專利名稱：小松菜Ogura胞質(zhì)雄性不育系的轉(zhuǎn)育的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬農(nóng)業(yè)種植業(yè)作物遺傳育種領(lǐng)域。背景技術(shù)：
小松菜是十字花科蕓薹屬白菜亞種普通白菜的一個變種。原產(chǎn)中國，十九世紀(jì) 七十年代傳入日本，二十世紀(jì)九十年代由日本客商引入我國栽培和加工。由于其含鈣較高， 小松菜有高鈣蔬菜之稱。在日本市場，小松菜經(jīng)常供不應(yīng)求，深受日本消費者青睞。出口速 凍小松菜的前景十分看好，我國許多省市對日本小松菜進行了大面積引種栽培。小松菜成 為我國出口日本的主要蔬菜品種之一。然而，目前我國小松菜種子需要依賴于從日本進口， 價格昂貴，有時種子供不應(yīng)求，困擾著我國一些出口加工企業(yè)，成為制約我國出口創(chuàng)匯蔬菜 持續(xù)發(fā)展的瓶頸。小松菜的育種研究以國外最早、也最深入。在我國尚停留在外部形態(tài)的 農(nóng)藝性狀鑒定，適宜種植的品種篩選，栽培模式的研究上。雄性不育是高等植物中普遍存在的一種現(xiàn)象。十字花科蕓薹屬作物雜種優(yōu)勢明 顯，采用自交不親和系和雄性不育系制種是此屬作物利用雜種優(yōu)勢的主要途徑。與自交不 親和系相比，利用雄性不育系配制雜交組合，可以克服人工蕾期授粉繁殖親本成本高、長期 連續(xù)自交生活力易衰退、雜交率易受留種環(huán)境制約等缺陷。在簡化雜種優(yōu)勢育種上具有重 要意義，為國內(nèi)眾多育種工作者所重視。與核不育相比，胞質(zhì)型不育具有轉(zhuǎn)育簡單、不育性 容易保持的優(yōu)點。Ogura不育源是由日本人小倉于1968年在鹿兒島蘿卜品種田里發(fā)現(xiàn)的不 育株經(jīng)選育而成。經(jīng)大量試驗證明，其不育性由細胞質(zhì)基因和2對隱性細胞核基因共同控 制。其特點是雄蕊完全退化呈小花瓣或條狀，無雄蕊，無花粉，雌蕊外形基本正常，不育率、 不育度均為100%。但該不育源存在苗期遇低溫植株黃化、花器蜜腺退化等缺陷。前人的 研究結(jié)果一致表明不同的轉(zhuǎn)育材料間后代缺綠癥狀和結(jié)實性存在差異。自上世紀(jì)80年代 初，我國引進Ogura蘿卜胞質(zhì)雄性不育系以來，通過采用原生質(zhì)體非對稱融合，雜交，多代 回交轉(zhuǎn)育等技術(shù)改良，現(xiàn)已成功育成花椰菜、白菜、甘藍、紫菜薹等低溫植株不黃化、蜜腺發(fā) 育較好的胞質(zhì)雄性不育系，但轉(zhuǎn)育成小松菜Ogura胞質(zhì)雄性不育系未見報道。本發(fā)明可應(yīng)用于培育具有自主知識產(chǎn)權(quán)、經(jīng)濟性狀好、適宜加工的小松菜新品種， 對滿足國際市場需求，出口創(chuàng)匯，減少對進口品種的依賴度，提高進口優(yōu)質(zhì)品種的國內(nèi)自給 能力，增強我國蔬菜產(chǎn)業(yè)的市場競爭力具有重大而深遠的現(xiàn)實意義。
發(fā)明內(nèi)容
2003午春，我們以青梗白菜‘矮抗青’的優(yōu)良Ogura胞質(zhì)雄性不育系0gi^8-4-13_2 與小松菜穩(wěn)定自交系NL-5-4-16雜交，并以NL-5-4-16為回交父本連續(xù)6代回交轉(zhuǎn)育成小 松菜Ogura源胞質(zhì)雄性不育系0guNL10-23-17-5-50-l 1。該不育系葉色深綠，對霜霉病田間 抗病性強，苗期低溫植株不黃化，蜜腺發(fā)達，雄蕊呈小花瓣狀，無雄蕊，無花粉，不育率、不育 度均為100%，不育性穩(wěn)定，配合力強，所配組合表現(xiàn)好，是優(yōu)良的雄性不育系。四

以白菜Ogura胞質(zhì)雄性不育系0gi^8-4-13_2為不育源轉(zhuǎn)育成小松菜胞質(zhì)雄性不 育系0guNL10-23-17-5-50-ll的選育經(jīng)過如圖1所示。五具體實施例方式2003年4月，以青梗白菜‘矮抗青’的優(yōu)良胞質(zhì)雄性不育系(代號0gi^8-4-13-2) 為母本，以小松菜的穩(wěn)定自交系(代號NL-5-4-16)為父本，進行雜交獲得變種間雜交種 F1(OguNLlO)，收獲的F1種子于2003年10月播種于我院試驗基地，在子葉期選擇子葉黃化 輕的植株做好標(biāo)記，在苗期選擇黃化程度相對輕的植株定植于大田。利用冬季低溫，特別是 寒潮過后的低溫天氣，選擇黃化程度輕的植株做好標(biāo)記，作為春季重點轉(zhuǎn)育單株。2004年 3月下旬，從白菜和小松菜雜交種定植田中，選擇生長勢強、葉色深綠、不黃化、蜜腺發(fā)達、柱 頭發(fā)育良好、雄蕊無花粉的優(yōu)良單株，同時，剔除病株、抽薹早的植株，以小松菜的穩(wěn)定自交 系(代號NL-5-4-16)為父本回交，單株留種，獲得5份回交一代種子?；亟灰淮N子于2004 年10月按株系播種，分株系圃栽種。在植株生長發(fā)育期間，調(diào)查各株系植物學(xué)性狀、抗病能 力、變異及分離情況。對低溫寒潮過后，植株黃化程度輕的植株做好標(biāo)記，作為春季重點轉(zhuǎn) 育單株。2005年3月，按照選育目標(biāo)，結(jié)合各植株的葉型，選擇了 M個單株，并在抽薹期，再 次淘汰抽薹早的植株，最后保留30個單株以小松菜的穩(wěn)定自交系(代號NL-5-4-16)為父 本回交，獲得0guNL10-23等30份回交2代種子(株系)。2005年10月將30份BC2種子按 株系播種于我院高新農(nóng)業(yè)技術(shù)實驗園區(qū)內(nèi)。按照形態(tài)、抗性、產(chǎn)量等性狀選育目標(biāo)，結(jié)合各 株系植株的性狀表現(xiàn)，選擇其中表現(xiàn)較好的8個株系。在該8個株系中根據(jù)各植株的表現(xiàn)， 選擇優(yōu)良單株。2006年3月，在抽薹期淘汰抽薹相對較早的4個株系，對剩余的4個株系內(nèi) 選留的植株同樣淘汰抽薹較早的植株，然后對入選植株中，選擇蜜腺發(fā)育較好的20個植株 以NL-5-4-16為父本進行回交轉(zhuǎn)育，獲得20份BC3種子。2006年10月，對20份BC3種子按 株系播種，分株系圃栽種。調(diào)查各株系植物學(xué)性狀、觀察一致性，發(fā)現(xiàn)20個BC3株系中有2 個株系表現(xiàn)植株生長勢強，比較整齊，苗期低溫不黃化，蜜腺發(fā)達，無花粉。2007年3月，從 這2個BC3中選擇10株優(yōu)良單株，以NL-5-4-16為父本進行回交轉(zhuǎn)育，獲得10份BC4種子。 2007年10月，對10份BC4種子按株系播種，分株系圃栽種。進行苗期低溫黃化性狀鑒定，均 未發(fā)現(xiàn)黃化植株。調(diào)查各株系植物學(xué)性狀，發(fā)現(xiàn)除OguNLlO-23-17-5的株系，其余株系仍有 較大幅度的分離，且相對優(yōu)良的植株其性狀遠不及OguNLlO-23-17-5的后代，均予以淘汰。 2008年3月，從0guNL10-23-17-5的后代中選擇5個優(yōu)良單株，以NL-5-4-16為父本進行 回交轉(zhuǎn)育，獲得5份BC5種子。2008年10月，對5份BC5種子按株系播種，分株系圃栽種。 調(diào)查各株系植物學(xué)性狀、觀察一致性。在5個株系中0guNL10-23-17-5-50表現(xiàn)優(yōu)良，系內(nèi) 株間基本一致。2009年3月從0guNL10-23-17-5-50中選擇20個優(yōu)良植株，以NL-5-4-16 為父本進行回交轉(zhuǎn)育，混合收種(代號0guNL10-23-17-5-50-ll)。2009年10月，對混合留 種的BC6植物學(xué)性狀、一致性觀察，發(fā)現(xiàn)株間基本一直，并且與0gUNL10-23-17-5-50基本一 直，不育系育成。同期，以0gUNL10-23-17-5-50-ll為母本與其他小松菜品種雜交，試配新 組合10個，進行品種比較試驗，發(fā)現(xiàn)0gUNL10-23-17-5-50-ll配合力強，所配組合表現(xiàn)好， 是優(yōu)良的雄性不育系。
權(quán)利要求
本發(fā)明以白菜‘矮抗青’的優(yōu)良Ogura胞質(zhì)雄性不育系0gM8-4-13-2與小松菜穩(wěn)定自 交系NL-5-4-16雜交，并以NL-5-4-16為回交父本連續(xù)6代回交轉(zhuǎn)育成小松菜Ogura源胞質(zhì) 雄性不育系0guNL10-23-17-5-50-ll。該不育系葉色深綠，對霜霉病田間抗病性強，苗期低 溫植株不黃化，蜜腺發(fā)達，雄蕊呈小花瓣狀，無雄蕊，無花粉，不育率、不育度均為100 %，不 育性穩(wěn)定，配合力強，所配組合表現(xiàn)好，是優(yōu)良的雄性不育系。請求對以下權(quán)利進行保護
1.本發(fā)明應(yīng)用的小松菜Ogura源胞質(zhì)雄性不育系的轉(zhuǎn)育方法。
2.育成苗期低溫植株不黃化，蜜腺發(fā)達的小松菜胞質(zhì)雄性不育系的先進性。
全文摘要
本發(fā)明屬農(nóng)業(yè)種植業(yè)作物遺傳育種領(lǐng)域。Ogura不育源存在苗期遇低溫植株黃化、花器蜜腺退化等缺陷。我們以青梗白菜“矮抗青”的優(yōu)良Ogura胞質(zhì)雄性不育系Ogu28-4-13-2與小松菜穩(wěn)定自交系NL-5-4-16雜交，并以NL-5-4-16為回交父本連續(xù)6代回交轉(zhuǎn)育成小松菜Ogura源胞質(zhì)雄性不育系OguNL10-23-17-5-50-11。該不育系葉色深綠，對霜霉病田間抗病性強，苗期低溫植株不黃化，蜜腺發(fā)達，雄蕊呈小花瓣狀，無雄蕊，無花粉，不育率、不育度均為100％，不育性穩(wěn)定，配合力強，所配組合表現(xiàn)好，是優(yōu)良的雄性不育系。該發(fā)明可應(yīng)用于培育具有自主知識產(chǎn)權(quán)、經(jīng)濟性狀好、適宜加工的小松菜新品種，減少對進口品種的依賴度，提高進口優(yōu)質(zhì)品種的國內(nèi)自給能力。
文檔編號A01H1/02GK102047840SQ201010193729
公開日2011年5月11日 申請日期2010年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月26日
發(fā)明者任錫亮, 孟秋峰, 王毓洪 申請人:寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院