專利名稱：一種雜色竹蓀子實(shí)體的栽培生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種雜色竹蓀的生產(chǎn)方法，具體來說涉及一種雜色竹蓀(Dictyophora multicolor Berk. & Broome)子實(shí)體的栽培生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
雜色竹蓀(Dictyophora multicolor Berk. & Broome)又稱黃裙竹蓀，在分類上隸屬于真菌界(Fungi)、擔(dān)子菌門(Basidiomycota)、傘菌綱(Agaricomycetes)、鬼筆亞綱 (Phallomycetidae)、鬼筆目(Phallales)、鬼筆科(Phallaceae)，是一種夏季多在竹林、闊葉林地上散生的腐生菌，在江蘇、安徽、福建、臺灣、湖南、廣東、廣西、海南、貴州、云南等熱帶亞熱帶省份均有分布。雜色竹蓀有微毒，不宜采食，但可供藥用。據(jù)研究，將其子實(shí)體浸泡于濃度為70%的酒精中，作為外涂藥用，可治療腳癬、腳氣，增強(qiáng)免疫力，抑菌，抗衰老。但野生雜色竹蓀子實(shí)體的資源極其有限，且受季節(jié)氣候的制約，因此，雜色竹蓀子實(shí)體的人工栽培研究是十分必要的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于開發(fā)出一種雜色竹蓀子實(shí)體的人工栽培生產(chǎn)方法。我們通過將野生的雜色竹蓀新鮮子實(shí)體經(jīng)過母種制作，原種制作，栽培種制作，培菌，出菇，采收等步驟，得到了人工栽培的雜色竹蓀子實(shí)體，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的。本發(fā)明的雜色竹蓀子實(shí)體的栽培生產(chǎn)方法，其特征包括以下的步驟(1)將野生的雜色竹蓀(Dictyophora multicolor Berk. & Broome)新鮮子實(shí)體進(jìn)行組織分離，接入綜合PDA斜面培養(yǎng)基或松針浸汁培養(yǎng)基，10 32°C，濕度50% 90%，培養(yǎng)20 50天，菌絲長滿斜面即得到斜面母種，所述的綜合PDA斜面培養(yǎng)基pH 5. O 7. 0，其原料組成為每IOOOmL水中加入馬鈴薯150 250g，葡萄糖15 25g，磷酸二氫鉀1 2g， 硫酸鎂0. 3 0. Sg5VB1S 15mg和瓊脂17 20g，其制備方法是原料按所述組成分別稱重后，先將馬鈴薯洗凈去皮切碎，按上述量加水煮沸25 30min，紗布過濾，取濾汁再加入葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、VB1和瓊脂，充分溶解后趁熱紗布過濾，分裝試管滅菌后取出試管擺斜面，冷卻貯存?zhèn)溆?，所述的松針浸汁培養(yǎng)基pH 5. O 7. 0，其原料組成為每IOOOmL水中加入松針50 150g，馬鈴薯150 250g，蔗糖15 25g，瓊脂15 25g，其制備方法是原料按所述組成分別稱重后，將馬鈴薯洗凈去皮切碎，和松針一起按上述量加水煮沸25 30min,紗布過濾，取濾汁再加入蔗糖和瓊脂，充分溶解后趁熱紗布過濾，取濾汁分裝試管滅菌后取出試管擺斜面，冷卻貯存?zhèn)溆茫?2)將步驟(1)得到的斜面母種按培養(yǎng)基質(zhì)量2% 3%的接種量接入麥粒培養(yǎng)基，置10 32°C培養(yǎng)，濕度60% 70%，培養(yǎng)25 70d后，菌絲長滿麥粒培養(yǎng)基，選取菌絲呈白色、粗壯的菌種作為原種，所述的麥粒培養(yǎng)基pH 5. 0 7. 0，其原料組成按質(zhì)量分?jǐn)?shù) 100%計(jì)，由小麥75% 85%，棉子殼或竹枝丫粉或雜木屑或草粉10 % 20%，蔗糖 3 %，過磷酸鈣1 % 2 %，石膏粉0. 5 % 1. 5 %和石灰0. 3 % 0. 8 %組成，所述的麥粒培養(yǎng)基的制備方法是先把小麥用水浸泡20 30h，再用自來水沖洗干凈，用鍋煮熟20 38min，過濾滴干備用，棉子殼或竹枝丫粉或雜木屑或草粉用熱水浸泡2 池后堆慪發(fā)酵 4 5d備用，將所有組份混合拌勻，此時(shí)含水量為50% 60%，用手握培養(yǎng)料放開后料不散，將培養(yǎng)料裝入培養(yǎng)瓶里滅菌冷卻后即可作接種用；(3)將步驟( 得到的原種按培養(yǎng)基質(zhì)量3% 6%的接種量分層播種到生產(chǎn)用培養(yǎng)基里并覆土，于溫度10 32 °C，空氣相對濕度50% 90%，培養(yǎng)25 70d菌絲長出覆土表面，所述的生產(chǎn)用培養(yǎng)基pH 5. 0 7. 0，其干料組成按質(zhì)量份數(shù)計(jì)為竹片8 12份，木片 20 30份，過磷酸鈣0. 2 0. 3份，石膏0. 2 0. 3份和竹葉0. 2 0. 3份，所述的生產(chǎn)用培養(yǎng)基的制備方法是將上述干料中的竹片、木片和竹葉切成碎片，再與過磷酸鈣和石膏混合堆積成堆，不斷用清水或0. 2%尿素液澆淋，使其充分吸水，每平方米的堆用干料15 20kg，以經(jīng)過2% 3%的石灰水浸泡23 2 或煮沸15 25min后用流水沖洗的木屑或玉米稈粉作填充料，然后堆慪發(fā)酵4 5d至料面呈白色，得到生產(chǎn)用培養(yǎng)基；(4)將步驟(3)得到的菌絲于溫度10 32°C，空氣相對濕度70% 95%，光照強(qiáng)度在100 3001X，每天通氣1次，每次0. 5 lh，培養(yǎng)20 55d則形成大量菌索，至菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾后以相對濕度70% 95%，IOC 32°C，光照強(qiáng)度在100 3001x,每天通氣1 2次，每次0. 5 lh，20 35d至菌裙達(dá)到最大開張度，即可采收雜色竹蓀子實(shí)體。步驟(1)所述的野生的雜色竹蓀新鮮子實(shí)體進(jìn)行組織分離，接至綜合PDA斜面培養(yǎng)基或松針浸汁培養(yǎng)基最好是溫度23 ^°C，濕度60% 65%，培養(yǎng)25 35d ；最好的綜合PDA斜面培養(yǎng)基其原料組成為每IOOOmL水中加入馬鈴薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀1. 5g，硫酸鎂0. 5g，VB1IOmg和瓊脂17g 20g，最好的松針浸汁培養(yǎng)基其原料組成為每 IOOOmL水中加入松針100g，馬鈴薯200g，蔗糖20g，瓊脂20g ；步驟( 所述的斜面母種接種至麥粒培養(yǎng)基最好的培養(yǎng)溫度是23 ^TC,最好的培養(yǎng)時(shí)間是23 40d ；最好的麥粒培養(yǎng)基其原料組成按質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計(jì)，由小麥80%，棉子殼或竹枝丫粉或雜木屑或草粉15%，蔗糖2%，過磷酸鈣1. 5%，石膏粉和石灰0. 5% 組成；步驟C3)所述的生產(chǎn)用培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度最好是23 ^°C，濕度60% 80%， 培養(yǎng)時(shí)間30 45d ；所述最好的生產(chǎn)用培養(yǎng)基其干料組成按質(zhì)量份數(shù)計(jì)為竹片10份，木片 25份，過磷酸鈣0. 25份，石膏0. 25份和竹葉0. 25份；所述的分層播種是先將三分之二的菌種均勻撒在料面上，抓料抖動，把撒上的菌種均勻地分布在三分之二的料層中，稍為平整料面，再把三分之一的菌種均勻混播在上面三分之一的料層里，不要讓菌種外露，然后覆土并用薄膜覆蓋調(diào)溫；步驟(4)所述的菌絲的培養(yǎng)溫度最好是22 27°C，培養(yǎng)時(shí)間35 55d，所述的形成幼原基和菌蕾后的培養(yǎng)溫度最好是20 ^TC,濕度75% 90%，雜色竹蓀子實(shí)體采收后立即去掉菌帽和菌托，以免污染潔白的菌裙，將菌裙在日光下曬干或炭火烤干或于40 60°C烘箱烘干，放置20min，使菌裙回潮變軟，方可包裝或于室溫保藏或用于研究等用途。本發(fā)明的栽培生產(chǎn)方法可以使雜色竹蓀子實(shí)體生物效率達(dá)到1. 5 2. 5kg/m2,即每平方米生產(chǎn)用培養(yǎng)料可得1. 5 2. 5kg新鮮的雜色竹蓀子實(shí)體，這些雜色竹蓀子實(shí)體可用作藥物原料或研究材料使用。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例是對本發(fā)明的進(jìn)一步說明，不是對本發(fā)明的限制。實(shí)施例1 綜合PDA斜面培養(yǎng)基原料組成為馬鈴薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀1.5g，硫酸鎂0. 5g，VB1IOmg,瓊脂17g與IOOOmL水，pH 6. 0，制備方法是稱取馬鈴薯200g，洗凈去皮切碎，加水IOOOmL煮沸30min，紗布過濾，取濾汁再加葡萄糖20g、磷酸二氫鉀1. 5g、硫酸鎂 0. 5、VBJOmg、瓊脂17g，充分溶解后趁熱紗布過濾，取濾汁分裝試管，視試管大小而定每試管約8mL，15磅蒸氣121°C滅菌20分鐘左右后取出試管擺斜面，冷卻貯存?zhèn)溆?；將野生的雜色竹蓀(Dictyophora multicolor Berk. & Broome)新鮮子實(shí)體進(jìn)行組織分離，按約0. 5cmX0. 5cm大小的量接至綜合PDA斜面培養(yǎng)基J4°C，濕度50%，培養(yǎng) 30d，菌絲長滿斜面即得到斜面母種。稱取小麥80kg (用水浸泡20h，再用自來水沖洗干凈，用鍋煮熟20min，過濾滴干)， 棉子殼15kg (用熱水浸泡池后堆慪發(fā)酵4天)，蔗糖^g，過磷酸鈣1. 5kg,石膏粉Ikg和石灰0. 5kg混合拌勻，調(diào)整pH至6. 0，此時(shí)含水量為50% 60%，用手握培養(yǎng)料放開后料不散，將培養(yǎng)料裝入培養(yǎng)瓶里，塞上棉塞，包上油紙，于溫度126°C，蒸汽壓20磅，保持池滅菌冷卻后，得到麥粒培養(yǎng)基。將斜面母種按培養(yǎng)基質(zhì)量的2%接種至麥粒培養(yǎng)基，置培養(yǎng)，濕度60%，培養(yǎng) 25d后，菌絲長滿麥粒培養(yǎng)基，選取菌絲呈白色、粗壯的菌種作為原種。取竹片10kg，木片25kg，過磷酸鈣0.25kg，石膏0.25kg和竹葉0.25kg堆積成堆， 其中竹片、木片和竹葉切成約20mmX300mm的碎片，不斷用清水澆淋堆，使其充分吸水，每平方米的堆用干料Mkg，用經(jīng)過2%的石灰水浸泡24h后流水沖洗的木屑作填充料，然堆慪發(fā)酵4d，料面呈白色，就得到生產(chǎn)用培養(yǎng)基。原種按培養(yǎng)基質(zhì)量3%的接種量并先將三分之二的均勻撒在生產(chǎn)用培養(yǎng)基上，抓料抖動，把撒上的菌種均勻的分布在三分之二的生產(chǎn)用培養(yǎng)基中，稍為平整料面，再把三分之一的菌種均勻混播在上面三分之一的生產(chǎn)用培養(yǎng)基里，不要讓菌種外露，然后覆土并用薄膜覆蓋調(diào)溫。在溫度26°C，空氣相對濕度60%的條件下，培養(yǎng)70d后菌絲長出覆土表面。將菌絲于溫度10 20°C，空氣相對濕度50% 70%，光照強(qiáng)度在3001x，每天通氣1次，每次0. 5h，培養(yǎng)55d則形成大量菌索，至菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾后以相對濕度70%，10°C，光照強(qiáng)度在3001x，每天通氣1次，每次0. 5h，35d至菌裙達(dá)到最大開張度， 即可采收雜色竹蓀子實(shí)體。采收后立即去掉菌帽和菌托，將菌裙在日光下曬干，放置20min， 使菌裙回潮變軟，室溫保藏。此次栽培的雜色竹蓀子實(shí)體生物效率達(dá)到2. 5kg/m2,即每平方米生產(chǎn)用培養(yǎng)料可得2. 5Kg新鮮的雜色竹蓀子實(shí)體，這些雜色竹蓀子實(shí)體可用作藥物原料或研究材料使用。實(shí)施例2 將野生的雜色竹蓀(Dictyophora multicolor Berk. & Broome)新鮮子實(shí)體進(jìn)行組織分離，按約0. 5cmX0. 5cm大小的量接至綜合PDA斜面培養(yǎng)基，10°C，濕度50%，培養(yǎng) 20d，菌絲長滿斜面即得到斜面母種，所述的綜合PDA斜面培養(yǎng)基pH 7.0,其原料組成為每 IOOOmL水中加入馬鈴薯150g，葡萄糖25g，磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂0. SgJB1ISmgJl^g 20g，其制備方法同實(shí)施例1。把75kg小麥(用水浸泡30h，再用自來水沖洗干凈，用鍋煮熟38min，過濾滴干)， 竹枝丫粉20kg (用熱水浸泡3h后堆慪發(fā)酵5d)，蔗糖1kg，過磷酸鈣^g，石膏粉1. ^g，石灰0. 5kg混合拌勻，pH為7. 0，此時(shí)含水量為50% 60%，用手握培養(yǎng)料放開后料不散，將培養(yǎng)料裝入培養(yǎng)瓶里，塞上棉塞，包上油紙，于溫度U6°C，蒸汽壓20磅，保持池滅菌冷卻后，得到麥粒培養(yǎng)基。將斜面母種按培養(yǎng)基質(zhì)量3%的接種量接種至麥粒培養(yǎng)基，置10°C培養(yǎng)，濕度 60%，培養(yǎng)70d后，菌絲長滿麥粒培養(yǎng)基，選取菌絲呈白色、粗壯的菌種作為原種。取竹片^g，木片30kg，過磷酸鈣0. 2kg,石膏0. 2kg和竹葉0. 2kg堆積成堆，其中竹片、木片和竹葉切成約20mmX300mm的碎片，不斷用清水澆淋堆，使其充分吸水，每平方米的堆用干料20kg，用經(jīng)過3%的石灰水煮沸20min后流水沖洗的玉米稈粉作填充料，然后堆慪發(fā)酵5d，料面呈白色，就得到生產(chǎn)用培養(yǎng)基，pH7. 0。原種按培養(yǎng)基質(zhì)量6%的接種量并先將三分之二的原種均勻撒在生產(chǎn)用培養(yǎng)基上，抓料抖動，把撒上的菌種均勻的分布在三分之二的生產(chǎn)用培養(yǎng)基中，稍為平整料面，再把三分之一的菌種均勻混播在上面三分之一的生產(chǎn)用培養(yǎng)基里，不要讓菌種外露，然后覆土并用薄膜覆蓋調(diào)溫。在溫度32°C，空氣相對濕度90%的條件下，培養(yǎng)25d后菌絲長出覆土表面。將菌絲于溫度32°C，空氣相對濕度95%，光照強(qiáng)度在ΙΟΟΙχ，每天通氣1次，每次lh，培養(yǎng)20d則形成大量菌索，至菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾后以相對濕度95 %， 320C，光照強(qiáng)度在2001x，每天通氣2次，每次lh，20d至菌裙達(dá)到最大開張度，即可采收雜色竹蓀子實(shí)體；采收后立即去掉菌帽和菌托，將菌裙用炭火烤干，放置20min，使菌裙回潮變軟，進(jìn)行包裝。此次栽培的雜色竹蓀子實(shí)體生物效率達(dá)到1. 5kg/m2,即每平方米生產(chǎn)用培養(yǎng)料可得1. 5Kg新鮮的雜色竹蓀子實(shí)體，這些雜色竹蓀子實(shí)體可用作藥物原料或研究材料使用。實(shí)施例3 除綜合PDA斜面培養(yǎng)基原料組成為馬鈴薯250g，葡萄糖15g，磷酸二氫鉀lg，硫酸鎂0. 3g，VB1Smg,瓊脂17g與IOOOmL水，pH 5. 0，以及制備方法中馬鈴薯洗凈去皮切碎，加水煮沸25min外，其它步驟和條件同實(shí)施例1。此次栽培的雜色竹蓀子實(shí)體生物效率達(dá)到1. 8kg/m2,即每平方米生產(chǎn)用培養(yǎng)料可得1. SKg新鮮的雜色竹蓀子實(shí)體，這些雜色竹蓀子實(shí)體可用作藥物原料或研究材料使用。實(shí)施例4 將野生的雜色竹蓀(Dictyophora multicolor Berk. & Broome)新鮮子實(shí)體進(jìn)行組織分離，按約0. 5cmX0. 5cm大小的量接至松針浸汁培養(yǎng)基，10°C，濕度50% 60%， 培養(yǎng)50d，菌絲長滿斜面即得到斜面母種，所述的松針浸汁培養(yǎng)基pH 5. 0，其原料組成為每IOOOmL水中加入松針50g，馬鈴薯250g，蔗糖15g，瓊脂25g，其制備方法是稱取馬鈴薯 250g，洗凈去皮切碎，和松針50g —起加水IOOOmL煮沸半個(gè)小時(shí)，紗布過濾，再稱取蔗糖、 瓊脂充分溶解于濾汁后趁熱紗布過濾，取濾汁分裝試管，視試管大小而定每試管約10mL，15 磅蒸氣121°C滅菌20分鐘左右后取出試管擺斜面，冷卻貯存?zhèn)溆?；按照?shí)施例1的方法制備麥粒培養(yǎng)基，其原料組成按質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計(jì)，由小麥85%，雜木屑10%，蔗糖3%，過磷酸鈣1%，石膏粉0.7%和石灰0.3%組成，pH 5.0。得到的斜面母種按培養(yǎng)基質(zhì)量2%的接種量接種至麥粒培養(yǎng)基，置23°C培養(yǎng)，濕度60%，培養(yǎng)40d后，菌絲長滿麥粒培養(yǎng)基，選取菌絲呈白色、粗壯的菌種作為原種。按照實(shí)施例1的方法制備生產(chǎn)用培養(yǎng)基，其干料組成按質(zhì)量份數(shù)計(jì)為竹片12份， 木片20份，過磷酸鈣0. 3份，石膏0. 3份和竹葉0. 3份。原種按培養(yǎng)基質(zhì)量的3%的接種量并先將三分之二的原種均勻撒在生產(chǎn)用培養(yǎng)基上，抓料抖動，把撒上的菌種均勻的分布在三分之二的生產(chǎn)用培養(yǎng)基中，稍為平整料面，再把三分之一的菌種均勻混播在上面三分之一的生產(chǎn)用培養(yǎng)基里，不要讓菌種外露，然后覆土并用薄膜覆蓋調(diào)溫。在溫度23°C，空氣相對濕度60%的條件下，培養(yǎng)45d后菌絲長出覆土表面。將菌絲于溫度22°C，空氣相對濕度80%，光照強(qiáng)度在ΙΟΟΙχ，每天通氣1次，每次 0.證時(shí)，培養(yǎng)55d則形成大量菌索，至菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾后以相對濕度75%， 200C，光照強(qiáng)度在200-3001x，每天通氣1次，每次0. 5h，35d至菌裙達(dá)到最大開張度，即可采收雜色竹蓀子實(shí)體。采收后立即去掉菌帽和菌托，將菌裙在40°C烘箱烘干，放置20min，使菌裙回潮變軟，室溫保藏。此次栽培的雜色竹蓀子實(shí)體生物效率達(dá)到^g/m2，即每平方米生產(chǎn)用培養(yǎng)料可得 2Kg新鮮的雜色竹蓀子實(shí)體，這些雜色竹蓀子實(shí)體可用作藥物原料或研究材料使用。實(shí)施例5 將野生的雜色竹蓀(Dictyophora multicolor Berk. & Broome)新鮮子實(shí)體進(jìn)行組織分離，按約0. 5emX0. 5em大小的量接至松針浸汁培養(yǎng)基，26°C，濕度65%，培養(yǎng)25d，菌絲長滿斜面即得到斜面母種，所述的松針浸汁培養(yǎng)基PH 7. 0，其原料組成為每IOOOmL水中加入松針150g，馬鈴薯150g，蔗糖25g，瓊脂15g，其制備方法是同實(shí)例4 ；按照實(shí)施例2的方法制備麥粒培養(yǎng)基，其原料組成按質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計(jì)，由小麥 84%，草粉10%，蔗糖3%，過磷酸鈣1.7%，石膏粉0.5%和石灰0.8%組成。得到的斜面母種按培養(yǎng)基質(zhì)量2%的接種量接種至麥粒培養(yǎng)基，置^TC培養(yǎng)，濕度70%，培養(yǎng)23d后，菌絲長滿麥粒培養(yǎng)基，選取菌絲呈白色、粗壯的菌種作為原種。按照實(shí)施例2的方法制備生產(chǎn)用培養(yǎng)基。原種按培養(yǎng)基質(zhì)量5%的接種量并先將三分之二的原種均勻撒在生產(chǎn)用培養(yǎng)基上，抓料抖動，把撒上的菌種均勻的分布在三分之二的生產(chǎn)用培養(yǎng)基中，稍為平整料面，再把三分之一的菌種均勻混播在上面三分之一的生產(chǎn)用培養(yǎng)基里，不要讓菌種外露，然后覆土并用薄膜覆蓋調(diào)溫。在溫度^°C，空氣相對濕度80%的條件下，培養(yǎng)30d后菌絲長出覆土表面。將菌絲于溫度23 °C，空氣相對濕度70% 90%，光照強(qiáng)度在ΙΟΟΙχ，每天通氣1 次，每次lh，培養(yǎng)35d則形成大量菌索，至菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾后以相對濕度 90%,26°C,光照強(qiáng)度在2001x，每天通氣2次，每次lh，20d至菌裙達(dá)到最大開張度，即可采收雜色竹蓀子實(shí)體。采收后立即去掉菌帽和菌托，將菌裙用60°C烘箱烘干，放置20min，使菌裙回潮變軟，進(jìn)行包裝。此次栽培的雜色竹蓀子實(shí)體生物效率達(dá)到2. 3kg/m2，即每平方米生產(chǎn)用培養(yǎng)料可得2. 3Kg新鮮的雜色竹蓀子實(shí)體，這些雜色竹蓀子實(shí)體可用作藥物原料或研究材料使用。
權(quán)利要求
1.一種雜色竹蓀子實(shí)體的栽培生產(chǎn)方法，其特征包括以下的步驟(1)將野生的雜色竹蓀Dictyophoramulticolor Berk. & Broome新鮮子實(shí)體進(jìn)行組織分離，接至綜合PDA斜面培養(yǎng)基或松針浸汁培養(yǎng)基，溫度10 32 °C，濕度50 % 90 %，培養(yǎng) 20 50天，菌絲長滿斜面即得到斜面母種，所述的綜合PDA斜面培養(yǎng)基pH 5. O 7. 0，其原料組成為每IOOOmL水中加入馬鈴薯150 250g，葡萄糖15 25g，磷酸二氫鉀1 2g， 硫酸鎂0. 3 0. Sg5VB1S 15mg和瓊脂17 20g，其制備方法是原料按所述組成分別稱重后，先將馬鈴薯洗凈去皮切碎，按上述量加水煮沸25 30min，紗布過濾，取濾汁再加入葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、VB1和瓊脂，充分溶解后趁熱紗布過濾，分裝試管滅菌后取出試管擺斜面，冷卻貯存?zhèn)溆茫龅乃舍樈囵B(yǎng)基pH 5. 0 7. 0，其原料組成為每IOOOmL水中加入松針50 150g，馬鈴薯150 250g，蔗糖15 25g，瓊脂15 25g，其制備方法是原料按所述組成分別稱重后，將馬鈴薯洗凈去皮切碎，和松針一起按上述量加水煮沸25 30min,紗布過濾，取濾汁再加入蔗糖和瓊脂，充分溶解后趁熱紗布過濾，取濾汁分裝試管滅菌后取出試管擺斜面，冷卻貯存?zhèn)溆茫?2)將步驟(1)得到的斜面母種按培養(yǎng)基質(zhì)量2% 3%的接種量接入麥粒培養(yǎng)基，置溫度10 32°C，濕度60% 70%，培養(yǎng)25 70d后，菌絲長滿麥粒培養(yǎng)基，選取菌絲呈白色、粗壯的菌種作為原種，所述的麥粒培養(yǎng)基PH 5. 0 7. 0，其原料組成按質(zhì)量分?jǐn)?shù)100% 計(jì)，由小麥75% 85%，棉子殼或竹枝丫粉或雜木屑或草粉10 % 20%，蔗糖 3%， 過磷酸鈣 2%，石膏粉0. 5% 1. 5%和石灰0. 3% 0. 8%組成，所述的麥粒培養(yǎng)基的制備方法是先把小麥用水浸泡20 30h，再用自來水沖洗干凈，用鍋煮熟20 38min，過濾滴干備用，棉子殼或竹枝丫粉或雜木屑或草粉用熱水浸泡2 池后堆慪發(fā)酵4 5d備用，將所有組份混合拌勻，此時(shí)含水量為50% 60 %，用手握培養(yǎng)料放開后料不散，將培養(yǎng)料裝入培養(yǎng)瓶里滅菌冷卻后即可作接種用；(3)將步驟( 得到的原種按培養(yǎng)基質(zhì)量3% 6%的接種量分層播種到生產(chǎn)用培養(yǎng)基里并覆土，于溫度10 32 °C，空氣相對濕度50% 90%，培養(yǎng)25 70d菌絲長出覆土表面，所述的生產(chǎn)用培養(yǎng)基PH 5. 0 7. 0，其干料組成按質(zhì)量份數(shù)計(jì)為竹片8 12份，木片 20 30份，過磷酸鈣0. 2 0. 3份，石膏0. 2 0. 3份和竹葉0. 2 0. 3份，所述的生產(chǎn)用培養(yǎng)基的制備方法是將上述干料中的竹片、木片和竹葉切成碎片，再與過磷酸鈣和石膏混合堆積成堆，不斷用清水或0. 2%尿素液澆淋，使其充分吸水，每平方米的堆用干料15 20kg，以經(jīng)過2% 3%的石灰水浸泡23 2 或煮沸15 25min后用流水沖洗的木屑或玉米稈粉作填充料，然后堆慪發(fā)酵4 5d至料面呈白色，得到生產(chǎn)用培養(yǎng)基；(4)將步驟(3)得到的菌絲于溫度10 32°C，空氣相對濕度70% 95%，光照強(qiáng)度在 100 3001x，每天通氣1次，每次0. 5 lh，培養(yǎng)20 55d則形成大量菌索，至菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾后以相對濕度70% 95%，IOC 32°C，光照強(qiáng)度在100 3001x，每天通氣1 2次，每次0. 5 lh，培養(yǎng)20 35d至菌裙達(dá)到最大開張度，即可采收雜色竹蓀子實(shí)體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雜色竹蓀子實(shí)體的栽培生產(chǎn)方法，其特征是步驟(1)所述的野生的雜色竹蓀新鮮子實(shí)體進(jìn)行組織分離，接至綜合PDA斜面培養(yǎng)基或松針浸汁培養(yǎng)基，溫度23 ^°C，濕度60% 65%，培養(yǎng)25 35d，所述的綜合PDA斜面培養(yǎng)基的原料組成為每1OOOmL水中加入馬鈴薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀1. 5g，硫酸鎂0. SgjVB11Omg和瓊脂17g 20g，所述的松針浸汁培養(yǎng)基的原料組成為每IOOOmL水中加入松針100g，馬鈴薯200g，蔗糖20g，瓊脂20g ；步驟( 所述溫度23 ^°C，培養(yǎng)23 40d，所述的麥粒培養(yǎng)基其原料組成按質(zhì)量分?jǐn)?shù)100 %計(jì)，由小麥80 %，棉子殼或竹枝丫粉或雜木屑或草粉 15 %，蔗糖2 %，過磷酸鈣1. 5 %，石膏粉1 %和石灰0. 5 %組成，步驟(3)所述的生產(chǎn)用培養(yǎng)基其干料組成按質(zhì)量份數(shù)計(jì)為竹片10份，木片25份，過磷酸鈣0. 25份，石膏0. 25份和竹葉0. 25份，所述的溫度23 ，所述的濕度60 % 80 %，培養(yǎng)30 45d，所述的分層播種是先將三分之二的菌種均勻撒在料面上，抓料抖動，把撒上的菌種均勻的分布在三分之二的料層中，稍為平整料面，再把三分之一的菌種均勻混播在上面三分之一的料層里，不要讓菌種外露，步驟(4)所述的菌絲的培養(yǎng)溫度22 27°C，培養(yǎng)35 55d，所述的形成幼原基和菌蕾后的培養(yǎng)溫度20 ^°C，濕度75% 90%。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種雜色竹蓀(Dictyophora multicolor Berk.& Broome(1882))子實(shí)體的栽培生產(chǎn)方法，其特征是先將野生的雜色竹蓀新鮮子實(shí)體進(jìn)行組織分離，接至綜合PDA斜面培養(yǎng)基或松針浸汁培養(yǎng)基培養(yǎng)至菌絲長滿斜面得到斜面母種，把斜面母種接種至麥粒培養(yǎng)基培養(yǎng)至菌絲長滿培養(yǎng)基，選取菌絲呈白色、粗壯的菌種作為原種，將原種分層播種到生產(chǎn)用培養(yǎng)基里并覆土，培養(yǎng)至菌絲長出覆土表面，然后使菌絲形成大量菌索，菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾，繼續(xù)培養(yǎng)至菌裙達(dá)到最大開張度，便可采收雜色竹蓀新鮮子實(shí)體。本發(fā)明的栽培生產(chǎn)方法可以使雜色竹蓀子實(shí)體生物效率達(dá)到1.5～2.5kg/m2，這些雜色竹蓀子實(shí)體可用作藥物原料或研究材料使用。
文檔編號A01G1/04GK102172173SQ20111005184
公開日2011年9月7日 申請日期2011年3月4日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月4日
發(fā)明者吳興亮, 宋斌, 李泰輝, 鄒方倫 申請人:廣東省微生物研究所