專利名稱：一種暗褐網(wǎng)柄牛肝菌栽培菌棒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種暗褐網(wǎng)柄牛肝菌栽培菌棒，屬生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
暗褐網(wǎng)柄牛肝菌(Phlebopus portentosus)分布于斯里蘭卡、越南、印度尼西亞、 泰國、巴西、墨西哥、澳大利亞，新西蘭(Maria2007，Bandala2004, Watling 2001，Barbara 1987，Heinemannl982)及我國云南、廣西和海南等地(臧穆等1986,2006 ；楊祝良和臧穆 2003)，味道鮮美，營養(yǎng)價(jià)值豐富，有較好的食用及藥用價(jià)值，是一種較好的保建食品，深受產(chǎn)地消費(fèi)者喜愛。由于受氣候季節(jié)條件的限制產(chǎn)量有限。加上不注重對野生自然生長資源的保護(hù)，人為過度采摘導(dǎo)致數(shù)量越來越少。
多數(shù)牛肝菌為菌根食用菌。許多菌根食用菌半人工模擬栽培的過程相當(dāng)長，需要 4 5年，甚至6 7年才能完成(弓明欽等2006)。目前世界菌根食用栽培最為成功的是黑孢塊菌(Tuber melanosporum)。在新西蘭，黑孢塊菌人工栽培從種植園的建立到有塊菌子囊果收獲需要6-7年時(shí)間(譚著明等2002)。實(shí)驗(yàn)室條件下Boletus菌絲在鋸末和麥粒組成的培養(yǎng)基上生長良好，避光條件下培養(yǎng)90d產(chǎn)生具擔(dān)孢子的成熟子實(shí)體(Ohta A等 2003)。國內(nèi)菌根食用菌栽培研究較晚，松乳菇(Lactarius deliciosus)人工栽培，菌根苗合成需5 8個(gè)月時(shí)間，用菌根合成苗移植到土壤中培養(yǎng)出菇需2 3年時(shí)間(譚著明等 2000)。褐環(huán)粘蓋牛肝菌(Suillus luteus)人工栽培，從菌根苗種植至子實(shí)體生長需12個(gè)月時(shí)間(應(yīng)國華等2007)。盆栽條件及田間條件下，將暗褐網(wǎng)柄牛肝菌純培養(yǎng)菌種接種于小?？Х葮?、鳳凰木、柚子樹根系，接種后30d 90d，生長子實(shí)體幼蕾發(fā)育成熟(紀(jì)開萍等 2007.2009)。
暗褐網(wǎng)柄牛肝菌是俗稱“牛肝菌”類中目前唯一一種可人工栽培成功的種類(Ji et al.2011)。栽培菌棒培養(yǎng)是暗褐網(wǎng)柄牛肝菌人工栽培的關(guān)鍵技術(shù)及第一步?；|(zhì)配方、 培養(yǎng)條件對菌絲萌發(fā)、生長速度、出菇及產(chǎn)量影響較大，只有實(shí)現(xiàn)了栽培菌棒的規(guī)模培養(yǎng)， 才能實(shí)現(xiàn)暗褐網(wǎng)柄牛肝菌產(chǎn)業(yè)化栽培。產(chǎn)自于云南的暗褐網(wǎng)柄牛肝菌味道鮮美，營養(yǎng)價(jià)值豐富，有較好的食用及藥用價(jià)值，是一種較好的保建食品。由于受氣候季節(jié)條件的限制產(chǎn)量有限，需通過人工栽培增加產(chǎn)量滿足人們需求。因此，迫切需要提供一種有效的栽培菌棒用于出菇培養(yǎng)。
參考文獻(xiàn)
[l]Pegler DN,Agaric Flora of Sri Lanka. Kew Bulletin Additional Series, 1986，12 :1-519.
[2]Barbara P, Segedin. An annotated checklist of Agarics and Boleti recorded from New Zealand. New Zealand Journal of Botany,1987,25 (2) :185-215.
[3]ffatling R. The relationships and possible distributional patterns of Boletes in South-East Asia. Mycological Research,2001,105(12) :1440-1448.
[4]Bandala VM, Montoya L, Jarvio D. Two interesting records of Boletesfound in coffee plantations in Eastern Mexico. Persoonia,2004,18(3) ；365-380.[5]Maria alice neves, Marina capelari. A preliminary checklist of Boletales from Brazil and notes on Boletales specimens at the Instituto de Botanica (SP)Herbarium, Sao Paulo, SP, Brazil. Sitientibus serie ciencias biologicas,2007,7(2) ；163-169.[6] Heinemann P, Ramme loo J. Observations sur Ie genre Phlebopus (Boletineae). Mycotaxon, 1982,15 :384-404.[7]臧穆.我國東喜馬拉雅及其鄰區(qū)牛肝菌目的研究(續(xù)).云南植物研究，1986， 8(1) :1-22.[8]臧穆，2006.中國真菌志第22卷.北京科學(xué)出版，pp. 1-215.[9]楊祝良，臧穆.中國南部高等真菌的熱帶親緣.云南植物研究，2003，25 O) 129-144.[10]弓明欽仲崇祿陳羽.2006.菌根食用菌及其半人工栽培.廣東廣東科學(xué)出版社，PP. 1-147.[11]Ohta A, Fujiwara N. Fruit-body production of an ectomycorrhizal fungus in genus Boletus in pure culture. Mycoscience,2003,44(4) :295-30.[12]譚著明，傅少春，劉曉紅.新西蘭菌根性食用菌研究開發(fā)現(xiàn)狀與啟示.湖南林業(yè)科技，2002，四(3) :72-74.[13]譚著明.松乳菇母種培養(yǎng)基及人工栽培方法，中華人民共和國專利， ZL98112527. 1.[14]應(yīng)國華，呂明亮，李伶俐.褐黃粘蓋牛肝菌人工栽培方法，中華人民共和國專利，申請專利號,200710164731. X.[15]紀(jì)開萍，張春霞，曾雁，等.盆栽條件下暗褐網(wǎng)柄牛肝菌人工菌塘及其子實(shí)體培養(yǎng)研究.云南植物研究，2007，四(5) =554-558.[16]紀(jì)開萍，何明霞，張春霞，等.暗褐網(wǎng)柄牛肝菌半人工模擬栽培及“宿主樹”根系上菌絲生長的持久性.微生物學(xué)通報(bào)，2009，36 (3) :377 382.[17]Kai-Ping Ji. Yang Cao. Cultivation of Phlebopus portentosus in southern China. Mycol Progress 2011，(10) :293-300.

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種低成本、出菇率高的暗褐網(wǎng)柄牛肝菌栽培菌棒。本發(fā)明的暗褐網(wǎng)柄牛肝菌栽培菌棒經(jīng)如下步驟得到1. 1原材料堆制發(fā)酵取橡膠木鋸木屑20000kg、橡膠木粗木粒20000kg、椰子殼屑10000kg分別建堆，將溫度計(jì)插入堆下30cm處，當(dāng)溫度達(dá)40°C -50°C時(shí)進(jìn)行第1次翻堆，以后每隔30天翻堆1次， 連續(xù)2次翻堆完成發(fā)酵備用；1. 2栽培菌棒制備a.取100. 0 200. Okg谷子放入100-200L的水中浸泡10 12小時(shí)；取經(jīng)1. 1 步驟發(fā)酵后的橡膠木鋸木屑100. 0 200. 0kg、橡膠木粗木粒100. 0 200. 0kg、椰子殼屑50. 0 100. Okg加水100-200L預(yù)濕10 12小時(shí)；b.將面粉10. 0 20. Okg均勻拌入預(yù)濕后的橡膠木鋸木屑和粗木粒及椰子殼屑料堆中，然后再將濾浸泡液后的谷子拌入料堆中；將100. 0-200. Og的MgS04、 100. 0-200. Og的KH2PO4溶解于10000ml的水中，pH 4. 0 6. 0，再將溶解液均勻噴灑于料
堆中，控制堆中物料的含水量為50. 0%，得菌棒培養(yǎng)基質(zhì)；c.將配制好的培養(yǎng)基質(zhì)分裝于17. OcmX33. Ocm的聚丙烯塑料袋中，每袋裝料量 0. 5-1. ^g，然后在料袋中部打孔至底部，121°C滅菌60分鐘，待冷卻后備用；d.將預(yù)先培養(yǎng)的液體菌種或固體菌種接種于袋裝的滅菌基質(zhì)中，接種時(shí)在料袋基質(zhì)表面、中部及底部均接入菌種，中部及底部的菌種從基質(zhì)中部孔洞塞入，接種后的培養(yǎng)袋置于培養(yǎng)室中培養(yǎng)50 60天，菌絲體長滿袋裝培養(yǎng)基質(zhì)，得到栽培菌棒。本發(fā)明所用原料取自天然或市場購買。本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1、原料豐富，成本低、生態(tài)環(huán)保。2、制備方法簡便，易推廣應(yīng)用。3、菌絲生長整齊，出菇率高；菌棒的出菇率達(dá)80.0% _85.0%，能夠?qū)崿F(xiàn)暗褐網(wǎng)柄牛肝菌的產(chǎn)業(yè)化栽培。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例所用原料取自天然或市場購買。實(shí)施例1 本發(fā)明的暗褐網(wǎng)柄牛肝菌栽培菌棒經(jīng)如下步驟得到1.1原材料堆制發(fā)酵取橡膠木鋸木屑20000kg、橡膠木粗木粒20000kg、椰子殼屑10000kg分別建堆，將溫度計(jì)插入堆下30cm處，當(dāng)溫度達(dá)40°C -50°C時(shí)進(jìn)行第1次翻堆，以后每隔30天翻堆1次， 連續(xù)2次翻堆完成發(fā)酵備用；1. 2栽培菌棒制備a.取100. Okg谷子放入100L的水中浸泡10小時(shí)；取經(jīng)1. 1步驟發(fā)酵后的橡膠木鋸木屑100. 0、橡膠木粗木粒100. 0kg、椰子殼屑50. Okg加水100L預(yù)濕10小時(shí)；b.將面粉10. Okg均勻拌入預(yù)濕后的橡膠木鋸木屑和粗木粒及椰子殼屑料堆中，然后再將濾浸泡液后的谷子拌入料堆中；將100. Og的MgSO4UOO. Og的KH2PO4溶解于10000ml的水中，pH 4. 0，再將溶解液均勻噴灑于料堆中，控制堆中物料的含水量為 50.0%，得菌棒培養(yǎng)基質(zhì)；c.將配制好的培養(yǎng)基質(zhì)分裝于17. OcmX33. Ocm的聚丙烯塑料袋中，每袋裝料量 0. ^g，然后在料袋中部打孔至底部，121°C滅菌60分鐘，待冷卻后備用；d.將預(yù)先培養(yǎng)的液體菌種或固體菌種接種于袋裝的滅菌基質(zhì)中，接種時(shí)在料袋基質(zhì)表面、中部及底部均接入菌種，中部及底部的菌種從基質(zhì)中部孔洞塞入，接種后的培養(yǎng)袋置于培養(yǎng)室中培養(yǎng)50天，菌絲體長滿袋裝培養(yǎng)基質(zhì)，得到栽培菌棒。實(shí)施例2
本發(fā)明的暗褐網(wǎng)柄牛肝菌栽培菌棒經(jīng)如下步驟得到1. 1原材料堆制發(fā)酵取橡膠木鋸木屑20000kg、橡膠木粗木粒20000kg、椰子殼屑10000kg分別建堆，將溫度計(jì)插入堆下30cm處，當(dāng)溫度達(dá)47°C時(shí)進(jìn)行第1次翻堆，以后每隔30天翻堆1次，連續(xù) 2次翻堆完成發(fā)酵備用；1. 2栽培菌棒制備a.取150. Okg谷子放入150L的水中浸泡11小時(shí)；取經(jīng)1. 1步驟發(fā)酵后的橡膠木鋸木屑150. 0kg、橡膠木粗木粒150. 0kg、椰子殼屑70. Okg加水150L預(yù)濕11小時(shí)；b.將面粉15. Okg均勻拌入預(yù)濕后的橡膠木鋸木屑和粗木粒及椰子殼屑料堆中，然后再將濾浸泡液后的谷子拌入料堆中；將150. Og的MgS04、150. Og的KH2PO4溶解于10000ml的水中，pH 5. 0，再將溶解液均勻噴灑于料堆中，控制堆中物料的含水量為 50.0%，得菌棒培養(yǎng)基質(zhì)；c.將配制好的培養(yǎng)基質(zhì)分裝于17. OcmX33. Ocm的聚丙烯塑料袋中，每袋裝料量 1. 0kg，然后在料袋中部打孔至底部，121°C滅菌60分鐘，待冷卻后備用；d.將預(yù)先培養(yǎng)的液體菌種或固體菌種接種于袋裝的滅菌基質(zhì)中，接種時(shí)在料袋基質(zhì)表面、中部及底部均接入菌種，中部及底部的菌種從基質(zhì)中部孔洞塞入，接種后的培養(yǎng)袋置于培養(yǎng)室中培養(yǎng)55天，菌絲體長滿袋裝培養(yǎng)基質(zhì)，得到栽培菌棒。實(shí)施例3 本發(fā)明的暗褐網(wǎng)柄牛肝菌栽培菌棒經(jīng)如下步驟得到1. 1原材料堆制發(fā)酵取橡膠木鋸木屑20000kg、橡膠木粗木粒20000kg、椰子殼屑10000kg分別建堆，將溫度計(jì)插入堆下30cm處，當(dāng)溫度達(dá)50°C時(shí)進(jìn)行第1次翻堆，以后每隔30天翻堆1次，連續(xù) 2次翻堆完成發(fā)酵備用；1.2栽培菌棒制備a.取200. Okg谷子放入200L的水中浸泡12小時(shí)；取經(jīng)1. 1步驟發(fā)酵后的橡膠木鋸木屑200. 0kg、橡膠木粗木粒200. 0kg、椰子殼屑100. Okg加水200L預(yù)濕12小時(shí)；b.將面粉20. Okg均勻拌入預(yù)濕后的橡膠木鋸木屑和粗木粒及椰子殼屑料堆中，然后再將濾浸泡液后的谷子拌入料堆中；將200. Og的MgS04、200. Og的KH2PO4溶解于10000ml的水中，pH 6. 0，再將溶解液均勻噴灑于料堆中，控制堆中物料的含水量為 50.0%，得菌棒培養(yǎng)基質(zhì)；c.將配制好的培養(yǎng)基質(zhì)分裝于17. OcmX33. Ocm的聚丙烯塑料袋中，每袋裝料量 l』kg，然后在料袋中部打孔至底部，121°C滅菌60分鐘，待冷卻后備用；d.將預(yù)先培養(yǎng)的液體菌種或固體菌種接種于袋裝的滅菌基質(zhì)中，接種時(shí)在料袋基質(zhì)表面、中部及底部均接入菌種，中部及底部的菌種從基質(zhì)中部孔洞塞入，接種后的培養(yǎng)袋置于培養(yǎng)室中培養(yǎng)60天，菌絲體長滿袋裝培養(yǎng)基質(zhì)，得到栽培菌棒。
權(quán)利要求
1. 一種暗褐網(wǎng)柄牛肝菌栽培菌棒，其特征在于該暗褐網(wǎng)柄牛肝菌栽培菌棒經(jīng)如下步驟得到1. 1原材料堆制發(fā)酵取橡膠木鋸木屑20000kg、橡膠木粗木粒20000kg、椰子殼屑10000kg分別建堆，將溫度計(jì)插入堆下30cm處，當(dāng)溫度達(dá)40°C -50°C時(shí)進(jìn)行第1次翻堆，以后每隔30天翻堆1次，連續(xù)2次翻堆完成發(fā)酵備用； 1.2栽培菌棒制備a.取100.0 200. Okg谷子放入100-200L的水中浸泡10 12小時(shí)；取經(jīng)1. 1步驟發(fā)酵后的橡膠木鋸木屑100. 0 200. 0kg、橡膠木粗木粒100. 0 200. 0kg、椰子殼屑50. 0 100. Okg加水100-200L預(yù)濕10 12小時(shí)；b.將面粉10.0 20. Okg均勻拌入預(yù)濕后的橡膠木鋸木屑和粗木粒及椰子殼屑料堆中，然后再將濾浸泡液后的谷子拌入料堆中；將100. 0-200. Og的MgSO4UOO. 0-200. Og的 KH2PO4溶解于10000ml的水中，pH4. 0 6. 0，再將溶解液均勻噴灑于料堆中，控制堆中物料的含水量為50. 0%，得菌棒培養(yǎng)基質(zhì)；c.將配制好的培養(yǎng)基質(zhì)分裝于17.0cmX33. Ocm的聚丙烯塑料袋中，每袋裝料量 0. 5-1. ^g，然后在料袋中部打孔至底部，121°C滅菌60分鐘，待冷卻后備用；d.將預(yù)先培養(yǎng)的液體菌種或固體菌種接種于袋裝的滅菌基質(zhì)中，接種時(shí)在料袋基質(zhì)表面、中部及底部均接入菌種，中部及底部的菌種從基質(zhì)中部孔洞塞入，接種后的培養(yǎng)袋置于培養(yǎng)室中培養(yǎng)50 60天，菌絲體長滿袋裝培養(yǎng)基質(zhì)，得到栽培菌棒。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種褐網(wǎng)柄牛肝菌栽培菌棒，屬生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的褐網(wǎng)柄牛肝菌栽培菌棒用MgSO4、KH2PO4、橡膠木鋸木屑、粗橡膠粗木粒、椰子殼屑、谷子、面粉、及水為原料按照一定比例配制成栽培菌棒培養(yǎng)基；然后將預(yù)先培養(yǎng)暗褐網(wǎng)柄牛肝菌液體菌種、固體菌種接種于袋裝培養(yǎng)基質(zhì)，接種后的培養(yǎng)袋置于28℃培養(yǎng)室中培養(yǎng)50～60天，菌絲體長滿袋裝培養(yǎng)基質(zhì)，得到栽培菌棒。本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1、原料豐富，成本低、生態(tài)環(huán)保；2、制備方法簡便，易推廣應(yīng)用；3、菌絲生長整齊，出菇率高；菌棒的出菇率達(dá)80.0％-85.0％，能夠?qū)崿F(xiàn)暗褐網(wǎng)柄牛肝菌的產(chǎn)業(yè)化栽培。
文檔編號A01G1/04GK102511302SQ20111035584
公開日2012年6月27日 申請日期2011年11月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月10日
發(fā)明者伍英, 何明霞, 劉靜, 張春霞, 曹旸, 段波, 王云, 王文兵, 紀(jì)開萍, 胡明陽, 許小娥 申請人:云南省熱帶作物科學(xué)研究所