專利名稱：HRN/gpt delta轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及動物模型的構(gòu)建方法，具體而言，涉及一種肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型甜 delta (.mWgpt delta)轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建方法。
背景技術(shù)：
機(jī)體代謝過程對外源化合物既可解毒也可增毒，且與化合物對機(jī)體的致癌作用密切相關(guān)。肝臟細(xì)胞色素P450酶(縮寫為CYP)在機(jī)體對外源性化合物的代謝過程中起到重要作用，但可用于揭示其致癌作用的研究工具非常有限。目前，研究肝臟P450酶對外源性化合物的代謝主要集中在體外實驗上，包括肝臟微粒體、原代肝細(xì)胞、CYI^s各亞型高表達(dá)細(xì)胞株和重組酶的應(yīng)用。盡管這些體外方法具有很大應(yīng)用價值，但是，由于外源性化合物的攝入途徑不同、組織中有機(jī)陰(陽)離子轉(zhuǎn)運體的存在、腎臟清除作用和肝外CYI^s作用等復(fù)雜因素的存在，使得上述體外實驗仍然難以精確預(yù)測外源性化合物在體內(nèi)的實際代謝途徑(Friedberg T, Pritchard MP, Bandera Μ, Hanlon SP, Yao D, McLaughlin LA, Ding S, Burchell B, Wolf CR. Merits and limitations of recombinant models for the study of human P450-mediated drug metabolism and toxicity: an intralaboratory comparison. Drug Metab Rev. 1999. 31(2) :523-44.)。在體內(nèi)代謝研究中，目前已有多個P450酶亞型敲除小鼠模型，這些模型已被廣泛用來研究特異性P450酶亞型在外源性化合物的代謝和毒性中的作用。然而， CYP通常具有多種亞型，并且各亞型功能類似，底物存在交叉，使得單一亞型的基因敲除動物模型難以準(zhǔn)確評價P450酶對外源性化合物毒性的影響。因此，使所有CYPs都失去功能的模型將是一個非常有用的工具。NADPH-細(xì)胞色素P450還原酶(CPR/P0R)為所有微粒體 P450酶的氧化還原搭檔，它提供P450酶氧化還原反應(yīng)所需的第一個電子，基于此原理，Jim Gu等人開發(fā)了一個肝臟特異性P450還原酶-Cpr基因敲除小鼠模型(H印atic Reductase Null, HRN,以下簡稱為肝臟特異性CPR KO小鼠模型)，該基因表達(dá)的缺失將抑制所有肝臟 P450 酶的活性(Wu L, Gu J, Weng Y, Kluetzman K, Swiatek P, Behr M, Zhang QY, Zhuo X，Xie Q, Ding X. Genesis. 2003 Aug; 36 177-81.)。該模型利用 Cre/LoxP 系統(tǒng)通過條件敲除(conditional knock)獲得，小鼠在成熟過程中肝臟②r基因被逐漸敲除(出生 2個月以后)，最終使得肝臟P450酶活性喪失，而其他組織卻不受影響。絕大多數(shù)致癌物具有遺傳毒性，即損傷遺傳物質(zhì)(DNA或染色體)，引起基因突變進(jìn)而致癌。遺傳毒性的評價是預(yù)測致癌性的有效方法，其檢測的對象包括DNA損傷及DNA損傷引起的基因突變、染色體損傷、重組和數(shù)目的改變等。評價通常采用標(biāo)準(zhǔn)組合試驗進(jìn)行， 如評價DNA損傷的彗星試驗、評價染色體損傷的微核試驗和染色體畸變試驗、評價基因突變的Ames試驗、哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗和轉(zhuǎn)基因動物突變檢測試驗等。與體外實驗相比，體內(nèi)實驗方法假陽性發(fā)生率較低，并且具有考慮到與人體應(yīng)用相關(guān)的吸收、代謝、分布和排泄的優(yōu)點，因此體內(nèi)實驗的應(yīng)用日益受到重視。現(xiàn)有的體內(nèi)試驗方法較少，經(jīng)典的體內(nèi)微核試驗可預(yù)測致癌性，但是該方法只評價骨髓而不能預(yù)測毒性靶器官。轉(zhuǎn)基因動物是一個非常重要的研究工具，可檢測任何所需器官內(nèi)的基因突變，還可以進(jìn)行突變的機(jī)制分析。歷來的轉(zhuǎn)基因動物突變檢測模型主要有Muta Mouse和Big Blue Mouse/Rat等(J A Gossen, W J de Leeuw, C H Tan, E C Zwarthoff, F Berends, P H Lohman, D L Knook, and J Vijg. Efficient rescue of integrated shuttle vectors from transgenic mice: a model for studying mutations in vivo, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1989，86:7971-7975. Kohler Sff, Provost GS, Kretz PL, Fieck A, Sorge JA, Short JM. The use of transgenic mice for short-term, in vivo mutagenicity testing. Genet Anal Tech App 1. 1990 Dec; 7 (8) :212-8. )0但是上述模型具有的共同缺陷是只能檢測點突變和DNA小片段的缺失突變，而大片段的缺失突變就難以被檢測出來。1996 年，Nohmi等人建立了新的轉(zhuǎn)基因動物模型aoi delta轉(zhuǎn)基因小鼠(Nohmi T, Katoh M, Suzuki H, Matsui Μ, Yamada Μ, Watanabe Μ, Suzuki Μ, Horiya N, Ueda O, Shibuya Τ, Ikeda H, Sofuni Τ. A new transgenic mouse mutagenesis test system using Spi-and 6-thioguanine selections. Environ Mol Mutagen. 1996; 28 (4) : 465-70.),該模型的特點是在小鼠的不同器官不僅可以檢測到包括點突變、移碼突變、堿基置換等堿基的突變，還可以檢測DNA片段大范圍的缺失。此外，甜 基因的長度為456 bp，有利于進(jìn)一步通過測序?qū)ν蛔冞M(jìn)行機(jī)制分析。確定肝臟細(xì)胞色素P450與體內(nèi)致突變檢測之間的關(guān)系對化合物的遺傳易感性預(yù)測和預(yù)防有著重要的意義。目前具有的這兩種小鼠模型中，肝臟特異性CPR KO小鼠模型不能進(jìn)行體內(nèi)突變檢測，甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠雖可做體內(nèi)突變檢測，但無法考察肝臟細(xì)胞色素P450在其中起的作用。因此，只有建立同時具備兩種特性的動物模型才能解決這一問題。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足，發(fā)明人致力于研究同時具備兩種特性的動物模型。由此， 本發(fā)明把正在應(yīng)用的兩種模型動物甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠與具有相同C57BL/6J遺傳背景的肝臟特異性CPR KO小鼠進(jìn)行了雜交，通過檢測基因型，選擇所需子代動物進(jìn)行反復(fù)交配， 最終得到了肝臟特異性CPR缺陷型的甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠新模型，即為肝臟Ρ450酶功能缺陷型甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠(^patic Reductase Null gpt delta轉(zhuǎn)基因小鼠，簡稱為 \m/gpt delta轉(zhuǎn)基因小鼠)。并且，在反復(fù)試驗中本發(fā)明還克服了雜交不成功，子代不能存活或者基因型與預(yù)期不符，以及使雜交后小鼠的各個基因能夠穩(wěn)定遺傳的技術(shù)難題。因此，本發(fā)明的一個目的是提供一種肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型甜 delta 轉(zhuǎn)基因小鼠模型。本發(fā)明的另一個目的是提供一種肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明的再一個目的是提供該模型在研究肝臟細(xì)胞P450酶與化合物致突變之間關(guān)系中的應(yīng)用。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型甜 delta 轉(zhuǎn)基因小鼠模型。根據(jù)本發(fā)明的另一個目的，本發(fā)明提供了一種構(gòu)建上述模型的方法，該方法包括以下步驟
(1)分別選用肝臟特異性CPR KO小鼠和甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行雜交，得到Fl代 cpr1卿+Cre+gpt+和C+hCre'-gpt+基因型小鼠。由于兩種小鼠遺傳背景一致，均是 C57BL/6J品系小鼠，所以子代小鼠不存在遺傳背景差異問題。(2)將Fl代中的印基因型的雌鼠和雄鼠再進(jìn)行雜交，得到F2代
cprloxp+/+Cre+/-gpt+/+ 和 cprloxp+l+Crehgpt+l+ 基因型小鼠。(3)將 F2 代中的 CPrloxp+'+Cre+'-gPt+,+ 基因型雄鼠與 cpr—Vre+gpt+,+ 基因型雌鼠進(jìn)行交配，產(chǎn)生更多F3代的cpi^+Cre^—gpt^和C+Cre+gpt+基因型小鼠。(4)將 F3 代中的 cprloxp+l+Cre+hgpt+,+ 基因型雄鼠與 CPrloxp+l+Cre+gPt+,+ 基因型雌鼠再交配后即可得到正常繁育的肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠模型。上述步驟均需對所獲得的小鼠利用特異基因擴(kuò)增引物進(jìn)行基因型鑒定。根據(jù)本發(fā)明的另一個目的，本發(fā)明提供了上述小鼠模型在研究肝臟細(xì)胞P450酶與化合物致突變之間關(guān)系中的應(yīng)用。本發(fā)明的肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠模型與以往技術(shù)相比的有益效果如下
首先，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠模型是通過將肝臟特異性CPR KO小鼠和甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠經(jīng)一系列雜交和基因型篩選后得到的，其兼具兩種親代模型的特征，是研究肝臟P450酶與化合物致突變之間關(guān)系不可或缺的技術(shù)手段。其次，本發(fā)明的新模型還具備兩種親代模型的全部應(yīng)用
a.具有肝臟特異性CPR KO小鼠方面的應(yīng)用化合物是否經(jīng)過肝臟CYP的代謝及作用； 肝外其他組織臟器中CYP在化合物代謝中的作用；肝臟微粒體和線粒體中CYP在內(nèi)源性和外源性化合物代謝上的迥異；肝臟HO酶功能改變后相關(guān)的代謝變化；還可用于研究能夠在肝內(nèi)CYP代謝，但在肝外組織臟器中產(chǎn)生毒性的化合物；用于研究肝臟CYP代謝后肝毒性增強(qiáng)的化合物。b.具有甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠方面的應(yīng)用由于XEGlO DNA存在于小鼠的基因組中，因此可以對小鼠全身的組織臟器做基因突變檢測和分析，可檢測點突變和缺失突變； 以及化合物對不同組織器官的致突變作用的比較研究。再次，這種新模型不僅具有肝臟細(xì)胞色素P450還原酶敲除小鼠和甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠一切特征，而且還可以進(jìn)行化合物代謝與致突變之間關(guān)系的研究，特別適合于那些能夠被肝CYP代謝活化肝外組織器官形成突變的化合物的研究。另外，在新模型構(gòu)建的過程中，本發(fā)明還克服了雜交不成功，子代不能存活或者基因型與預(yù)期不符的難題，這是因為肝臟特異性CPR KO小鼠和甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠均是 C57 BL/6J品系小鼠，遺傳背景較為一致，所以雜交成功幾率較大；肝臟特異性CPR KO小鼠和甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠繁殖力正常，雜交后形成的新基因型小鼠中印r基因敲除機(jī)制與 λ EGlO序列之間無交互作用，因此子代小鼠不僅可以存活而且繁殖力正常。而且，由于肝臟特異性CPR KO小鼠和甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠雜交之后可能會出現(xiàn)許多不同的基因型小鼠， 本發(fā)明所采用的基因型篩選過程可以有效解決這一難題。進(jìn)一步地，發(fā)明人在基因、ere基因和甜 基因可以穩(wěn)定遺傳的基礎(chǔ)上，雜交小鼠得到Cprloxp基因和甜 基因純合子小鼠之后再進(jìn)行正常繁殖，這樣就保證新模型小鼠中的印基因、ere基因和甜 基因在每一代中穩(wěn)定遺傳。


圖1為肝臟細(xì)胞色素Ρ450酶功能缺陷型甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠模型構(gòu)建的流程圖。圖2為Fl代小鼠基因型的PCR鑒定結(jié)果，A為有ere基因的小鼠，其中，印基因雜合子擴(kuò)出500 bp和600 bp兩條帶，ere基因擴(kuò)出300 bp—條帶，甜 基因雜合子擴(kuò)出 360 bp (F-Rl)和967 bp (F-R2)兩條帶；B中為無ere基因小鼠，其中，cPrloxp基因雜合子，擴(kuò)出500 bp和600 bp兩條帶，甜 基因雜合子擴(kuò)出360 bp (F-Rl)和967 bp (F-R2) 兩條帶。圖3為F2代小鼠基因型的PCR鑒定結(jié)果，A為有ere基因的小鼠，其中，基因純合子擴(kuò)出600 bp 一條帶，ere基因擴(kuò)出300 bp 一條帶，紹7 基因純合子擴(kuò)出967 bp (F-R2) —條帶；B為無ere基因小鼠，Cprloxp基因純合子擴(kuò)出600 bp 一條帶，甜 基因純合子擴(kuò)出967 bp (F-R2) 一條帶。圖4為根據(jù)本發(fā)明一個實施方式中F2代的肝臟特異性CPR缺陷型的甜 delta 轉(zhuǎn)基因小鼠中主要臟器鑒定結(jié)果。A為印基因和ere基因，B為甜 基因，其中967 bp 為基因型鑒定中應(yīng)用的引物F-R2的PCR結(jié)果，而600 bp是引物甜 -F和甜 -R鑒定結(jié)果； L 肝臟；K,腎臟；St,胃；B，膀胱；Sp，脾臟。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，以下實施方式只以舉例的方式描述本發(fā)明。很明顯，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可在本發(fā)明的范圍和實質(zhì)內(nèi)，對本發(fā)明進(jìn)行各種變通和修改。需要了解的是，本發(fā)明意欲涵蓋在所附權(quán)利要求書中包括的變通和修改。本發(fā)明人經(jīng)過深入而廣泛的研究，構(gòu)建了一種遺傳穩(wěn)定、表型穩(wěn)定的肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠模型，具體為分別選用親代雄性肝臟特異性CPR KO小鼠和親代雌性甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行雜交(F0代)。將Fl代中的 cprloxp+hCre'-gp t+h基因型的雌鼠和雄鼠再進(jìn)行雜交得到F2代cpr—W-gp t+,+和 c/Tr^^+frZ甜基因型小鼠，即為本發(fā)明所需基因型的小鼠，此過程需要大量篩檢。然后，將F2代中的Cprloxp小Cre+gpt小雄鼠與Cr^雌鼠通過交配進(jìn)行擴(kuò)大繁殖，從而產(chǎn)生更多F3代的cpr—W-gpt小和cpr—Cre+gpt+基因型小鼠。將F3代的叩產(chǎn)沖&^的小雄鼠與甜雌鼠再交配后，對F4代子鼠進(jìn)行鑒定基因型，結(jié)果表明所得子鼠中三種基因均可穩(wěn)定遺傳，即說明自F3代起即可正常繁育。整個制作過程均需要利用特異基因擴(kuò)增引物進(jìn)行基因型鑒定。具體實施過程 1. FO代雜交
親代雄性肝臟特異性CPR KO小鼠和親代雌性甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行雜交，產(chǎn)生Fl 代。在Fl代子代小鼠出生后4周剪腳趾鑒定基因型。
提取基因組DNA:
將剪下的腳趾放入1. 5mL的Ep管中，加入0. 4mL含0. 4mg/mL蛋白酶K的DNA消化緩沖液，然后放入水浴鍋內(nèi)，55°C過夜消化(消化時間在1 以上)。次日，待小鼠腳趾消化完全后，向每個Ep管中加入0.4 mL酚氯仿(pH 8.0)，上下顛倒混合50-60次，15，OOOg 4°C離心20分鐘。取300 μ L上清置入另1個新的1.5 mL Ep管中，向其中加入750 μ L冰無水乙醇，上下輕輕顛倒混合5-10次，12，000 rpm離心5分鐘。棄上清，加入冰75%乙醇200 μ L 洗2次。將含有基因組DNA的Ep管倒扣在吸水紙上30分鐘，干燥DNA。向Ep管中加入 80 100 μ L TE緩沖液，室溫放置2小時，使DNA充分溶解。檢測基因型
用提取出來的基因組做PCR，檢測Fl代小鼠基因型。引物序列和產(chǎn)物大小 OtP-基因引物
上游引物 1 (F) :5，-TACAATGGACCAGGCTCTGC-3， 下游引物 2 (R) :5，-AAGAGGGACAAAGAGCACC-3，
PCR 產(chǎn)物純合，600bp (含 Λ ρ)，一條帶；雜合 500bp (不含 Λ^ρ)和 600bp (/含 loxp) 各一條帶。Cre基因引物
上游引物 3 (F) :5’ -GGATTT CCGTCTCTGGTGTAGC-3’ 下游引物 4 (R) :5，-CATTGCCCCTGTTTCACTATCC-3， PCR產(chǎn)物300bp，一條帶。甜 基因引物
上游引物 5 (F) :5’ -GTTGTACTTCCAACCATGCCAAAG-3， 下游引物 6 (Rl) :5，-CAGAAATCATTCCAGGTCCTTGC-3， 下游引物 7 (R2) :5，-GTTCATCTGCTTTATGGGCAAGAG-3， 上游引物 8 (.gpt-V) :5，-GCGCAACCTATTTTCCCCTCGA-3， 下游引物 9 (.gpt-R) :5，-TGGAAACTATTGTAACCCGCCTG-3，
PCR產(chǎn)物純合子，967bp (引物F和引物Rl的PCR產(chǎn)物)，一條帶；雜合子為360bp (引物F和引物Rl的PCR產(chǎn)物)和967bp (引物F和引物R2的PCR產(chǎn)物)，兩條帶；野生型只有 360bp (引物F和引物Rl的PCR產(chǎn)物)一條帶。紹乂-F和甜 -R產(chǎn)物為600bp，主要鑒定甜 基因。程序設(shè)定
Cprloxp和Cre基因PCR程序設(shè)定94°C預(yù)變性3分鐘，94°C 30秒，64°C 30秒，72 °C 30 秒，共36個循環(huán)，然后72°C延伸7分鐘，4°C保存。甜 基因PCR程序設(shè)定94 V預(yù)變性4. 5分鐘，94 V 30秒，58 V 30秒，72 °C 1分鐘， 共30個循環(huán)，然后72°C延伸5分鐘，4°C保存。產(chǎn)物鑒定
PCR結(jié)束后取10 μ L PCR產(chǎn)物于1. 5%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行鑒定。擴(kuò)增結(jié)果見圖1所示，A示出了有ere基因小鼠的基因型，其中，第1泳道為100 bp DNA ladder Marker，第2 泳道為cprloxp基因雜合子，500 bp和600 bp，第3泳道為ere基因，300 bp，第4、5泳道為甜 基因雜合子360 bp (F-Rl)和967 bp (F-R2)。圖1中B示出了無ere基因(300 bp) 小鼠的基因型，其中，第1泳道為100 bp DNA ladder Marker，第2泳道為印Pmp基因雜合子，500 bp和600 bp，第4、5泳道為甜 基因雜合子360 bp (F-Rl)和967 bp (F-R2)。雜交后形成的Fl代基因型有兩種-.cpi^+Cre+gpt+和CPrloxp+hCrehgPt+h。代雜交
將Fl代雄性和雌性cpi^^-Ci^-gpt+小鼠交配，并對F2代子鼠按照上述方式鑒定基因型。測定結(jié)果表明F2代子鼠出現(xiàn)基因型較多，篩選并保留印產(chǎn)沖&‘ 時小和 cpr^Cre'-gpt^基因型小鼠。如圖2所示，A示出了有ere基因小鼠的基因型，其中，第1泳道為100 bp DNA ladder Marker，第2泳道為c/Tr^0基因純合子，600 bp，第3泳道為ere基因，300 bp，第4、 5泳道為甜 基因純合子，無360 bp (F-Rl)基因產(chǎn)物，只有967 bp (F-R2)。圖2中B示出了無ere基因(300 bp)小鼠的基因型，其中，第1泳道為100 bp DNA ladder Marker，第 2泳道為基因純合子，600 bp，第4、5泳道為甜 基因純合子，無360 bp (F-Rl)基因產(chǎn)物，只有967 bp (F-R2)。代擴(kuò)大繁殖
將F2代雄性Cprloxp小Cre+gpt小小鼠和雌性Cprlox沖Cre+gpt+h小鼠交配，并對F3代子鼠按照上述方式鑒定基因型。由于F2代子鼠中cpr1。神Cre+gp t+/+小鼠和 cpr^Cre'-gpt^小鼠所占比例較小，因此需要將兩種小鼠交配后擴(kuò)大繁殖。代正常繁殖
將F3代雄性cpi^+Cre^gpt^小鼠和雌性C+CJre+gpt小小鼠交配，并對F4代子鼠按照上述方式鑒定基因型。結(jié)果表明，自F3代起即可正常繁殖，三種基因均可穩(wěn)定遺傳。
權(quán)利要求
1.一種肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟分別選用肝臟特異性CPR KO小鼠和甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行雜交，得到Fl代 cprloxp+hCre+hgpt+h 和 cpr^+Cre+gpt+ 基因型小鼠；將Fl代中的cpi^^-a^-gpt+基因型的雌鼠和雄鼠再進(jìn)行雜交，得到F2代 cprloxp+/+Cre+/-gpt+/+ 和 cprloxp+l+Crehgpt+l+ 基因型小鼠；將F2代中的基因型雄鼠與Cr^基因型雌鼠進(jìn)行交配，產(chǎn)生更多F3代的cpr^+Cre+gpt+和cpr—^Cre+gpt小基因型小鼠；以及將F3代中的甜基因型雄鼠與甜基因型雌鼠再交配后即可得到能正常繁育的肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠模型。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述CPRKO小鼠和甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠具有相同C57BL/6J遺傳背景。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述各步驟進(jìn)一步包括對所獲得的小鼠利用特異基因擴(kuò)增引物進(jìn)行基因型鑒定。
4.一種如權(quán)利要求1所述的肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型甜 delta轉(zhuǎn)基因小鼠模型在研究肝臟細(xì)胞P450酶與化合物致突變之間關(guān)系中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種肝臟細(xì)胞色素P450酶功能缺陷型gptdelta轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明的提供的小鼠模型具有肝臟細(xì)胞色素P450還原酶敲除小鼠和gptdelta轉(zhuǎn)基因小鼠一切特征，而且還可以進(jìn)行化合物代謝與致突變之間關(guān)系的研究，特別適合于那些能夠被肝CYP代謝活化肝外組織器官形成突變的化合物的研究。
文檔編號A01K67/027GK102524177SQ201010607189
公開日2012年7月4日 申請日期2010年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月27日
發(fā)明者任進(jìn), 宮麗崑, 戚新明, 欒洋, 邢國振 申請人:中國科學(xué)院上海藥物研究所