專利名稱：一種報春苣苔葉柄扦插誘導不定芽和不定根的繁育方法
技術領域：
本發(fā)明屬于植物繁育技術領域，具體涉及一種報春苣苔葉柄扦插誘導不定芽和不定根的繁育方法。
背景技術：
報春苣苔(Primulina tabacum Hance)為苦苣苔科多年生小型草本植物，自1881 年美國人亨利在粵北連州連江流域的石壁上發(fā)現(xiàn)了報春苣苔這一珍稀植物后，它又神秘消失了 125年。直到前幾年，國內有關媒體報道了在連州再次發(fā)現(xiàn)了報春苣苔這一瀕危保護植物。它的發(fā)現(xiàn)對研究嶺南古氣候、土壤和動植物演變無疑具有重大的學術價值。由于該物種生存環(huán)境要求特殊、地理分布狹小、種群數(shù)量很少，已被國家確定為中國第一批重點一級保護的珍稀瀕危保護植物。以報春苣苔的葉柄扦插進行繁育生根方面的技術，國內外均未見報道。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種報春苣苔葉柄扦插誘導不定芽和不定根的繁育方法，利用本方法可以繁育得到不定芽和不定根，再將不定芽分株后移栽，短時間內可獲得大批的小苗，進而長成植株，從而為更好的保護和利用該珍稀瀕危植物，建立了一套簡單、快速、有效的繁殖體系和植株再生體系，有效的保護和繁殖該國家第一批一級物種，使之解除瀕危狀態(tài)，為今后更進一步保護和利用該物種奠定良好的基礎。本發(fā)明的報春苣苔葉柄扦插誘導不定芽和不定根的繁育方法，其特征在于，包括以下步驟在每年的2 4月份，取報春苣苔(Primulina tabacum Hance)的0. 5 IOcm 長的帶葉片的葉柄作為外植體；將外植體浸泡于植物生長調節(jié)劑中IOmin 2h，然后再扦插于基質中，或者先將外植體扦插于基質中，然后再往基質噴灑植物生長調節(jié)劑5 100ml/1200cm2l 3次；外植體的扦插生長環(huán)境為遮陽、通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度為18 32°C，相對濕度為50 95%，澆水保濕，直至長出不定芽和不定根；所述的基質為河沙、珍珠巖和蛭石中的兩種或三種的混合物；所述的植物生長調節(jié)劑是指含有下述三種濃度的物質6-芐基嘌呤(BA)I 10mg/L、吲哚-3- 丁酸(IBA) 1 10mg/L和萘乙酸(NAA) 1 10mg/L中的一種或兩種，或者所述的植物生長調節(jié)劑為吲哚乙酸(IAA)I 10mg/L。所述的基質優(yōu)選為河沙、珍珠巖和蛭石中的兩種或三種按體積比1 1或 1:1: 1混合。在河沙和珍珠巖(1:1，ν/ν)基質上，葉柄用ΙΒΑ1. Omg/L浸泡30分鐘后再插入基質后培養(yǎng)50 60天后，每個葉柄最多可繁殖8. 8個新的不定芽，其不定根的誘導率可達 90%以上，將不定芽進行分株后，移栽到沙石、珍珠巖和蛭石作為基質的沙盆中壯苗，能保證較高的成活率，成活率可達90%以上，然后長成小苗，進而可長成報春苣苔植株。一般三個月內就可以由一個葉柄外植體誘導出多個新的植株。本發(fā)明通過選擇合適的外植體，再經(jīng)植物生長調節(jié)劑處理，扦插于合適的基質中， 在合適的條件下培養(yǎng)，而誘導出不定芽和不定根，經(jīng)分株移栽長成小苗進而長成植株。本發(fā)明能簡單方便、快速有效，在短時間內繁殖出大批的小苗，進而長成植株。從而為更好的保護和利用該珍稀瀕危植物，建立了一套簡單、快速、有效的繁殖體系和植株再生體系，有效的保護和繁殖該國家第一批一級物種，使之解除瀕危狀態(tài)，為今后更進一步保護和利用該物種奠定良好的基礎。
具體實施例方式以下實施例是對本發(fā)明的進一步說明，而不是對本發(fā)明的限制。實施例1 在2月觀號，取成年報春苣苔2. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以1. Omg Γ1 IBA水溶液浸泡處理30分鐘后，將該葉柄斜扦插入河沙、蛭石和珍珠巖 (1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕，培養(yǎng)50天后，生根率為 90%，不定芽平均數(shù)為8. 8個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠巖(1 1 1，ν/ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例2:在3月10號，取報春苣苔3. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，先在河沙和珍珠巖(1 l,v/v)混合的基質中扦插，葉片立于基質面上，對每個扦插的盆(長X寬X高= 30cmX40cmX10cm)進行噴灑l.Omg廠1 IBA水溶液IOml共兩次。扦插生長環(huán)境為遮陽、 四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95% 之間，相隔兩天澆水以保濕。培養(yǎng)55天后，生根率為65%，平均誘導不定芽4.5個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石和珍珠巖(1 1，ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下， 20d后成活率為90%。實施例3:在4月15號，取報春苣苔5. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 5. Omgr1BA水溶液浸泡處理1小時后，然后將該葉柄扦插于河沙和珍珠巖(1 1，ν/ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，每天澆水以保濕，培養(yǎng)60天后，生根率為51%，存活的葉片平均有8. 3 個不定芽。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石和珍珠巖(1 1，ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例4:在4月15號，取報春苣苔0. 5cm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 LOmgr1BA水溶液浸泡處理2小時后，然后將該葉柄扦插于河沙和珍珠巖(1 1，ν/ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，每天澆水以保濕，培養(yǎng)60天后，生根率為63%，存活的葉片平均有6. 0 個不定芽。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石和珍珠巖(1 1，ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例5:在3月15號，取報春苣苔IOcm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 LOmgr1IAA水溶液浸泡處理IOmin后，然后將該葉柄扦插于河沙和珍珠巖(1 l,v/v)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，每天澆水以保濕，培養(yǎng)60天后，生根率為70%，存活的葉片平均有5. 9 個不定芽。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石和珍珠巖(1 1，ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例6 在3月10號，取報春苣苔2. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 10. Omgr1IAA水溶液浸泡處理10分鐘后，將該葉柄斜插入河沙、蛭石和珍珠巖(1 1 1， ν/ν/ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間， 相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕，培養(yǎng)50天后，生根率為72%，不定芽平均數(shù)為6. 6個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠巖 (1:1: 1，ν/ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例7在3月10號，取報春苣苔5. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 l.Omg T1NAA水溶液浸泡處理10分鐘后，將該葉柄斜插入河沙、蛭石和珍珠巖(1 1 1， ν/ν/ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間， 相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕，培養(yǎng)50天后，生根率為45%，不定芽平均數(shù)為3.0個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠巖 (1:1: 1，ν/ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例8在3月10號，取報春苣苔5. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 10. OmgL-1IBA水溶液浸泡處理池后，將該葉柄斜插入河沙、蛭石和珍珠巖(1 1 l,v/v/ ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕，培養(yǎng)50天后，生根率為83%，不定芽平均數(shù)為8. 5個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠巖(1 1 1， ν/ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例9在3月10號，取報春苣苔8. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 l.Omg L-1BA水溶液浸泡處理池后，將該葉柄斜插入河沙、蛭石和珍珠巖(1 1 1, ν/ν/ν) 混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕，培養(yǎng)50天后，生根率為80%，不定芽平均數(shù)為7. 9個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠巖(1 1 1， ν/ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例10在3月10號，取報春苣苔4. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 10. Omgr1NAA水溶液浸泡處理IOmin后，將該葉柄斜插入河沙、蛭石和珍珠巖(1 1 1， ν/ν/ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間， 相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕，培養(yǎng)50天后，生根率為70%，不定芽平均數(shù)為6. 6個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠巖 (1:1: 1，ν/ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例12在3月10號，取報春苣苔6. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 1. Omg U'M+8. Omg L^1IBA水溶液浸泡處理IOmin后，將該葉柄斜插入河沙、蛭石和珍珠巖 (1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕，培養(yǎng)50天后，生根率為 23%，不定芽平均數(shù)為0.6個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠巖(1 1 1，ν/ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例13在3月10號，取報春苣苔5. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 5. Omg ^ΒΑ+δ. Omg LlBA水溶液浸泡處理2小時后，將該葉柄斜插入河沙、蛭石和珍珠巖 (1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕，培養(yǎng)50天后，生根率為 44%，不定芽平均數(shù)為5. 9個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠巖(1 1 1，ν/ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例14在3月10號，取報春苣苔5. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 9. Omg L^BA+l. Omg L^1NAA水溶液浸泡處理1小時后，將該葉柄斜插入河沙、蛭石和珍珠巖 (1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕，培養(yǎng)50天后，生根率為 50%，不定芽平均數(shù)為4. 9個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠巖(1 1 1，ν/ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例15在3月10號，取報春苣苔7. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 9. Omg L^1IBA+!. Omg L-1NAA水溶液浸泡處理30min后，將該葉柄斜插入河沙、蛭石和珍珠巖(1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕，培養(yǎng)50天后，生根率為 54 %，不定芽平均數(shù)為62個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠巖(1:1: 1，ν/ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例16在3月10號，取報春苣苔9. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，將外植體先以 3. Omg ^ΒΑ+δ. Omg L^1NAA水溶液浸泡處理90min后，將該葉柄斜插入河沙、蛭石和珍珠巖 (1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基質(裝于盆中長X寬X高=30cmX 40cmX IOcm)中，葉片立于基質面上，扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕，培養(yǎng)50天后，生根率為 45%，不定芽平均數(shù)為5. 1個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠巖(1 1 1，ν/ν/ν)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例17 在3月10號，取報春苣苔3. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，先在河沙和珍珠巖(1 1，ν/ν)混合的基質中扦插，葉片立于基質面上，對每個扦插的盆(長X寬X高 =30cmX 40cmX IOcm)中的基質上進行噴灑5. Omg L4BA水溶液50ml共三次。扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在 50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕。培養(yǎng)55天后，生根率為61%，平均誘導不定芽3. 5 個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石和珍珠巖(1 l,v/v)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例18 在3月10號，取報春苣苔4. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，先在蛭石和珍珠巖(1 l,v/v)混合的基質中扦插，葉片立于基質面上，對每個扦插的盆(長X寬X高= 30cmX40cmX IOcm)中的基質進行噴灑5. Omg IZ1NAA水溶液IOOml —次。扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕。培養(yǎng)55天后，生根率為61%，平均誘導不定芽3. 5個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石和珍珠巖(1 l，v/v)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。實施例19 在3月10號，取報春苣苔3. Ocm長的帶葉片的葉柄作為外植體，先在河沙和珍珠巖(1 l,v/v)混合的基質中扦插，葉片立于基質面上，對每個扦插的盆(長X寬X高= 30cmX 40cmX IOcm)中的基質進行噴灑1. Omg LlBA水溶液5ml共兩次。扦插生長環(huán)境為遮陽、四面通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度在18 32°C之間，相對濕度控制在50 95%之間，相隔兩天澆水以保濕。培養(yǎng)55天后，生根率為65%，平均誘導不定芽4. 5個。葉柄誘導的叢生不定芽經(jīng)分成單個芽，移栽于沙石和珍珠巖(1 l，v/v)的基質中，常規(guī)條件下，20d后成活率為90%。
權利要求
1.一種報春苣苔葉柄扦插誘導不定芽和不定根的繁育方法，其特征在于，包括以下步驟在每年的2 4月份，取報春苣苔(Primulina tabacum Hance)的0. 5 IOcm長的帶葉片的葉柄作為外植體；將外植體浸泡于植物生長調節(jié)劑中IOmin 池，然后再扦插于基質中，或者先將外植體扦插于基質中，然后再往基質噴灑植物生長調節(jié)劑5 100ml/1200cm2l 3次；外植體的扦插生長環(huán)境為遮陽、通風、透氣的溫室大棚中，控制環(huán)境溫度為18 32°C，相對濕度為50 95%，澆水保濕，直至長出不定芽和不定根； 所述的基質為河沙、珍珠巖和蛭石中的兩種或三種的混合物； 所述的植物生長調節(jié)劑是指含有下述三種濃度的物質6-芐基嘌呤(BA)I 10mg/L、 吲哚-3- 丁酸(IBA) 1 10mg/L和萘乙酸(NAA) 1 10mg/L中的一種或兩種，或者所述的植物生長調節(jié)劑為吲哚乙酸(IAA)I 10mg/L。
2.根據(jù)權利要求1所述的報春苣苔葉柄扦插誘導不定芽和不定根的繁育方法，其特征在于，所述的基質為河沙、珍珠巖和蛭石中的兩種或三種按體積比1 1或1 1 1混合O
全文摘要
本發(fā)明公開了一種報春苣苔葉柄扦插誘導不定芽和不定根的繁育方法。本發(fā)明通過選擇合適的外植體，再經(jīng)植物生長調節(jié)劑處理，扦插于合適的基質中，在合適的條件下培養(yǎng)，而誘導出不定芽和不定根，經(jīng)分株移栽長成小苗進而長成植株。本發(fā)明能簡單方便、快速有效，在短時間內繁殖出大批的小苗，進而長成植株。從而為更好的保護和利用該珍稀瀕危植物，建立了一套簡單、快速、有效的繁殖體系和植株再生體系，有效的保護和繁殖該國家第一批一級物種，使之解除瀕危狀態(tài)，為今后更進一步保護和利用該物種奠定良好的基礎。
文檔編號A01G31/00GK102405755SQ201110269949
公開日2012年4月11日 申請日期2011年9月13日 優(yōu)先權日2011年9月13日
發(fā)明者呂金鳳, 張新華, 胡玉姬, 馬國華 申請人:中國科學院華南植物園