專利名稱：：硫辛酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及硫辛酸衍生物或其鹽，其通過改變與瓦博格效應(Warburgeffect)有關(guān)的癌癥細胞代謝和信號轉(zhuǎn)導途徑選擇性地殺死腫瘤細胞，還涉及用此類硫辛酸衍生物治療對象(subject)的方法。相關(guān)
背景技術(shù)：
：所有哺乳動物細胞都需要能量來生存和生長。細胞經(jīng)由通過氧化代謝而代謝食物分子來獲得該能量。絕大多數(shù)正常細胞利用單一代謝途徑對其食物進行代謝。該代謝途徑的第一步是在稱為糖酵解的過程中將葡萄糖分子部分地降解為丙酮酸(其產(chǎn)生兩個ATP單位)。即使在低氧條件下也可以發(fā)生糖酵解。通過稱為三羧酸(TCA)循環(huán)的過程在線粒體中將丙酮酸進一步降解，以產(chǎn)生36個ATP單位/葡萄糖分子、水和二氧化碳。TCA循環(huán)需要氧。在氧水平降低時期，正常細胞通過各種機制進行適應并隨著氧水平恢復而返回到正常的代謝。糖酵解和TCA循環(huán)之間的關(guān)鍵連接是稱為丙酮酸脫氫酶(以下稱為"PDH")的酶。PDH是較大的多亞基復合物(下文稱為"PDC")的一部分。PDH(與PDC復合物的其它的酶綴合)產(chǎn)生乙酰輔酶A，其將糖酵解產(chǎn)生的丙酮酸有效引入TCA循環(huán)。大多數(shù)癌癥表現(xiàn)出能量代謝的明顯擾動。基本變化之一是采用瓦博格效應，其中糖酵解成為ATP的主要來源。TCA中ATP生成減少導致ATP不足。換言之，癌癥細胞即使在其并不缺氧時也表現(xiàn)為缺氧狀態(tài)。能量代謝中的這種變化代表與惡性轉(zhuǎn)化最強勁且得到充分記載的相關(guān)性中的一種，并與導致腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的其它變化有關(guān)。由于糖酵解很大程度上與TCA循環(huán)脫離而導致可用的ATP水平降低，因此癌癥細胞增加了其對葡萄糖的吸收及其向丙酮酸的轉(zhuǎn)化來嘗試彌補能量不足。必須控制過量的丙酮酸以及瓦博格生物化學的其它代謝副產(chǎn)物。已知這些代謝產(chǎn)物中的許多是有細胞毒的，例如乙醛。癌癥中的PDC與其它相關(guān)的酶在控制過量丙酮酸和代謝產(chǎn)物和/或使它們脫毒中起主要作用。例如，連接兩個乙酰基分子，以形成中性化合物3-羥基-2-丁酮。3-羥基-2-丁酮的產(chǎn)生是由腫瘤特異性形式的PDC所催化的。已建議，硫辛酸作為輔因子利用酶與PDC和相關(guān)硫辛酰胺在這些其它有毒代謝產(chǎn)物脫毒中起作用。文獻中對硫辛酸是否是由健康細胞和癌癥細胞產(chǎn)生的或硫辛酸是否是必需營養(yǎng)素存在爭議，兩者都有可能。已在哺乳動物細胞中鑒定出了產(chǎn)生硫辛酸所需的基因。對健康細胞或癌癥細胞中是否存在線粒體泵或吸收機制或它們在不同組織中是否有所不同仍未可知。盡管TCA循環(huán)在癌癥細胞中仍起作用，但腫瘤細胞的TCA循環(huán)是依賴于谷氨酰胺作為主要能量來源的變體循環(huán)。腫瘤特異性PDC的抑制或失活以及使代謝產(chǎn)物脫毒的有關(guān)酶可以促進細胞凋亡或壞死和細胞死亡。雖然存在表征各種腫瘤類型及其代謝中的高度保守變化的大量工作，這些變化仍有待成功開發(fā)作為癌癥化療的目標。由于癌癥仍然是美國人的第二大殺手，因此急需疾病控制的新方法。已建議，由于其氧化還原電勢的性質(zhì)，硫辛酸可能有用于治療涉及線粒體功能的各種疾病，例如糖尿病、阿耳茨海默氏病和癌癥。這些報道教導維持從SH到S-S的氧化還原變換(shift)的可用性，以獲得所需的效果。美國專利No.6331559和6951887公開一類新型治療劑，其選擇性地耙向并殺死腫瘤細胞以及某些其它種類的疾病細胞。這些專利進一步公開藥物組合物，其包含根據(jù)其發(fā)明的有效量的硫辛酸衍生物以及藥學上可接受的載體。本發(fā)明人目前已發(fā)現(xiàn)超出前述專利范圍的其它硫辛酸衍生物。發(fā)明概述第一方面中，本發(fā)明涉及式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>其中&和R2獨立地選自定義為R3C(0)的酰基、雜芳基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基(imidoyl)、有機金屬芳基和烷基有機金屬芳基；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的；其中R3選自氫、烯基、炔基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基和有機金屬芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R4選自氫、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、雜芳基和烷基雜芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；以及其中x為0-16。本發(fā)明進一步涉及式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽，其中Ri和^獨立地選自定義為R3C(0)的酰基、定義為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—工的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n_S-的烷硫基(alkylsulfide)、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基和定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的；其中R3和尺4獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;以及其中x為0_16，n為0-10，m為2-10;條件為1^和12中的至少一個獨立地選自定義為13(:(0)的?；?、雜芳基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基、有機金屬芳基和烷基有機金屬芳基，其中R3選自氫、烯基、炔基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基、有機金屬芳基和烷基有機金屬芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的，并且R4選自氫、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、雜芳基和烷基雜芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的。本發(fā)明的另一種實施方式涉及式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽，其中Ri和^獨立地選自定義為R3C(0)的酰基、定義為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—i的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n-S-的烷硫基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基、定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛和氫，條件為&和R2中的至少一個為氫；其中如上所定義的&和12可以是未取代的或取代的；其中R3獨立地選自氫、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中RJ蟲立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;以及其中x為0-16，n為0-10，m為2-10。本發(fā)明進一步涉及式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽，其中Ri和^獨立地選自定義為CH3(CH2)n-S-的烷硫基和定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的，并且其中&和R2中的至少一個是取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;以及其中x為0-16，n為0-10，m為2-10。本發(fā)明的另一種實施方式涉及式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽，其中Ri和Rj蟲立地選自定義為R3C(0)的?；⒍x為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—i的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n-S-的烷硫基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基、定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的；其中R3和R4獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;以及其中x為0_16，n為0-10，m為2-10;條件為&和R2中的至少一個獨立地選自定義為CH3(CH2)n-S-的烷硫基和定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛，所述&和R2中的至少一個是取代的。本發(fā)明還涉及式(II)的硫辛酸衍生物或其鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>其中M為-[C(R》(R2)]z-;其中&和R2獨立地選自定義為R3C(0)的?；⒍x為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—工的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n_S-的烷硫基、定義為R3C(=NH)-的酰亞胺基、定義為R4CH(0H)-S-的半縮醛和氫；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的；其中R3和R4獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;以及其中x為0-16，z為0-5，n為0-10，m為2-10。本發(fā)明的其它實施方式包括式(I)的那些，其中Ri和&基團之一或兩者包括烷基芳基取代基、碳鏈中具有雜原子的烷基取代基、取代的?；鶊F或取代的烷基基團。本發(fā)明的另一種實施方式涉及藥物制劑，其包含(a)治療有效量的本發(fā)明任意實施方式的至少一種硫辛酸衍生物和(b)至少一種藥學上可接受的添加劑。在優(yōu)選的實施方式中，所述至少一種藥學上可接受的添加劑選自溶劑、稀釋劑、表面活性劑、增溶劑、防腐劑、緩沖劑及其組合，且/或所述至少一種硫辛酸衍生物以提供約0.001mg/m2約10g/m2的量存在。本發(fā)明的其它實施方式涉及治療或預防表征為對硫辛酸衍生物敏感的疾病細胞的疾病的方法，其包括向需要其的患者給予治療有效量的根據(jù)本發(fā)明任意實施方式的至少一種硫辛酸衍生物。在優(yōu)選的實施方式中，所述至少一種硫辛酸衍生物存在于進一步包含至少一種藥學上可接受的添加劑的藥物制劑中。詳述本發(fā)明涉及硫辛酸衍生物，其有效靶向并殺死腫瘤細胞。因此，在第一種實施方式中，本發(fā)明涉及式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽18<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>H—CH—CH2—CH—(CH2)X~C—OH其中&和R2獨立地選自定義為R3C(0)的酰基、雜芳基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基、有機金屬芳基和烷基有機金屬芳基；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的；其中R3選自氫、烯基、炔基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基和有機金屬芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R4選自氫、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、雜芳基和烷基雜芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；禾口其中x為0-16。在第二種實施方案中，本發(fā)明涉及式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽hR2SSOH-CH—CH2—GH—(CH2);;-C-OH其中&和R2獨立地選自定義為R3C(0)的?；?、定義為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—i的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n_S-的烷硫基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基、定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的；其中13和14獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;禾口其中x為0-16，n為0-10，m為2-10;條件為&和R2中的至少一個獨立地選自定義為R3C(0)的?；?、雜芳基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基、有機金屬芳基和烷基有機金屬芳基，其中R3選自氫、烯基、炔基、烷基芳基、雜芳基和烷基雜芳基、有機金屬芳基和烷基有機金屬芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的，并且R4選自氫、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、雜芳基和烷基雜芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的。所述第一和第二種實施方式中特別優(yōu)選的硫辛酸衍生物包括(A)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>2HC1或1HC1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>其中&和R2獨立地選自定義為R3C(0)的?；?、定義為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—工的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n_S-的烷硫基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基、定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛和氫，條件為&和R2中的至少一個為氫；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的；其中R3獨立地選自氫、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R4獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;禾口其中x為0-16，n為0-10，m為2-10。所述第三種實施方式中特別優(yōu)選的硫辛酸衍生物包括SCH2C02H22第四種實施方式中，本發(fā)明涉及式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>其中&和R2獨立地選自定義為CH3(CH2)n_S_的烷硫基和定義為R5CH(OH)_S_的半縮醛；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的，并且其中&和R2中的至少一個是取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;禾口其中x為0-16，n為0-10，m為2-10。在第五種實施方式中，本發(fā)明涉及式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽〖1s0〖2sH——CH—CH2-CH—(CH2)j-C—OH其中&和R2獨立地選自定義為R3C(0)的?；?、定義為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—i的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n_S-的烷硫基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基、定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代；其中13和14獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;禾口其中x為0-16，n為0-10，m為2-10;條件為&和R2中的至少一個獨立地選自定義為CH3(CH2)n_S-的烷硫基和定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛，所述&和R2中的至少一個是取代的。第四和第五種實施方式中特別優(yōu)選的硫辛酸衍生物包括肌本發(fā)明的第六種實施方式中，所述硫辛酸衍生物式(II)結(jié)構(gòu)H——CH—CH2-CH—(CH2))j-C—OHM為-[C(R》(R2)]z_，其中&和R2獨立地選自定義為R3C(0)-的?；⒍x為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—工的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n_S-的烷硫基、定義為R3C(=NH)-的酰亞胺基、定義為R4CH(0H)-S-的半縮醛和氫，其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的。R3和R4獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；Rs選自CC13、CF3和C00H。另外，x為0-16;z優(yōu)選為0-5，更優(yōu)選為0-3;n為0-10和m為2-10。合適的-[C(R》(R2)]z-基團非限制性地包括-CH2、-CH(CH3)、_C(CH3)2、-CH(C6H5)和-CH(吡啶)。第六種實施方式中特別優(yōu)選的硫辛酸衍生物包括24本文所用的?；窻3C(0)_基團，其中R3可非限制性地為氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基或雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的。在本發(fā)明的某些實施方式中，R3為氫、烯基、炔基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基或有機金屬芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；在其它實施方式中，R3為氫、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基或雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的。換言之，所列13基團中的一個通過硫酯鍵連接于式(I)的碳骨架。?；鶊F的實例非限制性地包括乙?；⒈郊柞；捅郊柞；苌?、4-氟苯甲酰基和1-甲基吡咯-2-羧基。本文所用的烷基指(;H^基團，其中n為l-10，更優(yōu)選為1_6，最優(yōu)選為1_4，即，烷基通過硫醚鍵連接于式(I)的碳骨架。烷基可以是脂族的(直鏈或支鏈)或脂環(huán)族的；脂環(huán)族基團可以在任意碳上進行加成或取代以形成雜環(huán)化合物(heterocyclics)。在給定的烷基基團(即在碳鏈中)中可以存在至少一個雜原子，如N、0或S。烷基基團在其任意碳上可以被取代或未被取代。優(yōu)選的烷基基團為被芳基或雜芳基基團取代的烷基基團，即，其中&或&為烷基芳基或烷基雜芳基基團；所述芳基或雜芳基基團可以是取代的或未取代的。烷基基團的實例非限制性地包括甲基、乙基、丁基、癸基、環(huán)丙基、4_吡啶甲基、2-蒽醌甲基、N-苯乙酰胺、苯乙基、2-乙酸、2-乙酰氨基、4-(2-乙酰胺基-吡啶基)甲基、N-[(2-氟苯基)甲基]乙酰胺、N-[(6-甲氧基-3-吡啶基)甲基]乙酰胺、5-(乙酰氨基)吡啶-2-甲胺(carboxamide)、5-(6，8-二氮雜-7-氧代-3-硫雜雙環(huán)[3.3.0]辛-2-基)-N-(2-羰基氨基乙基)戊酰胺和5-(6，8-二氮雜-7-氧代-3-硫雜雙環(huán)[3.3.0]辛-2-基)五羧基。本文所用的烯基指CmH2m—工基團，其中m為2_10，即，烯基基團通過硫醚鍵連接于式(I)的碳骨架。烯基基團可以是脂族(直鏈或支鏈)的或脂環(huán)族的；脂環(huán)族基團可以在任意碳上進行加成或取代以形成雜環(huán)化合物。在給定的烯基基團中(即，在碳鏈中)可以存在至少一個雜原子，如N、0或S。烯基基團可以在其任意碳上被取代或未被取代。烯基基團的實例非限制性地包括丙烯基、2，3二甲基-2_丁烯基、庚烯基和環(huán)戊烯基。本文所用的炔基指CmH2m—3，其中m為2-10，即，炔基基團通過硫醚鍵連接于式(I)的碳骨架。炔基基團可以是脂族(直鏈或支鏈)的或脂環(huán)族的；脂環(huán)族基團可以在任意碳上進行加成或取代以形成雜環(huán)化合物。在給定的炔基基團中(即，在碳鏈中)可以存在至少一個雜原子，如N、0或S。炔基基團可以在其任意碳上被取代或未被取代。炔基基團的實例非限制性地包括乙炔基、丙炔基和辛炔基。本文所用的芳基指通過硫醚鍵連接于式(I)的碳骨架的芳族基團或芳基基團。芳基優(yōu)選為具有6-10個碳原子的不飽和環(huán)系統(tǒng)。芳基還包括有機金屬芳基，例如二茂鐵。芳基基團可以在其任意碳上被取代或未被取代。芳基的實例非限制性地包括芐基(_CH2C6H5)、諸如甲基芐基和氨基芐基的芐基衍生物、(1，2，3，4，5-五氟苯基)甲基、三苯基甲基、4-甲基苯甲酸、二茂鐵甲基、2-萘甲基、4，4-聯(lián)苯甲基和均二苯代乙烯(或l-((lE)-2-苯基乙烯基)-4-甲基苯)。本文所用的雜芳基指芳族雜環(huán)系統(tǒng)(單環(huán)或雙環(huán))，其中所述雜芳基部分為含有選自S、N和0的14個雜原子的5或6元環(huán)；雜芳基通過硫醚鍵連接于式(I)的碳骨架。雜芳基基團可以在其任意原子上(尤其碳原子上)被取代或未被取代。雜芳基基團的實例非限制性地包括苯并噻唑、喹啉、7-氯喹啉、呋喃、噻吩、噴哚、氮雜吲哚、噁唑、噻唑、異噁唑、異噻唑、咪唑、N-甲基咪唑、妣啶、嘧啶、妣嗪、妣咯、N-甲基妣咯、妣唑、N-甲基妣唑、1，3，4-噁二唑、1，2，4-三唑、1-甲基-1，2，4-三唑、111-四唑、1-甲基四唑、苯并噁唑、苯并呋喃、苯并異噁唑、苯并咪唑、^甲基苯并咪唑、氮雜苯并咪唑、吲唑、喹唑啉和吡咯烷基。本文所用的烷硫基烷硫基指CH3(CH2)n_S-基團，其中n為0_9。換言之，烷基基團通過二硫鍵連接于式(I)的碳骨架。所述烷基基團(即，CHJCH》》可以在其任意碳上被取代或未被取代，并具有如上關(guān)于CnH2n+1烷基基團所述的相同特征。本文所用的酰亞胺基指R^(=NH)-基團，其中R4可以非限制性地為氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基或雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的。在本發(fā)明的某些實施方式中，R4為氫、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、雜芳基和烷基雜芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的。換言之，所列的R4基團中的一種通過硫酰亞胺(thio-imide)鍵連接于式(I)的碳骨架。本文所用的半縮醛指R5CH(OH)-S-基團，其中R5是具有強吸電子取代基的化合物，所述強吸電子取代基非限制性地例如CF3、CC13或C00H。任何上述基團可以是未取代的或取代的。示例性的取代基非限制性地包括烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、?；⑼檠豸驶?、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、氰基、鹵素、羥基、硝基、氧代、三氟甲基、三氟甲氧基、三氟丙基、氨基、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、二烷基氨基烷基、羥烷基、烷氧基烷基、烷硫基、_S03H、-S02NH2、-502朋烷基、-S02N(烷基)2、-C02H、C02NH2、0)2朋烷基和C02N(烷基)2。另外，可以在任意上述基團中進行任意數(shù)目的取代；換言之，有可能具有單取代、二取代或三取代等的&或R2基團，且取代基本身也可以被取代。此外，通常可以用碳水化合物、脂質(zhì)、核酸、氨基酸中的任意種或那些物質(zhì)中的任意種的聚合物，或單鏈或支鏈合成聚合物(具有約350約40000的分子量)適當?shù)厝〈鶵i或I^基團中的任意種。對于以上所提到的&和R2的任何定義，可以使將&和R2與骨架連接的硫酯鍵或硫醚鍵氧化，以生成亞砜或砜；換言之，所述鍵中的-S-可以是-S(0)-或-S(0)2。另外，對于以上所提到的&和R2的任何定義，將&和R2與骨架連接的硫酯鍵或硫醚鍵可進一步包含可被氧化成硫代亞磺酸(thiosulfinicacid)或硫代磺酸的二硫鍵(disulfides);換言之，代替鍵中的-s-，所述鍵可以是-s(0)-s-或S(0)2-s-。不管硫辛酸衍生物具有式(I)還是具有式(II)結(jié)構(gòu)，本發(fā)明的硫辛酸衍生物可以包括其中巰基之一或兩者被硒分子(硫的類似物)替代的那些化合物，或其中巰基之一或兩者被氧化成硫酸根或相關(guān)基團的那些化合物。另外優(yōu)選的本發(fā)明硫辛酸衍生物包括式(I)的某些化合物，其中存在對于&和R2之一或兩者的烷基芳基取代基。此類硫辛酸衍生物包括<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>和本發(fā)明的其它優(yōu)選實施方式包括以下硫辛酸衍生物，其中存在對于&和R2之一或兩者的雜原子取代的烷基基團<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>本發(fā)明的另外優(yōu)選實施方式包括下列不對稱取代的硫辛酸衍生物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>o(oo)和(pp)本發(fā)明的另一種實施方式涉及藥物制劑，其包含(a)治療有效量的前面說明的(以上)實施方式中任一種所述的至少一種硫辛酸衍生物，以及(b)至少一種藥學上可接受的添加劑。通常所述至少一種硫辛酸衍生物以治療有效量存在于本發(fā)明的藥物制劑中。本發(fā)明的藥物制劑可以含有單位劑量或多劑量的硫辛酸衍生物。"治療有效量"有意表示當給予需要其的對象時，硫辛酸衍生物的量足以使對表征為對硫辛酸衍生物敏感的疾病細胞的疾病狀況的治療(或預防)起效。治療上有效的給定硫辛酸衍生物的量將根據(jù)諸如疾病狀況或其嚴重性、需要其的對象的特性等因素而變化，可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員常規(guī)確定該量。重要的是，單位劑量中硫辛酸衍生物的數(shù)量應足以抑制或殺死腫瘤細胞，同時使正常細胞基本不受損害。所述至少一種硫辛酸衍生物優(yōu)選以每劑提供約0.001mg/m2約10g/m2(更優(yōu)選約0.01mg/m2約5g/m2，更加優(yōu)選約0.25mg/m2約3g/m2，最優(yōu)選約20mg/m2約500mg/m2)的所述至少一種硫辛酸衍生物的量存在于本發(fā)明的藥物制劑中。適用于本發(fā)明的藥學上可接受的添加劑非限制性地包括溶劑、稀釋劑、表面活性劑、增溶劑、防腐劑、緩沖劑及其組合，以及特別適于以胃腸外給藥形式使用的任何其它添加劑。確定這些藥學上可接受的添加劑的合適量完全落入本領(lǐng)域普通技術(shù)人員的技能范圍內(nèi)。特別適用于本文的溶劑包括芐醇、二甲胺、異丙醇和其組合；本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將容易地意識到首先將所述至少一種硫辛酸衍生物溶于合適的溶劑中然后用稀釋劑稀釋該溶液是合意的。當需要適合例如靜脈內(nèi)給藥的藥物制劑時，將采用合適的稀釋劑。任何常規(guī)的水性溶劑或極性非質(zhì)子溶劑均適用于本發(fā)明。合適的藥學上可接受的稀釋劑非限制性地包括鹽水、糖溶液、醇(例如乙醇、甲醇和異丙醇)、極性非質(zhì)子溶劑(例如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亞砜(匿S0)和二甲基乙酰胺(DMA))及其組合。優(yōu)選的藥學上可接受的稀釋劑為葡萄糖溶液，更優(yōu)選為含有約2.5重量％約10重量％(更優(yōu)選約重量5%)的葡萄糖的葡33萄糖溶液。所述藥學上可接受的稀釋劑通常以不產(chǎn)生均裂的量使用；本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可容易地確定適用于根據(jù)本發(fā)明的藥物制劑的稀釋劑的量。可以根據(jù)常規(guī)制劑技術(shù)制備本發(fā)明的藥物制劑。例如，可以根據(jù)常規(guī)技術(shù)制備所述至少一種硫辛酸衍生物的原液(stocksolution)，然后根據(jù)需要用藥學上可接受的稀釋劑進行稀釋。還可以按照2007年4月18日提交的編號為60/912605的共同未決美國臨時申請(代理人檔案號03459.000100.PV)，以及2008年4月xx日提交的編號為xx/xxxxxx的相應的共同未決美國專利申請(通過引用將它們的全部公開內(nèi)容并入本文)中所述的細節(jié)來制備本發(fā)明的硫辛酸衍生物的藥物制劑。本發(fā)明的藥物制劑為液體制劑，例如無菌注射溶液(parenteralsolution)。本發(fā)明的藥物制劑可以容納在任何合適的容器(例如小瓶或安瓿瓶)中，并適于通過數(shù)種途徑之一給藥，所述途徑非限制性地包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、真皮內(nèi)、腹腔內(nèi)、胸內(nèi)、胸膜內(nèi)、子宮內(nèi)或腫瘤內(nèi)途徑。本發(fā)明的其它實施方式涉及藥物制劑，其適用于除以上所列之外的給藥類型，例如但不限制為口服、經(jīng)鼻、局部、透皮和直腸給藥。本發(fā)明的藥物制劑可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員認可為適合的任何藥物形式。適合的藥物形式包括固體、半固體、液體或凍干制劑，如片劑、散劑、膠囊、栓劑、混懸劑、脂質(zhì)體和氣霧劑。本發(fā)明的另一種實施方式涉及治療表征為對硫辛酸衍生物敏感的疾病細胞的疾病的方法，其包括對需要其的患者給予治療有效量的本發(fā)明的至少一種硫辛酸衍生物。優(yōu)選地，將至少一種硫辛酸衍生物摻混入根據(jù)本發(fā)明的藥物制劑中。本發(fā)明的另一種實施方式涉及預防表征為對硫辛酸衍生物敏感的疾病細胞的疾病的方法，其包括對需要其的患者給予治療有效量的本發(fā)明的至少一種硫辛酸衍生物。優(yōu)選地，將至少一種硫辛酸衍生物摻混入根據(jù)本發(fā)明的藥物制劑中。根據(jù)所述治療和預防的方法，本發(fā)明的硫辛酸衍生物和硫辛酸衍生物的藥物制劑可以用于預防或抑制涉及改變的或獨特的細胞PDC活性的疾病，S卩，表征為對硫辛酸衍生物敏感的疾病細胞的疾病。通過所述硫辛酸衍生物特別地靶向并殺死具有適當改變或打亂的能量代謝(即，改變的PDC活性)的細胞，而周圍的健康細胞保持不受損害。本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地鑒定具有改變的PDC活性的疾病?；蛘?，本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地篩選感興趣的對硫辛酸衍生物敏感的疾病。在本發(fā)明方法的優(yōu)選實施方式中，所述治療或預防的疾病包括癌癥，例如癌、肉瘤、骨髓瘤、淋巴瘤、白血病及其混合類型。本發(fā)明的藥物制劑有效對抗(against)原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性癌癥兩者，并有效對抗非限制性例如肺癌、肝癌、子宮癌、宮頸癌、膀胱癌、腎癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌和胰腺癌。在其它實施方式中，本發(fā)明的藥物制劑可用于治療與改變的能量代謝有關(guān)的疾病(例如阿爾茨海默氏病)、過度增生性疾病(例如牛皮癬)以及其它疾病(例如糖尿病性神經(jīng)病)。對于治療性應用，通常以單位劑量的形式將根據(jù)本發(fā)明的硫辛酸衍生物或藥物制劑直接給予患者。在本發(fā)明的方法中，硫辛酸衍生物或包含硫辛酸衍生物的藥物制劑可以通過數(shù)種途徑給藥，所述途徑非限制性地包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、真皮內(nèi)、腹腔內(nèi)、胸內(nèi)、胸膜內(nèi)、子宮內(nèi)或腫瘤內(nèi)途徑。本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識到所述硫辛酸衍生物的給藥模式取決于待治療的癌癥或癥狀類型。例如，給予硫辛酸用于治療白血病的優(yōu)選模式將涉及靜脈內(nèi)給藥。同樣，本領(lǐng)域技術(shù)人員還將意識到具體的藥學上可接受的添加劑將從適于一種給藥模式的藥物制劑到適于另一給藥模式的藥物制劑而變化。通過修改本文所述的治療，本發(fā)明的硫辛酸衍生物或藥物制劑還可以在用于治療癌癥以外的疾病(其中引起疾病的細胞表現(xiàn)出改變的代謝模式)的方法中使用。例如，由于相比于細菌細胞，真核細胞與動物細胞類似得多，因此人和其它動物的真核病原體一般比細菌病原體難治療得多。此類真核病原體包括原生動物(如引起瘧疾的那些)以及真菌和藻類病原體。由于本發(fā)明的硫辛酸衍生物對正常的人和動物細胞明顯不具有毒性，并且由于多種真核病原體可能經(jīng)歷其中它們的PDC變得對硫辛酸衍生物敏感的生命周期階段，因此本發(fā)明的硫辛酸衍生物和藥物制劑可用于殺死細菌PDC。現(xiàn)在通過參考下列實施例，對本發(fā)明的具體實施方式進行說明。應理解，這些實施例僅是通過舉例說明本發(fā)明的方式公開，并且不應以任何方式限制本發(fā)明的范圍。6，8-二巰基辛酸(中間體)的合成SHSH將a-硫辛酸(5.15g，25.0mmo1)懸浮于水(125ml)中，加入碳酸氫鈉(2.lg，25.Ommol)。攪拌該混合物，產(chǎn)生澄清溶液。將所得的淺黃色溶液在冰浴中冷卻，經(jīng)20分鐘以小量分批(insmallportions)攪拌加入固體硼氫化鈉(1.90g，50.Ommol)。將該溶液在冰浴中攪拌另外30分鐘，然后在室溫下攪拌30分鐘。將渾濁溶液在冰浴中冷卻，通過緩慢加入2M鹽酸將pH調(diào)節(jié)至1。隨著過量硼氫化鈉分解，產(chǎn)生劇烈的氫逸出，并且看到分離出油性液體。用氯仿(3X50ml)萃取該混合物。將合并的氯仿萃取物用硫酸鎂干燥、過濾，在室溫下減壓蒸發(fā)溶劑。在真空下將殘留的油進一步干燥，以除去痕量的溶劑。分離出無色油狀的6，8-二巰基辛酸5.2g(100%)。在氮氣下于-2(TC保存產(chǎn)物。力-NMR(CDCl3):S2.89(m，1H，S—C—H)。2.67(m，2H，S_CH2)，2.34(t，J=7.1Hz，2H，CH2C(0))，1.4—1.92(m，8H，(CH2)2)，1.33(t，J=8.0Hz，1H，S—H)，1.30(t，J=7.6Hz，1H，S—H)。實施例l化合物(A)、(E)和(F)的一般程序?qū)⑷缟纤龅玫降?，8-二巰基辛酸(leq.)溶于無水乙醇中。向該溶液中加入適當?shù)姆蓟?2.2eq.)。用新鮮制備的乙醇鈉溶液(在氮氣下以小量分批向無水乙醇中加入鈉(4.4eq.)，以形成新鮮制備的乙醇鈉)處理所得溶液。在氮氣下，將反應混合物回流4-6小時。然后將反應混合物在冰浴中冷卻并小心地用2N鹽酸酸化至pH為2-3，用氯仿(X3)萃取酸性水相，用水(Xl)、飽和氯化鈉水溶液(XI)洗滌合并的氯仿萃取物并干燥(MgS04)。蒸發(fā)氯仿后得到粗產(chǎn)物。以氯仿甲醇(9:1)作為洗脫液，通過硅膠柱色譜純化產(chǎn)物。對于以鈉鹽形式得到的化合物，省略上述的酸化步驟。一經(jīng)蒸發(fā)溶劑，將反應混合物溶于氯仿中，加入乙醚使鈉鹽沉淀，過濾并真空干燥該沉淀。實施例2S-?；衔?C)、(D)和(GG)的一般程序程序1:在三乙胺的存在下，用所述3當量的適當酰基氯將6，8-二巰基辛酸?；陨?，8-二酰基巰基辛酸酰酐(acylanhydride)。用二噁烷/水將該酐選擇性地水解，以生成6，8-二?；鶐€基辛酸，且苯甲酰硫酯基團未發(fā)生任何不希望的水解。通過硅膠柱色譜純化產(chǎn)物。程序1的一般實例-6，8-二苯甲?；鶐€基辛酸的合成在氮氣下，將6，8-二巰基辛酸(2.03g，lOmmol)溶于無水二氯甲烷(50ml)中，加入三乙胺(3.24g，32mmo1)。經(jīng)20分鐘，在攪拌下逐滴加入苯甲酰氯(4.50g，32mmo1)的二氯甲烷(20ml)溶液。在該加樣期間，三乙胺和鹽酸之間所形成的鹽沉淀。溶液本身保持無色。室溫下繼續(xù)攪拌9小時。用更多二氯甲烷使體積增加到100ml(固體全部溶解)，將溶液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。用10%檸檬酸(2X50ml，萃取后檢查水相的pH，以確保其為酸性)將其萃取，然后用飽和氯化鈉水溶液(50ml)洗滌。有機相用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)二氯甲烷。得到無色油。將上面的油(aboveoil)(5.48g)溶于二噁烷(20ml)中，加入水(20ml)。這使得該物料形成油。將混合物在40-45。C攪拌53小時。3(TC下真空(2mm)蒸發(fā)溶劑。將殘留的油溶于氯仿(50ml)中，用5%檸檬酸水溶液(20ml)萃取。有機相用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。分離出淺黃色(faintyellow)油(5.7g)。NMR譜顯示，只有約三分之一的酐被水解。將粗物料重新溶于二噁烷(20ml)和水(10ml)中。在45。C攪拌該混合物32小時。真空蒸發(fā)溶劑。NMR顯示酐水解完全。將產(chǎn)物懸浮于乙酸乙酯(2ml)中，施加到用己烷-乙酸乙酯-乙酸(100:50:1，v/v)平衡的25X4.5cm硅膠60(150g)柱上。然后用相同的溶劑混合物洗脫該柱。以約5ml/min收集40ml級分。在級分16-21處收集純產(chǎn)物(1.95g，無色油),H-腿(CDCg:S8.0(m，4H，芳族H)，7.38-7.60(m，6H，芳族H)，3.89(m，1H，CH-S)，3.0-3.3(m，2H，CH2S)，2.34(t，J=7.1Hz，2H，CH2C(0))，1.1-2.2(m，8H，CH2);13C_NMR(CDC13):S191.71，191.46，179.72，136.98，136.92，133.29，128.51，127.25，127.14,43.60,34.98,34.59,33.76,26.43,26.19,24.29;TLC(己烷-乙酸乙酯-乙酸，100:50:l，v/v)，Rf=0.30;IR(純)2937，1710，1704，1662，1667，1655，1448，1207，1175，911，773，757，733，648，688cm—、程序2:用已在三乙胺(1.2eq.)的存在下用DCM中的CDI(1.2eq.)預活化的1.2eq.適當羧酸將6，8-二巰基辛酸?；?。通過如上所述的硅膠柱色譜純化產(chǎn)物。在色譜過程中分離出作為化合物(D)合成期間的副產(chǎn)物的化合物(K)。實施例3硫縮醛(thioacetal)化合物(M)、(N)、(0)、(P)和(Q)的一般程序通過修改J.AM.Chem.Soc.1993，115，3458和J.Org.Chem.1975，40，231中所描述的一般程序來合成硫縮醛化合物(M)-(Q)。在氮氣氛下，向DCM中的6，8-二巰基辛酸(leq.)中加入適當?shù)娜┗蛲?leq.)。將混合物在室溫下攪拌1小時并冷卻至_25°C。加入BF3醚合物(leq.)，并允許反應液溫熱至室溫。蒸發(fā)溶劑后，通過結(jié)晶或通過以乙酸乙酯己烷(1:2)作為洗脫劑的硅膠色譜純化產(chǎn)物。實施例4用于二?；衔?S)、(T)、(U)、(V)、(W)、(X)(BB)禾P(II)的一般程序在氮氣氛下，向6，8-二巰基辛酸(leq.)的THF溶液中加入適當?shù)钠S基溴、苯乙基溴或烷基溴(2eq.)。經(jīng)10分鐘，攪拌下逐滴加入新鮮制備于無水乙醇中的乙醇鈉(3eq.)。然后使反應混合物回流5.5小時并冷卻至室溫。用水稀釋后，溶液在冰中冷卻，用2N鹽酸酸化至pH二2。用氯仿(X3)萃取產(chǎn)物，并用水(XI)和飽和氯化鈉水溶液(XI)洗滌，干燥(MgS04)。蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物，所述粗產(chǎn)物從苯和己烷中結(jié)晶或通過使用1-3%甲醇/DCM的硅膠柱色譜進行純化。實施例5化合物(B)的合成使用修改自O(shè)rg.Lett.2007，6，3687的方法合成化合物(B):在室溫下用三氟乙酸(6.5eq.)處理6，8_二巰基辛酸(leq.)和二茂鐵甲醇(2.leq.)的DCM溶液1小時。除去溶劑，通過使用硅膠柱色譜(己烷乙酸乙酯2:1)純化粗產(chǎn)物。實施例6(中間體)化合物(J)的合成在氮氣下，將6，8-二巰基辛酸(1.04g，5.Ommol)溶于三氟乙酸(10ml)中。向該攪拌溶液中以小量分批加入三苯基甲醇(1.30g，5.0mmo1)。攪拌溶液15分鐘，通過使用真空(1(TC，2mm)進行蒸發(fā)。將所得的殘留物溶于新鮮的三氟乙酸(7ml)中并攪拌10分鐘。真空除去溶劑，通過與無水苯(3X2ml)共沸除去任何殘留的三氟乙酸。對殘留的粘稠糖漿狀物進行的TLC分析(CHC13:CH30H:CH3C00H，100:10:l)揭示Rf值為0.42、0.47和0.54的三個點。主要點的Rf值為0.47。將粗物料溶于氯仿(1ml)中，施加到用硅膠(140g)(CHC13:CH30H:CH3C00H，100:5:l中)加壓填充的色譜柱(36X3.2cm)上。重要的是，將柱充分填充，以及對每克減少的硫辛酸原料使用至少100g二氧化硅。用初始溶劑混合物(100ml)對柱進行初始洗脫。然后用CHCl3:CH3OH:CH3COOH(100:7:1)對柱進行洗脫。以2ml/min收集20ml級分。在級分10-16之間收集相當純的產(chǎn)物，得到1.44g。該6-巰基-8-三苯甲基巰基辛酸用于合成化合物(Y)、(Z)和(AA)。實施例7化合物(Y)和(Z)的一般程序化合物(Y)和(Z)的合成可以通過以下用于合成6-乙基巰基-8-三苯甲基巰基辛酸(化合物(Z))的一般程序來舉例說明將化合物(J)(1.09g，2.4mmo1)溶于無水乙醇(40ml)中，加入溴乙烷(0.38g，3.Ommol)。將攪拌的溶液置于氮氣氛下，經(jīng)5分鐘加入乙醇鈉(lOmmol)的無水乙醇(10ml)溶液(通過使鈉金屬(0.23g)與乙醇反應來新鮮制備該溶液)。將該溶液在室溫下攪拌20分鐘。然后在溫和回流下將其加熱6小時(浴溫95°C)。在此時，看見白色固體沉淀。將混合物冷卻至室溫，將乙醇真空(l(TC下lmm)蒸發(fā)。將殘留物懸浮于水(40ml)中。用2M鹽酸將pH調(diào)節(jié)至約2(pH試紙)。用乙酸乙酯(3X25ml)萃取混合物。用飽和氯化鈉水溶液(20ml)洗滌合并的萃取物，用硫酸鎂干燥。蒸發(fā)溶劑，得到重1.14g的黃色粘稠油。將氯仿(2ml)中的粗物料施加到用硅膠(90g)(CHC13-CH30H-CH3C00H，250:10:1中)填充的色譜柱(25X3.2cm)上。用該溶劑洗脫，得到0.85g(74.5%)的黃色糖漿狀物。實施例8化合物(AA)的合成將化合物(J)(6-巰基-8-三苯甲基-二巰基辛酸)(1.36g，3.Ommol)溶于無水乙醇(50ml)中，加入溴乙酸(0.63g，4.5翻l)。用乙醇鈉(12,1)的無水乙醇(10ml)溶液(通過使鈉金屬(0.28g)與乙醇反應新鮮制備該溶液)處理該無色溶液。加樣時形成白色固體。在室溫下攪拌混合物30分鐘，然后在輕柔回流下混合7小時(浴溫95tO。將該混合物冷卻至室溫，真空蒸發(fā)溶劑，得到淺黃色固體。將該固體溶于水(50ml)中。用2M鹽酸將pH調(diào)節(jié)至約2。形成淺黃色沉淀。用乙酸乙酯(4X25ml)萃取混合物。用飽和鹽水(20ml)洗滌合并的萃取物。用硫酸鎂干燥溶液，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到淺黃色粘稠的油(1.59g)。TLC(硅膠，IOO:10:1CHC13-CH30H-CH3C00H)顯示Rf=0.42的主要點。將粗物料溶于氯仿(2ml)中，施加到用硅膠(90g)(CHC13-CH30H-CH3C00H(100:5:1)中)加壓填充的柱(24X3.2cm)上。然后用CHC13:CH3OH:CH3C00H(100:10:1)洗脫該柱。以2ml/min收集級分(20ml)。在級分14-20處收集產(chǎn)物，得到1.32g無色油(在對殘余乙酸修正后為75%)。實施例9用于化合物(G)、(H)和(L)的一般程序化合物(G)和(H)的合成可以通過以下用于6-乙基巰基-8-巰基辛酸(化合物(H))的一般程序來舉例說明將6-乙基巰基-8-三苯甲基-二巰基辛酸(0.85g，1.78mmo1)溶于三氟乙酸(10ml)中。得到深黃色溶液。一批加入三乙基硅烷(0.42g，0.58ml，3.6mmo1)?？匆姲咨腆w沉淀。將混合物置于室溫下并偶爾搖晃，保持10分鐘。通過過濾除去固體并用三氟乙酸(2X2ml)洗滌。將合并的濾液在室溫下真空蒸發(fā)至干，然后與苯(2ml)共沸得到油(0.49g)。TLC(硅膠，CHC13-CH30H-CH3C00H(100:5:1))顯示Rf=0.82(三苯基甲烷)和0.35(產(chǎn)物)兩個點。將粗物料施加到用硅膠(40g)(CHCl3-CH3OH-CH3COOH(100:5:1)中)填充的柱(22X2.3cm)上。用該溶劑洗脫柱得到淺黃褐色的糖漿狀產(chǎn)物0.33g(78%)。在氮氣或氬氣下，于-2(TC黑暗保存產(chǎn)物。相似地。從化合物(Y)合成化合物(G)。通過用于化合物(H)和(G)的相似三步程序合成化合物(L)。實施例10化合物(I)的合成將化合物(AA)(6-羧亞甲基巰基-8-三苯甲基-二巰基辛酸)溶于三氟乙酸(12ml)中。一批加入三乙基硅烷(0.53g，0.73ml，4.6mmo1)。該亮黃色溶液變成無色，并沉淀白色固體。將混合物置于室溫下并偶爾搖晃，保持10分鐘，過濾。用三氟乙酸(2X3ml)洗滌固體。合并的濾液在室溫下真空蒸發(fā)至干，與苯(2ml)共沸，得到淺棕色油(0.74g)。將粗物料溶于氯仿(lml)中，施加至用硅膠(40g)(CHC13-CH30H-CH3C00H(100:5:1)中)填充的柱(28X2.3cm)上。用CHCl3-CH3OH-CH3COOH(100:7:l)洗脫柱，得到無色粘稠的糖漿狀物0.54g(82%)。該產(chǎn)物應在_201:，優(yōu)選在氮氣下黑暗保存。TLC:Rf=0.35(100:7:1CHCl3-CH3OH-CH3COOH)。實施例11用于化合物(CC)、(DD)、(EE)、(FF)和(HH)的一般程序通過使用以上所述程序合成化合物(CC)、(DD)、(EE)、(FF)和(HH)。用溴乙酰胺將化合物(J)烷基化。如上所述除去三苯甲基保護基，得到6-乙酰氨基-8-巰基-6，8-二巰基辛酸。然后，如上所述用適當?shù)耐榛寤蚱S基溴(對于化合物(HH))在乙醇鈉的存在38下于回流乙醇中使該中間體烷基化。實施例12化合物匪(6-乙基-8-苯基-6，8-二巰基辛酸)的合成將碘化亞銅(12mg)和無水碳酸鉀(0.33g，2.4mmo1)置于配備有磁力攪拌棒的試管(15X2cm)中，加入含于2-甲基-2-丁醇(2ml)中的6-乙基巰基-8-巰基辛酸(化合物(H))(0.19g，0.8mmo1)。用隔片帽(s印tumc即)封閉試管，用氬氣吹洗。通過注射器加入乙二醇(100mg，90iiL，1.6mmo1)，接著加入碘苯(164mg，90iiL，0.8mmo1)。再次用氬氣吹洗試管，然后用封口膜(parafilm)密封并在95°C攪拌38小時。將混合物冷卻至室溫，加入水(15ml)。用2.0M鹽酸將懸浮液的pH值調(diào)節(jié)至2。用氯仿(3X10ml)萃取混合物。合并的萃取物用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到重0.25g的黃色油。TLC(CHCl3-CH3OH-HOAc100:10:1)顯示Rf=0.45的主要點(majorspot)，Rf=0.39的次要點(minorspot)和幾個次要點。將氯仿(0.5ml)中的粗產(chǎn)物施加到用硅膠60(20g)(CHCl3-CH30H-H0Ac(100:5:1)中)填充的柱(12X2.2cm)上。該柱用CHCl3-CH30H-H0Ac(100:10:1)洗脫。以0.5ml/min的流速收集4-5ml的級分。收集級分7-10處的產(chǎn)物重140mg的無色油。TLCRf=0.45(硅膠；CH3Cl_CH30H-H0Ac100:10:1)一H-NMR(CDCl3):S7.1-7.4(m，5H)，3.08(td，2H)，2.6-2.8(m，1H)，2.48(q，2H)，2.35(t，2H)，1.3-1.9(m，8H)，1.22(t，3H);MS(ESI(-)):311(M-1)。實施例13二硫化物化合物(LL)的合成用催化量的冰醋酸(32.5iiL，2.5mol%)處理含于DCM(15ml)和Aldrothio1(5.0g，22.7mmol，4eq)中的6，8-二巰基辛酸(1.18g，5.67mmo1)。在氮氣下、于室溫攪拌反應液過夜。減壓蒸發(fā)溶劑，通過硅膠(80g)柱色譜(具有己烷至50%乙酸乙酯的己烷溶液的溶劑梯度)純化該粗產(chǎn)物。MS:425(M-1)。實施例14二硫化物化合物(JJ)的合成將從以上得到的二吡啶基-6，8-二巰基辛酸二硫化物(leq.)溶于DCM中，加入芐硫醇(2.5eq.)。通過加入催化量的乙酸(2.5mol%)引發(fā)反應。在室溫下攪拌過夜后，蒸發(fā)溶劑，通過硅膠柱色譜純化(用己烷至50%乙酸乙酯的己烷溶液的溶劑梯度洗脫產(chǎn)物)粗產(chǎn)物。MS:425(M-1)。實施例15化合物(KK)的合成用乙酸(33iiL，O.565,1，cat.)處理Aldrithiol(5.0g，22.6,1)的甲醇溶液(50ml)，加入苯硫酚(2.309ml，22.6mmo1，leq.)。室溫攪拌混合物24小時。減壓蒸發(fā)溶劑，通過以己烷至2%的乙酸乙酯己烷溶液為洗脫梯度的硅膠(50g)柱色譜純化粗化合物得到2.413g(48.6%)的淺黃色油。用冰醋酸(3.5iU，0.057mmol，cat)使該化合物(500mg，2.279mmo1)與化合物(L)(237.39mg，1.14mmo1，leq.)的甲醇溶液反應。在室溫下攪拌反應液24小時。蒸發(fā)溶劑，以10%乙酸乙酯的己烷溶液作為展開劑，通過硅膠制備薄層色譜純化該化合物得到38mg(9%)淺黃色油，TLC(硅膠)，Rf=0.18;MS(ESI(-)):423(M-1)。實施例16化合物(R)的合成使用實施例9的單S-烷基化程序和實施例3的硫縮醛形成方法的組合來合成化合物(R)。測試本研究中使用了三種人腫瘤細胞，它們是人H460NSCLC、人黑素瘤A2058和人腺瘤HT1080細胞系。細胞最初獲得自美國模式細胞培養(yǎng)所(AmericanTypeCellCulture,ATCC)并在傳代數(shù)低于30的情況下用于實驗。所有腫瘤細胞均保持在371:、加濕的5%0)2氣氛下的容納25mlRPMI(Roswe11ParkMemorialInstitute)1640培養(yǎng)基(含10%的胎牛血清(FBS)和2mML_谷氨酰胺)的T75組織培養(yǎng)燒瓶中。通過胰蛋白酶消化以每4_5天1:IO的比率使腫瘤細胞分裂，并重懸浮于新燒瓶中的新鮮培養(yǎng)基中。在70-90%匯合度時收獲實驗用細胞。本研究中用于所有細胞系的培養(yǎng)基為含有10%胎牛血清(FBS)、2mML-谷氨酰胺、100IU/mL青霉素禾口100iig/ml鏈霉素的RPMI(RoswellParkMemorialInstitute)1640培養(yǎng)基。所用的測試化合物通常以高于20mM的濃度制備，并在以lmM的濃度在培養(yǎng)基中進行沉淀測試，lmM是測試化合物的最高測試濃度。通過將腫瘤細胞暴露于各種濃度的測試化合物(或載體)或不用測試化合物或載體處理來評價測試化合物的抗腫瘤活性。本研究中所評價的測試化合物的濃度范圍為O-lmM。腫瘤細胞的處理持續(xù)時間為48小時。在用測試物處理后，確定活腫瘤細胞數(shù)，獲得并比較引起50%細胞生長抑制(IC5。)的測試試劑濃度。細胞接種實驗到細胞生長至70_90%匯合度，除去培養(yǎng)基并先后通過加入5ml磷酸鹽緩沖液(PBS)和吸氣來短暫洗滌細胞單層。向每個燒瓶中加入胰蛋白酶-乙二胺四乙酸(EDTA)(4ml)，將該燒瓶在組織培養(yǎng)箱中放置5分鐘。加入含血清的培養(yǎng)基(10ml)，以停止酶促反應，用血清移液管反復重懸浮使細胞解聚。向20iiL的0.4%臺盼藍溶液(TrypanBluesolution)中加入含有細胞的培養(yǎng)基(20iiL)，混合，將10yl的該含有細胞的混合物置于血細胞計數(shù)器的室(chamber)中。在100倍放大下，通過對血細胞計數(shù)器室的4個角方塊(cornersquare)中的活細胞(不排斥臺盼藍的細胞)進行計數(shù)來確定活細胞數(shù)目。根據(jù)下列公式確定所需的細胞體積<formula>formulaseeoriginaldocumentpage40</formula>其中所計數(shù)細胞的ft/mL=血細胞計數(shù)器上的細胞的平均#乂2稀釋因子X104。針對本研究的細胞數(shù)目為每孔4Xl(f個(在lOOiU培養(yǎng)基中)。對細胞的實際數(shù)目進行計數(shù)，接種到96孔板的各孔中。然后將細胞孵育約24小時，之后將其用于測試化合物和載體的抗腫瘤活力測試。對一些細胞系在實驗當天細胞單層匯合或亞匯合(subconfluent)。用測試化合物和載體進行處理在測試當天，向孔中加入5iiL具體濃度的測試化合物(或載體)。在暴露于測試物(或載體)48小時后，確定各孔中的活細胞數(shù)目(參見下一節(jié))，并計算相對于未處理的細胞百分比。通過CellTiterBlue分析確定活細胞的數(shù)目本研究中使用CellTiterBlue分析確定活細胞的數(shù)目。具體地，按照Promega公司(Madison,WI)的說明書，允許試劑達到室溫。用12通道E卯endorf移液器加入CellTiterBlue試劑，每孔加入20yL。然后在37將細胞在細胞培養(yǎng)箱中孵育1-4小時。使用FLU0star最佳熒光讀板儀(BMGtechnologies,德國)讀取530/590nm處的熒光強度(與活細胞的數(shù)量成正比)。ICs。值的計算將得自熒光讀數(shù)的數(shù)據(jù)復制到EXCEL電子數(shù)據(jù)表中，用下列公式計算相對于未處理細胞的細胞生長%#相對于未處理的細胞=(N下的平均熒光/未處理的平均熒光)X100%其中N二所述化合物或載體的濃度。將計算值輸入SigmaPlot，第9版。生成"以平均相對細胞生長作為測試化合物濃度的函數(shù)"的四參數(shù)邏輯曲線。從曲線中確定ICs。的數(shù)值。R平方值為數(shù)據(jù)與曲線的擬合程度提供了指示。下表1中闡述了測試化合物的IQ。值。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>以上參考其具體實施方式已對本發(fā)明進行了說明，顯然可以做出多種改變、修改和變化，而不背離本文所公開的發(fā)明概念。因此，有意包含落入所附權(quán)利要求書的精神和廣義范圍中的所有此類改變、修改和改變。本文所引用的所有專利申請、專利和其它發(fā)表物通過引用將其整體并入本文。權(quán)利要求式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽其中R1和R2獨立地選自定義為R3C(O)的?；?、雜芳基、定義為R4C(＝NH)-的酰亞胺基、有機金屬芳基和烷基有機金屬芳基；其中如上所定義的R1和R2可以是未取代的或取代的；其中R3選自氫、烯基、炔基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基和有機金屬芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R4選自氫、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、雜芳基和烷基雜芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；和其中x為0-16。F2008800209448C00011.tif2.權(quán)利要求l所述的硫辛酸衍生物，其中所述硫辛酸衍生物選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>2HC1或1HC1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>3.<image>imageseeoriginaldocumentpage3</image><formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中&和R2獨立地選自定義為R3C(0)的?；⒍x為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—工的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n-S-的烷硫基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基和定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的；其中R3和R4獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;禾口其中x為0-16，n為0-10且m為2-10;條件為&和R2中的至少一個獨立地選自定義為R3C(0)的?；?、雜芳基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基、有機金屬芳基和烷基有機金屬芳基，R3選自氫、烯基、炔基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基、有機金屬芳基和烷基有機金屬芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的，并且R4選自氫、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、雜芳基和烷基雜芳基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的。4.式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中&和R2獨立地選自定義為R3C(0)的?；⒍x為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—工的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n-S-的烷硫基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基、定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛和氫，條件為&和R2中的至少一個是氫；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的；其中R3獨立地選自氫、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R4獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;禾口其中x為0-16，n為0-10且m為2-10。5.權(quán)利要求4所述的硫辛酸衍生物，其中所述硫辛酸衍生物選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>6.式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中&和R2獨立地選自定義為CH3(CH2)n-S-的烷硫基和定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的，且其中&和R2中的至少一個被取代；其中R5選自CC13、CF3和C00H;禾口其中x為0-16，n為0-10且m為2-10。7.權(quán)利要求6所述的硫辛酸衍生物，其中所述硫辛酸衍生物為<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>8.式(I)的硫辛酸衍生物或其鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中&和R2獨立地選自定義為R3C(0)的?；?、定義為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—工的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n-S-的烷硫基、定義為R4C(=NH)-的酰亞胺基和定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的；其中R3和R4獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;禾口其中x為0-16，n為0-10且m為2-10;條件為&和R2中的至少一個獨立地選自定義為CH3(CH2)n-S-的烷硫基和定義為R5CH(0H)-S-的半縮醛，所述&和R2中的至少一個被取代。9.式(II)的硫辛酸衍生物或其鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中M為-[C(R》(R2)]z-;其中&和R2獨立地選自定義為R3C(0)的?；⒍x為CnH2n+1的烷基、定義為CmH2m—工的烯基、定義為CmH2m—3的炔基、芳基、雜芳基、定義為CH3(CH2)n-S-的烷硫基、定義為R3C(=NH)-的酰亞胺基、定義為R4CH(0H)-S-的半縮醛和氫；其中如上所定義的&和R2可以是未取代的或取代的；其中R3和R4獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、烷基芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其中的任何基團可以是取代的或未取代的；其中R5選自CC13、CF3和C00H;禾口其中x為0-16，z為0-5，n為0-10且m為2-10。110.權(quán)利要求9所述的硫辛酸衍生物，其中所述的硫辛酸衍生物選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>11.硫辛酸衍生物，其選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>12.藥物制劑，其包含(a)治療有效量的權(quán)利要求1、3、4、6、8、9和11中任一項所述的至少一種硫辛酸衍生物和(b)至少一種藥學上可接受的添加劑。13.權(quán)利要求12所述的藥物制劑，其中所述至少一種藥學上可接受的添加劑選自溶劑、稀釋劑、表面活性劑、增溶劑、防腐劑、緩沖劑及其組合。14.權(quán)利要求12所述的藥物制劑，其中所述至少一種硫辛酸衍生物以提供約0.OOlmg/m2約10g/m2的量存在。15.治療表征為硫辛酸衍生物敏感的疾病細胞的疾病的方法，其包括對需要其的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1、3、4、6、8、9和11中任一項所述的至少一種硫辛酸衍生物。16.權(quán)利要求15所述的方法，其中所述至少一種硫辛酸衍生物存在于進一步包含至少一種藥學上可接受的添加劑的藥物制劑中。17.預防表征為對硫辛酸衍生物敏感的疾病細胞的疾病的方法，其包括對需要其的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1、3、4、6、8、9和11中任一項所述的至少一種硫辛酸衍生物。18.權(quán)利要求17所述的方法，其中所述至少一種硫辛酸衍生物存在于進一步包含至少一種藥學上可接受的添加劑的藥物制劑中。全文摘要硫辛酸衍生物和含有硫辛酸衍生物的藥物制劑有用于治療和預防表征為對硫辛酸衍生物敏感的疾病細胞的疾病。文檔編號A01N43/26GK101765370SQ200880020944公開日2010年6月30日申請日期2008年4月17日優(yōu)先權(quán)日2007年4月18日發(fā)明者P·賓漢,T·郭,Z·扎查申請人:基石制藥公司