專利名稱：線蟲防治劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)有害生物防治劑領(lǐng)域。更準(zhǔn)確的說(shuō)，本發(fā)明涉及這樣的生物源試 劑作為線蟲防治劑的用途。
背景技術(shù)：
水楊醛(SA)是天然存在的物質(zhì)。在一些植物和植物局部中，它的濃度是相當(dāng)高 W0Pasteels JM禾口JC Gregoire,1983(The chemical ecology of defensein Arthropods, Ann Rev Entomol 28:263-289)已經(jīng)指出葉甲族的幼蟲Phaedomini分泌水楊醛。攝食甲 蟲用水楊醛作為其對(duì)抗小型捕食動(dòng)物例如螞蟻的天然驅(qū)避劑。水楊醛由幼蟲從水楊苷產(chǎn) 生，所述水楊苷是一種糖苷，幼蟲將其從寄主植物中吸取出來(lái)，并且進(jìn)一步被攝食甲蟲用于 產(chǎn)生水楊醛。在本發(fā)明共同發(fā)明人之一的以前的發(fā)明中，在PCT公開的WO 2005/102024中公 布，研究了水楊醛(SA)單獨(dú)或與大蒜提取物組合，作為用于不同有害生物類別防治劑的用 途。在與上面引用的發(fā)明共享發(fā)明人的本發(fā)明中，證明了 SA作為線蟲防治劑的潛在用途。發(fā)明詳述2006年期間，由蘇格蘭的蘇格蘭農(nóng)學(xué)院(SAC)進(jìn)行了試驗(yàn)。試驗(yàn)中所使用的材料 如下水楊醛與醇乙氧基化物表面活性劑Symperonic 91_8以1 1的比例混合，該混合物 以下稱為SAM。在該情況下，表面活性劑起分散劑作用。使用的另外的試劑為大蒜提取物 (GE)，并且將GE與SAM以4 1的比例混合。這樣的混合物以下稱為GASA (液劑)。也通過(guò) 將所述GASA噴在粘土上而將GASA制備成顆粒劑，如本領(lǐng)域已知的，每20千克最終產(chǎn)品(固 體顆粒劑)包含約5升GASA。這樣的顆粒劑以下稱為GASA顆粒劑。萜烯和Tyratech顆粒 劑也在試驗(yàn)中使用。所有這些材料由Omex Agriculture, of Bardney Airfield, Tupholme, LincolnLN3 5TP，UK提供。另外，殺線威(oxamyl)顆粒劑用作標(biāo)準(zhǔn)殺線蟲劑處理。實(shí)施例1 在沒有馬鈴薯塊莖的情況下防治馬鈴薯胞囊線蟲(PCN)(馬鈴薯金線蟲 (Globodera rostochiensis))0進(jìn)行這些試驗(yàn)以特定地測(cè)量在沒有任何馬鈴薯植物的情況下，土壤處理對(duì)土壤中 的PCN胞囊的存活和生活力的影響。所有試驗(yàn)均在愛丁堡的SAC溫室中進(jìn)行。馬鈴薯的種 植盆在移進(jìn)室內(nèi)之前，先在室外保持1個(gè)月。有害生物PCN(馬鈴薯金線蟲(G. rostochiensis))胞囊從蘇格蘭農(nóng)業(yè)科學(xué)機(jī) 構(gòu)(SASA)獲得。它們是從2006年用于種用馬鈴薯生產(chǎn)的大田的法定抽樣(statutory sampling)中獲得的。對(duì)來(lái)自SASA提供的這批胞囊的5個(gè)胞囊樣品進(jìn)行生活力和卵/胞囊 數(shù)目的評(píng)估。發(fā)現(xiàn)平均數(shù)為102. 2 士 8. 18個(gè)卵/胞囊。在試驗(yàn)之后，通過(guò)將土壤干燥而從 土中分離出來(lái)PCN胞囊，用滾筒輕輕壓碎，并隨后過(guò)篩沖洗以通過(guò)過(guò)濾收集胞囊。使收集的 全部胞囊的子樣裂開以測(cè)量生活力并計(jì)算存在的卵或幼線蟲的數(shù)目，表示為卵的數(shù)目/克 土壤。土壤試驗(yàn)中所使用的土壤從Bush Estate的大田中獲得，所述大田常規(guī)用于種 植谷物。在現(xiàn)有記錄中，該大田中沒有種植過(guò)馬鈴薯。土壤分析指出土壤中不存在PCN，并且僅存在非常少量的自生線蟲。將土壤部分干燥并壓實(shí)，以確保良好至中等結(jié)持度以供所 有的盆試驗(yàn)使用。方法從來(lái)自SASA的PCN胞囊批次中，對(duì)于每次重復(fù)，計(jì)數(shù)50個(gè)胞囊并且與 250克土壤混合。將處理劑與250克土壤和50個(gè)胞囊混合并放入小塑料盆中。這給出 102. 2/250X50 = 20. 44PCN卵/克土壤的評(píng)估基線值。每隔幾天對(duì)盆進(jìn)行灌溉(每處理 15盆)以保持濕潤(rùn)然而并非飽和，并且在溫室中保持在約18°C。約1個(gè)月(九月底)、2個(gè)月(十月底)和3個(gè)月(十一月底)后，從來(lái)自各個(gè)處 理的5個(gè)盆中的所有土壤中分離PCN胞囊。評(píng)估胞囊的生活力-即有多少胞囊中具有活的 PCN卵/幼蟲，并且確定可孵化卵/胞囊的平均數(shù)。然后將其轉(zhuǎn)換為PCN卵/克土壤的平均 數(shù)。處理劑和劑量在下面列出。作為劑量以毫升/升提供，將它們轉(zhuǎn)換為毫升/千克，假定 1千克的土壤相當(dāng)于1升。處理對(duì)照，GASA液劑以2. 5毫升/千克土壤(如使用250克土壤，將0. 625毫升 試劑與土壤混合以獲得相同用量)。萜烯液劑為2. 5毫升/千克土壤，GE為2. 5毫升/千 克土壤，GASA顆粒劑為2. 5克/千克土壤，Tyratech顆粒劑為2. 5克/千克土壤，SAM液劑 為1毫升/千克土壤；殺線威(oxamyl)用量相當(dāng)于55千克/公頃。各盆為5cmX5cm = 25cm2,即0. 25m2，殺線威用量等于5. 5克/平米。所以各盆用量為5. 5克/平米的1/20 = 0. 275 克 / 盆。
結(jié)果在所有處理中隨時(shí)間推移，卵/克土壤的平均數(shù)都有降低。這是可以預(yù)期 的，因?yàn)榘以跊]有馬鈴薯的情況下將會(huì)自發(fā)地孵化(通常在15-40%之間)，因此在這些 結(jié)果中降低速度是重要的。對(duì)照盆降低最少，從時(shí)間0的20. 44個(gè)卵/克土壤，至一個(gè)月 之后的18. 67個(gè)卵/克土壤，兩個(gè)月之后的17. 86個(gè)卵/克土壤，和三個(gè)月之后的16. 47 個(gè)卵/克土壤。GASA液劑處理在三個(gè)月之后已經(jīng)引起了 PCN卵最大程度降低，從時(shí)間0的 20. 44個(gè)卵/克土壤，至一個(gè)月之后的17. 29個(gè)卵/克土壤，兩個(gè)月之后的11. 003個(gè)卵/克 土壤，和三個(gè)月之后的5. 14個(gè)卵/克土壤。直至2個(gè)月的暴露時(shí)，卵/克土壤差異才變得 顯著，這時(shí)下列處理與對(duì)照相比已經(jīng)具有明顯較少的卵/克土壤GASA液劑(方差分析，P < 0. 005)、萜烯(P < 0. 05)、GE (P < 0. 05)并且 Tyratech 顆粒劑(P < 0. 05)。與殺線威 和SAM處理相比，GASA液劑處理也具有顯著較少的卵/克 土壤(P < 0. 05)。在3個(gè)月暴露 之后，所有處理與對(duì)照和殺線威處理相比均具有顯著較少的卵/克土壤(P < 0. 01)。與萜 烯(P < 0. 05)、GE (P < 0. 005) ,GASA 顆粒劑(P < 0. 05)、Tyratech 顆粒劑(P < 0. 001)禾口 SAM (P < 0. 001)處理相比，GASA液劑處理具有顯著較少的卵/克土壤。與Tyratech顆粒 劑(P < 0. 05)和SAM (P < 0.01)處理相比，GASA顆粒劑處理具有顯著較少的卵/克土壤。 萜烯處理比SAM(P <0.05)具有更少的卵/克土壤。卵/克土壤的降低可歸因于PCN胞囊 的生活力隨時(shí)間推移而降低，并且與不同處理相對(duì)應(yīng)(參見下列表1)。表1.在暴露于各種土壤處理之后有生活力的PCN胞囊平均數(shù)％SAM_84.10 ±5.93_71. 68 士 5. 51_ 52. 32 ± 3.06
殺賊_86.96 土 1.96_ 75. 86 士 3.0584. 38 土 3.42在GASA液劑處理中，在3個(gè)月暴露之后僅有四分之一的PCN胞囊有生活力(即 包含活的PCN卵或幼蟲)。對(duì)照處理在3個(gè)月后仍然具有80%有生活力的胞囊，如殺線威 (oxamyl)標(biāo)準(zhǔn)殺線蟲劑處理那樣。所有其它處理確實(shí)對(duì)PCN胞囊生活力具有一定程度的 影響，GASA顆粒劑和萜烯處理將胞囊生活力降低至低于40%。在1個(gè)月之后，GASA顆粒 劑和對(duì)照處理之間PCN胞囊生活力出現(xiàn)顯著差異(P < 0. 01)，但是直到胞囊已經(jīng)暴露于處 理2個(gè)月時(shí)，對(duì)照和其它處理之間的胞囊生活力差異才變得顯著(表1)。所有處理在兩 個(gè)月暴露后與對(duì)照相比具有顯著降低的胞囊生活力=GASA液劑(P < 0. 001)、GASA顆粒劑 (P < 0. 005)、萜烯(P < 0. 001)、GE(P < 0. 001)、Tyratech 顆粒劑(P < 0. 001)和 SAM(P
<0. 05)。殺線威處理也比對(duì)照處理具有較少的有生活力的胞囊(P < 0. 01)。與殺線威(P
<0. 001)、萜烯(P < 0. 05)、GASA顆粒劑(P < 0. 05)、Tyratech 顆粒劑(P < 0. 05)和 SAM(P <0.05)處理相比，在2個(gè)月暴露后，GASA液劑處理具有顯著校少的有生活力的胞囊。在 2個(gè)月暴露后，GE處理與殺線威處理相比具有顯著較少的有生活力的胞囊(P < 0. 05)。在 3個(gè)月后，與對(duì)照和殺線威處理相比，所有處理的胞囊生活力都有顯著下降(P < 0. 001，表 1)。與Tyratech (P < 0. 05)和SAM (P < 0. 05)處理相比，GASA液劑處理具有顯著較少的 有生活力的胞囊。與SAM處理相比(P < 0. 05)，GE處理和GASA處理具有顯著較少的有生 活力的胞囊。小結(jié)與對(duì)照相比，除了殺線威之外所有處理都在某種程度上降低了胞囊的生活 力。殺線威(oxamyl)是制線蟲劑(nematistat)即，使線蟲癱瘓而不是殺死它們的化學(xué)品， 且為了有效，需要線蟲從包囊中釋放出來(lái)。其它施用至土壤的處理顯示能夠?qū)Π覂?nèi)部的 線蟲起作用，提示它們能夠通過(guò)胞囊壁或在一定程度上削弱胞囊。GASA液劑和GASA顆粒劑 在降低PCN胞囊生活力方面是最有效的。這反映在這些處理的卵數(shù)目/克土壤方面。實(shí)施例2 有馬鈴薯塊莖的土壤中馬鈴薯胞囊線蟲(PCN)(馬鈴薯金線蟲)的防治方法從獲自SASA的PCN胞囊批次中，對(duì)于每次重復(fù)，計(jì)數(shù)500個(gè)胞囊并且與2. 5 千克土壤混合。這給出與實(shí)施例1中——20. 44個(gè)卵/克土壤相同的PCN卵數(shù)目/克，如 果未處理，則其預(yù)期將對(duì)產(chǎn)量產(chǎn)生顯著影響。將處理劑與2. 5千克土壤和500個(gè)胞囊混合， 并且放入大塑料盆中。在每個(gè)盆中將馬鈴薯品種Cara的種用塊莖種植于5cm深度。就液劑處理而言，它們也在種植5天后作為土壤浸液施用。每隔幾天對(duì)盆進(jìn)行灌溉以保持濕潤(rùn) 然而并非飽和，并且在移入溫室之前首先在約18°C下室外保持一個(gè)月。試劑和劑量在下面 列出。因?yàn)閯┝恳院辽?升形式提供，它們被轉(zhuǎn)換為毫升/千克，假設(shè)1千克土壤相當(dāng)于1升。處理和試劑有PCN胞囊的對(duì)照(10次重復(fù))，無(wú)PCN胞囊的對(duì)照(10次重復(fù))； GASA液劑以2. 5毫升/千克有PCN的土壤(如使用2. 5千克土壤，將6. 25ml處理劑與土壤 混合以獲得等同用量)(8次重復(fù))；種植后5天，GASA液劑以2. 5毫升/千克有PCN的土壤 澆灌(由于使用2. 5千克土壤，將6. 25ml份額混入IOOml水中并且均勻灌溉在土表以獲得 等同用量)(7次重復(fù))；GE以2. 5毫升/千克有PCN的土壤(8次重復(fù))。在種植后5天GE 以2. 5毫升/千克有PCN的土壤澆灌(7次重復(fù))；GASA顆粒劑以2. 5克/千克有PCN的土 壤(10次重復(fù))；Tyratech顆粒劑以2. 5克/千克有PCN的土壤(10次重復(fù))；SAM液劑以 1毫升/千克有PCN的土壤(7次重復(fù))；在種植后5天SAM液劑以1毫升/千克有PCN的 土壤澆灌(8次重復(fù))；殺線威(oxamyl)以相當(dāng)于55千克/公頃(2. 75克/盆)有PCN的 量施用(10次重復(fù))。在種植后20、35、45和60天記錄株高。栽培馬鈴薯120天以允許PCN完成生活周 期。不對(duì)馬鈴薯施用殺真菌劑、除草劑、殺昆蟲劑或肥料。在第117天，修剪馬鈴薯的莖葉。 將盆在白色托盤上倒空，并且由根生產(chǎn)的塊莖進(jìn)行計(jì)數(shù)、移除并清洗，以在稱重前除去任何 土壤。就每個(gè)盆而言，除去任何直徑小于2cm的塊莖并且不計(jì)數(shù)。在已經(jīng)除去馬鈴薯之后， 將來(lái)自各個(gè)盆的土壤置于托盤上并且干燥。對(duì)來(lái)自各個(gè)盆的500克土壤的子樣評(píng)估PCN卵 數(shù)。因?yàn)樵诜N植時(shí)，最初的PCN卵數(shù)/克是已知的(Pi = 20. 44個(gè)卵/克)，確定各個(gè)盆在 收獲后的PCN卵數(shù)/克(Pf)。Pf/^的比值給出了各個(gè)盆的PCN增殖率的測(cè)量值。結(jié)果就一些處理而言(GASA液劑、GASA顆粒劑、SAM、GE和Tyratech顆粒劑)，葉 片有短暫的變黃。在60天后，葉片最終恢復(fù)完全的綠色。雖然有一些零星的葉片影響直至 試驗(yàn)?zāi)?，但是大多?shù)植物保持免于馬鈴薯疫病。株高在20天后，在一些處理之間已經(jīng)有顯著差異。所有處理都顯著高于有PCN 的對(duì)照植物(方差分析，P < 0. 05)。GASA顆粒劑、GASA液劑和GE處理的盆顯著高于無(wú)PCN 的對(duì)照(P < 0. 05)。所有試驗(yàn)處理還顯著高于殺線威殺蟲劑處理(P < 0. 05)。這可能是 生長(zhǎng)刺激或肥料效應(yīng)的表現(xiàn)，因?yàn)樵谠撾A段PCN胞囊孵化應(yīng)該在其初期。在35天之后，處 理之間的株高差異就不是那么明顯，雖然與有PCN的對(duì)照植物相比，所有處理都具有顯著 較高的植物(P < 0. 01)。株高中的其它差異是那些在GASA液劑和GASA液劑種植后澆灌 (P < 0. 001)以及GE和GE種植后澆灌(P < 0. 05)之間的差異。在45天和60天之后，株 高中唯一的差異是那些在所有處理與有PCN的對(duì)照之間的差異(P < 0. 001)，以及GASA和 GASA種植后澆灌(P <0.01)之間的差異。就所有處理而言，株高隨時(shí)間推移的累積進(jìn)展表 明GASA液劑、GASA顆粒劑和GE處理劑在最初60天期間具有最快速的生長(zhǎng)速度。塊莖數(shù)120天之后收 獲自所有處理的塊莖數(shù)目在表2中總結(jié)。需要注意的是，生 長(zhǎng)較長(zhǎng)時(shí)間和在較大盆中的植物很有可能生產(chǎn)出更多的塊莖。選擇120天的生長(zhǎng)期是為了 完成PCN的生活周期。在120天之后，處理之中和處理之間塊莖的數(shù)目有較大的變異(表 2)。塊莖數(shù)目中唯一的顯著差異在有PCN的對(duì)照和無(wú)PCN的對(duì)照之間(P < 0. 05)，以及有 PCN的對(duì)照和殺線威處理之間(P < 0. 05)。
塊莖產(chǎn)量平均塊莖產(chǎn)量(所有塊莖的總重量)在有PCN的對(duì)照的83g至殺線威 盆的IlOg之間變化(表2)。下列處理比有PCN的對(duì)照盆具有顯著更高的產(chǎn)量殺線威(P <0. 001)、無(wú) PCN 的對(duì)照(P<0. 001)、GASA 液劑(P < 0. 05)和 SAM 種植后澆灌(P < 0. 05)。 下列處理比殺線威處理具有顯著較低的產(chǎn)量有PCN的對(duì)照(P < 0. 001)、GASA顆粒劑(P < 0. 05)、GASA 液劑種植后澆灌(P < 0. 05)、GE (P < 0. 01)、GE 種植后澆灌(P < 0. 05)、 Tyratech顆粒劑(P < 0. 01)和SAM(P < 0. 05)。與無(wú)PCN的對(duì)照的產(chǎn)量相比，只有GE和 Tyratech顆粒劑具有顯著降低的產(chǎn)量(P < 0. 05)。殺線威處理比一些其它處理具有較高 產(chǎn)量，表明其他處理中的線蟲仍然能夠進(jìn)食并且因此減少了這些處理中的產(chǎn)量，而殺線威 的制線蟲作用麻痹了大多數(shù)線蟲，導(dǎo)致較高產(chǎn)量。表2.馬鈴薯塊莖平均數(shù)目/盆和塊莖平均產(chǎn)量/盆
權(quán)利要求
防治線蟲的組合物，其至少包含水楊醛和表面活性劑。
2.防治馬鈴薯胞囊線蟲的組合物，其至少包含水楊醛和表面活性劑。
3.如權(quán)利要求1所述的防治線蟲的組合物，進(jìn)一步包含大蒜提取物。
4.如權(quán)利要求1所述的防治線蟲的組合物，其中所述表面活性劑為分散劑。
5.如權(quán)利要求3所述的防治線蟲的組合物，其中所述組合物是粒化的。
6.如權(quán)利要求1所述的防治線蟲的組合物，其中所述表面活性劑為分散劑。
7.防治土壤線蟲的方法，其中將水楊醛與表面活性劑混合，施用于被線蟲侵染的土壤。
8.如權(quán)利要求7所述的防治土壤線蟲的方法，其中在施用至土壤之前將大蒜提取物加 入與表面活性劑混合的水楊醛中。
9.如權(quán)利要求7和8所述的防治土壤線蟲的方法，其中所述線蟲為馬鈴薯胞囊線蟲。
10.防治土壤線蟲的方法，其中將大蒜提取物施用于被所述線蟲侵染的土壤。全文摘要
防治線蟲的組合物，包含水楊醛和表面活性劑。將大蒜提取物加入水楊醛得到組合物，其表現(xiàn)出對(duì)馬鈴薯胞囊線蟲更有效的防治作用。
文檔編號(hào)A01N65/42GK101938903SQ200880103231
公開日2011年1月5日 申請(qǐng)日期2008年6月11日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月11日
發(fā)明者G·巴赫利, I·伊利奧特 申請(qǐng)人:Omex國(guó)際有限公司