專(zhuān)利名稱(chēng)：一種多抗冬瓜的選育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種冬瓜的選育方法，特別是涉及一種適于珠三角地區(qū)氣候條件或相似氣候條件下的抗枯萎病、疫病、病毒病的多抗冬瓜的選育方法。
背景技術(shù)：
冬瓜是我國(guó)主要蔬菜作物，年播種面積約300萬(wàn)畝，冬瓜產(chǎn)品對(duì)于調(diào)節(jié)我國(guó)蔬菜周年供應(yīng)發(fā)揮著重要作用。由于冬瓜主要分布在我國(guó)、印度、越南、老撾等東南亞國(guó)家，遺傳背景狹窄，抗性資源十分貧乏?？菸　⒁卟?、病毒病等冬瓜病害的普遍流行，制約著冬瓜的生產(chǎn)，因而制定一套抗病冬瓜的高效、快捷的選育方法，對(duì)提高冬瓜育種水平和擴(kuò)大生產(chǎn)有著重要的作用。目前關(guān)于適應(yīng)珠三角地區(qū)氣候條件或相似氣候條件下的多抗冬瓜的選育方法尚未見(jiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種適于珠三角地區(qū)氣候條件或相似氣候條件下的多抗冬瓜的選育方法。本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是 一種多抗冬瓜的選育方法，包括如下步驟
(1)種子處理珠三角氣候地區(qū)的4月中下旬至5月上旬，取冬瓜種子消毒，浸種，催
芽；
(2)人工接種病菌取步驟(1)處理后的種苗，人工接種枯萎病、疫病和病毒病， (3 ) 一次篩選取步驟(2 )接種病菌后的種苗，淘汰發(fā)病株，選留抗病株；
(4)二次篩選將步驟(3)獲得的抗病株于珠三角氣候地區(qū)的6月上旬定植大田，繼續(xù)淘汰發(fā)病株，未發(fā)病單株自交留種；
(5)翌年將上年獲得的多抗單株的種子重復(fù)步驟(1)-(4)的篩選工作，獲得穩(wěn)定的多抗單株。上述多抗冬瓜選育方法的一個(gè)優(yōu)選方案，包括如下步驟
(1)種子處理珠三角氣候地區(qū)的4月中下旬至5月上旬，取冬瓜種子用10%-15%質(zhì)量比的Na3PO4溶液對(duì)種子消毒15-25min，再用50_55°C溫水浸種8_12h，洗凈后在條件下催芽；
(2)人工接種病菌取步驟(1)處理后的種苗，人工接種枯萎病、疫病和病毒病， 枯萎病接種方法取胚根長(zhǎng)0. 5-1. 5cm的萌發(fā)種子，損傷胚根，在濃度為
5 X IO6-IO X IO6個(gè)孢子/ml的枯萎病病菌液中浸泡30_40min ；
疫病接種方法取第2-3真葉期的種苗，傷根法澆灌或葉面噴施疫病病菌孢子，接種濃度為1 X 102-2 X IO2個(gè)孢子/ml ；
病毒病接種方法取第2-3真葉期的種苗，用病毒液涂擦胚芽葉片；
(3)—次篩選取步驟(2)接種病菌后的種苗，1周后連續(xù)20天調(diào)查，淘汰發(fā)病株，選留抗病株；
(4)二次篩選將步驟(3)獲得的抗病株于珠三角氣候地區(qū)的6月上旬定植大田，繼續(xù)淘汰發(fā)病株，未發(fā)病單株自交留種；
(5)翌年將上年獲得的多抗單株的種子重復(fù)步驟(1)-(4)的篩選工作，獲得穩(wěn)定的多抗單株。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于
使用本發(fā)明的冬瓜選育方法，具有快捷、效果穩(wěn)定、可操作性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，可以快速得到對(duì)多種病害具有抗性的冬瓜，選育成功率高，對(duì)提高冬瓜產(chǎn)量、擴(kuò)大生產(chǎn)有著重要的作用。


圖1為不同播種期與枯萎病發(fā)生的關(guān)系圖。圖2為不同播種期與疫病發(fā)生的關(guān)系圖。圖3為不同播種期與病毒病發(fā)生的關(guān)系圖。圖4為不同播種期人工接種病毒發(fā)病情況圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的具體描述，但并不局限于此。實(shí)施例1
1、播種時(shí)期的篩選
1. 1實(shí)驗(yàn)材料取三水黑皮冬(B94)、臺(tái)灣小冬瓜(B214)、東莞黑皮冬瓜(B218)、廣利粉皮冬瓜(P33)的種子，分別編號(hào)為1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)。1. 2播種時(shí)期方案取上述各品種的冬瓜種子，于2月上旬、3月上旬、4月上旬、5 月上旬分別播種。設(shè)3次重復(fù)，每重復(fù)50株苗。實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)廣東省農(nóng)科院白云基地。播種前，種子先經(jīng)過(guò)下述1.3、1.4步驟的處理。1. 3種子處理用10%妝#04溶液對(duì)種子消毒lOmin，再用50_55°C溫水浸種10h，洗凈后在恒溫條件下催芽。1. 4人工接種病菌取處理后的種苗，分別人工接種枯萎病、疫病和病毒病，
枯萎病接種方法取培根長(zhǎng)0. 5-1. 5cm的種苗，損傷胚根，枯萎病接種方法取胚根長(zhǎng)0. 5-2cm的萌發(fā)種子，損傷胚根，在濃度為5X IO6個(gè)孢子/ml的枯萎病病菌液中浸泡 30min ；
疫病接種方法取第2-3真葉期的種苗，傷根法澆灌或葉面噴施疫病病菌孢子，接種濃度為1 X IO2個(gè)孢子/ml ；
病毒病接種方法取第2-3真葉期的種苗，用病毒液涂擦胚芽葉片。1. 5實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同播種時(shí)期對(duì)枯萎病抗性篩選的影響見(jiàn)圖1。由圖1可見(jiàn)，播種期在2-6月份期間，隨著播種時(shí)間的延遲，人工接種枯萎病的發(fā)病株率逐漸下降，播種期為 5月份后枯萎病急劇下降，這與枯萎病的發(fā)生條件有關(guān)。不同播種時(shí)期對(duì)疫病抗性篩選的影響見(jiàn)圖2。由圖2可見(jiàn)，播種期從2月-5月份疫病發(fā)病呈上升趨勢(shì)，而6月份播種的反而下降了。不同播種時(shí)期對(duì)病毒病抗性篩選的影響見(jiàn)圖3。由圖3可見(jiàn)，播種期由2月份-6月份病毒病發(fā)生率呈上升趨勢(shì)。不同播種時(shí)期對(duì)多抗篩選的影響見(jiàn)圖4。由圖4可見(jiàn)，在不同的播種期先后人工接種枯萎病、疫病和病毒病，三種病害總發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，但播種期為4-5月份時(shí)，能比較客觀、準(zhǔn)確地表現(xiàn)各品種之間的抗性差異。2、多抗株系的篩選
2. 1種子處理廣州地區(qū)4月中下旬至五月上旬，取三水黑皮冬(B94)、臺(tái)灣小冬瓜 (B214)、東莞黑皮冬瓜(B218)、廣利粉皮冬瓜(P33)種子用10%Na3P0溶液對(duì)種子消毒 lOmin，再用50-55°C溫水浸種10h，洗凈后在恒溫條件下催芽。2. 2人工接種病菌取步驟(1)處理后的種苗，人工接種枯萎病、疫病和病毒病， 枯萎病接種方法取培根長(zhǎng)0. 5-1. 5cm的種苗，損傷胚根，枯萎病接種方法取胚根
長(zhǎng)0. 5-2cm的萌發(fā)種子，損傷胚根，在濃度為5X IO6個(gè)孢子/ml的枯萎病病菌液中浸泡 30min ；
疫病接種方法取第2-3真葉期的種苗，傷根法澆灌或葉面噴施疫病病菌孢子，接種濃度為1 X IO2個(gè)孢子/ml ；
病毒病接種方法取第2-3真葉期的種苗，用病毒液涂擦胚芽葉片。2. 3 一次篩選取步驟(2)接種病菌后的種苗，淘汰發(fā)病株，留選抗病株。2. 4 二次篩選將步驟(3)獲得的抗病株，于廣州地區(qū)6月上旬定植，淘汰發(fā)病株， 未發(fā)病抗病單株自交留種。2. 5翌年將上年獲得的多抗單株的種子重復(fù)步驟(1)- (4)的篩選工作，獲得穩(wěn)定的多抗單株。3、所獲多抗株系的抗病實(shí)驗(yàn)
取通過(guò)本發(fā)明方法所獲得的冬瓜多抗株系進(jìn)行抗病實(shí)驗(yàn)，以原始群體植株作為對(duì)照， 設(shè)3次重復(fù)，每重復(fù)100株苗，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。從表1中可以看出多抗株系比原始株系的三種發(fā)病率均顯著下降，說(shuō)明本發(fā)明的多抗冬瓜的選育方法是可行的，能獲得多抗株系。 注經(jīng)Duncan’ s多重比較測(cè)試，不同字母表示差異達(dá)5%水平。BD94_1_2、 BD218-5-1、BD214-2-6、PD33-6-4為經(jīng)過(guò)本發(fā)明方法所獲得的多抗株系；B94 (CK1)、B218 (CK2)、B214 (CK3)、P33 (CK4)為其原始株系。
4、所獲多抗株系的性狀穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
取通過(guò)本發(fā)明方法所獲得的冬瓜多抗株系進(jìn)行性狀穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，以原始群體植株作為對(duì)照，設(shè)3次重復(fù)，每重復(fù)50株苗，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。從表2中可以看出多抗株系與原始株系在主要農(nóng)藝性狀方面沒(méi)有產(chǎn)生顯著差異。
權(quán)利要求
1.一種多抗冬瓜的選育方法，其特征在于，包括如下步驟(1)種子處理于珠三角氣候地區(qū)的4月中下旬至5月上旬，取冬瓜種子消毒，浸種，催芽；(2)人工接種病菌取步驟(1)處理后的種苗，人工接種枯萎病、疫病和病毒病；(3)—次篩選取步驟(2)接種病菌后的種苗，淘汰發(fā)病株，選留抗病株；(4)二次篩選將步驟(3)獲得的抗病單株于珠三角氣候地區(qū)的6月上旬定植大田，繼續(xù)淘汰發(fā)病株，未發(fā)病單株自交留種；(5)翌年將上年獲得的抗病單株的種子重復(fù)步驟(1)-(4)的篩選工作，獲得穩(wěn)定的多抗單株。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多抗冬瓜選育方法，其特征在于，包括如下步驟(1)種子處理珠三角氣候地區(qū)的4月中下旬至5月上旬，取冬瓜種子用10%-15%質(zhì)量比的Na3PO4溶液對(duì)種子消毒15-25min，再用50_55°C溫水浸種8_12h，洗凈后在條件下催芽；(2)人工接種病菌取步驟(1)處理后的種苗，人工接種枯萎病、疫病和病毒病， 枯萎病接種方法取胚根長(zhǎng)0. 5-1. 5cm的萌發(fā)種子，損傷胚根，在濃度為·5 X IO6-IO X IO6個(gè)孢子/ml的枯萎病病菌液中浸泡30_40min ；疫病接種方法取第2-3真葉期的種苗，傷根法澆灌或葉面噴施疫病病菌孢子，接種濃度為1 X 102-2 X IO2個(gè)孢子/ml ；病毒病接種方法取第2-3真葉期的種苗，用病毒液涂擦胚芽葉片；(3)—次篩選取步驟(2)接種病菌后的種苗，1周后連續(xù)20天調(diào)查，淘汰發(fā)病株，選留抗病單株；(4)二次篩選將步驟(3)獲得的抗病株于珠三角氣候地區(qū)的6月上旬定植大田，繼續(xù)淘汰發(fā)病株，未發(fā)病單株自交留種；(5)翌年將上年獲得的多抗單株的種子重復(fù)步驟(1)-(4)的篩選工作，獲得穩(wěn)定的多抗單株。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種適于珠三角地區(qū)氣候條件或相似氣候條件下的多抗冬瓜的選育方法，包括種子處理、人工接種病菌，種苗篩選等步驟。本方法高效、快捷、穩(wěn)定性高，可以快速得到對(duì)多種病害具有抗性的冬瓜，選育成功率高，對(duì)提高冬瓜抗性育種水平、擴(kuò)大生產(chǎn)有著重要的作用。
文檔編號(hào)A01H3/00GK102283107SQ20111018667
公開(kāi)日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月5日
發(fā)明者何曉明, 劉文睿, 姜麗, 彭慶務(wù), 謝大森, 趙芹 申請(qǐng)人:廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所