專利名稱：：(-)-e-10-oh-nt組合物及其合成與使用的方法(-)-E-10-0H-NT組合物及其合成與使用的方法1.相關(guān)申請的交叉引用本申請依據(jù)35U.S.C.§1.119(e)要求2007年4月30日提交的臨時申請第60/915，103號、2008年2月11日提交的臨時申請第61/027，814號禾口2008年2月12日提交的臨時申請第61/028，122號的優(yōu)先權(quán)，這些臨時申請的公開內(nèi)容以其整體在此通過引用并入。2.關(guān)于聯(lián)邦政府資助的研究的聲明無3.合作研究協(xié)議的當(dāng)事人無4.對序列表、表格或計(jì)算機(jī)程序的引用無5.背景包括阿米替林(AT)和去甲替林(NT)的三環(huán)抗抑郁藥已顯示抑制包括去甲腎上腺素和5-羥色胺的一元胺的再攝取，并且已廣泛用于處方適應(yīng)癥(on-label)和非處方適應(yīng)癥(off-label)，以治療至少部分地由調(diào)節(jié)異常的去甲腎上腺素和5-羥色胺的攝取或再攝取介導(dǎo)的許多不同的病癥和疾病，其包括但不限于，心境障礙如抑郁、焦慮障礙如強(qiáng)迫癥(OCD)、進(jìn)食障礙如神經(jīng)性厭食和神經(jīng)性貪食、沖動控制障礙如拔毛狂、睡眠障礙如與阿片樣物質(zhì)脫癮相關(guān)的失眠、人格障礙如注意缺陷多動障礙(ADHD)以及軀體形式障礙如某些類型的疼痛。AT和NT還用作多種類型的急性疼痛和慢性疼痛的一線治療，所述疼痛是起源于傷害性的(例如軀體的或內(nèi)臟的)或非傷害性的(例如神經(jīng)性的或交感神經(jīng)的)，包括非傷害性的神經(jīng)性疼痛如糖尿病神經(jīng)病變和皰疹后神經(jīng)痛(PHN)、以及包括炎性疼痛和間質(zhì)性膀胱炎的傷害性疼痛。然而，AT和NT的使用已受其不利的副作用所限制，所述不利的副作用包括但不限于，抗毒蕈堿作用如口干、便秘、惡心和尿潴留；頭痛、出汗增加、耳鳴、不快味覺、心臟毒性作用如直立性低血壓、心律不齊和心動過速；鎮(zhèn)靜和體重增加。由于NT和AT與細(xì)胞色素P450藥物代謝酶共有的副作用和/或相互作用，NT和AT還被禁忌與多種間介(mediation)一起使用。必然地，鑒定能夠治療至少部分地由調(diào)節(jié)異常的去甲腎上腺素和5-羥色胺的攝取或再攝取介導(dǎo)的病癥和疾病的其他化合物以及在AT和三環(huán)抗抑郁藥的藥理學(xué)中已涉及但顯示出降低的和/或較少的副作用并且可與被禁忌與AT和NT—起使用的藥物一起施用的其他靶將是有益的和所期望的。6.概述當(dāng)體內(nèi)施用于包括人類的哺乳動物時，阿米替林("AT")和去甲替林("NT")共有許多共同的代謝產(chǎn)物，主要的一種是[(5-[3-甲基氨基_亞丙基]-10，11-二氫-5H-二苯并[a，d]環(huán)庚烯-10-醇]("10-OH-NT")。取決于關(guān)于雙鍵的構(gòu)型，該10-OH-NT代謝產(chǎn)物具有兩個幾何異構(gòu)體(Z-10-0H-NT和E-10-0H-NT)。由于在10位的碳的手性，這些異構(gòu)5體的每一個包括兩個對映體，(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT以及(+)-Z-IO-OH-NT和(-)-Z-10-0H-NT。某些研究提示，當(dāng)口服施用于人類時，主要的IO-OH-NT代謝產(chǎn)物的外消旋物(士)-E-10-0H-NT可能可用于治療抑郁和焦慮(Nordin等人，1987a)。然而，除了所提及的聲明E-10-0H-NT的(+)和(-)對映體以相似的功效抑制去甲腎上腺素?cái)z取的未發(fā)表的研究(Nordin&Bertilsson，1995)，在文獻(xiàn)中未報(bào)導(dǎo)該外消旋物的具體的藥理學(xué)性質(zhì)和生化性質(zhì)以及分離的(+)和(_)對映體。由申請人發(fā)現(xiàn)的并在此提供的有說服力的證據(jù)(在后面的部分中更具體地討論)說明E-10-0H-NT的(-)對映體具有符合治療有效性的重要的藥理學(xué)性質(zhì)和生化性質(zhì)。例如，如同AT和NT，(-)-E-10-0H-NT結(jié)合去甲腎上腺素("NE")和5-羥色胺("5HT")一元胺運(yùn)載體(monoaminetransporter)并且抑制NE和5HT的攝取，已知與AT和NT的抗抑郁性質(zhì)及其他治療性質(zhì)相關(guān)的生物活性。顯著地，如在重組體運(yùn)載體結(jié)合試驗(yàn)中所測量的，(_)-E-10-0H-NT對NE運(yùn)載體的親和力與AT的親和力大致相等并且在NT的親和力的約IO倍以內(nèi)。對于抑制NE攝取，觀察到如在基于細(xì)胞的功能分析(cell-basedfunctionalassay)中所測量的類似結(jié)果。此外，如同NT，(-)-E-IO-OH-NT對NE運(yùn)載體和5HT運(yùn)載體顯示出選擇性。本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)，(-)-E-lO-OH-NT與AT和NT不共有與在使用過程中的不利副作用相關(guān)的某些藥理學(xué)性質(zhì)和生化性質(zhì)。例如，雖然AT和NT都有效對抗&組胺能受體OViistaminergicrec印tor)，在短期使用和長期使用AT和NT均觀察到的顯著的體重增加(Altamura等人，1989;Wirshing等人，1999;Richelson，2001;Khawam等人，2006)和不期望的鎮(zhèn)靜作用(Bryson&Wilde，1996)中起作用的性質(zhì)，但(_)-E-IO-OH-NT以小得多的程度對抗該&組胺能受體。實(shí)際上，(_)-E-10-0H-NT相對于AT和NT的優(yōu)良非鎮(zhèn)靜作用在通常用于評價(jià)藥物的鎮(zhèn)靜性質(zhì)的大鼠旋轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)(ratrotarodassay)中確認(rèn)。因此，與AT和NT相比，(-)-E-10-0H-NT應(yīng)當(dāng)是較低鎮(zhèn)靜的并且具有較少的不良食欲作用。在該試驗(yàn)中，在施用AT(30mg/kg，腹膜內(nèi))和NT(30mg/kg，腹膜內(nèi))以后30分鐘時分別觀察到旋轉(zhuǎn)棒性能(rotarodperformance)51±20%和60±40%的峰值缺乏(peakdeficit)。完全相反地，在以30mg/kg腹膜內(nèi)的劑量接受(-)-E-10-0H-NT的大鼠中未觀察到性能的顯著減損°(-)-E-10-0H-NT的這些和其他新發(fā)現(xiàn)的有益性質(zhì)(以下進(jìn)一步討論)提供了在對于三環(huán)抗抑郁藥的領(lǐng)域中是史無前例的治療益處。因?yàn)?-)-E-10-0H-NT與AT和NT共有治療相關(guān)的藥理學(xué)性質(zhì)和生化性質(zhì)，其可以基本上對映體純的形式或?qū)τ丑w純的形式用于治療通常用AT和NT治療的許多適應(yīng)癥，所述適應(yīng)癥包括但不限于本文進(jìn)一步提及的多種疾病和病癥。然而，因?yàn)?-)-E-lO-OH-NT不具有已知作為不利副作用的原因的某些藥理學(xué)性質(zhì)和生化性質(zhì)，所以可給予患者較低發(fā)生率的不期望的副作用的治療。作為具體的、非限制性的實(shí)例，因?yàn)?_)-E-10-0H-NT相對于AT和NT是顯著較低效的^組胺能受體拮抗劑，所以用該藥劑可獲得治療益處，而沒有AT和/或NT治療所經(jīng)歷的顯著體重增加和鎮(zhèn)靜的不期望的副作用。如同(-)-E-10-0H-NT，外消旋的(士)-E-10-0H-NT及其(+)對映體在體外試驗(yàn)中還具有重要的且近似對等的生化活性。例如，(士)-E-10-0H-NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT每個均對去甲腎上腺素運(yùn)載體還有5-羥色胺運(yùn)載體表現(xiàn)出大致相等的親和力(見實(shí)施例14)。在功能試驗(yàn)中，E-10-0H-NT的(+)對映體和(_)對映體對去甲腎上腺素?cái)z取表現(xiàn)出大致對等的選擇性抑制，并且在體外功能試驗(yàn)中與AT大致對等(見實(shí)施例5)。但體內(nèi)動物研究指出，在神經(jīng)性疼痛的嚙齒動物模型(L5脊神經(jīng)結(jié)扎的大鼠模型；見實(shí)施例15)中，(-)-E-10-0HNT對映體比外消旋的(士)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT在治療上更有效，并且在痛覺過敏(FCA誘導(dǎo)的炎性疼痛；見實(shí)施例5和實(shí)施例17-20)和抑郁(強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)；見實(shí)施例21)的嚙齒動物模型中還比(+)-E-10-0H-NT更有效。已知(±)-E-IO-OH-NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-OH-NT的大致對等的生化活性，這些體內(nèi)結(jié)果是非常令人驚訝的。預(yù)期外消旋的(士)-E-10-0H-NT、(+)-E-10晉NT和(-)-E-10-OH-NT在疼痛和抑郁的體內(nèi)嚙齒動物模型中將顯示大致對等的功效。但是，僅(_)對映體被證明是有效的。本公開部分地基于對于(-)-E-10-OH-NT所發(fā)現(xiàn)的令人驚訝的功效。因此，在一方面中，本公開提供了包括E-10-0H-NT和可選擇的一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑的組合物。E-10-0H-NT在組合物中以富含(-)對映體的非外消旋的混合物存在。在某些實(shí)施方案中，構(gòu)成組合物的E-10-0H-NT是基本上對映體純的(-)-E-10-0H-NT。在某些實(shí)施方案中，構(gòu)成組合物的E-10-0H-NT是對映體純的(-)-E-IO-OH-NT。E-10-0H-NT可以游離堿的形式或以鹽的形式存在于組合物中。在某些實(shí)施方案中，E-10-0H-NT以藥學(xué)上可接受的酸加成鹽的形式存在。E-10-0H-NT(包括鹽的形式)還可以例如與在制備或純化期間使用的溶劑和/或水一起的溶劑合物和/或水合物的形式存在于組合物中。E-10-0H-NT組合物可在體外或體內(nèi)使用，如以下將更具體地描述的。當(dāng)在體內(nèi)使用時，所述組合物可被配制用于經(jīng)基本上任何施用途徑或模式施用至獸醫(yī)情形中的動物或者施用至人類，所述施用途徑或模式包括但不限于口服施用、局部施用、經(jīng)眼施用、含服、全身施用、經(jīng)鼻施用、注射施用、經(jīng)皮施用、直腸施用、陰道施用、吸入施用或吹入施用。如上所述，(-)-E-10-0H-NT與AT和NT共有與這些藥物的治療功效相關(guān)的重要的生物學(xué)性質(zhì)。它還在疾病的動物模型中顯示出功效?；谶@些類似的性質(zhì)，預(yù)期本文所述的組合物在治療對用AT和NT治療響應(yīng)的多種疾病和適應(yīng)癥中將是同等地有效的。因此，在另一方面中，本公開提供了治療對AT或NT治療響應(yīng)的疾病或適應(yīng)癥的方法。該方法通常包括向患有對用AT或NT治療響應(yīng)的疾病或適應(yīng)癥的、包括人類的哺乳動物施用有效治療所述疾病或適應(yīng)癥的量的本文所述的組合物。在某些實(shí)施方案中，E-10-0H-NT組合物包括富含(_)對映體的E-10-0H-NT。在某些實(shí)施方案中，E-10-0H-NT組合物包括基本上對映體純的(-)-E-10-0H-NT。在某些實(shí)施方案中，E-10-0H-NT組合物包括對映體純的(-)-E-IO-OH-NT。已知對用AT和/或NT治療響應(yīng)的一種重要類型的疾病或適應(yīng)癥是精神疾病。這樣的精神疾病或適應(yīng)癥的特定實(shí)例包括但不限于在DiagnosticandStatisticManualofMentalDisordersIV(精神障礙的診斷與統(tǒng)計(jì)手冊IV)(文本修訂2000;下文中被稱為"DSM-IV")中被歸類為以下的多種精神疾病和適應(yīng)癥心境障礙(例如，抑郁)、焦慮障礙(例如，0CD)、進(jìn)食障礙(例如，神經(jīng)性厭食和神經(jīng)性貪食)、沖動性障礙(例如，拔毛狂)、睡眠障礙(例如，與阿片樣物質(zhì)脫癮相關(guān)的失眠)、人格障礙(例如，ADHD)以及軀體形式障礙(例如，某些類型的疼痛)。已知對用AT和/或NT治療響應(yīng)的另一種重要類型的疾病或適應(yīng)癥是疼痛，疼痛包括急性疼痛和慢性疼痛，無論起源于傷害性的(例如軀體的或內(nèi)臟的)或非傷害性的(例如神經(jīng)性的或交感神經(jīng)的)(以下進(jìn)一步討論)。預(yù)期所有這些疾病或適應(yīng)癥均對用本文所述的E-10-0H-NT組合物的多種實(shí)施方案治療響應(yīng)。并且，如上所述，由于(-)-E-10-0H-NT對&組胺能受體的想不到的低的對抗性質(zhì)(antagonisticproperty)和以下進(jìn)一步討論的其他想不到的與未被認(rèn)識到的性質(zhì)，所以期望可獲得具有比用AT和/或NT治療較低的不利副作用的治療。當(dāng)用于治療這些多種疾病或適應(yīng)癥時，E-IO-OH-NT組合物可作為單一療法而單獨(dú)使用，或可選擇地，它們可聯(lián)合或伴隨其他治療而使用。例如，當(dāng)用于治療特定的精神疾病或適應(yīng)癥時，E-IO-OH-NT組合物可聯(lián)合或伴隨可用于治療相同的精神疾病或適應(yīng)癥的另一治療劑而施用。當(dāng)用于治療特定類型的疼痛時，E-IO-OH-NT組合物可聯(lián)合或伴隨可用于治療相同類型的疼痛的另一治療劑而施用。然而，這樣的聯(lián)合治療或伴隨治療不限于可用于治療相同適應(yīng)癥的化合物的組合。在某些實(shí)施方案中，聯(lián)合或伴隨治療劑而施用E-IO-OH-NT組合物可以是有用的或期望的，所述治療劑不能治療正在用E-IO-OH-NT組合物治療的疾病或病癥。在某些實(shí)施方案中，聯(lián)合或伴隨其他治療而施用的E-IO-OH-NT組合物包括富含(_)對映體的E-10-0H-NT。在某些實(shí)施方案中，E-IO-OH-NT組合物包括基本上對映體純的(-)-E-10-0H-NT。在某些實(shí)施方案中，E-IO-OH-NT組合物包括對映體純的(-)-E-10-0H-NT。合適的組合的代表性的非限制性的實(shí)例在后面的部分中更詳細(xì)地討論。盡管不期望受任何工作原理所束縛，但認(rèn)為AT和NT抑制諸如NE和/或5HT運(yùn)載體的一元胺運(yùn)載體的能力部分地是其許多治療性質(zhì)的原因。在本領(lǐng)域中有足夠的先例可循，至少以下疾病或適應(yīng)癥響應(yīng)于用NE和/或5HT運(yùn)載體的抑制劑治療泌尿病癥如尿失禁；心境障礙如抑郁和季節(jié)性情感障礙(SAD);認(rèn)知障礙如癡呆；精神障礙如精神分裂癥和躁狂癥；焦慮障礙；人格障礙如ADHD;進(jìn)食障礙如神經(jīng)性厭食和神經(jīng)性貪食；由濫用藥物或物質(zhì)而成癮造成的化學(xué)品依賴性，如對尼古丁、酒精、可卡因、海洛因、苯巴比妥和苯并二氮革類的成癮；停藥綜合征；內(nèi)分泌絮亂如高泌乳素血癥；沖動性障礙如拔毛狂和偷竊狂；抽動障礙如圖雷特綜合征；胃腸道病癥如腸易激綜合征(IBS);腸梗阻、胃輕癱、消化性潰瘍、胃食管反流疾病(GORD，或其同義詞GERD)、腸胃氣脹和其他功能性腸障礙如消化不良(例如，非潰瘍性消化不良(NUD))和非心源性胸痛(NCCP);血管病癥，包括諸如在大腦脈管系統(tǒng)中的血管痙攣；和混雜的其他病癥，包括帕金森病、休克和高血壓、性功能障礙、經(jīng)前期綜合征和纖維肌痛綜合征。如上所述，(-)-E-10-0H-NT還抑制NE運(yùn)載體和5HT運(yùn)載體以及NE和/或5HT的攝取。因此，在又一方面中，本公開提供了抑制NE和/或5HT的攝取的方法。所述方法通常包括使NE運(yùn)載體和/或5HT運(yùn)載體與有效抑制NE和/或5HT的攝取的量的(_)-E-IO-OH-NT相接觸。在某些實(shí)施方案中，所述方法在不存在AT和NT下實(shí)施。在某些實(shí)施方案中，使NE運(yùn)載體和/或5HT運(yùn)載體與如本文所述的E-10-0H-NT組合物相接觸。在某些實(shí)施方案中，所述E-10-0H-NT組合物包括富含(-)對映體的E-10-0H-NT。在某些實(shí)施方案中，所述E-10-0H-NT組合物包括基本上對映體純的(-)-E-10-0H-NT。在某些實(shí)施方案中，所述E-10-0H-NT組合物包括對映體純的(-)-E-10-0H-NT。所述方法可采用分離的運(yùn)載體或表達(dá)一種或兩種運(yùn)載體的細(xì)胞在體外實(shí)施，或者作為針對治療至少部分地由調(diào)節(jié)異常的NE和/或5HT的攝取或再攝取介導(dǎo)的疾病或病癥的治療方法而在體內(nèi)實(shí)施。至少部分地由調(diào)節(jié)異常的NE和/或5HT的攝取或再攝取介導(dǎo)的疾病或病癥的特定實(shí)例包括但不限于以上列出的那些疾病或病癥。歷史上，包括抑制NE(NRI)和/或5HT(SRI)的再攝取的那些抗抑郁藥的抗抑郁藥已被用作用于治療急性疼痛和慢性疼痛的一線治療，所述疼痛是起源于傷害性的或非傷害性的，例如，神經(jīng)病、皰疹后神經(jīng)痛(PHN)、與纖維肌痛相關(guān)的疼痛、與腸易激綜合征相關(guān)的疼痛和間質(zhì)性膀胱炎(Sindrup&Jensen,1999;Collins等人，2000;Crowell等人，2004)。近期的研究系統(tǒng)評價(jià)了對于在疼痛的嚙齒動物模型中的最大功效所需的NE運(yùn)載體和/或5HT運(yùn)載體的相對活性(Leventhal等人，2007)。觀察到的作用重現(xiàn)了對于治療神經(jīng)性疼痛病狀臨床觀察到的那些作用。換句話說，對NE運(yùn)載體具有較大親和力的化合物在治療疼痛中更有效，而對5HT運(yùn)載體具有更大親和力的化合物具有有限的功效(見，例如Max等人，1992;Collins等人，2000)。實(shí)際上，在比較四環(huán)NRI馬普替林與SRI帕羅西汀的雙盲、安慰劑對照的頭接頭研究中，對于被隨機(jī)化為馬普替林(45%)的研究完成者，相比于帕羅西汀(26%)或安慰劑(27%)，疼痛強(qiáng)度的降低顯著較大(Atkinson等人，1999)。近來，度洛西汀，即在5HT運(yùn)載體和NE運(yùn)載體中均具有功效的雙SRI和NRI，是被證明用于治療糖尿病神經(jīng)病變的第一個再攝取抑制劑(Bymaster等人，2005;Goldstein等人，2005)。本文說明的(_)-E-10-0H-NT的NRI活性使該化合物理想地適于治療許多不同類型的疼痛綜合征。實(shí)際上，在由申請人實(shí)施的并且在本文報(bào)導(dǎo)的試驗(yàn)中，(-)-E-10-0H-NT在傷害性炎性疼痛(見實(shí)施例6、15和16)和非傷害性神經(jīng)性疼痛(見實(shí)施例5和17-20)的疼痛的嚙齒動物模型中表現(xiàn)出強(qiáng)大的治療功效。在兩種模型中，對于(-)-E-10-0H-NT觀察到的功效與AT的功效相當(dāng)。因此，在又一方面中，本公開提供了治療包括人類的哺乳動物中疼痛的方法。所述方法通常包括對患有疼痛的、包括人類的哺乳動物施用有效治療該疼痛的量的本文所述的E-10-0H-NT組合物。在某些實(shí)施方案中，所述E-10-0H-NT組合物包括在對映體上富含(-)對映體的E-10-0H-NT。在某些實(shí)施方案中，所述E-10-0H-NT組合物包括基本上對映體純的(-)-E-10-0H-NT。在某些實(shí)施方案中，所述組合物包括對映體純的(-)-E-10-0H-NT。所述方法可用于治療多種不同類型的疼痛綜合征，疼痛綜合征包括起源于傷害性的(例如軀體的或內(nèi)臟的)或起源于非傷害性的(例如神經(jīng)性的或交感神經(jīng)的)急性疼痛或慢性疼痛。在某些實(shí)施方案中，所述疼痛是傷害性疼痛，其包括但不限于，炎性疼痛如與IBS或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎相關(guān)的炎性疼痛、與癌癥相關(guān)的疼痛和與骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)的疼痛。在某些實(shí)施方案中，所述疼痛是非傷害性疼痛，其包括但不限于，神經(jīng)性疼痛如皰疹后神經(jīng)痛(PHN)、三叉神經(jīng)痛、病灶周圍神經(jīng)損傷(focalperipheralnerveinjury)、痛性感覺缺失、中樞疼痛(例如，中風(fēng)后疼痛、由于脊髓損傷的疼痛或與多發(fā)性硬化相關(guān)的疼痛)和周圍神經(jīng)病(例如，糖尿病神經(jīng)病變、遺傳的神經(jīng)病或其他獲得性神經(jīng)病)。E-10-0H-NT組合物可單獨(dú)施用，或者它可以聯(lián)合或伴隨可用于治療疼痛或其他適應(yīng)癥的一種或多種其他藥物而施用。在后面的部分中提供可以在疼痛治療方案或管理方案中聯(lián)合或伴隨E-10-0H-NT組合物使用的藥物的特定非限制性的實(shí)例。期望本文所述的E-10-0H-NT組合物提供超過目前用于治療和/或管理疼痛且特9別是神經(jīng)性疼痛綜合征的藥物的顯著優(yōu)勢。用于治療疼痛的最常見的三環(huán)抗抑郁藥對抗^組胺能受體，并因此與顯著的體重增加和鎮(zhèn)靜作用相關(guān)。如上所述，(_)-E-10-0H-NT顯著較小程度地對抗該受體，并已證明在鎮(zhèn)靜的嚙齒動物模型中、以在體內(nèi)有效治療傷害性炎性疼痛和非傷害性神經(jīng)性疼痛的本文所說明的(_)-E-10-0H-NT的劑量不會誘導(dǎo)鎮(zhèn)靜。因此，本文所述的E-10-0H-NT組合物提供了一種治療或管理疼痛同時使體重增加和鎮(zhèn)靜最小化的方法。當(dāng)用于治療疼痛或本文所述的其他多種疾病和適應(yīng)癥中的任一種時，期望本文所述的E-10-0H-NT組合物提供另外的顯著優(yōu)勢。例如，AT和NT是已知的細(xì)胞色素P45。同工酶CYP2D6和CYP2C19的抑制劑，并因此被禁忌與由這些酶代謝的若干重要的藥物一起使用。已知至少部分地由CYP2D6代謝的并因此可能被禁忌與AT和NT—起使用的示例性的藥物包括s-美托洛爾、普羅帕酮、噻嗎洛爾、氯米帕明、地昔帕明、丙咪嗪、帕羅西汀、氟哌啶醇、利培酮、硫利達(dá)嗪、阿立哌唑、可待因、右美沙芬、度洛西汀、氟卡尼、美西律、昂丹司瓊、他莫昔芬、曲馬朵和文拉法辛。已知至少部分地由CYP2C19代謝的并因此可能被禁忌與AT和NT一起使用的示例性的藥物包括奧美拉唑、蘭索拉唑、泮托拉唑、雷貝拉唑、地西泮、苯妥英、苯巴比妥、氯米帕明、環(huán)磷酰胺和黃體酮。由本申請人獲得的并且在本文報(bào)導(dǎo)的數(shù)據(jù)(在實(shí)施例部分中更詳細(xì)地討論)說明了(_)-E-10-0H-NT是比AT和NT低效的CYP2C19和CYP2D6的抑制劑。部分地基于該令人驚訝的發(fā)現(xiàn)，認(rèn)為本文所述的E-10-0H-NT組合物將比AT和/或NT治療產(chǎn)生更少不期望的臨床結(jié)果，特別是當(dāng)聯(lián)合或伴隨至少部分地由這些細(xì)胞色素P^同工酶代謝的藥物使用時。本申請人還令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，(_)-E-IO-OH-NT具有比AT和NT對蕈毒堿性受體顯著較低的親和力、顯示出比AT和NT對人類Ether-a-Go-go相關(guān)基因(hERG)鉀通道較低的抑制，并且是比AT和NT對包括a工腎上腺素能受體和a2腎上腺素能受體的腎上腺素能受體較少對抗的。期望所有這些性質(zhì)相比于AT和NT治療產(chǎn)生改善的臨床益處。例如，蕈毒堿性受體的抑制已經(jīng)與口干、便秘和視力模糊相關(guān)聯(lián)。已報(bào)導(dǎo)02腎上腺素能受體的激動劑產(chǎn)生痛覺缺失(Ongioco等人，2000;Asano等人，2000;Hall等人，2001)，而拮抗劑抑制這些鎮(zhèn)痛作用(Kalso等人，1991;Millan&Colpaert1991;Petrovaara等人，1990)。盡管不期望受任何工作原理所束縛，但期望用本文所述的E-10-0H-NT組合物治療的患者將顯示出比用AT和/或NT治療的患者更少的不期望的副作用。特別地，期望用本文所述的E-10-0H-NT組合物治療的患者比用AT和NT治療的患者將經(jīng)歷除了以上討論的降低的藥物-藥物相互作用和鎮(zhèn)靜與食欲影響以外，較低水平的心臟毒性和便秘。實(shí)際上，以相等的口服劑量，(_)-E-10-0H-NT在胃腸運(yùn)動的嚙齒動物模型中比AT和NT產(chǎn)生少得多的便秘。不同于AT和NT，(-)-E-IO-OH-NT不會對抗a2腎上腺素能受體。因此，理論上，還預(yù)期本文所述的E-IO-OH-NT組合物在治療疼痛方面優(yōu)于AT和NT。實(shí)際上，如圖3和圖4所說明，(-)-E-10-0H-NT在傷害性疼痛和非傷害性疼痛的嚙齒動物模型中被證明優(yōu)于AT。雖然在文獻(xiàn)中已報(bào)導(dǎo)了(士)-E-10-0H-NT的合成(Remy等人，1973)，但迄今為止，單獨(dú)的(+)對映體和(_)對映體的手性合成從未被報(bào)導(dǎo)。因此，仍在另一方面中，本公開提供了合成E-10-0H-NT的(+)對映體和(-)對映體的手性特異性方法、可用于所述方法的中間體和合成所述中間體的手性特異性方法。在某些實(shí)施方案中，可用于(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT的手性特異性合成的中間體分別為E-5-(Y-溴亞丙基)-10，ll-二氫-10-羥基-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯的(+)對映體和(_)對映體，在圖1A中分別表示為化合物(+)-7和(-)-7。還未直接確定化合物7的(+)對映體和(-)對映體的手性10-碳的絕對構(gòu)型。因此，連接羥基與該手性碳原子(用星號表示手性)的鍵用未指定的立體化學(xué)說明。然而，化合物7的手性可由(-)-E-10-0HNT的絕對立體化學(xué)(在圖6中描述)來推斷，(-)-E-10-0HNT的絕對立體化學(xué)已通過(-)-E-10-0H-NT的蘋果酸鹽的X射線結(jié)晶學(xué)分析而確定。合成手性中間體(+)-7和(-)-7的方法通常包括在手性特異性噁唑硼烷(oxazaborolidine)催化劑存在下還原E_5_(Y_溴亞丙基)-10，11_二氫-10-氧代-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯(在圖1A中表示為化合物6)。合適的手性特異性噁唑硼烷催化劑的非限制性的示例性實(shí)施方案在圖1B中說明。在某些實(shí)施方案中，該手性特異性噁唑硼烷催化劑是(7aS)_3-甲基-1，1-二苯基全氫化-3-硼-2-氧雜吡咯并吡咯烷((7aS)_3_methyl_l，l_diphenylperhydro_3_bora_2_oxapyrrolizine)("7aS_CBS，，；在圖1A中的化合物S-10)，得到(-)-7。在某些實(shí)施方案中，該手性特異性噁唑硼烷催化劑是(7aR)-3-甲基-1，1-二苯基全氫化-3-硼-2-氧雜吡咯并吡咯烷("7aR-CBS";在圖IB中的化合物R-10)，得到(+)-7。(+)-E-10-0H-NT禾P(-)-E-10-0H-NT可分別由中間體(+)_7禾P(-)-7、通過使該中間體與甲胺反應(yīng)而合成。利用CBS作為手性特異性催化劑的合成的特定實(shí)施方案在圖1A中說明。在實(shí)施例部分提供的反應(yīng)條件下利用該方案可以容易地、高收率地合成(+)-E-10-0H-NT禾P(-)-E-IO-OH-NT，且對映體純度大于99%。7.附圖簡述圖1A提供了可用于合成對映體純的(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT的示例性方案；圖1B提供了可用于圖1A中說明的合成方案的手性特異性噁唑硼烷催化劑的示例性實(shí)施方案；圖2提供了說明(-)-E-10-0H-NT在鎮(zhèn)靜的大鼠旋轉(zhuǎn)棒模型中相對于AT和NT的非鎮(zhèn)靜作用的圖；圖3提供了說明(_)-E-10-0H-NT在傷害性炎性疼痛的嚙齒動物模型中相對于AT的優(yōu)越的抗痛覺過敏功效的圖；圖4提供了說明(-)-E-10-0H-NT在非傷害性神經(jīng)性疼痛的嚙齒動物模型中相對于AT的優(yōu)越的抗異常性疼痛功效(antiallodynicefficacy)的圖；圖5提供了說明(_)-E-10-0H-NT在GIT的嚙齒動物模型中相對于AT和NT在胃腸道移動性(gastrointestinaltractmobility)的優(yōu)越性質(zhì)的圖；圖6描述了通過X射線結(jié)晶學(xué)分析確定的(_)-E-10-0H-NT的絕對構(gòu)型；圖7提供了說明(-)-E-10-0H-NT在非傷害性神經(jīng)性疼痛的嚙齒動物模型中相對于(+)-E-10-0H-NT、外消旋的(士)-E-10-0H-NT和AT的優(yōu)越的抗異常性疼痛功效的圖；圖8提供了說明口服施用的(-)-E-10-0H-NT在非傷害性神經(jīng)性疼痛的嚙齒動物模型中相對于阿米替林的抗異常性疼痛功效的圖；圖9提供了描述在傷害性炎性疼痛的嚙齒動物模型中對于阿米替林的FCA和旋轉(zhuǎn)棒劑量響應(yīng)關(guān)系的曲線；圖10提供了描述在傷害性炎性疼痛的嚙齒動物模型中對于(-)-E-10-0H-NT的FCA和旋轉(zhuǎn)棒劑量響應(yīng)關(guān)系的曲線；圖11提供了說明(-)-E-10-0H-NT在傷害性炎性疼痛的嚙齒動物模型中的劑量相關(guān)的抗痛覺過敏活性的圖；圖12提供了說明由(+)-E-10-0H-NT在傷害性炎性疼痛的嚙齒動物模型中表現(xiàn)出的基本上的抗痛覺過敏活性的缺乏的圖；圖13提供了說明E-10-0H-NT的對映體在傷害性炎性疼痛的嚙齒動物模型中的有差異的抗痛覺過敏活性的圖；圖14提供了在傷害性炎性疼痛的嚙齒動物模型中比較E-10-0H-NT的對映體的抗痛覺過敏活性的圖；圖15A提供了說明阿米替林(AT)在抑郁的大鼠強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)?zāi)Ｐ椭械幕钚缘膱D；圖15B提供了說明(-)-E-10-0H-NT在抑郁的大鼠強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)?zāi)Ｐ椭械幕钚缘膱D；以及圖15C提供了說明(+)-E-10-0H-NT在抑郁的大鼠強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)?zāi)Ｐ椭性谒鶞y試的劑量下不顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的活性的圖。8.詳細(xì)描述8.1E-10-0H-NT化合物和組合物本公開涉及包括如下所示的、眾所周知的三環(huán)抗抑郁藥阿米替林(AT)和去甲替林(NT)的常見的主要代謝產(chǎn)物的E-幾何異構(gòu)體((S/R)-5-[3-甲基氨基-丙-(E)-亞基]-10，11-二氫-5H-二苯并[a，d]環(huán)庚烯-10-醇)(本文中稱為"E-10-0H-NT")的組合物由于在10-位的碳(用星號表示)的手性，該E-幾何異構(gòu)體包括兩種對映體(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT。由x射線結(jié)晶學(xué)分析確定的(-)異構(gòu)體的手性10-碳的絕對構(gòu)型在圖6中描述。因此(_)異構(gòu)體和(+)異構(gòu)體的手性如下描述<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(-)-E-10-0H-NT<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(+)-E-IO-OH-NT。在本文所述的多種組合物中，E-10-0H-NT化合物可以富含(_)對映體的非外消旋混合物存在、以基本上對映體純的(_)對映體存在或以對映體純的(_)對映體存在。在一個特定的實(shí)施方案中，本文所述的E-10-0H-NT組合物包括為基本上對映體純的(-)-E-10-0H-NT的E-10-0H-NT。在另一特定的實(shí)施方案中，本文所述的E-IO-OH-NT組合物包括為對映體純的(-)-E-10-0H-NT的E-IO-OH-NT。如本文所使用的，當(dāng)特定對映體超過另一對映體過量存在時，即，當(dāng)該對映體構(gòu)成組合物中的總E-IO-OH-NT的多于50%時，該組合物是"富含"特定對映體的。富含特定對映體的組合物將通常包括至少約60%、70%、80%、90%或更多的特定對映體。特定對映體的富含量可使用由本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)使用的常規(guī)分析方法來確定，常規(guī)分析方法包括在手性位移試劑存在下的NMR光譜法、使用手性柱的色譜分析和使用手性柱的高壓液相色譜分析。在某些實(shí)施方案中，單一對映體基本上不含相應(yīng)的對映體。"基本上不含"是指組合物包括少于約10%特定的、不期望的對映體，如使用本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)使用的常規(guī)分析方法所確定，例如以上提及的方法。在某些實(shí)施方案中，不期望的對映體的量可少于10%，例如少于9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%或更少。包含至少約95%特定對映體的富含對映體的組合物在本文中被稱為"基本上對映體純的"。包含至少約99%特定對映體的組合物在本文中被稱為"對映體純的"。在某些實(shí)施方案中，本文所述的富含對映體的E-10-0H-NT組合物包含(-)-E-10-0H-NT的純度為約60X、70X、80X或90X的E-10-0H-NT。換句話說，(-)對映體以約60%ee、70%ee、80%ee或90%ee范圍內(nèi)的對映體過量存在。在某些特定實(shí)施方案中，本文所述的基本上對映體純的E-10-0H-NT組合物包含(-)-對映體的純度為約95%-98%的￡-10-011-??；換句話說，(-)-E-10-0H-NT以約95%ee-98%ee范圍內(nèi)的對映體過量存在。在某些特定實(shí)施方案中，本文所述的對映體純的E-10-0H-NT組合物包含(-)對映體的純度為約99.0%至100%的E-10-0H-NT，換句話說，(-)-E-10-OH-NT以約99.0%ee至100%ee范圍內(nèi)的對映體過量存在。特定的、非限制性的示例性實(shí)施方案包括這樣的E-10-0H-NT組合物，其中對于所述E-10-0H-NT，(-)對映體的純度為約99.0%、99.1%、99.2%、99.3%、99.4%、99.5%、99.6%、99.7%、99.8%、99.9%或100%。在體內(nèi)，三環(huán)抗抑郁藥的羥基代謝產(chǎn)物是由多晶型的細(xì)胞色素P45。酶CYP2D6形成的。NT被認(rèn)為是通過所述酶以高度立體特異的方式被羥基化為E-10-0H-NT的(-)對映體(見，例如，Nordin&Bertilsson，1995)因此，理論上，(-)-E-10-OH-NT可以100%的對映體純度從生物來源中分離出來。相反，技術(shù)人員將理解，通過合成方法產(chǎn)生的(-)-E-10-0H-NT的組合物通常不會獲得100%的對映體純度。例如，在實(shí)施例部分中描述的合成方法中，通常獲得約90%ee至99.5%ee范圍內(nèi)的對映體純度的(_)對映體。除非另外特別說明，本文所述的對映體純的E-10-0H-NT組合物意圖包括生物源和合成源的對映體純的(_)-E-IO-OH-NT。因此，本文所述的對映體純的E-10-0H-NT組合物可包含從約99%至高達(dá)100%的對映體純的(+)-E-10-0H-NT。具有生物源(即，從生物來源分離的)的并因此可包含100%(-)-E-10-0H-NT的對映體純的E-10-0H-NT組合物的實(shí)施方案在本文中被稱為"生物衍生的對映體純的(-)-E-10-0H-NT組合物"。類似地，這樣的E-10-0H-NT在本文中被稱為"生物衍生的對映體純的(-)-E-10-0H-NT"。具有合成源的對映體純的E-10-0H-NT組合物的實(shí)施方案，包括借助于諸如CYP2D6的手性特異性生物催化劑而來自體內(nèi)制備的、并因此包含至少約99%但通常小于100%(-)-E-10-0H-NT的組合物，它們在本文中被稱為"合成衍生的對映體純的(_)-E-10-0H-NT組合物"。類似的，這樣的E-10-0H-NT在本文中被稱為"合成衍生的對映體純的(-)-E-10-OH-NT"。合成衍生的對映體純的(-)-E-lO-OH-NT通常包含約99%ee至99.9%ee范圍內(nèi)的對映體過量的(_)對映體。取決于期望的用途，E-IO-OH-NT可以游離堿存在于組合物中，或以諸如酸加成鹽的鹽的形式存在于組合物中。在某些實(shí)施方案中，E-10-0H-NT以藥學(xué)上可接受的鹽的形式存在于組合物中。通常，藥學(xué)上可接受的鹽是這樣的鹽基本上保持母體化合物的期望的藥理學(xué)活性中的一種或多種并且適于施用于人類。藥學(xué)上可接受的鹽包括與無機(jī)酸或有機(jī)酸形成的酸加成鹽。適于形成藥學(xué)上可接受的酸加成鹽的無機(jī)酸包括，作為實(shí)例且不是限制，氫鹵酸(例如，鹽酸、氫溴酸、氫碘酸，等)、硫酸、硝酸、磷酸及類似的酸。適于形成藥學(xué)上可接受的酸加成鹽的有機(jī)酸包括，作為實(shí)例且不是限制，乙酸、三氟乙酸、丙酸、己酸、環(huán)戊烷丙酸、乙醇酸、草酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、擰檬酸、棕櫚酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲?；?苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、烷基磺酸(例如，甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羥基乙磺酸等)、芳基磺酸(例如，苯磺酸、4-氯苯磺酸、2_萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟腦磺酸等)、4-甲基雙環(huán)[2，2，2]-辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羥基萘甲酸、水楊酸、硬脂酸、粘康酸及類似的酸。在某些實(shí)施方案中，E-10-0H-NT以有機(jī)酸加成鹽存在于組合物中，例如，與選自D-蘋果酸、L-蘋果酸和琥珀酸的有機(jī)酸形成的酸加成鹽。化合物的不同的鹽形式可表現(xiàn)出不同的性質(zhì)，例如不同的毒性、溶解性、穩(wěn)定性、吸濕性等，這是本領(lǐng)域眾所周知的。已發(fā)現(xiàn)與琥珀酸形成的(-)-E-10-0H-NT酸加成鹽(琥珀酸鹽)在鹽水中的溶解度(18mg/ml)高于與馬來酸形成的(-)-E-10-0H-NT鹽在鹽水中的溶解度(4.4mg/ml)，并且在性質(zhì)上是晶體的和不吸濕性的。因此，雖然外消旋的(士)-E-10-0H-NT的馬來酸鹽形式的用途先前已被用于對健康志愿者給藥(Bertilsson等人，1986)，但預(yù)期(-)-E-10-0H-NT的琥珀酸鹽可具有優(yōu)越的性能。例如，馬來酸先前已與急性腎小管壞死毒性相關(guān)(Everett等人，1993)。期望琥珀酸鹽將比馬來酸鹽將具有優(yōu)越的ADME和毒理學(xué)安全性的性質(zhì)。因此，在某些實(shí)施方案中，構(gòu)成組合物的(-)-E-10-0H-NT是琥珀酸鹽。無論是游離堿的形式或是鹽的形式，E-10-0H-NT可以無水形式存在于組合物中，或者它可以是溶劑合物和/或水合物的形式。使成溶劑合物的溶劑(solvatingsolvent)的強(qiáng)度和特性將部分地取決于用于合成并儲存E-10-0H-NT化合物的條件。除非另外特別說明，本文使用的表達(dá)"E-10-0H-NT"、(士)-E-10-0H-NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT意圖包括該化合物的所有的鹽和/或溶劑合物和/或水合物的形式。8.2合成方法(-)-E-10-0H-NT化合物可使用文獻(xiàn)中描述的方法來合成或制備，例如，外消旋的(士)-E-10-0H-NT可按照Bertrand等人，1994和Lassen等人，1983中所描述的來合成，上述文獻(xiàn)的公開內(nèi)容在此通過引用并入。富含對映體的(-)-E-10-0H-NT的組合物可從這樣的外消旋的混合物、通過使用手性分離的標(biāo)準(zhǔn)方法分離所需的對映體而制備(見，例如，ChiralS印arationTechniques:APracticalApproach(手性分離技術(shù)一禾中實(shí)用的方法)2001)。本公開的另一方面提供了使用手性特異性的合成方法來合成對映體純的E-10-0H-NT的異構(gòu)體的方法?？捎糜诤铣蓪τ丑w純的(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT的方法的示例性實(shí)施方案在圖1A中說明。根據(jù)圖lA，5-(Y-溴亞丙基)-10，ll-二氫-10-氧代-5H-二苯并[a，b]-環(huán)庚烯的E-異構(gòu)體(化合物6)在手性特異性的噁唑硼烷催化劑(以化合物S-10和R-10表示)存在下被還原。如所說明的，催化劑的S-異構(gòu)體(S-10)得到5-(Y-溴亞丙基)-10，ll-二氫-10-氧代-5H-二苯并[a，b]-環(huán)庚烯的(-)對映體(化合物(-)-7)，并且R-異構(gòu)體(R-10)得到(+)-異構(gòu)體，(+)-7。然后，這些中間體可通過與甲胺反應(yīng)而被轉(zhuǎn)化為其相應(yīng)的(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT產(chǎn)物?；衔?起始物料可使用文獻(xiàn)(見，例如，Bertrand等人，1994;Lassen等人，1983，其公開內(nèi)容通過引用并入)中描述的方法來合成?？蛇x擇地，它們可如圖1A中所說明的來合成。每個說明的步驟的特定條件在實(shí)施例部分中提供。在圖1A中說明了特定手性特異性的噁唑硼烷催化劑。還可使用其他手性特異性的噁唑硼烷催化劑。特異性的代表實(shí)例在圖1B中說明(在圖1B中，R是氫或甲基)并且在以下文獻(xiàn)中描述:Itsuno等人，1983(催化劑10a)，Corey等人，1987(催化劑10b)，Hong等人，1994(催化劑10c)，Quallich等人，1993(催化劑10d)和Berenguer等人，1994(催化劑10e)。通過CBS還原系統(tǒng)獲得的不對稱誘導(dǎo)高度受到連接至硼原子的不同基團(tuán)的影響。雖然最常用的是B-氫或B-甲基，但該基團(tuán)可以被調(diào)節(jié)以適應(yīng)特定的基質(zhì)。連接至硼原子的基團(tuán)將酮導(dǎo)引以便以這樣的方式結(jié)合在B-R基團(tuán)與該酮的小的取代基之間存在最小的相互作用(關(guān)于機(jī)械研究的細(xì)節(jié)，見Kim等人，2006)?？稍谄湎逻M(jìn)行還原的一般條件在上述參考文獻(xiàn)中描述并且還在以下文獻(xiàn)中描述Corey等人，1991;Corey等人，1992;Corey等人，1998;Paterson等人，2005;Zartman等人，2005;Tagat等人，2004;Duquette等人，2003;Yanagi等人，2003;和Coe等人，2003，其公開內(nèi)容在此通過引用并入。當(dāng)在-20。C下，在THF中，在硼烷-二甲基硫醚絡(luò)合物存在下進(jìn)行時，反應(yīng)可使用圖1A中說明的特定催化劑以高收率以及超過99%的對映體純度而實(shí)施，如實(shí)施例部分所描述的。8.3化合物與組合物的活性與用途如在實(shí)施例4和實(shí)施例14中更詳細(xì)地描述的，與AT和NT類似，(-)-E-IO-OH-NT對去甲腎上腺素("NE")運(yùn)載體具有強(qiáng)的親和力，并且是NE攝取的有效抑制劑。(-)-E-10-0H-NT還結(jié)合5-羥色胺運(yùn)載體并且抑制5HT的攝取，雖然具有比對于NE所觀察到的功效小的功效。文獻(xiàn)充分記載了抑制NE和/或5HT的再攝取以治療多種疾病和病癥的化合物的用途。例如，AT、NT、地昔帕明、度洛西汀、文拉法辛、西酞普蘭和simbalta被證實(shí)用于治療抑郁并且具有另外的非處方適應(yīng)癥用途；并且帕羅西汀和舍曲林被證實(shí)用于治療重度抑郁癥、OCD、驚恐性障礙、創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙、經(jīng)前焦慮性障礙和社交焦慮障礙，并且還具有另外的非處方適應(yīng)癥用途。在文獻(xiàn)中(見，例如，Nordin等人，1987b)已確定了外消旋的E-IO-OH-NT穿過血腦屏障的能力。因此，期望本文所述的E-10-0H-NT組合物可用于治療至少部分地由調(diào)節(jié)異常的NE再攝取介導(dǎo)的任何疾病和/或適應(yīng)癥。在某些特定的實(shí)施方案中，期望本文所述的E-10-0H-NT組合物可用于治療響應(yīng)于用其他NRI和SNRI劑治療的許多不同的疾病，所述其他NRI和SNRI劑包括，作為實(shí)例且不是限制，AT、NT、阿托西汀、瑞波西汀和馬普替林。已知至少部分地由調(diào)節(jié)異常的NE再攝取介導(dǎo)的疾病和病癥以及已知響應(yīng)于用NRI和SNRI化合物治療的疾病和病癥包括但不限于，泌尿病癥，包括尿失禁；心境障礙如抑郁和季節(jié)性情感障礙(SAD);認(rèn)知障礙如癡呆；精神障礙如精神分裂癥和躁狂癥；焦慮障礙；人格障礙如ADHD;進(jìn)食障礙如神經(jīng)性厭食和神經(jīng)性貪食；由濫用藥物或物質(zhì)而成癮造成的化學(xué)品依賴性，如對尼古丁、酒精、可卡因、海洛因、苯巴比妥和苯并二氮萆類的成癮；停藥綜合征；內(nèi)分泌絮亂如高泌乳素血癥；沖動性障礙如拔毛狂和偷竊狂；抽動障礙如圖雷特綜合征；胃腸道病癥如腸易激綜合征(IBS);腸梗阻、胃輕癱、消化性潰瘍、胃食管反流疾病(GORD，或其同義詞GERD)、腸胃氣脹和其他功能性腸障礙如消化不良(例如，非潰瘍性消化不良(NUD))和非心源性胸痛(NCCP);血管病癥，包括諸如在大腦脈管系統(tǒng)中的血管痙攣；和混雜的其他病癥，包括帕金森病、休克和高血壓、性功能障礙、經(jīng)前期綜合征和纖維肌痛綜合征。實(shí)際上，如實(shí)施例21中所說明的，(-)-E-10-0H-NT在抑郁的嚙齒動物模型中顯示出功效。疼痛也被認(rèn)為是至少部分地由調(diào)節(jié)異常的NE和/或5-HT再攝取介導(dǎo)的。實(shí)際上，許多NRI和/或SRI化合物也用于非處方適應(yīng)癥以治療疼痛。疼痛通常被理解為指不愉快的感官經(jīng)歷或情緒經(jīng)歷的感知或狀況，可以與或可以不與對組織的實(shí)際損傷相關(guān)。疼痛通常被理解為包括兩種寬泛的種類起源于傷害性的(例如軀體的或內(nèi)臟的)或非傷害性的(例如神經(jīng)性的或交感神經(jīng)的)急性疼痛和慢性疼痛(見，例如，Buschmann等人，2002;Jain，2000)。急性疼痛通常包括由以下引起的傷害性疼痛拉傷/扭傷、燒傷、心肌梗死、急性胰腺炎、外科手術(shù)、創(chuàng)傷和癌癥。慢性疼痛通常包括傷害性疼痛和非傷害性疼痛，所述傷害性疼痛包括但不限于，炎性疼痛如與IBS或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎相關(guān)的炎性疼痛、與癌癥相關(guān)的疼痛和與骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)的疼痛；所述非傷害性疼痛，包括但不限于，神經(jīng)性疼痛如皰疹后神經(jīng)痛(PHN)、三叉神經(jīng)痛、病灶周圍神經(jīng)損傷、痛性感覺缺失、中樞疼痛(例如，中風(fēng)后疼痛、由于脊髓損傷的疼痛或與多發(fā)性硬化相關(guān)的疼痛)和周圍神經(jīng)病(例如，糖尿病神經(jīng)病變、遺傳的神經(jīng)病或其他獲得性神經(jīng)病)。在實(shí)施例部分提供的動物數(shù)據(jù)證實(shí)(-)-E-10-0H-NT在治療傷害性炎性疼痛和非傷害性神經(jīng)性疼痛中均有效。因此，在某些實(shí)施方案中，本文所述的E-10-0H-NT組合物用于治療疼痛，所述疼痛包括以上討論的多種類型的疼痛。如上所述，在某些實(shí)施方案中，這樣的組合物包括基本上對映體純的(-)-E-10-0H-NT。在某些實(shí)施方案中，這樣的組合物包括對映體純的(-)-E-10-0H-NT。如本文所說明的，外消旋的(士)-E-10-0H-NT、(+)-E-IO-OH-NT和(-)-E-10-0H-NT顯示出對去甲腎上腺素和5-羥色胺運(yùn)載體相近的親和力(實(shí)施例14)，并且E-10-0H-NT的(-)異構(gòu)體和(+)異構(gòu)體對6種不同類型的受體和運(yùn)載體顯示出相近的體外活性，并且還對細(xì)胞色素P45。功能(實(shí)施例10)和hERG離子通道(實(shí)施例11)顯示出相近的體外活性，所述受體和運(yùn)載體即去甲腎上腺素運(yùn)載體(實(shí)施例4和實(shí)施例14)、5-羥色胺運(yùn)載體(實(shí)施例4和實(shí)施例14)、多巴胺運(yùn)載體(實(shí)施例4)、組胺能受體(實(shí)施例7)、a腎上腺素能受體(實(shí)施例9)和蕈毒堿性受體(實(shí)施例12)。鑒于這些數(shù)據(jù)，特別是當(dāng)共同考慮時，預(yù)期外消旋物與(+)對映體和(_)對映體將具有相近的體內(nèi)功效。雖然有這一期望，但本文提供的數(shù)據(jù)出人意料地說明了，E-10-0H-NT的(-)對映體在疼痛的嚙齒動物模16型中比外消旋物和(+)對映體兩者在治療上更有效，并且在抑郁的嚙齒動物模型中比(+)對映體更有效。更特別地，在所測試的劑量中(l)(-)-E-10-0H-NT在非傷害性神經(jīng)性疼痛的嚙齒動物L(fēng)-5單神經(jīng)結(jié)扎模型中比外消旋的(士)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT兩者都更有效(實(shí)施例15);(2)(-)-E-10-0H-NT在FCA誘導(dǎo)的傷害性疼痛的痛覺過敏測定中比(+)-E-10-0H-NT更有效(實(shí)施例19和實(shí)施例20);并且(3)(_)-E-10-OH-NT在抑郁的大鼠強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)?zāi)Ｐ椭斜?+)-E-10-0H-NT更有效(實(shí)施例21)。這些發(fā)現(xiàn)不能基于由外消旋的E-10-OH-NT及其(+)對映體和(-)對映體產(chǎn)生的體外數(shù)據(jù)而預(yù)測。實(shí)際上，基于在疼痛的大鼠L5SNL模型中采用(士)-E-10-OH-NT觀察到的功效的缺乏，沒有理由在該疾病的體內(nèi)動物模型中或任何其他的體內(nèi)動物模型中測試單獨(dú)的對映體。當(dāng)用于治療多種疾病或適應(yīng)癥時，E-10-0H-NT組合物通常將以有效治療該特定疾病或適應(yīng)癥的量而施用。如技術(shù)人員將認(rèn)識到的，被理解為"治療有效的"和提供治療益處的經(jīng)常取決于特定的疾病或適應(yīng)癥。技術(shù)人員基于對特定適應(yīng)癥的長期確立的標(biāo)準(zhǔn)將能夠確定治療有效量。通常，組合物的"治療有效的"量是這樣的量根除或改善正在治療的潛在的(underlying)疾病或適應(yīng)癥的量和/或根除或改善與潛在的病癥相關(guān)的癥狀中的一種或多種以便患者報(bào)告感覺或狀況上的改善的量，盡管患者仍可能遭受潛在的疾病或適應(yīng)癥。治療益處還包括中斷或減緩疾病或適應(yīng)癥的進(jìn)展，不管是否實(shí)現(xiàn)了改善。在抑郁的情形中，治療有效量是根除或改善抑郁或其癥狀的組合物的量，所述癥狀包括但不限于，改變心境、強(qiáng)烈的悲傷感、絕望、精神遲緩(mentalslowing)、注意力降低、悲觀的煩惱、激動、自我貶低、失眠、食欲缺乏、重量減輕、精力和性欲降低以及激素晝夜節(jié)律(hormonalcircadianrhythm)。在焦慮障礙的情形中，治療有效量是根除或改善焦慮障礙或其癥狀之一的組合物的量，所述癥狀包括但不限于，害怕對自己的行為失控、起因于無明顯原因的恐懼感、擔(dān)心大災(zāi)難、不安、神經(jīng)質(zhì)、對未來事件的惱人的不確定性、頭痛、疲勞和亞急性的自發(fā)癥狀。在疼痛的情形中，治療有效量是根除或改善疼痛或其癥狀的組合物的量，所述癥狀包括但不限于，剌痛感、燒灼感、觸電感、痛(aching)、不適、酸痛、緊縮感(tightness)、僵硬、失眠、麻木和虛弱。8.4聯(lián)合治療AT和NT已與其他藥劑聯(lián)合用于治療多種疾病和病癥。例如，AT已與利眠寧聯(lián)合用于治療焦慮障礙和重度抑郁癥，并且已與奮乃靜聯(lián)合用于治療焦慮障礙、精神分裂癥和重度抑郁癥。此外，NT已與布替耐德(budenoside)聯(lián)合用于治療哮喘。已知AT、NT和本文所述的E-10-0H-NT組合物抑制NE和5HT的攝取，預(yù)期本文所述的E-10-0H-NT組合物也可用于聯(lián)合治療。當(dāng)用于聯(lián)合治療時，本文所述的E-10-0H-NT組合物可聯(lián)合其他藥劑或作為其他藥劑的佐劑而使用。當(dāng)本文所述的E-10-0H-NT組合物與其他藥劑聯(lián)合使用時，這兩種藥劑可以單一藥物組合物而施用，或者它們可以單獨(dú)的藥物組合物而施用?？赏ㄟ^相同的施用途徑或通過不同的施用途徑施用該兩種組分。該兩種組分還可互相同時地或按順序地施用。因此，聯(lián)合治療的每種組分可以單獨(dú)地施用但與其他組分的施用時間足夠近以便提供所期望的效果。17雖然包括本文所述的E-10-0H-NT組合物的聯(lián)合治療可用于許多情形中，但與本文所述的E-IO-OH-NT組合物一起使用的其他藥劑將取決于正在治療的特定疾病或適應(yīng)癥。技術(shù)人員基于對特定適應(yīng)癥的長期確立的標(biāo)準(zhǔn)將能夠確定什么其他藥劑與本文所述的E-IO-OH-NT組合物聯(lián)合使用。盡管不期望受到任何工作原理所束縛，但聯(lián)合治療可包括施用本文所述的E-IO-OH-NT組合物與已知抑制NE和5HT的再攝取的其他藥劑?？蛇x擇地，聯(lián)合治療可包括施用本文所述的E-IO-OH-NT組合物與不會抑制NE和5HT的再攝取的藥劑。因此，本文所述的E-10-0H-NT組合物可聯(lián)合抑制NE和/或5HT的再攝取的其他藥劑以及雙重一元胺(dualmonoamine)和三重一元胺(triplemonoamine)攝取抑制劑以治療抑郁。本文所述的E-10-0H-NT組合物還可聯(lián)合選擇性的5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRI)以治療抑郁，所述抑制劑例如但不限于，氟西汀、帕羅西汀、氟伏沙明、cit即rolam和舍曲林。用于治療抑郁的聯(lián)合治療還可包括一元胺氧化酶抑制劑(MAOI)，例如但不限于，反苯環(huán)丙胺、苯乙肼和異卡波肼?？蛇x擇地，所述聯(lián)合治療可包括諸如但不限于，阿莫沙平、馬普替林和曲唑酮的雜環(huán)抗抑郁藥或諸如但不限于文拉法辛、奈法唑酮和米氮平的其他抗抑郁藥。此外，用于治療抑郁的聯(lián)合治療可包括本文所述的E-10-0H-NT組合物和諸如但不限于利眠寧的抗焦慮藥、或諸如但不限于奮乃靜的抗精神病藥。期望本文所述的E-10-0H-NT組合物如同AT和NT—樣可用于治療焦慮障礙、精神分裂癥和哮喘的聯(lián)合治療。在焦慮障礙的情形中，本文所述的E-10-0H-NT組合物可與諸如但不限于利眠寧的抗焦慮藥聯(lián)合。在精神分裂癥的情形中，本文所述的E-10-0H-NT組合物可與已知治療精神分裂癥的諸如但不限于奮乃靜的藥劑聯(lián)合。在哮喘的情形中，本文所述的E-10-0H-NT組合物可與已知治療哮喘的諸如皮質(zhì)激素類的藥劑聯(lián)合皮質(zhì)激素類包括但不限于布替耐德。還期望本文所述的E-10-0H-NT組合物可用于治療疼痛的聯(lián)合治療。因此，本文所述的E-IO-OH-NT組合物可與其他鎮(zhèn)痛藥聯(lián)合，所述鎮(zhèn)痛藥包括但不限于，大麻素(ca皿abinoid)和阿片樣物質(zhì)?？蛇m用于聯(lián)合治療的許多大麻素是可得到的。因此，聯(lián)合治療可包括選自A9-四氫大麻酚和大麻二酚及其混合物的大麻素。可選擇地，本文所述的E-IO-OH-NT組合物可與至少一種阿片樣物質(zhì)聯(lián)合使用?？蛇m用于聯(lián)合治療以治療疼痛的多種阿片樣物質(zhì)藥是可得到的。同樣地，聯(lián)合治療可包括選自但不限于以下的阿片樣物質(zhì)阿芬太尼、烯丙羅定、阿法羅定、阿尼利定、芐基-嗎啡、貝齊米特、丁丙諾啡、布托啡諾、氯尼他秦、可待因、環(huán)佐辛、地素嗎啡、右嗎拉胺、地佐辛、地恩丙胺、二乙酰嗎啡、雙氫可待因、雙氫嗎啡、地美沙朵、地美庚醇、二甲噻丁、dio即hetylbutyrate、地匹哌酮、依他佐辛、依索庚嗪、乙甲噻丁、乙基嗎啡、依托尼秦、芬太尼、海洛因、氫可酮、氫嗎啡酮、羥哌替啶、異美沙酮、凱托米酮、左洛啡烷、左啡諾、左芬啡烷、洛芬太尼、洛哌丁胺、度冷丁(哌替啶)、美普他酚、美他佐辛、美沙酮、美托酮、嗎啡、麥羅啡、納布啡、那碎因、尼可嗎啡、去甲左啡諾、去甲美沙酮、烯丙嗎啡、去甲嗎啡、norpinanone、鴉片、羥考酮、羥嗎啡酮、阿片全堿、噴他佐辛、苯嗎庚酮、非諾啡烷、非那佐辛、苯哌利定、匹米諾定、哌腈米特、proph印tazine、二甲哌替啶、丙派利定、丙吡胺、右丙氧芬、舒芬太尼、替利定、曲馬朵、其非對映體、其藥學(xué)上可接受的鹽、其絡(luò)合物；及其混合物。在某些實(shí)施方案中，所述阿片樣物質(zhì)選自嗎啡、可待因、羥考酮、氫可酮、雙氫可待因、右丙氧芬、芬太尼、曲馬朵及其混合物。聯(lián)合治療的阿片樣物質(zhì)組分還可包括常規(guī)上可用于鎮(zhèn)痛藥和/或咳嗽_風(fēng)寒-鎮(zhèn)咳藥(cough-cold-antitussive)組合產(chǎn)品的一種或多種其他活性成分。這樣的常規(guī)成分包括例如，阿司匹林、撲熱息痛、右美沙芬、苯丙醇胺、去氧腎上腺素、氯苯那敏、咖啡因和/或愈創(chuàng)甘油醚。可包括在阿片樣物質(zhì)組分中的典型的或常規(guī)的成分在例如Physicians'DeskReference(醫(yī)師案頭參考)，1999中描述，其公開內(nèi)容以其整體據(jù)此通過引用并入本文。阿片樣物質(zhì)組分還可包括可被設(shè)計(jì)為增強(qiáng)該阿片樣物質(zhì)的鎮(zhèn)痛功效和/或降低鎮(zhèn)痛耐受發(fā)展(analgesictolerancedevelopment)的一種或多種化合物。這樣的化合物包括例如，右美沙芬或其他NMDA拮抗劑(Mao等人，1996)、L_364，718和其他CCK拮抗劑(Dourish等人，1988)、N0S抑制劑(Bhargava等人，1996)、PKC抑制劑(Bilsky等人，1996)和強(qiáng)啡肽拮抗劑或抗血清(Nichols等人，1997)。前述文獻(xiàn)中的每一個的公開內(nèi)容均以其整體據(jù)此通過引用并入本文?？蛇x擇地，本文所述的化合物可與諸如以下的至少一種非阿片樣物質(zhì)鎮(zhèn)痛藥一起使用雙氯芬酸、C0X2抑制劑、阿司匹林、撲熱息痛、布洛芬、萘普生和類似物及其混合物。此外，在治療疼痛的情形中，聯(lián)合治療可包括消炎藥，其包括但不限于皮質(zhì)激素類、氨基芳基羧酸衍生物，例如但不限于依托芬那酯、甲氯芬那酸、甲芬那酸、尼氟酸；芳基乙酸衍生物，例如但不限于阿西美辛、氨基苯?；揭宜?、桂美辛、氯吡酸、雙氯芬酸、芬氯酸、苯克洛酸、芬克洛酸、芬替酸、葡美辛、伊索克酸、氯那唑酸、甲嗪酸、奧沙美辛、丙谷美辛、舒林酸、噻拉米特和托美丁；芳基丁酸衍生物，例如但不限于布替布芬和芬布芬；芳基羧酸，例如但不限于克力丹酸、酮咯酸和替諾立定；芳基丙酸衍生物，例如但不限于布氯酸、卡洛芬、非諾洛芬、氟諾洛芬、布洛芬、異丁普生、奧沙普秦、吡酮洛芬、吡洛芬、普拉洛芬、丙替嗪酸和噻洛芬酸；吡唑類，例如但不限于美比利唑；吡唑啉酮類，例如但不限于氯非宗、非普拉宗、莫非布宗、羥布宗、保泰松、苯基吡唑啉二酮(phenylpyrazolidininone)、琥布宗和噻唑丁炎酮；水楊酸衍生物，例如但不限于溴水楊醇、芬度柳、乙二醇單水楊酸酯、美沙拉秦、水楊酸l-萘酯、奧沙拉秦和柳氮磺吡啶；噻嗪甲酰胺類，例如但不限于屈噁昔康、伊索昔康和吡羅昔康；以及其他消炎藥，例如但不限于e-乙酰氨基己酸、s-腺苷蛋氨酸、3-氨基-4-羥基丁酸、阿米西群、節(jié)達(dá)酸、布可隆、卡巴腙、聯(lián)苯吡胺、地他唑、愈創(chuàng)藍(lán)油烴、麥考酚酸的雜環(huán)氨基烷基酯及衍生物、萘丁美酮、尼美舒利、奧古蛋白、奧沙西羅、噁唑衍生物、瑞尼托林、哌福肟、2-取代的-4，6-二-叔丁基-s-羥基-l，3-嘧啶、普羅喹宗和替尼達(dá)普。8.5制劑和施用本文所述的(-)-E-10-0H-NT化合物或其藥學(xué)上的鹽可與基于所選的施用途徑和按照例如Remington'sPharmaceuticalSciences(雷明頓的藥物科學(xué))，2005中描述的標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐而選擇的藥物載體組合，該文獻(xiàn)的公開內(nèi)容以其整體據(jù)此通過引用并入本文?；钚猿煞峙c載體的相對比例可以例如，通過化合物的溶解性和化學(xué)性質(zhì)、所選的施用途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐而確定。本文公開的(_)-E-10-0H-NT化合物和/或組合物可通過使得活性劑與患者體內(nèi)所期望的一個或多個作用部位接觸的任何方式而施用。化合物可通過可用于與醫(yī)藥品組合使用的任何常規(guī)方式、作為單獨(dú)的治療劑或與治療劑聯(lián)合而施用。例如，它們可作為藥物組合物中的單一活性劑而施用，或者它們可與其他治療性活性成分聯(lián)合使用。本文所述的(-)-E-10-0H-NT化合物和/或組合物可以適合于所選的諸如口服或胃腸外的施用途徑的多種形式而施用于哺乳動物宿主。在這方面的胃腸外施用包括通過以下途徑的施用靜脈內(nèi)施用、肌肉內(nèi)施用、皮下施用、眼內(nèi)施用、滑膜內(nèi)施用、跨上皮施用，其包括經(jīng)皮、眼的(ophthalmic)、舌下和口腔的施用；經(jīng)吹入法、氣溶膠和直腸系統(tǒng)的局部施用，其包括眼的、真皮的、眼睛的(ocular)、直腸的和鼻吸入的施用。(-)-E-10-0H-NT化合物和/或組合物可以例如與惰性稀釋劑或與可吸收的可食用的載體一起被配制用于口服施用，或者它可被封裝在硬殼或軟殼的明膠膠囊中，或者它可以被壓成片劑，或者它可以直接與飲食中的食物合并。對于口服治療性的施用，活性化合物可與賦形劑合并，并且以下面的形式使用可吸收的片劑、口腔片劑、錠劑、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿劑、干膠片及類似形式。在這樣的治療上有用的組合物中的活性化合物的量優(yōu)選為使得將會獲得合適的劑量?？芍苽鋬?yōu)選的根據(jù)本發(fā)明的組合物或制劑，以便口服劑量單位形式包含從約0.lmg至約1000mg的每種活性化合物(及其中的范圍和特定濃度的所有組合與亞組合(subcombination))。片劑、錠劑、丸劑、膠囊及類似物還可包含以下物質(zhì)中的一種或多種諸如黃蓍膠、阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠的粘合劑；諸如磷酸二鈣的賦形劑；諸如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、海藻酸及類似物的崩解劑；諸如硬脂酸鎂的潤滑劑；諸如蔗糖、乳糖或糖精的增甜劑；或諸如薄荷、冬青油或櫻桃調(diào)味品的調(diào)味劑。當(dāng)劑量單位形式是膠囊時，除了以上類型的物質(zhì)之外，還可包含液體載體。多種其他的物質(zhì)可作為包衣存在，例如，片劑、丸劑或膠囊可用紫膠、糖或兩者包覆。糖漿劑或酏劑可包含活性化合物、作為增甜劑的蔗糖、作為防腐劑的尼泊金甲酯和尼泊金丙酯、染料和諸如櫻桃或橙子香料的調(diào)味品。當(dāng)然，用于制備任何劑量單位形式的任何物質(zhì)優(yōu)選是藥學(xué)上純的并且在所使用的量中基本上無毒性的。(-)-E-10-0H-NT化合物和/或組合物還可以被配制用于胃腸外施用或腹膜內(nèi)施用。作為游離堿或藥理學(xué)上可接受的鹽的活性化合物的溶液可在適當(dāng)?shù)嘏c諸如羥丙基纖維素的表面活性劑混合的水中制備。還可在甘油、液體聚乙二醇及其混合物中以及在油中制備分散體。在通常的儲存和使用條件下，這些制劑可包含防腐劑以防止微生物的生長。適于通過注射施用的組合物通常包括例如，用于即時制備無菌可注射溶液或分散體的無菌水溶液或分散體以及無菌粉末。在所有情況下，優(yōu)選無菌的形式并且是流體的形式以提供容易的可注射性(syringability)。所述組合物優(yōu)選在制造和儲存條件下是穩(wěn)定的，并且優(yōu)選在防止諸如細(xì)菌和真菌的微生物的污染作用下保存。載體可以是包含例如以下物質(zhì)的溶劑或分散體介質(zhì)水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇、液體聚乙二醇及類似物)、其合適的混合物以及植物油。例如通過使用諸如卵磷脂的包衣、通過在分散體的情況下維持所需的粒徑和通過使用表面活性劑而維持適當(dāng)?shù)牧鲃有?。通過諸如對羥基苯甲酸酯類、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞及類似物的多種抗菌劑和抗真菌劑可獲得對微生物作用的預(yù)防。在許多情況下，優(yōu)選包括等滲劑，例如糖或氯化鈉。通過使用延遲吸收的藥劑可獲得可注射組合物的延長的吸收，所述藥劑例如單硬脂酸鋁和明膠。無菌可注射溶液可通過如下制備將所需的量的活性化合物與以上列舉的多種其他成分并入合適的溶劑中，如果需要，隨后是過濾滅菌。通常，分散體可通過將滅菌的活性成分并入無菌媒介物中而制備，所述無菌媒介物包含堿性的分散體介質(zhì)和所需的來自以上列舉的那些其他成分。在用于制備無菌可注射溶液的無菌粉末的情況下，優(yōu)選的制備方法可包括真空干燥和凍干技術(shù)，所述技術(shù)得到活性成分的粉末，加上來自其先前的無菌過濾的溶液的另外的所需要的成分。8.6有效劑量(-)-E-10-0H-NT化合物和/或組合物通常以如本文所述的治療有效量施用。施用的化合物或組合物的量取決于多種因素，包括例如在治療的特定征候、施用模式、所期望的益處是預(yù)防性的還是治療性的、正在治療的征候的嚴(yán)重性和患者的年齡與體重、特定活性化合物的生物利用度等。確定有效劑量完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)。劑量通常在從約0.000lmg/kg/天或0.00lmg/kg/天或0.0lmg/kg/天至約0.lmg/kg/天或1.0mg/kg/天或2.Omg/kg/天或2.5mg/kg/天或5.Omg/kg/天或10.Omg/kg/天或20.Omg/kg/天或25.Omg/kg/天或50.Omg/kg/天或75.Omg/kg/天或100mg/kg/天的范圍內(nèi)，期望的劑量為約5mg/天至約500mg/天，但可以更高或更低，取決于(除了其他因素以外)在治療的特定疾病或征候、化合物和/或組合物的活性、其生物利用度、施用模式和多種以上討論的因素。可單獨(dú)調(diào)節(jié)劑量和時間間隔以提供足以維持治療效果或預(yù)防效果的所述化合物和/或組合物的血漿水平。作為非限制性的實(shí)例，所述化合物和/或組合物可每天一次或每天多次地施用，取決于(除了其他)施用模式、在治療的特定征候和開處方的醫(yī)師的判斷。在諸如本地局部施用(localtopicaladministration)的本地施用或選擇性攝取的情況下，活性化合物和/或組合物的有效本地濃度可能不與血漿濃度相關(guān)。技術(shù)人員將能夠優(yōu)化本地劑量而無需不合理的試驗(yàn)。可用于治療疼痛的(-)-E-10-0H-NT化合物和/或組合物的初始劑量可由諸如實(shí)施例部分描述的動物模型的體內(nèi)數(shù)據(jù)中估計(jì)。此外，初始劑量可由本領(lǐng)域中可得的關(guān)于用于治療多種病癥的AT和NT的有效劑量的數(shù)據(jù)來估計(jì)。見，例如，Bryson&Wilde，1996(報(bào)導(dǎo)用于治療慢性疼痛的AT的起始劑量為10mg/天至25mg/天，以10mg/周至25mg/周增加至最大建議劑量75mg/天，或耐受劑量)和本領(lǐng)域中可得的關(guān)于在施用外消旋的(±)-E-10-OH-NT、AT和/或NT之后外消旋的(±)-E-IO-OH-NT及其單獨(dú)的對映體的藥代動力學(xué)性質(zhì)或藥效學(xué)性質(zhì)的數(shù)據(jù)(Dahl-P皿stinen等人，1989(報(bào)導(dǎo)在施用單一的75mg口服劑量的外消旋的(士)-E-10-0H-NT之后對于單獨(dú)的對映體的平均AUC);Bertilsson等人，1986(報(bào)導(dǎo)在施用從10mg至100mg范圍的劑量之后E-10-0H-NT的藥代動力學(xué)性質(zhì))；delbroek等人，1986(報(bào)導(dǎo)在施用75mgAT之后E-10-0H-NT的穩(wěn)態(tài)濃度))?；趯?shí)施例5、實(shí)施例6和實(shí)施例15-實(shí)施例21中描述的動物模型，相信用于治療人類中的疼痛的(-)-E-10-0H-NT的有效劑量可通過施用足以獲得類似于在對大鼠腹膜內(nèi)施用30mg/kg之后所獲得的血漿濃度的(-)-E-10-0H-NT的劑量而獲得。同樣地，在某些實(shí)施方案中，用于治療疼痛的(-)-E-10-0H-NT的有效劑量是獲得當(dāng)(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜內(nèi))施用于大鼠時獲得的血漿濃度所需的劑量。用于治療疼痛的(-)-E-10-0H-NT的劑量通常在從約O.0001mg/kg/天或0.001mg/kg/天或O.0lmg/kg/天至約O.lmg/kg/天或1.Omg/kg/天或2.Omg/kg/天或2.5mg/kg/天或5.Omg/kg/天或10.Omg/kg/天或20.Omg/kg/天或25.Omg/kg/天或50.Omg/kg/天或75.Omg/kg/天或100mg/kg/天的范圍內(nèi)，期望的劑量為約5mg/天至約500mg/天，但可以更高或更低。相信lOmg/天至約20mg/天或25mg/天或30mg/天或35mg/天或40mg/天或45mg/天或50mg/天或60mg/天或70mg/天或80mg/天或90mg/天或95mg/天或lOOmg/21天或150mg/天或200mg/天或250mg/天或300mg/天之間的(-)-E-IO-OH-NT的口服劑量將可有效治療疼痛。因此，某些實(shí)施方案包括施用在約10mg/天至約100mg/天之間的(-)-E-10-0H-NT的口服劑量?；谠趯?shí)施例21中描述的強(qiáng)迫游泳動物模型試驗(yàn)，相信用于治療人類中的抑郁的(-)-E-10-0H-NT的有效劑量可通過施用足以獲得類似于在對大鼠腹膜內(nèi)施用30mg/kg之后所獲得的血漿濃度的(-)-E-10-0H-NT的劑量而獲得。同樣地，在某些實(shí)施方案中，用于治療抑郁的(-)-E-10-0H-NT的有效劑量是獲得當(dāng)(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜內(nèi))施用于大鼠時獲得的血漿濃度所需的劑量。用于治療抑郁的(-)-E-10-0H-NT的劑量通常在從約O.0001mg/kg/天或0.OOlmg/kg/天或O.Olmg/kg/天至約O.lmg/kg/天或1.Omg/kg/天或2.Omg/kg/天或2.5mg/kg/天或5.Omg/kg/天或10.Omg/kg/天或20.Omg/kg/天或25.Omg/kg/天或50.Omg/kg/天或75.Omg/kg/天或100mg/kg/天的范圍內(nèi)，期望的劑量為約5mg/天至約500mg/天，但可以更高或更低。相信10mg/天至約20mg/天或25mg/天或30mg/天或35mg/天或40mg/天或45mg/天或50mg/天或60mg/天或70mg/天或80mg/天或90mg/天或95mg/天或lOOmg/天或150mg/天或200mg/天或250mg/天或300mg/天之間的(-)-E-IO-OH-NT的口服劑量將可有效治療抑郁。因此，某些實(shí)施方案包括施用在約10mg/天至約100mg/天之間的(-)-E-10-0H-NT的口服劑量。此外，基于對E-10-0H-NT及其對映體的藥代動力學(xué)性質(zhì)的先前的報(bào)導(dǎo)，相信用在約140nM與約220nM之間的血槳水平的E-10-0H-NT的對映體可治療抑郁。基于報(bào)導(dǎo)的(-)-E-10-0H-NT的藥代動力學(xué)性質(zhì)，相信用在約140nM與220nM之間的血漿水平的(-)-E-IO-OH-NT可治療抑郁，并且通過施用約30mg/天至約35mg/天或40mg/天或45mg/天或50mg/天或55mg/天或60mg/天或65mg/天或70mg/天或75mg/天或80mg/天或85mg/天或90mg/天或95mg/天或lOOmg/天或150mg/天或200mg/天或250mg/天或300mg/天可獲得這些血槳水平。因此，某些實(shí)施方案包括以獲得在約140nM與220nM之間的血槳水平所需的日劑量施用(-)-E-10-0H-NT。在其他實(shí)施方案中，(-)-E-lO-OH-NT的劑量為在約30mg/天與約lOOmg/天之間。在聯(lián)合治療的情形中，基于以上公開的(-)-E-10-0H-NT的劑量和對特定適應(yīng)癥長期確立的標(biāo)準(zhǔn)，組合的藥劑的合適的劑量將是技術(shù)人員容易確定的。作為一般原則，當(dāng)大麻素、阿片樣物質(zhì)和/或其他藥劑與本文所述的E-IO-OH-NT組合物聯(lián)合使用時，通常劑量可在從約0.01至約100mg/kg/天的大麻素、阿片樣物質(zhì)和/或其他活性化合物和約0.001至約100mg/kg/天的本文所述的E-10-0H-NT組合物的范圍內(nèi)。在某些實(shí)施方案中，劑量可以是約0.1至約10mg/kg/天的大麻素、阿片樣物質(zhì)和/或其他活性化合物和約0.01至約10mg/kg/天的本文所述的E-10-0H-NT組合物，并且在其他實(shí)施方案中，日劑量可以是約1.Omg的大麻素、阿片樣物質(zhì)和/或其他活性化合物和約0.lmg的本文所述的E-10-0H-NT組合物?？蛇x擇地，當(dāng)本文所述的E-10-0H-NT組合物與大麻素化合物(例如，八9-四氫大麻酚或大麻二酚)、阿片樣物質(zhì)化合物(例如，嗎啡)和/或其他藥劑組合時并且該組合物是口服施用時，通常劑量可以在約15至約200mg的大麻素、阿片樣物質(zhì)和/或其他藥劑和約0.1至約4mg的本文所述的E-10-0H-NT組合物的范圍內(nèi)。8.7(_)-E-IO-OH-NT的有利性質(zhì)由于本文討論的不利副作用，AT和NT不再用作用于抑郁或疼痛的一線治療。令人驚奇地，本文所述的E-10-0H-NT組合物已明顯降低了不利副作用。例如，幾十年來已知(1)對^組胺能受體具有高親和力的中央活性藥物(centrallyactivedrug)能夠減少體重增加，(2)某些抗精神病藥是有效的&組胺能受體拮抗劑，并且(3)抗精神病藥能夠誘導(dǎo)體重增加。有趣地，具有高^組胺能受體親和力的其他精神活性的化合物，例如AT(Altamura等人，1989)，已經(jīng)與顯著的體重增加相關(guān)。已說明了是有效的&組胺能拮抗劑的、諸如奧氮平和氯氮平的非典型抗精神病藥以及諸如AT和米氮平的三環(huán)和四環(huán)抗抑郁藥分別具有誘導(dǎo)體重增加的高傾向性(Wirshing，1999)。此外，由&組胺能拮抗介導(dǎo)的體重增加被列出為用三環(huán)抗抑郁藥的短期和長期治療的常見的和眾所周知的副作用，主要是作為食欲過盛的結(jié)果(Richelson,2001;Khawam等人，2006;Deshmukh等人，2003)。雖然先前的研究已充分說明&組胺能受體拮抗增加嚙齒動物的進(jìn)食而H2組胺能拮抗不增加(Sakata等人，1988;Fukagawa等人，1989)，但&組胺能拮抗可誘導(dǎo)體重增加的機(jī)理目前是未知的。此外，神經(jīng)元組胺的耗盡增加進(jìn)食(Menon等人，1971;Sakai等人，1995)。最后，&敲除小鼠(knockoutmice)對瘦蛋白的食欲抑制作用是相對有抗性的，并且當(dāng)置于高脂肪飲食中時易于肥胖(Masaki等人，2001a，Masaki等人，2001b)。合起來考慮，這些結(jié)果暗示&組胺能受體通過瘦蛋白依賴的機(jī)理調(diào)節(jié)進(jìn)食行為。由Kroeze和合作者的研究(Kroeze等人，2003)說明，當(dāng)研究大量典型的和非典型的抗精神病藥時&組胺能受體親和力與短期體重增加顯著相關(guān)。這些結(jié)果意味著具有相對高的&組胺能受體親和力的抗精神病藥可能誘導(dǎo)短期體重增加。如實(shí)施例7中詳細(xì)說明的，非常出乎意料地，當(dāng)與AT和NT的&組胺能親和力相比較時，(-)-E-10-0H-NT對&組胺能受體的親和力分別降低220倍和40倍?；谶@些體外結(jié)果，預(yù)期(_)-E-OH-NT比AT和NT產(chǎn)生較少的體重增加?；?-)-E-10-OH-NT對&組胺受體的親和力，還預(yù)期用本文所述的E-10-OH-NT組合物的治療比AT和NT產(chǎn)生較少的鎮(zhèn)靜。實(shí)際上，如在實(shí)施例8中更詳細(xì)地討論，使用通常用于評價(jià)藥物的鎮(zhèn)靜作用的大鼠旋轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)，AT(30mg/kg，腹膜內(nèi))和NT(30mg/kg，腹膜內(nèi))對旋轉(zhuǎn)棒性能的作用的大小是相近的，在30分鐘時的峰值缺乏分別為51±20%和60±14%。然而，對于(-)-E-10-OH-NT(30mg/kg，腹膜內(nèi))未觀察到旋轉(zhuǎn)棒性能的減損。這些數(shù)據(jù)說明(-)-E-10-0H-NT比AT和NT是顯著較少鎮(zhèn)靜的。(-)-E-10-0H-NT的另外的有利性質(zhì)是其對關(guān)鍵藥酶減少的抑制。藥物的代謝轉(zhuǎn)化通常是酶促的。雖然所研究的每個組織都具有一些代謝活性，但在藥物的生物轉(zhuǎn)化中涉及的酶系統(tǒng)主要位于肝中。在藥物的非胃腸外施用之后，劑量的顯著部分可能在其到達(dá)體循環(huán)之前在肝或腸中被代謝失活。該首過代謝顯著限制了高度代謝的藥物的口服生物利用度(Benet等人，1995)。細(xì)胞色素P450酶家族是藥物生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)的主要催化劑。該酶的超家族催化多種氧化反應(yīng)和還原反應(yīng)并且對化學(xué)上不同組的底物具有活性。關(guān)鍵的細(xì)胞色素P450酶包括CYP2D6和CYP2C19。由于多晶現(xiàn)象或通過抑制作用，這些酶的活性的改變導(dǎo)致不期望的臨床后果(見Ingelman-Sundberg等人，1999)。如實(shí)施例10中具體討論的，AT和NT抑制CYP2D6和CYP2C19，并且實(shí)際上，這些藥劑禁忌與被這些酶代謝的藥劑使用。然而令人驚奇地，CYP2D6和CYP2C19均不被(-)-E-10-0H-NT所抑制(見實(shí)施例10)。因此，預(yù)期在與AT和NT比較時(-)-E-IO—OH—NT將產(chǎn)生較少的不期望的臨床后果，并且可有效地與被這些細(xì)胞色素P450同工酶所代謝并禁忌與AT或NT治療一起使用的藥物聯(lián)合使用。使用(-)-E-10-0H-NT的另一優(yōu)勢是由于其對蕈毒堿性受體減少的親和力。雖然本領(lǐng)域中已報(bào)導(dǎo)了外消旋的(士)-E-10-0H-NT的降低的蕈毒堿親和力，但沒有(_)對映體對通常的蕈毒堿性受體或?qū)μ囟ㄞΧ緣A性受體亞型的親和力的報(bào)導(dǎo)。E-10-0H-NT對蕈毒堿性受體在體外的親和力僅為NT對這些受體的親和力的十八分之一(Nilvebrant等人.1991;Waegner等人，1984)。在健康個體中，NT將唾液流減少至比E-IO-OH-NT或安慰劑顯著更大的程度(Nordin等人，1987a)。此外，在用很高劑量的NT處理的NT的超高速羥基化劑(hydroxylator)中，非軛合的10_0H_NT的血漿濃度很高而沒有任何抗膽堿能副作用的跡象。這些結(jié)果說明IO-OH-NT代謝產(chǎn)物比AT和NT具有小得多的抗膽堿能作用。與這些結(jié)果一致，實(shí)施例12中詳細(xì)說明的數(shù)據(jù)確定了(-)-E-10-0H-NT比AT或NT對四種蕈毒堿性受體M2、M3、M4，具有較低的親和力。(-)-E-10-0H-NT相對于AT和NT的另外的優(yōu)勢是其對GI通行(GItransit)的減少的影響(見實(shí)施例13)。已知由在腸神經(jīng)系統(tǒng)中的多種神經(jīng)遞質(zhì)介導(dǎo)的許多信號機(jī)制在腸胃功能的生理學(xué)控制中起主要作用。小鼠的腸胃通行(GIT)試驗(yàn)被用作對所選化合物的潛在GI易感性的潛伏期標(biāo)記物(preclinicalmarker)。如在實(shí)施例13中詳細(xì)說明的，(-)-E-10-0H-NT顯示出比AT和NT對GIT顯著較低的抑制。AT和NT的使用與包括心律不齊的心臟中毒相關(guān)。心臟K+通道(Ikr)的阻斷已與藥物誘導(dǎo)的長QT綜合征(LQT)相關(guān)聯(lián)，所述藥物誘導(dǎo)的長QT綜合征可導(dǎo)致尖端扭轉(zhuǎn)型室性心動過速，其為心律不齊和隨后的心室纖顫的危及生命的形式(見Pearlstein等人，2003)。由三環(huán)抗抑郁藥(TCA)引起的QT延長和相關(guān)的心律不齊的風(fēng)險(xiǎn)與先天性心臟延遲整流鉀(K+)通道和由調(diào)節(jié)快速延遲整流電流-hERG的克隆的a亞單元所攜帶的電流的藥理學(xué)抑制作用在細(xì)胞水平上相對應(yīng)。如實(shí)施例11中詳細(xì)說明，諸如丙咪嗪和AT的TCA以臨床相關(guān)的濃度抑制hERG通道(Witchel等人，2002)。(-)-E-IO-OH-NT另外的優(yōu)勢在于它在hERG通道中比AT和NT具有顯著較低的活性?；谠摻Y(jié)果，相對于AT和NT，預(yù)期利用(-)-E-10-0H-NT的治療將得到減少的QT延長、尖端扭轉(zhuǎn)型室性心動過速和其他心律不齊相關(guān)的副作用的風(fēng)險(xiǎn)。三環(huán)抗抑郁藥由于其與a腎上腺素能受體的相互作用還產(chǎn)生血壓作用。與多慮平、奈法唑酮、AT和氯米帕明一起顯著發(fā)生的a工腎上腺素能受體的阻斷是直立性低血壓、頭暈和反射性心動過速的原因(Hamon&Bourgoin，2006)。如實(shí)施例9中詳細(xì)描述，(-)-E-10-0H-NT的優(yōu)勢是其在a^和ala腎上腺素能受體處相對于AT和NT的較弱的親和力?；谶@些體外數(shù)據(jù)，預(yù)期(-)-E-10-0H-NT將較少可能產(chǎn)生直立性低血壓、頭暈和反射性心動過速。(-)-E-10-0H-NT的另外的有利性質(zhì)起因于其對a2腎上腺素能受體較低的親和力(見實(shí)施例9)。已充分確定a2腎上腺素能受體激動劑產(chǎn)生痛覺缺失(Ongioco等人，2000;Asano等人，2000;Hall等人，2001)。a2腎上腺素能受體拮抗劑逆轉(zhuǎn)a2腎上腺素受體介導(dǎo)的抗傷害感受的能力也是眾所周知的(Kalso等人，1991;Millan和Colpaert，1991;Pertovaara等人，1990)。當(dāng)由其自身皮下施用時，高達(dá)3mg/kg劑量的a2腎上腺素受體拮抗劑RX821002([2-(2-甲氧基_1，4_苯并二噁烷_2_基)_2_咪唑啉)不對乙酸誘導(dǎo)的腹縊產(chǎn)生顯著的抑制作用(疼痛試驗(yàn))。另一方面，在相同的試驗(yàn)條件下，《2腎上腺素受體激動劑可樂定在0.Olmg/kg高達(dá)1.Omg/kg的劑量范圍對腹縊產(chǎn)生劑量依賴的抑制作用，并且在最高劑量水平，其完全消除了腹縊響應(yīng)，因此提供了100%的保護(hù)防止產(chǎn)生疼痛的剌激。此外，由0.3mg/kg和1.Omg/kg的可樂定誘導(dǎo)的抗疼痛作用通過同時皮下施用RX821002(lmg/kg)而顯著削弱，強(qiáng)調(diào)了在該試驗(yàn)中的可樂定響應(yīng)涉及a2腎上腺素受體(Gray等人，1999)。然而，c^腎上腺素能受體拮抗劑在疼痛響應(yīng)中的效應(yīng)的結(jié)果是非常易變的。對于在多種疼痛試驗(yàn)中的a2腎上腺素受體拮抗劑誘導(dǎo)的作用中的易變性的一種解釋是這樣的事實(shí)這些藥物可通過其他受體類型介導(dǎo)它們的某些行為影響(Dermis等人，1980;Virtanen等人，1989)。例如，Kauppila和合作者的結(jié)果(Kau卯ila等人，1998)說明，取決于若干試驗(yàn)參數(shù)，阿替美唑(a2腎上腺素受體拮抗劑)對疼痛反應(yīng)行為(nocifensivebehavior)的作用從促進(jìn)變化至抑制。從這些報(bào)導(dǎo)中，在a2腎上腺素能受體上的拮抗作用對于鎮(zhèn)痛活性看起來不是必需的。如實(shí)施例9中更詳細(xì)地說明，(-)-E-10-0H-NT顯示出比AT和NT對腎上腺素能受體a2a、0213和ci2。顯著較低的親和力。基于該數(shù)據(jù)，預(yù)期(-)-E-10-0H-NT在關(guān)于潛在的副作用方面將優(yōu)于AT和/或NT:(-)-E-10-0H-NT的鎮(zhèn)痛作用可能不被與a2腎上腺素能受體的相互作用所抵消，而AT和NT的鎮(zhèn)痛作用可能被與a2腎上腺素能受體的相互作用所降低。8.8試劑盒本文所述的(-)-E-10-0H-NT化合物和/或其藥學(xué)上的鹽可裝配為試劑盒的形式。在某些實(shí)施方案中，所述試劑盒提供所述化合物和試劑以制備用于施用的組合物。所述組合物可以是干燥形式或凍干形式，或者在溶液中，特別是在無菌溶液中。當(dāng)所述組合物是干燥形式時，試劑可包括用于制備液體制劑的藥學(xué)上可接受的稀釋劑。所述試劑盒可包括用于施用或用于分配所述組合物的裝置，包括但不限于，注射器、移液管、經(jīng)皮貼片(transdermalpatch)或吸入器。所述試劑盒可包括與本文所述的化合物聯(lián)合使用的其他治療劑。在某些實(shí)施方案中，所述治療劑可以單獨(dú)的形式提供或與本文所述的化合物混合而提供。試劑盒將包括關(guān)于組合物的制備與施用、組合物的副作用和任何其他相關(guān)信息的適當(dāng)?shù)恼f明書。該說明書可以任何合適的形式；包括但不限于，印刷品、錄像帶、計(jì)算機(jī)可讀磁盤或光盤。9.實(shí)施例意圖為示例性的和非限制性的以下執(zhí)行的實(shí)施例強(qiáng)調(diào)了本文所述的多種E-10-0H-NT組合物和方法的多種特征和優(yōu)勢。實(shí)施例1:(+)-E-10-0H-NT的手性特異性合成參考圖1A，如下合成對映體純的(+)-E-10-0H-NT。化合物2的合成。在室溫下，將溴(35.0mL，679mmo1，1.40當(dāng)量)的四氯化碳(200mL)溶液逐滴加入5-氧代-10，11-二氫-二苯并[a，b]環(huán)庚烷(化合物1;100.0g，485mmol，1.00當(dāng)量)與四氯化碳(400mL)的攪拌的混合物中。加入另外的200mL四氯化碳25以促進(jìn)攪拌，且該混合物在室溫下攪拌90min。將該混合物過濾、用四氯化碳(200mL)漂洗并干燥得到170g棕褐色固體(90%收率)。將該固體(170g，464mmo1，1.00當(dāng)量)與氫氧化鈉(55.7g，1.39mol，3.00當(dāng)量)合并并將該混合物在甲醇(2L)中回流2小時。將熱溶液過濾然后將固體溶解于二氯甲烷(400mL)中并用水(300mL)和鹽水(200mL)洗滌。將有機(jī)物濃縮并干燥得到96.24g淺橙色的固體。將濾液靜置過夜以冷至室溫，且更多的產(chǎn)物沉淀出來。將固體過濾得到22.2g淡橙色的晶體。合并的收率88%。NMR(400MHz，CDCl3)S8.16(d，1H)，7.93(m，2H)，7.79(s，1H)，7.68-7.51(m，4H)，7.44(d，1H)?；衔?的合成。將叔丁醇鉀(62.7g，559mmo1，1.40當(dāng)量)加入化合物2(114g，400,1，1.00當(dāng)量)和哌啶(79.lmL，800mmo1，2.00當(dāng)量)在叔丁醇(900mL)中的混合物。將該混合物回流60分鐘、冷至室溫并真空濃縮至近干。將粗產(chǎn)物溶解于乙酸乙酯(400mL)中并且所得有機(jī)混合物用水(300mL)和鹽水(200mL)洗滌。將有機(jī)物濃縮并將所得粗的油在甲醇(500mL)中攪拌而沉淀出黃色固體，過濾并干燥該黃色固體以得到63.6g所期望的產(chǎn)物(55%收率)。NMR(400MHz，CDC13)S8.08(dd，1H)，7.87(dd，1H)，7.82(dd，1H)，7.58(dt，1H)，7.52-7.45(m，2H)，7.41(m，1H)，7.33(dt，1H)，6.38(s，1H)，2.89(brs，4H)，1.74(m，4H)，1.61(brm，2H);質(zhì)譜分析m/z=290.1(M+H)+?；衔?的合成。在氮?dú)庀拢瑢h(huán)丙基溴化鎂在四氫呋喃中的溶液(0.50M于THF中，531mL，266mmo1，1.21當(dāng)量)逐滴加入溶解于四氫呋喃(100mL)中的化合物3(63.6g，220mmol，1.00當(dāng)量)的冷的(冰/水浴)溶液中。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時。加入環(huán)丙基溴化鎂的另外的部分(0.50M于THF中，100mL，50mmo1，0.23當(dāng)量)并且將反應(yīng)攪拌另外的1小時。將反應(yīng)混合物濃縮至近干、用二氯甲烷(600mL)稀釋并用水(800mL)和鹽水(300mL)洗滌。將有機(jī)物濃縮并干燥得到70.lg橙黃色粘稠的油(96%收率)。粗產(chǎn)物用于下一步而不需進(jìn)一步純化。質(zhì)譜分析m/z=332.2(M+H)+。化合物5和化合物6的混合物的合成。分別為5-[3-溴-亞丙基]-5，11-二氫-二苯并[a，d]環(huán)庚-10-酮的Z-幾何異構(gòu)體和E-幾何異構(gòu)體的化合物5和化合物6通過將化合物4(70.0g，211mmo1，1.00當(dāng)量)在48%含水氧溴酸(250mL)和乙酸(250mL)中回流16小時而制備。將反應(yīng)混合物冷至室溫、用水(200mL)稀釋并用二乙醚萃取3次(總計(jì)500mL)。將有機(jī)物合并并在大燒杯中攪拌，小心加入飽和碳酸氫鈉(300mL)直至停止冒泡。將層分離并將有機(jī)物用飽和碳酸氫鈉(200mL)和鹽水(150mL)洗滌并濃縮得到粗的半固體。在粗產(chǎn)物經(jīng)過硅石之前，將llg不溶的棕褐色固體過濾得到幾何E-異構(gòu)體(化合物6)和幾何Z-異構(gòu)體(化合物5)的混合物(通過^NMR，化合物6/化合物5的比例=87/13)。通過使用5%_10%的乙酸乙酯/己烷梯度的硅膠塞純化濾液并將純化的產(chǎn)物在10%乙酸乙酯/己烷中磨碎，得到19g對應(yīng)于幾何異構(gòu)體5和幾何異構(gòu)體6的混合物(通過^NMR，6/5=55/45)的棕褐色固體。該異構(gòu)體混合物用l:l苯己烷重結(jié)晶得到8.6g76%純化合物6。然后該物質(zhì)與先前分離的幾何異構(gòu)體5和幾何異構(gòu)體6(通過^NMR，6/5=87/13)混合物(llg)合并然后在1:1苯己烷中結(jié)晶得到12.7g對應(yīng)于幾何異構(gòu)體5和幾何異構(gòu)體6(通過111NMR，6/5=91/9)的淡橙色固體。^NMR(400MHz，CDC13)S8.ll(dd，1H)，7.50(m，2H)，7.36(m，2H)，7.24(m，3H)，6.17(m，1H)，4.48(d，1H)，3.78(d，1H)，3.47(m，2H)，2.86-2.66(m，2H)。(+)-E-5-(Y_浪亞丙某)-10,11-二氡-10-羥某-5H-二苯并「a,cH_環(huán)庚烯，化合物(+)-7的合成。在-2(TC下(干冰/乙腈浴)，將化合物6(2.00g，6.llmmol，1.00當(dāng)量)在四氫呋喃(25mL)中的溶液逐滴加入硼烷-二甲硫絡(luò)合物(0.326mL，3.67mmo1，0.60當(dāng)量)和(7aR)-3-甲基-l，l-二苯基全氫化-3-硼-2-氧雜吡咯并吡咯烷(1.02g，3.67mmol，0.60當(dāng)量)在四氫呋喃(75mL)的溶液中。將該反應(yīng)在_20°0下攪拌90分鐘，然后在室溫下攪拌45分鐘。加入硼烷-二甲硫絡(luò)合物(0.326mL，3.67mmol，0.60當(dāng)量)和(7aR)-3-甲基-l，l-二苯基全氫化-3-硼-2-氧雜吡咯并吡咯烷(1.02g，3.67mmo1，0.60當(dāng)量)的另外的部分然后該反應(yīng)在室溫下攪拌另外的30分鐘。將反應(yīng)混合物在冰/水浴中冷至0°C并逐滴加入甲醇(15ml)。該混合物在室溫下攪拌30分鐘、再次冷至0t:并加入飽和碳酸氫鈉(20mL)。將該混合物在室溫下攪拌30分鐘、濃縮并在二氯甲烷(75mL)和水(50mL)之間分離。濃縮有機(jī)物并通過使用10%_30%乙酸乙酯/己烷梯度的快速硅膠柱色譜純化粗產(chǎn)物，以47%收率得到950mg近白色半固體。力NMR(400MHz，CDC13)S7.50-7.10(m，8H)，6.00-5.84(m，1H)，5.09(brm，2/3H)，4.85(brm，1/3H)，3.65-3.43(m，3H)，3.05(m，1H)，2.78-2.62(m，2H)，1.64(d，1H)。(+)-E-10-0H-NT,化合物(+)_8的合成。通過在壓力容器中、60°C下將(+)-7(0.95g，2.6,1，1.00當(dāng)量)與甲胺(在水中按重量計(jì)40%，7.OOmL，81mmol，31當(dāng)量)在乙腈(lOmL)中的溶液加熱16小時而合成(+)-E-10-OH-NT。將該反應(yīng)濃縮至近干并通過使用5%-9%甲醇/氯仿梯度(加1%氫氧化銨)的快速硅膠柱色譜而純化，以90X收率得到650mg淡橙色泡沫。因?yàn)橛心承㈱-異構(gòu)體存在，S卩(+)-Z-IO-OH-NT，將不純的游離堿(650mg，2.33mmo1，1.00當(dāng)量)溶解于乙腈中并過濾以除去任何不溶性顆粒。將濾液濃縮、溶解于乙腈(15mL)并加入馬來酸(324mg，2.79mmo1，1.20當(dāng)量)。將該混合物攪拌30分鐘然后固體沉淀出來。將該混合物濃縮、干燥并從異丙醇(lOOmL)中重結(jié)晶，得到535mg白色晶狀固體，即，作為馬來酸鹽的(+)-E-10-OH-NT。力NMR(400MHz，DMS0_d6)S8.29(brs，2H)，7.50-7.12(m，8H)，6.02(s，2H)，5.90(brm，1/3H)，5.71(brm，2/3H)，5.31(brs，1/3H)，5.08(brs，1/3H)，4.60(brs，1/3H)，3.36(m，1H)，3.06—2.86(brm，3H)，2.52(d，3H)，2.36(brm，2H)。質(zhì)譜分析m/z=280.1(M+H)+。手性LC分析99.4%手性純度。柱ChromtechCHIRAL-AGP150X4.Omm，5ii。流速1.OmL/min。流動相80%20mM磷酸鈉pH6.0，20%。IPA檢測器UV于240nm。峰保留時間峰1[(+)-E-10-OH-NT]=5.4min。峰2[(-)-E-10-OH-NT]=7.3min。元素分析:C19H21NOC4H404。理論%C69.86;%H6.37;%N3.54。實(shí)測％C69.91;%H6.43;%N3.61。[a]D23.3=+27.79(c.10.lmg/mL，MeOH)。m.p.=180.5°C—182.0°C。實(shí)施例2:(_)-E-10-0H-NT的手性特異性合成參考圖1A，如下合成對映體純的(-)-E-10-OH-NT。(-)-E-5-(Y-溴亞丙基)-10，11-二氫-10-羥基-5H-二苯并「a，cH_環(huán)庚烯，化合物(-)-7的合成。在-2(TC下(干冰/乙腈浴)，將化合物6(2.50g，7.64mmol，1.00當(dāng)量)在四氫呋喃(25mL)中的溶液逐滴加入硼烷-二甲硫絡(luò)合物(0.455mL，5.12,1,0.67當(dāng)量)和(7aS)-3-甲基-l，l-二苯基全氫化-3-硼-2-氧雜吡咯并吡咯烷(1.42g，5.12mmol，0.67當(dāng)量)在四氫呋喃(75mL)中的溶液。反應(yīng)在_20°〇下攪拌60分鐘，然后在室溫下攪拌2小時。加入硼烷-二甲硫絡(luò)合物(0.455mL，5.12mmol，0.67當(dāng)量)和(7aS)-3-甲基-1，27l-二苯基全氫化-3-硼-2-氧雜吡咯并吡咯烷(1.42g，5.12mmol，0.67當(dāng)量)的另外的部分，然后反應(yīng)在室溫下攪拌另外的30分鐘。反應(yīng)混合物在冰/水浴中冷至ot:并逐滴加入甲醇(15ml)。該混合物在室溫下攪拌30分鐘、再次冷至0t:并加入飽和碳酸氫鈉(20mL)。將該混合物在室溫下攪拌30分鐘、濃縮并在二氯甲烷(75mL)和水(50mL)之間分離。濃縮有機(jī)物并通過使用10%-30%乙酸乙酯/己烷梯度的快速硅膠柱色譜純化粗產(chǎn)物，以97%收率得到2.45g近白色粘性泡沫？HNMR(400MHz，CDCl3)S7.50-7.10(m，8H)，6.00-5.84(m，1H)，5.09(brm，2/3H)，4.85(him,1/3H)，3.65—3.43(m，3H)，3.05(m，1H)，2.78—2.62(m，2H)，1.64(d，1H)。(-)-E-10-0H-NT,化合物(_)_8的合成。通過在壓力容器中、60°C下將(-)-7(2.45g，6.7mmo1，1.00當(dāng)量)與甲胺(在水中按重量計(jì)40%，25.OmL，290mmol，43當(dāng)量)在乙腈(35mL)中的溶液加熱5小時而合成(-)-E-10-0H-NT。將該反應(yīng)濃縮并通過使用5%-9%甲醇/氯仿梯度(加1%氫氧化銨)的硅膠塞而純化。因?yàn)橛心承㈱-異構(gòu)體存在，即(-)-Z-10-0H-NT，將不純的游離堿溶解于二氯甲烷中、過濾以除去任何不溶性顆粒、濃縮并干燥，以定量收率(quantitativeyield)得到1.9g淡黃色泡沫。將游離堿(1.37g，4.9mmo1，1.00當(dāng)量)溶解于乙腈(40mL)中并加入馬來酸(0.654g，5.64mmol，1.15當(dāng)量)。將該混合物攪拌60分鐘然后固體沉淀出來。將該混合物濃縮、干燥并從異丙醇(70mL)中重結(jié)晶，得到820mg淺橙色針狀、作為馬來酸鹽的(-)-E-10-0H-NT。^NMR(400MHz，DMS0-d6)S8.29(brs，2H)，7.50-7.12(m，8H)，6.02(s，2H)，5.90(brm，1/3H)，5.71(brs，2/3H)，5.31(brs，1/3H)，5.08(brs，1/3H)，4.60(brs，1/3H)，3.36(m，1H)，3.06—2.86(brm，3H)，2.52(d，3H)，2.36(brm，2H)。質(zhì)譜分析m/z=280.1(M+H)+。手性LC分析98.6%手性純度。柱:ChromtechCHIRAL-AGP150X4.Omm，5ii。流速1.OmL/min.流動相:80%20mM磷酸鈉pH6.0，20%IPA。檢測器UV于240nm.峰保留時間:峰1[(+)-E-10-OH-NT]=6.lmin。峰2[(_)-E-10-0H-NT]=8.6min。元素分析C19H21NO-C4H404。理論％C69.86;%H6.37;%N3.54。實(shí)測%C69.53;%H6.44;%N3.57。[a]D23.4=-24.12(c.10.7mg/mL，MeOH)。m.p.=177.5—179.0°C。實(shí)施例3:(-)-E-10-0H-NT琥珀酸鹽相對于(-)-E-IO-OH-NT馬來酸鹽已改善了性臺匕g匕(-)-E-10-0H-NT琥珀酸鹽的制備。通過將9.15g(-)_8(游離堿，88.6%E異構(gòu)體，11.4%Z異構(gòu)體)溶解于異丙醇(40mL)并加入琥珀酸(4.25g，110當(dāng)量)在異丙醇(90mL)中的溶液而制備(-)-E-10-0H-NT的琥珀酸鹽。2天后少量產(chǎn)物從溶液中結(jié)晶出來，因此將該混合物濃縮至20mL混合物并將所得固體過濾，得到llg94%E異構(gòu)體和6%Z異構(gòu)體的(-)-E-10-0H-NT的琥珀酸鹽。將固體從乙腈中重結(jié)晶兩次(400mL和300mL)，得到6.78g淡橙色晶體(99.2XE異構(gòu)體，0.8XZ異構(gòu)體)。所得琥珀酸鹽實(shí)際上是晶體的和非吸濕性的，并且在鹽水中比馬來酸鹽(4.4mg/ml)具有更高的溶解度(18mg/ml)。實(shí)施例4:(+)-E-10-0H-NT和(_)-E-IO-OH-NT是去甲腎上腺素再攝取的有效選擇性抑制劑皿。在采用放射性標(biāo)記的配體的競爭性結(jié)合試驗(yàn)中測定AT、NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT對去甲腎上腺素(NE)運(yùn)載體、5-羥色胺(5HT)運(yùn)載體和多巴胺(DA)運(yùn)載體的結(jié)合親和力。對于NE運(yùn)載體結(jié)合試驗(yàn)，將[3H]尼索西汀(l.OnM)與多種濃度的測試化合物在4t:下孵育2小時，膜是由異源表達(dá)的克隆的人類NE運(yùn)載體(hNET)的中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CH0)細(xì)胞制備的。通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性(boundradioactivity)。非特異性結(jié)合界定為在l.OiiM地昔帕明存在下出現(xiàn)的結(jié)合的量。使用標(biāo)準(zhǔn)方法測定各種測試化合物的Ki值。對于5HT運(yùn)載體結(jié)合試驗(yàn)，將[3H]丙咪嗪(2.0nM)與多種濃度的測試化合物在22t:下孵育l小時，膜是由異源表達(dá)人類5-羥色胺運(yùn)載體(hSERT)的CHO細(xì)胞制備的。通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性。非特異性結(jié)合界定為在1.0M丙咪嗪存在下出現(xiàn)的結(jié)合的量。使用標(biāo)準(zhǔn)方法測定各種測試化合物的Ki值。對于DA運(yùn)載體結(jié)合試驗(yàn)，將[3H]N-[l-(2-苯并[b]苯硫基)環(huán)己基]-哌啶([3H]BTCP)(4.OnM)與多種濃度的測試化合物在fC下孵育2小時，膜是由異源表達(dá)的克隆的人類多巴胺運(yùn)載體(hDAT)的中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞制備的。加入多種濃度的測試化合物并通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性。非特異性結(jié)合界定為在1.0i!MBTCP存在下出現(xiàn)的結(jié)合。使用標(biāo)準(zhǔn)方法測定各種測試化合物的&值。還評估了AT、NT(+)-E-10-0H-NT禾P(-)-E-IO-OH-NT抑制NE、5HT和DA的攝取的能力。通過測量對在37°C下孵育20分鐘時[3H]-去甲腎上腺素并入大鼠丘腦下部突觸體的抑制而測定NE攝取中的IC5。值。通過測量對在37t:下孵育15分鐘時[3H]-5HT并入大鼠腦突觸體的抑制而測定5HT攝取中的IC5。值。通過測量對在37t:下孵育15分鐘時[3H]-DA并入大鼠紋狀體突觸體的抑制而測定DA攝取中的IC5。值。MS。在下表1中提供了各個運(yùn)載體的結(jié)合親和力。在表1中，&值是以納摩爾(nanomolar)計(jì)。百分比是對于10yM測試化合物觀察到的結(jié)合的百分抑制。在下表2中報(bào)導(dǎo)了攝取抑制數(shù)據(jù)。在表2中，ICs。值是以納摩爾計(jì)。百分比是對于10M測試化合物觀察到的結(jié)合的百分抑制。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT對NE運(yùn)載體的親和力與AT對NE運(yùn)載體的親和力大致相等并且在NT的約10倍以內(nèi)。對于對NE攝取的抑制的IC5。值觀察到類似的結(jié)果。對NE攝取的抑制的IC5。值低于先前報(bào)導(dǎo)的對于外消旋的E-10-0H-NT對NE攝取的抑制的IC5。值(見Hyttel，1980，對于在小鼠心房中的NE攝取試驗(yàn)其報(bào)導(dǎo)了130nM的1C5。)。雖然(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT對NE運(yùn)載體的親和力與AT對NE運(yùn)載體的親和力相當(dāng)，但如同NT的親和力，(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT對5HT運(yùn)載體的親和力顯著大于AT的親和力。對于對5HT攝取的抑制的ICs。值觀察到類似的結(jié)果?；谶@些結(jié)果，如同NT，(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT對NE運(yùn)載體與5HT運(yùn)載體顯示出選擇性。如將在實(shí)施例14中所說明的，外消旋的(士)-E-10-0H-NT還對NE和5HT運(yùn)載體顯示出選擇性的親和力，該親和力與(+)和(_)對映體對NE和5HT運(yùn)載體的親和力大致對等。實(shí)施例5:(_)-E-IO-OH-NT是有效的抗痛覺過敏劑皿。(-)-E-10-0H-NT的抗痛覺過敏活作用在弗氏完全佐劑誘導(dǎo)的傷害性炎性疼痛的嚙齒動物模型中說明。作為比較，AT作為正對照進(jìn)行測試。以30mg/kg、腹膜內(nèi)施用藥物。無菌水媒介物作為負(fù)對照進(jìn)行測試。(-)-E-10-0H-NT以馬來酸鹽或琥珀酸鹽施用。AT以鹽酸鹽施用。劑量是基于游離堿的量。對于該試驗(yàn)，使用DeHaven-Hudkins等人，1999的方法測定在足底施用(intr即lantaradministration)150iiL弗氏完全佐劑(FCA)之后24小時時的大鼠中的機(jī)械性痛覺過敏。為了測定腳爪壓力閾值，大鼠被稍微限制在醫(yī)用紗布中并且使用壓力痛覺缺失儀器(pressureanalgesiaapparatus)(StoeltingInstruments,WoodDale,IL)、用圓錐活塞(conicalpiston)對發(fā)炎的和非發(fā)炎的腳爪的背側(cè)面施加壓力。腳爪壓力閾值界定為使用250克的截?cái)嘀狄鹛颖芊磻?yīng)所需的力的量(以克計(jì))。在藥物治療前和藥物治療后的特定時間測定腳爪壓力閾值。結(jié)果。結(jié)果在圖3中說明。(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜內(nèi))相對于AT(30mg/kg，腹膜內(nèi))顯示出加強(qiáng)的抗痛覺過敏活性。實(shí)施例6:(_)-E-IO-OH-NT在治療非傷害性神經(jīng)性疼痛中是有效的皿。相對于阿米替林抗異常性疼痛活性，還使用非傷害性神經(jīng)性疼痛的L5-單神經(jīng)結(jié)扎模型在體內(nèi)測試了(-)-E-10-0H-NT的抗異常性疼痛活性，如LaBuda和Little,2005中所述。將測試動物置于樹脂玻璃室(plexiglaschamber)(lOcmX20cmX25cm)中并使其適應(yīng)15分鐘。將該室置于網(wǎng)篩的頂上以便vonFrey單絲可呈現(xiàn)在兩個后爪的跖面上。使用升/降法(Dixon，1980)、用7個Frey單絲(0.4克、1克、2克、4克、6克、8克和15克)獲得對每個后爪的觸覺靈敏度的測定。采用遞送至右后爪約l-2秒鐘然后遞送至左后爪的2克vonFrey力開始每次試驗(yàn)。如果沒有收回反應(yīng)，則遞送下一較高的力。如果有反應(yīng)，則遞送下一較低的力。將該過程進(jìn)行至以最高的力(15克)而沒做出反應(yīng)或者進(jìn)行至在最初的反應(yīng)之后施加4次剌激。每個測試組包括8個動物。進(jìn)行手術(shù)但不經(jīng)過神經(jīng)結(jié)扎的假手術(shù)對照組包括4個動物。所有動物在測試化合物施用后60分鐘和240分鐘進(jìn)行測試。使用下式計(jì)算每個腳爪的50%腳爪收回閾值[Xth]log=[vFr]log+ky，其中是上一次使用的vonFrey力，k=0.2249，是vonFrey單絲之間的平均間隔(以log為單位)，并且y是取決于收回反應(yīng)的模式的值(Dixon，1980)。如果動物未對最高vonFrey單絲(15克)反應(yīng)，則腳爪被指定18.23克的值。對觸覺靈敏度的試驗(yàn)進(jìn)行兩次并且平均50%收回值被指定為對于每個動物的右腳爪和左腳爪的觸覺靈敏度。MS。結(jié)果在圖4中說明。(-)-E-10-0H-NT以馬來酸鹽或琥珀酸鹽施用。AT以鹽酸鹽施用。劑量是基于游離堿的量。(-)-E-10-0H-NT的抗異常性疼痛活性(30mg/kg，腹膜內(nèi))相對于媒介物治療的對照組(媒介物治療的，L5SNL大鼠)觀察到的抗異常性疼痛活性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性并且與AT(30mg/kg，腹膜內(nèi))的抗異常性疼痛活性相當(dāng)。實(shí)施例7:(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-OH-NT以弱親和力結(jié)合至&組胺能受體^^在競爭性結(jié)合試驗(yàn)中評價(jià)AT、NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-OH-NT對&組胺能受體的親和力。對于該試驗(yàn)，將[3H]吡拉明(3nM)與多種濃度的測試化合物在22t:下孵育1小時，膜是由異源表達(dá)的克隆的人類^組胺能受體的人類胚腎(HEK-293)細(xì)胞制備的。通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性。非特異性結(jié)合界定為在1.0iiM未標(biāo)記的吡拉明存在下出現(xiàn)的結(jié)合的量。MS。結(jié)合研究表明，(+)-E-10-0H-NT和(+)-E-IO-OH-NT的&組胺能受體親和力相對于AT和NT的&組胺能受體親和力出乎意料地分別降低220倍和40倍?；谶@些結(jié)果，預(yù)期(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT將比AT和NT是較少產(chǎn)生鎮(zhèn)靜的并將產(chǎn)生較少的體重增加。實(shí)施例8:(_)-E-10-0H-NT比AT和NT在體內(nèi)顯著較少產(chǎn)生鎮(zhèn)靜皿。大鼠旋轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)通常用于評價(jià)與化學(xué)藥物相關(guān)的鎮(zhèn)靜。用AT(30mg/kg，腹膜內(nèi))、NT(30mg/kg，腹膜內(nèi))和(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜內(nèi))進(jìn)行時程試驗(yàn)。旋轉(zhuǎn)棒被設(shè)置為恒速運(yùn)動并且大鼠被放置在該設(shè)備的單獨(dú)的轉(zhuǎn)鼓上。一旦大鼠在應(yīng)有的位置上，將計(jì)時器調(diào)到零并將旋轉(zhuǎn)棒切換到加速模式。旋轉(zhuǎn)棒經(jīng)5分鐘的時間間隔從4rpm加速至40rpm。當(dāng)大鼠從轉(zhuǎn)鼓上跌落時，計(jì)時器自動停止，以秒記錄跌落的潛伏期。在藥物施用前，大鼠具有由至少15分鐘分開的3次訓(xùn)練時段。對每個間隔以秒記錄性能分?jǐn)?shù)?；€旋轉(zhuǎn)棒性能分?jǐn)?shù)是在第三次訓(xùn)練時段跌落旋轉(zhuǎn)棒的潛伏期。對于將要被包括在試驗(yàn)中的大鼠，基線必須已經(jīng)大于或等于60秒的時間。在施用測試化合物之后的30分鐘、60分鐘和120分鐘測試動物。MS。結(jié)果在圖2中說明。(-)-E-10-0H-NT以馬來酸鹽或琥珀酸鹽施用。AT和NT以鹽酸鹽施用。劑量是基于游離堿的量。在用AT或NT治療的大鼠中，在30分鐘時觀察到旋轉(zhuǎn)棒性能的峰值缺乏。AT和NT對旋轉(zhuǎn)棒性能的影響的量級是相近的，峰值缺乏分別為51±20%和60±14%。作為明顯的對照，在用(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜內(nèi))治療的大鼠中未觀察到性能的減損。實(shí)施例9:(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT對a腎上腺素能受體具有低親和力測試了AT、NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT對ala、alb、a2a、a2b禾口a2c腎上腺素能受體的親和力。使用由大鼠唾液腺制備的膜測試對a^腎上腺素能受體的親和力。將[3H]哌唑嗪(0.06nM)在多種濃度的測試化合物存在下與該膜在22t:下孵育1小時。在10i!M酚妥拉明存在下測定非特異性結(jié)合。通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性。使用由異源表達(dá)的克隆的人類受體的中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞制備的膜測試對alb腎上腺素能受體的親和力，所述CHO細(xì)胞在多種濃度的測試化合物存在下與[3H]哌唑嗪(0.15nM)在22t:下孵育1小時。在10yM酚妥拉明存在下測試非特異性結(jié)合。通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性。使用異源表達(dá)的克隆的人類受體的CHO細(xì)胞測試對a2a腎上腺素能受體的親和力，所述CHO細(xì)胞在多種濃度的測試化合物存在下與[3H]RX821002(1.OnM)在22"C下孵育131小時。在100i!M(-)-腎上腺素存在下測試非特異性結(jié)合。通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性。使用異源表達(dá)的克隆的人類受體的CH0細(xì)胞測試對a2b腎上腺素能受體的親和力，所述CHO細(xì)胞在多種濃度的測試化合物存在下與[3H]RX821002(2.5nM)在22。C下孵育1小時。在100i!M(-)-腎上腺素存在下測試非特異性結(jié)合。通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性。使用異源表達(dá)的克隆的人類受體的CHO細(xì)胞測試對a2。腎上腺素能受體的親和力，所述CHO細(xì)胞在多種濃度的測試化合物存在下與[3H]RX821002(2.OnM)在22。C下孵育1小時。在100i!M(-)-腎上腺素存在下測試非特異性結(jié)合。通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性。皿。結(jié)果制成下表3。表3中，Ki值以納摩爾計(jì)報(bào)導(dǎo)。百分比是對于10iiM測試化合物觀察到的結(jié)合的抑制的百分比。表3對腎上腺素能受體的親和力(以nM計(jì)的Ki;在10^M下的y。抑制)<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT顯示出比AT和NT對所有列出的腎上腺素能受體顯著較低的親和力，特別是對02受體。因此，預(yù)期(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT的鎮(zhèn)痛作用可能不被它們與a2腎上腺素能受體的相互作用所抵消，而AT和NT的鎮(zhèn)痛反應(yīng)可能被它們與02腎上腺素能受體的相互作用所抵消。此外，(-)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT之間對a13受體和a1)3受體的親和力的不同表明(-)-E-IO-OH-NT優(yōu)于(+)對映體。實(shí)施例10:(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT不抑制細(xì)胞色素P450功能皿。使用Chauret等人，2001的方法，用7_甲氧基_4_(氨基甲基)-香豆素(MAMC)(Venhorst等人，2000)作為基質(zhì)測試AT和NT、(+)-E-10-OH-NT禾P(-)-E-10-OH-NT對細(xì)胞色素P450功能的抑制活性。酶的來源是包含由BDBioscience獲得的人類重組體CYP2D6的微粒體。使用帶有390nm激發(fā)濾波片和460nm發(fā)射濾波片的PerkinElmerFusion測定MAMC至7-羥基-4-(氨基甲基)香豆素的轉(zhuǎn)化率。使用二節(jié)基熒光素(dibezylflourescein)(DBF)作為基質(zhì)測定CYP2C19活性。酶的來源是包含由BDBioscience(SanJose，CA)獲得的人類重組體CYP2C19的微粒體。使用帶有485nm激發(fā)濾波片和535nm發(fā)射濾波片的PerkinElmerFusion測定DBF向熒光素的轉(zhuǎn)化率。皿。結(jié)果制成下表4。在表4中，1(:5。值是以納摩爾計(jì)并且在括號中顯示95%置信區(qū)間。百分比反映對于10i!M測試化合物觀察到的百分抑制。報(bào)導(dǎo)的值是6次重復(fù)試驗(yàn)的平均值。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>相比于AT和NT，(+)-E-10-0H-NT禾P(-)-E-10-OH-NT令人驚奇地表現(xiàn)出對多晶型的細(xì)胞色素P450同工酶CYP2D6和CYP2C19的抑制活性的顯著且意料不到的降低。當(dāng)與AT和NT比較時，預(yù)期對于E-10-0H-NT的(+)和(-)對映體的抑制活性的這種減少導(dǎo)致不利臨床結(jié)果的減少，并且允許在服用禁忌與AT和NT—起使用的藥劑的患者中使用(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT。實(shí)施例11:(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT比AT和NT較低程度地抑制hERG通道^^。用顯示快速延遲整流電流(hERG)的閉合的a亞單元測試AT、NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT阻斷心臟延遲整流鉀通道的能力。MS。以下顯示用10iiM測試化合物獲得的hERG通道的百分比抑制。AT:68.6%NT:55.1%(+)-E-10-0H-NT:8.8%(-)-E-10-0H-NT:6.0%對于(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT觀察到比AT和NT顯著較低的活性。基于這些結(jié)果，預(yù)期利用(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT的治療相對于用AT和NT的治療能夠得到QT延長和其他心律不齊相關(guān)的副作用的減少的風(fēng)險(xiǎn)。實(shí)施例12:(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT比AT和NT具有對蕈毒堿性受體的較低的親和力皿。用由異源表達(dá)的克隆的人類蕈毒堿性受體MpM2、M3、M4和M5的CH0細(xì)胞制備的膜測定AT、NT(+)-E-10-0H-NT禾P(-)-E-10-0H-NT對蕈毒堿性受體M!、M2、M3、M4和M5的親和力。對于該試驗(yàn)，膜和放射性標(biāo)記的配體與多種濃度的測試化合物在22t:下孵育1小時。通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性。非特異性結(jié)合界定為在l.OiiM阿托品存在下的結(jié)合的放射性配體的量。對于M工受體的放射線配體是[3H]哌侖西平(2nM)。對于M2受體的放射線配體是[3H]AF-DX384(2nM)。對于M3、M4和M5受體的放射線配體是[3H]4_DAMP。M^。多種不同測試化合物對不同受體的親和力常數(shù)(以納摩爾計(jì))制成下表5:表5<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>在所有情況下，(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT顯示出大致相等的親和力，并顯示出比AT和NT顯著較低的親和力。實(shí)施例13:(_)-E-IO-OH-NT比AT和NT顯示出對腸胃通行較少的抑制皿。在腸胃通行的嚙齒動物模型中評價(jià)AT、NT和(-)-E-10-0H-NT的抑制作用。對于該試驗(yàn)，將雄性Swiss-Webster小鼠(20g_25g)過夜禁食并在每次口服施用由炭面粉水(1:2:8，w:w:w)組成的炭餐(charcoalmeal)之前的1小時、2小時或4小時用測試化合物或無菌水媒介物對照來治療。在所述炭餐后25分鐘測試腸胃通行。(-)-E-10-0H-NT以馬來酸鹽或琥珀酸鹽施用；AT和NT以鹽酸鹽施用；劑量是基于游離堿的量。通過除去整個長度的小腸并測量炭餐的前緣在小腸中行進(jìn)多遠(yuǎn)來測定腸胃通行(GIT)。通過下式確定百分比GIT(XGIT):%GIT=[炭前緣的距離(cm)/小腸的長度(cm)X100]MS。對于測試化合物(相對于無菌水媒介物)觀察到的％GIT在圖5中說明。相對于AT和NT，(-)-E-IO-OH-NT顯示出對通行顯著較低的抑制作用。實(shí)施例14:外消旋的(±)-E-IO-OH-NT、(+)-E-IO-OH-NT和(-)-E-IO-OH-NT對一元胺運(yùn)載體的體外結(jié)合親和力是互相接近的方案。在采用放射性標(biāo)記的配體的競爭性結(jié)合試驗(yàn)中測定外消旋的E-IO-OH-NT("(±)-E-IO-OH-NT")、(+)-E-IO-OH-NT禾P(-)-E-IO-OH-NT對去甲腎上腺素(NE)運(yùn)載體和5-羥色胺(SERT)運(yùn)載體的結(jié)合親和力。對于NE運(yùn)載體結(jié)合試驗(yàn)，將[3H]尼索西汀(l.OnM)與多種濃度的測試化合物在4t:下孵育2小時，膜是由異源表達(dá)的克隆的人類NE運(yùn)載體(hNET)的中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO)細(xì)胞制備的。通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性。非特異性結(jié)合界定為在1.0i!M地昔帕明存在下出現(xiàn)的結(jié)合的量。使用標(biāo)準(zhǔn)方法測定各種測試化合物的Ki值。對于5HT運(yùn)載體(SERT)結(jié)合試驗(yàn)，將[3H]丙咪嗪(2.OnM)與多種濃度的測試化合物在22t:下孵育1小時，膜是由異源表達(dá)人類5-羥色胺運(yùn)載體(hSERT)的CHO細(xì)胞制備的。通過閃爍能譜測定結(jié)合放射性。非特異性結(jié)合界定為在10i!M丙咪嗪存在下出現(xiàn)的結(jié)合的量。使用標(biāo)準(zhǔn)方法測定各種測試化合物的&值。M^。在下表6中提供對多種運(yùn)載體的結(jié)合親和力。<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>外消旋的(士)-E-10-0H-NT對去甲腎上腺素運(yùn)載體的結(jié)合親和力與對于純化的對映體(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT所觀察到的結(jié)合親和力相當(dāng)，純化的對映體之間的結(jié)合親和力大致相等。類似地，外消旋的(士)-E-10-0H-NT對5-羥色胺運(yùn)載體的結(jié)合親和力也與對于純化的(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT觀察到的結(jié)合親和力相當(dāng)。實(shí)施例15:(-)-E-10-0H-NT在治療非傷害性神經(jīng)性疼痛中比(±)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT更有效皿相對于阿米替林的抗異常性疼痛活性，使用非傷害性神經(jīng)性疼痛的L5-單神經(jīng)結(jié)扎模型在體內(nèi)測試了(士)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT的(-)-E-IO-OH-NT的抗異常性疼痛活性，如LaBuda&Little，2005中所述。E-IO-OH-NT化合物以馬來酸鹽或琥珀酸鹽施用。AT以鹽酸鹽施用。劑量是基于游離堿的量。將測試動物置于樹脂玻璃室(10cmX20cmX25cm)中并使其適應(yīng)15分鐘。將該室置于網(wǎng)篩的頂上以便vonFrey單絲可呈現(xiàn)在兩個后爪的跖面上。使用升/降法(Dixon，1980)、用7個Frey單絲(0.4克、1克、2克、4克、6克、8克和15克)獲得對每個后爪的觸覺靈敏度的測定。采用遞送至右后爪約1-2秒鐘然后遞送至左后爪的2克vonFrey力開始每次試驗(yàn)。如果沒有收回反應(yīng)，則遞送下一較高的力。如果有反應(yīng)，則遞送下一較低的力。將該過程進(jìn)行至以最高的力(15克)而沒做出反應(yīng)或者進(jìn)行至在最初的反應(yīng)之后施加4次剌激。每個測試組包括8個動物。進(jìn)行手術(shù)但不經(jīng)過神經(jīng)結(jié)扎的假手術(shù)對照組包括4個動物。所有動物在測試化合物施用后60分鐘進(jìn)行測試。使用下式計(jì)算每個腳爪的50%腳爪收回閾值[Xth]log=[vFr]log+ky，其中[vFr]是上一次使用的vonFrey力，k=0.2249，是vonFrey單絲之間的平均間隔(以log為單位)，并且y是取決于收回反應(yīng)的模式的值(Dixon，1980)。如果動物未對最高vonFrey單絲(15克)反應(yīng)，則腳爪被指定18.23克的值。對觸覺靈敏度的試驗(yàn)進(jìn)行兩次并且平均50%收回值被指定為對于每個動物的右腳爪和左腳爪的觸覺靈敏度。M^。結(jié)果在圖7中說明。(-)-E-10-0H-NT的抗異常性疼痛活性(30mg/kg，腹膜內(nèi))大于對于媒介物治療的對照組(媒介物治療的，L5SNL大鼠)("VEH")所觀察到的抗異常性疼痛活性并且與AT的抗異常性疼痛活性相當(dāng)(30mg/kg，腹膜內(nèi))。(-)-E-10-0H-NT的抗異常性疼痛活性(30mg/kg，腹膜內(nèi))還大于對于(士)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜內(nèi))和(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜內(nèi))所觀察到的抗異常性疼痛活性。外消旋的混合物和(+)對映體的活性與僅有媒介物的對照("VEH")的活性相當(dāng)。實(shí)施例16:，在L5SNL大鼠模型中(-)-E-10-0H-NT與阿米替林在治療非傷害性神經(jīng)性疼痛中一樣有效皿使用非傷害性神經(jīng)性疼痛的L5-單神經(jīng)結(jié)扎模型，根據(jù)以上實(shí)施例15中描述的方法，體內(nèi)比較口服施用的(-)-E-10-0H-NT(馬來酸鹽或琥珀酸鹽)的抗異常性疼痛活性與阿米替林(鹽酸鹽)的抗異常性疼痛活性。MS。結(jié)果在圖8中說明。(-)-F-10-0H-NT的抗異常性疼痛活性(30mg/kg，口服和60mg/kg，口服)大于對于媒介物治療的對照所觀察到的抗異常性疼痛活性并且與AT的抗異常性疼痛活性相當(dāng)(30mg/kg，腹膜內(nèi))。劑量是基于施用的游離堿的量。實(shí)施例17:對于(_)-E-10-0H-NT和AT的FCA誘導(dǎo)的痛覺過敏和旋轉(zhuǎn)棒劑量響應(yīng)曲線在大鼠FCA誘導(dǎo)的痛覺過敏(RandallSelitto)試驗(yàn)和在大鼠旋轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)中用阿米替林(鹽酸鹽)和(-)-E-10-0H-NT(馬來酸鹽或琥珀酸鹽)進(jìn)行劑量響應(yīng)試驗(yàn)以測定IP施用后在抗痛覺過敏功效和鎮(zhèn)靜之間的治療比。用無菌水媒介物、AT或(-)-E-10-0H-NT以高達(dá)60mg/kgIP的劑量(劑量是基于施用的游離堿的量)治療大鼠。治療后lh測量腳爪壓力閾值。對于在24hFCA治療的大鼠中的機(jī)械性痛覺過敏的逆轉(zhuǎn)，AT和(-)-E-10-0H-NT顯示出相近的效能和功效。對于以60mg/kgIP的AT和(-)-E-IO-OH-NT，觀察到了高水平的抗痛覺過敏活性(％AH)，用AT和(-)-E-10-0H-NT治療的大鼠中的％AH值分別為259±39和270±53(圖9、圖10)。為了估計(jì)AT和(_)-E-IO-OH-NT的機(jī)械性痛覺過敏的逆轉(zhuǎn)的ED50值，在用60mg/kgIP治療的大鼠中獲得的響應(yīng)被用作最大響應(yīng)(100X)并且在較低劑量下的響應(yīng)以最大作用的百分比來計(jì)算。AT和(-)-E-10-0H-NT的ED50值分別為38mg/kgIP和36mg/kgIP(圖9、圖10)。大鼠中旋轉(zhuǎn)棒性能的減損用于評價(jià)由(-)-E-10-0H-NT和AT產(chǎn)生的鎮(zhèn)靜的程度。AT劑量依賴性降低了旋轉(zhuǎn)棒性能，EDs。值為27mg/kgIP并且在100mg/kgIP的劑量下觀察到96%的最大減損(圖9)。作為比較，30mg/kgIP(-)-E-IO-OH-NT僅產(chǎn)生5%的旋轉(zhuǎn)棒性能減損。對于旋轉(zhuǎn)棒性能的(-)-E-10-0H-NT減損的估計(jì)的EDs。值是120mg/kgIP(圖10)。這些數(shù)據(jù)在共同考慮時說明(_)-E-10-0H-NT比AT具有顯示較少脫靶的藥理學(xué)副作用的潛力。實(shí)施例18:在大鼠FCA誘導(dǎo)的痛覺過敏試驗(yàn)中(_)-E-10-0H-NT的抗痛覺過敏活性皿。在傷害性炎性疼痛的弗氏完全佐劑誘導(dǎo)的嚙齒動物模型中說明了口服施用(-)-E-10-0H-NT(馬來酸鹽或琥珀酸鹽)的抗痛覺過敏效力(劑量是基于施用的游離堿的量)。為了比較，無菌水媒介物作為負(fù)對照進(jìn)行測試。使用DeHaven-Hudkins等人，1999的方法測定在足底施用150iiL弗氏完全佐劑(FCA)之后24小時時的大鼠中的機(jī)械性痛覺過敏。為了測定腳爪壓力閾值，大鼠被稍微限制在醫(yī)用紗布中并且使用壓力痛覺缺失儀器(StoeltingInstruments,WoodDale,IL)、用圓錐活塞對發(fā)炎的和非發(fā)炎的腳爪的背側(cè)面施加壓力。腳爪壓力閾值界定為使用250克的截?cái)嘀狄鹛颖芊磻?yīng)所需的力的量(以克計(jì))。在藥物治療前和藥物治療后的特定時間測定腳爪壓力閾值。M^。結(jié)果在圖11中說明并且說明口服施用的(-)-E-10-0H-NT在大鼠FCA誘導(dǎo)的痛覺過敏試驗(yàn)中提供顯著的活性。實(shí)施例19:(_)-E-10-0H-NT和(+)-E-IO-OH-NT在大鼠FCA誘導(dǎo)的痛覺過敏試驗(yàn)中的抗痛覺過敏活性的比較進(jìn)行試驗(yàn)以確定(+)-E-10-0H-NT是否與(-)-E-IO-OH-NT在24hFCA治療的大鼠中具有相近的抗痛覺過敏效能和功效。用30mg/kgIP的(+)-E-10-0H-NT進(jìn)行時程試驗(yàn)。在該試驗(yàn)中，F(xiàn)CA治療后24小時，對大鼠施用媒介物或30mg/kgIP的(+)-E-IO-OH-NT(施用馬來酸鹽或琥珀酸鹽；劑量是基于施用的游離堿的量)。使用實(shí)施例5和實(shí)施例18中公開的方法在施用后1小時、2小時或4小時測定腳爪壓力閾值。在治療后1小時測定媒介物治療的大鼠。在測試的任意時間點(diǎn)，(+)-E-10-OH-NT不是抗痛覺過敏的(圖12)。為了驗(yàn)證這些結(jié)果，進(jìn)行24小時FCA誘導(dǎo)的痛覺過敏試驗(yàn)，其中大鼠用媒介物或30mg/kgIP的(+)-E-10-0H-NT或(-)-E-IO-OH-NT治療并且1小時后測試其抗痛覺過敏活性。結(jié)果在圖13中呈現(xiàn)。再次地，(-)-E-10-0H-NT產(chǎn)生顯著的抗痛覺過敏(55±7%AH)而(+)-E-10-0H-NT不是抗痛覺過敏的。對于(-)-E-10-0H-NT觀察到的抗痛覺過敏的量級與先前的試驗(yàn)(例如實(shí)施例18)—致。實(shí)施例20:以30mg/kg和60mg/kgip的(-)-E-IO-OH-NT和(+)-E-IO-OH-NT在大鼠FCA誘導(dǎo)的痛覺過敏試驗(yàn)中的抗痛覺過敏活性的比較進(jìn)行試驗(yàn)以擴(kuò)展對于(+)-E-10-0H-NT在FCA誘導(dǎo)的機(jī)械性痛覺過敏試驗(yàn)中的作用的劑量響應(yīng)關(guān)系(圖14)。如實(shí)施例18和19中所說明，(+)-E-10-0H-NT在劑量高達(dá)30mg/kgIP時不是活性的。因此，在施用FCA后24小時用無菌水媒介物(30mg/kgIP或60mg/kgIP)治療大鼠。用媒介物或(+)-E-10-0H-NT治療后1小時測試大鼠的痛覺過敏。結(jié)果在用60mg/kgIP(40±13%AH)但不是30mg/kgIP的(+)-E-IO-OH-NT治療的大鼠中觀察到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的但是中等水平的抗痛覺過敏活性。在測試的劑量范圍中，(-)-E-10-0H-NT對映體比(+)-E-10-0H-NT對映體具有較大的效能和功效(化合物以馬來酸鹽或琥珀酸鹽施用；劑量是基于游離堿的量)。實(shí)施例21:在抑郁的大鼠強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)中評價(jià)阿米替林、(-)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT皿將雄性斯普拉_道來大鼠(Sprague-Dawleyrat)(約200g)置于室溫水槽中已進(jìn)行15分鐘的練習(xí)游泳。在練習(xí)游泳的第一個5分鐘期間每隔5秒鐘將大鼠分級為不動的(漂浮的，帶有將頭保持在水面上所需的動作)、游泳的(游泳過程中的運(yùn)動)或攀爬的(活躍地試圖爬出水槽，前爪的向上運(yùn)動)。計(jì)算大鼠用在每個這些反應(yīng)中的時間百分?jǐn)?shù)。在練習(xí)游泳后約24h，用媒介物或測試化合物治療大鼠并將其置于該槽中以進(jìn)行5分鐘的游泳。如同練習(xí)游泳的情況，在測試游泳期間大鼠被分級為不動的、游泳的或攀爬的并且計(jì)算用在每個這些反應(yīng)中的時間百分?jǐn)?shù)。通過帶有事后分析的單向ANOVA分析數(shù)據(jù)以對于三種行為反應(yīng)的每一種比較媒介物治療后的行為反應(yīng)與藥物治療后的行為反應(yīng)。顯著水平設(shè)置為P〈0.05。在三個單獨(dú)的試驗(yàn)中進(jìn)行阿米替林、(_)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT的劑量響應(yīng)試驗(yàn)以測定其在強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)中的效能和功效。在這些試驗(yàn)中，在適應(yīng)性游泳后24小時將媒介物、阿米替林(3-30mg/kgIP)、(-)-E-10-OH-NT(3-30mg/kgIP)或(+)-E-10-0H-NT(3-30mg/kglP)給予大鼠并且lh以后，大鼠經(jīng)受5分鐘的游泳測試。在測試游泳中用在不動、游泳和攀爬的(活躍地試圖爬上游泳槽的側(cè)面)時間百分比在圖15A、B和C中顯示。MS:阿米替林劑量依賴地降低了用在不動上的時間量，在用10或30mg/kgIP治療的大鼠中觀察到顯著減少。相對于媒介物治療的大鼠，阿米替林在用10mg/kgIP和30mg/kgIP治療的大鼠中分別減少不動性33X和47X。在用lOmg/kg(81%增加)或30mg/kg(147X增加)的阿米替林治療后觀察到用在游泳中的時間量相應(yīng)的顯著增加。阿米替林不改變用在攀爬中的時間量(圖15A)。(-)-E-10-0H-NT產(chǎn)生與阿米替林類似量級的作用，說明在用30mg/kgIP治療后不動性的顯著降低(47%降低)和在用10mg/kgIP(64X增加)或30mg/kgIP(108%)治療的大鼠中游泳的顯著增加。如同阿米替林的情況，(-)-不改變用在攀爬上的時間量(圖15B)。相反，(+)-E-10-0H-NT在高達(dá)30mg/kgIP的劑量下的強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)中不是活性的(圖15C)。雖然已說明并描述了多種特定的實(shí)施方案，但應(yīng)理解，可作出多種改變，而不偏離本發(fā)明的精神和范圍。在本申請中引用的所有出版物、專利、專利申請和其他文獻(xiàn)以其整體為了所有目的據(jù)此通過引用并入，等同于每個單獨(dú)的出版物、專利、專利申請或其他文獻(xiàn)為了所有目的被單獨(dú)地指明以通過引用并入。通過引用并入本文的參考文獻(xiàn)包括美國專利第4，943，635號Altamura等人，1989，InternationalClinicalPsychopharmacology4(增刊1):103-6.Asano等人，2000，Anesthesia&Analgesia(Baltimore)90(2):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0.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其中所述鹽是琥珀酸鹽。11.一種治療哺乳動物中疼痛的方法，其包括將有效量的根據(jù)權(quán)利要求i-io中任一項(xiàng)所述的藥物組合物施用于哺乳動物。12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述疼痛是起源于傷害性的。13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述疼痛是起源于非傷害性的。14.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述疼痛是神經(jīng)性疼痛、炎性疼痛、皰疹后神經(jīng)痛、糖尿病神經(jīng)病變或化學(xué)治療誘導(dǎo)的神經(jīng)性疼痛。15.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述組合物被配制用于口服施用。16.—種治療哺乳動物中抑郁的方法，其包括將有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的藥物組合物施用于哺乳動物。17.—種治療患者中對阿米替林或去甲替林治療響應(yīng)的病癥的方法，其包括將有效量的根據(jù)權(quán)利要求i-io中任一項(xiàng)所述的藥物組合物施用于患者。18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述對阿米替林或去甲替林治療響應(yīng)的病癥選自泌尿病癥、心境障礙、認(rèn)知障礙、精神障礙、焦慮障礙、人格障礙、進(jìn)食障礙、由濫用藥物或物質(zhì)而成癮造成的化學(xué)品依賴性、停藥綜合征、內(nèi)分泌絮亂、沖動性障礙、抽動障礙、胃腸道病癥、血管病癥、軀體形式障礙、帕金森病、休克、高血壓、性功能障礙、經(jīng)前期綜合征和纖維肌痛綜合征。19.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中患者服用禁忌與阿米替林或去甲替林一起使用的藥物。20.基本上對映體純的(-)-E-5-(Y-溴亞丙基)-10，ll-二氫-10-羥基-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯。21.對映體純的(-)-E-5-(Y-溴亞丙基)-10，ll-二氫-10-羥基-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯。22.合成得到的對映體純的(-)-E-10-0H-NT。23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的合成得到的對映體純的(-)-E-10-0H-NT，其中所述E-10-0H-NT是以游離堿的形式。24.根據(jù)權(quán)利要求22所述的合成得到的對映體純的(-)-E-IO-OH-NT，其中所述E-10-0H-NT是以鹽的形式。25.根據(jù)權(quán)利要求22所述的合成得到的對映體純的(-)-E-10-0H-NT，其中鹽是蘋果酸^!.o26.根據(jù)權(quán)利要求22所述的合成得到的對映體純的(-)-E-10-0H-NT，其中鹽是琥珀酸27.—種制備(-)-E-5-(Y-溴亞丙基)-10，ll-二氫-10-羥基-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯的方法，其包括在手性特異性的噁唑硼烷催化劑存在下還原E-5-(y-溴亞丙基)-10，11-二氫-10-氧代-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯。28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述噁唑硼烷催化劑是29.—種制備(-)-E-10-0H-NT的方法，其包括使(-)-E-5-(y-溴亞丙基)-10，11-二氫-10-羥基-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯與甲胺反應(yīng)。30.—種制備基本上對映體純的(-)-E-10-0H-NT的方法，其包括使基本上對映體純的(-)-5-(Y-溴亞丙基)-10，ll-二氫-10-羥基-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯與甲胺反應(yīng)的步驟。31.—種制備(-)-E-10-OH-NT的方法，其包括以下步驟苯并[a，d]-環(huán)庚烯，以得到(-)-E-5-(y-溴亞丙基)-10，11-二氫-10-羥基-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯；禾口(ii)使所述(-)-E-5-(Y-溴亞丙基)-10，ll-二氫-10-羥基-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯與甲胺反應(yīng)。32.—種用于抑制去甲腎上腺素的攝取的方法，其包括使去甲腎上腺素運(yùn)載體與包括富含(_)對映體的E-10-OH-NT的組合物相接觸。33.根據(jù)權(quán)利要求32所述的方法，其在體外實(shí)施。34.根據(jù)權(quán)利要求32所述的方法，其通過將包括有效抑制去甲腎上腺素的再攝取的E-10-OH-NT的量的組合物的量施用于受治療者而在體內(nèi)實(shí)施，其中所述E-10-OH-NT富含(i)在、j存在下還原E-5-(y-溴亞丙基)-10，11-二氫-10-氧代-5H-所述(_)對映體。35.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的組合物用于制備用于治療哺乳動物中的疼痛的藥物的用途。36.根據(jù)權(quán)利要求35所述的用途，其中所述疼痛是起源于傷害性的。37.根據(jù)權(quán)利要求35所述的用途，其中所述疼痛是起源于非傷害性的。38.根據(jù)權(quán)利要求35所述的用途，其中所述疼痛是神經(jīng)性疼痛、炎性疼痛、皰疹后神經(jīng)痛、糖尿病神經(jīng)病變或化學(xué)治療誘導(dǎo)的神經(jīng)性疼痛。39.根據(jù)權(quán)利要求35所述的用途，其中所述藥物被配制用于口服施用。40.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的組合物用于制備用于治療哺乳動物中的抑郁的藥物的用途。41.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的組合物用于制備用于治療對阿米替林或去甲替林治療響應(yīng)的病癥的藥物的用途。42.根據(jù)權(quán)利要求41所述的用途，其中所述病癥選自泌尿病癥、心境障礙、認(rèn)知障礙、精神障礙、焦慮障礙、人格障礙、進(jìn)食障礙、由濫用藥物或物質(zhì)而成癮造成的化學(xué)品依賴性、停藥綜合征、內(nèi)分泌絮亂、沖動性障礙、抽動障礙、胃腸道病癥、血管病癥、軀體形式障礙、帕金森病、休克、高血壓、性功能障礙、經(jīng)前期綜合征和纖維肌痛綜合征。全文摘要本公開提供了包括AT和NT的E-10-OH-NT代謝產(chǎn)物的組合物、其合成方法以及其使用方法。在一個實(shí)施方案中，化合物(-)-E-5-(y-溴亞丙基)-10，11-二氫-10-羥基-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯，是通過在手性特異性的噁唑硼烷催化劑存在下還原E-5-(y-溴亞丙基)-10，11-二氫-10-氧代-5H-二苯并[a，d]-環(huán)庚烯而制備的。在另一實(shí)施方案中，描述了用于抑制去甲腎上腺素的攝取的方法，所述方法包括使去甲腎上腺素運(yùn)載體與包括富含(-)對映體的E-10-OH-NT的組合物相接觸。文檔編號A01N33/02GK101720186SQ200880022883公開日2010年6月2日申請日期2008年4月22日優(yōu)先權(quán)日2007年4月30日發(fā)明者伯特蘭·樂布爾多內(nèi)克,羅蘭·多勒申請人:阿得羅公司