專利名稱：一種用于防治蚜蟲和溫室白粉虱的蠟蚧輪枝菌水分散粒劑配方及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種用于防治蚜蟲和溫室白粉虱的蠟蚧輪枝菌水分散粒劑配方及制備方法。
背景技術(shù)：
蠟蚧輪枝菌[KertciWi鵬Jec朋h' (Zimmerman)Viegas]是一種常見的蟲生真菌，寄 生于同翅目、鱗翅目、纓翅目等昆蟲。20世紀(jì)80年代中后期，英國、荷蘭等國就已經(jīng)相繼 有了該菌商品制劑問世，如lXl(T孢子/mL Mycotal可濕性粉劑和1 X 10"'孢子/mL Vertalec可濕性粉劑等，用于溫室蔬菜和花卉害蟲防治。20世紀(jì)90年代以來，該菌的研究 得到極大重視。我國經(jīng)過10余年的科技攻關(guān)，已有"一種蠟蚧輪枝菌及其培養(yǎng)方法與應(yīng)用" (200410058017.9)和"蠟階輪枝菌及其培養(yǎng)方法與應(yīng)用"(200410058016.4) 2項(xiàng)專利登 記。
本發(fā)明如果將蠟階輪枝菌加工成水分散粒劑生物農(nóng)藥，與可濕性粉劑、乳油等其他農(nóng) 藥劑型相比，具有對施藥者安全、有效成分含量高(可達(dá)80%-90°/。)、易計量、貯運(yùn)方便、 低環(huán)境污染、入水易崩解、分散性好、懸浮率高、再懸浮性好、貨架壽命長等優(yōu)點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是將蠟蚧輪枝菌加工成水分散粒劑，避免使用有機(jī)溶劑，提高制劑中 蠟蚧輪枝菌的含量和穩(wěn)定性，提高藥效及貨架壽命，便于貯運(yùn)和施用。
本發(fā)明所采用的生防菌VL17菌株是分離于染菌的溫室岈蟲體表的蠟階輪枝菌，將其純 化后轉(zhuǎn)移至斜面作母菌劑，并在塑料袋內(nèi)進(jìn)行固體發(fā)酵培養(yǎng)，得到含蠟階輪枝菌VL17孢子 粉的培養(yǎng)基。所采用的固體發(fā)酵培養(yǎng)基成分為大米，在12rC下滅菌30分鐘，發(fā)酵溫度 24°C-26°C，發(fā)酵時間13-15天，以固體培養(yǎng)基表面長滿白色蠟階輪枝菌VL17孢子粉即可。 將含菌培養(yǎng)基塑料袋置于4'C冷藏保存?zhèn)溆?。使用時將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養(yǎng)基上 洗脫，過濾，配制成lX10"'孢子/mL孢子懸浮液。
蠟蚧輪枝菌水分散粒劑組成成分按重量比為
蠟蚧輪枝菌VL17菌株孢子懸浮液(lXl(T孢子/mL) 4-13 濕潤劑-木質(zhì)素磺酸鈉或十二烷基磺酸鈉 1-15黏結(jié)劑-聚乙烯醇 1-19 崩解劑-尿素或氯化鋁或羧甲基纖維素鈉 3-11 分散劑-十二烷基磺酸鈉或磷酸二氫鈉或丙烯酸胺或丙烯酸均聚物鈉鹽 1-13 穩(wěn)定劑-磷酸氫二鈉或丁二酸或葡萄糖 1-7 載體-膨潤土或高嶺土或輕質(zhì)碳酸鈣 20-55 水 5-20
先按重量比將分散劑、濕潤劑、崩解劑和載體混合，然后將混合物進(jìn)行超細(xì)粉碎，獲 得超細(xì)粉。將黏結(jié)劑、穩(wěn)定劑按重量比用水溶解，再加入上述超細(xì)粉中，然后加入蠟階輪 枝菌孢子懸浮液，在捏合機(jī)中常溫(25。C)下捏合，制成可塑形的物料；再將此物料送進(jìn) 擠壓造粒機(jī)中，常溫(25°C)下進(jìn)行造粒。自然干燥或在低于4(TC烘箱中烘干，篩分，檢 驗(yàn)合格后包裝，制成蠟蚧輪枝菌水分散粒劑。
本發(fā)明微生物農(nóng)藥的有益效果如下1.依據(jù)微生態(tài)學(xué)原理，通過微生物孢子著落 于蟲體表面，孢子萌發(fā)，菌絲鋪展，侵入表皮、侵害發(fā)展，形成次生分生孢子，從而有效
地控制蟲害發(fā)生。2.微生物農(nóng)藥具有化學(xué)藥劑所不具備的優(yōu)點(diǎn)，其殺蟲作用機(jī)制主要為
孢子萌發(fā)過程中產(chǎn)生蛋白酶、幾丁質(zhì)酶和脂肪酶，酶和機(jī)械作用共同降解昆蟲體壁，致使
昆蟲死亡。3.本發(fā)明產(chǎn)品既能發(fā)揮最佳殺蟲作用、又能減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量和使用次 數(shù)。4.經(jīng)測試表明，本發(fā)明產(chǎn)品具有藥效穩(wěn)定，對環(huán)境安全，對小白鼠無致病性，對蜜 蜂、柞蠶、異色瓢蟲、赤子勝愛蚯蚓、小球藻、魚等安全的特點(diǎn)。5.本發(fā)明產(chǎn)品劑型兼 具可濕性粉劑和乳劑的特點(diǎn)，施藥方便，無環(huán)境污染。既具有粒劑的優(yōu)點(diǎn)，又具有懸浮劑 高分散性的性能，還能避免如甲苯、二甲苯等有機(jī)溶劑的使用。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例h
取蠟蚧輪枝菌VL17斜面，接種到PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、 水1000毫升)平板上，26X:下培養(yǎng)4天，得到長滿白色蠟蚧輪枝菌VL17的平板，用無菌水 將蠟蚧輪枝菌VL17從平板上洗脫，得到107孢子/mL的蠟階輪枝菌VL17菌懸浮液。
所采用的固體發(fā)酵培養(yǎng)基制作方法為將大米煮至半熟，風(fēng)干，將在直徑20cm、長30cm 的耐高溫、高壓塑料袋內(nèi)，每袋200克，在12rC下滅菌30分鐘。將上述蠟階輪枝菌VL17菌懸浮液在無菌操作條件下接種到上述固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，每 袋接種菌懸浮液150mL，發(fā)酵溫度24。C，發(fā)酵時間15天，以固體培養(yǎng)基表面長滿白色蠟蚧 輪枝菌VL17孢子粉即可。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養(yǎng)基上用無菌水洗脫，過濾，配制 成lXlO"'孢子/mL孢子懸浮液。
按重量比將分散劑丙烯酸胺lg、濕潤劑木質(zhì)素磺酸鈉lg、崩解劑羧甲基纖維素鈉3g 和載體輕質(zhì)碳酸鈣20g混合，然后將混合物進(jìn)行超細(xì)粉碎，獲得超細(xì)粉。將黏結(jié)劑聚乙烯 醇lg、穩(wěn)定劑磷酸氫二鈉lg用5mL水溶解，加入上述超細(xì)粉中，然后加入lXl(T孢子/mL 蠟蚧輪枝菌孢子懸浮液4mL，在捏合機(jī)中常溫(25°C)下捏合，制成可塑形的物料；再將 此物料送進(jìn)擠壓造粒機(jī)中，常溫(25'C)下進(jìn)行造粒。自然干燥或在低于4(TC烘箱中烘干， 篩分，檢驗(yàn)合格后包裝，制成l. 1Xl(f孢子/g蠟蚧輪枝菌水分散粒劑。
實(shí)施例2:
取蠟蚧輪枝菌VL17斜面，接種到PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、 水1000毫升)平板上，26。C下培養(yǎng)4天，得到長滿白色蠟蚧輪枝菌VL17的平板，用無菌水 將蠟階輪枝菌VL17從平板上洗脫，得到10'孢子/mL的蠟階輪枝菌VL17菌懸浮液。
所采用的固體發(fā)酵培養(yǎng)基制作方法為將大米煮至半熟，風(fēng)干，將在直徑20cm、長30cm 的耐高溫、高壓塑料袋內(nèi)，每袋200克，在121'C下滅菌30分鐘。
將上述蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液在無菌操作條件下接種到上述固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，每 袋接種菌懸浮液150mL，發(fā)酵溫度25'C，發(fā)酵時間14天，以固體培養(yǎng)基表面長滿白色蠟階 輪枝菌VL17孢子粉即可。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養(yǎng)基上用無菌水洗脫，過濾，配制 成1X1(T孢子/mL孢子懸浮液。
按重量比將分散劑丙烯酸胺3g、濕潤劑木質(zhì)素磺酸鈉15g、崩解劑羧甲基纖維素鈉6g 和載體輕質(zhì)碳酸鈣45g混合，然后將混合物進(jìn)行超細(xì)粉碎，獲得超細(xì)粉。將黏結(jié)劑聚乙烯 醇9g、穩(wěn)定劑磷酸氫二鈉7g用15mL水溶解，加入上述超細(xì)粉中，然后加入lXl(T孢子/niL 蠟蚧輪枝菌孢子懸浮液10mL，在捏合機(jī)中常溫(25°C)下捏合，制成可塑形的物料；再將 此物料送進(jìn)擠壓造粒機(jī)中，常溫(25'C)下進(jìn)行造粒。自然干燥或在低于40。C烘箱中烘干， 篩分，檢驗(yàn)合格后包裝，制成0.9X109孢子/g蠟階輪枝菌水分散粒劑。
實(shí)施例3:
取蠟蚧輪枝菌VL17斜面，接種到PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、水1000毫升)平板上，26'C下培養(yǎng)4天，得到長滿白色蠟蚧輪枝菌VL17的平板，用無菌水 將蠟蚧輪枝菌VL17從平板上洗脫，得到l(^孢子/mL的蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液。
所采用的固體發(fā)酵培養(yǎng)基制作方法為將大米煮至半熟，風(fēng)干，將在直徑20cm、長30cm 的耐高溫、高壓塑料袋內(nèi)，每袋200克，在121。C下滅菌30分鐘。
將上述蠟階輪枝菌VL17菌懸浮液在無菌操作條件下接種到上述固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，每 袋接種菌懸浮液150mL，發(fā)酵溫度26'C，發(fā)酵時間13天，以固體培養(yǎng)基表面長滿白色蠟蚧 輪枝菌VL17孢子粉即可。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養(yǎng)基上用無菌水洗脫，過濾，配制 成l X 10'°孢子AnL孢子懸浮液。
按重量比將分散劑磷酸二氫鈉6g、濕潤劑十二垸基磺酸鈉7g、崩解劑氯化鋁6g和載體 高嶺土40g混合，然后將混合物進(jìn)行超細(xì)粉碎，獲得超細(xì)粉。將黏結(jié)劑聚乙烯醇8g、穩(wěn)定 劑丁二酸3g用llmL水溶解，加入上述超細(xì)粉中，然后加入lX10"'孢子/mL蠟蚧輪枝菌孢子 懸浮液lOmL，在捏合機(jī)中常溫(25°C)下捏合，制成可塑形的物料；再將此物料送進(jìn)擠壓 造粒機(jī)中，常溫(25°C)下進(jìn)行造粒。自然干燥或在低于4(TC烘箱中烘干，篩分，檢驗(yàn)合 格后包裝，制成O. 9X 109孢子/g蠟蚧輪枝菌水分散粒劑。
實(shí)施例4:
取蠟蚧輪枝菌VL17斜面，接種到PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、 水1000毫升)平板上，26'C下培養(yǎng)4天，得到長滿白色蠟蚧輪枝菌VL17的平板，用無菌水 將蠟階輪枝菌VL17從平板上洗脫，得到l(/孢子/rnL的蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液。
所采用的固體發(fā)酵培養(yǎng)基制作方法為將大米煮至半熟，風(fēng)干，將在直徑20cm、長30cm 的耐高溫、高壓塑料袋內(nèi)，每袋200克，在121。C下滅菌30分鐘。
將上述蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液在無菌操作條件下接種到上述固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，每 袋接種菌懸浮液150mL，發(fā)酵溫度26。C，發(fā)酵時間13天，以固體培養(yǎng)基表面長滿白色蠟階 輪枝菌VL17孢子粉即可。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養(yǎng)基上用無菌水洗脫，過濾，配制 成l X 10'"孢子/mL孢子懸浮液。
按重量比將分散劑丙烯酸均聚物鈉鹽6g、濕潤劑木質(zhì)素磺酸鈣6g、崩解劑尿素9g和載 體膨潤土33 g混合，然后將混合物進(jìn)行超細(xì)粉碎，獲得超細(xì)粉。將黏結(jié)劑聚乙烯醇12g、 穩(wěn)定劑葡萄糖4g用10tnL水溶解，加入上述超細(xì)粉中，然后加入lXl(T孢子AiL蠟階輪枝菌 孢子懸浮液8mL，在捏合機(jī)中常溫(25°C)下捏合，制成可塑形的物料；再將此物料送進(jìn)擠壓造粒機(jī)中，常溫(25°C)下進(jìn)行造粒。自然干燥或在低于4(TC烘箱中烘干，篩分，檢 驗(yàn)合格后包裝，制成O. 9X 109孢子/g蠟蚧輪枝菌水分散粒劑。
將本發(fā)明的蠟蚧輪枝菌水分散粒劑稀釋1000倍后對溫室白粉虱噴霧處理，藥后第15、 20、 30天蟲口減退率分別為51. 1%、 73.9%、 81.5%。
實(shí)施例5:
取蠟蚧輪枝菌VL17斜面，接種到PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、 水1000毫升)平板上，26'C下培養(yǎng)4天，得到長滿白色蠟蚧輪枝菌VL17的平板，用無菌水 將蠟蚧輪枝菌VL17從平板上洗脫，得到10'孢子/mL的蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液。
所采用的固體發(fā)酵培養(yǎng)基制作方法為將大米煮至半熟，風(fēng)干，將在直徑20cra、長30cm 的耐高溫、高壓塑料袋內(nèi)，每袋200克，在121'C下滅菌30分鐘。
將上述蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液在無菌操作條件下接種到上述固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，每 袋接種菌懸浮液150mL，發(fā)酵溫度24'C，發(fā)酵時間15天，以固體培養(yǎng)基表面長滿白色蠟蚧 輪枝菌VL17孢子粉即可。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養(yǎng)基上用無菌水洗脫，過濾，配制 成l X 101"孢子AnL孢子懸浮液。
按重量比將分散劑十二烷基磺酸鈉13g、濕潤劑木質(zhì)素磺酸鈉15g、崩解劑尿素llg和 載體高嶺土55g混合，然后將混合物進(jìn)行超細(xì)粉碎，獲得超細(xì)粉。將黏結(jié)劑聚乙烯醇19g、 穩(wěn)定劑丁二酸7g用20mL水溶解，加入上述超細(xì)粉中，然后加入lXl(T孢子/mL蠟階輪枝菌 孢子懸浮液13mL，在捏合機(jī)中常溫(25°C)下捏合，制成可塑形的物料；再將此物料送進(jìn) 擠壓造粒機(jī)中，常溫(25°C)下進(jìn)行造粒。自然干燥或在低于4(TC烘箱中烘干，篩分，檢 驗(yàn)合格后包裝，制成O. 9X 109孢子/g蠟階輪枝菌水分散粒劑。
按上述實(shí)施例生產(chǎn)的蠟蚧輪枝菌水分散粒劑，經(jīng)水稀釋1000倍后對蚜蟲噴霧處理，藥 后第IO、 15、 20天蟲口減退率分別為52.0%、 71.5%、 80.1%。
權(quán)利要求
1. 一種用于防治蚜蟲和溫室白粉虱的蠟蚧輪枝菌水分散粒劑，其特征是所含各種成分及重量比為蠟蚧輪枝菌VL17菌株孢子懸浮液(1×1010孢子/mL) 4-13濕潤劑-木質(zhì)素磺酸鈉或十二烷基磺酸鈉 1-15黏結(jié)劑-聚乙烯醇 1-19崩解劑-尿素或氯化鋁或羧甲基纖維素鈉 3-11分散劑-十二烷基磺酸鈉或磷酸二氫鈉或丙烯酸胺或丙烯酸均聚物鈉鹽 1-13穩(wěn)定劑-磷酸氫二鈉或丁二酸或葡萄糖 1-7載體-膨潤土或高嶺土或輕質(zhì)碳酸鈣 20-55水 5-20。
2.—種如權(quán)利要求1所述的防治蚜蟲和溫室白粉虱的蠟階輪枝菌水分散粒劑的制備方 法，其特征是利用從染菌的溫室蚜蟲體表分離到的蠟蚧輪枝菌VL17菌株，采用固體發(fā)酵 培養(yǎng)，得到含蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉的培養(yǎng)基。將蠟階輪枝菌VL17孢子粉用水從培養(yǎng)基上 洗脫，過濾，配制成lX10"'孢子/mL孢子懸浮液。先按重量比將分散劑、濕潤劑、崩解劑 和載體混合，然后將混合物進(jìn)行超細(xì)粉碎，獲得超細(xì)粉。將黏結(jié)劑、穩(wěn)定劑按重量比用水 溶解，加入上述超細(xì)粉中，然后加入蠟階輪枝菌孢子懸浮液，在捏合機(jī)中常溫(25°C)下 捏合，制成可塑形的物料；再將此物料送進(jìn)擠壓造粒機(jī)中，常溫(25")下進(jìn)行造粒，自 然干燥或在低于4(TC烘箱中烘干，篩分，檢驗(yàn)合格后包裝，制成蠟蚧輪枝菌水分散粒劑;其中固體發(fā)酵所用培養(yǎng)基成分為大米，在12rC下滅菌30分鐘，發(fā)酵溫度24。C-26 'C，發(fā)酵時間13-15天，以固體培養(yǎng)基表面長滿白色蠟階輪枝菌孢子粉即可。將含菌培養(yǎng) 基塑料袋置于4'C冷藏保存?zhèn)溆谩?br> 全文摘要
蠟蚧輪枝菌[Verticillium lecanii(Zimmerman)Viegas]VL17菌株由染菌的溫室蚜蟲體表分離獲得，對蚜蟲、溫室白粉虱具有高毒力。采用固體發(fā)酵培養(yǎng)，得到含蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉的培養(yǎng)基。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉用水從培養(yǎng)基上洗脫，過濾，配制成1×10¹⁰孢子/ml孢子懸浮液。先按重量比將分散劑、濕潤劑、崩解劑和載體混合，然后將混合物進(jìn)行超細(xì)粉碎，獲得超細(xì)粉。將黏結(jié)劑、穩(wěn)定劑用水溶解，加入上述超細(xì)粉中，然后加入蠟蚧輪枝菌孢子懸浮液，在捏合機(jī)中常溫(25℃)下捏合，制成可塑形的物料；再將此物料送進(jìn)擠壓造粒機(jī)中，常溫(25℃)下進(jìn)行造粒。自然干燥或在低于40℃烘箱中烘干，篩分，檢驗(yàn)合格后包裝，制成蠟蚧輪枝菌水分散粒劑。此水分散粒劑用于防治蚜蟲和溫室白粉虱具有使用方便，無環(huán)境污染，對人、畜安全，貨架壽命較長，易于包裝貯運(yùn)等特點(diǎn)。
文檔編號A01N63/00GK101444226SQ200810230170
公開日2009年6月3日 申請日期2008年12月26日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月26日
發(fā)明者楊 張, 李興海, 王英姿, 祁之秋, 紀(jì)明山, 谷祖敏, 魏松紅 申請人:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)