專利名稱：：一種含醚菌酯和春雷霉素的殺菌組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種殺菌劑農(nóng)藥，具體是一種含醚菌酯和春雷霉素的殺菌組合物。
背景技術(shù)：
：水稻是我國主要糧食作物之一，種植面積約占全國耕地面積的1/4，年產(chǎn)量約占全國糧食總產(chǎn)的1/2。然而，水稻病害的危害一直嚴(yán)重影響著水稻生產(chǎn)，稻瘟病是水稻三大病害中流行情況最復(fù)雜，潛在威脅最大的病害，在1975—1990年的16年間，由稻瘟病引起的全球糧食損失高達(dá)1.57億噸，年平均超過O.l億噸。該病是由真菌感染所致，危害地域廣泛，在大風(fēng)吹動下可在同一時間席巻整個田野，摧毀水稻，甚至可能導(dǎo)致顆粒無收；因此水稻稻瘟病的防治就成了擺在廣大水稻種植戶面前的一大難題。春雷霉素屬農(nóng)用抗菌素類低毒殺菌劑，具有較強(qiáng)的內(nèi)吸滲透性，同時具有預(yù)防和治療作用，其治療作用更為顯著。其作用機(jī)理是干擾病原菌的氨基酸代謝的酯酶系統(tǒng)，破壞蛋白質(zhì)的生物合成，抑制菌絲的生長和造成細(xì)胞顆?；?，使病原菌失去繁殖和侵染能力，從而達(dá)到殺死病原菌防治病害的目的。對細(xì)菌、酵母以及植物真菌均有活性，尤其是對水稻稻瘟病菌的孢子萌發(fā)、茵絲生長和孢于形成均有抑制氨基酸合成為蛋白質(zhì)的作用。春雷霉素施用于水稻等作物后，經(jīng)內(nèi)吸傳導(dǎo)到植物體內(nèi)，顯著地抑制稻瘟病蛋白質(zhì)的合成乃至菌絲生長，使肽鍵拉長，抑制肽轉(zhuǎn)移酶的活性。醚菌酯是一種高效、廣譜、新型殺菌劑。醚菌酯對半知菌、子囊菌、擔(dān)子菌、卵菌綱等真菌引起的多種病害具有很好的活性，如水稻稻瘟病、葡萄白粉病、小麥銹病、馬鈴薯疫病、南瓜疫病等病害，特別對水稻稻瘟病、黃瓜白粉病、梨黑星病特效。醚菌酯不僅具有廣譜的殺菌活性，同時兼具有良好的保護(hù)和治療作用。醚菌酯與其它常用的殺菌劑無交互抗性，且比常規(guī)殺菌劑持效期長，并具有高度的選擇性，對作物、人畜及有益生物安全，對環(huán)境基本無污染。實際的農(nóng)藥田間試驗表明，重復(fù)且專一施用一種活性化合物來防治有害真菌在很多情況下導(dǎo)致菌株的快速選擇性，為降低抗性菌株選擇性的危險性，通常使用的方法是篩選出不同活性的化合物的混合物來防治有害真菌。而如何將具有不同作用機(jī)理的活性化合物進(jìn)行組合，使其能延緩抗性，降低施用量，減少防治成本，一直是人們不斷研究的課題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種對于防治稻瘟病病菌具有協(xié)同增效作用的殺菌組合物。本發(fā)明以如下技術(shù)方案解決上述技術(shù)問題本發(fā)明殺菌組合物由下述組分組成春雷霉素和醚菌酯以及農(nóng)藥的常規(guī)助劑，其中春雷霉素和醚菌酯作為活性組分，它們的重量比為1:29，優(yōu)選為2:8。春雷霉素和醚菌酯累積重量占制劑總重量比的911%。所述殺菌組合物的加工劑型為懸浮劑，配制時添加以下占制劑總重量比的助劑潤濕劑13%、增稠劑13%、消泡劑13%、分散劑35%、余量為水。試驗結(jié)果表明，本發(fā)明產(chǎn)品具有增效作用明顯、速效性好、持效期長、高效低殘留等優(yōu)點(diǎn)，可以延緩水稻稻瘟病對三環(huán)唑的抗性，發(fā)病前預(yù)防稻瘟病保護(hù)水稻，發(fā)病后提高水稻抗病力，治療稻瘟病，兼有預(yù)防和治療作用，與當(dāng)前市場需求相吻合，具有很大的市場曰目U景。本發(fā)明產(chǎn)品與其它常用的殺菌劑無交互抗性，而且比常規(guī)殺菌劑持效期長。該藥主要干擾氨基酸的代謝酯酶系統(tǒng)，從而影響蛋白質(zhì)的合成，抑制菌絲伸長和造成細(xì)胞顆?；?，但對孢子萌發(fā)無影響，具有高度的選擇性，對作物、人畜及有益生物安全，對環(huán)境基本無污染。本發(fā)明產(chǎn)品中的有效成分是春雷霉素和醚菌酯，它們的名稱、結(jié)構(gòu)式和基本物化參數(shù)如下a)有效成分I:醚菌酯IS0通用名稱kresoxim-methylCAS號143390-89-0化學(xué)名稱甲基(E)-2-甲氧基亞氨基-2-[2-(0-甲苯氧基)苯基]醋酸鹽結(jié)構(gòu)式具體實施方式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>分子式C18H19N04相對分子質(zhì)量(按2001年國際相對原子質(zhì)量計)313.35生物活性殺菌比重1.258;熔點(diǎn)10rC;蒸氣壓20。C時〈1X10-5Pa。b)有效成分II:春雷霉素ISO通用名稱Kasugamycin化學(xué)名稱[5-氨基-2-甲基-6-(2，3，4，5,6-羰基環(huán)己基氧代)吡喃-3-基氨基-a-亞氨瞎分子式Cl4H25N309相對分子質(zhì)量(按2001年國際相對原子質(zhì)量計)433.8生物活性殺菌；熔點(diǎn)202°C-204°C(分解)；蒸汽壓(25'C):〈13mPa;溶解性能以鹽酸鹽形式存在，易溶于水，微溶于甲醇,不溶于乙醇、丙醇、酯類(乙酸)、乙酸、三氯甲烷、苯及石油醚等有機(jī)溶劑。穩(wěn)定性在常溫下穩(wěn)定，在酸性和中性條件下穩(wěn)定，在堿性條件下易分解。本發(fā)明產(chǎn)品是由符合標(biāo)準(zhǔn)的春雷霉素和醚菌酯原藥與助劑溶解在適宜的溶劑中制成的懸浮液。長期存放可有少量沉淀或分層，但置于室溫下用手搖動應(yīng)能恢復(fù)原狀。本發(fā)明有效成分的分析方法是春雷霉素生物測定法螢光杯法(NIHJB-245);醚菌酯毛細(xì)管氣相色譜法。本發(fā)明產(chǎn)品主要應(yīng)用于水稻，防治對象是稻瘟病，有效成分施用量是250330克/公頃，使用方法是噴霧。結(jié)構(gòu)式:以下是三個實施例A、B、C的原料配比表:o々含量g，ml/kgABC春雷霉素原藥65%15.031.046.0醚菌酯原藥95%90.084.073.0潤濕劑/20.020.020.0增稠劑/10.010.010.0分散劑/40.040.040.0消泡劑/10.010.010.0水/815.0805.0801.0總計1000.01000.01000.0本發(fā)明產(chǎn)品的制備工藝是將購進(jìn)的春雷霉素原藥和醚菌酯原藥入廠檢驗有效成分后，通過計算，加入計算所需的春雷霉素原藥和醚菌酯原藥，在不斷攪拌的情況下，再加入潤濕劑、增稠劑和分散劑進(jìn)行充分?jǐn)嚢杌靹?，時間為45分鐘，補(bǔ)足水后，放入消泡劑，經(jīng)化驗室取樣分析合格后，通過灌裝機(jī)灌裝成品，粘上合格標(biāo)簽，包裝成成品，再有化驗室隨機(jī)抽樣合格后，入庫出廠。所述潤濕劑可以是聚乙二醇、拉開粉、十二烷基磺酸鈉、十二垸基硫酸鈉、壬(辛)基酚聚氧乙烯醚、木質(zhì)素磺酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉、二辛基丁二酸酯磺酸鈉、椰子油N一甲基?；撬徕c、十六烷基甜菜堿、二壬基磷酸鈉、茶皂素、月桂醇醚硫酸鈉以及它們的復(fù)配物。所述分散劑可以是亞甲基雙甲基苯磺酸鈉、單烷基萘磺酸鈉、雙烷基萘磺酸鈉、萘磺酸甲醛縮合物鈉鹽、烷基或芳烷基磺酸甲酸縮合物鈉鹽、萘酚磺酸甲醛縮合物鈉鹽、石油磺酸鈉、烷基苯磺酸鈣鹽、N—甲基一脂肪酰基一?；撬猁}、有機(jī)磷酸酯類、垸基酚聚氧乙烯醚甲醛縮合物、木質(zhì)素磺酸鹽、壬(辛)基酚聚氧乙烯醚、脂肪酸聚氧乙烯酯、烷基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚以及它們的復(fù)配物。所述增稠劑可以是聚乙二醇雙硬脂酸酯、聚乙烯醇、聚己二醇、聚丙烯酰胺、膨潤土、水玻璃、黃原膠、明膠、阿拉伯膠、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉以及這些品種的復(fù)配物。所述消泡劑可以是有機(jī)硅，也可以是其它品種的消泡劑。本發(fā)明由南寧德豐富化工有限責(zé)任公司將本發(fā)明產(chǎn)品與春雷霉素和醚菌酯的單劑進(jìn)行農(nóng)藥室內(nèi)聯(lián)合毒力測定對比及本發(fā)明產(chǎn)品的配方篩選試驗，有關(guān)數(shù)據(jù)及結(jié)果如下1試驗依據(jù)NY/T1156.2-2006;供試靶標(biāo)水稻稻瘟病原菌。本試驗從田間采集稻瘟病樣品并分離純化得到水稻稻瘟病菌種，采用菌絲生長速率抑制6法，進(jìn)行春雷霉素與醚菌酯不同比例二元混配的聯(lián)合毒力測定，評價其增效作用，并綜合分析其毒力、增效作用及生產(chǎn)成本，確定這兩種藥劑混配的最佳配比。2試驗條件2.1供試靶標(biāo)水稻稻瘟病(/yn'cWan'aoryzse)，從廣西南寧市武鳴縣水稻田采集稻瘟病樣品，室內(nèi)分離純化鑒定培養(yǎng)，得到水稻稻瘟病菌種。2.2培養(yǎng)條件菌種保存在25'C光照培養(yǎng)箱中。接種后置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，溫度27士rC，相對濕度85%左右條件下培養(yǎng)。2.3儀器設(shè)備2.3.l光照培養(yǎng)箱(廣東醫(yī)療器械廠)；2.3.2電子天平(感量O.lmg);2.3.3打孔器；2.3.4培養(yǎng)皿；2.3.5接種器；2.3.6移液管2.3.7卡尺等。3試驗設(shè)計3.1試材準(zhǔn)備PDA培養(yǎng)基(1000mU的制備馬鈴薯200g，葡萄糖17g，瓊脂17g。供試的稻瘟病菌株，先在PDA培養(yǎng)基上，置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，溫度27士rC，相對濕度85%左右條件下培養(yǎng)備用。3.2試劑3.2.1試驗藥劑混劑l號(春雷霉素醚菌酯=3.0:7.0，下同)、混劑2號(2.5:7.5)、混劑3號(2.0:8.0)、混劑4號(1.5:8.5)、混劑5號(1.0:9.0)。3.2.2對照藥劑醚菌酯(kresoxim-methyl)原藥，含量94%，德國巴斯夫歐洲公司，市購；春雷霉素(kasugamycin)原藥，含量65%，華北制藥集團(tuán)制劑有限公司，市購。3.2.3其他試劑丙酮(分析純)；0.05%吐溫-80蒸餾水溶液。3.3劑量設(shè)置3.3.1劑量設(shè)置根據(jù)預(yù)備試驗結(jié)果，設(shè)置等比濃度如下春雷霉素設(shè)置處理濃度為80、40、20、10、5mg/L;醚菌酯設(shè)置處理濃度為128、64、32、16、8mg/L;混劑1號設(shè)置處理濃度為64、32、16、8、4mg/L;混劑2號設(shè)置處理濃度為64、32、16、8、4mg/L;混劑3號設(shè)置處理濃度為64、32、16、8、4mg/L;混劑4號設(shè)置處理濃度為64、32、16、8、4mg/U混劑5號設(shè)置處理濃度為64、32、16、8、4mg/L。3.4處理時間測定日期為2009年7月6日。4試驗步驟4.1藥劑配制在預(yù)備試驗的基礎(chǔ)上，準(zhǔn)確稱取94%醚菌酯原藥1.0638g，用丙酮溶解，裝入100ml的容量瓶中，用丙酮定容，得10g'L—i母液；準(zhǔn)確稱取65%春雷霉素原藥1.5385g，用丙酮溶解，裝入100ml的容量瓶中，用丙酮定容，得10g'L—'母液；然后分別稱取醚菌酯母液、春雷霉素母液按下列比例混配混劑1號、春雷霉素醚菌酯=3.0:7.0;混劑2號、春雷霉素醚菌酯=2.5:7.5;;混劑3號、春雷霉素醚菌酯=2.0:8.0;8混劑4號、春雷霉素醚菌酯=1.5:8.5;混劑5號、春雷霉素醚菌酯=1.0:9.0;最后再將兩種單劑和上述5種不同配比的混劑母液，分別用O.05%吐溫-80蒸餾水溶液按照等比梯度稀釋成5個濃度的藥液，劑量設(shè)置參見3.3.1。4.2藥劑處理在無菌條件下，將預(yù)先融化的滅菌培養(yǎng)基定量加入無菌錐形瓶中，從低濃度到高濃度依次定量吸取相同體積(lml)藥液，分別加入上述錐形瓶中，充分搖勻，然后等量倒入4個直徑為9cm的培養(yǎng)皿中，制成相應(yīng)濃度的含藥平板。試驗設(shè)不添加藥劑的PDA平板處理為空白對照。4.3菌餅的移植與培養(yǎng)用滅過菌的孔徑為5mm的打孔器在培養(yǎng)好的菌落上選均勻部分打取菌餅，用消毒鑷子夾取菌餅放于藥液處理過的PDA平板上，菌絲面朝下，在27。C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7d，與空白對照相比較，每處理4次重復(fù)。5數(shù)據(jù)調(diào)查與統(tǒng)計分析5.1調(diào)査方法視空白對照培養(yǎng)皿中菌的生長情況，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7d左右，用"十"字交叉法測定2次，以其平均值代表各處理菌落的增長直徑。5.2計算方法根據(jù)調(diào)查數(shù)據(jù)，按照公式(1)計算防效，單位為百分率(％)，計算結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后兩位。尸=A-Axl0。..........................................(1)式中尸——防治效果"。^空白對照菌落直徑A~—藥劑處理菌落直徑5.3統(tǒng)計分析利用DPS(數(shù)據(jù)處理軟件)及Excel,建立各藥劑的毒力回歸方程，計算LCs。值、LC9。和95%置信限。5.4混配劑共毒系數(shù)計算及增效作用評價9釆用孫云沛法(I960)評價混劑增效作用。根據(jù)下列公式計算混劑實測毒力指數(shù)c<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>似式中ATI——混劑實測毒力指數(shù)；S——標(biāo)準(zhǔn)藥劑的ECs。，單位為毫克每升(mg/L);M——混劑的ECs。，單位為毫克每升(mg/L)。根據(jù)下列公式計算混劑理論毒力指數(shù)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>式中TTI——混劑理論毒力指數(shù)；TIA——A藥劑毒力指數(shù)；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>-A藥劑在混劑中的百分含量，單位為百分率(％);一B藥劑毒力指數(shù)；-B藥劑在混劑中的百分含量，單位為百分率(％)。根據(jù)下列公式計算混劑的共毒系數(shù)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>式中CTC——共毒系數(shù)；ATI——混劑實測毒力指數(shù)；TTI——混劑理論毒力指數(shù)。復(fù)配劑的共毒系數(shù)(CTC)》120表現(xiàn)為增效作用；CTC《80表現(xiàn)為拮抗作用；80<ctc<120表現(xiàn)為相加作用。6試驗結(jié)果與分析6.1單劑對水稻稻瘟病的毒力測定結(jié)果單劑處理菌落的發(fā)病情況和毒力測定結(jié)果見附表l，經(jīng)統(tǒng)計分析，單劑的毒力回歸方程及檢驗結(jié)果見附表2。從附表2看出，醚菌酯對水稻稻瘟病的ECs。為23.72，EC9。為253.82;春雷霉素對水稻稻瘟病的ECs。為21.14，EC^。為179.63。6.2混劑對水稻稻瘟病的毒力測定結(jié)果分別測定了5個不同配比的春雷霉素與醚菌酯對水稻稻瘟病的毒力?；靹┑亩玖黠@高于春雷霉素與醚菌酯。毒力高低次序依次為混劑3號>混劑4號>混劑2號〉混劑5號>混劑1號，毒力最高的混劑3號(即春雷霉素醚菌酯=2.0:8.0)對水稻稻瘟病的ECs。為6.09，EU為174.54，毒力最低的混劑1號(即春雷霉素醚菌酯=3.0:7.0)對水稻稻瘟病的ECs。為19.78，EC9。為141.19。(見附表2)6.3混劑對水稻稻瘟病的共毒系數(shù)從共毒系數(shù)(見附表3)計算結(jié)果看出，各混劑的共毒系數(shù)分別為122.53、139.41、165.21、145.53、131.36，均大于120，表明這些混劑增效作用明顯，其中混劑3號(春雷霉素*醚菌酯=2.0:8.0)，其共毒系數(shù)為165.21，增效最為明顯，綜合成本、防效、增效情況等多方面的因素考慮，該配比比較合理。7試驗結(jié)論7.1本次試驗所測定的春雷霉素和醚菌酯5個配比混劑對水稻稻瘟病的共毒系數(shù)(CTC)都大于120，表現(xiàn)出明顯的增效作用，說明利用春雷霉素和醚菌酯混配是合理可行的，可以顯著提高藥效.7.2在所測定的5個配比混劑中，混劑3號(即春雷霉素醚菌酯=2.0:8.0)的共毒系數(shù)大于其他混劑。綜合考慮混劑的增效作用、毒力及經(jīng)濟(jì)性能等，認(rèn)為混劑3號的配比比較合理。附表1春雷霉素、醚菌酯及其混劑對水稻稻瘟病的毒力測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>64419.1180.45.85421.806232431.6462.95.32931.5051混劑1號16442.6947.54.93771.20418457.7226.64.37460.90314468.1412.13.82870.602164419.0880.45.85571.806232424.6172.75.60351.5051混劑2號16436.3256.45.16071.20418451.5935.14.61790.90314460.6122.64.24660.602164415.7585.06.03771.806232420.4878.45.78721.5051混劑3號16429.6965.65.40201.20418437.9254.25.10440.90314445.8343.14.82720.602164420.8977.95.76791.778232431.8262.75.32261.4771混劑4號16444.9644.44.85801.17618456.9527.74.40690.87514467.8712.43.84720.574064419.2280.25.84871.806232426.8469.65.51251.5051混劑5號16438.9252.85.06931.20418451.8234.84.60930.90314460.9322.14.23160.6021CK/476.810.0//附表2供試藥劑對水稻稻瘟病的毒力回歸方程及檢驗結(jié)果藥劑毒力回歸方程相關(guān)系數(shù)ECs。及CU(mg/L)ECg。及CU(mg/L)SE(B)醚菌酯原藥Y=l.3886X+3.09490.993823.72(17.97-29.65)253.82(130.23-377.41)0.174312<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>權(quán)利要求1.一種含醚菌酯和春雷霉素的殺菌組合物，其特征在于含有春雷霉素和醚菌酯作為活性組分制成的殺菌劑中，春雷霉素與醚菌酯的重量比為1∶2～9，春雷霉素和醚菌酯累積重量占制劑總重量比的9～11％。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述含醚菌酯和春雷霉素的殺菌組合物，其特征在于春雷霉素與醚菌酯的重量比為2:8。全文摘要本發(fā)明公開了一種含醚菌酯和春雷霉素的殺菌組合物，該組合物中含有春雷霉素和醚菌酯作為活性組分制成的殺菌劑中，春雷霉素與醚菌酯的重量比為1∶2～9，春雷霉素和醚菌酯累積重量占制劑總重量比的9～11％。本發(fā)明產(chǎn)品具有增效作用明顯、速效性好、持效期長、高效低殘留等優(yōu)點(diǎn)，可以延緩水稻稻瘟病對三環(huán)唑的抗性，發(fā)病前預(yù)防稻瘟病保護(hù)水稻，發(fā)病后提高水稻抗病力，治療稻瘟病，兼有預(yù)防和治療作用，與當(dāng)前市場需求相吻合，具有很大的市場前景。文檔編號A01N43/16GK101664031SQ200910114449公開日2010年3月10日申請日期2009年9月30日優(yōu)先權(quán)日2009年9月30日發(fā)明者史萬琪,琦李,李婧婧,魯王申請人:南寧市德豐富化工有限責(zé)任公司