專利名稱：一種綠僵菌復(fù)配殺蟲組合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種農(nóng)藥組合物及其應(yīng)用，尤其是一種含有綠僵菌的復(fù)配殺蟲組合物及其防治作物害蟲的應(yīng)用。

背景技術(shù)：
蠐螬是金龜甲幼蟲的總稱，屬鞘翅目，金龜子總科，為害大豆、花生、甘蔗、玉米以及一些中藥材、牧草、花卉、樹苗、人工草坪等，其中以為害花生最為嚴(yán)重。近幾年來(lái)，隨著種植結(jié)構(gòu)的調(diào)整、作物布局的改變以及氣候的變化，蠐螬在我國(guó)大范圍內(nèi)連年發(fā)生，為害猖獗。蠐螬的生活史較長(zhǎng)，完成一個(gè)世代所需時(shí)間1-6年不等，在生活史中，幼蟲期歷時(shí)最長(zhǎng)，且由于其在地下為害，所以防治起來(lái)相當(dāng)困難。對(duì)于蠐螬的防治主要還是以化學(xué)農(nóng)藥為主，常常大量使用化學(xué)農(nóng)藥，有的甚至使用高毒高殘留的劇毒農(nóng)藥，容易污染環(huán)境、殺傷天敵及其它有益生物及造成害蟲再猖獗和抗藥性。
綠僵菌屬半知菌類、叢梗菌目、叢梗霉科、綠僵菌屬，是一種廣譜的昆蟲病原菌，具有一定的專一性，對(duì)人畜無(wú)害，同時(shí)還具有不污染環(huán)境、無(wú)殘留、害蟲不會(huì)產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，在國(guó)外應(yīng)用其防治害蟲的面積超過了白僵菌，防治效果可與白僵菌媲美。目前，有的綠僵菌菌株已經(jīng)開發(fā)為真菌殺蟲劑，并已經(jīng)登記注冊(cè)，如100億孢子/毫升金龜子綠僵菌油懸浮劑用于灘涂防治飛蝗。
單獨(dú)使用綠僵菌效果慢且防效不穩(wěn)定，綠僵菌與敵殺死(溴氰菊酯)、辛硫磷、滅幼脲III等混用可以提高殺蟲速度[見福建林學(xué)院學(xué)報(bào)2001，21(4)308～311]，也已有將綠僵菌與菊酯類農(nóng)藥制成組合物的報(bào)道，但一般化學(xué)藥劑對(duì)孢子存活和萌發(fā)有影響，很難制成穩(wěn)定的混合制劑。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種綠僵菌與化學(xué)農(nóng)藥的復(fù)配組合物，組合物不但能提高殺蟲速度和效果，而且穩(wěn)定性有顯著提高、使用更方便、成本更低；本發(fā)明另一目的是提供一種用綠僵菌與新煙堿類殺蟲劑的組合物防治地下害蟲蠐螬的方法。
為解決上述技術(shù)問題，發(fā)明人通過大量的生物測(cè)定篩選，發(fā)現(xiàn)綠僵菌與新煙堿類殺蟲劑以一定比例復(fù)配，對(duì)蠐螬有明顯的增效作用。在上述發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)上，經(jīng)過大量配方篩選試驗(yàn)，形成了本發(fā)明的技術(shù)方案，即 一種綠僵菌復(fù)配殺蟲組合物，其特征在于，其有效成分為金龜子綠僵菌和一種新煙堿類殺蟲劑。
組合物中綠僵菌的含量為1～100億孢子/克，新煙堿類殺蟲劑的含量為10～200克/千克，其余為農(nóng)藥輔助成分。所述綠僵菌為金龜子綠僵菌(Metarhiziumanisopliae)的自然分離菌株及其經(jīng)人工培育的變種，可用其液體發(fā)酵產(chǎn)生的營(yíng)養(yǎng)菌絲體，也可用固體發(fā)酵產(chǎn)生的分生孢子，本發(fā)明組合物優(yōu)選采用固體發(fā)酵產(chǎn)生的分生孢子粉制備。作為對(duì)本發(fā)明綠僵菌殺蟲組合物的一種改進(jìn)，組合物中綠僵菌的含量?jī)?yōu)選為5～50億孢子/克。
所述新煙堿類殺蟲劑為吡蟲啉、噻蟲嗪、噻蟲胺、啶蟲脒中的任意一種。作為對(duì)本發(fā)明綠僵菌殺蟲組合物的一種改進(jìn)，組合物中新煙堿類殺蟲劑的含量?jī)?yōu)選為20～100克/千克。
本發(fā)明的組合物除有效成分綠僵菌與新煙堿類殺蟲劑之外，還包括有益于有效成分在制劑中穩(wěn)定和藥效發(fā)揮的輔助成分，以便制成適合使用的劑型，比如，可以用已知的方法制備成可濕性粉劑、顆粒劑、水分散粒劑或油懸浮劑等。
所述輔助成分包括分散劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑、穩(wěn)定劑、防凍劑、溶劑、填料等及其它有益于有效成分在制劑中穩(wěn)定和藥效發(fā)揮的已知物質(zhì)，都是農(nóng)藥制劑中常用或允許使用的各種成分，并無(wú)特別限定，具體成分和用量根據(jù)配方要求通過簡(jiǎn)單試驗(yàn)確定。
適用于制備本發(fā)明組合物可濕性粉劑和水分散粒劑的分散劑包括木質(zhì)素磺酸鹽(如木質(zhì)素磺酸鈉)、改性木質(zhì)素磺酸鹽、萘磺酸甲醛縮合物、烷基萘甲醛縮合物磺酸鹽、脂肪醇聚氧乙烯醚、二丁基萘磺酸鈉、十二烷基聚氧乙烯醚磷酸酯、芐基酚聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚、拉開粉中的一種或一種以上。
適用于制備本發(fā)明組合物可濕性粉劑和水分散粒劑的潤(rùn)濕劑包括特種聚醚改性聚有機(jī)硅氧烷、十二烷基硫酸鈉、脂肪酸硫酸鹽、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基酚基聚氧乙烯基醚中的一種或幾種。
適用于制備本發(fā)明組合物水分散粒劑的崩解劑包括膨潤(rùn)土、硫酸銨、尿素、硫酸鎂、蔗糖中的一種或一種以上。
適用于制備本發(fā)明組合物顆粒劑和水分散粒劑的粘合劑包括石蠟油、聚乙二醇、聚乙烯醇、環(huán)糊精、淀粉、硅酸鈉中的一種或一種以上。
適用于制備本發(fā)明組合物油懸浮劑的油包括菜籽油、芝麻油、花生油等植物油及石蠟油；乳化劑可以選用山梨醇酐單油酸脂、失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚、脂肪醇與環(huán)氧乙烷縮合物、聚氧乙烯脂肪酸酯、三乙醇胺單油酸脂、蓖麻油與環(huán)氧乙烷縮合物中的一種或幾種。
本發(fā)明組合物制劑中可以加入抗氧化劑或抗紫外劑作為穩(wěn)定劑，可用的成分包括叔丁基對(duì)羥基茴香醚(BHA)、2，6-二叔丁基對(duì)甲酚(BHT)、沒食子酸丙酯、特丁基對(duì)苯二酚等中的一種或一種以上，使用量為制劑總重量的0％-5％，優(yōu)選為1％-3％。
本發(fā)明所述的綠僵菌復(fù)配殺蟲組合物可用于防治危害植物的地上或地下害蟲，如蚜蟲、薊馬、蠐螬、金針蟲等。本發(fā)明組合物特別適合用于防治危害植物地下部分的各種蠐螬，適用的場(chǎng)所或植物包括草坪、花生、甘薯、蔬菜等。
施藥方法可以采取噴霧、淋灌、撒施等，以上施藥方法均可與進(jìn)一步的混土相結(jié)合。在蠐螬1-2齡盛期施用本發(fā)明組合物效果較好，施藥量根據(jù)蟲種、蟲口密度、蟲齡和土壤、作物等條件不同經(jīng)簡(jiǎn)單試驗(yàn)確定。
本發(fā)明組合物具有以下優(yōu)點(diǎn)兩種有效成分組合后對(duì)蠐螬有增效作用；與單用綠僵菌比較施用方便，藥效穩(wěn)定，速效性好；與單用化學(xué)農(nóng)藥相比，持效期長(zhǎng)，減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量，減少環(huán)境污染；組合物有效組分的作用機(jī)理不同，害蟲不容易產(chǎn)生抗藥性。

具體實(shí)施例方式 本發(fā)明的組合物可以用已知的方法制備成適合農(nóng)業(yè)使用的劑型，比較好的劑型為可濕性粉劑、顆粒劑、水分散粒劑或油懸浮劑。
為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，本發(fā)明進(jìn)一步用以下具體實(shí)施例和試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行說(shuō)明，但本發(fā)明絕非限于這些例子。以下所述綠僵菌孢子均指金龜子綠僵菌分生孢子，所述新煙堿類殺蟲劑的量均為有效量，實(shí)際配制時(shí)根據(jù)所用原藥含量進(jìn)行折算，偏差的量通過填料加入量進(jìn)行調(diào)節(jié)。
實(shí)施例1綠僵菌。啶蟲脒顆粒劑(綠僵菌1億孢子/g+啶蟲脒5g/kg) 稱取金龜子綠僵菌(R8-4菌株，中國(guó)農(nóng)科院植物保護(hù)研究所研制)50億孢子/g高孢粉20g、啶蟲脒5g、石蠟油10g、玉米芯顆粒965g，將啶蟲脒用少量丙酮溶解后與玉米芯顆?；旌暇鶆?，再在混合器中將綠僵菌孢子粉與玉米芯顆?；旌?，使孢子粉均勻吸附在玉米芯顆粒上，最后在攪拌下噴入石蠟油封閉以減少孢子粉脫落和減少吸水。
實(shí)施例2綠僵菌。吡蟲啉可濕性粉劑(綠僵菌100億孢子/g+吡蟲啉100g/kg) 稱取金龜子綠僵菌(重慶重大生物技術(shù)發(fā)展有限公司)200億孢子/g高孢粉500g、吡蟲啉100g、木質(zhì)素磺酸鈣30g、十二烷基硫酸鈉10g、2，6-二叔丁基對(duì)甲酚20g、高嶺土340g，將吡蟲啉、木質(zhì)素磺酸鈣、十二烷基硫酸鈉、2，6-二叔丁基對(duì)甲酚和高嶺土混合后用氣流粉碎機(jī)粉碎制得超細(xì)粉，再與綠僵菌孢子粉混合均勻即得產(chǎn)品。
實(shí)施例3綠僵菌。吡蟲啉可濕性粉劑(綠僵菌40億孢子/g+吡蟲啉80g/kg) 稱取金龜子綠僵菌(R8-4菌株，中國(guó)農(nóng)科院植物保護(hù)研究所研制)100億孢子/g高孢粉400g、吡蟲啉80g、烷基萘甲醛縮合物磺酸鹽30g、脂肪醇聚氧乙烯醚10g、叔丁基對(duì)羥基茴香醚20g、硅藻土460g，將吡蟲啉、烷基萘甲醛縮合物磺酸鹽、脂肪醇聚氧乙烯醚、叔丁基對(duì)羥基茴香醚和硅藻土混合后用氣流粉碎機(jī)粉碎制得超細(xì)粉，再與綠僵菌孢子粉混合均勻即得產(chǎn)品。
實(shí)施例4綠僵菌。噻蟲嗪水分散粒劑(綠僵菌50億孢子/g+噻蟲嗪200g/kg) 稱取金龜子綠僵菌(R8-4菌株，中國(guó)農(nóng)科院植物保護(hù)研究所研制)100億孢子/g高孢粉500g、噻蟲嗪80g、烷基萘甲醛縮合物磺酸鹽50g、脂肪醇聚氧乙烯醚20g、叔丁基對(duì)羥基茴香醚50g、硫酸銨20g、淀粉10、硅藻土270g，將噻蟲嗪、烷基萘甲醛縮合物磺酸鹽、脂肪醇聚氧乙烯醚、叔丁基對(duì)羥基茴香醚、硫酸銨和硅藻土混合粗粉碎后，用氣流粉碎機(jī)粉碎制得超細(xì)粉，將所得超細(xì)粉在流化床造粒機(jī)中以淀粉溶液為粘結(jié)劑進(jìn)行造粒，干燥后經(jīng)振動(dòng)篩進(jìn)行篩分得產(chǎn)品。
實(shí)施例5綠僵菌。吡蟲啉油懸浮劑(綠僵菌30億孢子/g+吡蟲啉20g/kg) 稱取金龜子綠僵菌(重慶重大生物技術(shù)發(fā)展有限公司)200億孢子/g高孢粉150g、吡蟲啉20g、失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚100g、十二烷基苯磺酸鈣20g、叔丁基對(duì)羥基茴香醚30g、花生油380g、芝麻油300g，將吡蟲啉、失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚、十二烷基苯磺酸鈣、叔丁基對(duì)羥基茴香醚和植物油按配方的比例依次加入混合釜中，攪拌均勻，再進(jìn)入砂磨機(jī)進(jìn)行砂磨，砂磨至90％粒徑小于5微米后與綠僵菌孢子粉混合均勻即得油懸浮劑產(chǎn)品。
實(shí)施例6綠僵菌。噻蟲胺油懸浮劑(綠僵菌10億孢子/g+噻蟲胺50g/kg) 稱取金龜子綠僵菌(R8-4菌株，中國(guó)農(nóng)科院植物保護(hù)研究所研制)100億孢子/g高孢粉100g、噻蟲胺50g、山梨醇酐單油酸脂120g、亞甲基奈磺酸鈉20g、沒食子酸丙酯50g、菜籽油660g，將噻蟲胺、山梨醇酐單油酸脂、亞甲基奈磺酸鈉、沒食子酸丙酯和菜籽油按配方的比例依次加入混合釜中，攪拌均勻，再進(jìn)入砂磨機(jī)進(jìn)行砂磨，砂磨至90％粒徑小于5微米后與綠僵菌孢子粉混合均勻即得油懸浮劑產(chǎn)品。
生物測(cè)定試驗(yàn)例 不同品種的農(nóng)藥混合后，通常表現(xiàn)出三種作用類型，即相加作用、增效作用和拮抗作用，但具體為何種作用，只有通過大量試驗(yàn)才能知道。復(fù)配增效的配方，能明顯提高實(shí)際防治效果，降低農(nóng)藥的使用量，有助于延緩害蟲抗藥性的產(chǎn)生速度。
本發(fā)明申請(qǐng)人通過大量的篩選試驗(yàn)，意外發(fā)現(xiàn)綠僵菌與新煙堿類殺蟲劑以一定比例復(fù)配，對(duì)蠐螬有明顯的增效作用，而不僅僅是兩種藥劑的簡(jiǎn)單相加，這從以下生物測(cè)定實(shí)例可以清楚看出。
試驗(yàn)藥劑金龜子綠僵菌(R8-4菌株，中國(guó)農(nóng)科院植物保護(hù)研究所研制)100億孢子/g高孢粉；95％吡蟲啉原藥(江蘇常隆化工有限公司)；95.8％噻蟲嗪原藥(瑞士先正達(dá)公司)。
試驗(yàn)對(duì)象銅綠麗金龜子(Anomala corpulenta Motschulsky)2齡幼蟲 生物測(cè)定方法采用浸漬法。用加0.05％吐溫-80的無(wú)菌水配制稀釋綠僵菌孢子懸浮液，新煙堿類殺蟲劑先用丙酮加10％曲拉通X-100配成母液，然后用0.05％吐溫-80的無(wú)菌水稀釋至需要的濃度，組合物采用稀釋液混合配制；將幼蟲在藥液中浸漬30s，在無(wú)菌濾紙上吸去多余藥液后放入盛有30g滅菌土的培養(yǎng)皿中，添加胡蘿卜片每皿5頭飼養(yǎng)。各濃度設(shè)4次重復(fù)，每重復(fù)供試蟲數(shù)均為10頭，設(shè)0.05％吐溫-80為對(duì)照。每日檢查、記錄死亡蟲數(shù)。
結(jié)果計(jì)算與評(píng)價(jià)方法 活性成分混合物的預(yù)期效力(即理論防治效果，％)使用Colby公式確定并與觀察到的效力比較 Colby公式E＝X+Y-X*Y/100 E當(dāng)組合物中活性成分A使用濃度為a，活性成分B使用濃度為b時(shí)的組合物預(yù)期效力， X活性成分A使用劑量為a時(shí)的效力， Y活性成分B使用劑量為b時(shí)的效力。
當(dāng)觀察到的防治效果超過預(yù)期防效時(shí)說(shuō)明有增效作用。
綠僵菌與吡蟲啉組合對(duì)蠐螬的增效作用測(cè)定見表1。
表1綠僵菌與吡蟲啉組合對(duì)蠐螬的增效效果

測(cè)定結(jié)果(表1)表明綠僵菌1×105～1×107孢子/ml與吡蟲啉10～200mg/L復(fù)配組合使用8個(gè)配比(M1～M8)對(duì)蠐螬的實(shí)際觀察效力均大于按Colby公式計(jì)算的理論效力，說(shuō)明均表現(xiàn)有增效作用。
綠僵菌與噻蟲嗪組合對(duì)蠐螬的增效作用測(cè)定見表1。
表2綠僵菌與噻蟲嗪組合對(duì)蠐螬的增效效果
測(cè)定結(jié)果(表2)表明綠僵菌1×105～1×107孢子/ml與噻蟲嗪10～180mg/L復(fù)配組合使用8個(gè)配比(M1～M8)對(duì)蠐螬的實(shí)際觀察效力均大于按Colby公式計(jì)算的理論效力，說(shuō)明均有增效作用。
貯存孢子活性檢測(cè) 將蛋白胨馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PPDA)直接涂抹于載玻片上，再取少許含綠僵菌分生孢子粉的本發(fā)明組合物用含0.1％甘油的無(wú)菌水稀釋至1×107個(gè)/mL，滴加20μL孢子懸浮液后均勻涂抹，28℃保濕36h。每種處理統(tǒng)計(jì)300個(gè)左右的孢子，普通顯微鏡400倍下觀察并記錄孢子萌發(fā)情況，計(jì)算孢子萌發(fā)率。
表3本發(fā)明組合物中綠僵菌孢子的貯存穩(wěn)定性 田間應(yīng)用試驗(yàn) 1、防治草坪蠐螬 按表4中的各藥劑的使用劑量，用球場(chǎng)砂(20g/m2)與藥劑拌勻后撒施(實(shí)施例1的顆粒劑直接撒施)，以化學(xué)制劑毒死蜱(40％乳油)0.25mL/m2和清水為對(duì)照，施藥后澆水一次。
施藥前1d和施藥后7d、15d、30d、60d，分別按五點(diǎn)取樣，每點(diǎn)收集25×25cm2樣方地表15cm內(nèi)的所有蠐螬，記錄活蟲數(shù)，計(jì)算出蟲口減退率和校正防效，用DPS軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。
表4本發(fā)明組合物防治草坪蠐螬的田間試驗(yàn)結(jié)果

由上表結(jié)果可見，本發(fā)明實(shí)施例1～6組合物藥后7～60d對(duì)草坪蠐螬的防治效果均在84％以上，已完全滿足草坪害蟲控制要求，而對(duì)照藥劑40％毒死蜱乳油30天后的防效就在50％以下，效果較差且殘效期短，綠僵菌單用的處理藥后7天的防效也在50％左右，雖然殘效期較長(zhǎng)但速效性差，不能迅速控制危害。
40％毒死蜱乳油用量折合每公頃有效成分為2000g，而本發(fā)明實(shí)施例中化學(xué)組分新煙堿類殺蟲劑折合每公頃有效成分為300～1000g，僅為毒死蜱的50％以下，這樣大大減少了化學(xué)農(nóng)藥的使用量，有利于環(huán)境保護(hù)和生態(tài)安全。
2、防治花生蠐螬 試驗(yàn)地區(qū)發(fā)生的金龜子的優(yōu)勢(shì)種大黑鰓金龜(占55-60％)，其次為暗黑鰓金龜和銅綠麗金龜。
試驗(yàn)方法采用隨機(jī)排列法在田間設(shè)定小區(qū)，每個(gè)小區(qū)33m2，采用清水對(duì)照，每個(gè)處理3次重復(fù)。于整地施肥后播種前將藥劑按照試驗(yàn)設(shè)定的用量拌細(xì)土(30kg/畝)溝施于播種溝(或穴)附近，深度10-15cm，施后覆土。
花生出苗時(shí)、花生成熟中期和收獲時(shí)共調(diào)查三次，每個(gè)小區(qū)隨機(jī)取5點(diǎn)，每點(diǎn)10穴，第一次調(diào)查花生出苗狀況及苗情，第二次調(diào)查殘蟲數(shù)，第三次調(diào)查每穴活蟲、總莢數(shù)和被害莢數(shù)，計(jì)算被害果率、防治效果。
表5本發(fā)明組合物防治花生蠐螬的田間試驗(yàn)結(jié)果 表5結(jié)果表明，本發(fā)明實(shí)施例組合物對(duì)花生蠐螬的防效明顯好于有機(jī)磷農(nóng)藥40％毒死蜱乳油，也顯著優(yōu)于吡蟲啉或綠僵菌單劑的防效，說(shuō)明本發(fā)明組合物具有增效作用、對(duì)花生蠐螬的控制效果好。
權(quán)利要求
1.一種綠僵菌復(fù)配殺蟲組合物，其特征在于，其有效成分為金龜子綠僵菌和一種新煙堿類殺蟲劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1，其特征在于，組合物中綠僵菌的含量為1～100億孢子/克，新煙堿類殺蟲劑的含量為10～200克/千克，其余為農(nóng)藥輔助成分。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2，其特征在于，所述新煙堿類殺蟲劑為吡蟲啉、噻蟲嗪、噻蟲胺、啶蟲脒中的任意一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求2，其特征在于，組合物中綠僵菌的含量為5～50億孢子/克。
5.根據(jù)權(quán)利要求2，其特征在于，組合物中新煙堿類殺蟲劑的含量為20～100克/千克。
6.根據(jù)權(quán)利要求3，其特征在于，組合物的劑型為可濕性粉劑、顆粒劑、水分散粒劑、微膠囊或油懸浮劑。
7.權(quán)利要求1所述的綠僵菌復(fù)配殺蟲組合物用于防治危害植物的害蟲。
8.根據(jù)權(quán)利要求7，其特征在于，組合物用于防治蠐螬。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種綠僵菌復(fù)配殺蟲組合物，其特征是有效成分為金龜子綠僵菌和一種新煙堿類殺蟲劑，組合物中綠僵菌的含量為1～100億孢子/克，新煙堿類殺蟲劑的含量為10～200克/千克，其余為農(nóng)藥輔助成分。本發(fā)明組合物對(duì)蠐螬有明顯增效作用，適用于防治危害植物的害蟲，尤其是蠐螬，可用于草坪、花生、甘薯、蔬菜等多種作物或場(chǎng)所，具有藥效穩(wěn)定、速效性好、持效期長(zhǎng)和安全環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A01P7/04GK101755847SQ200910225149
公開日2010年6月30日 申請(qǐng)日期2009年11月25日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月25日
發(fā)明者曹明章, 朱衛(wèi)鋒, 徐齊云, 孫華英, 文伯健, 孔建 申請(qǐng)人:深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司