專(zhuān)利名稱(chēng)：一種防治壓砂瓜枯萎病的木霉顆粒劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于農(nóng)藥生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種壓砂瓜木霉顆粒劑。
背景技術(shù)：
壓砂瓜被稱(chēng)為“石頭縫里長(zhǎng)出的西甜瓜”，是寧夏中部干旱帶上的同心、海原、中衛(wèi) 環(huán)香山地區(qū)干旱帶片上的農(nóng)民在沙礫淤積豐富的區(qū)域，或?qū)⒋罅克樯呈采w在山地、黃土 地表層，利用砂礫鋪壓對(duì)地表所具有的節(jié)水、增溫、保墑效果種植西瓜和甜瓜的一種特色種 瓜模式。目前，隨著壓砂瓜的連作，枯萎病發(fā)生非常嚴(yán)重，通常的防治方法是藥劑灌根，然而 壓砂瓜種植區(qū)為中部干旱帶，水資源十分匱乏，加之多次灌根耗費(fèi)大量人力，對(duì)有效防治壓 砂瓜枯萎病造成很大困難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺限，提供一種有效根治壓砂瓜枯萎病 的木霉顆粒劑。本發(fā)明是通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
一種防治壓砂瓜枯萎病的木霉顆粒劑，其特征在于該顆粒劑是由哈茨木霉固體發(fā)酵物 與鋸末按照1 1.5 :1的重量比混合配置而成，其中哈茨木霉固體發(fā)酵物的孢子含量為 108 101Qcfu / g,粒度在40 60目，含水量小于5 8% ；
上述哈茨木霉固體發(fā)酵物是哈茨木霉經(jīng)活化、液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)和固體培養(yǎng)基發(fā)酵 而成；
上述活化是指將哈茨木霉接入PDA培養(yǎng)基中，28°C活化5 7天，所述PDA培養(yǎng)基為去 皮馬鈴薯200g,葡萄糖10 20g,瓊脂17 20g和蒸餾水lOOOmL ；
上述液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)是指用接種環(huán)將活化的哈茨木霉刮下，加入少許滅菌水打 化，接入250 mL三角瓶中，裝PDA液體培養(yǎng)基到150 mL后密封，150 r / min振蕩培養(yǎng)5 天；
上述固體培養(yǎng)基質(zhì)發(fā)酵是指將擴(kuò)大培養(yǎng)后的哈茨木霉種子液噴灑到無(wú)菌的固體基質(zhì) 上，28°C >150 r / min振蕩，半開(kāi)放式發(fā)酵7天，所述固體基質(zhì)為麩皮或大麥穎殼；
上述鋸末先滅菌，然后按鋸末質(zhì)量的2%稱(chēng)取葡萄糖，在少量水中溶化后噴灑到鋸末 上，烘干到水分含量低于5%，粉碎并過(guò)40 60目網(wǎng)篩。P^^tK (Tri-choderma harzizrum)嵐年知蔑 if 毒 MiiTrickoderma spp \ 是—— 種生防微生物，據(jù)不完全資料統(tǒng)計(jì)，它至少對(duì)18個(gè)屬29種病原真菌在體外或體內(nèi)表現(xiàn) 有拮抗作用。它通過(guò)產(chǎn)生抗菌素、重寄生作用、溶菌作用、競(jìng)爭(zhēng)作用等，可有效地抑制灰霉 病、枯萎病以及褐斑病的發(fā)生發(fā)展。在拮抗過(guò)程中哈茨木霉產(chǎn)生的一系列細(xì)胞壁降解酶，如 葡聚糖酶、幾丁質(zhì)酶、纖維素酶和蛋白酶等起著重要的作用。在不同的哈茨木霉-原真菌作用體系中這些機(jī)制所起的作用有差異。哈茨木霉對(duì) 尖鐮孢拮抗作用以競(jìng)爭(zhēng)作用為主，對(duì)立枯絲核菌的抑制機(jī)理生抗生素六戊烷基吡喃和戊烯
3基吡喃，對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌、楊樹(shù)爛皮病菌、楊樹(shù)水皰潰瘍病菌和貝倫格葡萄座腔菌梨生專(zhuān)化 型等病原真菌的拮抗機(jī)制主要是重寄生作用，對(duì)辣椒疫霉的拮抗機(jī)制主要是直接向外分泌 水解酶類(lèi)分解疫霉的細(xì)胞壁和細(xì)胞質(zhì)(溶菌作用)。本發(fā)明將上述哈茨木霉作為根治壓砂瓜枯萎病的有效成分，由于哈茨木霉對(duì)壓砂 瓜枯萎病菌具有拮抗作用，因此對(duì)壓砂瓜枯萎病有較好防效，同時(shí)可以提升壓砂瓜根際微 生物群落利用碳源的生理活性。本發(fā)明壓砂瓜專(zhuān)用哈茨木霉顆粒劑使用簡(jiǎn)便，播種時(shí)一次 施藥，且施藥時(shí)不需要水，就可以解決了以上防治壓砂瓜枯萎病的瓶頸問(wèn)題，從而攻克了當(dāng) 前壓砂瓜枯萎病防治措施難于實(shí)施的困難。下面為本發(fā)明防治壓砂瓜枯萎病的哈茨木霉顆粒劑的藥效試驗(yàn)
試驗(yàn)地設(shè)在中衛(wèi)市香山鄉(xiāng)紅圈子村，15年壓砂地，為壓砂瓜枯萎病高發(fā)田，西瓜品種金 城5號(hào)，試驗(yàn)地管理嚴(yán)格，水肥條件優(yōu)良。試驗(yàn)結(jié)果播種時(shí)施藥，壓砂瓜枯萎病發(fā)病定型后(坐果期)調(diào)查，防治壓砂瓜枯 萎病的哈茨木霉顆粒劑的防效為55%?；瘜W(xué)對(duì)照藥劑95%惡霉靈的防效為72. 24% ；分別 在1-2葉期、2 - 4葉期、團(tuán)棵期、伸蔓期和坐果期取壓砂瓜根際土壤，測(cè)定壓砂瓜根際枯萎 病菌數(shù)量，防治壓砂瓜枯萎病的哈茨木霉顆粒劑的抑菌率分別為52. 57%,60. 13%,58. 60%、 50. 66%和59. 06%?；瘜W(xué)對(duì)照藥劑95%惡霉靈抑菌率分別為79. 91%,81. 01%,79. 59%,77. 09% 和82.55%;通過(guò)財(cái)01呢-EC0分析壓砂瓜根際土壤微生物群落功能多樣性，防治壓砂瓜 枯萎病的哈茨木霉顆粒劑處理西瓜根際微生物群落利用碳源的生理活性明顯高于清水對(duì) 照及化學(xué)對(duì)照藥劑95%惡霉靈。試驗(yàn)表明，防治壓砂瓜枯萎病的哈茨木霉顆粒劑對(duì)西瓜枯萎病具有較好效果，不 僅對(duì)枯萎病菌具有明顯的抑制效果，而且大大提升了西瓜根際微生物群落利用碳源的生理 活性。以上試驗(yàn)證明本發(fā)明對(duì)壓砂瓜枯萎病具有很好的防治效果，可作為專(zhuān)用生防制 劑，一般情況下，3g/株使用對(duì)壓砂瓜枯萎病具有很好的防治效果。同時(shí)也可用于其他中藥 材、蔬菜、農(nóng)作物上枯萎病的防治。
具體實(shí)施例方式1、菌種的活化
將哈茨木霉接入PDA培養(yǎng)基中，28°C活化5 7天。PDA培養(yǎng)基去皮馬鈴薯200g，葡 萄糖10-20g，瓊脂17-20g，蒸餾水1000mL。2、液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)
用接種環(huán)將活化的哈茨木霉刮下，加入少許滅菌水中打化，接入250 mL三角瓶中，裝 PDA液體培養(yǎng)基到150 mL后密封，150 r / min振蕩培養(yǎng)5d。3、固體培養(yǎng)基質(zhì)發(fā)酵
將菌哈茨木霉種子液噴灑到無(wú)菌的固體基質(zhì)(麥麩或者大麥穎殼)上，28°C、150 r / min振蕩，半開(kāi)放式發(fā)酵7天，在40°C下烘干到水分含量低于5 8%，粉碎后過(guò)40 60目 網(wǎng)篩，經(jīng)測(cè)，孢子含量為108 1010cfU / g。4、顆粒劑的制作
將鋸末滅菌，按鋸末質(zhì)量的2%稱(chēng)取葡萄糖，在少量水中溶化后噴灑到鋸末上，烘干到水分含量低于5 8%，粉碎并過(guò)40 60目網(wǎng)篩。將哈茨木霉固體發(fā)酵物和鋸末按質(zhì)量比 1 1. 5 :1混合均勻即可。
權(quán)利要求
一種防治壓砂瓜枯萎病的木霉顆粒劑，其特征在于該顆粒劑是由哈茨木霉固體發(fā)酵物與鋸末按照1～1.51的重量比混合配置而成，其中哈茨木霉固體發(fā)酵物的孢子含量為108～1010cfu／g，粒度在40～60目，含水量小于5～8%。
2.按照權(quán)利要求1所述的防治壓砂瓜枯萎病的哈茨木霉顆粒劑，其特征是上述哈茨 木霉固體發(fā)酵物是哈茨木霉經(jīng)活化、液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)和固體培養(yǎng)基發(fā)酵而成。
3.按照權(quán)利要求2所述的防治壓砂瓜枯萎病的哈茨木霉顆粒劑，其特征是上述活化 是指將哈茨木霉接入PDA培養(yǎng)基中，28°C活化5 7天，所述PDA培養(yǎng)基為去皮馬鈴薯200g， 葡萄糖10 20g,瓊脂17 20g和蒸餾水1000mL。
4.按照權(quán)利要求2所述的防治壓砂瓜枯萎病的哈茨木霉顆粒劑，其特征是上述液體 培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)是指用接種環(huán)將活化的哈茨木霉刮下，加入少許滅菌水打化，接入250 mL 三角瓶中，裝PDA液體培養(yǎng)基到150 mL后密封，150 r / min振蕩培養(yǎng)5天。
5.按照權(quán)利要求2所述的防治壓砂瓜枯萎病的哈茨木霉顆粒劑，其特征是上述固體 培養(yǎng)基質(zhì)發(fā)酵是指將擴(kuò)大培養(yǎng)后的哈茨木霉種子液噴灑到無(wú)菌的固體基質(zhì)上，28°C、150 r / min振蕩，半開(kāi)放式發(fā)酵7天。
6.按照權(quán)利要求5所述的防治壓砂瓜枯萎病的哈茨木霉顆粒劑，其特征是上述固體 基質(zhì)為麩皮或大麥穎殼。
7.按照權(quán)利要求1所述的防治壓砂瓜枯萎病的哈茨木霉顆粒劑，其特征是上述鋸末 先滅菌，然后按鋸末質(zhì)量的2%稱(chēng)取葡萄糖，在少量水中溶化后噴灑到鋸末上，烘干到水分 含量低于5%，粉碎并過(guò)4(T60目網(wǎng)篩。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種防治壓砂瓜枯萎病的木霉顆粒劑，該顆粒劑是由哈茨木霉固體發(fā)酵物與鋸末按照1～1.51的重量比混合配置而成，其中哈茨木霉固體發(fā)酵物的孢子含量為108～1010cfu／g，粒度40~60目，含水量小于5～8%。本發(fā)明哈茨木霉作為根治壓砂瓜枯萎病的有效成分，由于哈茨木霉對(duì)壓砂瓜枯萎病菌具有拮抗作用，因此對(duì)壓砂瓜枯萎病有較好防效，同時(shí)可以提升壓砂瓜根際微生物群落利用碳源的生理活性。本發(fā)明壓砂瓜專(zhuān)用哈茨木霉顆粒劑使用簡(jiǎn)便，播種時(shí)一次施藥，且施藥時(shí)不需要水，就可以解決了以上防治壓砂瓜枯萎病的瓶頸問(wèn)題，從而攻克了當(dāng)前壓砂瓜枯萎病防治措施難于實(shí)施的困難。
文檔編號(hào)A01N63/04GK101897346SQ201010245590
公開(kāi)日2010年12月1日 申請(qǐng)日期2010年8月5日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月5日
發(fā)明者南寧麗, 張怡, 張蓉, 朱猛蒙, 王芳, 陳宏灝, 馬建華, 高立原 申請(qǐng)人:寧夏農(nóng)林科學(xué)院