專利名稱：一種培養(yǎng)茯苓子實體的培養(yǎng)方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)方法，具體的說是一種培養(yǎng)茯苓子實體的培養(yǎng)方法。
背景技術：
茯苓(Wolfiporia cocos)又名茯菟，別稱松茯苓、松柏芋、松腴等，屬于擔子菌門， 層菌綱，非褶菌目，多孔菌科，茯苓屬。是我國傳統(tǒng)的名貴藥食兩用真菌菌，具有益脾促胃、 安神生津等功能。研究報道，茯苓子實體同其他食(藥)用菌相比小很多，子實體平伏貼生于菌核、 段木和土壤的表面，是茯苓的有性繁殖器官。茯苓子實體大小不一，初為白色，成熟或干后變成淺淡黃色。擔孢子近圓柱形或長方形，表面光滑，透明無色。子實體的形態(tài)特征是茯苓分類的重要依據(jù)。而要獲得孢子，作為遺傳育種以及分類的材料，就必須先得到能夠產生孢子的子實體。在自然界中茯苓子實體的形成長受到季節(jié)和環(huán)境條件的限制，在實驗室的條件下也較難獲得穩(wěn)定的子實體。熊杰(2006)曾用茯苓菌核組織分離所得的菌絲體培養(yǎng)形成子實體，日本富永保人(2006)用試管和三角瓶純培養(yǎng)以及木屑培養(yǎng)得到茯苓子實體，諸發(fā)會等(2008)通過比較不同固體培養(yǎng)基獲得過茯苓子實體產生的最適固體培養(yǎng)條件。但固體培養(yǎng)基培養(yǎng)茯苓時間較長，產生的數(shù)量較少，增加生產成本，降低勞動效率。

發(fā)明內容
本發(fā)明針對上述問題的不足，提供一種培養(yǎng)茯苓子實體的培養(yǎng)方法，能夠快速的培養(yǎng)出茯苓子實體。本發(fā)明為解決上述問題所采用的技術方案是一種培養(yǎng)茯苓子實體的培養(yǎng)方法， 利用茯苓子培養(yǎng)基得到茯苓子實體的方法，其茯苓子培養(yǎng)基的原料由土豆、麩皮、酵母膏、 茯苓母種、葡萄糖和麥粒組成，各原料的加入量是400—500mg的土豆、20—30的麩皮、1一 3g的茯苓母種、2 — 5g的酵母膏、15 — 30g的葡萄糖和130— 160mL的麥粒；
利用茯苓子培養(yǎng)基培養(yǎng)茯苓子實體的方法，其培養(yǎng)方法為
步驟一、在250mL三角瓶內加入130— 160mL的煮熟后麥粒種子和1一3g的茯苓母種， 在條件下，培養(yǎng)3天，將培養(yǎng)過程中出現(xiàn)結成塊的麥粒種子震碎，再繼續(xù)培養(yǎng)3天，得到茯苓菌種，備用；
步驟二、在2000mL水中加入400—500g的去皮土豆和20—30g的麩皮，將土豆煮熟后， 過濾，得到濾液，備用；
步驟三、在IOOOmL的濾液中加入2 — 5g的酵母膏和15 — 30g的葡萄糖，混合均勻，在 121°C條件下，滅菌30分鐘，冷卻至40—50°C，得到液體接種培養(yǎng)基，備用；
步驟四、按重量百分比在97%的液體接種培養(yǎng)基中加入3%的茯苓菌種，將含有茯苓菌種的液體接種培養(yǎng)基送入30°C的搖床內，轉速為160轉/分鐘，發(fā)酵培養(yǎng)3天，取出，在條件下，靜置培養(yǎng)2天，然后在溫度為20_^TC，光照強度為1600—2000勒克斯的條件下， 培養(yǎng)15d—25d，得到茯苓子實體。
有益效果
本發(fā)明的培養(yǎng)方法，采用麥粒菌種有利于茯苓子菌株的接種，且接種后茯苓子的實體生長比較均勻。本發(fā)明的培養(yǎng)方法，將麥粒菌種在搖床中發(fā)酵分散接種，加快了發(fā)酵速度，可以提前得到茯苓子實體。本發(fā)明的培養(yǎng)方法，采用液體培養(yǎng)基比固體培養(yǎng)基早20—30天培養(yǎng)得到茯苓子實體。本發(fā)明的培養(yǎng)方法，因為采用液體培養(yǎng)，培養(yǎng)基中的水分能充分保障子實體分化和成長的需要，不需人工加濕，有利于防止污染。本發(fā)明的培養(yǎng)方法，操作簡單，便于利用，提高生產成本，降低勞動消耗，提高經(jīng)濟效益。
具體實施例方式一種培養(yǎng)茯苓子實體的培養(yǎng)方法，利用茯苓子培養(yǎng)基得到茯苓子實體的方法，其茯苓子培養(yǎng)基的原料由土豆、麩皮、酵母膏、茯苓母種、葡萄糖和麥粒組成，各原料的加入量是400— 500mg的土豆、20— 30的麩皮、1 一3g的茯苓母種、2 — 5g的酵母膏、15 — 30g的葡萄糖和130— 160mL的麥粒；
利用茯苓子培養(yǎng)基培養(yǎng)茯苓子實體的方法，其培養(yǎng)方法為
步驟一、在250mL三角瓶內加入130— 160mL的煮熟后麥粒種子和1一3g的茯苓母種， 在條件下，培養(yǎng)3天，將培養(yǎng)過程中出現(xiàn)結成塊的麥粒種子震碎，再繼續(xù)培養(yǎng)3天，得到茯苓菌種，備用；
步驟二、在2000mL水中加入400—500g的去皮土豆和20—30g的麩皮，將土豆煮熟后， 過濾，得到濾液，備用；
步驟三、在IOOOmL的濾液中加入2 — 5g的酵母膏和15 — 30g的葡萄糖，混合均勻，在 121°C條件下，滅菌30分鐘，冷卻至40—50°C，得到液體接種培養(yǎng)基，備用；
步驟四、按重量百分比在97%的液體接種培養(yǎng)基中加入3%的茯苓菌種，將含有茯苓菌種的液體接種培養(yǎng)基送入30°C的搖床內，轉速為160轉/分鐘，發(fā)酵培養(yǎng)3天，取出，在條件下，靜置培養(yǎng)2天，然后在溫度為20_^TC，光照強度為1600—2000勒克斯的條件下， 培養(yǎng)15d—25d，得到茯苓子實體。實施例一
一種培養(yǎng)茯苓子實體的培養(yǎng)方法，利用茯苓子培養(yǎng)基得到茯苓子實體的方法，其茯苓子培養(yǎng)基的原料由土豆、麩皮、酵母膏、茯苓母種、葡萄糖和麥粒組成，各原料的加入量是 400mg的土豆、20的麩皮、Ig的茯苓母種、2g的酵母膏、15g的葡萄糖和130mL的麥粒； 利用茯苓子培養(yǎng)基培養(yǎng)茯苓子實體的方法，其培養(yǎng)方法為
步驟一、在250mL三角瓶內加入130mL的煮熟后麥粒種子和Ig的茯苓母種，在條件下，培養(yǎng)3天，將培養(yǎng)過程中出現(xiàn)結成塊的麥粒種子震碎，再繼續(xù)培養(yǎng)3天，得到茯苓菌種，備用；
步驟二、在2000mL水中加入400g的去皮土豆和20g的麩皮，將土豆煮熟后，過濾，得到濾液，備用；
4步驟三、在IOOOmL的濾液中加入2g的酵母膏和15g的葡萄糖，混合均勻，在121°C條件下，滅菌30分鐘，冷卻至40°C，得到液體接種培養(yǎng)基，備用；
步驟四、按重量百分比在97%的液體接種培養(yǎng)基中加入3%的茯苓菌種，將含有茯苓菌種的液體接種培養(yǎng)基送入30°C的搖床內，轉速為160轉/分鐘，發(fā)酵培養(yǎng)3天，取出，在條件下，靜置培養(yǎng)2天，然后在溫度為20°C，光照強度為1600勒克斯的條件下，培養(yǎng)7天后， 在接種培養(yǎng)基的上層表面上出現(xiàn)一層菌膜，菌膜下層出現(xiàn)菌絲，形成半固體狀，培養(yǎng)10天后，出現(xiàn)米粒凸起，突起逐漸分化，培養(yǎng)15天后，得到片齒狀的茯苓子實體，個別呈單片狀， 大部分呈叢壯，并以三角瓶邊緣居多。實施例二
一種培養(yǎng)茯苓子實體的培養(yǎng)方法，利用茯苓子培養(yǎng)基得到茯苓子實體的方法，其茯苓子培養(yǎng)基的原料由土豆、麩皮、酵母膏、茯苓母種、葡萄糖和麥粒組成，各原料的加入量是 450mg的土豆、25的麩皮、2g的茯苓母種、4g的酵母膏、23g的葡萄糖和145mL的麥粒；
利用茯苓子培養(yǎng)基培養(yǎng)茯苓子實體的方法，其培養(yǎng)方法為
步驟一、在250mL三角瓶內加入145mL的煮熟后麥粒種子和2g的茯苓母種，在條件下，培養(yǎng)3天，將培養(yǎng)過程中出現(xiàn)結成塊的麥粒種子震碎，再繼續(xù)培養(yǎng)3天，得到茯苓菌種，備用；
步驟二、在2000mL水中加入450g的去皮土豆和25g的麩皮，將土豆煮熟后，過濾，得到濾液，備用；
步驟三、在IOOOmL的濾液中加入4g的酵母膏和23g的葡萄糖，混合均勻，在121°C條件下，滅菌30分鐘，冷卻至45°C，得到液體接種培養(yǎng)基，備用；
步驟四、按重量百分比在97%的液體接種培養(yǎng)基中加入3%的茯苓菌種，將含有茯苓菌種的液體接種培養(yǎng)基送入30°C的搖床內，轉速為160轉/分鐘，發(fā)酵培養(yǎng)3天，取出，在條件下，靜置培養(yǎng)2天，然后在溫度為23°C，光照強度為1800勒克斯的條件下，培養(yǎng)8天后， 在接種培養(yǎng)基的上層表面上出現(xiàn)一層菌膜，菌膜下層出現(xiàn)菌絲，形成半固體狀，培養(yǎng)13天后，出現(xiàn)米粒凸起，突起逐漸分化，培養(yǎng)20天后，得到片齒狀的茯苓子實體，個別呈單片狀， 大部分呈叢壯，并以三角瓶邊緣居多。實施例三
一種培養(yǎng)茯苓子實體的培養(yǎng)方法，利用茯苓子培養(yǎng)基得到茯苓子實體的方法，其茯苓子培養(yǎng)基的原料由土豆、麩皮、酵母膏、茯苓母種、葡萄糖和麥粒組成，各原料的加入量是 500mg的土豆、30的麩皮、3g的茯苓母種、5g的酵母膏、30g的葡萄糖和160mL的麥粒；
利用茯苓子培養(yǎng)基培養(yǎng)茯苓子實體的方法，其培養(yǎng)方法為
步驟一、在250mL三角瓶內加入160mL的煮熟后麥粒種子和3g的茯苓母種，在條件下，培養(yǎng)3天，將培養(yǎng)過程中出現(xiàn)結成塊的麥粒種子震碎，再繼續(xù)培養(yǎng)3天，得到茯苓菌種，備用；
步驟二、在2000mL水中加入500g的去皮土豆和30g的麩皮，將土豆煮熟后，過濾，得到濾液，備用；
步驟三、在IOOOmL的濾液中加入5g的酵母膏和30g的葡萄糖，混合均勻，在121°C條件下，滅菌30分鐘，冷卻至50°C，得到液體接種培養(yǎng)基，備用；
步驟四、按重量百分比在97%的液體接種培養(yǎng)基中加入3%的茯苓菌種，將含有茯苓菌種的液體接種培養(yǎng)基送入30°C的搖床內，轉速為160轉/分鐘，發(fā)酵培養(yǎng)3天，取出，在條件下，靜置培養(yǎng)2天，然后在溫度為26°C，光照強度為2000勒克斯的條件下，培養(yǎng)7天后， 在接種培養(yǎng)基的上層表面上出現(xiàn)一層菌膜，菌膜下層出現(xiàn)菌絲，形成半固體狀，培養(yǎng)10—15 天后，出現(xiàn)米粒凸起，突起逐漸分化，培養(yǎng)15—25天后，得到片齒狀的茯苓子實體，個別呈單片狀，大部分呈叢壯，并以三角瓶邊緣居多。
權利要求
1. 一種培養(yǎng)茯苓子實體的培養(yǎng)方法，其特征在于利用茯苓子培養(yǎng)基得到茯苓子實體的方法，其茯苓子培養(yǎng)基的原料由土豆、麩皮、酵母膏、茯苓母種、葡萄糖和麥粒組成，各原料的加入量是400— 500mg的土豆、20— 30的麩皮、1 一3g的茯苓母種、2 — 5g的酵母膏、 15—30g的葡萄糖和130— 160mL的麥粒；利用茯苓子培養(yǎng)基培養(yǎng)茯苓子實體的方法，其培養(yǎng)方法為步驟一、在250 mL三角瓶內加入130—160mL的煮熟后麥粒種子和1一3g的茯苓母種， 在條件下，培養(yǎng)3天，將培養(yǎng)過程中出現(xiàn)結成塊的麥粒種子震碎，再繼續(xù)培養(yǎng)3天，得到茯苓菌種，備用；步驟二、在2000 mL水中加入400—500g的去皮土豆和20—30g的麩皮，將土豆煮熟后，過濾，得到濾液，備用；步驟三、在IOOOmL的濾液中加入2 — 5g的酵母膏和15 — 30g的葡萄糖，混合均勻，在 121°C條件下，滅菌30分鐘，冷卻至40—50°C，得到液體接種培養(yǎng)基，備用；步驟四、按重量百分比在97%的液體接種培養(yǎng)基中加入3%的茯苓菌種，將含有茯苓菌種的液體接種培養(yǎng)基送入30°C的搖床內，轉速為160轉/分鐘，發(fā)酵培養(yǎng)3天，取出，在條件下，靜置培養(yǎng)2天，然后在溫度為20_^TC，光照強度為1600—2000勒克斯的條件下， 培養(yǎng)15 — 25天，得到茯苓子實體。
全文摘要
一種培養(yǎng)茯苓子實體的培養(yǎng)方法，利用茯苓子培養(yǎng)基得到茯苓子實體的方法，其茯苓子培養(yǎng)基的原料由土豆、麩皮、酵母膏、茯苓母種、葡萄糖和麥粒組成，各原料的加入量是400—500mg的土豆、20—30的麩皮、1—3g的茯苓母種、2—5g的酵母膏、15—30g的葡萄糖和130—160mL的麥粒；其培養(yǎng)方法，在液體接種培養(yǎng)基中加入茯苓菌種，將含有茯苓菌種的液體接種培養(yǎng)基送入30℃的搖床內，轉速為160轉/分鐘，發(fā)酵培養(yǎng)3天，取出，在28℃條件下，靜置培養(yǎng)2天，然后在溫度為20—26℃，光照強度為1600—2000勒克斯的條件下，培養(yǎng)15—25天，得到茯苓子實體。本發(fā)明提供一種培養(yǎng)茯苓子實體的培養(yǎng)方法，能夠快速的培養(yǎng)出茯苓子實體，其培養(yǎng)方法簡單。
文檔編號A01G1/04GK102523922SQ201210009630
公開日2012年7月4日 申請日期2012年1月13日 優(yōu)先權日2012年1月13日
發(fā)明者侯軍, 張建祥, 李愛江, 林曉民, 黃治民 申請人:河南科技大學