專利名稱：櫻桃砧木組織培養(yǎng)基及培養(yǎng)基的改進方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及通過組織培養(yǎng)技術(shù)促進植物再生的方法，更 具體的說是櫻桃砧木組織培養(yǎng)基及培養(yǎng)基的改進方法。
背景技術(shù)：
櫻桃屬于薔薇科落葉喬木果樹，成熟時顏色鮮紅，玲瓏剔透，味美形嬌，樹姿優(yōu)美， 富含糖和鐵質(zhì)，營養(yǎng)豐富，是重要的果樹和園林綠化樹，又具有很高的食用和藥用價值，近 年來在我國廣泛栽培，發(fā)展?jié)摿薮?。目前櫻桃的生產(chǎn)中主要采用扦插、壓條和分根蘗繁殖，不但繁殖系數(shù)低，而且造成 品種退化，病蟲害傳播蔓延。采用組織培養(yǎng)技術(shù)可以快速繁殖作物新品種，加快新品種的推 廣速度，同時植物組織培養(yǎng)培育的組培苗，遺傳基因高度一致，生產(chǎn)穩(wěn)定，苗木品質(zhì)性能好， 能為產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)提供優(yōu)質(zhì)的苗木。我國植物組織培養(yǎng)的研究從20世紀50年代開始，至今 已有六七十年的歷史，組織培養(yǎng)的發(fā)展進展快速，已有豐碩的研究成果，尤其近10多年來 全國各地許多農(nóng)業(yè)科研院所和高校都開展了植物組織培養(yǎng)研究工作，其發(fā)展更為迅速，研 究范圍涉及農(nóng)作物、觀賞植物、園藝作物、經(jīng)濟林木等上千種植物品種，植物莖尖培養(yǎng)脫病 毒技術(shù)以及離體快繁技術(shù)也日趨成熟。但我國植物組織培養(yǎng)中仍然存在很多問題，其中經(jīng) 常出現(xiàn)的主要致命問題如組培苗的污染、褐化、玻璃化以及繁殖系數(shù)較低等，很多技術(shù)環(huán)節(jié) 至今未能達到理想效果導致不能進行規(guī)?；a(chǎn)，阻礙了我國組培脫毒苗木的規(guī)?；a(chǎn) 進程。植物的組織培養(yǎng)是否成功，在很大程度上取決于培養(yǎng)基選用是否合適。培養(yǎng)基好 比土壤，是組織培養(yǎng)中離體材料賴以生存和發(fā)展的基地，而選擇培養(yǎng)基更應該綜合考慮植 物組織不同材料以及不同生長階段，根據(jù)植物生長需要配置最適合的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的產(chǎn) 生最早是Sacks (1680)和Knop (1681)，他們根據(jù)植物從土中主要是吸收無機鹽營養(yǎng)，設(shè)計 出了由無機鹽組成的Sacks和Knop溶液，至今仍在作為基本的無機鹽培養(yǎng)基得到廣泛應 用。40年代White培養(yǎng)基用得較多。而到60和70年代則大多采用MS等高濃度培養(yǎng)基，可 以保證培養(yǎng)材料對營養(yǎng)的需要，并能生長快、分化快。目前，我國主要引進歐美櫻桃品種及砧木，主要采用微莖尖技術(shù)、組織培養(yǎng)技術(shù)繁 育具有生長優(yōu)勢的良種果樹脫毒種苗，一般采用MS基本培養(yǎng)基，與其它培養(yǎng)基的基本成分 相比，MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量高。MS基本培養(yǎng)基較高的無機鹽濃度，對保證組 織生長所需的礦質(zhì)營養(yǎng)和加速愈傷組織的生長十分有利。由于配方中的離子濃度高，在配 制、貯存、消毒等過程中，即使有些成分略有出入，也不致影響離子間的平衡。MS固體培養(yǎng)基 可用來誘導愈傷組織，或用于胚、莖段、莖尖及花藥培養(yǎng)，它的液體培養(yǎng)基用于細胞懸浮培 養(yǎng)時能獲得明顯成功。這種培養(yǎng)基中的無機養(yǎng)分的數(shù)量和比例比較合適，足以滿足植物細 胞在營養(yǎng)上和生理上的需要。吉塞拉甜櫻桃矮化砧木是目前在我國非常適用的櫻桃砧木，其中吉塞拉5、6號是 經(jīng)實踐證明適用于規(guī)?；a(chǎn)的品種。吉塞拉5、6號甜櫻桃矮化砧木由德國育成，為酸櫻桃(Prunus cerasus)與灰毛葉櫻桃(P. canesceus)進行種間雜交培育的三倍體雜種砧木， 在西歐、北美應用廣泛。該種砧木于1998年由美國引入我國，經(jīng)過7年的區(qū)域試驗和觀察， 發(fā)現(xiàn)吉塞拉5、6號與大多數(shù)品種親和良好，具有明顯的矮化、豐產(chǎn)、早實性強、抗病、抗鹽、 耐澇、土壤適應范圍廣、固地性能好、抗寒、產(chǎn)量高等優(yōu)點。由于其為無性系砧木，不能采用 種子繁殖。采用常規(guī)壓條及硬枝扦插生根困難，當前，在我國主要采用的是組織培養(yǎng)方法繁 育，但吉塞拉甜櫻桃矮化砧木在組織培養(yǎng)過程中還存在褐變、玻璃化等致命問題，一再影響 生產(chǎn)產(chǎn)量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點與不足，提供一種櫻桃砧木組織培養(yǎng)基我 們通過一系列實驗及實踐操作，對現(xiàn)用櫻桃培養(yǎng)基進行了改進，取得了很好的效果。本發(fā)明的另一個目的在于一種櫻桃砧木培養(yǎng)基的改進方法。為實現(xiàn)上述目的本發(fā) 明公開如下的技術(shù)方案一種用于繁殖櫻桃植株的組織培養(yǎng)基，其特征在于它是由初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、壯 苗培養(yǎng)、誘導生根培養(yǎng)四部分培養(yǎng)基組成，其原料組成如下優(yōu)化MS基礎(chǔ)母液2-60ML/L ；蔗糖25_45g/L;瓊脂6. 5-7. Og/L ；6-芐氨基嘌呤 0. 4-0. 6mg/L ；吲哚丁酸IBA 0. 1-0. 3mg/L ；Vc 0. 061-0. 067mg/L ；吲哚乙酸IAA 0. 05-1. OOmg/ ；活性碳1000_1200mg/L ；其中優(yōu)化MS基礎(chǔ)母液是由下述單位g/L的原料組成
權(quán)利要求
1. 一種櫻桃砧木組織培養(yǎng)基，其特征在于它是由初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、誘導 生根培養(yǎng)四部分的培養(yǎng)基組成，其原料組成如下 優(yōu)化MS基礎(chǔ)母液2-60ML/L ； 蔗糖25-45g/L ；瓊脂6. 5-7. Og/L ；6-芐氨基嘌呤0.4-0.6mg/L; 吲哚丁酸 IBA IBA 0. 1-0. 3mg/L ； Vc0.061-0. 067mg/L ；吲哚乙酸 IAA 0. 05-1. 00mg/L ； 活性碳1000-1200mg/L ；其中優(yōu)化MS基礎(chǔ)母液是由下述單位g/L的原料組成
2.權(quán)利要求1所述的組織培養(yǎng)基，其中初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、誘導生根培養(yǎng) 基的成分如下(1)初代培養(yǎng)組成優(yōu)化MS基礎(chǔ)母液2-60ML/L+40g/L蔗糖+6.5g/L瓊脂+0. 6mg/ L6-BA+0. 3mg/L IBA+0. 067mg/LVc；(2)繼代培養(yǎng)組成優(yōu)化MS基礎(chǔ)母液2-60ML/L+42g/L蔗糖+6.8g/L瓊脂+0. 5mg/ L6-BA+0. lmg/L IBA ；(3)壯苗培養(yǎng)組成優(yōu)化MS基礎(chǔ)母液2-60ML/L+40g/L蔗糖+6.5g/L瓊脂+0. 5mg/L6-BA+0. 2mg/L IBA ；(4)誘導生根培養(yǎng)組成優(yōu)化MS基礎(chǔ)母液2-25ML/L+25g/L蔗糖+6. 5g/L瓊脂+1. Omg/ L IAA+0. 2mg/L IBA+ 活性碳 1000mg/L。
3.權(quán)利要求1所述的組織培養(yǎng)基，其中的櫻桃植株指的是吉塞拉甜櫻桃矮化砧木芽苗。
4.權(quán)利要求3所述的組織培養(yǎng)基，其中的櫻桃植株指的是吉塞拉甜櫻桃矮化砧木5 號或6號芽苗。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種櫻桃砧木組織培養(yǎng)基，它是由優(yōu)化MS基礎(chǔ)母液2-60ml/L；蔗糖2545g/L；瓊脂6.5-7.0g/L；6-芐氨基嘌呤0.4-0.6mg/L；吲哚丁酸0.1-0.3mg/L；VC 0.061-0.067mg/L；吲哚乙酸0.05-1.00mg/L；活性炭1000-1200mg/L組成，該培養(yǎng)基特別適合于櫻桃矮化砧木的芽生長培養(yǎng)和壯苗培養(yǎng)以及誘導生根培養(yǎng)，增殖和生根效果好，使櫻桃矮化砧木生根率達95-98％，而且根系粗壯整齊，同時組培苗生長健壯，葉色濃綠，有效地節(jié)約了人力和物力，移栽成活率可達95％，為大規(guī)模生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。本發(fā)明的組培方法具有簡便易行、簡化了程序、提高了工效、降低了成本等優(yōu)點，解決了組織培養(yǎng)過程中存在褐變、玻璃化等問題，可用于吉塞拉甜櫻桃矮化砧木規(guī)?；a(chǎn)的快速繁殖。
文檔編號A01H4/00GK102090328SQ20101052869
公開日2011年6月15日 申請日期2010年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月3日
發(fā)明者楊揚, 江文, 羅飛, 肖寶祥 申請人:天津櫻桃谷農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司