專利名稱：：一種復(fù)合微生物菌劑及生產(chǎn)方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及飼料添加劑，具體的說是一種復(fù)合微生物菌劑及生產(chǎn)方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：目前現(xiàn)有微生物添加劑產(chǎn)品大多以單一菌種進行培養(yǎng)為主體。復(fù)合微生物菌群多采用同一種類、同一屬的具有相似或相近的特點的細菌組成復(fù)合益生菌，這種復(fù)合菌具有細菌的代謝產(chǎn)物成分單一；作用效果不理想；產(chǎn)品效果不穩(wěn)定；產(chǎn)品質(zhì)量難控制等問題。這種單一菌群和復(fù)合菌群生產(chǎn)出的微生物飼料添加劑具有功效單一、粗糙、缺乏系統(tǒng)性、飼料的酸化程度差的缺點，給微生物飼料添加劑的發(fā)展帶來很多不便。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的之一是提供一種好氧、厭氧、兼性厭氧的復(fù)合微生物菌劑及生產(chǎn)方法和應(yīng)用。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為一種復(fù)合微生物菌劑由產(chǎn)朊假絲酵母、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌和枯草芽孢桿菌組成，而后于培養(yǎng)基中培養(yǎng)至PH值2.5-3.5，即為復(fù)合微生物菌劑，按重量份數(shù)計產(chǎn)朊假絲酵母糞腸球菌嗜酸乳桿菌枯草芽孢桿菌=1-31-31-31-3。所述培養(yǎng)基為瓊脂0.51.5g，牛肉膏0.51.5g，酵母提取物23g，蔗糖3045g，消泡劑1.53.Og,蛋白胨0.51.5g，蒸餾水1000mL。pH3.05.0,110130°C高壓滅菌。將增殖培養(yǎng)后的產(chǎn)朊假絲酵母、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌和枯草芽孢桿菌按重量份數(shù)計產(chǎn)朊假絲酵母糞腸球菌嗜酸乳桿菌枯草芽孢桿菌==1-31-31-31-3，將上述菌種混合后按質(zhì)量百分比1015%于培養(yǎng)基中恒溫發(fā)酵，并攪拌同時通氧氣，培養(yǎng)的溫度初始溫度為280C培養(yǎng)24小時，30°C培養(yǎng)24小時、35°C培養(yǎng)12小時，直至發(fā)酵培養(yǎng)至pH值2.5即可。所述培養(yǎng)基為瓊脂0.51.5g，牛肉膏0.51.5g，酵母提取物23g，蔗糖3045g,消泡劑1.53.0g，蛋白胨0.51.5g,蒸餾水IOOOmL0pH3.05.0，110130°C高壓滅菌。復(fù)合微生物菌劑的應(yīng)用所述復(fù)合微生物菌劑可作為動物的飼料添加劑。所述復(fù)合微生物菌劑可作為禽、豬、反芻動物、兔、犬或魚的飼料添加劑。本發(fā)明所具有的優(yōu)點是本發(fā)明采用多種菌種組合的方式，對培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度、各菌種的不同比例而得到不同酸度的強酸(Ph2.5-3.5)態(tài)菌群，根據(jù)動物的種類、使用的不同飼料，發(fā)揮強酸態(tài)菌群的優(yōu)勢，提高了動物的抗病力、提高經(jīng)濟效益、優(yōu)化環(huán)境。具有良好的經(jīng)濟效益和社會效益。具有很大的實用和推廣價值。本發(fā)明復(fù)合微生物菌劑在經(jīng)過酸化后作為飼料利于動物消化吸收，所述菌劑中的產(chǎn)朊假絲酵母屬于產(chǎn)生大量乳酸的酵母菌，同時它的代謝產(chǎn)物可以為其它細菌所利用。在其生長繁殖過程中需要消耗大量氧氣，可以將培養(yǎng)基中的氧氣消耗，利于形成厭氧環(huán)境，促進嗜酸乳桿菌、糞腸球菌的生長；所述的嗜酸乳桿菌、糞腸球菌屬于乳酸菌屬中的細菌，它是一種厭氧、兼性厭氧菌，可以產(chǎn)生大量生物酸如乳酸、乙酸、丁酸、聚合生物酸等，利于建立酸性態(tài)益生菌群，抑制雜菌的生長，產(chǎn)生乳酸菌素等提高動物體免疫力的物質(zhì)，增強機體的抗病力；所述的復(fù)合菌群中的枯草芽孢桿菌，可以形成芽孢，增加高溫環(huán)境的抵抗能力，保持優(yōu)良的活性，可以產(chǎn)生抗菌素，抑制細菌病毒的生長，保持產(chǎn)品優(yōu)良的效果。同時利用不同底物可以用來生產(chǎn)多肽、氨基酸、抗菌肽等多種蛋白肽類營養(yǎng)物質(zhì)。并且可以與低聚糖、植物提取物復(fù)合制成不同用途的低聚糖、植物提取物復(fù)合添加劑。具體實施方式實施例1復(fù)合微生物菌劑的制備方法將增殖培養(yǎng)后的產(chǎn)朊假絲酵母、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌和枯草芽孢桿菌按重量份數(shù)計產(chǎn)朊假絲酵母糞腸球菌嗜酸乳桿菌枯草芽孢桿菌==1:1:1:1，將上述菌種混合后按質(zhì)量百分比10%于培養(yǎng)基中恒溫發(fā)酵，并攪拌同時通氧氣，培養(yǎng)的溫度初始溫度為28°c培養(yǎng)24小時，30°C培養(yǎng)24小時、35°C培養(yǎng)12小時，直至發(fā)酵培養(yǎng)至PH值2.5，即可。所述培養(yǎng)基為瓊脂Ig牛肉膏l(xiāng)g、酵母提取物2.5g、蔗糖35g、消泡劑(市購產(chǎn)品，本實施例購自美辰集團股份有限公司)1.5g、蛋白胨lg，蒸餾水加至1000mlpH3.05.0，110130°C高壓滅菌。所述酵母提取物為酵母浸粉(市購產(chǎn)品，本實施例酵母浸粉購自北京奧博星生物技術(shù)有限公司)。所述產(chǎn)朊假絲酵母、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌和枯草芽孢桿菌按照常規(guī)方法在下述各自的培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)。所述產(chǎn)朊假絲酵母增殖培養(yǎng)于馬鈴薯浸粉(市購)3g，葡萄糖20g，瓊脂粉15g，蒸餾水加至IOOOml培養(yǎng)基中，121°C高壓滅菌20分鐘，備用。所述糞腸球菌增殖培養(yǎng)于葡萄糖2%，蛋白胨1%，牛肉膏1%，酵母膏0.5%，磷酸氫二鉀0.2%，乙酸鈉0.5%，檸檬酸銨0.2%，硫酸鎂0.058%，硫酸錳0.025%，瓊脂1.5-2%,pH6.5培養(yǎng)基中，121°C高壓滅菌20分鐘，備用。所述嗜酸乳桿菌增殖培養(yǎng)于葡萄糖2%，蛋白胨1%，牛肉膏1%，酵母膏0.5%，磷酸氫二鉀0.2%，乙酸鈉0.5%，檸檬酸銨0.2%，硫酸鎂0.058%，硫酸錳0.025%，瓊脂1.5-2%,pH6.5培養(yǎng)基中，121°C高壓滅菌20分鐘，備用。所述枯草芽孢桿菌增殖培養(yǎng)于蛋白胨10g，瓊脂20g，氯化鈉5g，肉浸粉10g，水加至1000ml，pH7.2培養(yǎng)基中，121°C高壓滅菌20分鐘，備用。將上述復(fù)合微生物菌劑作為飼養(yǎng)商品肉雞的飼料添加劑，飼養(yǎng)量5000只，試驗組用上述復(fù)合微生物菌劑，對照組未用復(fù)合微生物菌劑，測定其肉雞的耗料量(參見表1)；對免疫力的影響(免疫器官指數(shù))(參見表2)。其中飼料為肉雞全價配合飼料。表1不同處理組肉雞的耗料量<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>由表1可知使用本發(fā)明復(fù)合微生物菌劑作為飼料添加劑，肉雞的采食量明顯低于未使用組。表2免疫器官指數(shù)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>由表2可知試驗組的免疫器官指數(shù)明顯高于對照組結(jié)果表明采用本發(fā)明復(fù)合微生態(tài)菌劑能夠提高飼料利用率，降低采食量；提高免疫力。提高經(jīng)濟效益。實施例2復(fù)合微生物菌劑的制備方法將增殖培養(yǎng)后的產(chǎn)朊假絲酵母、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌和枯草芽孢桿菌按重量份數(shù)計產(chǎn)朊假絲酵母糞腸球菌嗜酸乳桿菌枯草芽孢桿菌==1221，將上述菌種混合后按質(zhì)量百分比15%于培養(yǎng)基中恒溫發(fā)酵，并攪拌同時通氧氣，培養(yǎng)的溫度初始溫度為28°C培養(yǎng)24小時，30°C培養(yǎng)24小時、35°C培養(yǎng)12小時，直至發(fā)酵培養(yǎng)至pH值3，即可。所述培養(yǎng)基為瓊脂0.5g，牛肉膏0.5g，酵母提取物2g，蔗糖30g,消泡劑3.Og，蛋白胨0.5g，蒸餾水IOOOmL0ρΗ3·O5.0，110130°C高壓滅菌。所述酵母提取物為酵母浸粉。將上述復(fù)合微生物菌劑作為飼養(yǎng)鴨的添加劑，飼養(yǎng)量2400只，試驗組用上述復(fù)合微生物菌劑，對照組未用復(fù)合微生物菌劑，測定其鴨生長速度(參見表3)；對料肉比、成活率與單位增重(參見表4)。表3肉鴨生長速度的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>表4對料肉比、成活率與單位增重情況<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實施例3復(fù)合微生物菌劑的制備方法將增殖培養(yǎng)后的產(chǎn)朊假絲酵母、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌和枯草芽孢桿菌按重量份數(shù)計產(chǎn)朊假絲酵母糞腸球菌嗜酸乳桿菌枯草芽孢桿菌==3:1:1:1，將上述菌種混合后按質(zhì)量百分比12%于培養(yǎng)基中恒溫發(fā)酵，并攪拌同時通氧氣，培養(yǎng)的溫度初始溫度為28°C培養(yǎng)24小時，30°C培養(yǎng)24小時、35°C培養(yǎng)12小時，直至發(fā)酵培養(yǎng)至PH值3.5，即可。所述培養(yǎng)基為瓊脂1.5g，牛肉膏1.5g，酵母提取物2g，蔗糖45g,消泡劑2g，蛋白胨1.5g，蒸餾水IOOOmL0pH3.05.0，110130°C高壓滅菌。所述酵母提取物為酵母浸粉。將上述復(fù)合微生物菌劑作為飼養(yǎng)牛的添加劑，飼養(yǎng)量40頭，試驗組用上述復(fù)合微生物菌劑，對照組未用復(fù)合微生物菌劑，測定育肥期平均每頭牛體重(參見表5)。表5復(fù)合菌劑對育肥期平均每頭牛體重的試驗結(jié)果(kg)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>從表中可以看出，添加40ml/天·頭飼喂后復(fù)合菌劑，試驗組平均日增重2.61kg，對照組平均日增重2.01kg，試驗組比對照組多增重0.6kg/天頭，日增重提高了29.85%。實施例4復(fù)合微生物菌劑的制備方法將增殖培養(yǎng)后的產(chǎn)朊假絲酵母、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌和枯草芽孢桿菌按重量份數(shù)計產(chǎn)朊假絲酵母糞腸球菌嗜酸乳桿菌枯草芽孢桿菌==1:2:2:1，將上述菌種混合后按質(zhì)量百分比14%于培養(yǎng)基中恒溫發(fā)酵，并攪拌同時通氧氣，培養(yǎng)的溫度初始溫度為28°C培養(yǎng)24小時，30°C培養(yǎng)24小時、35°C培養(yǎng)12小時，直至發(fā)酵培養(yǎng)至PH值3.3，即可。所述培養(yǎng)基為瓊脂1.2g，牛肉膏1.3g，酵母提取物2.Sg,蔗糖40g，消泡劑2g，蛋白胨0.8g，蒸餾水IOOOmL0pH3.05.0，110130°C高壓滅菌。所述酵母提取物為酵母浸粉。將上述復(fù)合微生物菌劑作為飼養(yǎng)蛋雞的添加劑，飼養(yǎng)量1000只，試驗組用上述復(fù)合微生物菌劑，對照組未用復(fù)合微生物菌劑，測定生產(chǎn)性能(參見表6)。表6生產(chǎn)性能<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>權(quán)利要求一種復(fù)合微生物菌劑，其特征在于由產(chǎn)朊假絲酵母、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌和枯草芽孢桿菌組成，而后于培養(yǎng)基中培養(yǎng)至pH值2.5-3.5，即為復(fù)合微生物菌劑，按重量份數(shù)計產(chǎn)朊假絲酵母糞腸球菌∶嗜酸乳桿菌∶枯草芽孢桿菌＝1-3∶1-3∶1-3∶1-3。2.按權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物菌劑，其特征在于所述培養(yǎng)基為瓊脂0.51.5g，牛肉膏0.51.5g，酵母提取物23g，蔗糖3045g，消泡劑1.53.Og,蛋白胨0.51.5g,蒸餾水IOOOmL0pH3.05.0。3.一種按權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物菌劑的制備方法，其特征在于將增殖培養(yǎng)后的產(chǎn)朊假絲酵母、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌和枯草芽孢桿菌按重量份數(shù)計產(chǎn)朊假絲酵母糞腸球菌嗜酸乳桿菌枯草芽孢桿菌==1-31-31-31-3，將上述菌種混合后按質(zhì)量百分比1015%于培養(yǎng)基中恒溫發(fā)酵，并攪拌同時通氧氣，培養(yǎng)的溫度初始溫度為28°C培養(yǎng)24小時，30°C培養(yǎng)24小時、35°C培養(yǎng)12小時，直至發(fā)酵培養(yǎng)至pH值2.5，收集發(fā)酵液即可。4.按權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物菌劑的制備方法，其特征在于所述培養(yǎng)基為瓊脂0.51.5g，牛肉膏0.51.5g，酵母提取物23g，蔗糖3045g，消泡劑1.53.Og,蛋白胨0.51.5g，蒸餾水1000mL。pH3.05.0。5.按權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物菌劑的應(yīng)用，其特征在于所述復(fù)合微生物菌劑可作為動物的飼料添加劑。6.按權(quán)利要求5所述的復(fù)合微生物菌劑的應(yīng)用，其特征在于所述復(fù)合微生物菌劑可作為禽、豬、反芻動物、兔、犬或魚的飼料添加劑。全文摘要本發(fā)明涉及飼料添加劑，具體的說是一種復(fù)合微生物菌劑及生產(chǎn)方法。產(chǎn)朊假絲酵母、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌和枯草芽孢桿菌組成后于培養(yǎng)基中培養(yǎng)至pH值2.5-3.5，所得即為復(fù)合微生物菌劑，按重量份數(shù)計產(chǎn)朊假絲酵母∶糞腸球菌∶嗜酸乳桿菌∶枯草芽孢桿菌＝1-3∶1-3∶1-3∶1-3；所述復(fù)合微生物菌劑可作為動物的飼料添加劑。本發(fā)明采用多種菌種組合的方式，對培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度、各菌種的不同比例而得到不同酸度的強酸態(tài)菌群，根據(jù)動物的種類、使用的不同飼料，發(fā)揮強酸態(tài)菌群的優(yōu)勢，提高了動物的抗病力、提高經(jīng)濟效益、優(yōu)化環(huán)境。文檔編號A23K1/17GK101803682SQ200910248909公開日2010年8月18日申請日期2009年12月30日優(yōu)先權(quán)日2009年12月30日發(fā)明者何鳳燕,侯樹東,刑成儉,孫艷嬌,徐海濤,朱立良,楊忠偉,海洋,潘永榮,王躍男,白子金,白春生,聶鑫,邵中金,高林申請人:沈陽科豐牧業(yè)科技有限公司