專利名稱：一種抗病甘藍(lán)的育種及制種方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種甘藍(lán)的育種和制種方法，尤其是一種抗病甘藍(lán)的育種及制種方法，屬于植物育種制種技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
甘藍(lán)是我國各地普遍種植的一種重要蔬菜，在蔬菜栽培和供應(yīng)中占有重要地位。 到目前為止，雖然我國甘藍(lán)抗病育種工作取得了很大進(jìn)展和顯著的成果，但從當(dāng)前蔬菜生產(chǎn)和市場需求來看，以及與發(fā)達(dá)國家的甘藍(lán)遺傳育種先進(jìn)技術(shù)相比，還存在一定的差距。近年來隨著消費(fèi)需求的變化，設(shè)施栽培和反季節(jié)栽培面積逐年擴(kuò)大，這對甘藍(lán)品種提出了更高的要求。如抗病性方面，就夏秋甘藍(lán)而言，北方主要要求抗黑腐病、病毒病、霜霉病及干燒心等，而南方則主要要求抗黑腐病、根腫病、軟腐病、菌核病等(見參考文獻(xiàn)司軍，李成瓊，任雪松.我國甘藍(lán)抗病育種研究進(jìn)展和展望.北方園藝，2001 (1):1(Γ12)。 目前利用自交不親和系配制甘藍(lán)雜交種常用的方法和技術(shù)路線是根據(jù)雜種優(yōu)勢和抗病育種原理，通過連續(xù)多代自交分離、定向選擇，選育出穩(wěn)定的甘藍(lán)自交不親和系，再配制出雜交種，也就是在夏秋季露地栽培條件下，對后代群體進(jìn)行田間種植比較，選擇抗逆、 抗病性強(qiáng)，農(nóng)藝性狀優(yōu)良的單株，到翌年春季進(jìn)行自交留種，如此連續(xù)多代的自交分離和定向選擇，育成穩(wěn)定的自交不親和系，再利用這些穩(wěn)定的自交不親和系進(jìn)行配合力測定。 由于育種過程中對后代群體的品比、鑒定篩選是在露地栽培條件下進(jìn)行，雖然在自然條件下，病原種類多而復(fù)雜，甘藍(lán)材料易受多種病原浸染，但病害發(fā)生及發(fā)生輕重還與溫濕度條件關(guān)系很大，因此露地栽培條件下存在著抗逆性、抗病性不明顯，品質(zhì)性狀不突出等問題。雖然也有通過苗期人工接種方法，對甘藍(lán)材料進(jìn)行抗病性鑒定，但這樣的方法不僅費(fèi)工，麻煩，而且往往只能接種一種或兩種病害，治標(biāo)不治本，目前有報(bào)道的甘藍(lán)人工接種最多只對蕪菁花葉病毒(TuMV)、黃瓜花葉病毒(CMV)和黑腐病這3種病害的抗性聯(lián)合鑒定方法進(jìn)行了研究與利用。而且人工接種的抗病性表現(xiàn)常受到接種方法、病原物濃度、溫濕度、苗齡等影響，有時尚不能確切反映成株期的抗病性(參考文獻(xiàn)李樹德主編. 中國主要蔬菜抗病育種進(jìn)展[C].北京科學(xué)出版社，1995. 613)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，提出一
種抗病甘藍(lán)的育種方法及其種子的培育方法，育成具有較強(qiáng)抗病性的品種。本發(fā)明通過以下基本技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種抗病甘藍(lán)的育種方法，包括以下步驟 步驟一，選育母本，由“H-60”甘藍(lán)品種在大棚中經(jīng)過連續(xù)5代自交純化、定向選擇，得
到的穩(wěn)定自交不親和系(99-2-1-3-5)作為母本；
步驟二，選育父本，由“強(qiáng)力50”甘藍(lán)品種在大棚中經(jīng)過連續(xù)5代自交純化、定向選擇， 得到的穩(wěn)定自交不親和系(02-7)作為父本；
步驟三，培育雜交種，將所述母本(99-2-1-3-5)與所述父本(02-7)采取空間隔離、人工授粉進(jìn)行配種，得到抗病甘藍(lán)的雜交種子。進(jìn)一步地，所述大棚內(nèi)的相對濕度控制在75%_85%，溫度為22°C -30°C。 所述自交方式為春季花期、蕾期自交，每代自交后的種子于秋季播種育苗，再定植于大棚中進(jìn)行品比鑒定，從中篩選出生長勢旺、抗病性強(qiáng)、農(nóng)藝性狀好的單株留種。所述步驟一和步驟二分別在第3代自交純化、定向選擇之后，進(jìn)行品質(zhì)測定和自交不親和指數(shù)測定，選擇總糖含量彡3. 50%、VC含量彡410. 0 mg .kg—1、粗蛋白含量彡1. ；35%、粗纖維含量彡0. 55%和花期自交親和指數(shù)< 1、蕾期自交親和指數(shù)> 5的單株繼續(xù)進(jìn)行自交純化、定向選擇。本發(fā)明對上述抗病甘藍(lán)的雜交制種方法，包括以下步驟
步驟一，8月上旬，將所述母本和父本(99-2-1-3-5和02-7)播種育苗； 步驟二，待出苗后搭建蔭棚，防暴雨、烈日；
步驟三，當(dāng)苗具有7-8片葉子時，將所述母本和父本按行比1 :1定植，每畝定植總株數(shù)為 2000 士 20 株；
步驟四，在苗期至開花期，拔除不符合親本典型特征的雜株、弱株； 步驟五，開花期每畝放蜜蜂2 — 3箱；
步驟六，待70%種莢變黃干枯時，在晨露未干時收獲，后熟2 3天后，曬干、脫粒，脫下的種子及時晾曬、揚(yáng)凈。
本發(fā)明在甘藍(lán)的育種階段人為創(chuàng)造多種病害易發(fā)病的溫、濕度條件，在此環(huán)境中選育出的雜交種不僅抗病性強(qiáng)，而且可根據(jù)育種目標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性狀選擇，對于選配抗病及多育種目標(biāo)品種能夠起到快速、準(zhǔn)確、高效的目的。相對于常規(guī)育種方法，由被動測定品質(zhì)優(yōu)劣轉(zhuǎn)變?yōu)橹鲃雍Y選優(yōu)良品種，可控性高；在抗病性鑒定方面，本發(fā)明的方法相較于人工接種的方法更加全面準(zhǔn)確、簡便易行。


下面結(jié)合附圖對本產(chǎn)品作進(jìn)一步的說明。圖1為本發(fā)明一個雜交實(shí)施例的過程模式圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例一
材料H-60 (來源日本野崎采種場，鎮(zhèn)江瑞繁農(nóng)藝有限公司有售)，強(qiáng)力50 (來源日本小林公司，武漢九頭鳥種業(yè)公司有售)。本實(shí)施例的過程模式見圖1，具體是按以下步驟育種的
步驟一，選育母本，育種初始1998年秋季將H-60甘藍(lán)播種、栽培，從中選擇長勢好、 葉球圓整、抗病性強(qiáng)的優(yōu)良單株進(jìn)行留種，在翌年春季進(jìn)行花期和蕾期自交獲得種子，1999 年秋季將獲得的種子播種，然后定植于大棚內(nèi)，共定植了 42株，人為控制棚內(nèi)相對濕度在 75%-85%，溫度為22°C -30°C。成株期從42株中選擇長勢好、葉球圓整、抗病性強(qiáng)的優(yōu)良單株繼續(xù)留種，翌年春季進(jìn)行花期和蕾期自交獲得種子，當(dāng)年秋季再將獲得的種子播種， 然后定植于大棚內(nèi)，進(jìn)行品比、鑒定，選擇優(yōu)良單株繼續(xù)留種，如此連續(xù)多代自交純化、定向選擇，在第3代基本性狀穩(wěn)定后，進(jìn)行品質(zhì)測定，并結(jié)合留種進(jìn)行自交不親和性測定，選擇品質(zhì)好，即總糖含量彡3. 50%，VC含量彡410. 0 mg · kg_S粗蛋白含量彡1. ；35%，粗纖維含量< 0. 55%，且花期自交親和指數(shù)< 1，而蕾期自交親和指數(shù)> 5、的單株繼續(xù)自交純化、定向選擇，到第五代選育出農(nóng)藝性狀好、抗病性強(qiáng)、自交不親和性穩(wěn)定的自交不親和系 99-2-1-3-5，該自交不親和系99-2-1-3-5的植株開展度52 M cm,外葉數(shù)14 15片，長勢旺，耐熱性、耐濕性強(qiáng)，較抗病，葉球扁圓，整齊，結(jié)球緊實(shí)，單球重1. 15 kg左右，總糖含量 3. 57%，VC 422. 3 mg · kg—1，粗蛋白1. 39%，粗纖維0. 54%，外觀整齊。全生育期60天左右， 花期和蕾期自交親和指數(shù)分別為0. 35和9. 6 (上述自交純化、定向選擇的含義參見本領(lǐng)域工具書，此處不展開描述；上述農(nóng)藝性狀是指外葉數(shù)、開展度、株高、葉球顏色、球形、中心柱長和寬、葉球長和寬、單球重、緊實(shí)度)。步驟二，選育父本，育種初始1998年秋季將強(qiáng)力50甘藍(lán)播種、栽培，從中選擇長勢好、葉球圓整、抗病性強(qiáng)的優(yōu)良單株進(jìn)行留種，在翌年春季進(jìn)行花期和蕾期自交獲得種子， 1999年秋季將獲得的種子播種，然后定植于大棚內(nèi)，共定植了 55株，人為控制棚內(nèi)相對濕度在75%-85%，溫度為22°C -30°C。成株期從55株中選擇長勢好、葉球圓整、抗病性強(qiáng)的優(yōu)良單株繼續(xù)留種，翌年春季進(jìn)行花期和蕾期自交獲得種子，當(dāng)年秋季再將獲得的種子播種， 然后定植于大棚內(nèi)，進(jìn)行品比、鑒定，選擇優(yōu)良單株繼續(xù)留種，如此連續(xù)多代自交純化、定向選擇，在第3代基本性狀穩(wěn)定后，進(jìn)行品質(zhì)測定，并結(jié)合留種進(jìn)行自交不親和性測定，選擇花期自交親和指數(shù)彡1，而蕾期自交親和指數(shù)彡5、且品質(zhì)好(總糖含量彡3.50%，VC含量彡410. 0 mg · kg—1，粗蛋白含量彡1. 35%，粗纖維含量彡0. 55%)的單株繼續(xù)自交純化、定向選擇，到第五代選育出農(nóng)藝性狀好、抗病性強(qiáng)、自交不親和性穩(wěn)定的自交不親和系，命名為 02-7，作為父本，該自交不親和系02-7的植株開展度50 52 cm，外葉數(shù)12 13片，抗逆性強(qiáng)，抗病毒病、黑腐病，耐熱性、耐濕性強(qiáng)、不易裂球、較高產(chǎn)，葉球高扁圓，平均單球重1. 1 kg，總糖含量3. 60%，VC 436.5 mg.kg—1，粗蛋白1. 37%，粗纖維0. 51%。全生育期56天?；ㄆ诤屠倨谧越挥H和指數(shù)分別為0. 48和11. 9 ；
步驟三，培育雜交種，2004年春季，選擇已穩(wěn)定、優(yōu)良甘藍(lán)自交不親和系99-2-1-3-5 和02-7配制雜交組合，進(jìn)行配合力測定，經(jīng)試種品比，該組合的正反交均表現(xiàn)抗逆、抗病性強(qiáng)，品質(zhì)好，產(chǎn)量高。按以下方法對上述雜交種進(jìn)行制種
步驟一，8月上旬，將父、母本02-7和99-2-1-3-5進(jìn)行播種育苗； 步驟二，待出苗后搭建蔭棚，防暴雨、烈日；
步驟三，苗具7-8葉時，父母本按行比1 :1定植，每畝定植總株數(shù)為2000士20株； 步驟四，在苗期至開花期，嚴(yán)格檢查，拔除不符合親本典型特征的雜株、弱株；(上述不符合親本典型特征是指株型、葉形、葉色、葉緣波紋、球形、花期與親本不一致)； 步驟五，開花期每畝放蜜蜂2 — 3箱，提高雜交率和雜交種產(chǎn)量。步驟六，待70%種莢變黃干枯時，即可在晨露未干時收獲，后熟2 3天后，曬干、脫粒，脫下的種子及時晾曬、揚(yáng)凈。將上述所得甘藍(lán)參加了省級品種鑒定試驗(yàn)，定名為瑞甘60，該品種2010年已通過江蘇省省級品種鑒定，審定編號蘇鑒甘藍(lán)201002，其主要農(nóng)藝性狀及特征特性如下
瑞甘60植株生長勢較旺盛，耐暑、耐濕性強(qiáng)，抗逆性強(qiáng)，抗病毒病、黑腐病。株高四cm 左右，開展度51 cm左右，外葉數(shù)15 16片，葉色淺綠，倒卵圓形，葉球高扁圓，結(jié)球緊實(shí)， 綠色，質(zhì)地脆甜，市場性高，耐裂球，單球重1.3 kg左右，球高12.5 cm左右，橫徑17.5 cm左右，中心柱長6. 5 cm左右，中心柱寬2. 7 cm左右。全生育期94 d左右。667m2產(chǎn)量達(dá)到 4000 kg 左右。為了與人工接種鑒定方法進(jìn)行比較，2003-2004年對兩親本材料進(jìn)行了苗期抗黑腐病、軟腐病和根腫病3種病害的人工接種鑒定。甘藍(lán)三種病害人工接種抗性鑒定方法詳見參考文獻(xiàn)1、張恩慧，程永安，許忠民等.甘藍(lán)3種病害抗源篩選及抗病品種選育研究·西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，29 (6):30-33中1.1病原的分離提純-1.2苗期抗性鑒定方法和程序；2、司軍，李成瓊，宋洪元等.結(jié)球甘藍(lán)對根腫病的抗性鑒定與評價(jià).西南大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，31 (6)26-31中1.2方法。此處不展開描述。結(jié)果見表1，可見，兩親本材料對黑腐病、軟腐病和根腫病3種病害的抗性均較強(qiáng)，且人工接種與田間大棚條件下抗病性鑒定趨勢一致。表1.親本材料人工接種與田間大棚抗病性鑒定
權(quán)利要求
1.一種抗病甘藍(lán)的育種方法，包括以下步驟步驟一，選育母本，由“H-60”甘藍(lán)品種在大棚中經(jīng)過連續(xù)5代自交純化、定向選擇，得到的穩(wěn)定自交不親和系(99-2-1-3-5)作為母本；步驟二，選育父本，由“強(qiáng)力50”甘藍(lán)品種在大棚中經(jīng)過連續(xù)5代自交純化、定向選擇， 得到的穩(wěn)定自交不親和系(02-7)作為父本；步驟三，培育雜交種，將所述母本(99-2-1-3-5)與所述父本(02-7)采取空間隔離、人工授粉進(jìn)行配種，得到抗病甘藍(lán)的雜交種子。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述抗病甘藍(lán)的育種方法，其特征在于所述大棚內(nèi)的相對濕度控制在 75%-85%，溫度為 22°C -30°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗病甘藍(lán)的育種方法，其特征在于所述自交方式為春季花期、 蕾期自交，每代自交后的種子于秋季播種育苗，再定植于大棚中進(jìn)行品比鑒定，從中篩選出生長勢旺、抗病、農(nóng)藝性狀好的單株留種。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗病甘藍(lán)的育種方法，其特征在于所述步驟一和步驟二分別在第3代自交純化、定向選擇之后，進(jìn)行品質(zhì)測定和自交不親和指數(shù)測定，選擇總糖含量彡3. 50%、VC含量彡410. 0 mg .kg—1、粗蛋白含量彡1. ；35%、粗纖維含量彡0. 55%和花期自交親和指數(shù)< 1、蕾期自交親和指數(shù)> 5的單株繼續(xù)進(jìn)行自交純化、定向選擇。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述抗病甘藍(lán)的制種方法，包括以下步驟步驟一，8月上旬，將所述母本和父本(99-2-1-3-5和02-7)播種育苗；步驟二，待出苗后搭建蔭棚，防暴雨、烈日；步驟三，當(dāng)苗具有7-8片葉子時，將所述母本和父本按行比1 :1定植，每畝定植總株數(shù)為 2000 士 20 株；步驟四，在苗期至開花期，拔除不符合親本典型特征的雜株、弱株；步驟五，開花期每畝放蜜蜂2 — 3箱；步驟六，待70%種莢變黃干枯時，在晨露未干時收獲，后熟2 3天后，曬干、脫粒，脫下的種子及時晾曬、揚(yáng)凈。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種甘藍(lán)的育種和制種方法，尤其是一種抗病甘藍(lán)的育種及制種方法，屬于植物育種培育技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明在甘藍(lán)的育種階段創(chuàng)造易發(fā)病的環(huán)境條件，選育出耐高溫、高濕，抗病性強(qiáng)的雜交種，相較于常規(guī)育種方法，由被動測定品質(zhì)優(yōu)劣轉(zhuǎn)變?yōu)橹鲃雍Y選優(yōu)良品種，可控性高。在抗病性鑒定方面，相較于人工接種的方法更加全面準(zhǔn)確、簡便易行。
文檔編號A01H1/02GK102283102SQ201110193219
公開日2011年12月21日 申請日期2011年7月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月11日
發(fā)明者吳國平, 姚悅梅, 孫春青, 戴忠良, 毛忠良, 潘永飛, 潘躍平, 王建華, 秦文斌, 肖燕 申請人:江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所, 鎮(zhèn)江瑞繁農(nóng)藝有限公司