專利名稱：：一種新型蛋白飼料添加劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于詞料添加劑領(lǐng)域，涉及一種新型蛋白飼料添加劑的制備方法，具體地說是涉及一種水解蛋白混合物及蛋白肽粉飼料添加劑的制備方法。
背景技術(shù)：
：詞料資源不足，特別是飼料中的蛋白質(zhì)資源短缺是制約我國養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要問題，而且，在蛋白質(zhì)詞料資源利用上，我國還存在著轉(zhuǎn)化率和利用率較低的問題，因此，開發(fā)并合理利用蛋白詞料對養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展具有重要意義。'研究發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有的蛋白飼料往往存在抗營養(yǎng)因子和毒性問題，影響使用的安全性；另一方面，飼料中被消化的蛋白質(zhì)大部分是以低聚肽而不是以單體氨基酸被吸收的，各種肽轉(zhuǎn)移到動物細胞中時耗能低、運轉(zhuǎn)快，功能強，極利于動物對蛋白飼料的消化吸收。因此，將豆粕等植物類蛋白飼料進行預(yù)消化，使之成為植物性小肽類產(chǎn)品，降低抗營養(yǎng)因子含量，是獲得高質(zhì)量飼料蛋白的有效途徑。國際上對肽的研究開始于20世紀70年代末，我國近幾年開始研究，但所制得的產(chǎn)品多用于食品及保健品。目前，國內(nèi)外肽產(chǎn)品生產(chǎn)方法有酸解法、化學(xué)合成法、發(fā)酵法(液體發(fā)酵法、固態(tài)發(fā)酵)、酶法。酸解法的弊端是難以控制水解程度，容易破壞色氨酸和一些羥氨酸，水解產(chǎn)物以氨基酸為主，不利于寡肽制備?；瘜W(xué)合成法用于生產(chǎn)高價值的短鏈到中長鏈的藥理級肽，該法的缺點是成本高，且在反應(yīng)過程中對健康和環(huán)境可能有害。液體發(fā)酵法制備大豆肽需要高溫滅菌和密閉條件，成本高；菌和酶的生產(chǎn)條件存在差異，不能同時滿足兩者生長要求；水解程度不能精確控制，產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定等。目前在飼料行業(yè)中常用的固態(tài)發(fā)酵具有能耗低、過程節(jié)水、操作簡便易行等優(yōu)點，但通氣或散熱困難，產(chǎn)品質(zhì)量同樣很難控制。酶法生產(chǎn)具有生產(chǎn)規(guī)模大、成本低、反應(yīng)條件溫和無害、低分子小肽得率較高、技術(shù)相對容易控制、適用于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點。酶法在食品行業(yè)有比較廣泛的用途，但多是采用單一的蛋白酶，對蛋白質(zhì)的降解作用及其抗營養(yǎng)因子的破壞作用有限，很難在實際中得到應(yīng)用。專利CN1530022公開了一種蛋白飼料的制備方法，該方法采用生物發(fā)酵法結(jié)合酶法進行制備，一方面發(fā)酵去除抗營養(yǎng)因子，另一方面用酶將蛋白快速降解；但是，考慮到菌的生長周期，發(fā)酵時間還是較長；且將菌與酶同時加入，不能兼顧兩者的最適反應(yīng)條件；另外，采用固體發(fā)酵法，產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定。專利CN1377590和CN1274361中公開了以液態(tài)酶法生產(chǎn)大豆肽的方法，二者都采用單一的蛋白酶，只針對蛋白進行水解，并未對植物蛋白中的非淀粉多糖進行降解。專利CN1957736公開了一種大豆蛋白(肽)粉的生產(chǎn)方法，該法涉及一種綜合開發(fā)利用豆粕的方法，但是由于其工藝繁瑣，不利于低附加值伺料行業(yè)的應(yīng)用推廣。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供一種工藝簡單，適于在飼料行業(yè)工業(yè)化生產(chǎn)的、多酶復(fù)合的酶法水解蛋白制取水解蛋白混合物及蛋白肽粉飼料添加劑的方法。本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)方法復(fù)雜，發(fā)酵耗時過長，水解單一、水解度低的弊端，提髙水解速度和水解程度，并提高飼料利用率，降低生產(chǎn)成本。本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的本發(fā)明提供一種新型蛋白飼料添加劑的制備方法，包括如下步驟1)原料預(yù)處理將酶解底物粉碎到40100目，放入酶解罐中，加入水，所加入水的重量與酶解底物所含蛋白質(zhì)的重量配比為100:518，攪拌，調(diào)pH至79，3037""C條件下浸泡0.51小時，然后，80100'C下滅菌1020分鐘，后降溫到S060'C;2)復(fù)合酶的酶解處理向步驟1)得到的蕷處理過的原料中，依次加入非淀粉多糖酶(NSP酶)、蛋白酶進行水解，溫度4560。C，pH自然，酶解614h，至水解度(DH^)2042Q/^時停止反應(yīng)；3)滅酶將步驟2)得到的酶解處理后的液體于90120。C滅酶1530分鐘，流出液即為蛋白酶解液；4)濃縮將步驟3)得到的蛋白酶解液，濃縮至含固量1535%，得濃縮液；5)噴霧干燥-將步驟4)的濃縮液經(jīng)高壓泵打入壓力式噴霧干燥塔，進風(fēng)170190°C，排風(fēng)7085。C，塔內(nèi)溫度100110。C，進行噴霧干燥，得到水解蛋白混合物。其中，所述的酶解底物為下述植物蛋白大豆分離蛋白、大豆?jié)饪s蛋白、豆粕、豆餅、棉籽餅粕、菜籽餅粕、葵花籽餅粕、花生餅粕中的任一種、兩種或多種的混合物。該制備方法中的非淀粉多糖酶(NSP酶)可以降低豆粕等飼料中非淀粉多糖的含量，增加水解蛋白混合物和蛋白肽中還原糖的含量，提高水解速度和水解程度。非淀粉多糖酶可以為果膠酶、纖維素酶、木聚糖酶中的任一種、兩種或多種；所述的蛋白酶為中性蛋白酶和/或堿性蛋白酶，蛋白酶可以為下述菌枯草桿菌1398、放線菌166、棲土曲霉3942、黑曲霉3350和/或地衣型芽孢桿菌2709產(chǎn)生的蛋白酶及水解蛋白酶(Alcalase)、風(fēng)味蛋白酶(Flavourzyme)、復(fù)合蛋白酶(Protamex)中的任一種、兩種或多種。進一步，所述的果膠酶、纖維素酶、木聚糖酶和蛋白酶的添加量為果膠酶，03000U/g蛋白；纖維素酶，02000U/g蛋白；木聚糖酶，04000U/g蛋白;蛋白酶，100010000U/g蛋白。通過本發(fā)明以上步驟所制得的蛋白酶解液及水解蛋白混合物均可作為飼料添加劑使用，但本發(fā)明優(yōu)選使用水解蛋白混合物作為詞料添加劑。本發(fā)明進一步包括下述步驟蛋白肽的制備將步驟3)得到的蛋白酶解液在30006000rpm下離心1030分鐘，分出的上清液通過超濾膜過濾，過截止分子量S10000Da的超濾膜系統(tǒng)，得到的濾液經(jīng)負壓真空濃縮到原體積的50%，再進入步驟5)進行噴霧干燥，制得蛋白肽粉。通過本發(fā)明以上步驟所制得的蛋白肽粉可作為詞料添加劑使用。通過本發(fā)明的制備方法制得的水解蛋白混合物和蛋白肽粉作為詞料添加劑具有以下功效或用途1.提高飼料利用率，降低生產(chǎn)成本?；钚噪哪芴岣邉游飳I養(yǎng)物質(zhì)的吸收，從而提高飼料的轉(zhuǎn)化利用率；2.明顯提高蛋禽的產(chǎn)蛋率，延長產(chǎn)蛋高峰期；3.提高肉禽的增重，降低料肉比，提高肉雞生產(chǎn)性能，提高蛋白表觀消化率；4.可以降低幼齡動物腹瀉的發(fā)生率、降低仔豬料肉比；5.用于水產(chǎn)動物，可以提高魚的增重，降低餌料系數(shù)，降低腸道內(nèi)容物黏度，提高水產(chǎn)動物的總表觀消化率、蛋白質(zhì)和脂肪的表觀消化率。該方法制得的產(chǎn)品作為飼料添加劑的使用方法為(1)水解蛋白混合物的使用方法將水解蛋白混合物與飼料混合或拌料，其中仔豬、肉仔雞、牛仔、羔羊，用量200300克/噸飼料；母豬、育肥豬、奶牛、肥育羊和牛，用量3001000克/噸飼料;產(chǎn)蛋雞、鴨、鵝，用量250800克/噸飼料；水產(chǎn)動物，用量200800克/噸飼料。(2)蛋白肽粉的使用方法將蛋白肽粉與伺料混合或拌料，其中仔豬、肉仔雞、牛仔、羔羊，用量150200克/噸飼料；母豬、育肥豬、奶牛、肥育羊和牛，用量200800克/噸飼料；產(chǎn)蛋雞、鴨、鵝，用量150600克/噸飼料；水產(chǎn)動物，用量100600克/噸飼料。本發(fā)明與已有技術(shù)相比具有以下優(yōu)越性(1)非淀粉多糖酶與蛋白酶的復(fù)配，可克服現(xiàn)有技術(shù)發(fā)酵耗時過長，水解單一、水解度低的弊端，可以提高蛋白質(zhì)水解速度和水解程度，提高飼料利用率，降低生產(chǎn)成本；(2)非淀粉多糖酶的添加，可以降低飼料中非淀粉多糖的含量，提高水解產(chǎn)物中還原糖的含量，提高動物對飼料的消化率，改善動物對能量的利用率，；(3)工藝簡單，制備過程時間短，適于工業(yè)化應(yīng)用。通過下列實施例將更具體的說明本發(fā)明，但是應(yīng)理解所述實施例僅是為了說明本發(fā)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。具體實施例方式實施例l水解蛋白混合物一H11)原料預(yù)處理將酶解底物一大豆分離蛋白經(jīng)粉碎機粉碎到100目，放入酶解罐中，加入水，所加入水的重量與酶解底物所含蛋白質(zhì)的重量份配比為100:5，攪拌均勻，調(diào)pljl至7，于酶解罐中3(TC條件下浸泡1小時，然后，8(TC下進行20分鐘的滅菌處理，滅菌液降溫到5(TC，準備加酶水解；2)復(fù)合酶的酶解處理向步驟1)得到的預(yù)處理過的原料中，依次加入非淀粉多糖酶(NSP酶)、蛋白酶進行水解，反應(yīng)期間溫度45。C，pH自然，酶解14h，至水解度(DHX)20X時停止反應(yīng)；各種酶的添加量為果膠酶0U/g蛋白、纖維素酶OU/g蛋白、地衣型芽孢桿菌2709堿性P白酶5000U/g蛋白；3)滅酶將步驟2)得到的酶解處理后的液體于卯'C滅酶30分鐘，流出液即為蛋白酶解液；4)濃縮將步驟3)得到的蛋白酶解液，經(jīng)雙效降膜真空濃縮器濃縮至含固量1535%，得濃縮液；5)噴霧干燥將濃縮液經(jīng)高壓泵打入壓力式噴霧干燥塔，進風(fēng)170190°C，排風(fēng)7085。C,塔內(nèi)溫度100110°C，進行噴霧干燥，最終得到水解蛋白混合物一H1。水解度(DegreeofHydrolysis,DH。/。)的測定方法為常規(guī)的茚三酮顯色法，現(xiàn)簡單介紹如下①標準曲線的繪制首先配制標準甘氨酸溶液，其濃度為20ug/ml;然后依表l所列加樣量順序加樣。表l甘氨酸、茚三酮和乙醇的加樣量試管編號01234567標準甘氨酸溶液加樣量(ml)00.20.40.60.81.01.52.0蒸餾水加樣量(ml)2.01.81.61.41.21.00.50終體積2ml時甘氨酸終濃度02468101520(ug/ml)茚三酮加樣量(ml)1111111140。/。乙醇加樣量(ml)55555555按表1所列加樣量，于具塞試管中依次加入標準甘氨酸溶液、蒸餾水和茚三酮顯色劑，在沸水中加熱15min，然后于冷水中冷卻5min;再加入40%的乙醇溶液終止反應(yīng)，放置15min;以空白管調(diào)零于570nm處測定A(吸光度)值。②水解蛋白混合物中-NH2含量的測定取一定量的水解蛋白混合物于4000rpm下離心20min，取上清液進行適當稀釋，使OD.值在01之間。吸取2ml稀釋液于具塞試管中并加入lml茚三酮顯色劑，混勻后于沸水中加熱15min;然后于冷水中冷卻5min;再加5ml40%的乙醇溶液終止反應(yīng)，放置15min后，待測。最后，利用標準曲線計算水解蛋白混合物中-NH2的含量(umol/ml)。③水解度(DHy。)計算<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>在上式中水解蛋白混合物(即式中蛋白水解液)的相對甘氨酸濃度是指按上述方法測出的水解蛋白混合物的吸光度后，由標準曲線換算出的甘氨酸濃度；酶解底物的蛋白濃度是指酶解底物(如大豆蛋白等)的蛋白質(zhì)濃度；75.07:是甘氨酸的分子量；7.8mmol/g:是大豆蛋白完全水解后的肽鍵數(shù)(常數(shù))；Ho(mmol/g):是發(fā)酵底物(原料)中的肽鍵數(shù)(常數(shù))。實施例2水解蛋白混合物一H21)原料預(yù)處理將酶解底物一豆粕經(jīng)粉碎機粉碎到100目，放入酶解罐中，加入水，所加入水的重量與酶解底物所含蛋白質(zhì)的重量份配比為100:16，攪拌均勻，調(diào)pH至7，于酶解罐中37'C條件下浸泡0.5小時，然后，10(TC下進行10分鐘的滅菌處理，滅菌液降溫到60'C，準備加酶水解；2)復(fù)合酶的酶解處理向步驟1)得到的預(yù)處理過的原料中，依次加入非淀粉多糖酶(NSP酶)、蛋白酶進行水解，反應(yīng)期間溫度45'C，pH自然，酶解24h，至水解度(DHX)4^/^時停止反應(yīng)；各種酶的添加量為果膠酶5000U/g蛋白、纖維素酶2000U/g蛋白、地衣型芽孢桿菌2709堿性蛋白酶5000U/g蛋白、枯草桿菌1398中性蛋白酶5000U/g蛋白；3)滅酶將步驟2)得到的酶解處理后的液體于12(TC滅酶15分鐘，流出液即為蛋白酶解液；4)濃縮將步驟3)得到的酶lf液，經(jīng)雙效降膜真空濃縮器濃縮至含固量1535%，得濃縮液；5)噴霧干燥將濃縮好的濃縮液經(jīng)高壓泵打入壓力式噴霧干燥塔，進風(fēng)170190°C，排風(fēng)7085。C，塔內(nèi)溫度10011(TC，進行噴霧干燥，最終得到水解蛋白混合物一H2。實施例3水解蛋白混合物H2還原糖釋放量(l)還原糖測定①標準曲線的繪制'吸取乙酸-乙酸鈉緩沖液(pH5.5)40Ml，加入DNS試劑5.0ml，沸水加熱5min，用自來水冷卻至室溫，用水定容到25ml，制成標準空白溶液。分別吸取葡萄糖溶液l.OOml、2.00ml、3.00ml、4.00ml、5.00ml、6.00ml、7.00ml，分別用緩沖液定容至lOOml，配制成濃度為0.10mg/ml0.70mg/ml葡萄糖標準溶液。分別吸取上述濃度系列的葡萄糖標準溶液各2.00ml(做兩個平行)，分別加入到刻度試管中，再分別加入2ml水和5mlDNS試劑，電磁振蕩3s，沸水加熱5min,然后。用自來水冷卻到室溫，再用水定容至25ml，以標準空.白樣為對照調(diào)零，在540nm處測定吸光度OD值。以葡萄糖濃度為Y軸，吸光度OD值為X軸，繪制標準曲線。每次新配制的DNS試劑均需要重新繪制標準曲線。②測定將經(jīng)過NSP酶酶解的豆粕水解蛋白混合物于4000iVmin離20min，經(jīng)過適當稀釋后作還原糖待測液；③結(jié)果與計算ft曲線所得葡萄糖S克數(shù)x-水解液總體積還)京糖(%):lj定時取用的體積樣品的A克數(shù)100%(2)添加非淀粉多糖對還原糖釋放量的影響方法同實施例2，試驗結(jié)果如表2所示。表2、NSP酶添加效果組別果膠酶(U/g)木纖維素酶(U/g)堿性蛋白酶(U/g)中性蛋白酶(U/g)還原糖量(mg/ml)固％空白組0050005000274.930試驗組5000200050005000558.142豆粕中含有大量的非淀粉多糖(NSP)是限制豆粕在飼料中使用的主要因素。從體外酶解的方法可以消除或減弱這些抗營養(yǎng)因子的有害作用。從本試驗結(jié)果看，使用非淀粉多糖后，還原糖的量有明顯的上升，說明部分非淀粉多糖已被降解。同時，加入非淀粉多糖還可以促進蛋白水解的程度及速度。實施例4水解蛋白混合物一H31)原料預(yù)處理將酶解底物一菜籽粕經(jīng)粉碎機粉碎到80目，放入酶解罐中，加入水，所加入水的重量與酶解底物所含蛋白質(zhì)的重量份配比為100:10，攪拌均勻，調(diào)pH至8，于酶解罐中30'C條件下浸泡1小時，然后，195i:下進行15分鐘的滅菌處理，滅菌液降溫到55X:，準備加酶水解；2)復(fù)合酶的酶解處理向步驟1)得到的預(yù)處理過的原料中，依次加入非淀粉多糖酶(NSP酶)、蛋白酶進行水解，反應(yīng)期間溫度55-C，pH自然，酶解14h，至水解度(DHX)28X時停止反應(yīng)；各種酶的添加量為纖維素酶2000U/g蛋白、木聚糖酶4000U/g蛋白、地衣型芽孢桿菌2709堿性蛋白酶8000U/g蛋白、枯草桿菌1398中性蛋白酶2000U/g蛋白；3)滅酶將步驟2)得到的酶解處理后的液體于12(TC滅酶15分鐘，流出液即為蛋白酶解液；4)濃縮將步驟3)得到的酶解液，經(jīng)雙效降膜真空濃縮器濃縮至含固量1535%，得濃縮液；5)噴霧干燥將濃縮好的濃縮液經(jīng)高壓泵打入壓力式噴霧干燥塔，進風(fēng)170190°C，排風(fēng)7085。C，塔內(nèi)溫度100110。C，進行噴霧干燥，最終得到水解蛋白混合物一H3。實施例512、水解蛋白混合物一H4H11表3、水解蛋白混合物<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>實施例13蛋白肽粉一T13將實施例1得到的經(jīng)滅酶的蛋白酶解液再經(jīng)30006000rpm離心1030分鐘除去渣質(zhì)，分出的上清液通過超濾膜過濾，過截止分子量^10000Da的超濾膜系統(tǒng)，將得到的濾液經(jīng)負壓真空濃縮到原體積的50%，膜上液回到酶解過程繼續(xù)酶解，濾液則進入步驟5)進行噴霧干燥，制得蛋白肽粉一T13。實施例14蛋白肽粉一T14將實施例2得到的經(jīng)滅酶的蛋白酶解液再經(jīng)30006000rpm離心1030分鐘除去渣質(zhì)，分出的上清液通過超濾膜過濾，過截止分子量^10000Da的超濾膜系統(tǒng)，將得到的濾液經(jīng)負壓真空濃縮到原體積的50%，膜上液回到酶解過程繼續(xù)酶解，濾液則進入步驟5)進行噴霧干燥，制得蛋白肽粉一T14。實施例15蛋白肽粉一T15將實施例4得到的經(jīng)滅酶的蛋白酶解液再經(jīng)30006000rpm離心1030分鐘除去渣質(zhì)，分出的上清液通過超濾膜過濾，過截止分子量蕓10000Da的超濾膜系統(tǒng)，將得到的濾液經(jīng)負壓真空濃縮到原體積的50%，膜上液回到酶解過程繼續(xù)酶解。濾液則進入步驟5)進行噴霧干燥，制得蛋白肽粉一T15。實施例1623蛋白肽粉一T16T23表4、蛋白肽粉蛋白肽粉制備方法酶解底物所用酶或菌種類T-16同實施例5豆粕果膠酶、纖維素酶、水解蛋白酶(Alcalase)T-17同實施例6菜籽粕木聚糖酶、纖維素酶、復(fù)合蛋白酶(Protamex)T-18同實施例7豆餅果膠酶、纖維素酶、風(fēng)味蛋白酶(Flavourzyme)T-19同實施例8棉籽粕木聚糖酶、纖維素酶、放線菌166T-20同實施例9大豆分離蛋白棲土曲霉3942T-21同實施例10大豆?jié)饪s蛋白黑曲霉3350T-22同實施例11花生餅粕木聚糖酶、纖維素酶、地衣型芽孢桿菌2709堿性蛋白酶T-23同實施例12葵花籽粕木聚糖酶、纖維素酶、地衣型芽孢桿菌2709堿性蛋白酶實施例24使用本發(fā)明方法制得的水解蛋白混合物作為飼料添加劑在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用為檢驗本發(fā)明產(chǎn)品的功效和在養(yǎng)豬業(yè)上的應(yīng)用效果，以及代替抗生素的可行性，試驗選取體重接近健康的24日齡斷奶仔豬(公母各半)36頭分為3個處理，每個處理(組)12重復(fù)，每個重復(fù)6頭豬，均為3公3母，試驗期21禾，試驗結(jié)果列于表5。三個處理如下所示空白對照組不添加任何添加劑，僅飼喂豬基礎(chǔ)日糧；抗生素對照組粉劑金霉素100mg/kg，均勻混合于基礎(chǔ)日糧中；蛋白肽組:使用實施例2的水解蛋白混合物一H2，用量300mg/kg作為飼料添加劑，均勻混合于基礎(chǔ)日糧。表5、水解蛋白混合物在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的使用效果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>從表3可以看出，添加了水解蛋白混合物的蛋白肽組，料肉比降低，仔豬腹瀉的發(fā)生率減少。實施例25本發(fā)明方法制得的的蛋白肽粉作為飼料添加劑對肉仔雞生產(chǎn)性能(增重速度和耗料)的影響將艾維茵肉仔雞分為3個組，每個組分成4個重復(fù)，每個重復(fù)20只雞，試期7周。處理組3飼喂實施例14的蛋白肽粉一T14作為飼料添加劑，試驗設(shè)計見表6。表6、肉雞飼養(yǎng)試驗設(shè)計<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>在1日齡雛雞入舍時和4周齡末(28日齡)、7周齡末(49日齡)分別稱重，并統(tǒng)計耗料量，計算04周和47周齡的死亡只數(shù)、增重、釆食量以及料肉比。結(jié)果見表7。表7、49日齡添加蛋白肽粉對肉仔雞生產(chǎn)性能的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注同列右肩標有不同字母表示差異顯著表7的數(shù)據(jù)表明，添加蛋白肽粉作為飼料添加劑可明顯提高肉雞的增重，也能提高飼料轉(zhuǎn)化效率，從而節(jié)約詞料開支，提高經(jīng)濟效實施例26使用本發(fā)明方法制得的水解蛋白混合物一H2作為詞料添加劑在蛋雞飼養(yǎng)中的應(yīng)用為檢驗水解蛋白混合物作為飼料添加劑在蛋雞上的使用效果和在畜牧業(yè)上的應(yīng)用前景，試驗選用羅曼蛋雞后期雞2000羽，分兩組，每組1000只蛋雞，喂以2種不同的日糧，即A組為空白對照組，B組每噸飼料添加800克的實施例2的水解蛋白混合物一H2作為飼料添加劑，試驗期2個月，結(jié)果列于表8。檢測指標為破蛋率(％)、產(chǎn)蛋率(％)、蛋重(克/個蛋)、死淘率(％)、伺料轉(zhuǎn)化效率(耗料g/kg蛋)。表8、水解蛋白混合物在蛋雞飼養(yǎng)中的應(yīng)用<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>料蛋比(F/E)2.68±0.252.61±0,42<0.05破蛋率(％)3.07±0.432.21±0.24<0.05死淘率％1.51逸260.80士0.28<0.05蛋重(g)64.71±0.5866.75±0.51<0.05從表7可以看出，在蛋雞飼料中添加水解蛋白混合物作為飼料添加劑可明顯提高蛋禽產(chǎn)蛋率、增加蛋重、降低料蛋比、破蛋率，降低死淘率，從而提高飼料利用率、生產(chǎn)性能和降低生產(chǎn)成本。實施例27蛋白肽粉一T14飼喂水產(chǎn)動物的效果試驗魚平均體重100g,試驗在室內(nèi)水簇箱中進行。試驗期間水質(zhì)參數(shù)水溫25土10。C，溶氧57mg/L，pH6.87.5、氨態(tài)氮小于0.2mg/L。試驗2個處理，分為對照組和試驗組，每個處理三個水簇箱(三個重復(fù))，每個水簇箱10尾魚，試驗設(shè)計及結(jié)果如表8。試驗魚先預(yù)試驗20天后，隨機分到2個組中，轉(zhuǎn)入正式試驗期。試驗期，基礎(chǔ)日糧配方為高松(1980)、Takeuchi(1980)等推薦水平，試驗組在基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)上飼喂實施例14的蛋白肽粉一T14作為飼料添加劑，添加量為500g/t料，每天投餌3次，上午8:0()，中午1:00，下午6:00，投餌量為魚重的35%，試驗期50天。表9、羅非魚生產(chǎn)性能指標和腸道黏度變化檢測指標對照組試驗組P平均增重56.10±1.4875.57±2.39<0.05餌料系數(shù)2.79±0.062.13±0.04<0.05相對黏度1.197±0.051.027±0.02<0.05通過該試驗說明，蛋白肽粉作為飼料添加劑不僅可以提高水產(chǎn)動物的生產(chǎn)性能，而且可以減少其腸道的粘度。權(quán)利要求1、一種新型蛋白飼料添加劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟1)原料預(yù)處理將酶解底物粉碎到40～100目，放入酶解罐中，加入水，所加入水的重量與酶解底物所含蛋白質(zhì)的重量配比為100∶5～18，攪拌，調(diào)pH至7～9，30～37℃條件下浸泡0.5～1小時，然后，80～100℃下滅菌10～20分鐘，后降溫到50～60℃；2)復(fù)合酶的酶解處理向步驟1)得到的預(yù)處理過的原料中，依次加入非淀粉多糖酶(NSP酶)、蛋白酶進行水解，溫度45～60℃，pH自然，酶解6～14h，至水解度(DH％)20～42％時停止反應(yīng)；3)滅酶將步驟2)得到的酶解處理后的液體于90～120℃滅酶15～30分鐘，流出液即為蛋白酶解液；4)濃縮將步驟3)得到的蛋白酶解液，濃縮至含固量15～35％，得濃縮液；5)噴霧干燥將步驟4)的濃縮液經(jīng)高壓泵打入壓力式噴霧干燥塔，進風(fēng)170～190℃，排風(fēng)70～85℃，塔內(nèi)溫度100～110℃，進行噴霧干燥，得到水解蛋白混合物。2、如權(quán)利要求l所述的新型蛋白詞料添加劑的制備方法，其特征在于所述的酶解底物為下述植物蛋白大豆分離蛋白、大豆?jié)饪s蛋白、豆粕、豆餅、棉籽餅粕、菜籽餅粕、葵花籽餅粕、花生餅粕中的任一種、兩種或多種的混合物。3、如權(quán)利要求l所述的新型蛋白飼料添加劑的制備方法，其特征在于所述的非淀粉多糖酶為果膠酶、纖維素酶、木聚糖酶中的任一種、兩種或多種；所述的蛋白酶為中性蛋白酶和/或堿性蛋白酶，蛋白酶可以為下述菌枯草桿菌1398、放線菌166、棲土曲霉3942、黑曲霉3350和/或地衣型芽孢桿菌2709產(chǎn)生的蛋白酶及水解蛋白酶(Alcalase)、風(fēng)味蛋白酶(Flavourzyme)、復(fù)合蛋白酶(Protamex)中的任一種、兩種或多種。4、如權(quán)利要求3所述的新型蛋白詞料添加劑的制備方法，其特征在于所述果膠酶、纖維素酶、木聚糖酶和蛋白酶的添加量為果膠酶，03000U/g蛋白；纖維素酶，02000U/g蛋白；木聚糖酶，04000U/g蛋白；蛋白酶，100010000U/g蛋白。5、如權(quán)利要求l所述的新型蛋白飼料添加劑的制備方法，其特征在于進一步包括下述步驟蛋白肽的制備將步驟3)得到的蛋白酶解液在30006000卬m下離心1030分鐘，分出的上清液通過超濾膜過濾，過截止分子量^10000Da的超濾膜系統(tǒng)，得到的濾液經(jīng)負壓真空濃縮到原體積的50%,再進入步驟5)進行噴霧干燥，制得蛋白肽粉。全文摘要本發(fā)明涉及一種水解蛋白混合物及蛋白肽粉飼料添加劑的制備方法，該方法用多酶復(fù)合的酶法水解植物蛋白制備水解蛋白混合物及蛋白肽粉，其工藝簡單，非淀粉多糖酶與蛋白酶的復(fù)配，可提高蛋白質(zhì)水解速度和水解程度，提高飼料利用率，降低生產(chǎn)成本。通過本制備方法制得的產(chǎn)品作為飼料添加劑使用可明顯提高蛋禽的產(chǎn)蛋率；提高肉禽的增重，降低料肉比，提高肉雞生產(chǎn)性能；還可降低幼齡動物腹瀉的發(fā)生率、降低仔豬料肉比；用于水產(chǎn)動物，可以提高魚的增重，降低餌料系數(shù)，降低腸道內(nèi)容物黏度。文檔編號A23K1/16GK101530162SQ200810101609公開日2009年9月16日申請日期2008年3月10日優(yōu)先權(quán)日2008年3月10日發(fā)明者宇劉,琨姚,孫占敏,張玳華,白玉卿,賈秋英,軍趙,趙雁青申請人:北京大北農(nóng)科技集團股份有限公司