專利名稱：一種片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及片狀平滑子實體的生產(chǎn)方法，尤其涉及一種片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法，屬生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
蛹蟲草也即北冬蟲夏草(6br々ceAs/w'h'tsrh〕，隸屬麥角菌科蟲草屬，是一種極具價值的藥食兩用真菌；具有補(bǔ)虛損，益精氣，滋肺保腎益髓，止血化痰等療效，并且其藥理保健作用已經(jīng)得到充分的試驗證實。因此無論是從來源還是從價值方面來說北冬蟲夏草都應(yīng)是中藥類中最珍貴的。由于天然冬蟲夏草有其嚴(yán)格的寄生性和特殊的生長地理環(huán)境，產(chǎn)量相當(dāng)有限，藥源緊缺。盡管目前已有北冬蟲夏草的人工培養(yǎng)，但因其生長環(huán)境特殊、培養(yǎng)條件復(fù)雜、周期長等原因，實施的單位并不多且產(chǎn)品和報道多為菌絲液和菌草；經(jīng)檢索，關(guān)于片狀平滑北蟲草子實體及其生產(chǎn)的論文和相關(guān)專利還未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有的技術(shù)不足，本發(fā)明要解決的問題是提供一種片狀平滑蟲草子實體及其生產(chǎn)方法。
本發(fā)明所述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)步驟是
(1) 菌種選擇蛹蟲草(Cor辦c印s肌'h'taris) CCTCC No. M88061 (已有菌株，由CCTCC購得)；
(2) 斜面培養(yǎng)將上述新鮮蛹蟲草菌種接種于PDA斜面培養(yǎng)基上，2(TC 25。C，培養(yǎng)4 6天；
(3) 種子培養(yǎng)將步驟(2)培養(yǎng)的菌株，在無菌條件下用接種鉤接l 2cm2于含100mLCCl培養(yǎng)液的500ml三角瓶中，以溫度20°C 25°C，搖床轉(zhuǎn)速120 160轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)3 5天，制成種子液；
(4) 擴(kuò)大培養(yǎng)以10%體積比的接種量，將步驟(3)的種子液接種于含1000mLCC2培養(yǎng)液的已滅菌的5000毫升三角瓶中，以溫度20°C 25°C，搖床旋轉(zhuǎn)速度120 180轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)3 5天，菌液600nm處吸光度值為15±2;;
(5) 片狀平滑子實體制備將步驟(4)培養(yǎng)后的菌液倒入設(shè)定形狀的平盤中，在溫度20-25。C條件下靜止光照培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為50LX,當(dāng)片狀平滑子實體長至厚度為3 8腿后培養(yǎng)停止；
(6) 產(chǎn)品收集取出上述片狀平滑子實體，晾干保存或直接食用。
上述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法中步驟(2)、 (3)、 (4)、 (5)所述培養(yǎng)溫度優(yōu)選20-25。C。
上述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法中步驟(2)所述PDA斜面培養(yǎng)基制作方法是取去皮除芽土豆200克，切片，加水1升煮沸30分鐘，過濾除渣，洗渣補(bǔ)水至1升，加葡萄糖20克，蛋白胨1克，磷酸二氫鉀3克，硫酸鎂1.5克，瓊脂粉15克，自然pH。
上述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法中步驟(3)所述CC1培養(yǎng)液制作方法是
取去皮除芽土豆60克，切小塊，煮沸10分鐘，冷卻后用勻漿機(jī)打漿，加20克葡萄糖，蛋白胨5克，用自來水補(bǔ)足1.0升。
3上述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法中步驟(4)所述CC2培養(yǎng)液制作方法是 取去皮除芽土豆100克，切塊、煮沸10分鐘，冷卻后用勻漿機(jī)打漿，加40克葡萄糖，
蛋白胨10克，用自來水補(bǔ)足1.0升。
上述培養(yǎng)基還可單獨(dú)或搭配大米、小米、玉米面等淀粉類原料制作。 本發(fā)明使用的培養(yǎng)基為純天然培養(yǎng)基，主要組分是土豆，學(xué)名馬鈴薯，又叫洋芋、 洋山芋、山藥蛋，是一種糧菜兼用型的蔬菜，與稻、麥、玉米、高粱一起被稱為全球五
大農(nóng)作物。在法國，土豆被稱作"地下蘋果"。含有豐富的維生素A和維生素C以及礦 物質(zhì)，優(yōu)質(zhì)淀粉含量約為16.5%，被譽(yù)為人類的"第二面包"。中醫(yī)認(rèn)為馬鈴薯"性 平味甘無毒，能健脾和胃，益氣調(diào)中，緩急止痛，通利大便。對脾胃虛弱、消化不良、 腸胃不和、脘腹作痛、大便不暢的患者效果顯著"。因此，本發(fā)明所述純天然培養(yǎng)基的 應(yīng)用與蛹蟲草片狀平滑子實體的保健功能相得益彰。
上述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法中步驟(5)所述平盤的形狀優(yōu)選正方形、
長方形、圓形、橢圓形、或菱形，最優(yōu)選正方形、長方形或圓形。
上述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法中步驟(5)所述片狀平滑子實體的形狀優(yōu)
選正方形、長方形或圓形；厚度優(yōu)選5 6mm。
本發(fā)明所述片狀平滑蟲草子實體，其特征是所述片狀平滑蟲草子實體由上述方法制得。
本發(fā)明所述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法優(yōu)點(diǎn)在于操作簡單，生產(chǎn)周期短，所用
原料易得，生產(chǎn)成本低，節(jié)能。目前蟲草人工草子實體培養(yǎng)周期為60天左右，本發(fā)明所 述片狀平滑子實體的生產(chǎn)周期一般為6-8天，更利于大眾化推廣。
本發(fā)明所述方法制備的片狀平滑蟲草子實體呈淺黃色，鮮品形同蓋一層淺黃色絨布 的鮮粉皮，可根據(jù)喜好制成各種形狀。干燥后微黃褐，質(zhì)地較輕薄。所述片狀平滑蟲草 子實體色香味等質(zhì)量特性均可與蟲草媲美，藥效主要成分優(yōu)于野生蟲草子實體；食用方 便，其平滑片狀子實體切絲涼拌，水煮韌性好，成形好，口感好，更利于普通人的食用 和進(jìn)一步加工成保健食品或保健飲料。
具體實施例方式
實施例1、
(1) 菌種選擇蛹蟲草(Cbr辦c印s肌7!'teris) CCTCC No. M88061 (已有菌株， 由CCTCC購得)；
(2) 斜面培養(yǎng)將上述新鮮蛹蟲草菌種接種于PDA斜面培養(yǎng)基上，23°C，培養(yǎng)4
天；
(3) 種子培養(yǎng)將步驟(2)培養(yǎng)的菌株，在無菌條件下用接種鉤接l 2cm2于含 100mLCCl培養(yǎng)液的500ml三角瓶中，以溫度23'C，搖床轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)3天， 制成種子液；
(4) 擴(kuò)大培養(yǎng)以10%體積比的接種量，將步驟(3)的種子液接種于含1000mLCC2 培養(yǎng)液的已滅菌的5000毫升三角瓶中，以溫度23。C，搖床旋轉(zhuǎn)速度120轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng) 5天，菌液600nm處吸光度值為15;
(5) 片狀平滑子實體制備將步驟(4)培養(yǎng)后的菌液倒入正方形的平盤中，在溫 度25。C條件下靜止光照培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為50LX，當(dāng)片狀平滑子實體長至厚度為3 5醒 后培養(yǎng)停止；(6)產(chǎn)品收集取出上述平滑片狀子實體，晾干保存或直接食用。
實施例2、
(1) 菌種選擇蛹蟲草(CarJ/c印s啦7iten's) CCTCC No. M88061;
(2) 斜面培養(yǎng)將上述新鮮蛹蟲草菌種接種于TOA斜面培養(yǎng)基上，25°C，培養(yǎng)6
天；
(3) 種子培養(yǎng)將步驟(2)培養(yǎng)的菌株，在無菌條件下用接種鉤接l 2cm2于含 100mLCCl培養(yǎng)液的500ml三角瓶中，以溫度25。C，搖床轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)4天， 制成種子液；
(4) 擴(kuò)大培養(yǎng)以10%體積比的接種量，將步驟(3)的種子液接種于含1000mLCC2 培養(yǎng)液的已滅菌的5000毫升三角瓶中，以溫度25。C，搖床旋轉(zhuǎn)速度170轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng) 4天，菌液600nm處吸光度值為15;
(5) 片狀平滑子實體制備將步驟(4)培養(yǎng)后的菌液倒入圓形的平盤中，在溫度 25'C條件下靜止光照培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為50LX，當(dāng)片狀平滑子實體長至厚度為5 6ram后 培養(yǎng)停止；
(6) 產(chǎn)品收集取出上述平滑片狀子實體，晾干保存或直接食用。 實施例3、
(1) 菌種選擇蛹蟲草(Corc^c印s /w'h'ter^) CCTCC No. M88061;
(2) 斜面培養(yǎng)將上述新鮮蛹蟲草菌種接種于PM斜面培養(yǎng)基上，2(TC，培養(yǎng)6
天；
(3) 種子培養(yǎng)將步驟(2)培養(yǎng)的菌株，在無菌條件下用接種鉤接l 2cm2于含 100mLCCl培養(yǎng)液的500ml三角瓶中，以溫度2(TC，搖床轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)5天， 制成種子液；
(4) 擴(kuò)大培養(yǎng)以10%體積比的接種量，將步驟(3)的種子液接種于含1000mLCC2 培養(yǎng)液的已滅菌的5000毫升三角瓶中，以溫度20。C，搖床旋轉(zhuǎn)速度130轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng) 5天，菌液600nm處吸光度值為15;
(5) 片狀平滑子實體制備將步驟(4)培養(yǎng)后的菌液倒入了菱形的平盤中，在溫 度25。C條件下靜止光照培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為50LX，當(dāng)片狀平滑子實體長至厚度為7 8mra 后培養(yǎng)停止；
(6) 產(chǎn)品收集取出上述片狀平滑子實體，晾干保存或直接食用。 本發(fā)明實施例所述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法中步驟(2)所述PDA斜面培
養(yǎng)基制作方法是取去皮除芽土豆200克，切片，加水1升煮沸30分鐘，過濾除渣， 洗渣補(bǔ)水至l升，加葡萄糖20克，蛋白胨1克，磷酸二氫鉀3克，硫酸鎂1.5克，瓊 脂粉15克，自然pH。
本發(fā)明實施例所述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法中步驟(3)所述CC1培養(yǎng)液 制作方法是取去皮除芽土豆60克，切小塊，煮沸10分鐘，冷卻后用勻漿機(jī)打漿，加 20克葡萄糖，蛋白胨5克，用自來水補(bǔ)足1.0升。
本發(fā)明實施例所述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法中步驟(4)所述CC2培養(yǎng)液 制作方法是取去皮除芽土豆100克，切塊、煮沸10分鐘，冷卻后用勻漿機(jī)打漿，加 40克葡萄糖，蛋白胨10克，用自來水補(bǔ)足1.0升。
上述培養(yǎng)基還可單獨(dú)或搭配大米、小米、玉米面等淀粉類原料制作。
權(quán)利要求
1.一種片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法，步驟是(1)菌種選擇蛹蟲草(Cordyceps militaris)CCTCC No.M88061；(2)斜面培養(yǎng)將上述新鮮蛹蟲草菌種接種于PDA斜面培養(yǎng)基上，20℃～25℃，培養(yǎng)4～6天；(3)種子培養(yǎng)將步驟(2)培養(yǎng)的菌株，在無菌條件下用接種鉤接1～2cm2于含100mL CC1培養(yǎng)液的500ml三角瓶中，以溫度20℃～25℃，搖床轉(zhuǎn)速120～160轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)3～5天，制成種子液；(4)擴(kuò)大培養(yǎng)以10％左右體積比的接種量，將步驟(3)的種子液接種于含1000mL CC2培養(yǎng)液的已滅菌的5000毫升三角瓶中，以溫度20℃～25℃，搖床旋轉(zhuǎn)速度120～180轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)3～5天，菌液600nm處吸光度值為15±2；(5)片狀平滑子實體制備將步驟(4)培養(yǎng)后的菌液倒入設(shè)定形狀的平盤中，在溫度20-25℃條件下靜止光照培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為50LX，當(dāng)片狀平滑子實體長至厚度為3～8mm后培養(yǎng)停止；(6)產(chǎn)品收集取出上述片狀平滑子實體，晾干保存或直接食用。
2. 如權(quán)利要求1所述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法，其特征是步驟(2)、 (3)、 (4)、 (5)所述培養(yǎng)溫度為20-25°C。
3. 如權(quán)利要求1所述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法，其特征是步驟(2)所述PDA 斜面培養(yǎng)基制作方法是取去皮除芽土豆200克，切片，加水1升煮沸30分鐘，過濾 除渣，洗渣補(bǔ)水至1升，加葡萄糖20克，蛋白胨1克，磷酸二氫鉀3克，硫酸鎂1. 5 克，瓊脂粉15克，自然pH。
4. 如權(quán)利要求1所述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法，其特征是步驟(3)所述CC1 培養(yǎng)液制作方法是取去皮除芽土豆60克，切小塊，煮沸10分鐘，冷卻后用勻漿機(jī)打 漿，加20克葡萄糖，蛋白胨5克，用自來水補(bǔ)足1.0升。
5. 如權(quán)利要求1所述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法，其特征是步驟(4)所述CC2 培養(yǎng)液制作方法是取去皮除芽土豆100克，切塊、煮沸10分鐘，冷卻后用勻漿機(jī)打 漿，加40克葡萄糖，蛋白胨10克，用自來水補(bǔ)足1.0升。
6. 如權(quán)利要求1所述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法，其特征是步驟(5)所述平 盤的形狀是正方形、長方形、圓形、橢圓形、或菱形。
7. 如權(quán)利要求1所述片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法，其特征是步驟(5)所述片 狀平滑子實體的厚度為5 6mm。
8. —種片狀平滑蟲草子實體，其特征是所述片狀平滑蟲草子實體由權(quán)利要求1所 述方法制得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種片狀平滑蟲草子實體的生產(chǎn)方法，是利用發(fā)酵方法將培養(yǎng)后的菌液倒入設(shè)定形狀的平盤中，在溫度20-25℃、光照強(qiáng)度為50LX條件下靜止光照培養(yǎng)獲得；本發(fā)明所述方法操作簡單，成本低、周期短，一般為6-8天，而目前蟲草人工草子實體培養(yǎng)周期為60天左右，因此本發(fā)明更經(jīng)濟(jì)和利于推廣。
文檔編號A01G1/04GK101663956SQ20091001849
公開日2010年3月10日 申請日期2009年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月29日
發(fā)明者常宏文, 恒 張, 趙海霞, 馬劍峰 申請人:山東大學(xué)