專利名稱：西藏嵩草種子萌發(fā)處理方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)畜牧領(lǐng)域，特別涉及西藏嵩草種子萌發(fā)處理技術(shù)背景技術(shù)嵩草屬(Kobresia Sp.)植物全世界共有70余種，在修訂了的嵩草屬植物的分類中，確認(rèn)了西藏就有36種和1亞種(張樹仁，2004)。嵩草屬植物多為高寒草甸的建群種或優(yōu)勢種。它具有草質(zhì)柔軟、營養(yǎng)豐富等特點(diǎn)，為各類家畜所喜食。嵩草屬寒冷、中生型多年生莎草科嵩草屬草本植物，是青藏高原控制水土流失的重要植物種類(楊永昌，1976；周興民，1982)。它的良好生長對維持青藏高原的生態(tài)平衡起著重要作用，是世界第三極高原畜牧業(yè)發(fā)展依賴的物質(zhì)基礎(chǔ)，是長江、黃河的發(fā)源地植被保護(hù)的重要物種。
在自然條件下，嵩草種了大多處于休眠狀態(tài)，一般很難發(fā)芽。為了保護(hù)西藏日益惡化的天然草地生態(tài)環(huán)境和發(fā)展西藏草地畜牧業(yè)，解決西藏本地優(yōu)勢種嵩草牧草的繁殖問題，用嵩草屬牧草恢復(fù)青藏高原嚴(yán)重退化草地植被，改善高寒草甸生態(tài)環(huán)境，發(fā)展草地畜牧業(yè)均具有重要意義。本發(fā)明關(guān)鍵解決了嵩草種子發(fā)芽率低的問題，克服了嵩草植物在青藏高原的繁殖困難。
很早就有人對青藏高原嵩草發(fā)芽問題作過研究，但都沒有最終解決其發(fā)芽率低的關(guān)鍵問題。1992年喬有明做了線葉嵩草、窄果嵩草和高山嵩草的發(fā)芽試驗(yàn)。采取常規(guī)方法，當(dāng)年采集種子發(fā)芽試驗(yàn)無效果，貯藏半年后發(fā)芽率突破了零，貯藏一年半后發(fā)芽率可達(dá)13％。如對海北站高寒草甸矮生嵩草種群繁殖對策的研究表明，矮生嵩草無性小株的平均壽命為4-5年；其種子野外萌發(fā)率僅為3％(鄧自發(fā)等，2001a)；藏嵩草種子室內(nèi)和野外萌發(fā)率分別為4％和2％(鄧自發(fā)，等，2001b)。但是另有研究表明，藏嵩草種子經(jīng)氫氧化鈉溶液和赤霉素溶液處理后的室內(nèi)和野外種子萌發(fā)率分別為1％和6.7％(鄧自發(fā)，2001b)。小嵩草種子室內(nèi)和野外萌發(fā)率分別僅有4％和1％，經(jīng)氫氧化鈉溶液和赤霉素溶液處理后的種子萌發(fā)率分別為1％和2％(鄧自發(fā)，2002)。線葉嵩草種子在兩種貯藏溫度室溫(15±8)℃和(25±1)℃條件下，隨貯藏時間的延長，98％硫酸處理促進(jìn)種子萌發(fā)效果上升，處理冰箱中貯藏的種子發(fā)芽率達(dá)47.5％。而20g/L NaOH的促進(jìn)效果有所下降，適當(dāng)增大處理濃度(40g/L)，效果較好(王得賢，2004)。以上對嵩草屬牧草種子萌發(fā)的研究結(jié)果并不一致，處理技術(shù)不過關(guān)，總體上尚未解決嵩草種子萌發(fā)處理技術(shù)和發(fā)芽率低的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種西藏嵩草種子萌發(fā)處理方法，該方法能夠提高西藏嵩草種子發(fā)芽率。
為了實(shí)現(xiàn)上述任務(wù)，本發(fā)明采取如下的技術(shù)解決方案1.一種西藏嵩草種子萌發(fā)處理方法，其特征在于，包括下列步驟第一步，于當(dāng)年8月中旬到9月上旬，在西藏自治區(qū)高寒嵩草草原到高寒嵩草草甸，≥0℃積溫在800℃～1000℃，降水量在300mm～550mm地區(qū)采種，嵩草種子的蠟熟期至成熟期間，嵩草種子的顏色呈現(xiàn)淡粟色至粟色，即可采收嵩草種子，采收的種子含水量為35％～47％；第二步，對采收的嵩草種子除雜，選潔凈種子常溫下存放一個月，以渡過種子休眠期；然后冷濕層化處理，即在溫度為0～4℃的濕沙中埋藏14天；常溫下日光曬干，并擦破種皮；第三步，將擦破種皮的干凈種子用無菌水沖洗3～5次，然后放入0.1％的氯化汞中浸泡3分鐘～4分鐘，取出用無菌水反復(fù)沖洗4～5次；再用濃度為20g/L～40g/L的氫氧化鈉溶液處理種子3小時，取出后用無菌水反復(fù)沖洗6～9次；
第四步，取直徑25cm的干凈培養(yǎng)皿作為發(fā)芽床，培養(yǎng)皿內(nèi)墊入雙層圓形濾紙并用0.2％的硝酸鉀溶液浸透，隨機(jī)取氫氧化鈉溶液處理后并清洗干凈的嵩草種子呈方陣形均勻擺入發(fā)芽床中，每粒種子之間保持一定距離，以減少相鄰種子對種苗發(fā)育的影響和病菌的相互感染，蓋好培養(yǎng)皿上蓋；第五步，待置床后的種子濕潤，開始在5～10℃溫度下冷凍保持7天，然后移入人工氣候箱進(jìn)行發(fā)芽培養(yǎng)，發(fā)芽培養(yǎng)的光照條件設(shè)定為每日光照時段、黑暗時段交替進(jìn)行光照時間8～10小時，溫度25℃，光強(qiáng)為2300～5500LX，；黑暗時間14～16小時，溫度為15℃，光強(qiáng)為100～750LX；每天加入少許無菌水，加入量以保持濾紙濕潤為準(zhǔn)，注水要均勻一致，使種子吸水良好，共進(jìn)行28天，即可大幅度提高嵩草種子的平均發(fā)芽率。
按照本發(fā)明的方法處理后的西藏嵩草種子，對其發(fā)芽勢和發(fā)芽率進(jìn)行測定，其方法分別是1)發(fā)芽勢是在進(jìn)行種子發(fā)芽率檢測初期進(jìn)行，嵩草種子在第4～6天開始萌發(fā)，以第7天初次記數(shù)正常發(fā)芽的種子數(shù)占供試種子的百分比，以％表示，精確到0.1％，計(jì)算公式如下GE=N1N×100%]]>式中GE表示發(fā)芽勢，％；N表示供試種子數(shù)；N1表示規(guī)定天數(shù)內(nèi)全部正常發(fā)芽的種子數(shù)；2)芽率進(jìn)行測定參照GB/T 2930.4-2001牧草種子檢驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)，以％表示，精確到0.1％；在初次記數(shù)后，每隔1～2天記數(shù)一次，記錄符合牧草種子檢驗(yàn)規(guī)程標(biāo)準(zhǔn)的正常種苗，將明顯死亡的或腐爛種子取出并記數(shù)；第28天作末次記數(shù)，分別記錄所有正常種苗、不正常種苗、硬實(shí)種子、新鮮未發(fā)芽種子和死種子數(shù)，復(fù)粒種子單位產(chǎn)生一株以上的正常種苗，僅記錄一株種苗；
結(jié)果計(jì)算末次觀察結(jié)束后，計(jì)算每一重復(fù)的正常種苗、不正常種苗、硬實(shí)種子、新鮮未發(fā)芽種子和死種子分別占供試種子的百分率，其中正常種苗的百分率為發(fā)芽率，然后計(jì)算4次重復(fù)的平均數(shù)，計(jì)算公式如下GI=N1N×100%]]>式中GI表示發(fā)芽率，％；N表示供試種子數(shù)；N1表示發(fā)芽終期全部正常發(fā)芽的種子數(shù)；計(jì)算后的允許差為5％，如果4次重復(fù)的數(shù)值之間均未超出最大容許差距則結(jié)果是可靠的，4次重復(fù)的平均數(shù)即為該樣品的發(fā)芽率；如果4次重復(fù)的數(shù)值之間超出最大容許差距，則應(yīng)進(jìn)行再次試驗(yàn)；如果兩次試驗(yàn)結(jié)果未超出最大容許差距，則兩次結(jié)果的平均數(shù)為該樣品的發(fā)芽率；如果兩次結(jié)果超出最大容許差距，則應(yīng)用同樣的方法進(jìn)行第三次試驗(yàn)。記錄相符合的兩次結(jié)果的平均數(shù)。
按照本發(fā)明的方法進(jìn)行西藏嵩草種子萌發(fā)處理，嵩草種子平均發(fā)芽率可達(dá)到80％以上，對于西藏嵩草草地的植被恢復(fù)、生態(tài)建設(shè)和草地畜牧業(yè)生產(chǎn)中的廣泛應(yīng)用有積極的作用。


圖1是本發(fā)明的工藝流程圖。
以下結(jié)合附圖和發(fā)明人給出的實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明的西藏嵩草種子萌發(fā)方法，具體包括下列步驟1)種子采集時間的確定在西藏自治區(qū)高寒嵩草草原到高寒嵩草草甸，≥0℃積溫在800～1000℃，降水量在300-550mm地區(qū)，一般采種時間在8月中旬到9月上旬，嵩草種子在蠟熟期到成熟期進(jìn)行采集，種子顏色呈現(xiàn)淡粟色至粟色，種子含水量在35～47％。
2)種子前處理對當(dāng)年采收的嵩草種子，選潔凈種子200克，常溫下(20℃-35℃)存放一個月，以渡過種子休眠期；然后冷濕層化(溫度為0～4℃的濕沙埋藏)處理14天；常溫下日光曬干，擦破種皮處理(一定要輕擦，因?yàn)槠浞N子較小)。
3)種子消毒將擦破種皮的干凈種子用無菌水沖洗3～5次，然后放入0.1％的氯化汞中浸泡3～4分鐘，用無菌水反復(fù)沖洗4～5次。
4)氫氧化鈉溶液處理用濃度為20g/L～40g/L的氫氧化鈉溶液處理種子3小時，用無菌水反復(fù)沖洗6～9次。
5)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗(yàn)采取紙上發(fā)芽(TP)。隨機(jī)取處理后清洗干凈的嵩草種子，充分混勻，分取400粒，分4個重復(fù)，各100粒；取直徑25cm的干凈培養(yǎng)皿4個，培養(yǎng)皿內(nèi)分別墊入雙層圓形濾紙并用0.2％的硝酸鉀溶液小心浸透，分別在每個培養(yǎng)皿內(nèi)，呈方陣形均勻整齊擺入10×10粒種子，每粒種子應(yīng)保持一定距離，以減少相鄰種子對種苗發(fā)育的影響和病菌的相互感染，蓋好培養(yǎng)皿上蓋。共4個重復(fù)。
6)預(yù)先冷凍待置床后的4個重復(fù)的種子濕潤，開始在5℃～10℃溫度下保持7天時間。
7)發(fā)芽光照條件在置床嵩草種子的4個培養(yǎng)皿預(yù)先冷凍7天后，移入人工氣候箱進(jìn)行發(fā)芽培養(yǎng)，光照條件設(shè)定為每日交替光照8～10小時，光強(qiáng)為2300～5500LX；黑暗14～16小時，光強(qiáng)為100～750LX。
8)發(fā)芽溫度條件在人工氣候箱，設(shè)定溫度條件為每日交替光照時段溫度25℃，黑暗時段溫度為15℃，共進(jìn)行30天發(fā)芽試驗(yàn)。每天需要加入少許無菌水，加入量以保持濾紙濕潤為準(zhǔn)，注水要均勻一致，使種子吸水良好。
9)發(fā)芽勢測定發(fā)芽勢是在進(jìn)行種子發(fā)芽率檢測初期進(jìn)行，嵩草種子在第4～6天開始萌發(fā)。以初次記數(shù)(第7天)記數(shù)正常發(fā)芽的種子數(shù)占供試種子的百分比。以％表示，精確到0.1％。計(jì)算公式如下GE=N1N×100%]]>式中GE——發(fā)芽勢，％；N——供試種子數(shù)；N1——規(guī)定天數(shù)內(nèi)全部正常發(fā)芽的種子數(shù)。
10)發(fā)芽率測定在實(shí)驗(yàn)室控制及標(biāo)準(zhǔn)條件下對種子發(fā)芽率進(jìn)行檢測，參照GB/T 2930.4-2001牧草種子檢驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)。以％表示，精確到0.1％。
在初次記數(shù)后，應(yīng)每隔1～2天記數(shù)一次，記錄符合牧草種子檢驗(yàn)規(guī)程標(biāo)準(zhǔn)的正常種苗。將明顯死亡的或腐爛種子取出并記數(shù)。末次記數(shù)(第28天)時，分別記錄所有正常種苗、不正常種苗、硬實(shí)種子、新鮮未發(fā)芽種子和死種子數(shù)。復(fù)粒種子單位產(chǎn)生一株以上的正常種苗，僅記錄一株種苗。
結(jié)果計(jì)算末次觀察結(jié)束后，計(jì)算每一重復(fù)的正常種苗、不正常種苗、硬實(shí)種子、新鮮未發(fā)芽種子和死種子分別占供試種子的百分率。其中正常種苗的百分率為發(fā)芽率。然后計(jì)算4次重復(fù)的平均數(shù)。公式如下GI=N1N×100%]]>式中GI——發(fā)芽率，％；N——供試種子數(shù)；N1——發(fā)芽終期全部正常發(fā)芽的種子數(shù)。
允許差5％。如果4次重復(fù)的數(shù)值之間均未超出最大容許差距則結(jié)果是可靠的，4次重復(fù)的平均數(shù)即為該樣品的發(fā)芽率。如果4次重復(fù)的數(shù)值之間超出最大容許差距，則應(yīng)進(jìn)行再次試驗(yàn)。如果兩次試驗(yàn)結(jié)果未超出最大容許差距，則兩次結(jié)果的平均數(shù)為該樣品的發(fā)芽率。如果兩次結(jié)果超出最大容許差距，則應(yīng)用同樣的方法進(jìn)行第三次試驗(yàn)。記錄相符合的兩次結(jié)果的平均數(shù)。
以下是發(fā)明人給出的實(shí)施例，從這些實(shí)施例中可以更進(jìn)一步清楚的理解本發(fā)明的特點(diǎn)。
實(shí)施例1西藏大花嵩草種子的萌發(fā)在西藏山南浪卡子當(dāng)年8月中旬到9月上旬采收的大花嵩草蠟熟期后期的種子，此時種子顏色呈現(xiàn)淡粟色，含水量39％～46％。常溫下(20℃-35℃)在麻袋或布袋里中自然貯藏30天。取出后于0～4℃的濕沙埋藏14天，常溫日光下曬干。把種子攤在水泥地上，用腳輕擦。用0.1％的氯化汞浸3～4分鐘對種子消毒；再用氫氧化鈉溶液處理(溶液濃度為20g/L～40g/L)3小時，之后用無菌水反復(fù)沖洗干凈。以0.2％的硝酸鉀溶液處理發(fā)芽床后，呈方陣形均勻整齊擺入10×10粒大花嵩草種子，5～10℃溫度下預(yù)冷7天；移入人工氣候箱進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為光照10小時，光強(qiáng)為2300～5500LX，其間溫度為25℃；黑暗12小時，光強(qiáng)為100～750LX，溫度為15℃，共進(jìn)行28天結(jié)束發(fā)芽。計(jì)算結(jié)果，平均發(fā)芽率可達(dá)到90.8％；而未經(jīng)過任何處理(對照組)的種子發(fā)芽率0％。
西藏大花嵩草種子萌發(fā)結(jié)果表

實(shí)施例2西藏矮生嵩草種子的萌發(fā)在西藏當(dāng)雄當(dāng)年8月中旬到9月上旬采收的矮生嵩草成熟期的種子，此時種子顏色呈現(xiàn)淡粟色，含水量36～45％。常溫下(20℃-35℃)在麻袋或布袋里中自然貯藏30天。取出后于0～4℃的濕沙埋藏14天，常溫日光下曬干。把種子攤在水泥地上，用腳輕擦。用0.1％的氯化汞浸3～4分鐘對種子消毒；再用氫氧化鈉溶液處理(溶液濃度為20g/L～40g/L)3小時，之后用無菌水反復(fù)沖洗干凈。以0.2％的硝酸鉀溶液處理發(fā)芽床后，呈方陣形均勻整齊擺入10×10粒大花嵩草種子，5～10℃溫度下預(yù)冷7天；移入人工氣候箱進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為光照10小時，光強(qiáng)為2300～5500LX，其間溫度為25℃；黑暗12小時，光強(qiáng)為100～750LX，溫度為15℃，共進(jìn)行28天結(jié)束發(fā)芽。計(jì)算結(jié)果，平均發(fā)芽率可達(dá)到61.0％；而未經(jīng)過任何處理(對照組)的種子發(fā)芽率10％。
西藏矮生嵩草種子萌發(fā)結(jié)果表

實(shí)施例3西藏高山嵩草種子的萌發(fā)在西藏那曲當(dāng)年8月中旬到9月上旬采收的高山嵩草成熟期的種子，此時種子顏色呈現(xiàn)粟色，含水量35～44％。常溫下(20℃-35℃)在麻袋或布袋里中自然貯藏30天。取出后于0～4℃的濕沙埋藏14天，常溫日光下曬干。把種子攤在水泥地上，用腳輕擦。用0.1％的氯化汞浸3～4分鐘對種子消毒；再用氫氧化鈉溶液處理(溶液濃度為20g/L～40g/L)3小時，之后用無菌水反復(fù)沖洗干凈。以0.2％的硝酸鉀溶液處理發(fā)芽床后，呈方陣形均勻整齊擺入10×10粒大花嵩草種子，5～10℃溫度下預(yù)冷7天；移入人工氣候箱進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為光照10小時，光強(qiáng)為2300～5500LX，其間溫度為25℃；黑暗12小時，光強(qiáng)為100～750LX，溫度為15℃，共進(jìn)行28天結(jié)束發(fā)芽。計(jì)算結(jié)果，平均發(fā)芽率可達(dá)到49.3％；而未經(jīng)過任何處理(對照組)的種子發(fā)芽率0％。
西藏高山嵩草種子萌發(fā)結(jié)果表

權(quán)利要求
1.一種西藏嵩草種子萌發(fā)處理方法，其特征在于，包括下列步驟第一步，于當(dāng)年8月中旬到9月上旬，在西藏自治區(qū)高寒嵩草草原到高寒嵩草草甸，≥0℃且積溫在800℃～1000℃，降水量在300mm～550mm地區(qū)采種，嵩草種子的蠟熟期至成熟期間，嵩草種子的顏色呈現(xiàn)淡粟色至粟色，即可采收嵩草種子，采收的種子含水量為35％～47％；第二步，對采收的嵩草種子除雜，選潔凈種子常溫下存放一個月，以渡過種子休眠期；然后冷濕層化處理，即在溫度為0～4℃的濕沙中埋藏14天；常溫下日光曬干，并擦破種皮；第三步，將擦破種皮的干凈種子用無菌水沖洗3～5次，然后放入0.1％的氯化汞中浸泡3分鐘～4分鐘，取出用無菌水反復(fù)沖洗4～5次；再用濃度為20g/L～40g/L的氫氧化鈉溶液處理種子3小時，取出后用無菌水反復(fù)沖洗6～9次；第四步，取直徑25cm的干凈培養(yǎng)皿作為發(fā)芽床，培養(yǎng)皿內(nèi)墊入雙層圓形濾紙并用0.2％的硝酸鉀溶液浸透，隨機(jī)選取氫氧化鈉溶液處理后并清洗干凈的嵩草種子呈方陣形均勻擺入發(fā)芽床中，每粒種子之間保持一定距離，以減少相鄰種子對種苗發(fā)育的影響和病菌的相互感染，蓋好培養(yǎng)皿上蓋；第五步，待置床后的種子濕潤，開始在5～10℃溫度下冷凍保持7天，然后移入人工氣候箱進(jìn)行發(fā)芽培養(yǎng)，發(fā)芽培養(yǎng)的光照條件設(shè)定為每日光照時段、黑暗時段交替進(jìn)行光照時間8～10小時，溫度25℃，光強(qiáng)為2300～5500LX，；黑暗時間14～16小時，溫度為15℃，光強(qiáng)為100～750LX；每天加入適量無菌水，加入量以保持濾紙濕潤為準(zhǔn)，注水要均勻一致，使種子吸水良好，共進(jìn)行28天，即可大幅度提高嵩草種子的平均發(fā)芽率。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種西藏嵩草種子萌發(fā)處理方法，對西藏當(dāng)年嵩草種子的蠟熟期至成熟期間，采收的種子含水量為35％～47％嵩草種子，經(jīng)常溫下存放、冷濕層化處理后擦破種皮，氯化汞中浸泡和氫氧化鈉溶液處理種子進(jìn)行4個重復(fù)，采用干凈培養(yǎng)皿作為發(fā)芽床，將嵩草種子呈方陣形均勻擺入發(fā)芽床中，開始在5～10℃溫度下冷凍保持7天，然后移入人工氣候箱進(jìn)行發(fā)芽培養(yǎng)，然后對種子發(fā)芽勢進(jìn)行測定，按照本發(fā)明的方法進(jìn)行西藏嵩草種子萌發(fā)處理，嵩草種子平均發(fā)芽率可達(dá)到80％以上，對于西藏嵩草草地的植被恢復(fù)、生態(tài)建設(shè)和草地畜牧業(yè)生產(chǎn)中的廣泛應(yīng)用有積極的作用。
文檔編號A01C1/02GK101061774SQ200710017658
公開日2007年10月31日 申請日期2007年4月10日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月10日
發(fā)明者呼天明, 王佺珍, 苗彥軍, 徐雅梅 申請人:西北農(nóng)林科技大學(xué)