerckFrosstL-663536、MerckleML-3000、3MPharmaceuticalsR-840、利洛p比司、ScheringPloughSCH匿40120、替泊沙林、林那司特(TMK-688)、ZenecaZD-2138、Bristol-MyersSquibbBU-4601A、呻喳霉素C、lag腿mycin、WellcomeBW-70C、Ciba-GeigyCGS-26529、Warner-LambertCI1004、Warner-LambertPD-136005、Warner-LambertPD-145246、EisaiE-3040、FujirebioF-1322、FujisawaFR國(guó)l10302、MerckFrosstL-699333、MerckFrosstL-739010、LillyLY-269415、LillyLY-178002、HoechstRousselP-8892、SmithKlineBeechamSB-202235、AmericanHomeProductsWAY-121520、AmericanHomeProductsWAY畫125007、ZenecaZD-7717、ZenecaZM-216訓(xùn)、ZenecaZM-230487、1,2-二氬-n-(2-p塞唑基)-l-氧代吡咯并(3，2，l-kl)吩噻嗪-l-曱酰胺、AbbottA-65260、AbbottA畫69412、Abbott-63162、AmericanHomeProductsAHR-5333、BayerBay-q-1531、BoehringerIngdheimBI-L-357、BoehringerIngelheimBI-L-93BS、BoehringerIngelheimBIL226XX、Bristol-MyersSquibbBMY-30094、?？ㄟ蛎顾谺、WellcomeBW-B218C、ChauvinCBS-1114、Ciba-GeigyCGS-21595、Ciba-GeigyCGS-22745、Ciba-GeigyCGS-23885、Ciba-GeigyCGS24891、Ciba-GeigyCGS-8515、ChiesiCHF-1909、Warner-LambertCI-986、Warner-LambertCI987、去甲中國(guó)薊醇(cirsiliol)、多西苯醌、EisaiE陽(yáng)5110、EisaiE-6080、乙諾司特、epocarbazolin-A、依普4戈芬、依凡達(dá)明、FisonsFPL62064、ZenecaICI-211965、ZenecaICI-216800、KyowaHakkoKF-8940、Merck&CoL-651392、Merck&CoL-651896、Merck&CoL-652343、Merck&CoL-656224、Merck&CoL-670630、Merck&CoL-674636、LillyLY-233569、，Merck&CoMK-591、Merck&CoL-655240、nitrosoxacin-A、OnoONO-5349、OnoONO畫LP國(guó)219、OnoONO-LP-269、Warner-LambertPD-127443、PurdueFrederickPF-5901、Rhone-PoulencRorerRev-5367、Rhone-PoulencRorerRG-5901-A、Rhone-PoulencRorerRG-6866、Roussel-UclafRU-46057、SearleSC-41661A、SearleSC-45662、SandozSDZ-210-610、SmithKlineBeechamSK&F-104351、SmithKlineBeechamSK&F-104493、SmithKlineBeechamSK&F-105809、SynthelaboSL-81-0433、TeijinTEI-8005、Te畫oTMK-777、Te畫oTMK-781、TerumoTMK-789、TerumoTMK-919、TerumoTMK-992、TeikokuHormoneTZI-41127、AmericanHomeProductsWAY-120739、AmericanHomeProductsWY-47288、AmericanHomeProductsWY-48252、AmericanHomeProductsWY-50295、YoshitomiY-19432、4-{3-[4-(2-曱基-111-咪唑-1-基)苯硫基]}苯基-3,4,5，6-四氫-2H-p比喃-4-曱酰胺、七葉亭、菲尼酮和其衍生物、BI-L國(guó)239、5，8，11-二十碳三炔酸(ETI)、5,8,11，14-二十碳四炔酸(ETYA)、肉桂基-3，4國(guó)二羥基-ot-氰基肉桂酸酯、姜黃素、esculeitin、棉子酚、咖啡酸、黃芩黃素、7,7-二曱基二十碳二烯酸(DEDA)、Ly311727、溴烯醇內(nèi)酯、甲基花生四烯基氟代磷酸酯、.曱基y-亞麻基氟代磷酸酯、油基氧乙基磷酸膽堿、AACOCF3、n-(對(duì)戊基肉桂?；?鄰氨基苯曱酸、麥帕克林、奎納克林、阿的平、對(duì)溴苯曱酰曱基溴、馬兜鈴酸、皮質(zhì)類固醇、GlaxoSmithKline480848、GlaxoSmithKline659032、GlaxoSmithKline677116、BMS畫181162、MJ33和MillenniumPharmaceuticalsMLN977。更優(yōu)選的5-脂氧合酶抑制劑包括馬索羅酚、替尼達(dá)普、齊留通、flobufen、氯萘帕林、他戈利溱、AbbottA-121798、AbbottA-76745、AbbottA-78773、[(R)(+)N'-[[5-(4-氟苯氧基)呋喃-2-基]-l-曱基-2-丙炔基]-N-羥基脲(AbbottA-79175),]AbbottA-79175、AbbottABT761、DainipponAL-3264、BayerBay-x-1005、BioforBF-389、布那司特、CytomedCMI畫392、TakedaCV-6504、Ciba-GdgyCGS-26529、磷酸依那扎群、LeoDenmarkETH畫615、鹽酸氟卓斯汀、MerckFrosstL663536、MerckFrosstL699333、MerckleML-3000、3MPharmaceuticalsR-840、利洛吡司、ScheringPloughSCH40120、替泊沙林、林那司特(TMK-688)、ZenecaZD-7717、ZenecaZM-216800、ZenecaZM-230487、ZenecaZD-2138;和NDGA(去曱二氫愈創(chuàng)木酸)。進(jìn)一步更優(yōu)選的5-脂氧合酶抑制劑包括替尼達(dá)普、齊留通、flobufen、氯萘帕林、他戈利。秦、AA-861、AbbottA-121798、AbbottA-76745、AbbottA-78773、AbbottA-79175、AbbottABT761、Ciba-GeigyCGS-26529、BioforBF-389、CytomedCMI-392、LeoDenmarkETH-615、氯萘帕4木、MerckFrosstL699333、MerckleML-3000、3MPharmaceuticalsR-840、林那司特(TMK-688)、ZenecaZD-7717、ZenecaZM-216800、ZenecaZM-230487、ZenecaZD-2138和NDGA(去曱二氫愈創(chuàng)木酸)。在另一方面，本發(fā)明包括5-LO抑制劑和COX抑制劑及其用途。優(yōu)選地，COX抑制劑是一種選擇性COX-l抑制劑，也就是，抑制COX-l活性超過(guò)抑制COX-2活性。5-LO抑制劑和COX抑制劑的應(yīng)用包括在給藥方案中以一種相繼的方式給藥，這將會(huì)提供藥物組合物的有益效果，以一種實(shí)質(zhì)上同時(shí)的方式共同給予抑制劑，例如以一種具有固定比例的活性試劑的單個(gè)膠嚢，或以對(duì)每種試劑多個(gè)，獨(dú)立的膠嚢，還有一種抑制兩種酶的單個(gè)化合物。COX抑制劑可選自塞來(lái)考昔；羅非考昔；美洛昔康；吡羅昔康;伐地考昔、帕瑞考昔、艾托考昔、CS-502、JTE-522;L-745，337;FR122047;NS398;選自包括阿斯匹林、布洛芬、茚曱新CAY10404、雙氯芬酸、酮洛芬、萘普生，酮咯酸、苯基丁氮酮、酮咯酸、舒林酸和其他物質(zhì)的非選擇性NSAID,或選自類固醇或皮質(zhì)類固醇。選擇性的抑制環(huán)加氧酶-2的化合物已在美國(guó)專利Nos.5,380,738、5,344,991、5,393,790、5,466,823、5,434,178、5,474,995、5,510,368和WO文獻(xiàn)WO96/06840、WO96/03388、WO96/03387、W095/15316、W094/15932、WO94/27980、WO95/00501、W094/13635、WO94/20480和W094/26731和其他本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的文獻(xiàn)中描述。選擇性的COX-l抑制劑是本領(lǐng)域已知的。下面是優(yōu)選的COX-l選擇性NSAID列表SC-560[Smith等人，ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmerica95:13313-8(1998)]、FR122047[Dohi等人，EuropeanJournalofPharmacology243:179-84(1993)]、戊酰水楊酸、阿斯匹林。阿斯匹林是一種在體內(nèi)迅速失活的不可逆的環(huán)加氧酶抑制劑。阿斯匹林可以抑制COX-l和COX-2,預(yù)先用阿斯匹林處理可在COX-2表達(dá)之前或之中使所有預(yù)存在的COX-l失活。因此，任何表達(dá)的新的COX-2是有活性的，但所有"老的"COX-l或COX-2是失活的。下面是相對(duì)于COX-2優(yōu)先抑制COX-l的NASID的列表右酮洛芬、Keterolac、氟比洛芬、舒洛芬。也可見(jiàn)[Warner等人，ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmerica96:7563-8(1999)]。在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明包括5-LO抑制劑和COX-2活化劑及其用途。COX-2活化劑也是本領(lǐng)域已知的。見(jiàn)[Tanabe和Tohnai，Prostaglandins&otherLipidMediators68-69:95-114(2002)]，其是涉及COX-2基因表達(dá)的調(diào)節(jié)的綜述文章，作為下面所列的沒(méi)有參考文獻(xiàn)的化合物或治療的參考文獻(xiàn)。優(yōu)選的COX-2活化劑包括超聲治療[Sena等人，UltrasoundinMedicine&Biology31:703-8(2005)]、脈沖電磁場(chǎng)(PEMF)[Lohmann等人,JournalofOrthopaedicResearch21:326-34(2003)]、BMP2[Chikazu等人，JournalofBoneandMineralResearch17:1430-40(2002)]、PDGF、FGF和PTH和其類似物(PTHrP和特立帕肽(teraparatide》[Maciel等人，JournalofRheumatology24:2429-35(1997)]。其他的COX-2活化劑包括前列腺素和前列腺素受體激動(dòng)劑[Rosch等人,BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications338:1171-8(2005)]、PDGF(血小板衍生生長(zhǎng)因子)、IL-lot(白介素1a)、IL-ip、TNF-ot(胂瘤壞死因子oc)、FGF(成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子)、TGF-P(轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子P)、TGF-a、EGF(表皮生長(zhǎng)因子)、TPA(十四酰佛波醇醋酸鹽)。另外，本發(fā)明包括一種組合，該組合包括治療有效量的5-脂氧合酶抑制劑和環(huán)加氧酶-2抑制劑，例如，licofelone、DupontDup697、TaishoNS-398、美洛昔康、氟舒胺、GlaxoSmithKline406381、GlaxoSmithKline644784或替泊沙林。通過(guò)本發(fā)明方法對(duì)骨代謝的調(diào)節(jié)可通過(guò)在給藥后相對(duì)于對(duì)照受試者檢查骨強(qiáng)度和質(zhì)量而確定。所述檢查可利用成像技術(shù)(例如，X-射線、核磁共振成像、X-射線斷層攝影、超聲和聲音傳導(dǎo))或壓力測(cè)試原位進(jìn)行，或通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)組織學(xué)、放射攝影、機(jī)械或生化方法離體(exvivo)進(jìn)行。骨密度和/或骨質(zhì)量的調(diào)節(jié)可通過(guò)一個(gè)或多個(gè)參數(shù)的變化進(jìn)行評(píng)價(jià)，所述參數(shù)例如是骨礦物質(zhì)密度、骨強(qiáng)度、小梁的數(shù)目、骨大小和骨組織連通性。確定骨礦物質(zhì)密度(BMD)的幾種方法是本領(lǐng)域已知的。例如，BMD的測(cè)定可通過(guò)利用，例如，雙能量X射線吸收測(cè)量法或定量計(jì)算機(jī)化斷層攝影術(shù)等進(jìn)行。類似地，提高的骨形成可利用本領(lǐng)域公知的方法確定。例如，骨形成速度(BFR)的動(dòng)態(tài)測(cè)量可利用定量數(shù)字化形態(tài)測(cè)量法對(duì)四環(huán)素標(biāo)記的來(lái)自腰推和股骨遠(yuǎn)側(cè)干銜端的松質(zhì)骨進(jìn)行(Ling等人，五m/ocn'"o/ogy140:5780-5788(1999))?？蛇x地，可以評(píng)價(jià)骨形成標(biāo)記，例如堿性磷酸酶活性、血清膠原肽水平或血清骨鈣蛋白水平，以間接確定是否發(fā)生了提高的骨形成(Looker等人，a^eoporaWs/w&rwa"ow"/11:467-480(2000))?？蓽y(cè)i式調(diào)節(jié)花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑的化合物加速或增強(qiáng)骨折愈合和/或骨形成、促進(jìn)骨形成以及防止骨損失的能力。這可在多種本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的動(dòng)物模型中進(jìn)行測(cè)試，例如動(dòng)物骨折模型、動(dòng)物截骨術(shù)模型、動(dòng)物顱骨環(huán)鉆缺陷模型、動(dòng)物骨質(zhì)缺損模型、多種動(dòng)物節(jié)段缺陷模型和骨延長(zhǎng)模型、卵巢切除誘導(dǎo)的骨損失模型，等等。這些動(dòng)物模型的應(yīng)用已經(jīng)很好地確定，并且被廣泛的不同的觀察所支持。例如，在包括大鼠在內(nèi)的動(dòng)物中的BMP2研究證實(shí)了BMP2刺激骨生成，并且BMP2現(xiàn)在在臨床上用于人類的骨修復(fù)應(yīng)用(商品名INFUSE)。有上百篇關(guān)于其用于動(dòng)物的論文，關(guān)于人類的有幾十篇；NSAID抑制大鼠中的骨折修復(fù)[Simon等人，Cyclooxygenase2functionisessentialforbonefracturehealing.Journal'ofBoneandMineralResearch17:963-76(2002)],并且NSAID的4吏用與人中很差的骨折愈合相關(guān)[Burd等人，JournalofBoneandJointSurgery(British)85B:700-5(2003)];Rubin等人(2001),JBJS83(2):259-270引證的研究顯示超聲治療加速大鼠(Azumaref.)和人體中的骨折修復(fù)。FDA關(guān)于骨質(zhì)疏松治療的準(zhǔn)則顯示臨床前研究需要利用2個(gè)種并且其中一個(gè)必須是切除了卵巢的大鼠模型。通過(guò)本發(fā)明方法對(duì)骨代謝的調(diào)節(jié)可通過(guò)在相對(duì)于模擬治療細(xì)胞改變了花生四烯酸代謝的處理后檢查成骨細(xì)胞和/或軟骨細(xì)胞的增殖、存活和分化而體外確定。細(xì)胞或器官外植體，例如新生嚙齒動(dòng)物顱頂或指骨，可利用抑制5-脂氧合酶活性、改變環(huán)加氧酶活性、影響白三烯或前列腺素受體功能的化合物以及本申請(qǐng)闡明的類似化合物進(jìn)行處理。另外的處理方法可包括利用反義核酸、干擾RNA、其他核酸或蛋白質(zhì)等。成骨細(xì)胞或軟骨細(xì)胞增殖和存活可通過(guò)本領(lǐng)域公知的許多技術(shù)來(lái)測(cè)定，例如細(xì)胞計(jì)數(shù)，放射性標(biāo)記的胸普或溴脫氧尿普向復(fù)制DNA中的摻入，臺(tái)盼藍(lán)排除，和對(duì)經(jīng)歷細(xì)胞凋亡的細(xì)胞內(nèi)的DNA的末端脫氧核糖核普轉(zhuǎn)移酶末端標(biāo)記。成骨細(xì)胞和/或軟骨細(xì)胞的分化可通過(guò)本領(lǐng)域爿^知的許多纟支術(shù)來(lái)測(cè)定，包括通過(guò)vonKossa或茜素紅方法染色礦化節(jié)結(jié)的形成來(lái)確定成骨細(xì)胞或軟骨細(xì)胞培養(yǎng)物礦化，軟骨細(xì)胞的阿辛藍(lán)染色來(lái)測(cè)定蛋白聚糖基質(zhì)的精制，基因表達(dá)分析來(lái)測(cè)定成骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞分化標(biāo)記物例如I型、II型和X型膠原，骨鈣蛋白，和利用基于蛋白質(zhì)或核酸的測(cè)試方法的聚集蛋白聚糖，堿性磷酸酶活性的測(cè)試，和通過(guò)例如酶聯(lián)免疫測(cè)定(EIA)的定量方法對(duì)RANKL、OPG、VEGF、骨形態(tài)發(fā)生蛋白和其他生長(zhǎng)因子的測(cè)定。5-脂氣合酶活化蛋白(FLAP)FLAP是一種18-KD的膜結(jié)合多肽，其特異性結(jié)合花生四烯酸并且通過(guò)作為花生四烯酸轉(zhuǎn)移蛋白起作用而活化5-LO。FLAP基因大于31kb并且由五個(gè)小的外顯子和四個(gè)大的外顯子組成(外顯子1為GenBank182657,GenbankM60470,夕卜顯子2為GenbankM63259,夕卜顯子3為GenbankM63260,外顯子4為GenbankM63261，外顯子5為GenbankM6322)。核被膜是5-LO和FLAP作用以代謝花生四烯酸的細(xì)胞內(nèi)部位，并且嗜中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的離子載體活化導(dǎo)致5-LO從不能沉積的部位遷移到核被膜。FLAP功能抑制劑防止了5-LO從細(xì)胞溶質(zhì)遷移到膜并且抑制5-LO活化。因此，F(xiàn)LAP抑制劑是抗炎性候選藥物。抑制FLAP的藥物(MK866)或缺乏FLAP的小鼠降低白三烯的合成。因此，在本發(fā)明的一個(gè)方面，在調(diào)節(jié)花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑因此加速和/或增強(qiáng)骨折愈合和骨形成的方法中使用FLAP抑制劑例如BAYx1005、MK-886和MK-0591。反義治療術(shù)語(yǔ)"反義核酸"指與5-LO或FLAP-編碼DNA和RNA的堿基序列互補(bǔ)的，或與那些編碼花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑中的其他蛋白質(zhì)的堿基序列互補(bǔ)的寡核苷酸。反義寡核苷酸可以是修飾的或未修飾的RNA、DNA或混合的聚合體寡核苷酸，并且，當(dāng)導(dǎo)入到靶細(xì)胞中時(shí)，特異性地與它們的靶核酸結(jié)合，并且干擾轉(zhuǎn)錄、RNA加工、轉(zhuǎn)運(yùn)和/或翻譯。用寡核苷酸靶向雙鏈(ds)DNA導(dǎo)致三螺旋形成；靶向RNA導(dǎo)致雙螺旋形成。反義構(gòu)建體可設(shè)計(jì)為與基因的啟動(dòng)子和其他控制區(qū)、外顯子、內(nèi)含子或外顯子-內(nèi)含子邊界結(jié)合。反義RNA構(gòu)建體，或編碼所述反義RNA的DNA，可用于抑制宿主細(xì)胞內(nèi)的基因轉(zhuǎn)錄或翻譯或兩者，無(wú)論在體外還是在體內(nèi)，例如在宿主動(dòng)物包括人類受試者內(nèi)。包含"互補(bǔ)核苷酸"的核酸序列是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)Watson-Crick互補(bǔ)原則能夠石咸基配對(duì)的核酸序列，其中鳥嘌呤與胞嘧啶配對(duì)，在DNA中腺嘌呤與胸腙^嘧咬配對(duì)(A:T)，或在RNA中腺嘌呤與尿嘧啶配對(duì)(A:U)。雖然所有的或部分的基因序列可用于上下文的反義構(gòu)建體中，但是優(yōu)選利用任何17個(gè)堿基長(zhǎng)度的序列確定唯一的靶序列。雖然更短的寡聚體更容易在產(chǎn)生并增加體內(nèi)可及性，但是決定雜交特異性還有許多其他因素。選擇反義寡核苷酸以使得與它的互補(bǔ)目標(biāo)的結(jié)合親和性和序列特異性足夠作為治療劑應(yīng)用。因此，可以使用8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22或更多石威基對(duì)的寡核香酸。僅僅通過(guò)在體外測(cè)試構(gòu)建體以確定內(nèi)源基因的功能是否被影響，或具有互補(bǔ)序列的相關(guān)基因的表達(dá)是否被影響，可以容易地確定給出的反義核酸對(duì)于靶向相應(yīng)的宿主細(xì)胞是否是有效的。干擾RNA干擾RNA(RNAi)片斷，特別是雙鏈(ds)RNAi，可用于調(diào)節(jié)花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑。小的干擾RNA(siRNA)—般是19-25個(gè)核苷酸長(zhǎng)的RNA分子，其干擾基因的表達(dá)。與使用RNAi在秀麗隱桿線蟲(Ce/eg"朋)、果蠅、植物和人類中沉默化基因相關(guān)的方法在本領(lǐng)域是已知的(Fire等人，Nature391:806-811(1998);Sharp,P.A.RNAinterference2001.GenesDev.15:485-490(2001);Tuschl，T.Chem.Biochem.2:239-245(2001);WO0129058;和W09932619)。應(yīng)用RNAi的核苷酸序列包括至少大約15到50個(gè)》威基對(duì)的那些序列。所述序列可以是雙鏈體，任選地在5，端和/或3'端具有突出端，其中雙鏈體的一條鏈包含至少15個(gè)連續(xù)堿基的核酸序列，其具有花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑之內(nèi)的核酸分子的核酸序列。如果期望，每條鏈的長(zhǎng)度可以更長(zhǎng)，例如19、20、21、22、23、24、25或30個(gè)核苷酸或可達(dá)此處所述的任一分子的全長(zhǎng)。單鏈突出端可以是，例如1、2、3、4、5或10個(gè)核苷酸長(zhǎng)度，并且可以在3，端存在、5'端存在、或同時(shí)在3，和5'端存在。所述片段可容易地通過(guò)化學(xué)合成方法直接合成片段而制備，通過(guò)應(yīng)用核酸擴(kuò)增技術(shù)而制備，或通過(guò)將選擇的序列導(dǎo)入到用于重組生產(chǎn)的重組載體中而制備。特別地，核苷酸序列或RNAi可以是與5-LO或FLAP-編碼DNA和RNA的堿基序列互補(bǔ)的，或與編碼花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑的其他蛋白質(zhì)的堿基序列互補(bǔ)的寡核苷酸。寡核苷酸可以是修飾的或未修飾的RNA、DNA或混合聚合體寡核苷酸，并且，當(dāng)導(dǎo)入靶細(xì)胞內(nèi)時(shí)，特異性地與它們的靶核酸結(jié)合，并且干擾轉(zhuǎn)錄、RNA加工、轉(zhuǎn)運(yùn)和/或翻譯。其他試劑在本發(fā)明的另一方面，可給受試者施用附加的藥劑或藥物。附加的藥劑可包含一種或多種有效調(diào)節(jié)鈣穩(wěn)態(tài)平衡、調(diào)節(jié)軟骨形成、調(diào)節(jié)骨生成、調(diào)節(jié)骨重塑、調(diào)節(jié)疼痛、調(diào)節(jié)炎癥、或具有抗生素活性的活性劑。附加活性劑可以是，但不限于，雌激素、IGF、胰島素、骨形態(tài)發(fā)生蛋白、和其他生長(zhǎng)因子、護(hù)骨蛋白(OPG)、降鈣素，二膦酸鹽、維生素D3或其類似物、抑制素、adrogen、氟化鹽、曱狀旁腺激素或其類似物、增強(qiáng)血管生成的藥劑例如血管表皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、素、礦物質(zhì)補(bǔ)充物、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充物，和其組合。附加藥劑還可以是抗生素例如慶大霉素、環(huán)丙沙星、萬(wàn)古霉素和/或其他抗生素。附加活性劑可以在施用本發(fā)明的5-脂氧合酶抑制劑之前、同時(shí)或之后給受試者施用?？寡姿幬?，包括但不限于非甾體抗炎藥物和皮質(zhì)類固醇，P38激酶抑制劑，和抗病毒藥物，包括但不限于利巴韋林、阿糖腺苷、阿昔洛韋和更昔洛韋，也可以與本發(fā)明的組合物組合。抗生素化合物，包括但不限于慶大霉素、替考拉寧、托普霉素和萬(wàn)古霉素，也可與本發(fā)明的組合物組合。III.藥物制劑和給藥方式此處描述的方法利用包含上述分子和一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體和任選的其他治療性或預(yù)防性成分的藥物組合物。所述賦形劑包括例如水、鹽水、甘油、聚乙二醇、透明質(zhì)酸、乙醇、環(huán)糊精、改性環(huán)糊精(即，磺丁醚環(huán)糊精)等液體。用于非液體制劑的鹽可用于本發(fā)明的組合物中，包括，例如，無(wú)才幾酸鹽例如鹽酸鹽、氬溴酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽等；以及有機(jī)酸鹽例如醋酸鹽、丙酸鹽、丙二酸鹽、苯甲酸鹽等。關(guān)于藥學(xué)上可接受的賦形劑和鹽的詳細(xì)討論可見(jiàn)7，/wgto/A尸/2(3削acew"'ca/Sc/e"c",18thEdition(Easton，Pennsylvania:MackPublishingCompany,1990)。另外，所述載體中也可以存在輔助物質(zhì)，例如濕潤(rùn)劑或乳化劑、生物緩沖物質(zhì)、表面活性劑等。生物緩沖液實(shí)質(zhì)上可以為任何藥理學(xué)上可接受的，并且給制劑提供期望的pH,即，生理學(xué)上可接受范圍內(nèi)的pH的溶液。緩沖溶液的例子包括鹽水、磷酸鹽緩沖液、Tris緩沖液、Hank's緩沖液等等。取決于預(yù)期的給藥方式，藥物組合物可以是固體、半固體或液體劑型，例如，片劑、栓劑、丸劑、膠嚢劑、粉劑、液體、懸浮液、乳膏、軟膏劑、洗劑等，優(yōu)選為適合單次施用精確劑量的單元?jiǎng)┬?。組合物將包含與藥學(xué)上可接受的載體組合的有效量的所選藥物，并且另外可包含其他藥劑、佐劑、稀釋液、緩沖液等。本發(fā)明包括一種藥物組合物，其包含本發(fā)明的化合物，包括異構(gòu)體，異構(gòu)體的外消旋或非外消旋混合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，還包含一種或多種藥學(xué)上可接受的載體，和任選的其他治療性和/或預(yù)防性成分。通常，本發(fā)明的化合物將作為藥物制劑施用，包括那些適于口服(包括口腔和舌下)、直腸、鼻、局部、肺部、陰道或腸胃外(包括肌肉內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi))給藥的藥物制劑，其為適于通過(guò)吸入或吹入給藥的形式，或適于在骨形成部位給藥的形式。優(yōu)選的給藥方式是利用方便的每天劑量方案口服或靜脈內(nèi)給藥，其可根據(jù)病患程度進(jìn)行調(diào)整。用于在骨形成部位給藥的制劑包括吸附到如下材料上或包封在其中聚交酯和/或聚半乳糖酐聚合物、棕櫚酸、藻酸鹽、石膏、硫酸4丐、磷酸鈣、硫酸鈣和磷酸鈣的混合物、羥磷灰石、膠原或其他細(xì)胞外基質(zhì)材料、骨蠟(例如來(lái)自CPMedical,Inc.,Ethicon,Inc.,UnitesStatesSurgicalCorp.,或Ceremed)、Orthocon骨油灰(一種硬脂酸鈣、醋酸微生素E和烯化氧共聚物的混合物)或其他可用于該目的的材料或化合物。給藥可通過(guò)直接放置在骨形成部位或通過(guò)用或不用載體將本發(fā)明活性化合物沉積到假體或手術(shù)植入裝置的表面上來(lái)實(shí)現(xiàn)。給受試者施用藥物有效量或治療有效量的組合物。精確的有效量隨受試者不同而改變，依賴于物種、年齡、受試者大小和健康、被治療的疾病的情況和程度、治療醫(yī)師的建議、和為給藥而選擇的治療或治療組合。因此，對(duì)于給定的情況，有效量可以通過(guò)常規(guī)試驗(yàn)確定。對(duì)于本發(fā)明而言，治療量通常為大約0.05mg/kg到大約40mg/kg體重，更優(yōu)選大約0.5mg/kg到大約20mg/kg,至少給藥一次。在更大的哺乳動(dòng)物中，提示的每天劑量可以從大約lmg到4800mg，每天一次或更多次，更優(yōu)選為大約10mg到1200mg。可以根據(jù)需要多次給受試者給藥，以減輕和/或緩解所述疾病的體征、癥狀或病因，或產(chǎn)生任何其他期望的生物系統(tǒng)的改變。治療所述疾病的領(lǐng)域的普通技術(shù)人員不需要過(guò)多的試驗(yàn)，依靠個(gè)人知識(shí)和本申請(qǐng)的公開(kāi)內(nèi)容就能夠確定本發(fā)明的化合物對(duì)于一種給定疾病的治療有效量。當(dāng)實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)，開(kāi)始的人用劑量可能需要根據(jù)大鼠劑量數(shù)據(jù)來(lái)估測(cè)。所述估測(cè)方法是本領(lǐng)i或7i^知的。見(jiàn)FDA出片反物"GuidanceforIndustry:EstimatingtheMaximumSafeStartingDoseinInitialClinicalTrialsforTherapeuticsinAdultHealthyVolunteers"2005年7月出片反(FederalRegisterDocument5-14456)可于www.fda.gov/Cder/guidance/5541fnl.pdf在線獲得。為了獲得等效的人用劑量，通常將以mg/kg表示的大鼠劑量除以6.2。當(dāng)期望時(shí)，制劑可用適合于活性成分持續(xù)或控制釋放給藥的腸溶衣進(jìn)行制備。藥劑制劑優(yōu)選為單元?jiǎng)┬?。在所述劑型中，制劑再分為包含適量的活性成分的單元?jiǎng)┝?。單元?jiǎng)┬涂梢允前b的制劑，含有離散量的制劑的包裝體，例如在小瓶或安瓿中包裝的片劑、膠嚢和粉末。而且，單元?jiǎng)┬鸵部梢允悄z嚢、片劑、扁嚢劑、或錠劑，或可以是任何包裝形式的適量的上述物質(zhì)。IV.實(shí)驗(yàn)下面是實(shí)施本發(fā)明的特定實(shí)施方式的例子。提供這些例子僅僅為了說(shuō)明目的，不意圖以任何方式限制本發(fā)明的范圍。已經(jīng)努力確保使用的數(shù)字的精確性(例如，量、溫度等等)，但是一些試驗(yàn)誤差和偏差應(yīng)該當(dāng)然是允許的。實(shí)施例15-LO敲除小鼠缺乏5-脂氧合酶(Alox5-A或5-LO-A)的敲除小鼠購(gòu)自JacksonLaboratory,BarHarbor，Maine。即將發(fā)生的股骨骨折用倒插入股管中的骨髓內(nèi)的線穩(wěn)定化。用三點(diǎn)彎曲裝置產(chǎn)生骨折。股骨骨折的愈合通過(guò)組織形態(tài)測(cè)定術(shù)、》丈射照相術(shù)和扭轉(zhuǎn)一幾械測(cè)試進(jìn)4于測(cè)量或評(píng)<介。證實(shí)了5-LOV-小鼠與相同遺傳背景和年齡的野生型小鼠(C57BL/6)相比，其骨折愈合具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的、定量的加速和增強(qiáng)。在10-12周齡的雌性小鼠中產(chǎn)生了閉合性中骨干骨折。在骨折4周和12周后，骨折愈合通過(guò)X-射線評(píng)價(jià)(圖3),并且通過(guò)扭轉(zhuǎn)機(jī)械測(cè)試進(jìn)行評(píng)價(jià)(圖4和表2)。愈合4或12周后，切下5LO-A和野生型(WT)小鼠的骨折的股骨，并利用MTS伺服液壓控制測(cè)試機(jī)器和界面20Nm轉(zhuǎn)矩負(fù)載單元機(jī)械測(cè)試扭轉(zhuǎn)斷裂。在測(cè)試之前和之后測(cè)量骨折的股骨尺寸。由骨痂尺寸和轉(zhuǎn)矩相對(duì)于角位移的曲線計(jì)算出轉(zhuǎn)矩峰值、剛度、最大剪應(yīng)力和剪切模量。5-LO-A的所有機(jī)械參數(shù)在愈合4周后比野生型小鼠高50-120%。對(duì)來(lái)自正常和5-LOV-小鼠的分時(shí)間段的骨折樣本進(jìn)行組織形態(tài)測(cè)定分析，顯示5-LO-A小鼠中的軟骨面積很早達(dá)到峰值，并且到達(dá)較高的程度(圖5和表3)。而且，在骨折后7和10天，顯著更多的新骨(礦化組織)出現(xiàn)在5-LO-A骨折骨痂中。數(shù)據(jù)證實(shí)5LO-KO小鼠中骨折愈合加速和增強(qiáng)。表2.相對(duì)于骨折時(shí)間(Fx),相同遺傳背景和年齡的5-LO-A和野生型小鼠的骨折股骨扭轉(zhuǎn)機(jī)械測(cè)試數(shù)據(jù)概要<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>表3.相對(duì)于骨折時(shí)間，相同遺傳背景和年齡的5-LO-A和野生型'J、鼠的骨折骨痂組織形態(tài)測(cè)定分析概要<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>21天0±00±0l細(xì)77.26±6.2675.72±2.550.624系列X-射線(圖3)顯示51^0-/-小鼠中的骨折愈合比野生型小鼠(C57BL/6)加速。更具體來(lái)說(shuō)，5LO-Z-小鼠的10天的骨折顯示處于與野生型小鼠14天骨折類似的階段，14天5LO-A骨折類似于21天野生型骨折，1個(gè)月的5LO-A骨折類似于3個(gè)月的野生型骨折。機(jī)械測(cè)試數(shù)據(jù)定量地顯示出愈合4周后5丄0-/-骨折骨痂的結(jié)構(gòu)和材料特性在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著好于對(duì)照，轉(zhuǎn)矩峰值提高50%,剛度提高75%,最大剪應(yīng)力提高75%，剪切模量提高超過(guò)100%。而且，5LOV-小鼠的4周機(jī)械測(cè)試參數(shù)類似于12周的野生型小鼠，這支持了圖3的X-射線數(shù)據(jù)，并且證實(shí)了5LOV-小鼠中的骨折愈合加速并增強(qiáng)。愈合12周之后，野生型骨折骨痂的剛度和剪切模量追上5-LO-A骨折骨痂。對(duì)5丄0-/-和野生型小鼠的分時(shí)間段骨折骨痂樣本的組織形態(tài)測(cè)定支持了機(jī)械和放射照相方法的結(jié)果(圖5和表2)。骨痂軟骨面積在5-LO-/-小鼠中在骨折7天之后達(dá)到峰值，但在野生型小鼠中直到第10天才達(dá)到峰值。在第7天在5LO-Z-骨痂中幾乎比野生型小鼠存在多4倍的軟骨。同時(shí)，與野生型小鼠相比，第7天在5-LO-A小鼠中也出現(xiàn)多幾乎兩倍的新骨(礦化組織)形成，第10天具有多30%的新骨。這些數(shù)據(jù)與5丄0-/-小鼠比正常小鼠骨折愈合發(fā)生的更快并且產(chǎn)生具有增強(qiáng)的結(jié)構(gòu)和材料特性的機(jī)械性更強(qiáng)的骨折骨痂是一致的。實(shí)施例2COX-2敲除小鼠在COX-2基因輩巴向缺失的小鼠中測(cè)試了骨折愈合。在COX-2敲除的、COX-l敲除的和野生型小鼠(未顯示)的右后肢產(chǎn)生了閉合性中骨干股骨骨折。骨折愈合通過(guò)X-射線和組織學(xué)(圖6)并通過(guò)機(jī)械測(cè)試(未顯示)進(jìn)行評(píng)價(jià)。數(shù)據(jù)顯示骨折愈合在COX-2敲除小鼠中顯著削弱，但在COX-l敲除的或野生型小鼠中不是這樣。愈合14天后的X-射線顯示了在COX-l敲除小鼠中具有大的礦化骨折骨痂(圖6)，而在COX-2敲除小鼠中有很少或沒(méi)有明顯的礦化的骨痂。組織學(xué)檢查證實(shí)了X-射線的發(fā)現(xiàn)，COX-2敲除骨痂具有顯著量的軟骨，但沒(méi)有明顯的新骨。扭轉(zhuǎn)機(jī)械測(cè)試數(shù)據(jù)顯示骨折骨痂結(jié)構(gòu)和材料特性比COX-l敲除的或野生型小鼠在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著更差。與實(shí)施例1、實(shí)施例3和實(shí)施例4的試驗(yàn)結(jié)果結(jié)合起來(lái)，證明了如何根據(jù)本發(fā)明的方法調(diào)節(jié)花生四烯酸代謝或信號(hào)傳導(dǎo)，以影響骨形成。實(shí)施例3用一種5-脂氧合酶抑制劑對(duì)大鼠的治療對(duì)Sprague-Dawley大鼠(3月齡)進(jìn)行了如本領(lǐng)域所描述的標(biāo)準(zhǔn)閉合性股骨骨折操作(Simon等人JournalofBoneandMineralResearch,17(6):963-976(2002);Bonnarens和Einhorn,iVodwWowa加w&^/c/o"cZ々ar"wre/aZora/or少"w/膽/JournalofOrthopaedicResearch,2:97-101(1984))。將發(fā)生的骨折用骨髓內(nèi)不銹鋼釘穩(wěn)定。骨折后的開(kāi)始4小時(shí)，大鼠用在1%的甲基纖維素中的30mg/kg的NDGA(去甲二氫愈創(chuàng)木酸)處理(5-脂氧合酶抑制劑處理組)或僅僅用載體(1%曱基纖維素)處理。手術(shù)后一天以及直到骨折后第14天，實(shí)驗(yàn)大鼠持續(xù)用2劑NDGA(30mg/kg)處理，第一劑在8-10AM，然后8-10小時(shí)后再施用另一劑NDGA。對(duì)照大鼠類似地處理但僅僅用載體(1%甲基纖維素)處理。骨折三周后，殺死大鼠，收獲骨折的股骨，利用PackardFaxitron和KodakMinR2000乳房X射線照相膠片對(duì)骨折的股骨進(jìn)行高分辨率放射照相。每個(gè)處理組(對(duì)照組和5-脂氧合酶(5-LO)抑制劑處理組)的兩張代表性的X光相片顯示于圖7中。X光照片顯示3周之后5-LO抑制劑處理大鼠的骨折的股骨與新骨連接起來(lái)。相反，在對(duì)照大鼠中形成了成形良好的、礦化的骨折骨痂，但是骨折部位仍然沒(méi)有與新骨連接。在大鼠C中，骨折與新骨在骨折骨痂的中間(頂端)和側(cè)面(底端)連接。在大鼠D中，骨折與新骨在側(cè)面(底端)連接并且顯示出在中間與新骨連接的跡象。在對(duì)照大鼠(大鼠A和B)中沒(méi)有明顯的新骨連接。因此該數(shù)據(jù)證實(shí)了5-LO抑制劑治療可加速年輕的正常大鼠的骨折愈合過(guò)程。實(shí)施例4用5-脂氧合酶抑制劑對(duì)大鼠的治療對(duì)Sprague-Dawley大鼠(3月齡)進(jìn)行了如本領(lǐng)域所描述的標(biāo)準(zhǔn)閉合性股骨骨折操作(Simon等人JournalofBoneandMineralResearch,17(6):963-976(2002);Bonnarens和Einhorn，尸rodwc"owo/ac/05edy^3"wre/〃Z)ora/or少aw/ma/JournalofOrthopaedicResearch,2:97-101(1984))。將發(fā)生的骨折用骨髓內(nèi)不4秀鋼釘穩(wěn)定。骨折后的開(kāi)始4小時(shí)，大鼠用載體(1%曱基纖維素)或懸浮在1%曱基纖維素中的5-LO抑制劑處理。抑制劑A(NDGA)以30mg/kg施用，抑制劑B(AA-861)以5mg/kg施用。手術(shù)之后一天以及直到骨折后第21天，實(shí)驗(yàn)大鼠持續(xù)用2劑抑制劑(A或B)處理，第一劑在8-10AM之間，然后在8-10小時(shí)后再施用另一劑。對(duì)照大鼠類似地處理，但僅僅用載體(1%曱基纖維素)處理。骨折三周后將大鼠麻醉，利用PackardFaxitron和KodakMinR2000乳房X射線照相膠片對(duì)骨折的股骨進(jìn)行高分辨率X光照相(圖8A,8B，8C)。骨折后五周殺死大鼠，切下股骨，通過(guò)扭轉(zhuǎn)機(jī)械測(cè)試檢驗(yàn)結(jié)構(gòu)機(jī)械性能(圖8D)。放射線照片顯示愈合3周后，5-LO抑制劑處理的大鼠中骨折出現(xiàn)連接，但在載體處理的大鼠中沒(méi)有出現(xiàn)。應(yīng)用扭轉(zhuǎn)機(jī)械測(cè)試測(cè)量愈合5周后每個(gè)股骨保持的轉(zhuǎn)矩峰值。數(shù)據(jù)顯示抑制劑A(NDGA)處理大鼠和抑制劑B處理大鼠的股骨具有比載體處理大鼠高22%和53%的轉(zhuǎn)矩峰值(圖8D)。另外，所有來(lái)自抑制劑A或B處理的大鼠的股骨作為骨整體測(cè)試斷裂，而在載體處理的大鼠的股骨中13%(15中的2個(gè))作為非整體測(cè)試斷裂，沒(méi)有明顯的骨連接。這些實(shí)驗(yàn)觀察證實(shí)了5-LO抑制治療可加速(使骨連接更快)并且增強(qiáng)(更好的機(jī)械性能)骨折愈合。實(shí)施例5利用小分子化合物、RNAi和反義化合物的離體處理方法利用促進(jìn)離體骨生成的方法，例如，幫助頑固性骨折的愈合，由外傷或骨節(jié)段的病理性切除引起的節(jié)段性缺陷的愈合，或者用于關(guān)節(jié)固定術(shù)。在這些例子中，前體骨細(xì)胞從受試者中分離或從適當(dāng)?shù)墓w中分離，利用標(biāo)準(zhǔn)方法離體培養(yǎng)。細(xì)胞生長(zhǎng)在或接種到適合的支架上，所述支架代表缺失骨的節(jié)段或可塑造為配合缺失的節(jié)段或與骨的末端并置。導(dǎo)入細(xì)胞，利用適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)條件或誘導(dǎo)因子，例如骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2),離體形成骨。一旦細(xì)胞開(kāi)始精制新的骨基質(zhì)，即可將構(gòu)建體植入病人中以實(shí)現(xiàn)骨生成和促進(jìn)愈合。這一系列事件一般被稱為增強(qiáng)骨生成的組織工程方法。5-脂氧合酶(5-LO)的抑制可用于促進(jìn)離體骨形成進(jìn)行組織工程應(yīng)用。這通過(guò)單獨(dú)利用5-LO或FLAP的小分子抑制劑或與公知的誘導(dǎo)劑例如BMP-2組合應(yīng)用促進(jìn)離體骨生成來(lái)實(shí)現(xiàn)。第二種方法利用RNAi技術(shù)抑制5-LO活性并且促進(jìn)離體骨生成。其實(shí)現(xiàn)方法是通過(guò)利用商業(yè)上可獲得的轉(zhuǎn)染試劑如TransIT-TKO或jetSI用siRNA序列庫(kù)轉(zhuǎn)染培養(yǎng)的前體骨骼細(xì)胞。用5-LO或FLAP特異的3種siRNA的混合物(每種siRNA50-200pmol)轉(zhuǎn)染大約1百萬(wàn)個(gè)細(xì)胞?；蛘撸琟使用靶向于5-LO和FLAP的siRNA庫(kù)。作為對(duì)照，用開(kāi)發(fā)用來(lái)抑制(knock-down)增強(qiáng)的綠色熒光蛋白(EGFP)的商業(yè)上可獲得的siRNAs類似地轉(zhuǎn)染細(xì)胞。通過(guò)western印跡分析證實(shí)5-LO或FLAP的抑制，并對(duì)結(jié)果進(jìn)4亍定量，確定5-LO和/或FLAP的表達(dá)降低超過(guò)80%。培養(yǎng)處理的前體骨骼細(xì)胞，并且利用例如適當(dāng)?shù)陌⑿了{(lán)或茜素紅結(jié)合的檢測(cè)或特定基質(zhì)蛋白的檢測(cè)，評(píng)價(jià)作為軟骨或骨基質(zhì)的細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生的骨生成。根據(jù)通過(guò)茜素紅結(jié)合檢測(cè)的增強(qiáng)的鈣化基質(zhì)沉積，5-LO或FLAP的抑制促進(jìn)了骨生成。這表明抑制5-LO活性的RNAi或反義方法可用于為組織工程目的促進(jìn)離體骨生成。用于5-L0的siRNA對(duì)的庫(kù)可選自例如，庫(kù)-A(5，-AACTGGGCGAGATCCAGCTGG國(guó)3，(SEQIDNO:9),5，-AAGCTCCCGGTGACCACGGAG-3'(SEQIDNO:10)，5，-AAGGAAGCCATGGCCCGATTC-3，)(SEQIDNO:11)，庫(kù)-B(5，-AATCGAGAAGCGCAAGTACTG-3'(SEQIDNO:12)，5，畫AAGGAGTGGACTTTGTTCTGA誦3，(SEQIDNO:13)，5'國(guó)AACTTCGGCCAGTACGACTGG-3，)(SEQIDNO:14)，或庫(kù)畫C(5，-AAGTTGGCCCGAGATGACCAA-3，(SEQIDNO:15),5，-AACACATCTGGTGTCTGAGGT畫3，(SEQIDNO:16)，5，-AACCATGCGAGCCCCGCCACC-3，)(SEQIDNO:17)。用于FLAP的siRNA對(duì)的庫(kù)可選自例如，庫(kù)-D(5，-AAGCAAACATGGATCAAGAAA-3'(SEQIDNO:18)，5'陽(yáng)AAGTTCCTGCTGCGTTTGCTG-3'(SEQIDNO:19)，5，-AATTCAGCTCTTGAGAGCATT-3，)(SEQIDNO:20)，庫(kù)-E(5，-AATGGATTCTTTGCCCATAAA-3，(SEQIDNO:21)，5，-AAGTACTTTGTCGGTTACCTA-3，(SEQIDNO:22),5，-AATCTATTGGCCATCTGGGCT-3，)(SEQIDNO:23),或庫(kù)-F(5'-AACCAGAACTGTGTAGATGCG-3，(SEQIDNO:24)，5，-AAGTGACTTTGAAAACTACAT畫3，(SEQIDNO:25)，5，-AATGATGTCATGTCAGCTCCG-3，)(SEQIDNO:26)。為了筒短，僅僅顯示每個(gè)siRNA對(duì)的有義鏈。本領(lǐng)域公知siRNA對(duì)是雙鏈小RNA,其在有義鏈具有5'-AA突出端，在反義鏈具有5，-UU突出端。本領(lǐng)域也公知主鏈的化學(xué)修飾對(duì)于穩(wěn)定或提高siRNA分子的吸收是有利的。PirolloKF等人，(2003)，RaitA,SleerLS,ChangEH，"Antisensetherapeutics:fromtheorytoclinicalpractice,"PharmacolTher.99(l):55-77。具有有利的主鏈化學(xué)修飾的寡核苷酸的制備屬于普通技術(shù)人員的技術(shù)水平范圍，所述主鏈修飾的化合物(以及非主鏈修飾的化合物)的應(yīng)用在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到除了直接將siRNA轉(zhuǎn)染到細(xì)胞內(nèi)以外，還可發(fā)展表達(dá)這些或類似序列的表達(dá)載體，和通過(guò)轉(zhuǎn)染傳遞到細(xì)胞的表達(dá)載體，病毒介導(dǎo)的遞送，或遞送DNA分子到細(xì)胞中的方法。表達(dá)載體表達(dá)siRNA,導(dǎo)致5-LO、FLAP或兩者被持續(xù)抑制，并因此促進(jìn)骨生成。本領(lǐng)域技術(shù)人員也將認(rèn)識(shí)到可以利用抑制5-LO或FLAP表達(dá)的其他策略在前體骨骼細(xì)胞中促進(jìn)相同的骨生成效果。所述技術(shù)包括利用反義物。示例性的5-脂氧合酶反義序列包括，例如，5，-GCAGGTGCTTCTCGCTGCAGCC-3'(SEQIDNO:27),5,-GCCAGTACTTGCGCTTCTCG-3'(SEQIDNO:28),5，畫CCATCGATATTGTTTTTGCC-3,(SEQIDNO:29)，5，-GGAGCTTCTCGGGCAGCTCTGTGC-3，(SEQIDNO:30),5，-CCAGGTTCTTATACAGCAAGC畫3，(SEQIDNO:31)，5'-CCAGCAGCTTGAAAATGGGGTGC-3'(SEQIDNO:32)，5，-GCCCCGGGCCTTGATGGCC-3，(SEQIDNO:33)，5，-CCACGCCCTTGGCAGTCGG-3，(SEQIDNO:34),和5，-GCGGAATCGGGCCATGGCTTCC-3'(SEQIDNO:35).示例性的FLAP反義序列包括，例如，5，-GTTCCGGTCCTCTGGAAGCTCC-3，(SEQIDNO:36)，5，-CGCAGACCAGAGCACAGCG-3'(SEQIDNO:37)，5，-GCAAACGCAGCAGGAAC畫3，(SEQIDNO:38),5，-CGTTTCCCAAATATGTAGCC國(guó)3，(SEQIDNO:39)，5'國(guó)GTTTTCAAAGTCACTTCCG-3'(SEQIDNO:40)，5，-GGTTAACTCAAGCTGTGAAGC-3'(SEQIDNO:41),5'誦GGAGCTGACATGACATC-3'(SEQIDNO:42),和5，-GGCCACGGTCATGTTCAAGG-3'(SEQIDNO:43).因此，公開(kāi)了促進(jìn)骨生成以加速或增強(qiáng)骨折愈合、治療骨質(zhì)缺損和增強(qiáng)骨形成的新方法。雖然已經(jīng)詳細(xì)描述了本發(fā)明的優(yōu)選的實(shí)施方式，但是應(yīng)當(dāng)理解可以在不偏離所附權(quán)利要求限定的本發(fā)明的精神和范圍的條件下進(jìn)行顯而易見(jiàn)的變化。權(quán)利要求1.一種促進(jìn)骨生成以治療有此需要的哺乳動(dòng)物受試者的方法，包括給所述受試者施用藥物有效量的降低5-脂氧合酶活性的化合物，其中所述脂氧合酶活性的降低促進(jìn)骨生成以治療選自骨折、骨質(zhì)缺損和通過(guò)誘導(dǎo)骨形成而治療之疾病的疾病。2.權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是骨折。3.權(quán)利要求2的方法，其中所述骨折是非骨質(zhì)疏松性骨折、骨質(zhì)疏松性骨折、與先天性疾病相關(guān)的骨折、與獲得性疾病相關(guān)的骨折、或截骨術(shù)骨折。4.權(quán)利要求3的方法，其中所述骨折是非骨質(zhì)疏松性骨折。5.權(quán)利要求3的方法，其中所述骨折是骨質(zhì)疏松性骨折。6.權(quán)利要求3的方法，其中所述骨折是截骨術(shù)骨折。7.權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是通過(guò)誘導(dǎo)骨形成而治療的疾病。8.權(quán)利要求7的方法，其中所述疾病是通過(guò)脊柱融合術(shù)或關(guān)節(jié)固定術(shù)治療的疾病。9.權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是骨質(zhì)缺損。10.權(quán)利要求1的方法，其中所述施用是體內(nèi)施用。11.權(quán)利要求l的方法，其中所述施用是離體施用。12.權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物通過(guò)抑制5-脂氧合酶活化蛋白(FLAP)而降低5-脂氧合酶活性。13.權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物包括一種小分子。14.權(quán)利要求13的方法，其中所述小分子選自3-[1-(4-氯芐基)-3-叔-丁基_硫基_5-異丙基吲咮-2-基]-2,2-二甲基丙酸(MK886);3-(1-(4-氯千基)-3-(l-丁基-硫基)-5-(喹啉-2-基-甲氧基)-吲哚-2-基)-2，2-二甲基丙酸)(MK-591);去曱二氫愈創(chuàng)木酸(NDGA);2-(l厶羥基十二碳-5,10-二炔基)-3,5，6-三甲基-1，4-苯醌(八八861);(N-(l-苯并(b)噻吩-2-基乙基)-N-羥基脲)(齊留通)；馬索羅酚；替尼達(dá)普；flobufen;氯萘帕林；他戈利。秦；AA-861;AbbottA-121798;AbbottA-76745;AbbottA-78773;[(R)(+)N'-[[5-(4-氟苯氧基)呋喃-2-基]-1-曱基-2-丙炔基]-N-羥基脲(AbbottA-79175);AbbottABT761;DainipponAL-3264;BayerBay-x-1005;BioforBF-389;布那司特；CytomedCMI-392;TakedaCV-6504;磷酸依那扎群；LeoDenmarkETH-615;鹽酸氟卓斯??；MerckFrosstL國(guó)663536;MerckleML-3000;3MPharmaceuticalsR國(guó)840;利洛吡司；ScheringPloughSCH-40120;替泊沙林；林那司特(TMK-688);ZenecaZD-2138;Bristol-MyersSquibbBU-4601A;口卡峻霉素C;lagunamycin;WellcomeBW-70C;Ciba-GeigyCGS畫26529;Warner-LambertCI1004;Warner-LambertPD畫136005;Warner-LambertPD-145246;ElsaiE-3040;FujirebioF-1322;FujisawaFR-110302;MerckF畫tL-699333;MerckF畫tL-739010;LillyLY-269415;LillyLY-17謂2;HoechstRousselP-8892;SmithKlineBeechamSB-202235;AmericanHomeProductsWAY-121520;AmericanHomeProductsWAY-125007;ZenecaZD-7717;ZenecaZM-216800;ZenecaZM-230487;1，2-二氫-n-(2畫噻唑基)-l-氧代吡咯并(3，2，l-kl)吩噻嗪-l畫曱酰胺；AbbottA-65260;AbbottA-69412;Abbott-63162;AmericanHomeProductsAHR-5333;BayerBay-q-1531;BoehringerIngelheimBI-L-357;BoehringerIngelheimBI-L-93BS;BoehringerIngelheimBIL226XX;Bristol-MyersSquibbBMY-30094;口卡唑霉素B;WellcomeBW-B218C;ChauvinCBS-1114;Ciba-GeigyCGS-21595;Ciba-GeigyCGS-22745;Ciba-GeigyCGS-23885;Ciba-GeigyCGS24891;Ciba陽(yáng)GeigyCGS-8515;ChiesiCHF-1909;Warner-LambertCI-986;Warner-LambertCI987;去曱中國(guó)薊醇；多西苯醌；EisaiE-5110;EisaiE-6080;乙諾司特；epocarbazolin-A;依普伐芬；依凡達(dá)明；FisonsFPL62064;ZenecaICI-211965;ZenecaICI-216800;KyowaHakkoKF-8940;Merck&CoL-651392;Merck&CoL-651896;Merck&CoL-652343;Merck&CoL-656224;Merck&CoL-670630;Merck&CoL-674636;LillyLY-233569;Merck&CoMK-591;Merck&CoL國(guó)655240;nitrosoxacin國(guó)A;OnoONO-5349;OnoONO-LP-219;OnoONO-LP-269;Warner-LambertPD-127443;PurdueFrederickPF-5901;Rhone畫PoulencRorerRev國(guó)5367;Rhone-PoulencRorerRG-5901-A;Rhone-PoulencRorerRG-6866;Roussel國(guó)UclafRU-46057;SearleSC畫41661A;SearleSC-45662;SandozSDZ-210-610;SmithKlineBeechamSK&F-104351;SmithKlineBeechamSK&F-104493;SmithKlineBeechamSK&F畫105809;SynthelaboSL-81-0433;TeijinTEI-8005;Te腿oTMK-777;TerumoTMK-781;Ter畫oTMK-789;Te畫oTMK-919;TerumoTMK-992;TeikokuHormoneTZI-41127;AmericanHomeProductsWAY-120739;AmericanHomeProductsWY-47288;AmericanHomeProductsWY-48252;AmericanHomeProductsWY-50295;YoshitomiY畫19432;4-{3國(guó)[4-(2-曱基-111-咪唑畫1-基)苯硫基])苯基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-4-曱酰胺；七葉亭；菲尼酮；BI-L-239;5,8，11-二十碳三炔酸(ETI);5，8，11,14-二十碳四炔酸(ETYA);肉桂基-3,4-二羥基-oc-氰基肉桂酸酯；姜黃素；esculeitin;棉子酚；咖啡酸；黃芩黃素；7,7-二曱基二十碳二烯酸(DEDA);Ly311727;溴烯醇內(nèi)酯；甲基花生四烯?；姿狨?；曱基-亞麻基氟代磷酸酯；油基氧乙基磷酸膽堿；AACOCF3;n-(對(duì)戊基肉桂酰基)鄰氨基苯曱酸；麥帕克林；奎納克林；阿的平；對(duì)渙苯曱酰甲基溴；馬兜鈴酸；皮質(zhì)類固醇；GlaxoSmithKline480848;GlaxoSmithKline659032;GlaxoSmithKline677116;BMS-181162;MJ33;和MillenniumPharmaceuticalsMLN977。15.權(quán)利要求14的方法，其中所述小分子選自馬索羅酚；替尼達(dá)普；(N-(l-苯并(b)噻吩-2-基乙基)-N-羥基脲)(齊留通)；flobufen;氯萘帕林；他戈利。秦；AbbottA-121798;AbbottA-76745;AbbottA-78773;[(R)(+)N'-[[5-(4-氟苯氧基)呋喃-2-基]-1-曱基-2-丙炔基]-N-羥基脲(AbbottA-79175);AbbottABT761;DainipponAL-3264;BayerBay-x-1005;BioforBF-389;布那司特；CytomedCMI-392;TakedaCV-6504;Ciba畫GeigyCGS-26529;磷酸依那扎群；LeoDenmarkETH-615;鹽酸氟卓斯??；MerckFrosstL663536;MerckFrosstL畫699333;MerckleML-3000;3MPharmaceuticalsR-840;利洛吡司；ScheringPloughSCH-40120;替泊沙林；林那司特(TMK-688);ZenecaZD-7717;ZenecaZM-216800;ZenecaZM-230487;ZenecaZD-2138;和NDGA(去甲二氫愈創(chuàng)木酸)。16.權(quán)利要求15的方法，其中所述小分子選自替尼達(dá)普；齊留通；flobufen;氯萘帕林；他戈利。秦；AA-861;AbbottA-121798;AbbottA-76745;AbbottA-78773;[(R)(+)N'-[[5-(4-氟苯氧基)呋喃-2-基]-l陽(yáng)甲基-2-丙炔基]-N-鞋基脲(AbbottA-79175);AbbottABT761;Ciba-GeigyCGS-26529;BioforBF-389;CytomedCMI-392;LeoDenmarkETH-615;MerckFrosstL699333;MerckleML-3000;3MPharmaceuticalsR-840;林那司特(TMK-688);ZenecaZD-7717;ZenecaZM-216800;ZenecaZM-230487;ZenecaZD-2138;和NDGA(去曱二氫愈創(chuàng)木酸)。17.權(quán)利要求11的方法，其中所述化合物包括一種核酸，該核酸包含選自下組的序列5，-AACTGGGCGAGATCCAGCTGG-3,,5，-AAGCTCCCGGTGACCACGGAG-3'，5，-AAGGAAGCCATGGCCCGATTC-3，，5'國(guó)AATCGAGAAGCGCAAGTACTG-3,,5'畫AAGGAGTGGACTTTGTTCTGA-3，，5，-AACTTCGGCCAGTACGACTGG-3，，5，-AAGTTGGCCCGAGATGACCAA-3，，5，-AACACATCTGGTGTCTGAGGT國(guó)3，，5，-AACCATGCGAGCCCCGCCACC-3,，5,-AAGCAAACATGGATCAAGAAA-3,,5'畫AAGTTCCTGCTGCGTTTGCTG-3,，5'畫AATTCAGCTCTTGAGAGCATT-3，，5，-AATGGATTCTTTGCCCATAAA-3'，5'誦AAGTACTTTGTCGGTTACCTA-3'，5，-AATCTATTGGCCATCTGGGCT-3'，5,-AACCAGAACTGTGTAGATGCG-3'5，畫AAGTGACTTTGAAAACTACAT-3',和5'誦AATGATGTCATGTCAGCTCCG-3，。18.權(quán)利要求11的方法，其中所述化合物包括一種核酸，該核酸包含選自下組的序列5，-GCAGGTGCTTCTCGCTGCAGCC-3，，5,畫GCCAGTACTTGCGCTTCTCG國(guó)3，，5'-CCATCGATATTGTTTTTGCC-3'，5,-GGAGCTTCTCGGGCAGCTCTGTGC-3，，5，-CCAGGTTCTTATACAGCAAGC-3'，5，-CCAGCAGCTTGAAAATGGGGTGC-3，，5，-GCCCCGGGCCTTGATGGCC-3，，5，-CCACGCCCTTGGCAGTCGG-3，，5，-GCGGAATCGGGCCATGGCTTCC-3，，5，-GTTCCGGTCCTCTGGAAGCTCC畫3'，5，-CGCAGACCAGAGCACAGCG-3，，5，曙GCAAACGCAGCAGGAAC-3，，5'畫CGTTTCCCAAATATGTAGCC-3，，5，-GTTTTCAAAGTCACTTCCG-3，，5，-GGTTAACTCAAGCTGTGAAGC畫3，，5，-GGAGCTGACATGACATC-3,，和5，畫GGCCACGGTCATGTTCAAGG國(guó)3,。19.權(quán)利要求1的方法，進(jìn)一步包括給所述受試者施用藥物有效量的降低COX-1活性的化合物。20.權(quán)利要求19的方法，其中所述化合物選自SC-560、FR122047、戊酰水楊酸、阿斯匹林、右酮洛芬、Keterolac、氟比洛芬和舒洛芬。21.權(quán)利要求1的方法，進(jìn)一步包括給所述受試者施用藥物有效量的提高COX-2活性的化合物。22.權(quán)利要求21的方法，其中所述化合物選自前列腺素E2、布他前列素、硫前列酮、CP-536,745-01、CP-043，305-02、CP-044,519-02、CP432、ONO-4819、CP-533,536、前列腺素F2a、比馬前列素、氯前列醇、拉坦前列素、tafluprost、骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP2)、血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)、白介素-la、白介素-ip、腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-P(TGF-|3)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、曱狀旁腺激素(PTH)、曱狀旁腺激素相關(guān)肽(PTHrP)和特立帕肽。23.權(quán)利要求1的方法，包括以足以提高所述受試者中C0X-2活性的量給所述受試者施用超聲治療或?qū)⑺鍪茉囌弑┞队诿}沖電磁場(chǎng)中。全文摘要公開(kāi)了促進(jìn)骨生成以加速或增強(qiáng)骨折愈合，治療骨質(zhì)缺損，和增強(qiáng)骨形成的方法。本方法通常調(diào)節(jié)花生四烯酸代謝或信號(hào)途徑，并且，特別地，利用5-脂氧合酶抑制劑。這些分子可單獨(dú)施用或與一種或多種抑制骨吸收、調(diào)節(jié)鈣從骨中的再吸收、增強(qiáng)骨積累、增強(qiáng)骨形成、誘導(dǎo)骨形成、削弱微生物生長(zhǎng)、減輕炎癥、和/或減輕疼痛的藥物組合施用。文檔編號(hào)A01N43/56GK101277614SQ200680036641公開(kāi)日2008年10月1日申請(qǐng)日期2006年8月18日優(yōu)先權(quán)日2005年8月18日發(fā)明者J·P·奧康納申請(qǐng)人:阿塞萊洛克斯公司