專利名稱：一種從枇杷葉中提取熊果酸制備飼料添加劑的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從枇杷葉中提取熊果酸制備飼料添加劑的方法，屬動(dòng)物科學(xué)領(lǐng)域和天然產(chǎn)物分離提取技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
抗生素在飼料中的應(yīng)用創(chuàng)造了養(yǎng)殖業(yè)和飼料工業(yè)的革命。規(guī)模養(yǎng)殖在全世界范圍內(nèi)得到了迅速發(fā)展，動(dòng)物的生產(chǎn)數(shù)量和飼料轉(zhuǎn)化率得到大幅度提高。但是，正如所有工業(yè)文明的成果都有它的負(fù)面影響一樣，飼料中抗生素的長期、大量的濫用也產(chǎn)生嚴(yán)重的負(fù)面效應(yīng)。現(xiàn)代科學(xué)研究表明，動(dòng)物食品中抗生素殘留，可能導(dǎo)致人體DNA結(jié)構(gòu)發(fā)生突變，從而造成致殘、致畸、致癌等嚴(yán)重后果，對人類健康構(gòu)成極大危害。隨著人們對抗生素殘留量所造成的危害越來越深刻的認(rèn)識(shí)，開發(fā)無污染、無殘留、無副作用的綠色飼料添加劑已成為當(dāng)前畜牧業(yè)發(fā)展的戰(zhàn)略方向。其中，最簡便可行的方法就是在飼糧中添加天然物質(zhì)或天然物質(zhì)提取物，不僅資源豐富，而且價(jià)格低廉，一經(jīng)研制成功則有廣闊的市場。熊果酸不是抗生素，它來源于植物提取物，其具有多種生物學(xué)功能，使其成為一種具有廣譜生物學(xué)活性的天然物質(zhì)，可以提高機(jī)體的免疫功能，在畜牧獸藥上具有廣泛的應(yīng)用前景。這對真正意義上減少抗生素等藥物添加劑在飼料中的使用，推進(jìn)動(dòng)物飼料“無抗生素化”或盡量少用抗生素的進(jìn)程，保證畜產(chǎn)品的安全和我國畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展具有重大意義。因此，植物提取物熊果酸作為防病促生長的綠色環(huán)保飼料添加劑應(yīng)用于畜牧業(yè)將具有廣闊的前景。在熊果酸分離純化技術(shù)中，多采用方法有溶劑提取法，超聲輔助提取法，以及超臨界萃取工藝，在熊果酸的分離純化方面，大多通過用石油醚結(jié)合活性炭脫色工藝，在經(jīng)過重結(jié)晶能到熊果酸晶體，另外李麗等人通過堿性乙醇除雜、活性炭脫色以及大孔吸附樹脂富集結(jié)合乙醇重結(jié)晶作用得到熊果酸晶體。相廷英等人則是通過用石油醚結(jié)合活性炭脫色工藝，在經(jīng)過重結(jié)晶能到熊果酸晶體，另外李麗等人通過堿性乙醇除雜、活性炭脫色以及大孔吸附樹脂富集結(jié)合乙醇重結(jié)晶作用得到熊果酸晶體。本發(fā)明采用的集成膜分離工藝進(jìn)行脫色、除雜和濃縮，優(yōu)化了提取的工藝效率，縮短了生產(chǎn)周期，提高了有效成分的含量和純度， 節(jié)約了大量的溶劑消耗，提高了產(chǎn)品質(zhì)量，并且在整個(gè)處理過程中除乙醇外，無其他有毒有害試劑的加入。

發(fā)明內(nèi)容
設(shè)計(jì)目的本發(fā)明以枇杷葉為原料，經(jīng)過干燥，粉碎，過蹄，水煮，真空干燥，醇提， 減壓蒸餾濃縮，集成膜分離，乙醇重結(jié)晶得到高純度熊果酸純品制備新型飼料添加劑，減少抗生素等藥物添加劑在飼料中的使用。設(shè)計(jì)方案為了實(shí)現(xiàn)上述設(shè)計(jì)目的。本發(fā)明的目的是從枇杷葉中提取熊果酸制備飼料添加劑。以枇杷葉為原料，經(jīng)過干燥，粉碎，過篩，水煮，真空干燥，醇提，減壓蒸餾濃縮， 集成膜分離，乙醇重結(jié)晶得到高純度熊果酸純品制備飼料添加劑。本發(fā)明的技術(shù)方案如圖1 :(1)枇杷葉的干燥處理將枇杷葉洗凈，去除灰塵等雜質(zhì)，浙干水分，于40-60°C真空干燥，干燥至恒重；(2)粉碎與過篩將真空干燥過后的枇杷葉用中藥粉碎機(jī)粉碎，并過20-60 目篩；(3)水煮枇杷葉粉末中加入5-10倍體積水，煮沸0. 5-3h后過濾；(4)醇提將粉碎后過篩的枇杷葉粉用90%乙醇水提取，溫度為70°C，提取時(shí)間為1. 5h，重復(fù)提取3次；(5) 減壓蒸餾將醇提溶液于20-80°C減壓蒸餾，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并過篩(40目)制得熊果酸粗品，其組分圖如圖1 (a)所示；(6)集成膜處理往枇杷葉粉末中加入10-20倍體積水，進(jìn)行超濾和納濾進(jìn)行脫色、除雜、脫鹽和濃縮，超濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為1 000 一 5 0000道爾頓，納濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為150 - 1000 ； (6)重結(jié)晶將(5)所得粉末進(jìn)行重結(jié)晶處理，結(jié)晶溶劑為濃度為60-100%乙醇，結(jié)晶溫度為2-20°C，該過程重復(fù) 3-10次；(7)干燥對上述結(jié)晶晶體真空干燥后即得到熊果酸純品，其組分圖如圖2 (b)所示；(8)熊果酸(質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%-60%)與白炭黑混合制備針對不同的家禽、家畜、水產(chǎn)養(yǎng)殖制備成含熊果酸的新型飼料添加劑。技術(shù)方案一種從枇杷葉中提取熊果酸制備飼料添加劑的方法，
(1)枇杷葉的干燥處理將枇杷葉洗凈，去除灰塵等雜質(zhì)，浙干水分，于40-60°C真空干燥，干燥至恒重；
(2)粉碎與過篩將真空干燥過后的枇杷葉用中藥粉碎機(jī)粉碎，并過20-60目篩；
(3)水煮枇杷葉粉末中加入5-10倍體積水，煮沸0.5-3h后過濾；
(4)醇提將粉碎后過篩的枇杷葉粉用90%乙醇水提取，溫度為65-75°C，提取時(shí)間為 l_2h，重復(fù)提取2-4次；
(5)減壓蒸餾將醇提溶液于20-80°C減壓蒸餾，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并過篩 (40目)制得熊果酸粗品，其組分圖如圖1 (a)所示；
(6)集成膜處理往枇杷葉粉末中加入10-20倍體積水，進(jìn)行超濾和納濾進(jìn)行脫色、除雜、脫鹽和濃縮，超濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為1 000 — 5 0000道爾頓，操作壓力設(shè)為 5-30bar，溫度為20-60°C，膜通量為10_30L/hm2，納濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為150 — 1000 ；
變體積和恒定體積操作模式，操作壓力設(shè)為8-2^ar，溫度為25-50°C，膜通量為 8-25L/hm2 ；
(7)重結(jié)晶將(5)所得粉末進(jìn)行重結(jié)晶處理，結(jié)晶溶劑為濃度為60-100%乙醇，結(jié)晶溫度為2-20°C，該過程重復(fù)3-10次；
(8)干燥對上述結(jié)晶晶體真空干燥后即得到熊果酸純品，其組分圖如圖2(b)所示；
(9)熊果酸(質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%-60%)與白炭黑混合制備針對不同的家禽、家畜、水產(chǎn)養(yǎng)殖制備成含熊果酸的新型飼料添加劑。本發(fā)明與背景技術(shù)相比，一是采用的集成膜分離工藝進(jìn)行脫色、除雜和濃縮，優(yōu)化了提取的工藝效率，縮短了生產(chǎn)周期，提高了有效成分的含量和純度，節(jié)約了大量的溶劑消耗，提高了產(chǎn)品質(zhì)量，并且在整個(gè)處理過程中除乙醇外，無其他有毒有害試劑的加入；二是熊果酸不是抗生素，它來源于植物提取物，其具有多種生物學(xué)功能，使其成為一種具有廣譜生物學(xué)活性的天然物質(zhì)，可以提高機(jī)體的免疫功能，在畜牧獸藥上具有廣泛的應(yīng)用前景。


圖1集成膜分離提取結(jié)合重結(jié)晶技術(shù)制得熊果酸的工藝流程圖。圖2是枇杷葉中熊果酸提取物的粗品及最終產(chǎn)品的液相色譜圖一。圖3是枇杷葉中熊果酸提取物的粗品及最終產(chǎn)品的液相色譜圖一。圖2和3中，液相條件C18柱，甲醇水=9:1，檢測波長210nm，柱溫30°C，圖中峰 1為熊果酸。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 一種從枇杷葉中提取熊果酸制備飼料添加劑的方法，(1)枇杷葉的干燥處理將枇杷葉洗凈，去除灰塵等雜質(zhì)，浙干水分，于40-60°C真空干燥，干燥至恒重；(2)粉碎與過篩將真空干燥過后的枇杷葉用中藥粉碎機(jī)粉碎，并過20-60目篩；(3)水煮枇杷葉粉末中加入5-10倍體積水，煮沸0. 5-3h后過濾；(4)醇提將粉碎后過篩的枇杷葉粉用 90%乙醇水提取，溫度為65-75°C，提取時(shí)間為l_2h，重復(fù)提取2_4次；(5)減壓蒸餾將醇提溶液于20-80°C減壓蒸餾，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并過篩(40目)制得熊果酸粗品， 其組分圖如圖1 (a)所示；(6)集成膜處理往枇杷葉粉末中加入10-20倍體積水，進(jìn)行超濾和納濾進(jìn)行脫色、除雜、脫鹽和濃縮，超濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為1 000 — 5 0000道爾頓，操作壓力設(shè)為5-30bar，溫度為20-60°C，膜通量為10_30L/hm2，納濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為150 - 1000 ；變體積和恒定體積操作模式，操作壓力設(shè)為8-25l3ar，溫度為 25-500C，膜通量為8-25L/hm2 ;(7)重結(jié)晶將(5)所得粉末進(jìn)行重結(jié)晶處理，結(jié)晶溶劑為濃度為60-100%乙醇，結(jié)晶溫度為2-20°C，該過程重復(fù)3-10次；(8)干燥對上述結(jié)晶晶體真空干燥后即得到熊果酸純品，其組分圖如圖2 (b)所示；(9)熊果酸(質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%-60%) 與白炭黑混合制備針對不同的家禽、家畜、水產(chǎn)養(yǎng)殖制備成含熊果酸的新型飼料添加劑。實(shí)施例2 在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上，(1)枇杷葉的干燥處理將枇杷葉洗凈，去除灰塵等雜質(zhì)，浙干水分，于40°C真空干燥，干燥至恒重；(2)粉碎與過篩將真空干燥過后的枇杷葉用中藥粉碎機(jī)粉碎，并過20目篩；(3)水煮枇杷葉粉末中加入5倍體積水，煮沸0. 5h后過濾；(4)醇提將粉碎后過篩的枇杷葉粉用90%乙醇水提取，溫度為65°C，提取時(shí)間為lh， 重復(fù)提取2次；(5)減壓蒸餾將醇提溶液于20°C減壓蒸餾，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并過篩(40目)制得熊果酸粗品，其組分圖如圖1 (a)所示；(6)集成膜處理往枇杷葉粉末中加入10倍體積水，進(jìn)行超濾和納濾進(jìn)行脫色、除雜、脫鹽和濃縮，超濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為1 000道爾頓，操作壓力設(shè)為^ar,溫度為20°C，膜通量為10L/hm2，納濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為150 ；變體積和恒定體積操作模式，操作壓力設(shè)為8bar，溫度為25°C， 膜通量為8L/hm2 ;(7)重結(jié)晶將(5)所得粉末進(jìn)行重結(jié)晶處理，結(jié)晶溶劑為濃度為60%乙醇，結(jié)晶溫度為2°C，該過程重復(fù)3次；(8)干燥對上述結(jié)晶晶體真空干燥后即得到熊果酸純品，其組分圖如圖2 (b)所示。(9)熊果酸(質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%%)與白炭黑混合制備針對不同的家禽、家畜、水產(chǎn)養(yǎng)殖制備成含熊果酸的新型飼料添加劑。實(shí)施例3 在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上，(1)枇杷葉的干燥處理將枇杷葉洗凈，去除灰塵等雜質(zhì)，浙干水分，于60°C真空干燥，干燥至恒重；(2)粉碎與過篩將真空干燥過后的枇杷葉用中藥粉碎機(jī)粉碎，并過60目篩；(3)水煮枇杷葉粉末中加入10倍體積水，煮沸后過濾；(4)醇提將粉碎后過篩的枇杷葉粉用90%乙醇水提取，溫度為75°C，提取時(shí)間為2h， 重復(fù)提取4次；(5)減壓蒸餾將醇提溶液于80°C減壓蒸餾，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并過篩(40目)制得熊果酸粗品，其組分圖如圖1 (a)所示；(6)集成膜處理往枇杷葉粉末中加入20倍體積水，進(jìn)行超濾和納濾進(jìn)行脫色、除雜、脫鹽和濃縮，超濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為5 0000道爾頓，操作壓力設(shè)為301^1~，溫度為601，膜通量為30L/hm2，納濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為1000 ；變體積和恒定體積操作模式，操作壓力設(shè)為2^ar，溫度為 500C，膜通量為25L/hm2 ;(7)重結(jié)晶將(5)所得粉末進(jìn)行重結(jié)晶處理，結(jié)晶溶劑為濃度為 100%乙醇，結(jié)晶溫度為20°C，該過程重復(fù)10次；(8)干燥對上述結(jié)晶晶體真空干燥后即得到熊果酸純品，其組分圖如圖2 (b)所示；(9)熊果酸(質(zhì)量分?jǐn)?shù)60%)與白炭黑混合制備針對不同的家禽、家畜、水產(chǎn)養(yǎng)殖制備成含熊果酸的新型飼料添加劑。實(shí)施例4 在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上，(1)枇杷葉的干燥處理將枇杷葉洗凈，去除灰塵等雜質(zhì)，浙干水分，于50°C真空干燥，干燥至恒重；(2)粉碎與過篩將真空干燥過后的枇杷葉用中藥粉碎機(jī)粉碎，并過30目篩；(3)水煮枇杷葉粉末中加入7或8倍體積水，煮沸池后過濾；(4)醇提將粉碎后過篩的枇杷葉粉用90%乙醇水提取，溫度為70°C，提取時(shí)間為 1.證，重復(fù)提取3次；(5)減壓蒸餾將醇提溶液于50°C減壓蒸餾，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并過篩(40目)制得熊果酸粗品，其組分圖如圖1 (a)所示；(6)集成膜處理往枇杷葉粉末中加入15倍體積水，進(jìn)行超濾和納濾進(jìn)行脫色、除雜、脫鹽和濃縮，超濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為30000道爾頓，操作壓力設(shè)為18bar，溫度為40°C，膜通量為20L/hm2，納濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為450 ；變體積和恒定體積操作模式，操作壓力設(shè)為17bar，溫度為37°C，膜通量為16L/hm2 ;(7)重結(jié)晶將(5)所得粉末進(jìn)行重結(jié)晶處理，結(jié)晶溶劑為濃度為80%乙醇，結(jié)晶溫度為12°C，該過程重復(fù)7次；(8)干燥對上述結(jié)晶晶體真空干燥后即得到熊果酸純品，其組分圖如圖2 (b)所示；(9)熊果酸(質(zhì)量分?jǐn)?shù)33%)與白炭黑混合制備針對不同的家禽、家畜、水產(chǎn)養(yǎng)殖制備成含熊果酸的新型飼料添加劑。實(shí)施例5 在實(shí)施例1-4的基礎(chǔ)上，所述醇提，將粉碎后過篩的枇杷葉粉用90%乙醇水提取，溫度為70°C，提取時(shí)間為1. 5h，重復(fù)提取3次。實(shí)施例6 在實(shí)施例1-5的基礎(chǔ)上，新鮮枇杷葉經(jīng)清洗烘干至恒重，粉碎后得到粉末1kg，加入水1L，混合均勻，調(diào)成漿狀，100水煮20min，過濾充分收集物料，烘干至恒重后經(jīng)粉碎得到枇杷葉粉末750g。往得到的粉末中加入乙醇水(乙醇水=9:1)7. 5L，混合后水浴70°C攪拌提取，提取時(shí)間為1. ，提取次數(shù)為3次。收集3次提取液，離心分離后取上清液，于45°C減壓蒸餾，經(jīng)真空干燥后粉碎的得到粉末(40目)95g，加入15倍水經(jīng)超濾(截留分子量3000D)，操作壓力設(shè)為15bar，溫度為40°C，膜通量為15L/hm2，超濾液經(jīng)納濾(截留分子量150D)，采用變體積操作模式，操作壓力設(shè)為17bar，溫度為40°C，膜通量為18L/ hm2，收集濾液采用乙醇結(jié)晶，用煮沸95%乙醇溶液溶解至過飽和，趁熱過濾，取濾液至于4°C 環(huán)境結(jié)晶，時(shí)間為48h，得到的晶體按上述過程重復(fù)結(jié)晶5次，得到熊果酸晶體(純度>95%) 7. 3g。需要理解到的是上述實(shí)施例雖然對本發(fā)明的設(shè)計(jì)思路作了比較詳細(xì)的文字描述，但是這些文字描述，只是對本發(fā)明設(shè)計(jì)思路的簡單文字描述，而不是對本發(fā)明設(shè)計(jì)思路的限制，任何不超出本發(fā)明設(shè)計(jì)思路的組合、增加或修改，均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種從枇杷葉中提取熊果酸制備飼料添加劑的方法，其特征是(1)枇杷葉的干燥處理將枇杷葉洗凈，去除灰塵等雜質(zhì)，浙干水分，于40-60°C真空干燥，干燥至恒重；(2)粉碎與過篩將真空干燥過后的枇杷葉用中藥粉碎機(jī)粉碎，并過20-60目篩；(3)水煮枇杷葉粉末中加入5-10倍體積水，煮沸0.5-3h后過濾；(4)醇提將粉碎后過篩的枇杷葉粉用90%乙醇水提取，溫度為65-75°C，提取時(shí)間為 l_2h，重復(fù)提取2-4次；(5)減壓蒸餾將醇提溶液于20-80°C減壓蒸餾，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并過篩 (40目)制得熊果酸粗品，其組分圖如圖1 (a)所示；(6)集成膜處理往枇杷葉粉末中加入10-20倍體積水，進(jìn)行超濾和納濾進(jìn)行脫色、除雜、脫鹽和濃縮，超濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為1 000 — 5 0000道爾頓，操作壓力設(shè)為 5-30bar，溫度為20-60°C，膜通量為10_30L/hm2，納濾所用的膜是分子質(zhì)量截留為150 — 1000 ；變體積和恒定體積操作模式，操作壓力設(shè)為8-2^ar，溫度為25-50°C，膜通量為 8-25L/hm2 ；(7)重結(jié)晶將(5)所得粉末進(jìn)行重結(jié)晶處理，結(jié)晶溶劑為濃度為60-100%乙醇，結(jié)晶溫度為2-20°C，該過程重復(fù)3-10次；(8)干燥對上述結(jié)晶晶體真空干燥后即得到熊果酸純品，其組分圖如圖2(b)所示；(9)熊果酸(質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%-60%)與白炭黑混合制備針對不同的家禽、家畜、水產(chǎn)養(yǎng)殖制備成含熊果酸的新型飼料添加劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從枇杷葉中提取熊果酸制備飼料添加劑的方法，其特征是 所述醇提，將粉碎后過篩的枇杷葉粉用90%乙醇水提取，溫度為70°C，提取時(shí)間為1.證，重復(fù)提取3次。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從枇杷葉中提取熊果酸制備飼料添加劑的方法，從枇杷葉中提取熊果酸制備飼料添加劑，以枇杷葉為原料，經(jīng)過干燥，粉碎，過篩，水煮，真空干燥，醇提，減壓蒸餾濃縮，集成膜分離，乙醇重結(jié)晶得到高純度熊果酸純品制備飼料添加劑。優(yōu)點(diǎn)一是采用的集成膜分離工藝進(jìn)行脫色、除雜和濃縮，優(yōu)化了提取的工藝效率，縮短了生產(chǎn)周期，提高了有效成分的含量和純度，節(jié)約了大量的溶劑消耗，提高了產(chǎn)品質(zhì)量，并且在整個(gè)處理過程中除乙醇外，無其他有毒有害試劑的加入；二是熊果酸不是抗生素，它來源于植物提取物，其具有多種生物學(xué)功能，使其成為一種具有廣譜生物學(xué)活性的天然物質(zhì)，可以提高機(jī)體的免疫功能，在畜牧獸藥上具有廣泛的應(yīng)用前景。
文檔編號A23K1/14GK102318745SQ201110303900
公開日2012年1月18日 申請日期2011年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月10日
發(fā)明者楊瑞金, 王賢勇, 趙偉 申請人:杭州銀豐生物科技有限公司