專利名稱：非那吡啶化合物的制作方法
非那吡啶化合物發(fā)明背景發(fā)明領域本發(fā)明涉及共價連接于各種偶聯(lián)物的非那吡啶化合物。采用這些化合物和組合物提高了(口服)生物利用度同時減少了副作用。相關技術本文引用了各種出版物，納入它們公開的內(nèi)容作為參考。然而，本文引用任何參考文獻并不構成承認這類文獻發(fā)表在本申請之前。非那吡啶(phenazopyridine)是一類止痛化合物，其適應癥有尿道疼痛、燒傷、 刺激和不適；以及因尿道感染、手術、損傷或器械檢查引起的尿頻和尿急。非那吡啶雖然是有效的止痛劑，但攜帶者可預感到有惡心、嘔吐副作用，最嚴重癥狀通常是胃腸道混亂。為改善非那吡啶的副作用和擴大應用范圍，提出了繼續(xù)開發(fā)穿過胃腸道上皮后能形成活性藥物的前藥化合物，。非那吡啶或2，6-吡啶二胺3-(苯基偶氮基)一氯化物(CAS號94_78_0)是一種偶氮染料，對尿道粘膜有局部止痛或局部麻醉作用，能緩解因感染、創(chuàng)傷、手術、內(nèi)窺鏡檢查或使用插管導致下尿道刺激所引起的疼痛、燒灼感、尿急、尿頻和其它不適癥狀。自1925年以來非那吡啶業(yè)已投入市場，從1951年以來處于處方藥和非處方藥(OTC)的雙重狀態(tài)。市售非那吡啶為一片IOOmg和200mg的片劑，商品名有許多=Nefrecil, Phenazodine, Pyridiate, Pyridium, Sedural, Uricalm, Uropyrine, Urodine,禾口 Urogesic0 單劑 OTC 藥物包括 Azo-Gesic，Azo-Mandard 和 Uristat (95mg 片劑)，ReAzo (97mg 片劑)， 以及URIRelief和Baridium(97. 2mg片劑)。作為聯(lián)合處方可購得非那吡啶與硫代異噁唑或磺胺甲氧噁唑(sulfamethoxazole)/三甲氧芐二氨嘧啶的復合制劑，以及非那吡啶加東莨菪胺和仲丁巴比妥的復合制劑。成人常用劑量是餐后100-200mg每天三次不超過兩天，兒童劑量是12mg/kg/天， 分成三次餐后服用，不超過兩天。非那吡啶止痛作用的藥理學機制不清楚。非那吡啶口服后由胃腸道吸收。雖然尚未確定其在人體中的絕對生物利用度，但看來最高達200mg處方劑量時吸收差，血漿最高水平僅為10-20ng/mL。高達65%未改變的非那吡啶經(jīng)尿液快速排泄，單次劑量M小時內(nèi)約90%被廓清。代謝產(chǎn)物包括苯胺、N-乙酰基-對-氨基酚(NAPA或醋氨酚)和對-氨基酚。苯胺有助于口服非那吡啶對尿道粘膜的止痛作用。與治療劑量非那吡啶有關的副作用包括頭痛、皮疹瘙癢、胃腸道紊亂(惡心、嘔吐和腹瀉)、橙色到紅色的尿變色以及軟性隱形眼鏡染色。在腎臟廓清不足病例中，由于藥物積累，非那吡啶積可引起皮膚、鞏膜或體液變黃。業(yè)已報道，在劑量水平過度時常發(fā)生正鐵血紅蛋白血癥(Methemaglobenemia)、溶血性貧血、腎和肝毒性。也已報道有過敏樣反應。非那吡啶和代謝產(chǎn)物苯胺在紅細胞中可使血紅蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)檎F血紅蛋白而引起氧化應激反應。葡萄糖-6-磷酸酯脫氫酶缺乏病人傾向發(fā)生溶血性貧血。不應將非那吡啶給予腎功能損傷病人。超過推薦劑量可能導致血清水平升高和毒性反應。正鐵血紅蛋白血癥一般發(fā)生于急性過量用藥之后?？紤]到非那吡啶的應用歷史長范圍廣，這類嚴重毒性報道相對來說不常見。長期0年)給予鹽酸非那吡啶可能誘發(fā)大鼠大腸腺瘤和腺癌，終生給予可能引起雌性小鼠肝細胞腺瘤和癌。業(yè)已證明非那吡啶在細菌中有誘變作用，在哺乳動物細胞中有誘變和染色體斷裂作用。在2，214個接受鹽酸非那吡啶治療的病人流行病學研究中，沒有觀察到最少給藥3年期間有任何類型癌癥發(fā)病的上升。目前的非那吡啶產(chǎn)品標簽說“長期給予鹽酸非那吡啶會誘發(fā)大鼠(大腸)和小鼠(肝)腫瘤。雖然報道鹽酸非那吡啶與人腫瘤形成無關，但沒有沿著這些線索進行過充分的流行病學研究”。劑量高達大鼠50mg/kg/天或110mg/kg/天和家兔39mg/kg/天的重復研究顯示對生育或胚胎發(fā)育沒有影響。非那吡啶目前歸類為妊娠B類藥物。也沒有對給予非那吡啶的妊娠婦女進行過充分和良好的對照研究。監(jiān)視研究報告說服用非那吡啶與先天缺陷沒有聯(lián)系。圍產(chǎn)期合作專項(The Collaborative Perinatal Project)監(jiān)測了 50，282 對母親-孩子，其中1，109對有妊娠期服藥記錄，219對有妊娠前三個月服藥記錄。沒有發(fā)現(xiàn)與服藥相關的重大或微小畸形或個體缺陷。監(jiān)視的229，101名密歇根州醫(yī)療補助病人中469名鑒定為妊娠前三個月期間服用了非那吡啶。獲得的數(shù)據(jù)表明該藥物與異常無任何相關。據(jù)報道，非那吡啶的大鼠急毒性LD50為47ang/kg( 口服)和200(腹膜內(nèi)給藥 (i.p.))；小鼠為180mg/kg(i.p.)。尚沒有對非那吡啶進行充分的安全性藥理學研究和重復劑量的非臨床毒理學研究。發(fā)明簡述本發(fā)明提供共價連接于各種化學分子的非那吡啶及其衍生物或類似物。所述化學分子包括任何能產(chǎn)生前藥形式的物質(zhì)，即能在體內(nèi)通過正常代謝過程轉(zhuǎn)變成其活性形式的分子。例如，所述的化學分子可以是單個氨基酸、二肽或多肽。所述化學分子可直接或通過接頭間接地與非那吡啶連接。連接點通常由非那吡啶上可利用的官能團決定。在一個實施方式中，非那吡啶連接于天然或合成氨基酸的一個氨基酸。在另一個實施方式中，非那吡啶連接于由天然或合成氨基酸的任何組合構成的二肽或三肽，在另一個實施方式中，所述氨基酸選自蛋白酶可消化的L-氨基酸。通過以下描述將會明白本發(fā)明的其它目的、優(yōu)點和實施方式并可實施本發(fā)明。附圖的簡要說明


圖1顯示了大鼠口服非那吡啶偶聯(lián)物后各種非那吡啶-氨基酸偶聯(lián)物的血漿濃度。顯示給予PAP · HC1、甘氨酰-PAP、丙氨酰-PAP、甲硫氨酰-PAP、組氨酰-PAP、色氨酰-PAP、纈氨酰-PAP和賴氨酰-PAP后，非那吡啶(PAP)血漿濃度與時間的曲線。圖2是2-氨基-6-氨基乙酰氨基-3-E-非那吡啶二氫氯化物(鹽酸鹽)的說明。圖3顯示雄性大鼠的1)鹽酸非那吡啶(2.8mg/kg，含2.5mg/kg非那吡啶堿) 釋放的非那吡啶，2)Gly-PAP(^ig/kg，含2. 5mg/kg非那吡啶堿)釋放的非那吡啶，和3) Gly-PAP(^ig/kg，含2. 5mg/kg非那吡啶堿)釋放的Gly-PAP完整前藥的平均血漿濃度曲線。圖4顯示雄性大鼠的1)鹽酸非那吡啶0.8mg/kg，含2.5mg/kg非那吡啶堿)釋放的非那吡啶和2) Gly-PAP (0. 9mg/kg，含0. 6mg/kg非那吡啶堿)釋放的非那吡啶平均血漿濃
度曲線。圖5表格，顯示Gly-PAP游離堿和鹽酸鹽的室溫溶解度。圖6表格，顯示Gly-PAP鹽的水溶解度和大鼠生物利用度。圖7表格，顯示用UV-HPLC研究Gly-PAP的穩(wěn)定性所得結果。圖8表格，顯示用UV-HPLC研究0. 2mg/mlGly-PAP-HCl在4°C水中的穩(wěn)定性結果。圖9表格，顯示用UV-HPLC研究8. 8mg/mlGly-PAP-HCl在4°C水中的穩(wěn)定性結果。
圖10表格，顯示用UV-HPLC研究Gly-PAP-HCl水溶液室溫穩(wěn)定性的結果。
圖11表格，是雄性大鼠口服給予Gly-PAP或鹽酸非那吡啶后非那吡啶藥代動力學的小結。
圖12表格，是雄性大鼠口服給予Gly-PAP后Gly-PAP后的藥代動力學小結。
圖13顯示雄狗的1)鹽酸非那吡啶(5. 9mg/kg，含5mg/kg非那吡啶堿)釋放的非那吡啶，2) Gly-PAP (8. lmg/kg，含5mg/kg非那吡啶堿)釋放的非那吡啶，和3) Gly-PAP (8. Img/ kg，含5mg/kg非那吡啶堿釋放的Gly-PAP完整前藥的平均血漿濃度曲線。
圖14表格，是雄狗一次口服Gly-PAP (組1)或PAP HCl (組2)后收集得到的血漿藥代動力學參數(shù)小結。
圖15表格，是雄狗一次口服Gly-PAP (組1)或PAP HCl (組2)后尿液Gly-PAP和 PAP HCl濃度小結。
圖16是合成2-氨基-6-氨基乙酰氨基-3-E-非那吡啶二氫氯化物產(chǎn)品的流程圖。
圖17表格，顯示大鼠口服Gly-PAP鹽后的生物利用度。
圖18表格，顯示胃腸道副作用嘔吐減少。發(fā)明詳述本申請中所用的“肽”包括單個氨基酸、二肽、三肽、寡肽、多肽或載體肽。寡肽指包含2-70個氨基酸的肽。此外，就示范性的具體實施方式
而言，本發(fā)明有時將連接于一個氨基酸、二肽、三肽、寡肽、多肽或載體肽的活性藥物稱為活性偶聯(lián)藥物。本文闡述了這種偶聯(lián)藥物的優(yōu)選長度和其它優(yōu)選實施方式。本文所用的“組合物”泛指含有所述分子偶聯(lián)物的任何組合物。這種組合物包括無水制劑、水溶液或無菌組合物。包含本文所述分子的組合物可以凍干形式貯存，可與穩(wěn)定劑例如碳水化合物混合。使用時，可將該組合物配制成含有鹽(如NaCl)、洗滌劑(如十二烷基硫酸鈉(SDS))和其它組分的水溶液?！ǚ悄沁拎ぁㄖ?br> 權利要求
1. 一種式I化合物其中，R1和&獨立地是(a)氫；
2.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是氨基酸殘基，R2是氫。
3.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是(L-)氨基酸殘基，R2是氫。
4.如權利要求2所述的化合物，其特征在于，所述氨基酸殘基選自丙氨酸、精氨酸、天門冬氨酰胺、天門冬氨酸、胱氨酸、甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、絲氨酸、色氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和纈氨酸殘基。
5.如權利要求3所述的化合物，其特征在于，所述(L-)氨基酸殘基選自丙氨酸、精氨酸、天門冬氨酰胺、天門冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、絲氨酸、色氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和纈氨酸殘基。
6.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是甘氨酸的氨基酸殘基，R2是氫。
7.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是賴氨酸的氨基酸殘基，R2是氫。
8.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是丙氨酸的氨基酸殘基，R2是氫。
9.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是c)，民選自乙基、芐基、異丁基、十二烷基、乙基己基、三氯乙基和正丁基，R2是氫。
10.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是氨基酸殘基，R1是氫。
11.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是(L-)氨基酸殘基，R1是氫。
12.如權利要求10所述的化合物，其特征在于，所述氨基酸殘基選自丙氨酸、精氨酸、 天門冬氨酰胺、天門冬氨酸、胱氨酸、甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、 賴氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、絲氨酸、色氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和纈氨酸殘基。
13.如權利要求11所述的化合物，其特征在于，所述(L-)氨基酸殘基選自丙氨酸、精氨酸、天門冬氨酰胺、天門冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、絲氨酸、色氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和纈氨酸殘基。
14.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是甘氨酸的氨基酸殘基，R1是氫。
15.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是賴氨酸的氨基酸殘基，R1是氫。
16.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是丙氨酸的氨基酸殘基，R1是氫。
17.如權利要求1所述的化合物，其特征在于，&是(c)，R3選自乙基、芐基、異丁基、 十二烷基、乙基己基、三氯乙基和正丁基，R2是氫。
18.—種藥物組合物，它包含治療有效量的權利要求1所述的化合物。
19.如權利要求18所述的藥物組合物，其特征在于，所述化合物的治療有效量比非偶聯(lián)非那吡啶治療有效量低50%。
20.一種治療個體的方法，包括給予治療有效量的權利要求1所述的化合物。
21.如權利要求20所述的方法，其特征在于，所述化合物的治療有效量比非偶聯(lián)非那吡啶治療有效量低50%。
22.如權利要求20所述的方法，其特征在于，該方法可治療尿道疼痛、燒傷、刺激、不適；或因尿道感染、手術、損傷或器械檢查引起的尿頻和尿急。
23.如權利要求20所述的方法，其特征在于，給予所述化合物的副作用嚴重程序比給予非偶聯(lián)非那吡啶的副作用低。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I所示的取代的非那吡啶類化合物。本發(fā)明也涉及以下發(fā)現(xiàn)，即式I化合物的生物利用度比非偶聯(lián)非那吡啶提高。
文檔編號A01N43/04GK102256486SQ200980151914
公開日2011年11月23日 申請日期2009年12月21日 優(yōu)先權日2008年12月19日
發(fā)明者G·博納維爾, N·E·法赫米, S·D·羅伊, S·赫克特 申請人:巔峰醫(yī)藥品股份有限公司