專利名稱：：用于治療甲狀旁腺功能亢進和高鈣血癥的聚陽離子鈣調(diào)節(jié)肽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及聚陽離子鈣調(diào)節(jié)肽及其藥物組合物，并且涉及所述肽和組合物用于在需要所述治療的受試者中減少甲狀旁腺激素(PTH)和/或治療高鈣血癥的方法中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：鈣的體內(nèi)穩(wěn)態(tài)鈣的體內(nèi)穩(wěn)態(tài)是機體通過其保持充足的鈣水平的機制。該過程是高度調(diào)節(jié)性的，并且包括在鈣吸收、轉(zhuǎn)運、在骨中存儲、在其它組織中沉積、和排泄之間的復(fù)雜的相互作用。PTH是血清鈣水平的最重要的調(diào)節(jié)劑，并且作用通過經(jīng)由骨再吸收作用增加鈣從骨的釋放而提高血液中的鈣濃度；提高鈣從腎小管的再吸收；并且通過增加維生素D的活性形式1,25-(OH)2維生素D的產(chǎn)量而提高在小腸中的鈣吸收。PTH還刺激磷從腎臟的排泄，并且增加從骨的釋放。PTH分泌受鈣感應(yīng)受體(CaSR)調(diào)節(jié)，f丐感應(yīng)受體(CaSR)是表達在甲狀旁腺細胞細胞表面上的一種G-蛋白偶聯(lián)受體，其檢測細胞外鈣離子(Ca2,濃度的小波動并且通過改變PTH的分泌而響應(yīng)。(^2+對CaSR的激活在數(shù)秒到數(shù)分鐘內(nèi)抑制PTH的分泌，并且該過程可以由該受體的蛋白激酶C(PKC)磷酸化調(diào)控。CaSR還表達在成骨細胞上和在腎臟中，在腎臟中它調(diào)節(jié)腎的(^2+排泄。另外，PTH調(diào)節(jié)磷的體內(nèi)穩(wěn)態(tài)。PTH刺激在頂端膜(刷狀緣膜)和基底外側(cè)膜二者上的甲狀旁腺激素受體l(PTHR1)。由于通過在刷狀緣膜上的腎Na+/磷酸鹽(NaPi-^a)協(xié)同轉(zhuǎn)運體的內(nèi)在化而減少，PTHR1刺激導(dǎo)致磷酸鹽(Pi)尿路排泄的增加。預(yù)計PKC激活類似地減少Pi排泄。PTH還參與骨中的成骨細胞和破骨細胞的調(diào)節(jié)。PTH通過提高鈣的骨再吸收和腎吸收而增加血清Ca2+。PTH刺激成骨細胞產(chǎn)生RANK配體(RANKL)，其與RANK受體結(jié)合并且激活破骨細胞，導(dǎo)致骨再吸收的增加和血清C的增加。護骨蛋白(OPG)是RANKL的誘殺型受體，其阻斷骨再吸收。骨質(zhì)疏松癥由破骨細胞的骨再吸收和成骨細胞的骨形成過程之間的不平衡導(dǎo)致。高鈣血癥和甲狀旁腺功能亢進人體含有約1kg鈣，其中99%沉積在骨中。在正常條件下，循環(huán)鈣離子(Ca2+)嚴格保持在約8-10mg/dL(g卩，2.25-2.5mmol/L;600mg)的水平。約lg元素鈣(C^+)是日常攝取的。在該量中，吸收約200mg/天，并且排泄800mg/天。另外，約500mg/天通過骨再吸收釋放，或沉積在骨中。每天約10g(^2+通過腎過濾，其中約200mg出現(xiàn)在尿中，并且其余的被重新吸收。高鈣血癥是在血液中升高的鈣水平。急性高轉(zhuǎn)血癥可以導(dǎo)致胃腸癥狀(厭食、惡心、嘔吐)；腎癥狀(尿頻(polvuria)、多飲)，神經(jīng)肌肉癥狀(抑郁、意識模糊、木僵、昏迷)和心臟癥狀(心搏徐緩、第一度房室(firstdegreeatrio-ventricular))癥狀。慢性高鈣血癥也與胃腸癥狀(消化不良、便秘、胰腺炎)；腎癥狀(腎石病、腎鈣質(zhì)沉著)，神經(jīng)肌肉癥狀(虛弱)和心臟(高血壓阻滯、毛地黃敏感性)癥狀相關(guān)。異常心律可以導(dǎo)致，并且短QT時間間隔和加寬的T波的EKG發(fā)現(xiàn)表示高鈣血癥。高鈣血癥可以是無癥狀的，癥狀主要在高鈣水平(12.0mg/dL或3mmol/l)發(fā)生。認為嚴重的高鈣血癥(在15-16mg/dL或3.75-4mmol/1以上)是醫(yī)學(xué)緊急事件在這些水平，可以導(dǎo)致昏迷和心臟停博。高鈣血癥通常由甲狀旁腺功能亢進引起，甲狀旁腺功能亢進導(dǎo)致過量的骨再吸收和升高的血清鈣水平。在原發(fā)性偶發(fā)性甲狀旁腺功能亢進中，PTH由單甲狀旁腺腺瘤過量產(chǎn)生；較不常見地，多個腺瘤或彌散的甲狀旁腺腺體增生可能是原因。增加的PTH分泌導(dǎo)致骨再吸收的凈增加，釋放C^+和磷酸鹽(Pi)。PTH還提高C^+的腎再吸收，并且抑制磷酸鹽(Pi)的再吸收，這導(dǎo)致血清鈣的凈增加和磷酸鹽的減少。當(dāng)血漿(^2+水平減少刺激PTH分泌時，發(fā)生繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進。繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進的最重要的起因是慢性腎不足，諸如在多囊腎病或慢性腎盂腎炎中的那些，或是慢性腎衰竭，諸如在血液透析患者中的那些。響應(yīng)由低鈣攝入、GI病癥、腎不足、維生素D缺乏、和腎高鈣尿癥導(dǎo)致的低血鈣癥可能產(chǎn)生過量的PTH。在長期的繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進和高鈣血癥之后，可能發(fā)生三發(fā)性甲狀旁腺功能亢進。惡性病是非PTH介導(dǎo)的高鈣血癥的最常見的起因。惡性高爭丐血癥是癌癥的罕見但嚴重的并發(fā)癥，影響10%-20%的癌癥患者，并且可能與實體瘤和白血病一起發(fā)生。該病癥具有突然的發(fā)作，并且具有非常低的預(yù)后，平均存活僅為6周。在腫瘤細胞中，生長因子(GF)調(diào)節(jié)甲狀旁腺激素-相關(guān)蛋白(PTHrP)的生產(chǎn)。腫瘤細胞可能受自分泌GF的刺激而增加PTHrP的生成，導(dǎo)致提高的骨再吸收。轉(zhuǎn)移到骨的腫瘤細胞也可以分泌PTHrP，其可以再吸收骨，并且釋放額外的GF，其又以旁分泌方式作用進一步增加PTHrP生成。轉(zhuǎn)模擬齊U(CalcimimeticAgents)鈣模擬劑是模擬鈣在各種組織上的作用的藥物。已經(jīng)描述了具有對甲狀旁腺鈣感應(yīng)受體(CaSR)的活性的苯烷基胺鈣模擬劑。參見Nemeth等，美國國家科學(xué)院學(xué)報(尸rac.A^/.5W.),95:4040-4045(1998)。一種這樣的試劑，Cinacalcet,市售用于甲狀旁腺功能亢進的治療。另外，CaSR還可以感應(yīng)和響應(yīng)其它二價和多價陽離子，以及有機聚陽離子，諸如精胺、六環(huán)(hexacyclin)、聚賴氨酸、聚精氨酸、魚精蛋白、淀粉狀(3-肽、新霉素、和慶大霉素，盡管報道這些陽離子缺乏針對CaSR的敏感性并且具有針對CaSR的相對低的功效。參見Nagano和Nemeth，藥學(xué)科學(xué)雜志尸/wmwco/.),97:355-360(2005);還參見Brown等，骨礦物質(zhì)研究雜志(/5o"eM^"aWas.)，6:1217-1225(1991)。蛋白激酶C蛋白激酶C(PKC)是參與各種細胞功能，包括細胞生長、基因表達調(diào)控和離子通道活性的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的關(guān)鍵酶。PKC家族的同工酶包括至少ll種不同的蛋白激酶，基于它們的同源性和針對激活劑的敏感性，它們可以分成至少3個亞家族。經(jīng)典或cPKC亞家族的成員，a，|3(3),和y同工酶，包含由同工酶-特有的(可變或V)區(qū)域間隔的4個同源結(jié)構(gòu)域(C1，C2,C3和C4)，并且激活需要鈣、磷脂酰絲氨酸(PS)、和二?；视?DG)或佛波醇酯。新型或nPKC亞家族成員，5，s，"，和e同工酶，激活不需要鈣。最后，非典型的或aPKC亞家族成員，C和Vi同工酶，對DG、佛波醇酯和轉(zhuǎn)不敏感。關(guān)于PKC同工酶亞細胞分布的研究表明PKC的激活導(dǎo)致其在細胞內(nèi)的重新分布(也稱為易位)，以致激活的PKC同工酶與質(zhì)膜、細胞骨架元件、核、和其它亞細胞區(qū)室締合。似乎不同PKC同工酶特有的細胞功能由它們的亞細胞定位決定。例如，發(fā)現(xiàn)激活的(^PKC在核內(nèi)，而發(fā)現(xiàn)激活的PnPKC在心肌細胞的核周和細胞外周處。此外，在相同的細胞中，sPKC結(jié)合交叉-條紋狀結(jié)構(gòu)(可能是收縮性的元件)，并且在激活后或在向固定細胞加入外源激活的sPKC后，細胞-細胞接觸。不同PKC同工酶在細胞不同區(qū)域的定位又似乎是由于激活的同工酶與稱為關(guān)于激活的C-激酶的受體(RACKs)的特異性錨定分子的結(jié)合引起。認為RACKs通過將激活的PKC同工酶選擇性錨定至它們各自的亞細胞位點而行使功能。RACKs僅結(jié)合激活的PKC，并且不必需是該酶的底物。與RACKs的結(jié)合也不是通過該激酶的催化結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)。PKC的易位反映激活的酶與錨定在細胞特定部分的RACKs的結(jié)合，并且與RACKs的結(jié)合是PKC產(chǎn)生其細胞響應(yīng)所必需的。抑制PKC與RACKs的體內(nèi)結(jié)合抑制PKC易位和PKC-介導(dǎo)的功能。已經(jīng)鑒定了編碼RACKl和RACK2的cDNA克隆。二者均是G蛋白卩亞基的同源物，所述G蛋白卩亞基是另一種易位蛋白激酶即P-腎上腺素能受體激酶(3-ARK的受體。與G-蛋白相似，RACKl，和RACK2具有7個WD40重復(fù)。最近的數(shù)據(jù)表明RACKl是關(guān)于激活的pilPKC的選擇性錨定蛋白。研究已經(jīng)表明RACK2(也稱為P'-COP)是關(guān)于ePKC的選擇性結(jié)合蛋白。Csukai等，生物化學(xué)雜志(J.Biol.Chem.)1997;272:29200-29206。PKC的易位是PKC同工酶正確功能所必需的。模擬RACKs上的PKC-結(jié)合位點或PKC上的RACK-結(jié)合位點的肽是PKC的同工酶-特異性易位抑制劑，其在體內(nèi)選擇性抑制該酶的功能。發(fā)明概述本發(fā)明涉及聚陽離子鈣調(diào)節(jié)肽及其藥物組合物，并且涉及所述肽和組合物在用于在需要所述治療的受試者中減少甲狀旁腺激素(PTH)和/或治療高鈣血癥的方法中的應(yīng)用。在一方面中，本發(fā)明提供用于在受試者中降低甲狀旁腺激素(PTH)水平的方法，所述方法包括給需要其的受試者施用治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽，由此減少血清PTH。在另一個方面中，本發(fā)明提供用于治療高轉(zhuǎn)血癥的方法，所述方法包括給需要其的受試者施用治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽，由此減少血清轉(zhuǎn)。在另一個方面中，本發(fā)明提供用于治療骨病的方法，所述方法包括給需要其的受試者施用治療有效量的聚陽離子鈣調(diào)節(jié)肽，由此減少骨轉(zhuǎn)換。在一些實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包含a)包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基的聚陽離子肽；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)包含第二含有巰基的殘基的貨物肽；其中所述第二含有巰基的殘基與所述第一含有巰基的殘基以二硫鍵鍵合。在其它實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包含a)第一聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第一氨基端、第一羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所述第一聚陽離子肽在第一氨基端、第一羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)第二聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第二氨基端、第二羧基端、和第二含有巰基的殘基；其中所述第二聚陽離子肽在第二氨基端、第二羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含6-30個在生理pH下帶正電荷的氨基酸。在其它實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包含聚陽離子肽，其包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和其中所述第一含有巰基的殘基包含可以作為游離巰基巰基或處于保護形式的巰基基團。在一些實施方案中，治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以將血清PTH減少至少20%，在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少10小時。在某些實施方案中，確定PTH水平的減少為血清全部PTH的減少。在其它實施方案中，治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以將血清全部PTH減少低于治療前基線水平的至少20%，在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少IO小時。在其它實施方案中，治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以將血清PTH減少30%-70%，在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少48小時。在某些實施方案中，治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以將血清轉(zhuǎn)減少至少5%，在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少10小時。在其它實施方案中，治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以將血清轉(zhuǎn)減少5%-20%，在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少48小時。本發(fā)明的方法有效用于治療患有以升高的血清PTH水平、升高的血清鈣水平、或二者為特征的病癥或疾病的受試者。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法還可以有效用于治療患有以減少的血清磷酸鹽水平為特征的病癥或疾病的受試者。在一些實施方案中，所述受試者是人。在其它實施方案中，所述受試者是人，并且減少血清PTH。在某些實施方案中，所述受試者是人，并且減少血清鈣。在其它實施方案中，所述受試者是人，并且減少骨轉(zhuǎn)換。在一些實施方案中，所述受試者患有原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進、繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進、三發(fā)性甲狀旁腺功能亢進、惡性高鈣血癥、轉(zhuǎn)移性骨病(例如骨肉瘤)、佩吉特病、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨軟化、軟骨鈣質(zhì)沉著病、軟骨發(fā)育不全、骨軟骨炎、囊性成骨不全、先天性低磷酸酯酶癥、纖維瘤性損傷、纖維性結(jié)構(gòu)不良、多發(fā)性骨髓瘤、溶骨性骨病、假體周圍(periprosthetic)骨質(zhì)溶解、牙周病、骨質(zhì)疏松癥、異常骨轉(zhuǎn)換、或高轉(zhuǎn)換性骨病。在具體實施方案中，所述受試者患有原發(fā)性、繼發(fā)性或三發(fā)性甲狀旁腺功能亢進。在優(yōu)選實施方案中，所述受試者患有繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(有時稱為SHPT)。預(yù)測在患有SHPT的受試者中的血清PTH的減少將降低骨轉(zhuǎn)換。在其它實施方案中，所述受試者患有惡性高鈣血癥或轉(zhuǎn)移性骨病(例如，骨肉瘤)。在其它實施方案中，所述受試者患有骨質(zhì)疏松癥。在一個方面中，本發(fā)明提供鈣調(diào)節(jié)肽，其包含a)包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基的聚陽離子肽；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)包含第二含有巰基的殘基的貨物肽；其中所述第二含有巰基的殘基與所述第一含有巰基的殘基以二硫鍵鍵合。在另一個方面中，本發(fā)明提供鈣調(diào)節(jié)肽，其包含a)第一聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第一氨基端、第一羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所碌第一聚陽離子肽在第一氨基端、第一羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)第二聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第二氨基端、第二羧基端、和第二含有巰基的殘基；其中所述第二聚陽離子肽在第二氨基端、第二羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含6-30個在生理pH下帶正電荷的氨基酸。在另一個方面中，本發(fā)明提供鈣調(diào)節(jié)肽，其包含聚陽離子肽，其包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和其中所述第一含有巰基的殘基包含可以作為游離巰基或處于保護形式的巰基基團。在一些這樣的實施方案中，所述聚陽離子肽還包含第二含有巰基的殘基，其與所述第一含有巰基的殘基以二硫鍵鍵合。在這樣的情形中，二硫鍵的形成構(gòu)成環(huán)形聚陽離子鈣調(diào)節(jié)肽。在另一個方面中，本發(fā)明提供與聚乙二醇(PEG)綴合形成加入聚乙二醇的肽的本文所述的鈣調(diào)節(jié)肽。在優(yōu)選實施方案中，PEG具有約5kDa-約40kDa的平均分子量。在另一個方面中，本發(fā)明提供包含本文進一步所述的鈣調(diào)節(jié)肽和一種或多種藥用賦形劑的藥物組合物。有效用于本發(fā)明方法的肽可以利用常規(guī)液相或固相技術(shù)進行化學(xué)合成，或可以重組產(chǎn)生。包含至少一種藥用賦形劑和所述肽的藥物組合物也考慮用于本文提供的方法。本發(fā)明的方法可以有效用于治療甲狀旁腺功能亢進、骨病、和其它高鈣血癥。示例性的疾病包括但不限于甲狀旁腺功能亢進(原發(fā)性、繼發(fā)性和三發(fā)性)、惡性高鈣血癥、轉(zhuǎn)移性骨病、佩吉特病、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨軟化、軟骨鈣質(zhì)沉著病、軟骨發(fā)育不全、骨軟骨炎、囊性成骨不全、先天性低磷酸鹽血癥、纖維瘤性損傷、纖維性結(jié)構(gòu)不良、多發(fā)性骨髓瘤、溶骨性骨病、假體周圍骨質(zhì)溶解、牙周病、骨質(zhì)疏松癥、異常骨轉(zhuǎn)換、或其它形式的高轉(zhuǎn)換骨病。附圖簡述圖1顯示在通過12-小時靜脈內(nèi)輸注以12.5mg/kg給藥KAI-1455的犬中PTH、血清鈣和血清磷酸鹽(iP)水平之間的關(guān)系。圖2顯示通過12小時的靜脈內(nèi)輸注以25mg/kg的劑量給藥KAI-1455的犬中的血清鈣水平，在12-小時輸注過程中補充鈣(2mg元素鈣/kg/小時)，并且在EOI后3-6小時再次補充。圖3顯示通過12小時的靜脈內(nèi)輸注以25mg/kg的劑量給藥KAI-1455的犬中的血清磷酸鹽水平，在12-小時輸注過程中補充鈣(2mg元素鈣/kg/小時)，并且在EOI后3-6小時再次補充。圖4顯示通過12小時的靜脈內(nèi)輸注以18,54,81和162mg/kg/小時的劑量施用KAI-1455的受試者中，KAI-1455在人血漿中的血漿藥物代謝動力學(xué)。在給藥前，給藥過程中的1,3,6，9,12小時時間點，以及在輸注結(jié)束后的2,5,7，10,15,20,30和60分鐘，確定KAI-1455濃度(ng/mL)。圖5顯示在通過12小時的靜脈內(nèi)輸注以18,54,81和162mg/kg的劑量施用KAI-1455的人中，在輸注開始時、和在輸注開始后3,6,9,12,15,18,21，24和48小時的離子化鈣(mmol/L)。圖6顯示在通過12小時的靜脈內(nèi)輸注以18,54,81和162mg/kg的劑量施用KAI-1455的人中，在輸注開始時、和在輸注開始后3，6,9,12,15,18,21，24和48小時的總f丐(mg/dL)。圖7顯示在通過12小時的靜脈內(nèi)輸注以18,54,81和162mg/kg的劑量施用KAI-1455的人中，在輸注開始時、和在輸注開始后3,6,9,12,15,18，21,24和48小時的f丐水平的百分數(shù)變化。圖8顯示在通過12小時的靜脈內(nèi)輸注以18,54,81和162mg/kg的劑量施用KAI-1455的人中，在輸注開始時、和在輸注開始后3,6,12,15,18,24和48小時的血漿PTH水平(pg/mL)。圖9顯示在通過12小時的靜脈內(nèi)輸注以18,54,81和162mg/kg的劑量施用KAI-1455的人中，在輸注開始時、和在輸注開始后3,6,12,15,18,24和48小時的血漿PTH水平的百分數(shù)變化。圖10顯示在通過4小時的靜脈內(nèi)輸注以54和108mg/kg的劑量施用KAI-1455的人中，在輸注開始時、和在輸注開始后2，3，4,6,8,12,16和36小時的離子化鈣(mmol/L)。圖11顯示在通過4小時的靜脈內(nèi)輸注以54和108mg/kg/小時的劑量施用KAI-1455的人中，在輸注開始時、和在輸注開始后2,3,4,6,8,12,16和36小時的總轉(zhuǎn)(mg/dL)。圖12顯示在通過4小時的靜脈內(nèi)輸注以54和108mg/kg/小時的劑量施用KAI-1455的人中，在輸注開始時、和在輸注開始后2,3，4,6,8,12,16和36小時的血漿PTH水平(pg/mL)。圖13顯示在通過3小時的靜脈內(nèi)輸注以9mg/kg/小時的給藥速率施用KP-1524(SEQIDNO:9)的麻醉大鼠(n-4)中，在輸注前、和在1，2,3和4小時的時間點的總鈣(mg/dL)和血漿PTH(pg/mL)。圖14顯示在通過3小時的靜脈內(nèi)輸注以9mg/kg/小時的給藥速率施用KP-9706(SEQIDNO:6)的麻醉大鼠(n-4)中，在給藥前、和在1,2,3，4和24小時的時間點的總鈣(mg/dL)水平。圖15顯示在大鼠EDTA血漿中關(guān)于KAI-1455(SEQIDNO:7),KP-9706(SEQIDNO:6)和KP-9803(SEQIDNO:8)的體外血漿穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及使用聚陽離子肽預(yù)防、治療或改善甲狀旁腺功能亢進、骨病和/或其它高鈣血癥的方法。當(dāng)用于本文時，除非另外指明，術(shù)語"甲狀旁腺功能亢進"是指原發(fā)性、繼發(fā)性和三發(fā)性甲狀旁腺功能亢進。在一個優(yōu)選的實施方案中，使用本發(fā)明的鈣調(diào)節(jié)肽治療患有繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進的受試者以降低血漿PTH水平。未治療的患有中度嚴重性的甲狀旁腺功能亢進的SHPT患者通常具有>300pg/ml的基線循環(huán)完整PTH水平，并且水平超過600pg/mL。在一個優(yōu)選的實施方案中，血清PTH的減少測量為低于治療前基線水平的完整PTH的減少。當(dāng)用于本文時，"鈣調(diào)節(jié)肽"是包含一個或多個聚陽離子肽和總共3-30個在生理pH下帶正電荷的氨基酸的肽，其中所述帶正電荷的氨基酸包含在所述聚陽離子肽內(nèi)，并且其中所述鈣調(diào)節(jié)肽能夠在一個或多個靶組織中、或在受試者中降低血清PTH和/或鈣水平。在某些實施方案中，當(dāng)將治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽施用給需要所述治療的受試者時，所述鈣調(diào)節(jié)肽能夠降低血清PTH和/或血清鈣水平。在優(yōu)選實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸。在特別優(yōu)選的實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包含6-12個在生理pH下帶正電荷的氨基酸。本發(fā)明的鈣調(diào)節(jié)肽包含總共約4-35個氨基酸殘基，包括帶正電荷的氨基酸殘基。在某些實施方案中，本發(fā)明的鈣調(diào)節(jié)肽包括聚陽離子肽和貨物肽，每一個包括包含巰基的殘基，其中所述包含巰基的殘基通過二硫鍵連接。在其它實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包括兩個聚陽離子肽，每個包括包含巰基的殘基，所述殘基通過二硫鍵連接。在一些這樣的實施方案中，所述第一聚陽離子肽和第二聚陽離子肽是相同的，以致二硫鍵的形成構(gòu)成同型二聚體結(jié)構(gòu)。在其它實施方案中，所述第一聚陽離子肽和第二聚陽離子肽是不同的，以致二硫鍵的形成構(gòu)成異型二聚體結(jié)構(gòu)。在其它實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包含單一聚陽離子肽和至少一個包含巰基的殘基，其中所述包含巰基的殘基含有游離的巰基或所述巰基部分以被保護的形式存在。在一些這樣的實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包含單一聚陽離子肽和兩個彼此以二硫鍵鍵合的包含巰基的殘基，(即，所述巰基部分以二硫化物基團被內(nèi)部"保護")，其中二硫鍵的形成提供環(huán)形的鈣調(diào)節(jié)肽。當(dāng)用于本文時，"聚陽離子肽"是指包含2-30個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、和至少一個包含巰基的殘基的肽，其中所述聚陽離子肽在肽的氨基端、羧基端、或兩端進行化學(xué)修飾(即,"加帽的")。聚陽離子肽可以在長度上總共3-25個氨基酸殘基、優(yōu)選地總共5-25個氨基酸殘基變化，并且可以由單重復(fù)的帶正電荷的氨基酸殘基組成，或可以包含多個天然的或非天然的氨基酸殘基。在優(yōu)選實施方案中，所述聚陽離子肽包含5-20個帶正電荷的氨基酸、優(yōu)選5-15個帶正電荷的氨基酸、更優(yōu)選地包含6-12個帶正電荷的氨基酸。在一些實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽僅包含一個聚陽離子肽。在其它實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包含兩個聚陽離子肽，其中每一個優(yōu)選地包含3-IO個帶正電荷的氨基酸。優(yōu)選的聚陽離子肽包括TAT-衍生的肽，例如具有SEQIDNO:5的序列的加帽的Cys-TAT肽或具有SEQIDNO:29的序列的截短的肽。還優(yōu)選包括3-7個精氨酸殘基的聚陽離子肽。在一些實施方案中，所述精氨酸殘基是連續(xù)的，諸如具有SEQIDNOs:19-26的序列的加帽的聚精氨酸肽。在其它實施方案中，所述聚陽離子肽可以包含不連續(xù)的3-7個精氨酸殘基，諸如具有SEQIDNO:32的肽。當(dāng)用于本文時，術(shù)語"帶正電荷的氨基酸"是指在生理pH下(在血槳中~7.4)帶正電荷的氨基酸殘基。帶正電荷的氨基酸獨立地選自生理pH下帶正電荷的天然的或非天然的具有L-或D-構(gòu)型的氨基酸，或它們的外消旋物，或它們具有任何手性純度程度的混合物。在一些實施方案中，所述帶正電荷的氨基酸選自天然的氨基酸。在其它實施方案中，所述帶正電荷的氨基酸選自天然的和/或非天然的氨基酸。在具體實施方案中，所述帶正電荷的氨基酸獨立地選自由下列各項組成的組組氨酸、賴氨酸、精氨酸、2,3-二氨基丙酸(Dap)、2,4-二氨基丁酸(Dab)、鳥氨酸、和高精氨酸。當(dāng)治療肽進入受試者的血漿中時，它變得易受肽酶的攻擊。外肽酶是典型的非特異性酶，其從肽或蛋白的氨基或羧基末端裂解氨基酸殘基。內(nèi)肽酶，其在氨基酸序列內(nèi)部裂解，也可以是非特異性的；然而，內(nèi)肽酶通常識別特定的氨基酸序列(識別位點)并且在這些位點處或附近裂解肽。一種保護肽組合物免于蛋白水解降解的方法包括"化學(xué)修飾"或"加帽"肽的氨基和/或羧基末端。當(dāng)用于本文時，術(shù)語"化學(xué)修飾"或"加帽"可互換使用，指通過共價修飾向肽的末端引入保護基團。適當(dāng)?shù)谋Ｗo基團在不減小肽的生物學(xué)活性的條件下起作用給肽的末端加帽。不希望受到理論束縛，據(jù)信將所述聚陽離子肽的至少一端加帽對于獲得充分的血漿穩(wěn)定性和暴露以在體內(nèi)獲得治療相關(guān)的PTH水平和/或l^減少是重要的。所述保護或"加帽"基團可以有效用來保護肽免于受到血清蛋白酶的蛋白水解降解。將所述肽的氨基末端乙?；且环N包含該肽免于蛋白水解降解的優(yōu)選方法。將所述肽的羧基末端酰胺化也是一種保護所述肽免于蛋白水解降解的優(yōu)選方法。然而，其它的加帽基團是可能的。例如，氨基端可以通過?；蚧酋；纬甚０坊蚧酋０范患用薄ｎ愃频?，羧基端可以被酯化、或轉(zhuǎn)化成仲酰胺、和酰基磺酰胺等。在一些實施方案中，所述氨基端或羧基端可以包含PEG化位點，即，氨基或羧基端可以通過與適當(dāng)官能化的PEG反應(yīng)而化學(xué)修飾。保護肽免受內(nèi)肽酶作用典型地包括鑒定并消除肽的內(nèi)肽酶識別位點。蛋白酶識別位點是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的。因此，可以鑒定潛在的內(nèi)肽酶識別位點，并且然后通過改變所述識別位點內(nèi)的氨基酸序列而消除所述位點?？梢砸苿踊蛉コ谧R別序列內(nèi)的殘基以破壞識別位點。優(yōu)選地，對鑒定的蛋白酶識別位點包括的一個或多個氨基酸進行保守取代。在優(yōu)選實施方案中，聚陽離子肽的氨基端通過乙?；瘜W(xué)修飾以提供N-乙酰基肽。在更優(yōu)選的實施方案中，聚陽離子肽的羧基端通過酰胺化化學(xué)修飾，以在C-端提供伯羧酰胺。在特別優(yōu)選的實施方案中，氨基端和羧基端均分別通過乙?；王０坊患用薄．?dāng)用于本文時，術(shù)語"包含巰基的殘基"是指包含巰基的氨基酸或包含巰基的化合物，其包括氨基基團和/或羧基基團，以致其可以結(jié)合到多肽中，其中所述巰基基團可以處于被保護的或未被保護的形式，并且當(dāng)所述巰基基團處于其游離形式時，其能夠形成二硫鍵。包含巰基的殘基的代表性實例包括，例如，半胱氨酸、高半胱氮酸、和巰基丙酸。當(dāng)所述包含巰基的殘基包含手性中心時，它可以以L-或D-構(gòu)型存在，或作為外消旋物，或以任何手性純度程度存在。在常見的實施方案中，所述包含巰基的殘基包括半胱氨酸或高半胱氨酸。所述包含巰基的殘基可以位于聚陽離子肽鏈的任何位置，包括氨基端、羧基端、或一些其它的位置。為了化學(xué)合成的便利，包含巰基的殘基通常利用包含處于被保護形式的包含巰基部分的結(jié)構(gòu)單元偶聯(lián)到肽鏈上。在一些實施方案中，在聚陽離子肽和貨物肽之間、或在第一和第二聚陽離子肽之間形成二硫鍵的包含巰基的殘基是相同的(g卩，半胱氨酸-半胱氨酸，或高半胱氨酸-高半胱氨酸)。在其它實施方案中，所述兩個包含巰基的殘基可以是不同的。在某些實施方案中，所述包含巰基的氨基酸可以處于被保護的形式。用于巰基部分的適當(dāng)?shù)谋Ｗo基團包括，例如，硫酯衍生物，特別是硫代乙酰或硫代苯甲?；愃莆?；硫代碳酸酯；半硫縮醛，諸如1-乙氧基乙基，甲氧基甲基和聚甲醛硫醚；和二硫化物保護基團，諸如在包含巰基的殘基的游離巰基和取代的或未取代的苯硫酚部分之間形成的二硫化物。在一些實施方案中，所述巰基保護基團可以在體內(nèi)裂解。所述被保護的包含巰基的殘基可以作用為前體藥物，掩蔽游離的巰基并且修飾包括這樣的被保護的包含巰基的殘基的鈣調(diào)節(jié)肽的物理化學(xué)、藥物代謝動力學(xué)和/或藥效特征。連接包含巰基的殘基可以放置在所述聚陽離子肽和/或貨物肽的序列中的任何位置。例如，在某些實施方案中，所述第一和第二包含巰基的殘基可以位于兩個聚陽離子肽的氨基端，或在其它實施方案中，位于聚陽離子肽和貨物肽的氨基端。連接包含巰基的殘基可以放置在所述肽的羧基端，或備選地在所述聚陽離子肽和貨物肽中之一的氨基端，和在另一個肽的羧基端。備選地，連接包含巰基的殘基可以放置在聚陽離子肽和/或貨物肽中的任一個或二者的序列內(nèi)的任何位置處。在一些實施方案中，第一包含巰基的殘基位于第一聚陽離子或聚陽離子肽的氨基端或羧基端。在其它實施方案中，所述第一含有巰基的殘基位于除第一聚陽離子或聚陽離子肽的氨基端或羧基端之外的位置。在一些實施方案中，第二含有巰基的殘基位于第二聚陽離子或貨物肽的氨基端或羧基端。在其它實施方案中，第二含有巰基的殘基位于除第二聚陽離子或貨物肽的氨基端或羧基端之外的位置。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述第一和第二含有巰基的殘基都是半胱氨酸殘基。在其它實施方案中，還可以使用高半胱氨酸類似物來在兩個聚陽離子肽之間或在聚陽離子肽和貨物肽之間形成二硫鍵。例如，高半胱氨酸的應(yīng)用可以在貨物肽、聚陽離子肽或在二者中使用，并且可以穩(wěn)定該組合物并且減少二硫鍵交換。其它半胱氨酸同系物也有效用于二硫鍵形成。類似地，半胱氨酸和高半胱氨酸的立體異構(gòu)體將抑制二硫鍵的交換。在一些實施方案中，第二含有巰基的殘基是所述聚陽離子肽中的另一個殘基，以致在第一和第二含有巰基的殘基之間形成二硫鍵構(gòu)成環(huán)形的聚陽離子肽。當(dāng)用于本文時，術(shù)語"貨物肽"是指5-25個氨基酸的肽，其包含第二含有巰基的殘基。在常見的實施方案中，所述貨物肽通過在第一和第二含有巰基的殘基之間形成分子間二硫鍵而與所述聚陽離子肽共價連接。在一些情形中，所述貨物肽可以包含帶正電荷的氨基酸殘基。然而，存在帶正電荷的氨基酸殘基不是貨物肽的必需特征。在某些實施方案中，所述貨物肽包含同工酶特異性PKC調(diào)節(jié)肽。當(dāng)用于本文時，當(dāng)化合物作用在參與骨重建和/或鈣體內(nèi)穩(wěn)態(tài)的特定的PKC同工酶時，該化合物是"同工酶-特異性的"，其與不能區(qū)分PKC同工酶的非特異性肽或化合物相反。當(dāng)用于本文時，"PKC調(diào)節(jié)肽"定義為能夠在一個或多個耙組織中完全或部分激活或抑制PKC同工酶活性的化合物。PKC調(diào)節(jié)肽可以在不同組織中表現(xiàn)出不同的同工酶特異性、激活劑或抑制劑活性和/或激活劑或抑制劑活性水平(完全或部分的)。在一些實施方案中，所述貨物肽是PKC調(diào)節(jié)肽，其中所述PKC調(diào)節(jié)肽包含這樣的氨基酸序列，所述氨基酸序列包括與選自由SEQIDNOs:l和2組成的組的肽大于50%的序列同一性。在其它方法中，所述PKC調(diào)節(jié)肽包括包含選自由SEQIDNOs:l和2組成的組的肽的5-9個連續(xù)殘基的氨基酸序列。在某些方法中，所述PKC調(diào)節(jié)肽包括選自由SEQIDNOs:l和2組成的組的氨基酸序列。在其它實施方案中，所述貨物肽是PKC調(diào)節(jié)肽，其中所述PKC調(diào)節(jié)肽包括包含與已知具有PKC調(diào)節(jié)活性的肽的大于50%的序列同一性的氨基酸序列。在其它實施方案中，本發(fā)明的鈣調(diào)節(jié)肽包括包含與選自由SEQIDNOs:6，7,8,9,10,12,13,14，15,16,17，18,19，20,21，22，23,24,25,26,28，28,31,和32組成的組的肽的大于50%的序列同一性的氨基酸序列。在其它實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包括包含選自由SEQIDNOs:6，7,8,9,10,12，13,14,15，16，17,18,19,20,21,22,23，24,25,26,28，28,31，和32組成的組肽的6-15個連續(xù)殘基的氨基酸序列。在某些方法中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包括選自由SEQIDNOs:7,9,10,和12組成的組的氨基酸序列。在具體實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包括與貨物肽二硫鍵鍵合的聚陽離子肽，如本文進一步所述。在優(yōu)選實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽選自具有SEQIDNO:7，SEQIDNO:9，SEQIDNO:10,或SEQIDNO:12的序列的肽。在其它實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包括與第二聚陽離子肽二硫鍵鍵合的第一聚陽離子肽，如本文進一步所述。在優(yōu)選實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽選自具有SEQIDNO:13,SEQIDNO:15,SEQIDNO:16，SEQIDNO:17,SEQIDNO:18的序列的肽。在其它實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包括包含第一含有巰基殘基的單個聚陽離子肽，其中所述巰基基團以被保護的或未保護的形式存在，如本文進一步所述。在一些這樣的實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽還包括第二含有巰基的殘基，以致二硫鍵的形成構(gòu)成環(huán)形肽。在優(yōu)選實施方案中，所述^調(diào)節(jié)肽選自具有SEQIDNO:5,SEQIDNO:14,SEQIDNOs:19畫26，SEQIDNO:29,或SEQIDNO:32的序列的肽。KAI-1455(SEQIDNO:7)包含同工酶-特異性PKC調(diào)節(jié)肽作為貨物肽。包含其它貨物肽的鈣調(diào)節(jié)肽，例如，KP-1524(SEQIDNO:9)，也在大鼠中以與KAI-1455相似的水平(實施例11和12)顯著降低總鈣和PTH水平。不希望受到理論束縛，與貨物肽連接二硫化物作用為前體藥物以在體內(nèi)保護所述聚陽離子肽，延長其在血漿內(nèi)作用的持續(xù)時間是可能的。不希望受到理論束縛，所述貨物肽可以提供提高或穩(wěn)定鈣和PTH調(diào)節(jié)活性的前體藥物形式是可能的。本發(fā)明的鈣調(diào)節(jié)肽包括至少一個包含巰基的殘基，其中所述巰基基團可以作為游離巰基、被保護的巰基存在，或可以與作為第二含有巰基的殘基二硫鍵鍵合。在常見的實施方案中，所述鈣調(diào)節(jié)肽包括至少兩個彼此二硫鍵鍵合的包含巰基的殘基。包含具有游離巰基基團的單個包含巰基的殘基的鈣調(diào)節(jié)肽表現(xiàn)出與KAI-1455所示的水平相當(dāng)?shù)乃降捏w外活性。例如，具有包含游離巰基的N-端半胱氨酸殘基的加帽的TAT-衍生的肽(SEQIDNO:5)，當(dāng)在體外檢測時，表現(xiàn)出與KAI-1455相當(dāng)?shù)幕钚?。包括具有游離的巰基基團的單一包含巰基的殘基的鈣調(diào)節(jié)肽本身可以有效用于本發(fā)明的方法，或所述巰基基團可以作為前體藥物施用，其通過如本文進一步所述將所述游離的巰基基團保護在可在體內(nèi)裂解的保護基團內(nèi)。在對包含巰基的治療劑的保護領(lǐng)域中，所述基團是已知的。在另一個方面中，本發(fā)明提供包含聚陽離子肽(如本文進一步所述)和至少一種藥用賦形劑的藥物組合物。在另一個方面中，本發(fā)明提供用于治療甲狀旁腺功能亢進、高鈣血癥和/或骨病的方法，所述方法包括施用治療有效量的本文所述的鈣調(diào)節(jié)肽，并且還包括用治療有效量的選自由下列各項組成的組的試劑治療受試者抗再吸收的二膦酸鹽試劑、整聯(lián)蛋白阻斷劑、激素替代治療劑、選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑、組織蛋白酶K抑制劑、維生素D治療、消炎劑、低劑量PTH治療、降鈣素、RANK配體的抑制劑、針對RANK配體的抗體、護骨蛋白、adensosine拮抗劑和ATP質(zhì)子泵抑制劑。在本發(fā)明的另一個方面中，所述鈣調(diào)節(jié)肽以有效減小血清PTH或PTH作用的量施用。在一些實施方案中，血清PTH的減少為低于基線治療前水平至少1%,2%，3%,4%，5%,6%,7%,8%,9%,10%,11%，12%，13%,14%，15%,16%,17%，18%,19%，20%,25%或30%，在施用所述f丐調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少10小時。在具體實施方案中，血清PTH的減少在施用后10小時是至少20%。在優(yōu)選實施方案中，血清PTH的減少是低于基線治療前水平15-40。/。，優(yōu)選地20-50%，更優(yōu)選地30-70%，在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少48小時。在本發(fā)明的另一個方面中，所述鈣調(diào)節(jié)肽以有效減少血清鈣或鈣作用的量施用。在一些實施方案中，所述血清鈣的減少低于基線治療前水平至少1%,2%,3%，4%,5%，6%,7%,8%,9%,10%,11%,12%,13%，14%,150/0，16%,17%,18%,19%,20%或25%，在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少IO小時。在優(yōu)選實施方案中，血清鈣的減少在施用后10小時為至少5%。在優(yōu)選實施方案中，血清鈣的減少是低于基線治療前水平5-10%，優(yōu)選地5-20%，在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少48小時。在另一個方面中，本發(fā)明提供用于在需要其的受試者中治療甲狀旁腺功能亢進和/或高鈣血癥的方法，所述方法包括施用治療有效量的聚陽離子肽，所述聚陽離子肽包括與選自由SEQIDN0:7，SEQIDNO:9，SEQIDNO:IO,或SEQIDNO:12組成的組的肽有大于50。/。的序列同一性的氨基酸序列，由此減少血清PTH和/或鈣。在本申請內(nèi)，除非另外闡明，術(shù)語的定義和本申請技術(shù)的舉例說明可以在一些公知的參考文獻中的任一種中找到，諸如Sambrook,J.，等，分子克隆實驗室手冊(MolecularCloning:ALaboratoryManual),冷泉港實驗室出版社(ColdSpringHarborLaboratoryPress)(1989);Goeddel,D.,編，基因表達技術(shù)(GeneExpressionTechnology),酶學(xué)方法(MethodsinEnzymology),185,學(xué)院出版社(AcademicPress),圣地亞哥，CA(1991);"蛋白純化指南"("GuidetoProteinPurification")在Deutshcer,M.R,編,酶學(xué)方法(MethodsinEnzymology)中，學(xué)院出版社(AcademicPress),圣地亞哥，CA(1989);Innis，等，PCR方法方法和應(yīng)用指南(PCRProtocols:AGuidetoMethodsandApplications),學(xué)院出版禾土(AcademicPress),圣i也亞哥，CA(1990);Freshney,R丄，動物細胞培養(yǎng)基礎(chǔ)技術(shù)手冊(CultureofAnimalCells:AManualofBasicTechnique),第2版，AlanLiss,公司.紐約，紐約(1987);Murray,E丄，編，基因轉(zhuǎn)運和表達方法(GeneTransferandExpressionProtocols),第109-128頁,TheHumanaPress公司.,Clifton,NJ和Lewin,B.,基因VI(GenesVI),牛津大學(xué)出版社(OxfordUniversityPress),紐約(1997)。通過參考下述本發(fā)明優(yōu)選實施方案以及其中包括的實施例的詳細描述可以更容易地理解本發(fā)明。然而，在公開和描述本方法之前，應(yīng)該理解，本發(fā)明不限于特定的核酸、特定的多肽、特定的細胞類型、特定的宿主細胞、特定的條件、或特定的方法等等，當(dāng)然其可以變化，并且對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，其中的各種改進和變化是顯而易見的。還應(yīng)該理解，本文所用的術(shù)語僅是出于描述具體實施方案的目的，并不意欲限制。還應(yīng)該理解，除非在本文中專門限定，本文所用的術(shù)語給出相關(guān)領(lǐng)域已知的常規(guī)意思。當(dāng)用于本文時，單數(shù)形式"一種(a)"，"一種(an)",和"所述(the)"包括復(fù)數(shù)引用，除非另外指明。例如，"一種"調(diào)節(jié)肽包括一種或多種調(diào)節(jié)肽。當(dāng)用于本文時，"治療有效量"是產(chǎn)生理想的治療效果所需要的量。例如，在高鈣血癥的受試者中減少血清藥的方法中，治療有效量是將血清f丐水平減少至少1%,2%，3%,4%,:5%,6%,7%,8%,9%,10%,11%,12%，13%，14%，15%,16%，17%,18%,19%,20%或25%所需要的量。當(dāng)用于本文時，"受試者"是指患有高鈣血癥和/或骨病的人或動物受試者0當(dāng)用于本文時，"肽"和"多肽"可互換使用，并且是指由肽鍵連接的氨基酸殘基鏈組成的化合物。除非另外指明，肽的序列以從氨基端到羧基端的順序提供。為了確定兩個氨基酸序列的百分數(shù)同源性，為了最佳比較目的(例如，為了與另一個多肽最佳比對，可以在一個多肽序列中引入缺口)，比對所述序列。然后比較在相對應(yīng)的氨基酸位置處的氨基酸殘基。當(dāng)在一個序列中的位置被與另一個序列相對應(yīng)位置處相同的氨基酸殘基占有時，那么所述分子在該位置處是相同的。當(dāng)用于本文時，氨基酸或核酸"同源性"等價于氨基酸或核酸"同一性"。因此，在兩種序列之間的序列同一性百分數(shù)是由所述序列共有的相同位置的數(shù)目的函數(shù)(即，序列同一性百分數(shù)=相同位置的數(shù)目/位置總數(shù)Xl00)。為了本發(fā)明的目的，使用載體NTI6.0(PC)軟件包(InforMax.7600WisconsinAve.,Bethesda,MD20814)確定在兩種多肽序列之間的序列同一性百分數(shù)。使用缺口開口罰分10和缺口延長罰分0.1而確定兩種多肽之間的同一性百分數(shù)。所有其它的參數(shù)設(shè)置為默認的設(shè)置。如果它具有與親本肽或多肽的至少5個氨基酸殘基的連續(xù)序列相同或相似的氨基酸序列，那么肽或肽片段"衍生于"親本肽或多肽。當(dāng)用于本文時，"保守氨基酸取代"是不引起所選擇的多肽或蛋白質(zhì)的活性或三級結(jié)構(gòu)的顯著變化的取代。這樣的取代典型地包括將所選擇的氨基酸殘基用具有相似的物理化學(xué)性質(zhì)的不同的殘基替換。通過物理化學(xué)性質(zhì)對氨基酸分組是本領(lǐng)域的技術(shù)人員己知的。例如，在本領(lǐng)域已經(jīng)定義了具有相似側(cè)鏈的氨基酸殘基家族，并且其包括堿性側(cè)鏈(例如，賴氨酸、精氨酸、組氨酸)，酸性側(cè)鏈(例如，天冬氨酸、谷氨酸)，不帶電荷的極性側(cè)鏈(例如，甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)，非極性側(cè)鏈(例如，丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨麟、色氨酸)，卩-支鏈側(cè)鏈(例如，蘇氨酸、纈氨酸、異亮氨酸)和芳族側(cè)鏈(例如，酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸)。本發(fā)明的另一個方面涉及分離的多肽、及其生物活性部分的應(yīng)用。當(dāng)用于本文時，當(dāng)通過重組DNA技術(shù)產(chǎn)生時，"分離的"或"純化的"多肽或其生物活性部分不含一些細胞物質(zhì)，或者當(dāng)化學(xué)合成時，其不含化學(xué)前體或其它化學(xué)品。表述"基本上不含細胞物質(zhì)"包括這樣的多肽的制備物，其中所述多肽與它在其中天然或重組產(chǎn)生的細胞的一些細胞成分分離。當(dāng)所述多肽或其生物活性部分重組產(chǎn)生時，它還優(yōu)選地基本上不含培養(yǎng)基，g卩，培養(yǎng)基具有小于約20%，更優(yōu)選地小于約10%，并且最優(yōu)選地小于約5%的所述多肽制備物的體積。表述"基本上不含化學(xué)前體或其它化學(xué)品"包括這樣的多肽的制備物，其中所述多肽與參與所述多肽合成的的化學(xué)前體或其它化學(xué)品分離。在一個實施方案中，表述"基本上不含化學(xué)前體或其它化學(xué)品"包括具有小于約30%(干重)的化學(xué)前體或其它化學(xué)品，更優(yōu)選地小于約20%的化學(xué)前體或其它化學(xué)品，還更優(yōu)選地小于約10%的化學(xué)前體或其它化學(xué)品，并且最優(yōu)選地小于約5%的化學(xué)前體或其它化學(xué)品的多肽的制備物。在優(yōu)選的實施方案中，分離的多肽、或其生物活性部分不含來自domain多肽來源的同一生物體的污染多肽。用于使所述聚陽離子肽與所述貨物肽綴合的非限制性方法包括通過二硫鍵綴合，和作為單鏈或線性多肽合成。所述聚陽離子肽還可以通過接頭與貨物肽綴合。在一些實施方案中，所述接頭是l-5個氨基酸的肽,2-4個氨基酸的肽，或2-3個氨基酸的肽。PKC同工酶的肽調(diào)節(jié)劑先前己經(jīng)描述了PKC同工酶的多種肽調(diào)節(jié)劑。例如，美國專利號5,783,405描述了多種調(diào)節(jié)PKC同工酶，包括(3、e、S、s、和y同工酶的活性的肽。待審美國專利申請?zhí)?0/843,271描述了5PKC調(diào)節(jié)肽及其衍生物。美國專利號6,165,977描述了sPKC調(diào)節(jié)肽及其衍生物。美國專利號6,855,693描述了來自a，(3!，|3,Y,S,s，"，p,0,和；同工酶的多種調(diào)節(jié)肽以及修飾的片段。每一專利和專利申請通過引用完全結(jié)合于此。PKC同工酶-特異性抑制肽可以衍生自位于特定的同工酶的C2/V1結(jié)構(gòu)域中的特異性RACK-結(jié)合位點。同工酶-特異性肽調(diào)節(jié)劑可以衍生自在每種PKC同工酶中與相對應(yīng)的RACK序列相似的假RACKORACK)序列。據(jù)信i)/RACK序列與PKC的RACK結(jié)合位點形成分子內(nèi)相互作用，穩(wěn)定無活性或"閉合的"構(gòu)象。干擾該分子內(nèi)相互作用的肽可以使所述無活性形式不穩(wěn)定，增強PKC的易位和RACK結(jié)合。Chen等，美國國家科學(xué)院學(xué)報(Proc.Nat.Acad.Sci.)2001;98:11114-11119。同工酶-特異性肽調(diào)節(jié)劑可以綴合到有效促進肽穿過細胞膜轉(zhuǎn)運的載體部分上。所述載體部分的實例包括，但不限于，TAT-衍生的肽、觸角載體肽、和聚精氨酸肽。已經(jīng)報道TAT-綴合的肽通過循環(huán)有效遞送至器官中，并且與基因靶向遞送相比，該遞送形式可以提供優(yōu)點，原因在于遞送是即時的，并且因此較不易受由信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)的適應(yīng)性的影響。\|/sRACK，其包括氨基酸序列HDAPIGYD(SEQIDN0:1)，是一種同工酶-選擇性肽，設(shè)計結(jié)合并且1急定'sPKC成為暴露RACK結(jié)合位點的構(gòu)象，由此使得sPKC能夠與其RACK結(jié)合。VKsRACK在幾種重要的方式上不同于PKC的小分子激活劑(諸如二?；视?DAG)或佛波醇酯)。第一，與DAG或佛波醇酯相比較，，RACK結(jié)合sPKC上不同的位點。第二，vj;sRACK僅結(jié)合在sPKC同種型中為該同種型特有的位點，而DAG和佛波醇酯結(jié)合所有PKC共有的位點。xj/sRACK的這種特異性賦予與非選擇性分子相比顯著的優(yōu)點。最后，V(/sRACK處理導(dǎo)致sPKC易位中的適度生理改變，即使在施用延長的時間期間時。這些數(shù)據(jù)表明，M/sRACK加強sPKC的活性，但是沒有直接激活PKC，該方式中PKC由DAG激活。已經(jīng)報道sPKC的易位在局部缺血的預(yù)先調(diào)節(jié)中起重要作用。M/sRACK(SEQIDNO:l)在體內(nèi)和離體表現(xiàn)出針對局部缺血-再灌注損傷的心臟保護作用，并且在沒有引起sPKC脫敏或下調(diào)的條件下，減少在局部缺血-再灌注過程中致死性心律不齊的發(fā)生。還已經(jīng)報道sPKC在調(diào)節(jié)神經(jīng)、內(nèi)分泌、外分泌、炎癥、和免疫系統(tǒng)的活化中起作用?？刂频膕PKC激活可能在阿爾茨海默病的發(fā)展中起保護作用，而其不受控制的慢性激活可能導(dǎo)致嚴重的疾病，如惡性腫瘤和糖尿病。為了促進穿過生物膜轉(zhuǎn)運，可以將包括氨基酸序列CHDAPIGYD(SEQIDN0:2)的包含N-端半胱氨酸的v(/eRACK肽與聚陽離子肽共價連接。制備了s-PKC調(diào)節(jié)肽(SEQIDNO:6)，其包括通過二硫鍵與TAT(SEQIDNO:"綴合的肽SEQIDNO:2，并且制備了鈣調(diào)節(jié)肽(SEQIDNO:7)，其包括通過二硫鍵與N-?；疌-酰胺化的TAT(SEQIDNO:5)綴合的肽SEQIDNO:2。包括SEQIDNO:7的肽，本文也稱為KAI-1455(或KP-1455),具有下文所示的結(jié)構(gòu)。H-Cys-His-Asp-Ala-Pro-Ile-Gly-Tyr-Asp-COOHAc-Cys-Tyr-Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-CONH2(SEQIDN0:7)。在高劑量動物毒性學(xué)研究中己經(jīng)令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，KAI-1455(SEQIDNO:7)引起血清鈣水平的顯著減少。在三種物種(在臨床情形中的大鼠、犬和人受試者)中觀察到在靜脈內(nèi)輸注KAI-1455后的血清鈣水平的減少。鈣的最低點似乎在輸注結(jié)束時出現(xiàn)，而在輸注結(jié)束后鈣的抑制可以持續(xù)大于24小時。對血清鈣的作用是劑量依賴性的和可逆的。在通過12小時的輸注向男性志愿者施用KAI-1455(SEQIDNO:7)的單一遞增劑量研究中，觀察到離子化的和總鈣的顯著減少，在EOI附近觀察到最大減少。在最高濃度(162mg/kg，12小時)觀察到大于15%的最大的鈣變化百分數(shù)。在同一研究中，觀察到血漿PTH水平(pg/mL)的劑量依賴性減少，在EOI處觀察到最大減少。對于在最高劑量組(162mg/kg，12小時)中的受試者，在EOI和在EOI后12小時觀察到PTH的顯著減少，在EOI后36小時仍然可觀察到低于治療前基線水平的持續(xù)減少。對于在81和162mg/kg劑量組中的受試者觀察到大于40。/。的血漿PTH水平的最大減少百分數(shù)，在EOI后12小時水平仍然顯著低于基線。在通過3小時靜脈內(nèi)輸注施用低劑量KAI-1455的犬中，沒有觀察到血清鈣的顯著變化；然而，在2.75小時，即在輸注結(jié)束前，PTH水平增加。在使用足以引起低鈣血癥的KAI-1455劑量的犬中觀察到血清PTH的減少?；谘邂}、骨代謝和PTH之間的關(guān)系，本發(fā)明人相信本發(fā)明的鈣調(diào)節(jié)肽，諸如KAI-1455，應(yīng)該有益于甲狀旁腺功能亢進和各種形式的骨病和/或高鈣血癥的治療。與目前的治療劑相比，這些化合物可以具有優(yōu)點，原因在于它們可以腸胃外施用，并且可能與胃腸副作用無關(guān)，不通過細胞色素P450代謝，并且可以導(dǎo)致血清PTH和鈣的更有效的減少。本發(fā)明的方法可以單獨或與其它用于治療高鈣血癥和/或骨病的方法組合使用。這樣的其它方法包括，但不限于，使用下列試劑的治療諸如抗再吸收的二膦酸鹽試劑，如阿侖膦酸鹽和利塞膦酸鹽；整聯(lián)蛋白阻斷劑，諸如a^3拮抗劑；用于激素替代治療的綴合的雌激素，諸如PREMPROTM，PREMARINTM和ENDOMETRION;選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMs),諸如雷洛昔芬，屈洛昔芬，CP-336，156(Pfizer)和拉索昔芬；組織蛋白酶(cathespin)K抑制劑；維生素D治療；低劑量PTH治療(使用或不使用雌激素)；降鈣素；RANK配體的抑制劑；針對RANK配體的抗體；護骨蛋白；adensosine拮抗劑；和ATP質(zhì)子泵抑制劑。盡管PTH典型地與骨再吸收有關(guān)，在某些情形中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)PTH刺激成骨細胞的累積和骨生長。據(jù)信PTH的成骨作用通過刺激前成骨細胞增殖和休眠的襯細胞轉(zhuǎn)化為活性成骨細胞而發(fā)生。PTH還可以起作用通過增加成骨細胞活性和/或通過防止細胞程序性死亡增加生命周期而構(gòu)建骨。因此，PTH的小增加可能具有合成代謝影響，導(dǎo)致骨生長。在一個實施方案中，鈣調(diào)節(jié)肽以足以降低PTH和血清f丐二者水平的劑量施用。在另一個實施方案中，鈣調(diào)節(jié)肽以足以減少PTH而不顯著影響血清鈣水平的劑量施用。在另一個實施方案中，鈣調(diào)節(jié)肽以足以增加PTH而不顯著影響血清鈣水平的劑量施用。制劑制備這些制劑或組合物的方法包括使本發(fā)明的化合物與載體和任選地，一種或多種助劑締合的步驟。通常，所述制劑通過均勻地并且緊密地使本發(fā)明的化合物與脂質(zhì)載體或細分的固體載體或二者相締合，并且然后，如果需要，將所述產(chǎn)物定形而制備。適合腸胃外施用的本發(fā)明的藥物組合物包括一種或多種本發(fā)明的化合物，其與一種或多種藥用無菌等滲水性或非水性溶液、分散液、混懸液或乳液、或無菌散劑組合，所述無菌散劑可以恰好在使用前重構(gòu)成無菌的可注射溶液或分散體，其可以包含糖、醇、抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑、使得所述制劑與目的受體的血液等滲的溶質(zhì)、或混懸劑或增稠劑。可以用于本發(fā)明的藥物組合物中的適宜的水性和非水性載體的實例包括水，醇，多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)、以及它們的適當(dāng)?shù)幕旌衔?，植物油，如橄欖油，和可注射的有機酯，如油酸乙酯。可以保持恰當(dāng)?shù)牧鲃有?，例如，通過使用涂層物質(zhì)，如磷脂酰膽堿，在分散體的情形中通過保持需要的顆粒大小，并且通過使用表面活性劑而進行。這些組合物還可以包含佐劑，如防腐劑，濕潤劑，乳化劑和分散劑。防止微生物在本發(fā)明的化合物上的作用可以通過包含各種抗細菌和抗真菌劑，例如，對羥基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚山梨酸等而得到保證。還可以需要地在所述組合物中包含等滲劑，如糖、氯化鈉等。另外，可注射藥物形式的延長吸收可以通過包含延遲吸收的試劑如單硬脂酸鋁和明膠而導(dǎo)致。在一些情形中，為了延長藥物的作用，需要減緩從皮下或肌內(nèi)注射的藥物吸收。這可以通過使用具有很小的水溶性的晶態(tài)或非晶態(tài)的物質(zhì)的液體混懸液而實現(xiàn)。那么藥物的吸收速率取決于它的溶解速率，而溶解速率又可能取決于晶體大小和晶體形式。備選地，腸胃外施用的藥物形式的延遲吸收通過將所述藥物溶解或懸浮在油性賦形劑中而實現(xiàn)。例如，聚陽離子肽可以以在通過用液體重構(gòu)固體形式的藥物制備的溶液形式遞送至人。該溶液可以進一步用輸注流體諸如0.9%的氯化鈉注射液、5%的葡萄糖注射液和乳酸鹽林格氏注射液稀釋。優(yōu)選地，所述重構(gòu)的和稀釋的溶液在4-6小時內(nèi)使用，以遞送最大功效。備選地，聚陽離子肽可以以片劑或膠囊的形式遞送至人。可注射的長效制劑形式通過在生物可降解的聚合物如聚交酯-聚乙交酯中形成本發(fā)明化合物的微膠囊基質(zhì)而制備。取決于藥物與聚合物的比例，和所用的特定聚合物的性質(zhì)，可以控制藥物釋放的速率。其它可生物降解的聚合物的實例包括聚(原酸酯)和聚(酐)。長效注射制劑還通過將藥物包埋在與機體組織相容的脂質(zhì)體或微乳液中而制備。適于口服施用的本發(fā)明的制劑可以是下列形式膠囊、扁囊劑、丸劑、片劑、錠劑(使用調(diào)味成分，通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)、散劑、粒劑或作為在水性或非水性液體中的溶液或混懸液、或者作為水包油或油包水液體乳狀液、或者作為酏劑或糖漿、或者作為軟錠劑(使用惰性成分，諸如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)和/或作為漱口劑等，每一種包含預(yù)先確定量的本發(fā)明的化合物作為活性組分。本發(fā)明的化合物還可以作為大丸劑、舐劑(electuary)或糊劑施用。當(dāng)本發(fā)明的化合物作為藥物施用給人和動物時，它們可以自身給藥或者作為藥物組合物給藥，所述藥物組合物包含，例如，0.1到99%(更優(yōu)選地，10到30%)的活性成分與藥用載體的組合。這些化合物可以通過任何適當(dāng)?shù)氖┯猛緩绞┯媒o人和其它動物用于治療，所述施用途徑包括，例如，皮下注射，皮下長效制劑，靜脈內(nèi)注射，和靜脈內(nèi)或皮下輸注。不管所選擇的施用途徑，可以以適當(dāng)?shù)乃闲问綉?yīng)用的本發(fā)明的化合物，和/或本發(fā)明的藥物組合物，通過本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的常規(guī)方法配制成藥用劑型?；钚越M分在本發(fā)明的藥物組合物中的實際劑量水平可以不同，以便獲得有效實現(xiàn)對于具體的患者、組合物和施用模式的理想的治療反應(yīng)而對患者沒有毒性的活性組分的量。選擇的劑量水平將取決于各種因素，包括本發(fā)明所用的特定化合物、或其酯、鹽或酰胺的活性，施用途徑，施用時間，所用的特定化合物的排泄或代謝速率，吸收的速率和程度，治療的持續(xù)時間，與所用的特定化合物組合應(yīng)用的其它藥物、化合物和/或物質(zhì)，治療的患者的年齡、性別、體重、病況、綜合健康情況和已有的醫(yī)藥史，以及醫(yī)藥領(lǐng)域公知的類似因素。在本領(lǐng)域內(nèi)具有普通技術(shù)的醫(yī)生或獸醫(yī)可以容易地確定并且開出所需要的有效量的藥物組合物。例如，醫(yī)生或獸醫(yī)可以從低于需要的水平的用于所述藥物組合物中的本發(fā)明的化合物的劑量開始，以獲得理想的治療作用，并且逐漸增加劑量直到獲得理想的作用。通常，本發(fā)明化合物的適合的日常劑量應(yīng)該是有效產(chǎn)生治療作用的最低劑量的所述化合物的量。這樣的有效劑量通常取決于上述因素。一般地，當(dāng)用于指定的作用時，本發(fā)明的化合物對于患者的口服、靜脈內(nèi)、腦室內(nèi)(intracerebroventricular)和皮下的劑量，將在從約lmcg到約5mg/kg體重/小時的范圍內(nèi)。在其它實施方案中，劑量將在約5mcg到約2.5mg/kg體重/小時的范圍內(nèi)。在其它實施方案中，劑量將在約5mcg到約1mg/kg體重/小時的范圍內(nèi)。如果需要，所述活性化合物的有效每日劑量可以在一整天當(dāng)中以適當(dāng)?shù)拈g隔作為分開施用的兩次、三次、四次、五次、六次或更多的分劑量進行施用，任選地，以單位劑型施用。在一個實施方案中，化合物以一劑量/每天施用。在其它實施方案中，化合物連續(xù)施用，如通過靜脈內(nèi)或其它途徑。在其它實施方案中，化合物以不如每日一次那樣頻繁地施用，諸如每周一次或更少。盡管本發(fā)明的化合物可以單獨施用，但是優(yōu)選地將所述化合物作為藥物制劑(組合物)進行施用。通常接受這種治療的受試者是需要其的任何動物，包括靈長類動物，特別是人，以及其它哺乳動物，如馬、牛、豬和羊；以及家禽和寵物。本發(fā)明的化合物可以按原樣或者與藥用載體的混合物進行施用，并且還可以與抗微生物藥劑如青霉素、頭孢菌素類、氨基糖苷和糖肽聯(lián)合施用。因此，聯(lián)合治療包括以在后續(xù)施用時先施用的活性化合物的治療作用沒有完全消失的方式，順序、同時和分開施用活性化合物。用于所公開的化合物的可能的施用途徑這些化合物可以通過任何適當(dāng)?shù)氖┯猛緩绞┯媒o人和其它動物，用于治療。當(dāng)用于此處時，術(shù)語施用"途徑"意欲包括，但不限于，皮下注射，皮下長效制劑，靜脈內(nèi)注射，靜脈內(nèi)或皮下輸注，眼內(nèi)注射，皮膚內(nèi)注射，肌內(nèi)注射，腹膜內(nèi)注射，氣管內(nèi)施用，脂肪內(nèi)(intmadiposal)施用，關(guān)節(jié)內(nèi)施用，鞘內(nèi)施用，硬膜外施用，吸入，鼻內(nèi)施用，口服施用，舌下施用，口腔施用，直腸施用，陰道施用，池內(nèi)施用和局部施用，或通過局部遞送(例如，通過導(dǎo)管或斯滕特固定模(stent))施用。所述聚陽離子肽還可以以緩慢釋放劑型施用或共同施用。當(dāng)系統(tǒng)施用時，所公開的化合物具有功效。如上文所述，本發(fā)明的方法可以單獨或與其它用于治療高鈣血癥和/或骨病的方法組合使用。所述其它方法包括，但不限于，使用下列試劑的治療諸如二膦酸鹽試劑，整聯(lián)蛋白阻斷劑，激素替代治療，選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，組織蛋白酶K抑制劑，維生素D治療，消炎劑，低劑量PTH治療(使用或不使用雌激素)，降鈣素，RANK配體的抑制劑，針對RANK配體的抗體，護骨蛋白，adensosine拮抗劑和ATP質(zhì)子泵抑制劑。要用于組合方案的具體的治療(療法或步驟)組合應(yīng)該考慮需要的治療劑和/或步驟與要獲得的需要的治療效果的相容性。還應(yīng)該理解，所用的治療可以對于同一種疾病獲得需要的效果(例如，本發(fā)明化合物可以與用于治療同一種疾病的另一種藥劑同時施用)，或者它們可以獲得不同的效果(例如，對任何不利作用的控制)。當(dāng)用于本文時，己知通常施用來治療或預(yù)防特別的疾病或病況的額外的治療藥劑是"適合所述被治療的疾病或病況"的。本文定義的本發(fā)明的組合治療可以通過同時、順序或分開施用所述治療的單個成分的方式而實現(xiàn)。本發(fā)明的化合物或其藥用組合物還可以結(jié)合到用于涂敷可移植的醫(yī)學(xué)裝置的組合物中，所述可移植的醫(yī)學(xué)裝置如假體、人造閥、血管移植物、斯滕特固定模和導(dǎo)管。因此，在另一個方面中，本發(fā)明包括用于涂敷可植入裝置的組合物，其包含如上文一般描述的本發(fā)明的化合物，和適合涂敷所述可植入裝置的載體。在另一個方面中，本發(fā)明包括用包含如上文一般描述的本發(fā)明的化合物和適合涂敷所述可植入裝置的載體的組合物涂敷的可植入裝置。例如，血管斯滕特固定模已經(jīng)用于克服再狹窄(損傷后的血管壁再狹窄)。然而，使用斯滕特固定?；蚱渌芍踩胙b置的患者具有形成血塊或血小板激活的危險。這些不需要的作用可以通過將所述裝置用包含激酶抑制劑的藥用組合物預(yù)先涂敷而防止或減輕。適當(dāng)?shù)耐繉雍屯糠蟮目芍踩胙b置的一般制備在美國專利號6,099,562;5，886，026;和5,304,121中描述，其通過引用完全結(jié)合于此。所述涂層典型地是生物相容性聚合物物質(zhì)，如水凝膠聚合物、聚甲基二硅氧垸、聚己內(nèi)酯、聚乙二醇、聚乳酸、乙烯乙酸乙烯酯、以及它們的混合物。所述涂M可以任選地進一步由適宜的氟硅氧垸、多糖、聚乙二醇、磷脂或它們的組合的頂部涂層(topcoat)覆蓋，以賦予所述組合物控制釋放的特征。用于確定治療功效的可能的臨床標記本發(fā)明的治療方法的功效的確定可以通過多種方法確定。血清鈣的正常水平處于8.0-10.8mg/dL(2.0-2.7mmol/L)的范圍內(nèi)。在某些情形中，治療功效可以通過測量與鈣相關(guān)的血清和尿標記確定，所述標記包括但不限于，總的和離子化的血清鈣，白蛋白，血清PTH,PTHrP,磷酸鹽，維生素D,和鎂。在其它情形中，功效可以通過測量骨礦物質(zhì)密度(BMD)，或通過測量關(guān)于骨形成和/或血清或尿中的骨再吸收的生化標記而確定?？赡艿墓切纬蓸擞洶?，但不限于，總堿性磷酸酶，骨堿性磷酸酶，骨鈣蛋白，undercarboxylated骨鈣蛋白，C-端前膠原I型前肽，和N-端前膠原I型前肽?？赡艿墓窃傥諛擞洶ǎ幌抻?，羥脯氨酸，羥賴氨酸，糖基-半乳糖基羥賴氨酸，半乳糖基羥賴氨酸，吡啶啉，脫氧吡啶啉，I型膠原的N-端交聯(lián)的端肽，I型膠原的C-端交聯(lián)的端肽，通過MMPs產(chǎn)生的I型膠原的C-端交聯(lián)的端肽，骨涎蛋白，酸性磷酸酶和酒石酸抗性酸性磷酸酶。預(yù)測當(dāng)本發(fā)明的治療方法對需要其的受試者實施時，所述治療方法將產(chǎn)生通過例如下列各項中的一種或多種測量的作用總血清鈣，離子化的血清韓，白蛋白，血清PTH,PTHrP，磷酸鹽，維生素D,鎂，骨礦物質(zhì)密度(BMD),總堿性磷酸酶，骨堿性磷酸酶，骨鈣蛋白，羧化不全骨鈣蛋白(undercarboxylatedosteocalcin),C-端前膠原I型前肽，N-端前膠原I型前肽，羥脯氨酸，羥賴氨酸，糖基-半乳糖基羥賴氨酸，半乳糖基羥賴氨酸，吡啶啉，脫氧吡啶啉，I型膠原的N-端交聯(lián)的端肽，I型膠原的C-端交聯(lián)的端肽，通過MMPs產(chǎn)生的I型膠原的C-端交聯(lián)的端肽，骨涎蛋白，酸性磷酸酶和酒石酸抗性酸性磷酸酶。作用包括預(yù)防性治療以及已有疾病的治療。生物學(xué)有效的分子可以使用共價鍵或非共價相互作用可操作性地連接到本發(fā)明的肽上。在具體實施方案中，所述可操作性連接的生物學(xué)有效分子可以利用賦予作為所連接的分子的一部分的所述肽性質(zhì)而改變本發(fā)明上述實施方案中的肽的藥物代謝動力學(xué)。所述生物學(xué)有效分子可以賦予所述肽的一些性質(zhì)包括，但不限于將肽遞送至體內(nèi)的不連續(xù)的位置；將肽的活性集中在體內(nèi)需要的位置并且減少其在其它位置的作用；減少用肽治療的副作用；改變肽的滲透性；改變肽的生物利用度或遞送至機體的速率；改變用肽治療的作用持久性；改變肽的穩(wěn)定性；改變肽的作用發(fā)作和衰減的速率；通過允許肽具有功效而提供允許的作用。在另一個方面中，本發(fā)明的鈣調(diào)節(jié)肽可以綴合到聚乙二醇(PEG)上。所選擇的PEG可以是任意便利的分子量，并且可以是直鏈的或支鏈的，并且可以任選地通過接頭綴合。PEG的平均分子量優(yōu)選在約2千道爾頓(kDa)-約lOOkDa范圍內(nèi)，更優(yōu)選地約5kDa-約40kDa的范圍內(nèi)。肽調(diào)節(jié)肽可以通過位于貨物肽和/或一種或多種聚陽離子肽上的任何位置處的適當(dāng)?shù)陌被釟埢Y合到PEG上。聚陽離子和貨物肽，如本文進一步所述，可以任選地包含與PEG綴合的額外的氨基酸殘基，包括例如，額外的堿性殘基，諸如賴氨酸。在本領(lǐng)域內(nèi)己知加入聚乙二醇的肽提高綴合的肽的血漿半衰期。在本領(lǐng)域中，關(guān)于制備加入聚乙二醇的肽的多種方法是己知的。例如，PEG部分可以連接到氨基端，羧基端，或通過所述的肽的側(cè)鏈，任選地通過存在連接基團連接。在其它實施方案中，所述PEG部分可以與包含巰基的氨基酸如半胱氨酸的硫連接，或可以偶聯(lián)到堿性氨基酸如賴氨酸或精氨酸的側(cè)鏈上。PEG基團通常通過經(jīng)過PEG部分上的反應(yīng)基團(例如，醛、氨基、巰基、酯、或羧酸基團)與本發(fā)明化合物上的反應(yīng)基團(例如，醛、氨基、酯、酸或巰基基團)的?；蜻€原垸基化而附著到本發(fā)明的肽上，本發(fā)明化合物上的反應(yīng)基團可以位于聚陽離子或貨物肽的氨基端、羧基端、或側(cè)鏈位置。用于制備合成肽的加入聚乙二醇的一種方法由通過在溶液中綴合連接組合肽和PEG部分組成，所述肽和PEG部分分別攜帶彼此相互反應(yīng)的官能團。肽可以利用常規(guī)液相或固相合成技術(shù)容易地制備。肽和PEG的綴合典型地在水相中進行，并且可以通過反相HPLC監(jiān)測。使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標準技術(shù)，可以容易地純化和表征加入聚乙二醇的肽。本發(fā)明的肽的一個或多個單個殘基還可以用已知與特定的側(cè)鏈或末端殘基反應(yīng)的各種衍生試劑進行修飾。例如，賴氨酰(lysinyl)殘基和氨基端殘基可以與琥珀酸酐或其它類似的羧酸酐反應(yīng)，其使賴氨?；虬被鶜埢系碾姾勺?yōu)橄喾吹摹Ｆ渌m宜的試劑包括，例如，亞氨酸酯，如甲基皮考林酰亞胺(methylpicolinimidate);吡哆醛；吡哆醛磷酸；氯硼氫化物；三硝基苯磺酸；鄰-甲基異脲；2,4,-戊二酮；和轉(zhuǎn)氨酶催化的與乙醛酸(glyoxalate)的反應(yīng)。精氨酰殘基可以通過與常規(guī)試劑如苯甲酰甲醛、2,3-丁二酮、1，2-環(huán)己二酮和茚三酮反應(yīng)而進行修飾。另外，可以修飾本發(fā)明的聚陽離子肽以包括非陽離子殘基，其提供有效用于開發(fā)用于生物分析ELISA測量的抗體的免疫原性殘基，以及評估免疫原性。例如，所述聚陽離子肽可以通過結(jié)合酪氨酸和/或甘氨酸殘基而修飾。對于將光譜標記引入到酪氨酰殘基中來特異性修飾酪氨酰殘基是特別感興趣的。非限制性實例包括與芳香重氮化合物或四硝基甲垸反應(yīng)。最常見的，N-乙酰咪唑和四硝基甲垸分別用于形成鄰-乙?；野滨：?-硝基衍生物。包含所公開的化合物的試劑盒本發(fā)明還提供實施本發(fā)明的治療方案的試劑盒。這樣的試劑盒包括治療有效量的具有作為CaSR調(diào)節(jié)劑活性的聚陽離子肽，其以藥用形式，單獨的或與其它以藥用形式存在的藥劑組合。優(yōu)選的藥物形式包括與無菌鹽水、右旋糖溶液、緩沖液或其它藥用無菌流體組合的肽。備選地，所述組合物可以是凍干的或干燥的。在這種情形中，所述試劑盒可以進一步包括藥用溶液，優(yōu)選是無菌的，以形成用于注射目的的溶液。在另一個實施方案中，所述試劑盒可以進一步包括針頭或注射器，優(yōu)選是以無菌形式包裝的，用于注射所述組合物。在其它實施方案中，所述試劑盒進一步包括將所述組合物施用給受試者的使用說明方式。所述使用說明方式可以是書面插頁、錄音磁帶、視聽帶或任何其它指導(dǎo)將所述組合物施用給受試者的方式。在一個實施方案中，所述試劑盒包含(i)第一容器，其包含具有作為CaSR調(diào)節(jié)劑活性的鈣調(diào)節(jié)肽；和(ii)關(guān)于使用的使用說明方式。在另一個實施方案中，所述試劑盒包括(i)第一容器，其包含具有作為CaSR調(diào)節(jié)劑活性的鈣調(diào)節(jié)肽；(ii)第二容器，其包含抗鈣血癥(nticalcemic)藥劑；和(iii)關(guān)于使用的使用說明方式。在一個實施方案中，所述抗鈣血癥藥劑是選自由下列各項組成的組的藥劑二膦酸鹽試劑，激素替換治療劑，維生素D治療，低劑量PTH(使用或不使用雌激素)，和降鈣素。在相關(guān)方面中，本發(fā)明提供包括上述試劑盒的內(nèi)容物的制品。例如，本發(fā)明提供這樣的制品，其包括有效量的具有作為CaSR調(diào)節(jié)劑活性的鈣調(diào)節(jié)肽，所述肽單獨的或與其它藥劑組合，和指示治療本文所述的疾病的應(yīng)用的使用說明。本發(fā)明的多肽在本文中通過它們的SEQIDNO:或通過內(nèi)部參考號引用，所述內(nèi)部參考號指定為KAI-號和域KP-號，其在本文中可互換使用。例如，具有SEQIDNO:7的肽可以在本文中不同地稱為KAI-1455或KP-1455。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，這樣的數(shù)字可以互換使用，并且是指同一多肽序列。除非另外指明，本文引用的所有文件通過引用完全結(jié)合。實施例提供下述實施例進行舉例說明，而不是限制本發(fā)明。本發(fā)明的主要特征可以用于不同的實施方案而不背離本發(fā)明的范圍。在不背離本發(fā)明的真實精神和范圍的條件下，熟練的技術(shù)人員可以進行各種改進。實施例1制備檢測和賦形劑/對照制品將適量的KAI-1455(SEQIDNO:7)溶解在用于注射的在水中(由ITR供應(yīng))的32.5mg/mL甘露醇和32.5mg/mL蔗糖的溶液中，以獲得10mg/mLKAI-1455的儲液濃度。如果需要，調(diào)整pH為5。用注射用無菌鹽水稀釋儲液，以獲得最終劑量溶液濃度。在施用給動物之前，通過0.22pmPVDF濾器(Millipore)將溶液過濾到無菌容器/袋中，并且保持冷凍直至在給藥前不久，然后允許加溫至室溫。賦形劑對照溶液通過采用適當(dāng)體積的在WFI中的32.5mg/mL甘露醇/32.5mg/mL蔗糖溶液，并且用SF1將其稀釋約4.44-倍(g卩，與用于檢測制品的高劑量溶液相同的稀釋比例)進行制備。實施例2在具有14-天恢復(fù)期的大鼠中對KAI-1455的單劑量連續(xù)靜脈內(nèi)輸注毒性和毒性動力學(xué)/組織分布的研究本研究在獲自查爾斯河實驗室(CharlesRiverLaboratories)，Raleigh，NC的SpragueDawley大鼠(品系Crl:CD(SD))中進行。研究中包括總共42只大鼠(21只雄性和21只雌性)，每組11=3。在治療開始時的平均體重范圍為7-11kg。在治療開始時的平均年齡范圍是6-7周，用于導(dǎo)管插入術(shù)，10-12周，用于開始治療。在治療開始時的平均體重為100-400克。施用檢測和對照/賦形劑制品動物由供應(yīng)商通過股靜脈插入導(dǎo)管。通過經(jīng)由植入股靜脈的導(dǎo)管的靜脈內(nèi)輸注施用適當(dāng)?shù)膭┝俊Ｍㄟ^連續(xù)的靜脈內(nèi)輸注以10,20和45mg/kg經(jīng)24小時和以45mg/kg經(jīng)6小時的劑量施用KAI-1455(SEQIDNO:7)給大鼠。所有的動物以單一連續(xù)劑量持續(xù)約6或24小時給藥。劑量體積為20mL/kg;對提供24-小時輸注的動物的給藥速率為0.83mL/kg/小時，并且對提供6-小時輸注的動物的給藥速率為3.33mL/kg/小時。在前劑量期間以保持的速率輸注無菌鹽水溶液。個體動物絕對劑量體積基于第1天的體重。在結(jié)束最終劑量后，對動物停止輸注。在最終劑量后，切斷用于動物的導(dǎo)管，打結(jié)，并且保留在原位。利用外部泵裝置在指定給藥時間間隔給每只動物遞送目標劑量體積。利用系繩和帶狀裝覃(tetherandharnessdevice)保持經(jīng)由泵的輸注。結(jié)果由于極端的低鈣血癥，經(jīng)24小時以45mg/kg施用KAI-1455的動物變得處于死亡的邊緣，并且在第2天施以安樂死。所有其它劑量組在輸注結(jié)束后24-42小時具有正常的鈣水平。以20mg/kg施用KAI-1455的動物在給藥后第3天表現(xiàn)出血清鈣的劑量依賴性減少。在這些動物中的鈣水平到第14天恢復(fù)正常，這表明由用KAI-1455治療引起的總血清鈣減少是可逆的。血清鈣水平提供在表l中。表l在輸注結(jié)束后2,3和14天的總血清鈣(mg/dL)<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>在經(jīng)24小時以45mg/kg接受KAI-1455的大鼠中在EOI后24小時觀察到血清磷酸鹽水平的明顯升高。在20mg/kg劑量組中觀察到血清磷酸鹽的可能持續(xù)不變的增加。所有其它劑量組在EOI后24-42小時具有正常的血清磷酸鹽(數(shù)據(jù)未顯示)。實施例3在畢爾格獵犬OBeagledog沖對KAI-1455單劑量(24-小時)連續(xù)靜脈內(nèi)輸注毒性和毒性動力學(xué)/組織分布的研究本研究在獲自馬歇爾生物資源公司(MarshallBioResources,Inc.)的畢爾格獵犬中進行。研究中包括總共24只犬(12只雄性，12只雌性)，每組11=3/性別。在治療開始時的平均體重范圍為7-llkg。在治療開始時的平均年齡范圍是7-11月齡。施用檢測和對照/賦形劑制品-通過插入到頭靜脈或隱靜脈之一中的并且通過醫(yī)學(xué)級別的管道與輸注泵連接的一次性留置導(dǎo)管(Abbocath⑧或Angiocath),以0.83mL/kg/小時的給藥速率，通過靜脈內(nèi)輸注在單一24-小時的時間期間內(nèi)施用KA1-1455(SEQIDNO:7)和對照制品?；诿恐粍游锏淖罱膶嶋H體重來計算輸注的實際體積(mL)。KAI-1455以10,20和40mg/kg/的劑量，經(jīng)過24小時施用。在輸注結(jié)束(EOI)后第3、24小時確定血清鈣水平(mmol/L)。在輸注開始之前，每只犬的輸注管線預(yù)先用適當(dāng)?shù)慕o藥溶液充滿，以確保在輸注泵打開時立即開始對動物給藥。這確保將完整的劑量給與動物。輸注袋以適當(dāng)?shù)臅r間間隔變化(如果需要)，并且在輸注開始之前和結(jié)束時記錄體重。結(jié)果在輸注結(jié)束后24小時觀察到總血清鈣的劑量依賴性減少。血清鈣水平顯示在表2中。表2給藥后24小時的總血清鈣水平<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>實施例4對畢爾格獵犬以12-小時靜脈內(nèi)輸注施用KAI-1455的安全性藥理學(xué)研究以1，5和12.5mg/kg的劑量，經(jīng)過12小時(n=3/劑量)通過連續(xù)靜脈內(nèi)輸注對畢爾格獵犬施用KAI-1455(SEQIDNO:7)。在12小時的時間點、輸注結(jié)束(EOI)后立即、和在EOI后24小時確定對血清鈣的影響。結(jié)果在EOI觀察到血清鈣的劑量依賴性減少。在EOI觀察到最大的^減少。在EOI后24小時觀察到鈣水平的部分恢復(fù)，在12.5mg/kg劑量組，動物仍然表現(xiàn)出血清鈣與基線水平相比可檢測的減少。血清鈣水平顯示在表3中。表3給藥前、在輸注結(jié)束(EOI)時、和在EOI后12小時的總血清鈣(mg/dL)<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>在EOI和在EOI后24小時觀察到血清磷酸鹽水平的劑量依賴性減少。血清磷酸鹽水平顯示在表4中。表4給藥前和在輸注結(jié)束(EOI)時的血清磷酸鹽(mg/dL)<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>對于在12.5mg/kg劑量組中的動物，在EOI和在EOI后24小時觀察到PTH的顯著減少。在EOI，血漿PTH水平減少至基線治療前水平的約15%，在EOI后24小時具有約50%基線治療前水平的持續(xù)不變的減少。PTH水平(pg/mL)顯示在表5中。表5給藥前和在輸注結(jié)束時的PTH(pg/mL)<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>PTH、血清鈣、和血清磷酸鹽水平之間的關(guān)系顯示在圖1中。鈣水平的減少與血清磷酸鹽的增加和PTH的減少相一致。實施例5在SpragueDawlev大鼠中的KAI-1455的單劑量鈣輸注研究本研究設(shè)計來在大鼠中研究在以45mg/kg單劑量KAI-1455(SEQIDNO:7)的約24-小時的靜脈內(nèi)輸注期間內(nèi)血清鈣變化的時間過程，并且研究補充鈣以改善與KAI-1455輸注的毒性相關(guān)的臨床癥狀的可能性。本研究在獲自査爾斯河實驗室(CharlesRiverLaboratories)，Hollister,CA.的SpragueDawley大鼠(品系Crl:CD(SD)IGSBR)中進行。在本研究中包括總共20只大鼠(n-5/性別/組)。在治療開始時的平均年齡范圍是5-8周(收到時)。在治療開始時的平均體重是160-380克。施用檢測和對照/賦形劑制品動物由供應(yīng)商在頸靜脈插入導(dǎo)管。將動物分組并且按照表6治療。<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>總靜脈內(nèi)輸注時間為-24小時。*在第二次12小時的輸注過程中，組2接受終濃度為0.8mg/mL元素鈣的包含鈣的輸注物(infosate)(與KAI-1455給藥溶液混合)。**在第一次12-小時的輸注期間測試制品在輸注物中的終濃度為2.25mg/mL，并且對于第二次12-小時輸注所述終濃度為~0.75mg/mL。***對于第一次12-小時的輸注，輸注速率為0.83mL/kg/小時(10mL/kg總體積)，并且對于第二次12-小時的輸注期間，輸注速率為2.5mL/kg/小時(~30mL/kg總體積)?；谧罱捏w重計算用于個體動物的絕對劑量體積。制備3種檢測制品給藥溶液用于本研究。對于在第一次12小時輸注過程中的施用，通過用SFI稀釋10mg/mL的儲液以獲得2.25mg/mL的最終KAI-1455濃度，而對兩組制備單一溶液。第一套給藥注射器充滿該溶液用于輸注。對于組1，在第二次12小時輸注的過程中，通過用SFI稀釋10mg/mL儲液以獲得0.75mg/mL的最終KAI-1455濃度制備用于施用的給藥溶液。用于組1的第二套給藥注射器充滿該溶液用于輸注。對于組2，在第二次12小時輸注過程中施用的給藥溶液包含濃度為0.75mg/mL的KAI-1455，以及終濃度為0.8mg/mL元素鈣的葡萄糖酸鈣。該溶液通過首先將10mg/mL儲液稀釋在加大體積的需要的SFI中，并且然后加入適量的葡萄糖酸鈣，然后加入更多的SFI，以達到需要的體積而制備。用于組2的第二套給藥注射器充滿該溶液用于輸注?？缮藤彨@得的10%葡萄糖酸鈣注射液用于鈣補充。該溶液包含9mg元素鈣/mL。在第二次12-小時輸注過程中對組2施用的給藥溶液中的元素鈣的需要的終濃度為0.8mg/mL。血液收集和采樣方法通過靜脈穿刺從限制的清醒的動物的外周靜脈收集血液。在每個時間點(除了終止時間點之外)，從過夜禁食的動物收集約1.1mL血液。對于所有的動物，在輸注前、研究開始后12小時(在開始補充鈣之前)、在輸注結(jié)束時、和在尸檢時，測量離子化的鈣、PTH、和總血清鈣。結(jié)果在12小時的時間點，在開始鈣輸注之前，對于所有動物的平均總鈣從10.5mg/dL下降到8.0mg/dL。在第二個12小時的輸注過程中，在接受單獨的KAI-1455的大鼠中，平均總鈣進一步下降到6.8mg/dL，并且在接受KAI-1455和鈣的大鼠中下降到7.6mg/dL(圖8)。接受KAI-1455和鈣補充的8只大鼠沒有一只死亡(2只大鼠在開始鈣輸注之前死亡；一只與12小時的血液汲取有關(guān)，并且另一只在輸注開始后5小時死亡)，而僅接受KAI-1455的10只大鼠中有3(30%)死亡。在24-小時的KAI-1455輸注的后一半過程中通過靜脈內(nèi)輸注補充鈣(2mg/kg/小時)部分減弱了與KAI-1455有關(guān)的血清鈣減少，其足以防止與高劑量KAI-1455輸注相關(guān)的死亡率。到48小時(EOI后24小時)時，觀察到的鈣下降恢復(fù)。實施例6在畢爾格獵犬中KAI-1455的單劑量鈣輸注研究在犬中研究低鈣血癥的劑量-響應(yīng)和時間過程，以及通過提供l^補充防止低鈣血癥和改善毒性臨床癥狀的可能性。對3只犬連續(xù)(在劑量之間有適當(dāng)?shù)钠胶?washout)期間)施用12.5，1.0和5mg/kg(在12小時內(nèi)輸注)的劑量，以徹底表征低鈣血癥的劑量-響應(yīng)和其它終點，并且以研究血清鈣的變化、臨床癥狀、PTH、QT延長、和對動物的其它作用之間的關(guān)系。在該階段研究之后，同一只犬用來研究鈣補充防止或改善毒性的潛力。在該后期階段中，所有的三只犬均在12小時內(nèi)接受25mg/kg的KAI-1455(即，先前與明顯的垂死性相關(guān)的劑量)，但是它們在輸注開始時補充葡萄糖酸鈣，以2mg元素鈣/kg/小時的速率(即，在上述大鼠f丐補充研究中使用的相同速率)與KAI-1455同時輸注。在輸注過程中每3小時且在輸注后定時地監(jiān)測血清鈣。結(jié)果在同時接受鈣補充的KAI-1455輸注過程中，在12-小時輸注結(jié)束時，鈣的微小增加傾向于正常，這之后鈣水平開始下降(圖2)。在EOI后3小時，動物開始表現(xiàn)出低鈣血癥的癥狀。重新開始鈣輸注，并且持續(xù)~3小時，此時動物的癥狀迅速消退。在KAI-1455輸注后24小時時測量的鈣濃度又倒退至正常以下水平，這表明在額外的鈣補充后KAI-1455的作用仍在進行中(雖然較不明顯得多)。在12小時的輸注過程中，血清磷酸鹽水平增加，并且在EOI后6小時保持高于基線(圖3)。實施例7SEOIDNOs表表7肽序列和相應(yīng)的SEOIDNOs<table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage46</column></row><table>實施例8在人志愿者中的KAI-1455單升高劑量研究研究設(shè)計在健康的人志愿者中進行KAI-1455(SEQIDNO:7)的雙盲、隨機的、安慰劑控制的單升高劑量研究。最初的研究設(shè)計要求向7組同齡組通過靜脈內(nèi)輸注歷經(jīng)12小時施用KAI-1455(SEQIDNO:7)，初始劑量為1mg/kg。劑量升高依賴于在前劑量的安全性。每個同齡組隨機分配4名年輕的男性受試者(11=4)。同齡組是隨機性的，以便3名受試者接受活性藥物，和一名受試者接受安慰劑。在劑量同齡組之間的1周隨訪期間內(nèi)監(jiān)測受試者。對每名受試者確定研究終點，包括臨床和實驗安全性，藥物代謝動力學(xué)，血清離子化的鈣(iCa)，總鈣，磷酸鹽，和血漿PTH。結(jié)果KAI-1455—般在1-162mg/kg的劑量范圍內(nèi)，歷時12小時是安全的并且被很好地耐受。KAI-1455與血清鈣和血漿PTH的劑量依賴性減少相關(guān)。血清鈣和血漿PTH的減少在輸注結(jié)束(EOI)時達到最低點，但是在以最高劑量輸注結(jié)束后多至36小時保持被抑制。$0.1mg/kg/小時的給藥速率與用12-小時輸注血清鈣的<10%的平均最大減少相關(guān)。血漿藥物代謝動力學(xué)通過靜脈內(nèi)輸注在12小時內(nèi)對健康男性志愿者施用18，54,81和162mg/kgKAI-1455(SEQIDNO:7)的劑量。在12小時輸注過程中在1,3,6:9,和12小時的時間點確定KAI-1455的血漿濃度(ng/mL)，并且測量在輸注結(jié)束(EOI)后多至1小時。以最高劑量，從9-12小時時間點獲得約100ng/mL的持續(xù)不變的血漿濃度，其在EOI后約30分鐘逐漸恢復(fù)到基線(圖4)。治療組的離子化的鈣在輸注開始時，和在輸注開始后3，6,9,12,15，18,21,24和48小時確定血清離子化的鈣(mmol/L)。觀察到離子化的鈣的劑量依賴性減少，在約15和18小時的時間點(即，EOI后3-6小時)觀察到最大的鈣減少。以最高劑量，最大的鈣減少在EOI后保持12小時。在EOI后12小時觀察到鈣水平的部分恢復(fù)，在54,81,和162mg/kg劑量組，在EOI后12和36小時，與基線相比，受試者仍然表現(xiàn)出離子化鈣的顯著減少(圖5)。治療組的總鈣在輸注開始時，和在輸注開始后3,6,9,12,15,18,21,24和48小時，確定總鈣水平(mg/dL)。也觀察到總鈣的劑量依賴性減少，在約15和18小時的時間點(即，EOI后3-6小時)觀察到最大的鈣減少。以最高劑量，最大的鈣減少在EOI后保持12小時。在EOI后12小時觀察到鈣水平的部分恢復(fù)，在54,81,和162mg/kg劑量組，在EOI后12和36小時，與基線相比，受試者仍然表現(xiàn)出總鈣的顯著減少(圖6)。治療組的鈣變化百分數(shù)對于每個治療組，確定鈣變化百分數(shù)。在約15和18小時的時間點(即，EOI后3-6小時)觀察到最大的變化百分數(shù)。在162mg/kg劑量組，觀察到大于15%的鈣的最大減少百分數(shù)(圖7)。治療組的血漿PTH:在輸注開始時，和在輸注開始后3,6,12,15,18,24和48小時，確定治療組的血漿PTH水平(pg/mL)。在EOI觀察到血漿PTH的最大減少。對于162mg/kg劑量組中的受試者，在EOI和在EOI后12小時觀察到PTH的顯著減少，在EOI后36小時仍可觀察到低于治療前基線水平的持續(xù)不變的減少(圖8)。治療組的血漿PTH變化百分數(shù)對于每個治療組確定血漿PTH水平的變化百分數(shù)。在EOI觀察到最大變化百分數(shù)。對于81和162mg/kg劑量組中的受試者，觀察到大于40%的血槳PTH水平的最大變化百分數(shù)，在EOI后12小時，水平仍顯著低于基線，在EOI后36小時PTH水平恢復(fù)至基線(圖9)。實施例9在人志愿者中KAI-1455的4小時輸注研究研究設(shè)計:通過持續(xù)4小時的靜脈內(nèi)輸注對另外兩個同齡組以54或108mg/kg的劑量施用KAI-1455(SEQIDNO:7)。在對12-小時輸注確定最大耐受劑量后招募同齡組。每個同齡組隨機分配4名年輕的男性受試者(11=4)。同齡組是隨機的，以便3名受試者接受活性藥物，和一名受試者接受安慰劑。在輸注結(jié)束(EOI)后監(jiān)測受試者持續(xù)36小時。對每個治療組，確定研究終點，包括離子化的鈣(iCa),和血漿PTH。S0.2mg/kg/小時的給藥速率與用4-小時輸注血清鈣的<10%的平均最大減少相關(guān)。治療組的離子化的鈣在輸注開始時，和在輸注開始后2,3,4，6,8,12,16和36小時，確定血清離子化的鈣(mmol/L)。觀察到離子化鈣的劑量依賴性減少，對于54mg/kg劑量組，在EOI后約4小時觀察到最大離子化鈣的減少，并且對于108mg/kg劑量組，在EOI后12小時觀察到最大離子化鈣的減少(圖10)。治療組的總鈣同樣，在輸注開始時，和在輸注開始后2,3，4，6，8,12,16和36小時，確定總鈣(mg/dL)的減少。觀察到離子化鈣的劑量依賴性減少，對于54mg/kg劑量組，在EOI后約8小時觀察到最大總鈣的減少，并且對于108mg/kg劑量組，在EOI后12小時觀察到最大總鈣的減少，對于108mg/kg劑量組，在EOI后32小時觀察到總鈣的顯著減少(圖ll)。治療組的血漿PTH-在輸注開始時，和在輸注開始后2，3，4,6，8，12,16和36小時，確定治療組的血漿PTH水平(pg/mL)。在EOI觀察到血漿PTH的最大減少。對于108mg/kg劑量組的受試者，在EOI和在EOI后8小時觀察到血漿PTH的顯著減少(圖12)。實施例10在麻醉的大鼠中KP-1524的4小時輸注研究研究設(shè)計本研究設(shè)計用來確定貨物肽對鈣調(diào)節(jié)肽減少總鈣和/或血漿PTH水平的能力的影響。材料和方法對用異氟烷麻醉的大鼠(11=4)通過3小時的靜脈內(nèi)輸注以9mg/kg的劑量率施用KP-1524(SEQIDNO:9)。給對照動物(11=4)輸注鹽水。在輸注前、和在1,2,3禾Q4小時的時間點采集血液樣品。確定總鈣(mg/dL)和PTH(pg/mL)。結(jié)果治療的動物表現(xiàn)出總鈣和PTH水平的顯著減少。在EOI后1小時觀察到最大的總鈣(mg/dL)減少(圖13(A))。到2小時的時間點觀察到血漿PTH(pg/mL)的最大減少，并且血漿PTH的顯著減少持續(xù)到EOI后1小時(圖13(B))。在鹽水處理的動物中觀察到的血漿PTH水平升高可能是由多尿?qū)е碌?。實施?1在麻醉的大鼠中KAI-1455和KP-1524的3小時輸注研究材料和方法對用異氟垸麻醉的大鼠(11=3)通過3小時的靜脈內(nèi)輸注以9mg/kg的劑量率施用KAI-1455(SEQIDNO:7)和KP-1524(SEQIDNO:9)。對照動物(n-2)輸注鹽水。在輸注前、和在l,2,3，6和24小時的時間點采集血液樣品。確定總鈣(mg/dL)和PTH(pg/mL)。結(jié)果治療的動物表現(xiàn)出總鈣和PTH水平的顯著減少，在EOI附近觀察到最大的減少。對KAI-1455和KP-1524二者，總鈣的減少持續(xù)到EOI后多至4小時，并且對于這兩種肽，總鈣和PTH的減少是相當(dāng)?shù)?數(shù)據(jù)未顯示)。實施例12在麻醉的大鼠中KAI-9706的3小時輸注研究研究設(shè)計本研究設(shè)計用來確定加帽基團對陽離子肽減少鈣和血漿PTH的作用。材料和方法對用異氟烷麻醉的大鼠(11=4)通過3小時的靜脈內(nèi)輸注以9mg/kg的劑量率施用KP-9706(SEQIDNO:6)。對照動物(11=4)輸注鹽水。在輸注前、和在l,2，3，4和24小時的時間點采集血液樣品。確定總鈣(mg/dL)和PTH(pg/mL)。結(jié)果KP-9706沒有表現(xiàn)出總鈣(圖14)或血漿PTH水平的減少(數(shù)據(jù)未顯示)。實施例13在大鼠EDTA血漿中的體外血漿穩(wěn)定性材料和方法對于KAI-1455(SEQIDNO:7)，KP-9706(SEQIDNO:6)和KP-9803(SEQIDNO:8)，在大鼠EDTA血漿中確定體外血槳穩(wěn)定性。結(jié)果加帽的鈣調(diào)節(jié)肽，即KAI-1455(SEQIDNO:7)，在血漿中比未加帽的肽，即KP-9706(SEQIDNO:6)和KP-9803(SEQIDNO:8)的任一種，基本上更穩(wěn)定。在大鼠EDTA血漿中，KAI-1455表現(xiàn)出ca.50分鐘的半衰期(t1/2)。KP-9706(SEQIDNO:6)和KP-9803(SEQIDN0:8)分別表現(xiàn)出ca.5和IO分鐘的半衰期(圖15)。在人和犬血漿中觀察到相似的結(jié)果(數(shù)據(jù)未顯示)。實施例14在麻醉的大鼠中KAI-1586和KAI-1633的3小時輸注研究研究設(shè)計本研究設(shè)計用來確定二硫鍵和/或半胱氨酸殘基對鈣調(diào)節(jié)肽減少總鈣和血漿PTH的作用。材料和方法對用異氟烷麻醉的大鼠(11=3)通過3小時的靜脈內(nèi)輸注以9mg/kg的劑量率施用KAI-1633(SEQIDNO:ll)。對照動物(11=4)輸注鹽水。在輸注前、和在1,2,3，4和24小時的時間點采集血液樣品，用于確定總鈣(mg/dL)和PTH(pg/mL)。結(jié)果KAI-1633沒有表現(xiàn)出總鈣或血漿PTH水平的減少(數(shù)據(jù)未顯示)。對于9mg/kg的KAI-1633的穩(wěn)定狀態(tài)的血漿濃度通過ELISA確定為約3500ng/mL。通過比較，對于9mg/kgKAI-1455的穩(wěn)定狀態(tài)的血漿濃度通過ELISA確定為約2200ng/mL。穩(wěn)定狀態(tài)藥物代謝動力學(xué)數(shù)據(jù)表明，KAI-1455和KAI-1633表現(xiàn)出相似的系統(tǒng)暴露。觀察到的在減少總轉(zhuǎn)和血漿PTH的功效中的差異不能完全歸因于這兩種化合物之間的藥物代謝動力學(xué)差異。實施例15代表性的實施方案包括下述代表性實施方案，以舉例說明而不是限制本發(fā)明。1.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低甲狀旁腺激素(PTH)水平，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含a)包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基的聚陽離子肽；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)包含第二含有巰基的殘基的貨物肽；其中所述第二含有巰基的殘基與所述第一含有巰基的殘基以二硫鍵鍵合。2.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低甲狀旁腺激素(PTH沐平，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含a)第一聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第一氨基端、第一羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所述第一聚陽離子肽在第一氨基端、第一羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)第二聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第二氨基端、第二羧基端、和第二含有巰基的殘基；其中所述第二聚陽離子肽在第二氨基端、第二羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含6-30個在生理pH下帶正電荷的氨基酸。3.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低甲狀旁腺激素(PTH)水平，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含聚陽離子肽，其包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和其中所述第一含有巰基的殘基包含可以作為游離巰基或處于保護形式的巰基基團。4.實施方案l、2或3中任一項的應(yīng)用，其中當(dāng)向受試者施用治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽時，血清PTH減少。5.實施方案4的應(yīng)用，其中所述治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以在施用所述l丐調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少10小時將血清PTH減少至少20%。6.實施方案4的應(yīng)用，其中所述治療有效量的鈣調(diào)節(jié)足以在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少48小時將血清PTH減少30%-70%。7.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低血清鈣水平，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含a)包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基的聚陽離子肽；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)包含第二含有巰基的殘基的貨物肽；其中所述第二含有巰基的殘基與所述第一含有巰基的殘基以二硫鍵鍵合。8.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低血清鈣水平，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含a)第一聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第一氨基端、第一羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所述第一聚陽離子肽在第一氨基端、第一羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)第二聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第二氨基端、第二羧基端、和第二含有巰基的殘基；其中所述第二聚陽離子肽在第二氨基端、第二羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含6-16個在生理pH下帶正電荷的氨基酸。9.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低血清鈣水平，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含聚陽離子肽，其包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和其中所述第一含有巰基的殘基包含可以作為游離巰基或處于保護形式的巰基基團。10.實施方案7，8或9中任一項的應(yīng)用，其中當(dāng)向受試者施用治療有效量的l^調(diào)節(jié)肽時，血清^減少。11.實施方案10的應(yīng)用，其中所述治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少10小時將血清鈣減少至少5%。12.實施方案10的應(yīng)用，其中所述治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少48小時將血清韓減少5%-20%。13.實施方案1-12中任一項的應(yīng)用，其中所述受試者患有原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進、繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進、三發(fā)性甲狀旁腺功能亢進、惡性高鈣血癥、轉(zhuǎn)移性骨病、佩吉特病、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨軟化、軟骨鈣質(zhì)沉著病、軟骨發(fā)育不全、骨軟骨炎、囊性成骨不全、先天性低磷酸酯酶癥、纖維瘤性損傷、纖維性結(jié)構(gòu)不良、多發(fā)性骨髓瘤、溶骨性骨病、假體周圍骨質(zhì)溶解、牙周病、骨質(zhì)疏松癥、異常骨轉(zhuǎn)換、或高轉(zhuǎn)換性骨病。14.實施方案1-13中任一項的應(yīng)用，其中所述受試者患有繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進。15.鈣調(diào)節(jié)肽，其包含a)包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基的聚陽離子肽；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)包含第二含有巰基的殘基的貨物肽；其中所述第二含有巰基的殘基與所述第一含有巰基的殘基以二硫鍵鍵合。16.鈣調(diào)節(jié)肽，其包含a)第一聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第一氨基端、第一羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所述第一聚陽離子肽在第一氨基端、第一羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)第二聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第二氨基端、第二羧基端、和第二含有巰基的殘基；其中所述第二聚陽離子肽在第二氨基端、第二羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含6-16個在生理pH下帶正電荷的氨基酸。17.鈣調(diào)節(jié)肽，其包含聚陽離子肽，其包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和其中所述第一含有巰基的殘基包含可以作為游離巰基或處于保護形式的巰基基團。18.實施方案17的鈣調(diào)節(jié)肽，其還包含第二含有巰基的殘基，所述第二含有巰基的殘基與第一含有巰基的殘基以二硫鍵鍵合。19.實施方案15-18中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述帶正電荷的氨基酸獨立地選自由下列各項組成的組精氨酸、賴氨酸、組氨酸、2,3-二氨基丙酸(Dap)、2，4-二氨基丁酸(Dab)、鳥氨酸、和高精氨酸。20.實施方案15-19中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述第一含有巰基的殘基位于所述聚陽離子肽的氨基端或羧基端。21.實施方案15-19中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述第一含有巰基的殘基位于所述聚陽離子肽除氨基端或羧基端之外的位置。22.實施方案15,16或18中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述第二含有巰基的殘基位于所述貨物肽的氨基端或羧基端。23.實施方案15,16或18中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述第二含有巰基的殘基位于所述貨物肽除氨基端或羧基端之外的位置。24.實施方案15-23中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述聚陽離子肽的氨基端被化學(xué)修飾為乙酰胺。25.實施方案15-24中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述聚陽離子肽的羧基端被化學(xué)修飾為伯羧酰胺。26.實施方案15-25中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述聚陽離子肽的氨基端被化學(xué)修飾為乙酰胺，并且所述聚陽離子肽的羧基端被化學(xué)修飾為伯羧酰胺。27.實施方案15-26中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述第一含有巰基的殘基和第二含有巰基的殘基，如果存在，獨立地選自由半胱氨酸、高半胱氨酸、和巰基丙酸組成的組。28.前述實施方案中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其綴合到聚乙二醇(PEG)上。29.鈣調(diào)節(jié)肽，其具有SEQIDNO:13，SEQIDNO:15,SEQIDNO:16,SEQIDNO:17,或SEQIDNO:18的氨基酸序列。30.—種藥物組合物，其包含前述實施方案中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，和至少一種藥用賦形劑。權(quán)利要求1.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低甲狀旁腺激素(PTH)水平，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含a)包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基的聚陽離子肽；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)包含第二含有巰基的殘基的貨物肽；其中所述第二含有巰基的殘基與所述第一含有巰基的殘基以二硫鍵鍵合。2.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低甲狀旁腺激素(PTH)水平，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含a)第一聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第一氨基端、第一羧基端、和第一包含巰基的殘基；其中所述第一聚陽離子肽在第一氨基端、第一羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)第二聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第二氨基端、第二羧基端、和第二包含巰基的殘基；其中所述第二聚陽離子肽在第二氨基端、第二羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含6-30個在生理pH下帶正電荷的氨基酸。3.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低甲狀旁腺激素(PTH)水平'，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含聚陽離子肽，其包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一包含巰基的殘基；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和其中所述第一包含巰基的殘基包含可以作為游離巰基或處于保護形式的巰基基團。4.權(quán)利要求l、2或3中任一項的應(yīng)用，其中當(dāng)向受試者施用治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽時，血清PTH減少。5.權(quán)利要求4的應(yīng)用，其中所述治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少10小時將血清PTH減少至少20%。6.權(quán)利要求4的應(yīng)用，其中所述治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少48小時將血清PTH減少30%-70%。7.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低血清鈣水平，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含a)包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基的聚陽離子肽；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)包含第二含有巰基的殘基的貨物肽；其中所述第二含有巰基的殘基與所述第一含有巰基的殘基以二硫鍵鍵合。8.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低血清鈣水平，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含a)第一聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第一氨基端、第一羧基端、和第一包含巰基的殘基；其中所述第一聚陽離子肽在第一氨基端、第一羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)第二聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第二氨基端、第二羧基端、和第二包含巰基的殘基；其中所述第二聚陽離子肽在第二氨基端、第二羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含6-16個在生理pH下帶正電荷的氨基酸。9.鈣調(diào)節(jié)肽在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在需要其的受試者中降低血清鈣水平，其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含聚陽離子肽，其包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一包含巰基的殘基；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和其中所述第一包含巰基的殘基包含可以作為游離羥基或處于保護形式的巰基基團。10.權(quán)利要求7，8或9中任一項的應(yīng)用，其中當(dāng)向受試者施用治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽時，血清鈣減少。11.權(quán)利要求10的應(yīng)用，其中所述治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少10小時將血清鈣減少至少5%。12.權(quán)利要求10的應(yīng)用，其中所述治療有效量的鈣調(diào)節(jié)肽足以在施用所述鈣調(diào)節(jié)肽后持續(xù)至少48小時將血清鈣減少5%-20%。13.權(quán)利要求1-12中任一項的應(yīng)用〃其中所述受試者患有原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進、繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進、三發(fā)性甲狀旁腺功能亢進、惡性高鈣血癥、轉(zhuǎn)移性骨病、佩吉特病、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨軟化、軟骨鈣質(zhì)沉著病、軟骨發(fā)育不全、骨軟骨炎、囊性成骨不全、先天性低磷酸酯酶癥、纖維瘤性損傷、纖維性結(jié)構(gòu)不良、多發(fā)性骨髓瘤、溶骨性骨病、假體周圍(periprosthetic)骨質(zhì)溶解、牙周病、骨質(zhì)疏松癥、異常骨轉(zhuǎn)換、或高轉(zhuǎn)換性骨病。14.權(quán)利要求1-13中任一項的應(yīng)用，其中所述受試者患有繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進。15.鈣調(diào)節(jié)肽，其包含a)包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基的聚陽離子肽；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)包含第二含有巰基的殘基的貨物肽；其中所述第二含有巰基的殘基與所述第一含有巰基的殘基以二硫鍵鍵合。16.鈣調(diào)節(jié)肽，其包含a)第一聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第一氨基端、第一羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所述第一聚陽離子肽在第一氨基端、第一羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和b)第二聚陽離子肽，其包含至少3個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、第二氨基端、第二羧基端、和第二含有巰基的殘基；其中所述第二聚陽離子肽在第二氨基端、第二羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；其中所述鈣調(diào)節(jié)肽包含6-16個在生理pH下帶正電荷的氨基酸。17.鈣調(diào)節(jié)肽，其包含聚陽離子肽，其包含5-20個在生理pH下帶正電荷的氨基酸、氨基端、羧基端、和第一含有巰基的殘基；其中所述聚陽離子肽在氨基端、羧基端或兩端進行化學(xué)修飾；和其中所述第一含有巰基的殘基包含可以作為游離巰基或處于保護形式的巰基基團。18.權(quán)利要求17的鈣調(diào)節(jié)肽，其還包含第二含有巰基的殘基，所述第二含有巰基的殘基與第一含有巰基的殘基以二硫鍵鍵合。19.權(quán)利要求15-18中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述帶正電荷的氨基酸獨立地選自由下列各項組成的組精氨酸、賴氨酸、組氨酸、2,3-二氨基丙酸(Dap)、2，l二氨基丁酸(Dab)、鳥氨酸、和高精氨酸。20.權(quán)利要求15-19中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述第一含有巰基的殘基位于所述聚陽離子肽的氨基端或羧基端。21.權(quán)利要求15-19中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述第一含有巰基的殘基位于所述聚陽離子肽除氨基端或羧基端之外的位置。22.權(quán)利要求15,16或18中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述第二含有巰基的殘基位于所述貨物肽的氨基端或羧基端。23.權(quán)利要求15,16或18中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述第二含有巰基的殘基位于所述貨物肽除氨基端或羧基端之外的位置。24.權(quán)利要求15-23中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述聚陽離子肽的氨基端被化學(xué)修飾為乙酰胺。25.權(quán)利要求15-24中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述聚陽離子肽的羧基端被化學(xué)修飾為伯羧酰胺。26.權(quán)利要求15-25中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述聚陽離子肽的氨基端被化學(xué)修飾為乙酰胺，并且所述聚陽離子肽的羧基端被化學(xué)修飾為伯羧酰胺。27.權(quán)利要求15-26中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其中所述第一含有巰基的殘基和第二含有巰基的殘基，如果存在，獨立地選自由半胱氨酸、高半胱氨酸、和巰基丙酸組成的組。28.前述權(quán)利要求中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，其綴合到聚乙二醇(PEG)上。29.f丐調(diào)節(jié)肽，其具有SEQIDNO:13，SEQIDNO:15,SEQIDNO:16,SEQIDNO:17，或SEQIDNO:18的氨基酸序列。30.—種藥物組合物，其包含前述權(quán)利要求中任一項的鈣調(diào)節(jié)肽，和至少一種藥用賦形劑。全文摘要本發(fā)明提供用于治療甲狀旁腺功能亢進、骨病和/或高鈣血癥的方法和試劑盒。特別地，提供利用聚陽離子鈣調(diào)節(jié)肽來降低血清PTH和血清鈣的方法。所述鈣調(diào)節(jié)肽可以用來治療患有例如下列各項的疾病的受試者原發(fā)性、繼發(fā)性或三發(fā)性甲狀旁腺功能亢進；惡性高鈣血癥；轉(zhuǎn)移性骨?。换蚬琴|(zhì)疏松癥。文檔編號A01N37/18GK101668421SQ200780050006公開日2010年3月10日申請日期2007年11月16日優(yōu)先權(quán)日2006年11月16日發(fā)明者格雷戈里·貝爾,薩拉·瓦爾特,費利克斯·卡里姆申請人:凱制藥公司