專(zhuān)利名稱(chēng)：一種馬鈴薯試管苗集群式切段繁殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種馬鈴薯的繁殖方法，特別是一種馬鈴薯試管苗的繁殖方法。
背景技術(shù)：
馬鈴薯是重要的糧食作物之一，我省馬鈴薯的種植面積在常年100萬(wàn)畝以
上，是第三大種植作物。在過(guò)去，馬鈴薯生產(chǎn)長(zhǎng)期以來(lái)一直受"馬鈴薯退化" 的影響，新品種的優(yōu)良種性不斷喪失，導(dǎo)致馬鈴薯產(chǎn)量長(zhǎng)期低下，品質(zhì)也得不 到保證。隨著馬鈴薯脫毒技術(shù)的推廣應(yīng)用，這個(gè)問(wèn)題才根本上逐漸得以解決。 但是脫了毒的馬鈴薯在大田生產(chǎn)中很容易再次感染病毒，表現(xiàn)出"退化"現(xiàn)象， 三代以后即不能再作為種子使用。這就要求必須持續(xù)提供脫過(guò)毒的馬鈴薯試管 苗，為整個(gè)馬鈴薯生產(chǎn)源源不斷地提供優(yōu)質(zhì)的馬鈴薯脫毒種薯。馬鈴薯脫毒苗 繁殖技術(shù)是馬鈴薯脫毒種薯生產(chǎn)技術(shù)基礎(chǔ)，無(wú)論是在隔離網(wǎng)棚還是在隔離溫室， 生產(chǎn)馬鈴薯脫毒原原種都需要提供大量的脫毒試管苗。傳統(tǒng)的馬鈴薯試管苗生 產(chǎn)采用單株試管苗單節(jié)切段繁殖技術(shù)， 一般每次取一株試管苗，放培養(yǎng)皿內(nèi)，
依節(jié)間切成小段，再放入培養(yǎng)瓶(皿)中，每個(gè)培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)放約30個(gè)切段； 一般
每個(gè)培養(yǎng)瓶中，需要切6株試管苗、切30次才能完成一瓶。每切一株試管苗， 就必須對(duì)剪切工具進(jìn)行一次滅菌處理。切成小段的試管苗在培養(yǎng)皿內(nèi)的培養(yǎng)基 上，再進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，從而完成馬鈴薯試管苗的繁殖。這種方法操作煩瑣，效 率低，成本高；嚴(yán)重制約試管苗繁殖效率，影響脫毒馬鈴薯在馬鈴薯生產(chǎn)中的 大面積推廣應(yīng)用。發(fā)明的內(nèi)容
本發(fā)明的目的是要提供一種生產(chǎn)效率高、操作次數(shù)少、成本低、種苗受污 染的幾率也低的馬鈴薯試管種苗繁殖方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案是a.基礎(chǔ)苗培養(yǎng)馬鈴薯試管苗在20-22°C， 16小時(shí) 光照/8小時(shí)暗培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)22-25天，每個(gè)試管苗長(zhǎng)到5-6片葉子；
b.配制培養(yǎng)基配制簡(jiǎn)化MS培養(yǎng)基，即只含大量元素和微量元素成分的 MS培養(yǎng)基，加瓊脂粉6克/升，蔗糖30克/升，調(diào)節(jié)pH值為5.8;分裝到培養(yǎng)
瓶中，放入高壓滅菌鍋在12rC下滅菌20分鐘；取出平置，冷卻凝固，待用； C.集群切段在無(wú)菌工作臺(tái)上， 一次性用消過(guò)毒的鑷子取出培養(yǎng)瓶中的全
部基礎(chǔ)苗，用消過(guò)毒的剪刀，將取出的基礎(chǔ)苗基本按其節(jié)間位置同時(shí)切斷，切
入準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶；每瓶基礎(chǔ)苗切入4個(gè)新的培養(yǎng)瓶中；每個(gè)培養(yǎng)瓶放置的莖 段為基礎(chǔ)苗數(shù)的1.3-1.5倍；
d. 莖段擺放切完一瓶基礎(chǔ)苗后，用消過(guò)毒的鑷子將切入新的培養(yǎng)瓶中的 莖段進(jìn)行擺放，使每個(gè)莖段均勻分散平擺在培養(yǎng)基上，封口；
e. 培養(yǎng)將封口的培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為20-22°C， 16 小時(shí)光照/8小時(shí)黑暗，培養(yǎng)22-25天；
f. 再次切段繁殖重復(fù)步驟b-e，直至所需要的量。
本發(fā)明具有如下的優(yōu)點(diǎn)和效果1、由于是將全部試管苗一次全部拿出進(jìn)行 切段，而不是一根一根地切段，所以效率大幅度提高。如果， 一次處理30根試 管苗，則效率可提高30倍。2、由于是將試管苗一次切入培養(yǎng)瓶中，莖段的擺 放也僅僅是個(gè)別調(diào)整而已。而不是將莖段一個(gè)一個(gè)地放入瓶中，也大大提高了 效率。3、由于一次成批處理多根試管苗，所以大大減少了對(duì)操作工具的滅菌次
數(shù)。如果一次處理30根試管苗，則切30根試管苗才對(duì)操作工具進(jìn)行一次滅菌 處理，而現(xiàn)有技術(shù)，每處理1根試管苗，就要對(duì)操作工具滅菌一次。同時(shí)，相 比于現(xiàn)有技術(shù)還大大減少了試管苗染菌的幾率。最后，由于效率的提高使得人 力資源得到節(jié)省，也就降低了成本。滅菌次數(shù)的減少，也降低了成本。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1、馬鈴薯青薯9號(hào)脫毒試管苗繁殖
a. 基礎(chǔ)苗培養(yǎng)馬鈴薯試管苗在20-22°C， 16小時(shí)光照/8小時(shí)暗培養(yǎng)的條 件下培養(yǎng)22-25天，每個(gè)試管苗長(zhǎng)到5-6片葉子；每瓶約30根苗；
b. 配制培養(yǎng)基配制簡(jiǎn)化MS培養(yǎng)基，即只含大量元素和微量元素成分的 MS培養(yǎng)基，加瓊脂粉6克/升、蔗糖30克/升，調(diào)節(jié)pH值為5.8;分裝到培養(yǎng) 瓶中，放入高壓滅菌鍋在12rC下滅菌20分鐘；取出平置，冷卻凝固，待用；
C.集群切段在無(wú)菌工作臺(tái)上， 一次性用消過(guò)毒的鑷子取出培養(yǎng)瓶中的全
部基礎(chǔ)苗，用消過(guò)毒的剪刀，將取出的基礎(chǔ)苗基本按其節(jié)間位i同時(shí)切斷，切
入準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶；每瓶基礎(chǔ)苗切入4個(gè)新的培養(yǎng)瓶中；每個(gè)培養(yǎng)瓶放置的莖 段為基礎(chǔ)苗數(shù)的1. 5倍；
d. 莖段擺放切完一瓶基礎(chǔ)苗后，用消過(guò)毒的鑷子將切入新的培養(yǎng)瓶中的 莖段進(jìn)行擺放，使每個(gè)莖段均勻分散平擺在培養(yǎng)基上，封口；
e. 培養(yǎng)將封口的培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為20-22°C， 16 小時(shí)光照/8小時(shí)黑暗，培養(yǎng)22-25天；
f. 再次切段繁殖重復(fù)步驟b-e，直至所需要的量。
結(jié)果顯示，培養(yǎng)25天后每瓶培養(yǎng)基上的苗子平均為30根，生長(zhǎng)正常，莖' 粗，株高、葉片數(shù)、根長(zhǎng)等生長(zhǎng)指標(biāo)與同期用傳統(tǒng)方法繁殖培養(yǎng)的苗子沒(méi)有顯
著差異。 -
實(shí)施例2、馬鈴薯青薯2號(hào)脫毒試管苗繁殖
a. 基礎(chǔ)苗培養(yǎng)馬鈴薯試管苗在20-22°C， 16小時(shí)光照/8小時(shí)暗培養(yǎng)的條 件下培養(yǎng)22-25天，每個(gè)試管苗長(zhǎng)到5-6片葉子；每瓶約30根苗；
b. 配制培養(yǎng)基酉己制簡(jiǎn)化MS培養(yǎng)基，即只含大量元素和微量元素成分的 MS培養(yǎng)基，加瓊脂粉6克/升、蔗糖30克/升，調(diào)節(jié)pH值為5.8;分裝到培養(yǎng) 瓶中，放入高壓滅菌鍋在12rC下滅菌20分鐘；取出平置，冷卻凝固，待用；
C.集群切段在無(wú)菌工作臺(tái)上， 一次性用消過(guò)毒的鑷子取出培養(yǎng)瓶中的全
部基礎(chǔ)苗，用消過(guò)毒的剪刀，將取出的基礎(chǔ)苗基本按其節(jié)間位置同時(shí)切斷，切
入準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶；每瓶基礎(chǔ)苗切入4個(gè)新的培養(yǎng)瓶中；每個(gè)培養(yǎng)瓶放置的莖 段為基礎(chǔ)苗數(shù)的1. 3倍；
d. 莖段擺放切完一瓶基礎(chǔ)苗后，用消過(guò)毒的鑷子將切入新的培養(yǎng)瓶中的 莖段進(jìn)行擺放，使每個(gè)莖段均勻分散平擺在培養(yǎng)基上，封口；
e. 培養(yǎng)將封口的培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為20-22°C， 16 小時(shí)光照/8小時(shí)黑暗，培養(yǎng)22-25天；
f. 再次切段繁殖重復(fù)步驟b-e，直至所需要的量。
結(jié)果顯示，培養(yǎng)25天后每瓶培養(yǎng)基上的苗子平均為30根，生長(zhǎng)正常，莖粗， 株高、葉片數(shù)、根長(zhǎng)等生長(zhǎng)指標(biāo)與同期用傳統(tǒng)方法繁殖培養(yǎng)的苗子沒(méi)有顯著差 異。
實(shí)施例3、炸片型馬鈴薯大西洋品種脫毒試管苗繁殖
a.基礎(chǔ)苗培養(yǎng)馬鈴薯試管苗在20-22。C， 16小時(shí)光照/8小時(shí)暗培養(yǎng)的條 件下培養(yǎng)22-25天，每個(gè)試管苗長(zhǎng)到5-6片葉子；每瓶約30根苗；
b.配制培養(yǎng)基配制簡(jiǎn)化MS培養(yǎng)基，即只含大量元素和微量元素成分的
MS培養(yǎng)基，加瓊脂粉6克/升、蔗糖30克/升，調(diào)節(jié)pH值為5.8;分裝到培養(yǎng)
瓶中，放入高壓滅菌鍋在12rC下滅菌20分鐘；取出平置，冷卻凝固，待用；
C.集群切段在無(wú)菌工作臺(tái)上， 一次性用消過(guò)毒的鑷子取出培養(yǎng)瓶中的全 部基礎(chǔ)苗，用消過(guò)毒的剪刀，將取出的基礎(chǔ)苗基本按其節(jié)間位置同時(shí)切斷，切 入準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶；每瓶基礎(chǔ)苗切入4個(gè)新的培養(yǎng)瓶中；每個(gè)培養(yǎng)瓶放置的莖 段為基礎(chǔ)苗數(shù)的1.5倍；
d. 莖段擺放切完一瓶基礎(chǔ)苗后，用消過(guò)毒的鑷子將切入新的培養(yǎng)瓶中的 莖段進(jìn)行擺放，使每個(gè)莖段均勻分散平擺在培養(yǎng)基上，封口；
e. 培養(yǎng)將封口的培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為20-22°C， 16 小時(shí)光照/8小時(shí)黑暗，培養(yǎng)22-25天；
f. 再次切段繁殖重復(fù)步驟b-e，直至所需要的量。
結(jié)果顯示，集群式切段繁殖的馬鈴薯試管苗生長(zhǎng)指標(biāo)與傳統(tǒng)方法繁殖的試 管苗的生長(zhǎng)指標(biāo)間沒(méi)有顯著差異，單人切斷繁殖效率是傳統(tǒng)方法的6倍。
權(quán)利要求
1.一種馬鈴薯試管苗集群式切段繁殖方法，其特征在于a.基礎(chǔ)苗培養(yǎng)馬鈴薯試管苗在20-22℃，16小時(shí)光照/8小時(shí)暗培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)22-25天，每個(gè)試管苗長(zhǎng)到5-6片葉子；b.配制培養(yǎng)基配制簡(jiǎn)化MS培養(yǎng)基，即只含大量元素和微量元素成分的MS培養(yǎng)基，加瓊脂粉6克/升，蔗糖30克/升，調(diào)節(jié)pH值為5.8；分裝到培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋在121℃下滅菌20分鐘；取出平置，冷卻凝固，待用；c.集群切段在無(wú)菌工作臺(tái)上，一次性用消過(guò)毒的鑷子取出培養(yǎng)瓶中的全部基礎(chǔ)苗，用消過(guò)毒的剪刀，將取出的基礎(chǔ)苗基本按其節(jié)間位置同時(shí)切斷，切入準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶；每瓶基礎(chǔ)苗切入4個(gè)新的培養(yǎng)瓶中；每個(gè)培養(yǎng)瓶放置的莖段為基礎(chǔ)苗數(shù)的1.3-1.5倍；d.莖段擺放切完一瓶基礎(chǔ)苗后，用消過(guò)毒的鑷子將切入新的培養(yǎng)瓶中的莖段進(jìn)行擺放，使每個(gè)莖段均勻分散平擺在培養(yǎng)基上，封口；e.培養(yǎng)將封口的培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為20-22℃，16小時(shí)光照/8小時(shí)黑暗，培養(yǎng)22-25天；f.再次切斷繁殖重復(fù)步驟b-e；直至所需要的量。
全文摘要
一種馬鈴薯試管苗集群式切段繁殖方法，其特點(diǎn)是配制簡(jiǎn)化MS培養(yǎng)基，再加瓊脂粉6克/升，蔗糖30克/升，調(diào)節(jié)pH值為5.8；分裝到培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋在121℃下滅菌20分鐘；在無(wú)菌工作臺(tái)上，一次取出培養(yǎng)瓶中的全部基礎(chǔ)苗，用消過(guò)毒的剪刀，將取出的基礎(chǔ)苗基本按其節(jié)間位置同時(shí)切斷，切入準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶；每瓶基礎(chǔ)苗切入4個(gè)新的培養(yǎng)瓶中；每個(gè)培養(yǎng)瓶放置的莖段為基礎(chǔ)苗數(shù)的1.3-1.5倍；將切入新的培養(yǎng)瓶中的莖段進(jìn)行擺放；將封口的培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為20-22℃，16小時(shí)光照/8小時(shí)黑暗，培養(yǎng)22-25天；重復(fù)上述步驟直至所需要的量。
文檔編號(hào)A01H4/00GK101336612SQ200710018339
公開(kāi)日2009年1月7日 申請(qǐng)日期2007年7月4日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月4日
發(fā)明者云 周, 楊永智, 艦 王 申請(qǐng)人:青海省農(nóng)林科學(xué)院