專利名稱：：大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法。尤其涉及一種含枯草芽胞桿菌r^"7/wm6"7/WBS2-5、BS6、BS8-3菌的防治大棚農(nóng)作物病害的生物拮抗菌劑，以及將該生物拮抗菌劑和生化黃腐酸菌肥復(fù)合使用一種大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法。
背景技術(shù)：
：本發(fā)明中"大棚農(nóng)作物"是指在大棚中栽培的蔬菜、瓜果、花弁等。近年來(lái)，隨著農(nóng)業(yè)栽培技術(shù)的改進(jìn)，在蔬菜、瓜果的反季節(jié)生產(chǎn)中，作為我國(guó)傳統(tǒng)的蔬菜、瓜果類主要品種，大多以大棚栽培為主。大棚中由于溫度、濕度高，所以大棚農(nóng)作物栽培中蟲害較少，但病害發(fā)生種類多且危害嚴(yán)重，普遍發(fā)生的病害有霜霉病、白粉病、枯萎病、炭疽病、蔓枯病、細(xì)菌性角斑病、灰霉病。目前，防治病害的手段主要是潑灑化學(xué)殺菌劑。農(nóng)戶通常使用的化學(xué)殺菌劑主要有殺毒礬、速克靈、甲基托布津、多菌靈、農(nóng)用鏈霉素、代森錳鋅、百菌清、普力克等。大棚農(nóng)作物栽培中，蔬菜生長(zhǎng)期和瓜果坐果期是病害發(fā)生的高發(fā)期，病害發(fā)生具有頻率高、范圍廣、種類多、程度嚴(yán)重的特點(diǎn)，為防治病害，目前釆用的辦法通常是平均每3~7天噴施農(nóng)藥一次?；瘜W(xué)農(nóng)藥的大量使用，不但污染了人類賴以生存的自然生態(tài)環(huán)境，減緩了農(nóng)作物的生長(zhǎng)，在農(nóng)產(chǎn)品中殘留的化學(xué)農(nóng)藥，也極大危害著人們的身體健康。因此，無(wú)公害、綠色安全的農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)技術(shù)越來(lái)越受到人們的重視。生物防治技術(shù)的原理主要是利用各種有益的微生物，通過(guò)生物間的竟3爭(zhēng)作用、拮抗作用、重寄生作用、交叉保護(hù)作用及誘發(fā)植物抗病性等，來(lái)抑制某些病害的繁殖和活動(dòng)，為植物提供一個(gè)良好的生長(zhǎng)環(huán)境，增加植物自身的抗病性，能使植物避免病原菌的侵染與擴(kuò)散，抑制病害對(duì)植物產(chǎn)生的危害。生物防治技術(shù)對(duì)人畜安全，不污染生態(tài)環(huán)境，不產(chǎn)生抗藥性，僅殺傷或抑制防治對(duì)象，既能參與生態(tài)環(huán)境的調(diào)控，保持大自然生態(tài)平衡，起到長(zhǎng)效抗菌的作用。又能降低農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)成本。本發(fā)明中"生化黃腐酸菌肥"是指根據(jù)本人在2006年12月11日申請(qǐng)的申請(qǐng)?zhí)?00610162041.6發(fā)明專利，利用果渣、各類農(nóng)作物秸稈、牲畜糞便、粉渣等各類農(nóng)副產(chǎn)品加工廢料為原料，經(jīng)微生物多菌種固體一半固體混合發(fā)酵后，所生產(chǎn)的液體生化黃腐酸菌肥、半固體生化黃腐酸菌肥和固體生化黃腐酸菌肥的統(tǒng)稱，也包括利用其他方法生產(chǎn)的生化黃腐酸及生化黃腐酸類菌肥。生化黃腐酸(BFA)是微生物發(fā)酵而生成，是一種成份極為復(fù)雜的混合物，其中含有大量對(duì)植物生長(zhǎng)過(guò)程有影響的酶類、氨基酸、維生素和微量元素等生物活性物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)成份，對(duì)促進(jìn)植物生長(zhǎng)、發(fā)育有顯著功效。BFA具有良好的水溶性，在土壤中能通過(guò)絡(luò)合、螯合、吸附作用增強(qiáng)土壤的緩沖能力，提高土壤的保肥、保水能力，提高土壤的透氣性和土壤微生物的活性，增加有效菌群數(shù)量來(lái)達(dá)到改良土壤的效果。BFA是目前發(fā)現(xiàn)的最有效地調(diào)節(jié)葉面氣孔開張度的物質(zhì)，它可以縮小葉面氣孔開張度，減少水分蒸騰，使植株和土壤保持較多的水分，同時(shí)促進(jìn)根系發(fā)育生長(zhǎng)，提高根系活力使農(nóng)作物吸收較多的水分和養(yǎng)料，二者相輔相成，開源節(jié)流，達(dá)到提高農(nóng)作物抗旱節(jié)水能力的目的。BFA是一種良好的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，具有較強(qiáng)的離子結(jié)合能力，可顯著提高植物對(duì)微量元素的吸收與運(yùn)轉(zhuǎn)能力。生化黃腐酸具有相當(dāng)明顯的五大特點(diǎn)一是生化黃腐酸分子量小，滲透能力強(qiáng)，容易被生物吸收利用；二是水溶性好，抗硬水能力強(qiáng)，不絮凝，不沉淀，使用方便；三是活性基團(tuán)含量高，生理活性大，對(duì)金屬離子絡(luò)合、螯合能力強(qiáng)；四是飽和溶解度大，與微量元素有良好的相溶性；五是不含重金屬與其它有害物質(zhì)。其獨(dú)有的五大特點(diǎn)，對(duì)植物生長(zhǎng)具有極大的生物活性，能明顯提高植物的免疫功能和抗逆性能，達(dá)到防治病蟲害的作用，改善土地鹽堿化程度。因此生化黃腐酸是廣泛應(yīng)用于各類農(nóng)作物的最佳營(yíng)養(yǎng)供給體。本發(fā)明中防治大棚農(nóng)作物病害的"生物拮抗菌劑"是指包括枯草芽胞桿菌0aC27/M卯6〃/2'W,含有枯草芽胞桿菌(S3C27/MM6"'7/WBS2-5、BS6、BS8-3菌。將枯草芽胞桿菌0<3"'7/"5T/W/"^BS2-5、BS6、BS8-3菌分別經(jīng)過(guò)一系列工藝培養(yǎng)，三種菌按一定比例混合后，再接入發(fā)酵罐液體培養(yǎng)，即可獲得生產(chǎn)用生物拮抗菌劑。生產(chǎn)用生物拮抗菌劑具有對(duì)各類植物病害病原菌廣譜抗性。本發(fā)明通過(guò)生物拮抗菌劑、生化黃腐酸菌肥兩者復(fù)合施用，能夠最大限度的彌補(bǔ)各自使用上的不足，充分發(fā)揮兩者的優(yōu)勢(shì)，是抑制、殺滅農(nóng)作物病原菌的有益微生物菌群，以替代化學(xué)農(nóng)藥防治農(nóng)作物病害，減少化肥使用的作用，達(dá)到農(nóng)產(chǎn)品綠色安全生產(chǎn)的目的。本發(fā)明中"生化黃腐酸葉面肥"是指本發(fā)明利用本人申請(qǐng)?zhí)?00610162041.6的發(fā)明專利方法所生產(chǎn)的液體生化黃腐酸菌肥，根據(jù)各類農(nóng)作物不同生長(zhǎng)階段的營(yíng)養(yǎng)需求，復(fù)配氮肥、磷肥、鉀肥各類營(yíng)養(yǎng)元素或者添加常量元素或微量元素，配成的生化黃腐酸葉面肥。本發(fā)明中"生化黃腐酸沖施肥"是指利用本人申請(qǐng)?zhí)?00610162041.6的發(fā)明專利方法所生產(chǎn)的半固體生化黃腐酸菌肥，經(jīng)過(guò)打漿機(jī)打漿后，根據(jù)各類農(nóng)作物的不同營(yíng)養(yǎng)需求，復(fù)配氮肥、磷肥、鉀肥各類營(yíng)養(yǎng)元素或者添加常量元素或稀有微量元素，配成的生化黃腐酸沖施肥。運(yùn)用生態(tài)學(xué)原理建設(shè)高效生態(tài)農(nóng)業(yè)模式產(chǎn)業(yè)化系統(tǒng)工程是我國(guó)現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)發(fā)展的方向。這種高效生態(tài)農(nóng)業(yè)能夠較好的解決種植業(yè)及其廢棄物的綜合利用，使其有機(jī)地綜合起來(lái)形成生物鏈，大大提高種植業(yè)的產(chǎn)品產(chǎn)量和質(zhì)量，保持生態(tài)環(huán)境友好，并帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。5經(jīng)檢索未發(fā)現(xiàn)與本人發(fā)明相同的已有技術(shù)和專利發(fā)明。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種防治大棚農(nóng)作物病害的生物拮抗菌劑和一種大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法，通過(guò)篩選、培養(yǎng)生產(chǎn)用生物拮抗菌劑，配合生化黃腐酸菌肥施用，充分發(fā)揮兩者復(fù)合使用的優(yōu)勢(shì)，抑制、殺滅農(nóng)作物病原菌，以替代化學(xué)農(nóng)藥防治農(nóng)作物病害，減少化肥使用，達(dá)到農(nóng)產(chǎn)品綠色安全生產(chǎn)。本發(fā)明是釆用以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的1.防治大棚農(nóng)作物病害的生物拮抗菌劑，包括枯草芽胞桿菌0ac/W^^^27/^,其特征在于含枯草芽胞桿菌^3c/77^w力07/WBS2-5、BS6、BS8-3菌。生物拮抗菌劑的生產(chǎn)工藝如下(1)樣品釆集從自然界和已有各類植物病害的環(huán)境中釆集患病植物、土壤等可能存在相應(yīng)拮抗病害微生物的樣品，選育到多株植物病害病原菌優(yōu)勢(shì)拮抗菌株；(2)經(jīng)分離、純化、鑒定后確認(rèn)均為枯草芽孢桿菌，經(jīng)過(guò)激光誘變等技術(shù)手段，初步選育得到有效生物防治枯草芽孢桿菌菌株BS2-5、BS6、BS8-3，經(jīng)病原菌拮抗試驗(yàn)，BS2-5、BS6、BS8-3菌株對(duì)蘋果褐斑病病菌抑菌圈直徑分別為1.3cm、1.65cm和1.46cm,而此三種菌株按1:1:1的比例配制的拮抗微生物菌劑比單一菌株拮抗菌作用增強(qiáng)，抑菌圈直徑為2.25cm;(3)樣品分離將所采集的樣品按常規(guī)微生物分離鑒定的方法進(jìn)行稀釋、培養(yǎng)、分離、鑒定；(4)拮抗微生物菌的初篩將所分離的菌種按常規(guī)拮抗微生物菌的篩選方法進(jìn)行植物病害菌抑菌試驗(yàn)，選擇抑菌范圍及抑菌圈較大的菌株作為初篩菌株保存；(5)初篩菌誘變?yōu)榱诉M(jìn)一步提高初篩菌株的抑菌范圍和抑菌能力，釆用常規(guī)激光誘變微生物的方法對(duì)初篩菌株進(jìn)行誘變處理，處理后按上述(3)、(4)的方法進(jìn)行檢驗(yàn)篩選，最后對(duì)抑菌范圍及抑菌圈較大的菌株進(jìn)行分類鑒定?？莶菅挎邨U菌經(jīng)過(guò)激光誘變等技術(shù)手段得到有效生物防治枯草芽孢桿菌菌株BS2-5、BS6、BS8-3,對(duì)蘋果輪紋病、灰斑病、蘋果樹皮腐爛病、斑點(diǎn)落葉病病原菌、番茄早疫病菌、番茄灰霉病、番某葉霉病菌、赤霉病菌、刺盤孢菌、黃瓜霜霉病、黃瓜枯萎病菌、棉枯萎病菌、玉米白僵菌、蘋果白僵菌、蘋果干腐菌、煙草赤星菌、甜瓜白粉病、甜瓜細(xì)菌性斑點(diǎn)病等病原菌均有較強(qiáng)的抑菌作用，證明了此三種菌具有對(duì)各類植物病害病原菌廣譜抗性。將枯草芽胞桿菌^3"7/m卯6〃/i'WBS2-5、BS6、BS8-3分別經(jīng)試管培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)后，根據(jù)所選育的拮抗菌株對(duì)各種植物病害的防治作用，確定拮抗菌劑中各菌株的混合比例為1~3:1~2:1~2,按體積比例10%的接種量接入發(fā)酵罐液體培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25~35°C，培養(yǎng)時(shí)間為24-72小株時(shí)，培養(yǎng)成生產(chǎn)用高濃度菌體菌懸液，當(dāng)活菌數(shù)為>10"個(gè)/ml，即可作為生產(chǎn)用生物拮抗菌劑。生物拮抗菌劑的樣品釆集、分離、培養(yǎng)、誘變、測(cè)試、鑒定過(guò)程所采用的方法，均為所述微生物常規(guī)釆用的技術(shù)方法。試管培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵罐培養(yǎng)、擴(kuò)大培養(yǎng)等培養(yǎng)方法中所用的各培養(yǎng)基都是已知的適合培養(yǎng)所述微生物的常規(guī)培養(yǎng)基。培養(yǎng)方法是已知的適合培養(yǎng)所述微生物菌的常規(guī)培養(yǎng)工藝。2.在大棚農(nóng)作物生長(zhǎng)中使用生物拮抗菌劑和生化黃腐酸菌肥。3.在大棚農(nóng)作物生長(zhǎng)中施用生產(chǎn)用生物拮抗菌劑，根據(jù)農(nóng)作物生長(zhǎng)階段的需求，每一次施用生物拮抗菌劑用量0.5-5公斤/畝，加水稀釋50-500倍，自農(nóng)作物苗移栽后開始，每隔15-30天在植物葉面噴施生物拮抗菌劑一次。4.每次液體生化黃腐酸菌肥使用量0.5-5.0公斤/畝，加水稀釋100-500倍，根據(jù)各類農(nóng)作物不同生長(zhǎng)階段的營(yíng)養(yǎng)需求，復(fù)配氮肥、磷肥、鉀肥各類營(yíng)養(yǎng)元素或者添加常量元素或微量元素，配成生化黃腐酸葉面肥，自農(nóng)作物苗移栽后開始，每隔15-30天在植物葉面噴施一次；5.每次半固體生化黃腐酸菌肥使用量5-50公斤/畝，經(jīng)打漿機(jī)打漿后，加水稀釋100-500倍，可根據(jù)各類農(nóng)作物不同生長(zhǎng)期的營(yíng)養(yǎng)需求，復(fù)配氮肥、磷肥、鉀肥各類營(yíng)養(yǎng)元素或者添加常量元素或稀有微量元素，配成生化黃腐酸沖施肥，自農(nóng)作物苗移栽后開始，每隔15-30天在植物根部沖施或根灌一次；6.生化黃腐酸復(fù)配營(yíng)養(yǎng)元素的生產(chǎn)工藝按本人申請(qǐng)?zhí)?00610162041.6的發(fā)明專利方法所生產(chǎn)的液體生化黃腐酸菌肥，根據(jù)各類農(nóng)作物不同生長(zhǎng)階段的營(yíng)養(yǎng)需求，復(fù)配氮肥、磷肥、鉀肥各類營(yíng)養(yǎng)元素或者添加常量元素或微量元素，配成不同農(nóng)作物不同生長(zhǎng)階段專用生化黃腐酸葉面肥。按本人申請(qǐng)?zhí)?00610162041.6的發(fā)明專利方法所生產(chǎn)的半固體生化黃腐酸菌肥，經(jīng)過(guò)打漿機(jī)打漿后，可根據(jù)各類農(nóng)作物的不同營(yíng)養(yǎng)需求，復(fù)配氮肥、磷肥、鉀肥各類營(yíng)養(yǎng)元素或者添加常量元素或稀有微量元素，配成不同農(nóng)作物專用生化黃腐酸沖施肥。本發(fā)明所用菌種都是已知的菌種，可通過(guò)已知篩選、商業(yè)手段或其他途徑得到。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于1.通過(guò)對(duì)大棚農(nóng)作物的葉面和土壤環(huán)境中施用生物拮抗菌劑和生化黃腐酸菌肥，抑制和殺滅農(nóng)作物和環(huán)境中各類病原微生物，并提供農(nóng)作物生長(zhǎng)所需要的各類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)植物生長(zhǎng)并提高植物的抗病能力，達(dá)到完全替代化學(xué)農(nóng)藥，減少或取代化學(xué)肥料，實(shí)現(xiàn)無(wú)公害、綠色安全的農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)過(guò)程。2.釆用現(xiàn)代先進(jìn)的菌種選育技術(shù)，選育出了高效廣譜抗多種植物病害的枯草芽胞桿菌BS2-5、BS6、BS8-3拮抗菌株。3.根據(jù)所選育的拮抗菌株對(duì)各種植物病害防治作用，確定生產(chǎn)用生物拮抗菌劑中各菌種的配比，通過(guò)發(fā)酵工藝，使生產(chǎn)用拮抗菌劑中活菌數(shù)為>10°個(gè)/ml。4、研究出了生化黃腐酸菌肥與氮肥、磷肥、鉀肥各類營(yíng)養(yǎng)元素或者添加常量元素或稀有微量元素，針對(duì)不同類型農(nóng)作物的專用肥進(jìn)行科學(xué)復(fù)配，使兩類生物質(zhì)肥能夠有機(jī)結(jié)合，協(xié)同發(fā)揮效應(yīng)。5、由于釆用價(jià)廉的生化黃腐酸菌肥，先進(jìn)的篩選工藝篩選的優(yōu)良生物菌劑，科學(xué)的配方，大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法同目前釆用的方法相比，生產(chǎn)成本大幅度下降，抗病效果則極為顯著。具體實(shí)施例方式實(shí)施例中，實(shí)驗(yàn)組是指釆取本專利方法進(jìn)行生產(chǎn)的田地；對(duì)照組是指用原生產(chǎn)方法進(jìn)行生產(chǎn)的田地。實(shí)施例I:陜西富平、閻良、蒲城三地歷史上就有種植甜瓜的習(xí)慣，近十年來(lái)由于巿場(chǎng)的拉動(dòng)，甜瓜種植面積不斷擴(kuò)大，目前面積已達(dá)十萬(wàn)畝，成為全國(guó)最大的甜瓜生產(chǎn)基地，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷國(guó)內(nèi)各大城巿。栽培設(shè)施以大弓棚和中棚為主，個(gè)別有日光溫室。每年3月初定植，5月初成熟銷售，畝產(chǎn)值6000-10000元。大棚甜瓜栽培中病害發(fā)生種類多且危害嚴(yán)重。2008年由于雨水豐沛，大棚中溫度、濕度高，病害嚴(yán)重，普遍發(fā)生的病害有炭疽病、蔓枯病、細(xì)菌性角斑病、灰霉病。農(nóng)戶使用的化學(xué)殺菌劑有甲基托布津、多菌靈、農(nóng)用鏈霉素、代森錳鋅、百菌清、普力克。針對(duì)病害的多樣性及嚴(yán)重性，為了防治病害，平均每37天噴施農(nóng)藥一次。1、實(shí)驗(yàn)條件(1)實(shí)驗(yàn)時(shí)間及地點(diǎn)2008年3月下甸一5月下旬陜西省富平縣張橋鎮(zhèn)馥玉香甜瓜專業(yè)合作社(2)甜瓜主栽品種千玉一號(hào)、蜜霸208、玉金香(3)栽培設(shè)施大弓棚，跨度6米，長(zhǎng)200300米，陽(yáng)畦栽培，中間定植(4)實(shí)驗(yàn)溫度和濕度定植初期棚內(nèi)溫度12-3(TC，生長(zhǎng)中后期棚內(nèi)溫度25-4(TC，相對(duì)濕度70~95%。(5)施肥實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組底肥均以雞糞和尿素、二銨、復(fù)混肥為主，(大多農(nóng)戶的雞糞未能腐熟)對(duì)照組果實(shí)膨大期沖施三次尿素，每次10公斤/畝。實(shí)驗(yàn)組施用兩次生化黃腐酸葉面肥，每次O.5公斤/畝；兩次生化黃腐酸沖施肥，每次10公斤/畝。(6)病害防治實(shí)驗(yàn)組使用生產(chǎn)用生物拮抗菌劑兩次，每次0.5公斤/畝；對(duì)照組使用化學(xué)農(nóng)藥甲基托布津、多菌靈、農(nóng)用鏈霉素、代森錳鋅、百菌清、普力克，3-7天噴藥一次，共噴藥5~8次。(7)田間管理實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均按常規(guī)管理進(jìn)行管理。2、實(shí)驗(yàn)方法A、實(shí)驗(yàn)分別在21家農(nóng)戶早期、中期、晚期大棚甜瓜進(jìn)行，共計(jì)109畝。釆用相鄰正常使用化肥和農(nóng)藥的大棚甜瓜作為對(duì)照。實(shí)驗(yàn)甜瓜早期、中期、晚期的畝數(shù)及農(nóng)戶的信息<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>B、將枯草芽胞桿菌^3"7/mw6〃7/WBS2-5、BS6、BS8-3分別經(jīng)試管培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)后，按l:1:l的比例混合，按體積比例10%的接種量接入發(fā)酵罐液體培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25~35°C,培養(yǎng)時(shí)間為24-72小時(shí)，培養(yǎng)成生產(chǎn)用高濃度菌體菌懸液，當(dāng)活菌數(shù)為》l(T個(gè)/ml，即可作為生產(chǎn)用生物拮抗菌劑。C、實(shí)驗(yàn)組生產(chǎn)用生物拮抗菌劑及生化黃腐酸菌肥使用量及使用方法實(shí)驗(yàn)組自2008年3月上甸甜瓜苗移栽后，分別于3月20日至4月20曰期間，共噴施兩次生產(chǎn)用生物拮抗菌劑、兩次生化黃腐酸菌葉面肥、兩次生化黃腐酸菌沖施肥。實(shí)驗(yàn)組每次使用生產(chǎn)用生物拮抗菌劑0.5~1公斤/畝，稀釋50倍后噴施葉面；每次使用液體生化黃腐酸菌肥0.5-1公斤/畝，稀釋200倍后添加鉀、鈣、鐵、磷、硒等常量、微量元素和磷、鉀肥復(fù)配成生化黃腐酸葉面肥，噴施葉面；每次使用半固體生化黃腐酸菌肥10公斤/畝，經(jīng)過(guò)打漿機(jī)打漿后，稀釋500倍添加鉀、鈣、鐵、磷等常量元素與微量元素和磷、鉀肥復(fù)配成生化黃腐酸沖施肥，灌溉使用。實(shí)驗(yàn)中為保證生產(chǎn)用生物拮抗菌劑和葉面肥在植物葉面充分吸收，生產(chǎn)用生物拮抗菌劑、生化黃腐酸葉面肥和生化黃腐酸沖施肥，在生產(chǎn)中間隔交替使用。D、對(duì)照組農(nóng)藥使用種類及施用次數(shù)對(duì)照組自2008年3月上旬甜瓜苗移栽后，根據(jù)病害發(fā)生情況，種植戶主要噴施各類化學(xué)殺菌劑防治甜瓜侵染性病害，主要是以下六種甲基托布津、多菌靈、農(nóng)用鏈霉素、代森錳鋅、百菌清、普力克。平均3-7天用藥一次，共用藥58次。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果A、甜瓜葉片葉綠素含量對(duì)比實(shí)驗(yàn)組的甜瓜葉片在整個(gè)種植期間，用葉綠素測(cè)定儀檢測(cè)不同部位葉片的葉綠素含量在50-70之間，平均62;對(duì)照組不同部位葉片的葉綠素含量在3850之間，平均45。實(shí)驗(yàn)組葉綠素含量比對(duì)照組高30%左右。B、甜瓜葉片拮抗微生物數(shù)量檢測(cè)釆用稀釋平板培養(yǎng)法進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組甜瓜葉片有效拮抗活菌數(shù)10lfl個(gè)/cm2。對(duì)照組未檢測(cè)出有效拮抗菌。C、土壤環(huán)境中有益微生物數(shù)量檢測(cè)釆用稀釋平板培養(yǎng)法進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組土壤中有益微生物活菌數(shù)》1011個(gè)/g。對(duì)照組土壤中有益微生物活菌數(shù)107個(gè)/g。D、甜瓜長(zhǎng)勢(shì)實(shí)驗(yàn)組葉片明顯厚、大、綠，生長(zhǎng)旺盛，實(shí)驗(yàn)組早期瓜棚由于噴施時(shí)間較晚，出現(xiàn)個(gè)別病害，但仍少于對(duì)照組。中后期瓜棚未見有明顯病害產(chǎn)生。對(duì)照組病害普遍明顯比往年增多，農(nóng)藥使用量較大，個(gè)別農(nóng)戶甚至灌澆高錳酸鉀殺菌，長(zhǎng)勢(shì)明顯差于實(shí)驗(yàn)組。E、果實(shí)品質(zhì)對(duì)比實(shí)驗(yàn)組甜瓜大小基本一致、表面光潔無(wú)斑點(diǎn)、果肉色澤金黃、香甜，實(shí)驗(yàn)組甜度高于對(duì)照組2~3%，，口味明顯優(yōu)于對(duì)照組。F、產(chǎn)量對(duì)比實(shí)驗(yàn)組畝產(chǎn)約6000-8000斤，對(duì)照組畝產(chǎn)4000-5000斤，平均增產(chǎn)50%。G、種植成本實(shí)驗(yàn)組菌肥成本平均400元左右/畝，對(duì)照組農(nóng)藥肥成本平均為700元左右/畝。實(shí)驗(yàn)表明大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法對(duì)綜合防治甜瓜病害效果好，明顯促進(jìn)甜瓜的生長(zhǎng)和增產(chǎn)，使用方便簡(jiǎn)單，成本低廉，所生產(chǎn)的甜瓜品質(zhì)好、售價(jià)高、真正的綠色無(wú)公害產(chǎn)品，農(nóng)戶每畝增收千元以上，受到農(nóng)戶和巿場(chǎng)經(jīng)銷商廣泛歡迎。實(shí)施例n:近十年來(lái)由于巿場(chǎng)的拉動(dòng)，大棚黃瓜種植面積不斷擴(kuò)大，目前陜西渭南地區(qū)種植面積已達(dá)數(shù)萬(wàn)畝，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷國(guó)內(nèi)各大城巿。栽培設(shè)施以大弓棚和中棚為主，個(gè)別有日光溫室。大棚黃瓜栽培中蟲害較少，但病害發(fā)生種類多且危害嚴(yán)重。2008年由于雨水豐沛，大棚中溫度、濕度高，病害嚴(yán)重，普遍發(fā)生的病害有霜霉病、焦斑病、白粉病、炭疽病、蔓枯病、細(xì)菌性角斑病、灰霉病。農(nóng)戶通常使用的化學(xué)殺菌劑有6種殺毒礬、速克靈、甲基托布津、多菌靈、代森錳鋅、百菌清、普力克。針對(duì)病害的多樣性及嚴(yán)重性，為了防治病害，平均每3-7天噴施農(nóng)藥一次。1、實(shí)驗(yàn)條件(1)實(shí)驗(yàn)時(shí)間及地點(diǎn)2008年2月下旬一4月下旬陜西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院渭南蔬菜實(shí)驗(yàn)基地(2)栽培設(shè)施大弓棚，跨度6米，長(zhǎng)200300米，陽(yáng)畦栽培，中間定植(3)實(shí)驗(yàn)溫度和濕度初期棚內(nèi)溫度12~30°C,生長(zhǎng)中后期棚內(nèi)溫度25~35°C，相對(duì)濕度70~95%,雨天濕度較高。(4)施肥實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組底肥均以雞糞和尿素、二銨、復(fù)混肥為主，對(duì)照組果實(shí)膨大期沖施三次尿素，每次20公斤/畝。實(shí)驗(yàn)組使用兩次生化黃腐酸葉面肥，每次l公斤/畝；兩次生化黃腐酸沖施肥，每次10公斤/畝。(5)病害防治實(shí)驗(yàn)組使用生產(chǎn)用生物拮抗菌劑兩次，每次l公斤/畝；對(duì)照組使用化學(xué)農(nóng)藥殺毒礬、速克靈、甲基托布津、多菌靈、代森錳鋅、百菌清、普力克，3-7天噴藥一次。(6)田間管理實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均按常規(guī)管理進(jìn)行管理。2、實(shí)驗(yàn)方法A、實(shí)驗(yàn)分別在該基地早期、中期、晚期黃瓜種植大棚中進(jìn)行，共計(jì)25畝。采用相鄰正常使用農(nóng)藥和化肥的黃瓜種植大棚作為對(duì)照。B、將枯草芽胞桿菌0ac27/Mw6〃/2'WBS2-5、BS6、BS8-3分別經(jīng)試管培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)后，按2:1:l的比例混合，按體積比例10%的接種量接入發(fā)酵罐液體培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25~35°C，培養(yǎng)時(shí)間為24~72小時(shí)，培養(yǎng)成生產(chǎn)用高濃度菌體菌懸液，當(dāng)活菌數(shù)為》10"個(gè)/ml，即可作為生產(chǎn)用生物拮抗菌劑。C、實(shí)驗(yàn)組生產(chǎn)用生物拮抗菌劑及生化黃腐酸菌肥使用量及使用方法2月下甸黃瓜苗移栽后，分別于3月初至4月下甸期間，共噴施兩次生產(chǎn)用生物拮抗菌劑、兩次生化黃腐酸菌葉面肥、兩次生化黃腐酸菌沖施肥。實(shí)驗(yàn)組每次使用生產(chǎn)用生物拮抗菌劑l公斤/畝，稀釋100倍后噴施葉面；每次使用液體生化黃腐酸菌肥l公斤/畝，稀釋200倍后添加鉀、鈣、鐵、磷、硒等常量、微量元素和磷、鉀肥復(fù)配成生化黃腐酸葉面肥，噴施葉面；每次使用半固體生化黃腐酸菌肥10公斤/畝，經(jīng)過(guò)打漿機(jī)打漿后，稀釋500倍添加鉀、鈣、鐵、磷等常量元素與微量元素和磷、鉀肥復(fù)配成生化黃腐酸沖施肥，灌溉施用。實(shí)驗(yàn)中為保證生產(chǎn)用生物拮抗菌劑和葉面肥在植物葉面充分吸收，生產(chǎn)用生物拮抗菌劑、生化黃腐酸葉面肥和生化黃腐酸沖施肥，在生產(chǎn)中間隔交替使用。D、對(duì)照組農(nóng)藥使用種類及施用次數(shù)對(duì)照組根據(jù)病害發(fā)生情況，主要噴施各類化學(xué)殺菌劑防治黃瓜侵染性病害，主要是以下七種殺毒礬、速克靈、甲基托布津、多菌靈、代森錳鋅、百菌清、普力克。平均37天用藥一次，共用藥58次。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果A、黃瓜葉片葉綠素含量對(duì)比噴施了生產(chǎn)用生物拮抗菌劑和生化黃腐酸菌肥的黃瓜葉片在整個(gè)生長(zhǎng)期內(nèi)，用葉綠素測(cè)定儀檢測(cè)不同部位葉片的葉綠素含量在54-70之間，平均61;對(duì)照組不同部位葉片的葉綠素含量在38-50之間，平均43。B、黃瓜葉片拮抗微生物數(shù)量檢測(cè)釆用稀釋平板培養(yǎng)法進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組黃瓜葉片有效拮抗活菌數(shù)^1(T個(gè)/cm2。對(duì)照組未檢測(cè)出有效拮抗菌。C、土壤環(huán)境中有益微生物數(shù)量檢測(cè)釆用稀釋平板培養(yǎng)法進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組土壤中有益微生物活菌數(shù)>1012個(gè)/g。對(duì)照組土壤中有益微生物活菌數(shù)108個(gè)/g。D、黃瓜長(zhǎng)勢(shì)實(shí)驗(yàn)組葉片明顯厚、大、綠，生長(zhǎng)旺盛，在整個(gè)生長(zhǎng)期內(nèi)大棚未見有明顯病害產(chǎn)生。對(duì)照組大棚病害普遍明顯，農(nóng)藥使用量較大，長(zhǎng)勢(shì)明顯差于實(shí)驗(yàn)組。E、產(chǎn)量對(duì)比實(shí)驗(yàn)組畝產(chǎn)約8000-10000斤，對(duì)照組畝產(chǎn)6000-8000斤，平均增產(chǎn)20%。F、種植成本實(shí)驗(yàn)組菌肥成本平均為900元左右/畝，對(duì)照組藥肥成本平均為1500元左右/畝。大田實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明綜合防治黃瓜病害效果好，明顯促進(jìn)黃瓜的生長(zhǎng)和增產(chǎn)，使用方便簡(jiǎn)單，成本低廉，所生產(chǎn)的黃瓜品質(zhì)好、售價(jià)高、真正的綠色無(wú)公害產(chǎn)品，受到巿場(chǎng)經(jīng)銷商廣泛歡迎。農(nóng)戶每畝增收數(shù)千元以上，周邊各縣種植戶現(xiàn)已紛紛要求訂貨，推廣應(yīng)用。本發(fā)明的大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法，通過(guò)生產(chǎn)用生物拮抗菌劑、生化黃腐酸菌肥兩者科學(xué)復(fù)配使用，能夠最大限度的彌補(bǔ)各自使用上的不足，充分發(fā)揮兩者復(fù)合使用的巨大優(yōu)勢(shì)，對(duì)于解決目前我國(guó)農(nóng)業(yè)面臨的水資源缺乏，農(nóng)藥化肥過(guò)量使用帶來(lái)的水體污染，耕地退化，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量低劣，病蟲害蔓延，生態(tài)環(huán)境惡化等嚴(yán)重問(wèn)題，表現(xiàn)出多功能，高效率，適用性廣等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)上述問(wèn)題的解決有著廣泛的物質(zhì)基礎(chǔ)和現(xiàn)實(shí)可操作性，因此，其不但是一種符合環(huán)境保護(hù)和生態(tài)學(xué)原則的綠色技術(shù)，也是一種可持續(xù)發(fā)展生態(tài)農(nóng)業(yè)的新型生物防治技術(shù)。生產(chǎn)用生物拮抗菌劑、生化黃腐酸葉面肥、生化黃腐酸沖施肥在農(nóng)作物上的綜合使用，完全可以將生產(chǎn)用生物拮抗菌劑替代化學(xué)藥物進(jìn)行病害防治、以生化黃腐酸菌肥部分替代化學(xué)肥料，為農(nóng)作物提供易于吸收利用的各類營(yíng)養(yǎng)成分，增強(qiáng)農(nóng)作物自身生長(zhǎng)能力和對(duì)病蟲害的抗病能力，改善農(nóng)作物生長(zhǎng)的生態(tài)環(huán)境，達(dá)到生物防治的目的，建立綠色環(huán)保、無(wú)公害、可持續(xù)發(fā)展、更高經(jīng)濟(jì)效益的農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)體系。在國(guó)內(nèi)外巿場(chǎng)均有極強(qiáng)的巿場(chǎng)竟?fàn)幠芰?，受到消費(fèi)者歡迎，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。權(quán)利要求1.防治大棚農(nóng)作物病害的生物拮抗菌劑，包括枯草芽胞桿菌(Bacillussubtilis)，其特征在于含枯草芽胞桿菌(Bacillussubtilis)BS2-5、BS6、BS8-3菌。2.大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法，其特征在于大棚農(nóng)作物生長(zhǎng)中施用權(quán)利要求l所述的生物拮抗菌劑。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法，其特征在于在大棚中復(fù)合使用權(quán)利要求2所述的生物拮抗菌劑和生化黃腐酸菌肥。4.根據(jù)權(quán)利要求2、3所述的大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法，其特征在于根據(jù)農(nóng)作物生長(zhǎng)階段的需求，每一次施用生物拮抗菌劑用量0.5-5公斤/畝。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法，其特征在于每隔15-30天在植物葉面噴施生物拮抗菌劑一次。6.根據(jù)權(quán)利要求2、3所述的大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法，其特征在于每次使用液體生化黃腐酸菌肥0.5-5.0公斤/畝。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法，其特征在于根據(jù)各類農(nóng)作物不同生長(zhǎng)階段的營(yíng)養(yǎng)需求，復(fù)配氮肥、磷肥、鉀肥各類營(yíng)養(yǎng)元素或者添加常量元素或微量元素，配成生化黃腐酸葉面肥，自農(nóng)作物苗移栽后開始，每隔15-30天在植物葉面噴施液體生化黃腐酸菌肥一次。8.根據(jù)權(quán)利要求2、3所述的大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法，其特征在于半固體生化黃腐酸菌肥使用量5-50公斤/畝。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法，其特征在于可根據(jù)各類農(nóng)作物不同生長(zhǎng)期的營(yíng)養(yǎng)需求，復(fù)配氮肥、磷肥、鉀肥各類營(yíng)養(yǎng)元素或者添加常量元素或稀有微量元素，配成生化黃腐酸沖施肥，自農(nóng)作物苗移栽后開始，每隔15-30天在植物根部沖施或根灌一次。全文摘要一種大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法，尤其涉及一種含枯草芽胞桿菌(Bacillussubtilis)BS2-5、BS6、BS8-3菌的防治大棚農(nóng)作物病害的生物拮抗菌劑，以及將該生物拮抗菌劑和生化黃腐酸菌肥復(fù)合使用一種大棚農(nóng)作物病害的生物防治方法。本發(fā)明通過(guò)篩選、培養(yǎng)生產(chǎn)用生物拮抗菌劑，配合生化黃腐酸菌肥施用，充分發(fā)揮兩者復(fù)合使用的優(yōu)勢(shì)，抑制、殺滅農(nóng)作物病原菌，以替代化學(xué)農(nóng)藥防治農(nóng)作物病害，減少化肥使用，實(shí)現(xiàn)真正的無(wú)公害、綠色安全的農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)過(guò)程。文檔編號(hào)A01P3/00GK101297656SQ20081012638公開日2008年11月5日申請(qǐng)日期2008年6月30日優(yōu)先權(quán)日2008年6月30日發(fā)明者陳五嶺申請(qǐng)人:陳五嶺