專利名稱：一種復合微生態(tài)飼料添加劑的制備方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種飼料添加劑，具體為一種復合微生態(tài)飼料添加劑的制備方法。
背景技術(shù)：
隨著經(jīng)濟的發(fā)展以及人們生活水平的提高，安全衛(wèi)生、無公害、綠色的畜禽產(chǎn)品將 會備受消費者的青睞，動物性食品擁有更好的品質(zhì)和更高的安全性也是大勢之所向。動物 飼料與畜產(chǎn)品的關系非常密切，前者直接關系到后者品質(zhì)的好壞，畜禽產(chǎn)品質(zhì)量的好壞又 直接關系到人類身體健康。動物飼料轉(zhuǎn)為供給人類食用的畜禽產(chǎn)品，即形成了動物飼料一 畜禽產(chǎn)品一人類食品這樣一個食物鏈，因此動物飼料的安全性直接關系到人們的健康和生 命安全，同時如何提高飼料的利用率、保護環(huán)境和保障農(nóng)牧業(yè)的持續(xù)、健康、穩(wěn)定發(fā)展已成 為人類迫切需要解決的重要問題。 目前，國內(nèi)在畜禽的養(yǎng)殖過程中，常用含抗生素飼料喂養(yǎng)，不僅造成了飼養(yǎng)動物抗 病能力的減弱，肉蛋產(chǎn)品質(zhì)量和肉味的下降，而且抗生素使用不當，將會在畜禽肉、奶、蛋中 產(chǎn)生殘留，還可能導致人類癌癥，致畸等種種不良后果，因此，發(fā)展綠色無公害飼料添加劑 是飼料工業(yè)的重要研究方向，其中飼用酶制劑既能提高飼料的消化率和利用率，提高禽畜 及魚類的生產(chǎn)性能，又能減少禽畜排泄物中的氮、磷的排泄量，保護水體和土壤免受污染， 因而飼用酶制劑作為一類高效、無毒副作用和環(huán)保型的"綠色"飼料添加劑，在21世紀將有 著十分廣闊的應用前景。 目前市場上的商品飼用酶制劑大多數(shù)以復合酶制劑的形式銷售，如溢多酶、保安 生等。 一般來說，復合酶制劑比單一酶制劑效果好，但并不意味著復合酶制劑中酶種類愈多 愈好。復合酶制劑有兩種，多數(shù)由幾種單一酶混合調(diào)制而成，還有一種是利用微生物發(fā)酵產(chǎn) 生多種酶的復合酶制劑，前者成本較高，從而限制了其使用范圍，后者的關鍵技術(shù)有兩條 一是如何篩選獲得高產(chǎn)酶的菌種；另一條是如何選擇合適的培養(yǎng)條件使菌種發(fā)揮最佳生產(chǎn) 性能，從實際使用情況來看，當前市場上銷售的該類復合酶制劑中所含菌種比較單一，只能 滿足部分抗病或促進消化的作用，不能滿足生物體內(nèi)復雜多樣的微生態(tài)環(huán)境，而且飼料利 用率較低。 此外，現(xiàn)有飼料添加劑中，長期以來，鐵、鋅、銅、錳等微量元素均以硫酸鹽的形式 添加于配合飼料中，硫酸根的存在不僅對飼料加工設備易造成腐蝕、影響維生素的穩(wěn)定性， 更為嚴重的是大量的硫酸根被動物攝取后會影響動物腸道的健康。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了解決現(xiàn)有各類飼料添加劑在實際應用中存在上述各自不同缺點的問 題，提供一種復合微生態(tài)飼料添加劑的制備方法。 本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案實現(xiàn)的一種復合微生態(tài)飼料添加劑的制備方法，包 括以下步驟 (1)富含微量元素的有機功能酵母的制備
4
A、硒酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種 接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)20 25h作為種子液；制備pH4. 5的YEPD液體培 養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以3 6%的菌重量接種(該百分比的含義是接種量占種子液總 重量的重量百分比)，培養(yǎng)18 25h后，加入3 6mg/L的亞硒酸鈉溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至45 55h ;將得到的發(fā)酵液離心，收集菌體并烘干，即得到硒酵母； B、鐵酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種 接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)20 25h作為種子液；制備p朋.0的YEPD液體培 養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以8 12%的菌重量接種，培養(yǎng)18 25h后，加入700 900mg/ L的硫酸亞鐵溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至55 65h ;將得到的發(fā)酵液離心，收集菌體并烘干，即得到鐵 酵母； C、鋅酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種 接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)20 25h作為種子液；制備p朋.0的YEPD液體培 養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以8 12%的菌重量接種，培養(yǎng)18 25h，加入700 900mg/L 的硫酸鋅溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至55 65h ;將得到的發(fā)酵液離心，收集菌體并烘干，即得到鋅酵 母； (2)多菌復合酶的制備
A、原料混合拌料 用預處理過的原料醋糟、麥麩、玉米粉按重量比(1.5 2.5) : (0.8 1.5) : (0.8 1.5)配料，在混合原料中分別加入占原料總重量的3 6%復合大曲和 0. 5 1. 2%硫酸銨，攪拌均勻即可接種；
所述復合大曲的制備方法如下 a大曲原料的處理將大曲原料混合、篩選、粉碎，然后加水，使得大曲原料與水 的重量比為l : 2.5 3;所述大曲原料至少可由以下重量百分比的原料制成帶殼小麥 40-45%、蕎麥18-22%、綠豆35-40%，或者采用傳統(tǒng)大曲的制曲原料大麥、豌豆、小麥；
b種曲的制備將試管斜面培養(yǎng)基中的以下菌種黑曲霉(Aspergi 1 lus niger) 41254、黑曲霉(Aspergillus niger)UV-11、紅曲霉屬(Monascus sp.)、總狀毛霉 (Mucor racemosus)、雅致放身寸毛霉(Actinomucor elegans)、米根霉(Rhizopus oryzae)、 釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、克魯斯假絲酵母(Candida krusei)、醋桿菌屬 (Acetobacter sp.)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、德氏乳桿菌(Lactobacillus delbrueckiisubsp.bulgaricus)6100各取一環(huán)，分別接入裝有大曲原料的三角瓶中進行培 養(yǎng)，控制發(fā)酵溫度為30°C 33t:，時間為44 46h，pH值為5 7，然后再繼續(xù)進行擴大培 養(yǎng)，得到種曲； c復合大曲的制備采用生料制曲，將得到的種曲與大曲原料按l : 45 55的重 量比接入固態(tài)發(fā)酵設備，充分混合均勻后，控制發(fā)酵溫度保持在30°C 33°C， pH值為5 7，鼓風量為50 75m3/m3 min，當發(fā)酵時間達到30 33h時，出曲，然后將得到的大曲放 入真空干燥箱，進行低溫真空烘干，即得到本發(fā)明所述的復合大曲；
B、接種 使用培養(yǎng)40 50h的酵母菌，培養(yǎng)20 30h的黑曲霉和米曲霉，培養(yǎng)5 10h的 芽孢桿菌和培養(yǎng)8 15h的乳酸菌這5株菌的培養(yǎng)液作為種子液，按酵母菌接種量為2 4%，黑曲霉接種量為2 4%，芽孢桿菌接種量為3 5%，乳酸菌的接種量為3 5%，米 曲霉接種量3 6%時接種，再加上拌料時加入的復合大曲，調(diào)整培養(yǎng)料的含水量為50
65% ; C、固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng) 接種后采用固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30 35°C ，培養(yǎng)至80 95h后，出料，即得 到多菌復合酶； (3)將步驟(1)中得到的富含微量元素的有機功能酵母，硒酵母、鐵酵母、鋅酵母 和步驟(2)中得到的多菌復合酶以及植酸酶按下列重量比混合均勻硒酵母O. 5 1. 5%， 鐵酵母1 3%，鋅酵母1 3%，多菌復合酶80 90%，植酸酶8 12% ;然后低溫真空
干燥、粉碎，即得到本發(fā)明所述的復合微生態(tài)飼料添加劑。該飼料添加劑在使用時，可按照 1%。的重量比加入動物日糧中。 本發(fā)明將液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)的富含有機微量元素酵母和植酸酶，同固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)的多 菌復合酶混合，以生產(chǎn)出有益菌群活菌多，動物需要的消化酶、非消化酶酶系全，且各種酶 活力高，并富含對動物和人類具有功能營養(yǎng)的有機微量元素、維生素、氨基酸以及未知促生 長因子的生物飼料微多酶。該添加劑呈棕黃色粉狀，具有發(fā)酵味、無腐敗、無異臭味。粗蛋白 含量> 20%，總活菌數(shù)> 1X1()8，硒酵母X). 5mg/kg，鋅酵母^ 150mg/kg，鐵酵母^ 150mg/ kg，植酸酶^ 500u/g，纖維素酶^ 1000u/g，木聚糖酶^ 1200u/g，果膠酶^ 600u/g，淀粉酶 > 1200u/g，酸性蛋白酶^ 1000u/g， P-葡聚糖酶^ 800u/g。 上述步驟(2)中，為了使硫酸銨與原料混合更均勻，可先用少量水溶解后，直接 噴灑在原料中；所述的復合大曲在制曲過程中，均能代謝產(chǎn)生有利于大曲原料發(fā)酵的不同 的酶，發(fā)揮微生物群體協(xié)同作用，提高成曲的生化性能，產(chǎn)生較多的代謝產(chǎn)物，其中黑曲霉 41254代謝產(chǎn)生纖維素酶、果膠酶、單寧酶；黑曲霉UV-11代謝產(chǎn)生糖化酶；紅曲霉屬代謝產(chǎn) 生糖化酶、色曲；總狀毛霉代謝產(chǎn)生蛋白酶；雅致放射毛霉代謝產(chǎn)生糖化酶；米根霉代謝產(chǎn) 生糖化淀粉酶；釀酒酵母1001代謝產(chǎn)生乙醇；克魯斯假絲酵母代謝產(chǎn)生生香酵母；醋桿菌 屬代謝產(chǎn)生醋酸；枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)生淀粉糖化酶、蛋白酶；德氏乳桿菌6100代謝產(chǎn)生 乳酸。上述菌種均可從市場上購買到。經(jīng)過酶活測定，復合大曲糖化力有了顯著的提高，可 以充分分解制曲原料中的碳水化合物等，為微生物生長繁殖提供能量，還可以有效的提高 糧食的利用率，降低企業(yè)的生產(chǎn)成本；通過復合菌株的接入，以豐富大曲的菌系、酶系構(gòu)成， 曲中菌系酶系豐富，可以獲得大量的相應目的代謝產(chǎn)物；根據(jù)對傳統(tǒng)大曲中存在的菌系酶 系動態(tài)變化進行的研究，以及獲得我們所需的最適目的代謝產(chǎn)物，人為地選擇不同菌種接 入制曲原料中，這樣不需要再向大曲中添加其他酶制劑，同時也簡化了生產(chǎn)工序，使得生產(chǎn) 工藝簡單、快捷，產(chǎn)品質(zhì)量安全可靠。 該步驟中，利用醋糟、麩皮、玉米粉以及復合大曲為主要原料，添加復合大曲和作 為氮源的硫酸銨等輔料作為培養(yǎng)基，供做微生物繁殖和產(chǎn)酶用；所用微生物以復合大曲為 基礎菌株，用既是動物所需的微生物，又能產(chǎn)酶的黑曲霉、米曲酶、枯草芽孢桿菌、乳酸桿 菌、酵母菌為配伍菌株，固態(tài)法生產(chǎn)既具有活菌數(shù)量大又具有較高酶活性的加菌復合酶產(chǎn) 品。通過微生物群的發(fā)酵作用，培養(yǎng)生成酵母菌、芽孢桿菌、乳酸桿菌等二十多種有益菌活 菌數(shù)高；木聚糖酶、纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶、果膠酶、葡聚糖酶活力高；同時其中的纖維 素、半纖維素等成分降解為動物容易消化吸收的單糖、雙糖、氨基酸、維生素及未知促生長
6因子等物質(zhì)，并轉(zhuǎn)化為菌體蛋白。復合大曲的添加，既提供了有益的微生物菌種，又為微生 物生長繁殖提供了有機氮源。 上述步驟(3)中，所述植酸酶是一種可以將植酸水解為肌醇和磷酸的酶類，飼料 中添加植酸酶后可將植酸和質(zhì)酸鹽水解成肌醇和磷酸鹽，供動物吸收利用，從而提高磷 的利用率和骨骼礦化程度，可節(jié)約磷資源，降低飼料成本，該植酸酶至少可采用申請?zhí)枮?200610103778. 0的專利申請中所公開的方法制得。 本發(fā)明所述復合微生態(tài)飼料添加劑是利用醋糟為基質(zhì)，生產(chǎn)飼料酵母并富集微量 元素同以大曲微生物的基礎上添加黑曲霉、米曲霉、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌、乳酸菌多菌 共酵，經(jīng)生物工程技術(shù)生產(chǎn)的綠色復合微生態(tài)飼料添加劑。產(chǎn)品中有益菌群系、生物多酶 系、多種未知生長因子、有機微量元素、維生素、礦物質(zhì)、氨基酸以及載體復配生產(chǎn)畜禽及其 它動物的飼料添加劑，使之產(chǎn)生對動物機體互相協(xié)同及綜合平衡作用，通過生物多菌復合 酶與其它物質(zhì)的作用，充分提高飼料的利用率，提高動物對飼料的吸收及其轉(zhuǎn)化，以達到促 進動物增長和節(jié)約飼料的目的。生產(chǎn)添加劑的原料利用了醋糟，不僅變廢為寶，同時還降低 了生產(chǎn)成本，提高了飼料的投入產(chǎn)出比。更重要的是通過動物過腹轉(zhuǎn)化，可以生產(chǎn)出對人 類極具營養(yǎng)價值的雞蛋、雞肉、豬肉等綠色食品。它不但可以防病治病、提高飼料轉(zhuǎn)化率和 畜禽生產(chǎn)性能，還可降低畜禽產(chǎn)品中膽固醇的含量，減少糞便中硫化氫、有機磷等有害物質(zhì) 的含量，明顯減少畜牧業(yè)生產(chǎn)對環(huán)境造成的污染，具有顯著的經(jīng)濟效益、社會效益和生態(tài)效
.、 總之，本發(fā)明具有以下優(yōu)點 1、工藝先進液態(tài)深層發(fā)酵培養(yǎng)功能酵母，多菌聯(lián)合協(xié)同固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)多菌復合 酶，高效混合，經(jīng)低溫干燥、超微粉碎，生產(chǎn)產(chǎn)品； 2、營養(yǎng)豐富優(yōu)質(zhì)酵母蛋白，蛋白質(zhì)可達20%以上，菌種能產(chǎn)生豐富的B組維生素 及多種生長因子，促進畜禽生長； 3、菌群豐富本發(fā)明以復合大曲的SMEM菌群為基礎菌，并添加芽孢桿菌、乳酸菌、 酵母菌等五種益生菌，它不是用一種微生物，也不是只有某幾種特定的微生物，而是將許多 種類的有用微生物作為一個功能群體來應用。因此，它和一般微生物菌劑相比，不僅具備功 能齊全的優(yōu)勢，而且在本身的生產(chǎn)上也表現(xiàn)出了高科技水平； 4、酶譜全、活性高本發(fā)明所述菌種自身在腸道中產(chǎn)生大量消化酶，同時又外加各 種酶制劑，大大提高了酶的活性； 5、主要原料是醋糟、麥麩、玉米，來源豐富，價格低廉，變廢為寶； 6、富含對人和動物都具有重要營養(yǎng)作用的功能酵母硒酵母、鋅酵母、鐵酵母，富
集微量元素的功能酵母具有其他形態(tài)微量元素絡合物所無法比擬的優(yōu)勢，其在飼料行業(yè)中
必將有著廣泛的應用前景； 7、使用本發(fā)明所述的產(chǎn)品，加上配套的科學養(yǎng)殖方法，通過動物過腹轉(zhuǎn)化，可以生 產(chǎn)出對人類極具營養(yǎng)價值、具有原始的風味的雞蛋、雞肉、豬肉等綠色食品。


圖1為本發(fā)明的制備工藝流程圖具體實施方式

實施例1 : —種復合微生態(tài)飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟
(1)富含微量元素的有機功能酵母的制備 A、硒酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代兩次，獲得活化后菌種，將活化后 菌種接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，2『C振蕩培養(yǎng)20h作為種子液；制備pH4. 5的YEPD 液體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以3X的菌重量接種，3(TC搖床往復振蕩培養(yǎng)18h后，加 入3mg/L的亞硒酸鈉溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至45h ;將得到的發(fā)酵液在4000r/min離心10min，收集 菌體并烘干，即得到硒酵母； B、鐵酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種 接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，28t:振蕩培養(yǎng)20h作為種子液；制備p朋.0的YEPD液 體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以8^的菌重量接種，3(TC搖床往復振蕩培養(yǎng)18h后，加入 700mg/L的硫酸亞鐵溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至55h ;將將得到的發(fā)酵液在4000r/min離心10min，收 集菌體并烘干，即得到鐵酵母； C、鋅酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種 接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，28t:振蕩培養(yǎng)20h作為種子液；制備p朋.0的YEPD液 體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以8^的菌重量接種，3(TC搖床往復振蕩培養(yǎng)18h，加入 700mg/L的硫酸鋅溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至55h ;將得到的發(fā)酵液在4000r/min離心10min，收集菌
體并烘干，即得到鋅酵母； [OO44] (2)多菌復合酶的制備
A、原料混合拌料 用預處理過的原料醋糟、麥麩、玉米粉按重量比1.5 : 0.8 : 0.8配料，在混合原
料中分別加入占原料總重量的3%復合大曲和0. 5%硫酸銨，攪拌均勻即可接種； 原料的預處理包括原料的除雜、打碎，其中除雜步驟如下通常用篩選和磁選。
首先選用初清篩去除原料中有較大雜質(zhì)、泥砂和部分灰塵，而后用振動篩，根據(jù)原料顆粒和
雜質(zhì)大小的不同，使其自動分級，以保證最大限度降低雜質(zhì)含糧率的同時，盡可能多地除去
雜質(zhì)。磁選是用永磁馬蹄鐵去除原料中的磁性雜質(zhì)如鐵削、鐵釘、螺母等。原料的粉碎主要
是粉碎玉米及打散醋糟、麩皮的結(jié)團。使得原料中淀粉分子與微生物充分接觸，提高淀粉轉(zhuǎn)
化率。用粉碎機，將原料在高速旋轉(zhuǎn)的捶片打擊下破碎，細物料通過篩板孔排出機外，粗粒
繼續(xù)被捶片擊打，直到破碎通過篩孔排出機外，玉米粉粉碎粒度1. 5 2. Omm。 所述復合大曲的制備方法如下 a大曲原料的處理將大曲原料混合、篩選、粉碎，然后加水，使得大曲原料與水的 重量比為1 : 2. 5 ; b種曲的制備將試管斜面培養(yǎng)基中的以下菌種黑曲霉(Aspergi 1 lus niger) 41254、黑曲霉(Aspergillus niger)UV-11、紅曲霉屬(Monascus sp.)、總狀毛霉 (Mucor racemosus)、雅致放身寸毛霉(Actinomucor elegans)、米根霉(Rhizopus oryzae)、 釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、克魯斯假絲酵母(Candida krusei)、醋桿菌屬 (Acetobacter sp.)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、德氏乳桿菌(Lactobacillus delbrueckiisubsp.bulgaricus)6100各取一環(huán)，分別接入裝有大曲原料的三角瓶中進行培養(yǎng)，控制發(fā)酵溫度為3(TC，時間為44h， pH值為5，然后再繼續(xù)進行擴大培養(yǎng)，得到種曲；
c復合大曲的制備采用生料制曲，將得到的種曲與大曲原料按l : 45的重量比 接入固態(tài)發(fā)酵設備，充分混合均勻后，控制發(fā)酵溫度保持在3(TC，pH值為5，鼓風量為50m3/ m3 min，當發(fā)酵時間達到30h時，出曲，然后將得到的大曲放入真空干燥箱，進行低溫真空 烘干，即得到本發(fā)明所述的復合大曲；上述菌種均為現(xiàn)有公知產(chǎn)品。
B、接種 使用培養(yǎng)40h的酵母菌，培養(yǎng)20h的黑曲霉和米曲霉，培養(yǎng)5h的芽孢桿菌和培養(yǎng) 8h的乳酸菌這5株菌的培養(yǎng)液作為種子液，按酵母菌接種量為2 % ，黑曲霉接種量為2 % ，芽 孢桿菌接種量為3%，乳酸菌的接種量為3%，米曲霉接種量3%時接種，再加上拌料時加入 的復合大曲，調(diào)整培養(yǎng)料的含水量為50% ;
C、固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng) 接種后采用固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為3(TC，培養(yǎng)至80 95h后，出料，即得到多 菌復合酶；具體步驟如下 原料裝池的厚度一般為30cm左右，為了保持均勻而良好的通風風條件，料層堆積 應疏松及平整。發(fā)酵利用通風機供給空氣及調(diào)節(jié)溫度，促使各菌種迅速生長繁殖。風量(m3/ h)以曲池內(nèi)盛總原料量(Kg)的4-5倍計算。并據(jù)此選擇通風機的型號。
靜置培養(yǎng)6h左右，此時曲料就開始升溫，當溫度升至35左右時，就通風降溫。此 后根據(jù)實際情況連續(xù)通風，使料層溫度保持在3(TC左右，溫度的調(diào)節(jié)可采取循環(huán)通風或以 換氣的方式控制，使上層和下層的溫差盡量減小。 在生產(chǎn)過程中，接種后10h左右，料溫上升很快，此時曲料由于菌絲生長而結(jié)塊， 通風的阻力隨著菌絲生長時間的延長而逐漸增加，料溫出現(xiàn)下低而高的現(xiàn)象，溫差也逐漸 增大。此時，應立即用翻曲機進行翻曲，使曲料疏松，減少通風阻力，保持正常溫度。斷續(xù)培 養(yǎng)，根據(jù)料溫上升情況及曲料出現(xiàn)收縮裂縫等現(xiàn)象，再進行翻曲，翻松曲料，消除裂縫，以防 漏風。以后繼續(xù)保持料溫3(TC左右培養(yǎng)，培養(yǎng)至80 95h，即可出料。出料的最適宜時間 主要綜合考慮以蛋白酶活力和酵母菌數(shù)達到其最高點為依據(jù)。選擇80 95h為產(chǎn)品出料 時間。時間過短，酶活力不足，菌種沒有充分繁殖；時間過長，酶活力反而逐漸下降，活菌數(shù) 也下降；同時影響發(fā)酵設備周轉(zhuǎn)，增加通風機電力的消耗，增加生產(chǎn)成本。
(3)將步驟(1)中得到的富含微量元素的有機功能酵母，硒酵母、鐵酵母、鋅酵母 和步驟(2)中得到的多菌復合酶以及植酸酶按下列重量比混合均勻硒酵母0.5%，鐵酵母 1 % ，鋅酵母1 % ，多菌復合酶89. 5% ，植酸酶8% ，在臥式螺帶混合機中進行充分混合10 20min，直到混合均勻為止；然后低溫真空干燥，干燥的工藝參數(shù)為溫度3(TC，真空度為 0. 06-0. 096Mpa時，干燥時間為3 4h，產(chǎn)品含水量《13% ;干燥后的物料用粉碎機進行粉
碎，粉碎成品的細度符合要求的物料，即得到本發(fā)明所述的復合微生態(tài)飼料添加劑。
實施例2 : —種復合微生態(tài)飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟
(1)富含微量元素的有機功能酵母的制備 A、硒酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代兩次，獲得活化后菌種，將活化后 菌種接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，2『C振蕩培養(yǎng)25h作為種子液；制備pH4. 5的YEPD 液體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以6^的菌重量接種，3(TC搖床往復振蕩培養(yǎng)25h后，加入6mg/L的亞硒酸鈉溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至55h ;將得到的發(fā)酵液在4000r/min離心10min，收集 菌體并烘干，即得到硒酵母； B、鐵酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種 接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，28t:振蕩培養(yǎng)25h作為種子液；制備pH6. 0的YEPD液 體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以12X的菌重量接種，3(TC搖床往復振蕩培養(yǎng)25h后，加入 900mg/L的硫酸亞鐵溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至65h ;將將得到的發(fā)酵液在4000r/min離心10min，收 集菌體并烘干，即得到鐵酵母； C、鋅酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種 接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，28t:振蕩培養(yǎng)25h作為種子液；制備pH6. 0的YEPD液 體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以12X的菌重量接種，3(TC搖床往復振蕩培養(yǎng)25h，加入 900mg/L的硫酸鋅溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至65h ;將得到的發(fā)酵液在4000r/min離心10min，收集菌
體并烘干，即得到鋅酵母； [ooee] (2)多菌復合酶的制備
A、原料混合拌料 用預處理過的原料醋糟、麥麩、玉米粉按重量比2.5 : 1.5 : 1.5配料，在混合原
料中分別加入占原料總重量的6%復合大曲和1. 2%硫酸銨，攪拌均勻即可接種； 原料的預處理包括原料的除雜、打碎，其中除雜步驟如下通常用篩選和磁選。
首先選用初清篩去除原料中有較大雜質(zhì)、泥砂和部分灰塵，而后用振動篩，根據(jù)原料顆粒和
雜質(zhì)大小的不同，使其自動分級，以保證最大限度降低雜質(zhì)含糧率的同時，盡可能多地除去
雜質(zhì)。磁選是用永磁馬蹄鐵去除原料中的磁性雜質(zhì)如鐵削、鐵釘、螺母等。原料的粉碎主要
是粉碎玉米及打散醋糟、麩皮的結(jié)團。使得原料中淀粉分子與微生物充分接觸，提高淀粉轉(zhuǎn)
化率。用粉碎機，將原料在高速旋轉(zhuǎn)的捶片打擊下破碎，細物料通過篩板孔排出機外，粗粒
繼續(xù)被捶片擊打，直到破碎通過篩孔排出機外，玉米粉粉碎粒度1. 5 2. 0mm。 所述復合大曲的制備方法如下 a大曲原料的處理將大曲原料混合、篩選、粉碎，然后加水，使得大曲原料與水的 重量比為1:3; b種曲的制備將試管斜面培養(yǎng)基中的以下菌種黑曲霉(Aspergi 1 lus niger) 41254、黑曲霉(Aspergillus niger)UV-11、紅曲霉屬(Monascus sp.)、總狀毛霉 (Mucor racemosus)、雅致放身寸毛霉(Actinomucor elegans)、米根霉(Rhizopus oryzae)、 釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、克魯斯假絲酵母(Candida krusei)、醋桿菌屬 (Acetobacter sp.)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、德氏乳桿菌(Lactobacillus delbrueckiisubsp.bulgaricus)6100各取一環(huán)，分別接入裝有大曲原料的三角瓶中進行培 養(yǎng)，控制發(fā)酵溫度為33t:，時間為46h， pH值為7，然后再繼續(xù)進行擴大培養(yǎng)，得到種曲；
c復合大曲的制備采用生料制曲，將得到的種曲與大曲原料按l : 55的重量比 接入固態(tài)發(fā)酵設備，充分混合均勻后，控制發(fā)酵溫度保持在33t:，pH值為7，鼓風量為75m3/ m3 min，當發(fā)酵時間達到33h時，出曲，然后將得到的大曲放入真空干燥箱，進行低溫真空 烘干，即得到本發(fā)明所述的復合大曲；上述菌種均為現(xiàn)有公知產(chǎn)品。
B、接種 使用培養(yǎng)40 50h的酵母菌，培養(yǎng)30h的黑曲霉和米曲霉，培養(yǎng)10h的芽孢桿菌和培養(yǎng)15h的乳酸菌這5株菌的培養(yǎng)液作為種子液，按酵母菌接種量為4%，黑曲霉接種量 為4% ，芽孢桿菌接種量為5 % ，乳酸菌的接種量為5 % ，米曲霉接種量6 %時接種，再加上拌 料時加入的復合大曲，調(diào)整培養(yǎng)料的含水量為65% ;
C、固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng) 接種后采用固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為35t:，培養(yǎng)至80 95h后，出料，即得到多 菌復合酶；具體步驟如下 原料裝池的厚度一般為30cm左右，為了保持均勻而良好的通風風條件，料層堆積 應疏松及平整。發(fā)酵利用通風機供給空氣及調(diào)節(jié)溫度，促使各菌種迅速生長繁殖。風量(m3/ h)以曲池內(nèi)盛總原料量(Kg)的4-5倍計算。并據(jù)此選擇通風機的型號。
靜置培養(yǎng)6h左右，此時曲料就開始升溫，當溫度升至35左右時，就通風降溫。此 后根據(jù)實際情況連續(xù)通風，使料層溫度保持在3(TC左右，溫度的調(diào)節(jié)可采取循環(huán)通風或以 換氣的方式控制，使上層和下層的溫差盡量減小。 在生產(chǎn)過程中，接種后10h左右，料溫上升很快，此時曲料由于菌絲生長而結(jié)塊， 通風的阻力隨著菌絲生長時間的延長而逐漸增加，料溫出現(xiàn)下低而高的現(xiàn)象，溫差也逐漸 增大。此時，應立即用翻曲機進行翻曲，使曲料疏松，減少通風阻力，保持正常溫度。斷續(xù)培 養(yǎng)，根據(jù)料溫上升情況及曲料出現(xiàn)收縮裂縫等現(xiàn)象，再進行翻曲，翻松曲料，消除裂縫，以防 漏風。以后繼續(xù)保持料溫3(TC左右培養(yǎng)，培養(yǎng)至80 95h，即可出料。出料的最適宜時間 主要綜合考慮以蛋白酶活力和酵母菌數(shù)達到其最高點為依據(jù)。選擇80 95h為產(chǎn)品出料 時間。時間過短，酶活力不足，菌種沒有充分繁殖；時間過長，酶活力反而逐漸下降，活菌數(shù) 也下降；同時影響發(fā)酵設備周轉(zhuǎn)，增加通風機電力的消耗，增加生產(chǎn)成本。
(3)將步驟(1)中得到的富含微量元素的有機功能酵母，硒酵母、鐵酵母、鋅酵母 和步驟(2)中得到的多菌復合酶以及植酸酶按下列重量比混合均勻硒酵母1. 5%，鐵酵 母3 % ，鋅酵母3 % ，多菌復合酶80. 5 % ，植酸酶12 % ，在臥式螺帶混合機中進行充分混合 10 20min，直到混合均勻為止；然后低溫真空干燥，干燥的工藝參數(shù)為溫度3(TC，真空度 為0. 06-0. 096Mpa時，干燥時間為3 4h，產(chǎn)品含水量《13%;干燥后的物料用粉碎機進行
粉碎，粉碎成品的細度符合要求的物料，即得到本發(fā)明所述的復合微生態(tài)飼料添加劑。
實施例3 : —種復合微生態(tài)飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟
(1)富含微量元素的有機功能酵母的制備 A、硒酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代兩次，獲得活化后菌種，將活化后 菌種接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，2『C振蕩培養(yǎng)23h作為種子液；制備pH4. 5的YEPD 液體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以5X的菌重量接種，3(TC搖床往復振蕩培養(yǎng)20h后，加 入5mg/L的亞硒酸鈉溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至48h ;將得到的發(fā)酵液在4000r/min離心10min，收集 菌體并烘干，即得到硒酵母； B、鐵酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種 接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，28t:振蕩培養(yǎng)22h作為種子液；制備pH6. 0的YEPD液 體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以10X的菌重量接種，3(TC搖床往復振蕩培養(yǎng)20h后，加入 800mg/L的硫酸亞鐵溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至60h ;將將得到的發(fā)酵液在4000r/min離心10min，收 集菌體并烘干，即得到鐵酵母；
C、鋅酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種 接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，28t:振蕩培養(yǎng)20h作為種子液；制備p朋.0的YEPD液 體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以10X的菌重量接種，3(TC搖床往復振蕩培養(yǎng)20h，加入 800mg/L的硫酸鋅溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至60h ;將得到的發(fā)酵液在4000r/min離心10min，收集菌
體并烘干，即得到鋅酵母；
(2)多菌復合酶的制備
A、原料混合拌料 用預處理過的原料醋糟、麥麩、玉米粉按重量比2 : 1 : l配料，在混合原料中分 別加入占原料總重量的5%復合大曲和1%硫酸銨，攪拌均勻即可接種； 原料的預處理包括原料的除雜、打碎，其中除雜步驟如下通常用篩選和磁選。 首先選用初清篩去除原料中有較大雜質(zhì)、泥砂和部分灰塵，而后用振動篩，根據(jù)原料顆粒和 雜質(zhì)大小的不同，使其自動分級，以保證最大限度降低雜質(zhì)含糧率的同時，盡可能多地除去 雜質(zhì)。磁選是用永磁馬蹄鐵去除原料中的磁性雜質(zhì)如鐵削、鐵釘、螺母等。原料的粉碎主要 是粉碎玉米及打散醋糟、麩皮的結(jié)團。使得原料中淀粉分子與微生物充分接觸，提高淀粉轉(zhuǎn) 化率。用粉碎機，將原料在高速旋轉(zhuǎn)的捶片打擊下破碎，細物料通過篩板孔排出機外，粗粒 繼續(xù)被捶片擊打，直到破碎通過篩孔排出機外，玉米粉粉碎粒度1. 5 2. Omm。
所述復合大曲的制備方法如下 a大曲原料的處理將大曲原料混合、篩選、粉碎，然后加水，使得大曲原料與水的 重量比為1 : 2. 8 ; b種曲的制備將試管斜面培養(yǎng)基中的以下菌種黑曲霉(Aspergi 1 lus niger) 41254、黑曲霉(Aspergillus niger)UV-11、紅曲霉屬(Monascus sp.)、總狀毛霉 (Mucor racemosus)、雅致放身寸毛霉(Actinomucor elegans)、米根霉(Rhizopus oryzae)、 釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、克魯斯假絲酵母(Candida krusei)、醋桿菌屬 (Acetobacter sp.)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、德氏乳桿菌(Lactobacillus delbrueckiisubsp.bulgaricus)6100各取一環(huán)，分別接入裝有大曲原料的三角瓶中進行培 養(yǎng)，控制發(fā)酵溫度為32t:，時間為45h， pH值為6，然后再繼續(xù)進行擴大培養(yǎng)，得到種曲；
c復合大曲的制備采用生料制曲，將得到的種曲與大曲原料按l : 50的重量比 接入固態(tài)發(fā)酵設備，充分混合均勻后，控制發(fā)酵溫度保持在3rC，pH值為6，鼓風量為60m3/ m3 min，當發(fā)酵時間達到32h時，出曲，然后將得到的大曲放入真空干燥箱，進行低溫真空 烘干，即得到本發(fā)明所述的復合大曲；上述菌種均為現(xiàn)有公知產(chǎn)品。
B、接種 使用培養(yǎng)45h的酵母菌，培養(yǎng)24h的黑曲霉和米曲霉，培養(yǎng)8h的芽孢桿菌和培養(yǎng) 10h的乳酸菌這5株菌的培養(yǎng)液作為種子液，按酵母菌接種量為3%，黑曲霉接種量為3%， 芽孢桿菌接種量為4%，乳酸菌的接種量為4%，米曲霉接種量4%時接種，再加上拌料時加 入的復合大曲，調(diào)整培養(yǎng)料的含水量為60% ;
C、固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng) 接種后采用固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30 35°C ，培養(yǎng)至80 95h后，出料，即得 到多菌復合酶；具體步驟如下 原料裝池的厚度一般為30cm左右，為了保持均勻而良好的通風風條件，料層堆積
12應疏松及平整。發(fā)酵利用通風機供給空氣及調(diào)節(jié)溫度，促使各菌種迅速生長繁殖。風量(m3/h)以曲池內(nèi)盛總原料量(Kg)的4-5倍計算。并據(jù)此選擇通風機的型號。
靜置培養(yǎng)6h左右，此時曲料就開始升溫，當溫度升至35左右時，就通風降溫。此后根據(jù)實際情況連續(xù)通風，使料層溫度保持在3(TC左右，溫度的調(diào)節(jié)可采取循環(huán)通風或以換氣的方式控制，使上層和下層的溫差盡量減小。 在生產(chǎn)過程中，接種后10h左右，料溫上升很快，此時曲料由于菌絲生長而結(jié)塊，通風的阻力隨著菌絲生長時間的延長而逐漸增加，料溫出現(xiàn)下低而高的現(xiàn)象，溫差也逐漸增大。此時，應立即用翻曲機進行翻曲，使曲料疏松，減少通風阻力，保持正常溫度。斷續(xù)培養(yǎng)，根據(jù)料溫上升情況及曲料出現(xiàn)收縮裂縫等現(xiàn)象，再進行翻曲，翻松曲料，消除裂縫，以防漏風。以后繼續(xù)保持料溫3(TC左右培養(yǎng)，培養(yǎng)至80 95h，即可出料。出料的最適宜時間主要綜合考慮以蛋白酶活力和酵母菌數(shù)達到其最高點為依據(jù)。選擇80 95h為產(chǎn)品出料時間。時間過短，酶活力不足，菌種沒有充分繁殖；時間過長，酶活力反而逐漸下降，活菌數(shù)也下降；同時影響發(fā)酵設備周轉(zhuǎn)，增加通風機電力的消耗，增加生產(chǎn)成本。
(3)將步驟(1)中得到的富含微量元素的有機功能酵母，硒酵母、鐵酵母、鋅酵母和步驟(2)中得到的多菌復合酶以及植酸酶按下列重量比混合均勻硒酵母1%，鐵酵母2% ，鋅酵母2% ，多菌復合酶85% ，植酸酶10% ，在臥式螺帶混合機中進行充分混合10 20min，直到混合均勻為止；然后低溫真空干燥，干燥的工藝參數(shù)為溫度3(TC，真空度為0. 06-0. 096Mpa時，干燥時間為3 4h，產(chǎn)品含水量《13% ;干燥后的物料用粉碎機進行粉碎，粉碎成品的細度符合要求的物料，即得到本發(fā)明所述的復合微生態(tài)飼料添加劑。
權(quán)利要求
一種復合微生態(tài)飼料添加劑的制備方法，其特征是包括以下步驟(1)富含微量元素的有機功能酵母的制備A、硒酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)20～25h作為種子液；制備pH4.5的YEPD液體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以3～6％的菌重量接種，培養(yǎng)18～25h后，加入3～6mg/L的亞硒酸鈉溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至45～55h；將得到的發(fā)酵液離心，收集菌體并烘干，即得到硒酵母；B、鐵酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)20～25h作為種子液；制備pH6.0的YEPD液體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以8～12％的菌重量接種，培養(yǎng)18～25h后，加入700～900mg/L的硫酸亞鐵溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至55～65h；將將得到的發(fā)酵液離心，收集菌體并烘干，即得到鐵酵母；C、鋅酵母制備將啤酒酵母于YEPD斜面上傳代，獲得活化后菌種，將活化后菌種接種于制備好的YEPD液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)20～25h作為種子液；制備pH6.0的YEPD液體培養(yǎng)基，將活化后的啤酒酵母以8～12％的菌重量接種，培養(yǎng)18～25h，加入700～900mg/L的硫酸鋅溶液，繼續(xù)培養(yǎng)至55～65h；將得到的發(fā)酵液離心，收集菌體并烘干，即得到鋅酵母；(2)多菌復合酶的制備A、原料混合拌料用預處理過的原料醋糟、麥麩、玉米粉按重量比(1.5～2.5)∶(0.8～1.5)∶(0.8～1.5)配料，在混合原料中分別加入占原料總重量的3～6％復合大曲和0.5～1.2％硫酸銨，攪拌均勻即可接種；所述復合大曲的制備方法如下a大曲原料的處理將大曲原料混合、篩選、粉碎，然后加水，使得大曲原料與水的重量比為1∶2.5～3；b種曲的制備將試管斜面培養(yǎng)基中的以下菌種黑曲霉(Aspergillus niger)41254、黑曲霉(Aspergillus niger)UV-11、紅曲霉屬(Monascus sp.)、總狀毛霉(Mucor racemosus)、雅致放射毛霉(Actinomucor elegans)、米根霉(Rhizopus oryzae)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、克魯斯假絲酵母(Candida krusei)、醋桿菌屬(Acetobacter sp.)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、德氏乳桿菌(Lactobacillus delbrueckiisubsp.bulgaricus)6100各取一環(huán)，分別接入裝有大曲原料的三角瓶中進行培養(yǎng)，控制發(fā)酵溫度為30℃～33℃，時間為44～46h，pH值為5～7，然后再繼續(xù)進行擴大培養(yǎng)，得到種曲；c復合大曲的制備采用生料制曲，將得到的種曲與大曲原料按1∶45～55的重量比接入固態(tài)發(fā)酵設備，充分混合均勻后，控制發(fā)酵溫度保持在30℃～33℃，pH值為5～7，鼓風量為50～75m3/m3·min，當發(fā)酵時間達到30～33h時，出曲，然后將得到的大曲放入真空干燥箱，進行低溫真空烘干，即得到本發(fā)明所述的復合大曲；B、接種使用培養(yǎng)40～50h的酵母菌，培養(yǎng)20～30h的黑曲霉和米曲霉，培養(yǎng)5～10h的芽孢桿菌和培養(yǎng)8～15h的乳酸菌這5株菌的培養(yǎng)液作為種子液，按酵母菌接種量為2～4％，黑曲霉接種量為2～4％，芽孢桿菌接種量為3～5％，乳酸菌的接種量為3～5％，米曲霉接種量3～6％時接種，再加上拌料時加入的復合大曲，調(diào)整培養(yǎng)料的含水量為50～65％；C、固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)接種后采用固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30～35℃，培養(yǎng)至80～95h后，出料，即得到多菌復合酶；(3)將步驟(1)中得到的富含微量元素的有機功能酵母，硒酵母、鐵酵母、鋅酵母和步驟(2)中得到的多菌復合酶以及植酸酶按下列重量比混合均勻硒酵母0.5～1.5％，鐵酵母1～3％，鋅酵母1～3％，多菌復合酶80～90％，植酸酶8～12％；然后低溫真空干燥、粉碎，即得到本發(fā)明所述的復合微生態(tài)飼料添加劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種飼料添加劑，具體為一種復合微生態(tài)飼料添加劑的制備方法，為了解決現(xiàn)有各類飼料添加劑在實際應用中存在上述各自不同缺點的問題，包括制備富含微量元素的硒酵母、鐵酵母、鋅酵母，利用醋糟、麩皮、玉米粉以及復合大曲、硫酸銨等輔料作為培養(yǎng)基，添加黑曲霉、米曲酶、枯草芽孢桿菌、乳酸桿菌、酵母菌，固態(tài)法生產(chǎn)多菌復合酶，將上述功能酵母、植酸酶、多菌復合酶混合，以生產(chǎn)出有益菌群活菌多，動物需要的消化酶、非消化酶酶系全，且各種酶活力高，并富含對動物和人類具有功能營養(yǎng)的有機微量元素、維生素、氨基酸以及未知促生長因子的生物飼料微多酶，具有工藝先進、營養(yǎng)豐富、菌群豐富、酶譜全、活性高、綠色無污染等優(yōu)點。
文檔編號A23K1/165GK101791051SQ20101012257
公開日2010年8月4日 申請日期2010年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月12日
發(fā)明者丁靜, 宋春雪, 張茜, 李麗華, 郭建國 申請人:山西三盟實業(yè)發(fā)展有限公司