專利名稱：一種快速高效構(gòu)建團(tuán)頭魴半同胞家系的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于魚類育種方法領(lǐng)域，具體涉及一種團(tuán)頭魴半同胞家系的構(gòu)建方法。
背景技術(shù)：
團(tuán)頭鮮(Megalobrama amblycephala Yih, 1955),又名武昌魚，隸屬于硬骨魚綱， 鯉形目，鯉科，魴屬，其自然分布僅局限于長(zhǎng)江中下游少數(shù)幾個(gè)湖泊中。團(tuán)頭魴是我國(guó)重要的草食性經(jīng)濟(jì)魚類之一，由于其食性廣、成本低、生長(zhǎng)快、成活率高、易捕撈，能在池塘中產(chǎn)卵繁殖，凡具有味美、頭小、含肉率高、體形好、規(guī)格適中等優(yōu)點(diǎn)，因而被作為優(yōu)良的草食性魚類品種在全國(guó)普遍推廣。近年來(lái)，團(tuán)頭魴成為市場(chǎng)暢銷品種，養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益較好。因而市場(chǎng)對(duì)團(tuán)頭魴優(yōu)良苗種的需求十分迫切，亟待規(guī)范團(tuán)頭魴的苗種繁育生產(chǎn)，加快團(tuán)頭魴的種質(zhì)資源保護(hù)和良種選育進(jìn)程。由于團(tuán)頭魴苗種生產(chǎn)中普遍存在近親繁殖的現(xiàn)象，導(dǎo)致種質(zhì)退化加劇。常規(guī)苗種的生長(zhǎng)速度較慢，不僅影響了團(tuán)頭魴的生長(zhǎng)性能，而且在一定程度上制約了團(tuán)頭魴在更大范圍的推廣。雖然我國(guó)已經(jīng)選育出生長(zhǎng)速度較快的團(tuán)頭魴新品種“浦江一號(hào)”，其選育方法采用傳統(tǒng)的群體選育法，其后代性狀不穩(wěn)定。目前國(guó)內(nèi)亟待挖掘和創(chuàng)新種質(zhì)資源，選育出生長(zhǎng)速度快、抗逆性好的團(tuán)頭魴優(yōu)良品種。目前國(guó)際上在水產(chǎn)動(dòng)物的選育越來(lái)越傾向運(yùn)用大規(guī)模家系選育技術(shù)，而運(yùn)用大規(guī)模家系選育，構(gòu)建半同胞家系是必不可少的，因?yàn)檫x育中很多遺傳參數(shù)都要通過(guò)半同胞家系進(jìn)行估計(jì)。有報(bào)道認(rèn)為，在虹鱒(Kincaid et al. 1977 ；Gjerde 1986)、大西洋鮭(Gjerde 1986，1999)、羅非魚(Longalong et al. 1999 ；Gall et al. 2002)、斑點(diǎn)叉尾鮰(Rezk et al. 2003)、銀大麻哈魚(Cerda et al，2003)、南美白對(duì)蝦(Fjalestad et al. 1997 ；Hetzel et al. 2000)、東部牡蠣(Davis 2000)以及國(guó)內(nèi)對(duì)中國(guó)對(duì)蝦(田焱2007 ;楊翠華2007)以及大菱鲆(欒生等2008)、長(zhǎng)牡蠣(王慶志等，2009)等的選育中已有成功實(shí)施案例。然而，在實(shí)際構(gòu)建團(tuán)頭魴的半同胞家系中，仍存在親本發(fā)育不同步，雌魚產(chǎn)卵的數(shù)量和質(zhì)量不穩(wěn)定、 雄魚精液不足，導(dǎo)致半同胞構(gòu)建效率不高等突出問(wèn)題。而且由于親本的發(fā)育不一致，使得半同胞構(gòu)建不同步，構(gòu)建周期也比較長(zhǎng)。迄今為止尚未見到有關(guān)團(tuán)頭魴半同胞家系的構(gòu)建方法的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種團(tuán)頭魴半同胞家系的構(gòu)建方法，該方法能滿足后續(xù)的大規(guī)模團(tuán)頭魴家系選育要求。本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種構(gòu)建團(tuán)頭魴半同胞家系的方法，其步驟包括I)在自然年份I月上旬，選擇2齡以上且體重大于O. 5kg的團(tuán)頭魴提前進(jìn)行個(gè)體培育，用PIT電子標(biāo)記通過(guò)注射器注入至團(tuán)頭魴背鰭基部，做好相應(yīng)記錄，培育6個(gè)月；2)在當(dāng)年的6月份，起捕步驟I)的團(tuán)頭魴，人工注射激素調(diào)節(jié)其性腺發(fā)育使其同步，第一次注射激素時(shí)，只注射雌魚，注射的激素為絨毛膜促性腺激素，注射劑量為I μ g/kg 體重；3)在第一次注射激素12h后，對(duì)雌、雄團(tuán)頭魴進(jìn)行第二次注射激素，注射的激素及劑量絨毛膜促性腺激素為4 μ g/kg體重；地歐酮為2mg/kg體重；4)構(gòu)建團(tuán)頭魴半同胞家系其中構(gòu)建母系半同胞家系按團(tuán)頭魴I尾雌性配2尾雄性的比例配置，或雌性團(tuán)頭魴的懷卵量超過(guò)超過(guò)50萬(wàn)粒，按I尾雌性配3尾雄性的比例構(gòu)建團(tuán)頭魴母系半同胞家系；其中構(gòu)建父系半同胞家系按團(tuán)頭魴I尾雄性配2尾雌性，或個(gè)體精液量超過(guò)2ml，按I尾雄性配3尾雌性構(gòu)建父系半同胞家系；5)在步驟3)團(tuán)頭魴第二次注射激素6_8h后，以手指輕壓雌性團(tuán)頭魴腹部卵子能自動(dòng)流出，即可進(jìn)行人工授精；6)將團(tuán)頭魴雌魚撈出，擦去體表水分，將卵擠入擦干的不銹鋼碗內(nèi)，將所取的卵分成2等分，分置于兩個(gè)不銹鋼碗內(nèi)，待用；或?qū)⒊^(guò)50萬(wàn)粒的卵分成3等分，分置于三個(gè)不銹鋼碗內(nèi)，待用；然后向所述分置的不銹鋼碗內(nèi)擠入2尾雄性團(tuán)頭魴的精液(約
O.8-1. Iml),再加入20ml生理鹽水,輕輕攪拌至3_4min ;分別用黃泥水對(duì)團(tuán)頭鮮的受精卵進(jìn)行脫粘，清水漂凈后放置孵化缸孵化即可；其中步驟2)所述的個(gè)體培育的步驟為單獨(dú)養(yǎng)殖，放養(yǎng)密度為每666. 7m2養(yǎng)殖水面放養(yǎng)200-300尾，養(yǎng)殖期間飼料日糧的配比按重量份為30%的草魚混養(yǎng)浮性商品飼料，70% 青飼料(例如黑麥草或蘇丹草等)。步驟3)和5)兩次注射激素的時(shí)間的間隔依據(jù)水溫情況而定，當(dāng)水溫為20_22°C 時(shí)，間隔時(shí)間為12h ;當(dāng)水溫高于22-25°C時(shí)，間隔時(shí)間為8h。步驟6)所述的生理鹽水，為O. 6%濃度的生理鹽水，即將O. 6g氯化鈉加少量蒸餾水溶解并定容至100ml。步驟6)所述的黃泥水，是黃泥加水充分?jǐn)噭蚝筮^(guò)40目網(wǎng)即可。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)I.本發(fā)明對(duì)設(shè)備要求不高，操作簡(jiǎn)便，團(tuán)頭魴半同胞家系構(gòu)建成功率顯著提高，一般實(shí)驗(yàn)室內(nèi)和養(yǎng)殖場(chǎng)所均能達(dá)到，且構(gòu)建團(tuán)頭魴家系也只需3-4人即可進(jìn)行批量構(gòu)建。2.在構(gòu)建團(tuán)頭魴家系時(shí)可以平衡各個(gè)家系的數(shù)量，以保證各個(gè)家系的后代的一致性，有效解決了半同胞家系構(gòu)建不同步的問(wèn)題，大大縮短了家系構(gòu)建的周期，易于進(jìn)行家系標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)。3.本發(fā)明對(duì)團(tuán)頭魴親魚損傷小，親本可在來(lái)年繼續(xù)用于繁殖，且子代存活率高。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明實(shí)施應(yīng)用進(jìn)行說(shuō)明。本發(fā)明的實(shí)施例是在國(guó)家級(jí)團(tuán)頭魴原種場(chǎng)(湖北省鄂州市)進(jìn)行實(shí)施，選用的團(tuán)頭魴親魚來(lái)至江西省鄱陽(yáng)湖、湖北省梁子湖和和湖北省的淤泥湖的野生團(tuán)頭魴，共73尾， 其中雌性24尾，雄性49尾。試驗(yàn)于當(dāng)年12月份左右開始，將用于構(gòu)建團(tuán)頭魴半同胞家系的親本進(jìn)行單獨(dú)養(yǎng)殖，即放養(yǎng)密度為200kg/666. 7m2養(yǎng)殖水面。按重量份計(jì)，飼喂的日糧比例為30%的草魚混養(yǎng)浮性商品飼料(購(gòu)自武漢高龍飼料有限公司)和70%的青草(如種植的黑麥草和蘇丹草)進(jìn)行育肥，一直持續(xù)到第二年6月的繁殖前。翌年6月份左右，當(dāng)養(yǎng)殖水溫達(dá)20_22°C時(shí)，將團(tuán)頭魴親魚捕起，用PIT電子標(biāo)記 (購(gòu)自廣州洪騰條碼技術(shù)有限公司)通過(guò)注射器注入至團(tuán)頭魴背鰭基部，將雌雄團(tuán)頭魴分開暫養(yǎng)并禁食，在暫養(yǎng)池給予充分的曝氣以保證溶氧大于5mg/L。表I六月齡團(tuán)頭魴半同胞家系間體重和體長(zhǎng)的的比較
權(quán)利要求
1.一種構(gòu)建團(tuán)頭魴半同胞家系的方法，其特征在于其步驟包括1)在自然年份I月上旬，選擇2齡以上且體重大于O.5kg的團(tuán)頭魴提前進(jìn)行個(gè)體培育， 用PIT電子標(biāo)記通過(guò)注射器注入至團(tuán)頭魴背鰭基部，做好相應(yīng)記錄，培育6個(gè)月；2)在當(dāng)年的6月份，起捕步驟I)的團(tuán)頭魴，人工注射激素調(diào)節(jié)其性腺發(fā)育使其同步， 第一次注射激素時(shí)，只注射雌魚，注射的激素為絨毛膜促性腺激素，注射劑量為I μ g/kg體3)在第一次注射激素12h后，對(duì)雌、雄團(tuán)頭魴進(jìn)行第二次注射激素，注射的激素及劑量絨毛膜促性腺激素為4 μ g/kg體重；地歐酮為2mg/kg體重；4)構(gòu)建團(tuán)頭魴半同胞家系其中構(gòu)建母系半同胞家系按團(tuán)頭魴I尾雌性配2尾雄性的比例配置，或雌性團(tuán)頭魴的懷卵量超過(guò)超過(guò)50萬(wàn)粒，按I尾雌性配3尾雄性的比例構(gòu)建母系半同胞家系；其中構(gòu)建父系半同胞家系按團(tuán)頭魴I尾雄性配2尾雌性，或個(gè)體精液量超過(guò) 2ml，按I尾雄性配3尾雌性構(gòu)建團(tuán)頭魴父系半同胞家系；5)在步驟3)團(tuán)頭魴第二次注射激素6 8h后，以手指輕壓團(tuán)頭魴腹部卵子能自動(dòng)流出，即可進(jìn)行人工授精；6)將團(tuán)頭魴雌魚撈出，擦去體表水分，將卵擠入擦干的不銹鋼碗內(nèi)，將所取的卵分成 2等分，分置于兩個(gè)不銹鋼碗內(nèi)，待用；或?qū)⒊^(guò)50萬(wàn)粒的卵分成3等分，分置于三個(gè)不銹鋼碗內(nèi)，待用；然后向所述分置的不銹鋼碗內(nèi)擠入團(tuán)頭鮮2尾雄魚的精液O. 8-1. Iml,加入 20ml生理鹽水，輕輕攪拌至3 4min ;分別用過(guò)40目網(wǎng)的黃泥水對(duì)團(tuán)頭魴的受精卵進(jìn)行脫粘，清水漂凈后放置孵化缸即可；其中步驟2)所述的個(gè)體培育的步驟為單獨(dú)養(yǎng)殖，放養(yǎng)密度為每666. 7m2放養(yǎng)200 300 尾，養(yǎng)殖期間飼料日糧的配比按重量份為30%的草魚混養(yǎng)浮性飼料，70%青飼料。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，步驟3)和5)兩次注射激素的時(shí)間的間隔依據(jù)水溫情況而定，當(dāng)水溫為20-22°C時(shí)，間隔時(shí)間為12h ;當(dāng)水溫高于22-25°C時(shí)，間隔時(shí)間為8h。
全文摘要
本發(fā)明屬于淡水魚育種技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種構(gòu)建團(tuán)頭魴半同胞家系方法，步驟包括1)選擇體重大于0.5kg的團(tuán)頭魴提前進(jìn)行個(gè)體培育，用電子標(biāo)記進(jìn)行標(biāo)記，個(gè)體培育6個(gè)月；2)在當(dāng)年的6月份，調(diào)節(jié)其性腺發(fā)育使其同步，第一次注射時(shí)，只注射雌魚，注射絨毛膜促性腺激素；3)第一次注射12h后，對(duì)雌、雄親本進(jìn)行第二次注射，為絨毛膜促性腺激素和地歐酮；4)構(gòu)建團(tuán)頭魴半同胞家系母系半同胞家系按1雌配2雄；父系半同胞家系按1雄配2雌；5)第二次注射后，以手指輕壓團(tuán)頭魴腹部卵子能自動(dòng)流出，即可進(jìn)行人工授精；6)將取的卵分成2等分，分置不銹鋼碗內(nèi)，以2尾雄魚的精液授精，用黃泥水對(duì)受精卵脫粘，清水漂凈后放置孵化缸即可。
文檔編號(hào)A01K61/00GK102599079SQ20111002855
公開日2012年7月25日 申請(qǐng)日期2011年1月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月24日
發(fā)明者曹小娟, 曾聰, 王衛(wèi)民, 羅偉, 高澤霞 申請(qǐng)人:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)