專利名稱：曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種水產(chǎn)動(dòng)物的定向選育方法，特別涉及曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè) 體的選育方法。
背景j支術(shù)
烏賊，俗稱墨魚，屬頭足綱，十腕目。烏賊肉含有多種氨基酸，營養(yǎng)豐富，肉 味鮮美。烏賊墨由墨囊中的分泌腺合成,在墨囊中儲存，是烏賊遇到天敵時(shí)噴出來染
黑周圍水域的黑色物質(zhì)。我國醫(yī)藥對烏賊的應(yīng)用歷史悠久,對烏賊墨的藥用始于止 血。現(xiàn)代對烏賊墨的研究是從烏賊墨中黑色素的結(jié)構(gòu)及其生物合成開始的。自從日 本學(xué)者發(fā)現(xiàn)烏賊墨的抗腫瘤活性以來，對其免疫調(diào)節(jié)作用、抗腫瘤作用的研究已成 為熱點(diǎn)。烏賊對溫度的適應(yīng)性較強(qiáng)，在我國沿海分布很廣，是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值很高的 傳統(tǒng)漁業(yè)種類。由于過度捕撈和生態(tài)惡化，自20世紀(jì)70年代以來，先后出現(xiàn)了衰 退現(xiàn)象。隨著烏賊人工養(yǎng)殖研究的陸續(xù)展開，在將烏賊作為食品的同時(shí)逐步開始把 開發(fā)墨囊這一具有藥用價(jià)值的臟器逐步提升到重要位置，挖掘其潛在藥用價(jià)值對于 充分利用海洋資源、擴(kuò)大藥源有深遠(yuǎn)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法，以此篩選具有墨囊 增生潛力的烏賊并提高該曼氏無針烏賊墨囊的生長速度和其藥用價(jià)值，而且該方法步 驟簡單、效果顯著，適于大規(guī)模推廣。
本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選 育方法，包括親體暫養(yǎng)、育苗、幼體養(yǎng)殖和成體養(yǎng)殖步驟，其中在培育過程中的親 體暫養(yǎng)步驟中增加對親體外套膜的氨基酸組分篩選暫養(yǎng)的曼氏無針烏賊，以選取具有 墨囊快速增生潛力的親體曼氏無針烏賊；在幼體養(yǎng)殖步驟使用經(jīng)過墨囊增生相關(guān)氨基 酸強(qiáng)化的鹵蟲或橈足類飼養(yǎng)曼氏無針烏賊幼體；在成體養(yǎng)殖步驟使用含有墨囊增生相 關(guān)氨基酸的配合餌料飼養(yǎng)曼氏無針烏賊成體。采用以上操作能通過適時(shí)補(bǔ)充烏賊墨生 成大量所需的相關(guān)氨基酸，以保證烏賊墨囊內(nèi)墨汁生成需要，并以此為基礎(chǔ)間接促進(jìn) 其墨囊的增大。烏賊科動(dòng)物所分泌的墨汁，主要以黑色素的構(gòu)成為基質(zhì)，在此類基質(zhì)中，能夠溶解眾多具有藥用價(jià)值的活性物質(zhì)。黑色素是由黑色素單體堆積而成的，
X-射線光電子能譜進(jìn)一步表明黑色素包括5,6-二羥基吲哚和5,6-二羥基吲哚-2-羧酸所
組成的結(jié)構(gòu)。烏賊墨的黑色素中含有次生降解低聚糖，這類成分是由5,6-二羥基吲哚-
羧酸的對二酚部分在體內(nèi)經(jīng)過氧化裂解，并伴隨著脫羧和加氧而產(chǎn)生的，而這些中間
體的來源均是酪氨酸。通過人為調(diào)節(jié)酪氨酸的攝入可以有效的促進(jìn)墨囊的生長，增加
其藥用價(jià)值。
為優(yōu)化上述技術(shù)方案，采取的技術(shù)措施還包括 上述墨囊增生相關(guān)氨基酸包括酪氨酸。
氨基酸組分篩選包括如下步驟在飼料中增加甘氨酸或絲氨酸或丙氨酸含量為正
常投喂量的2倍至10倍飼養(yǎng)親體曼氏無針烏賊，持續(xù)3天至9天；然后，取親體曼氏無 針烏賊的外套膜組織，檢測氨基酸含量以選取酪氨酸占總氨基酸含量小于5%的親本
用于育苗。采用高海螵蛸增生相關(guān)氨基酸量投喂烏賊并檢測氨基酸含量，能夠篩去對 氨基酸調(diào)節(jié)能力不強(qiáng)的個(gè)體，從而篩選出具有墨囊快速增生潛力的親體曼氏無針烏賊 個(gè)體，以提高本發(fā)明技術(shù)方案的效率。
在幼體養(yǎng)殖步驟中，強(qiáng)化鹵蟲的步驟包括使用經(jīng)含有墨囊增生相關(guān)氨基酸的海水
浸泡的小球藻喂養(yǎng)鹵蟲；在幼體養(yǎng)殖步驟中，強(qiáng)化橈足類的步驟包括使用經(jīng)含有墨囊 增生相關(guān)氨基酸的海水培養(yǎng)的酵母喂養(yǎng)橈足類的無節(jié)幼體。酵母還經(jīng)過含有中間體的 溶液浸泡；中間體的溶液濃度小于10ppm。在篩選出具有海螵蛸快速增生潛力的親體 曼氏無針烏賊后所得到的子代烏賊，由于遺傳了親體的特性，絕大多數(shù)同樣具有海螵 蛸快速增生潛力。
中間體的溶液中的溶質(zhì)為5,6-二羥基吲哚或5，6-二羥基吲哚-2-羧酸或5，6-二羥基 B引哚-2-羧酸的堿金屬鹽或5，6-二羥基吲哚的堿金屬鹽。烏賊在幼體階段，酪氨酸的酶 促分解途徑不活躍，在次階段補(bǔ)充酪氨酸效果不明顯，以前述中間體替代酪氨酸對墨 囊的補(bǔ)充不僅能實(shí)現(xiàn)增大墨囊，其附屬的效果是通過補(bǔ)充墨囊內(nèi)的墨汁能夠提高幼體 烏賊的存活率。幼體烏賊在受到刺激吐墨之后，經(jīng)過數(shù)天生長后即會(huì)死亡；而采用本 方法可以使部分吐墨的幼體烏賊存活，其機(jī)理上雖不清楚，然而卻能達(dá)到了一定效果。 利用堿金屬鹽形式的中間體能夠使其在細(xì)胞膜上通過主動(dòng)運(yùn)輸形式更順利的進(jìn)入細(xì) 胞。
中間體的溶液經(jīng)過超聲波振蕩處理。這樣的處理能使溶液均勻。 在成體養(yǎng)殖步驟中，使用的配合餌料為含有基礎(chǔ)料50kg、白魚粉28kg、微晶纖維素3.6kg、糊精14kg、生物提取油3.汰g的配合飼料，并且配合飼料還添加有酪氨酸 50g。用含有海螵蛸增生相關(guān)氨基酸的飼料詞養(yǎng)成體是墨囊生長和墨汁積累的主要階 段，在此階段采用特殊詞料的目的是維持烏賊產(chǎn)墨機(jī)制的快速循環(huán)，使烏賊即使應(yīng)激 吐墨，也能在短期內(nèi)快速補(bǔ)充墨汁。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于通過適時(shí)補(bǔ)充烏賊墨生成大量所需的相關(guān)氨 基酸，以保證烏賊墨囊內(nèi)墨汁生成需要，并以此為基礎(chǔ)間接促進(jìn)其墨囊的增大。采用 高海螵蛸增生相關(guān)氨基酸量投喂烏賊并檢測氨基酸含量，能夠篩去對氨基酸調(diào)節(jié)能力 不強(qiáng)的個(gè)體，從而篩選出具有墨囊快速增生潛力的親體曼氏無針烏賊個(gè)體，以提高本 發(fā)明技術(shù)方案的效率。在篩選出具有海螵蛸快速增生潛力的親體曼氏無針烏賊后所得 到的子代烏賊，由于遺傳了親體的特性，絕大多數(shù)同樣具有海螵蛸快速增生潛力。烏 賊在幼體階段，酪氨酸的酶促分解途徑不活躍，在次階段補(bǔ)充酪氨酸效果不明顯，以 前述中間體替代酪氨酸對墨囊的補(bǔ)充不僅能實(shí)現(xiàn)增大墨囊，其附屬的效果是通過補(bǔ)充 墨囊內(nèi)的墨汁能夠提高幼體烏賊的存活率。用含有海螵蛸增生相關(guān)氨基酸的飼料飼養(yǎng) 成體是墨囊生長和墨汁積累的主要階段，在此階段采用特殊飼料的目的是維持烏賊產(chǎn) 墨機(jī)制的快速循環(huán)，使烏賊即使應(yīng)激吐墨，也能在短期內(nèi)快速補(bǔ)充墨汁。采用本發(fā)明 方法可以提高曼氏無針烏賊墨囊的生長速度和其藥用價(jià)值，并且該方法步驟簡單、效 果顯著，適于大規(guī)模推廣。
具體實(shí)施例方式
以下結(jié)合附實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
實(shí)施例曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法，包括親體暫養(yǎng)、育苗、幼體養(yǎng) 殖和成體養(yǎng)殖步驟，其中在培育過程中的親體暫養(yǎng)步驟中增加對親體外套膜的氨基 酸組分篩選暫養(yǎng)的曼氏無針烏賊，以選取具有墨囊快速增生潛力的親體曼氏無針烏 賊;在幼體養(yǎng)殖步驟使用經(jīng)過墨囊增生相關(guān)氨基酸強(qiáng)化的鹵蟲或橈足類飼養(yǎng)曼氏無針 烏賊幼體；在成體養(yǎng)殖步驟使用含有墨囊增生相關(guān)氨基酸的配合餌料詞養(yǎng)曼氏無針烏 賊成體。
為優(yōu)化上述技術(shù)方案，采取的技術(shù)措施還包括 上述墨囊增生相關(guān)氨基酸包括酪氨酸。
氨基酸組分篩選包括如下步驟在飼料中增加甘氨酸或絲氨酸或丙氨酸含量為正 常投喂量的2倍飼養(yǎng)親體曼氏無針烏賊，持續(xù)9天；然后，取親體曼氏無針烏賊的外套 膜組織，檢測氨基酸含量以選取酪氮酸占總氨基酸含量小于4.8%的親本用于育苗。在幼體養(yǎng)殖步驟中，強(qiáng)化鹵蟲的步驟包括使用經(jīng)含有墨囊增生相關(guān)氨基酸的海水 浸泡的小球藻喂養(yǎng)鹵蟲；在幼體養(yǎng)殖步驟中，強(qiáng)化橈足類的步驟包括使用經(jīng)含有墨囊 增生相關(guān)氨基酸的海水培養(yǎng)的酵母喂養(yǎng)橈足類的無節(jié)幼體。酵母還經(jīng)過含有中間體的 溶液浸泡；中間體的溶液濃度小于10ppm。
中間體的溶液中的溶質(zhì)為5,6-二羥基吲哚或5，6-二羥基吲哚-2-羧酸或5,6-二羥基 口引哚-2-羧酸的堿金屬鹽或5,6-二羥基吲哚的堿金屬鹽，本實(shí)施例優(yōu)選5,6-二羥基吲哚 -2-羧酸的堿金屬鹽和5，6-二羥基吲哚的堿金屬鹽等摩爾混合使用，并且各自所占的濃 度均小于上述10ppm的標(biāo)準(zhǔn)。
中間體的溶液經(jīng)過超聲波振蕩處理。這樣的處理能使溶液均勻。
在成體養(yǎng)殖步驟中，使用的配合餌料為含有基礎(chǔ)料50kg、白魚粉28kg、微晶纖 維素3.6kg、糊精14kg、生物提取油3.8kg的配合飼料，并且配合飼料還添加有酪氨酸 50g。該配方作為前述的正常投喂量基數(shù)，再此配比的基礎(chǔ)上增加墨囊增生相關(guān)氨基 酸的量以用于篩選。
盡管已結(jié)合優(yōu)選的實(shí)施例描述了本發(fā)明，然其并非用以限定本發(fā)明，任何本領(lǐng) 域技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍的情況下，能夠?qū)υ谶@里列出的主題實(shí) 施各種改變、同等物的置換和修改，因此本發(fā)明的保護(hù)范圍當(dāng)視所提出的權(quán)利要求 限定的范圍為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1、曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法，包括親體暫養(yǎng)、育苗、幼體養(yǎng)殖和成體養(yǎng)殖步驟，其特征是在培育過程中的親體暫養(yǎng)步驟中增加對親體外套膜的氨基酸組分篩選暫養(yǎng)的曼氏無針烏賊，以選取具有墨囊快速增生潛力的親體曼氏無針烏賊；在幼體養(yǎng)殖步驟使用經(jīng)過墨囊增生相關(guān)氨基酸強(qiáng)化的鹵蟲或橈足類飼養(yǎng)曼氏無針烏賊幼體；在成體養(yǎng)殖步驟使用含有墨囊增生相關(guān)氨基酸的配合餌料飼養(yǎng)曼氏無針烏賊成體。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法，其特征是所述 的墨囊增生相關(guān)氨基酸包括酪氨酸。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法，其特征是氨基 酸組分篩選包括如下步驟在飼料中增加甘氨酸或絲氨酸或丙氨酸含量為正常投喂量的 2倍至10倍詞養(yǎng)所述的親體曼氏無針烏賊，持續(xù)3天至9天；然后，取所述的親體曼氏無 針烏賊的外套膜組織，檢測氨基酸含量以選取酪氨酸占總氨基酸含量小于5%的親本用于育苗。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法，其特征是在幼體養(yǎng)殖步驟中，強(qiáng)化鹵蟲的步驟包括使用經(jīng)含有墨囊增生相關(guān)氨基酸的海水浸泡的小球藻喂養(yǎng)鹵蟲；在幼體養(yǎng)殖步驟中，強(qiáng)化橈足類的步驟包括使用經(jīng)含有墨囊增生相關(guān)氨基 酸的海水培養(yǎng)的酵母喂養(yǎng)橈足類的無節(jié)幼體。
5、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法，其特征是所述的酵母還經(jīng)過含有中間體的溶液浸泡；所述的中間體的溶液濃度小于10ppm。
6、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法，其特征是所述的中間體的溶液中的溶質(zhì)為5,6-二羥基B引哚或5,6-二羥基B引哚-2-羧酸或5,6-二羥基B引哚 -2-羧酸的堿金屬鹽或5，6-二羥基。引哚的堿金屬鹽。
7、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法，其特征是所述 的中間體的溶液經(jīng)過超聲波振蕩處理。
8、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法，其特征是在成 體養(yǎng)殖步驟中，使用的所述的配合餌料為含有基礎(chǔ)料50kg、白魚粉28kg、微晶纖維素 3.6kg、糊精14kg、生物提取油3.8kg的配合飼料，并且所述的配合飼料還添加有酪氨酸 50g。
全文摘要
本發(fā)明公開了曼氏無針烏賊墨囊較大個(gè)體的選育方法，包括親體暫養(yǎng)、育苗、幼體養(yǎng)殖和成體養(yǎng)殖步驟，其中在培育過程中的親體暫養(yǎng)步驟中增加對親體外套膜的氨基酸組分篩選暫養(yǎng)的曼氏無針烏賊，以選取具有墨囊快速增生潛力的親體曼氏無針烏賊；在幼體養(yǎng)殖步驟使用經(jīng)過墨囊增生相關(guān)氨基酸強(qiáng)化的鹵蟲或橈足類飼養(yǎng)曼氏無針烏賊幼體；在成體養(yǎng)殖步驟使用含有墨囊增生相關(guān)氨基酸的配合餌料飼養(yǎng)曼氏無針烏賊成體。其具有此篩選具有墨囊增生潛力的烏賊并提高該曼氏無針烏賊墨囊的生長速度和其藥用價(jià)值的特點(diǎn)，而且該方法步驟簡單、效果顯著，適于大規(guī)模推廣。
文檔編號A23K1/16GK101558748SQ20091009630
公開日2009年10月21日 申請日期2009年2月19日 優(yōu)先權(quán)日2009年2月19日
發(fā)明者于新秀, 吳常文, 徐佳晶 申請人:浙江海洋學(xué)院