專利名稱：朱砂蘭組織培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物的組織培養(yǎng)方法，尤其是涉及朱砂蘭的組織培養(yǎng)方法。屬農(nóng)業(yè)種植技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
朱砂蘭為蘭科蘭屬的植物，因花色紅似朱砂而得名；明朝時期朱砂蘭曾被當(dāng)作貢品，因此又被稱為“貢品蘭”和“神品蘭”。朱砂蘭植株雄健，根粗而長，每年9-10月開花(一般是重陽節(jié)前后盛放，少數(shù)延至年底，甚至春節(jié)前后)，花期約I月；葶高30-40cm，花桿鐵銹紅，每葶著花3-5朵，花徑6-8厘米，柳葉瓣，萼片披針狀，呈等邊三角形排列，色朱砂紅見紫色，香味純正，花舌白底，布鮮紅小斑點，但斑點散，不成形。朱砂蘭已有千余年的家養(yǎng)歷史，是與大雪素、小雪素齊名的云南傳統(tǒng)蘭花，屬滇蘭四大名品之一。云南民間認(rèn)為種養(yǎng)此花能增添家庭喜慶氣氛，其葉健茂而花明麗，很有氣派，有大富大貴、大紅大紫之寓意，深受人們喜愛。朱砂蘭曾屢次在各級各類蘭博會上獲得嘉獎，在中國第十屆秋季蘭博會獲得兩枚金獎、在2003年昆明國慶秋季蘭展亦獲金獎。朱砂蘭的傳統(tǒng)繁殖方式是利用分株進(jìn)行繁殖，繁殖系數(shù)低，并且在后期生長中花色會產(chǎn)生變異。目前文獻(xiàn)資料中沒有朱砂蘭組織培養(yǎng)方面的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，提供一種在短期內(nèi)獲得出苗快、增殖頻率高，尤其出苗齊，生產(chǎn)出性狀一致的種苗，保證后續(xù)產(chǎn)品整齊劃一的商品性能， 易于操作，可進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)的朱砂蘭組織培養(yǎng)方法。本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)朱砂蘭組織培養(yǎng)方法，其特征在于， 該方法包括以下步驟(I)外植體采集10-11月是朱砂蘭蒴果成熟時期，當(dāng)蒴果外表轉(zhuǎn)為褐色，達(dá)到形態(tài)成熟而尚未開裂時采收；時間過早，種子胚發(fā)育不全影響發(fā)芽率；時間太遲，蒴果破裂，會造成不必要的損失;⑵消毒滅菌取朱砂蘭未開裂的蒴果，流水沖洗25-35min，在超凈工作臺上用70_75%酒精處理25-35s后再用O. 1-0. 2%升汞液浸泡10_15min，倒去升汞溶液，用無菌水沖洗4_5次，每次不少于4-5min,后用無菌紙吸干果實表面水分；⑶播種在無菌條件下，將滅菌過的朱砂蘭種子播種在人工配制的播種培養(yǎng)基上；培養(yǎng) 30-40天，待培養(yǎng)物膨大形成原球體時，即開始下一階段；⑷增殖將上一步所得培養(yǎng)物在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的增殖培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)30-40天左右，膨大的原球體開始出現(xiàn)幼嫩的朱砂蘭小苗，待小苗長到常規(guī)壯苗程序所需高度時可將苗轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基上；(5)壯苗將上一步所得的朱砂蘭小苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的壯苗培養(yǎng)基上；經(jīng)過 25-35天培養(yǎng)的小苗開始出現(xiàn)2-3片葉子，形成獨立的植株，待植株長到常規(guī)生根程序所需高度時可將其轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上；(6)生根將上一步所得的朱砂蘭壯苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)30-50 天植株開始出現(xiàn)長高和5-6片葉子，在苗的基部長出多條肉質(zhì)、綠色氣生根，最后形成完整的植株；最終生根率高達(dá)80-95% ；所述的種子萌發(fā)培養(yǎng)基包括MS+芐基腺嘌呤6-BA0. 1-0. 5mg/L+l_3%蔗糖；所述的增殖分化培養(yǎng)基包括MS+萘乙酸NAA O. 1-0. 3mg/L+6芐基腺嘌呤 6-BA0. 8-1. 2mg/L+l-3%蔗糖；所述的壯苗培養(yǎng)基包括MS+10-15%香蕉+萘乙酸NAA l-2mg/L+l_3%蔗糖；所述的生根培養(yǎng)基包括MS+10_15%香蕉+萘乙酸NAA I. 5-2. 5mg/L+吲哚丁酸 IBA O. 8-1. 2mg/L+l-3%蔗糖。所述的MS基本培養(yǎng)基是由大量元素、微量元素和有機(jī)成分組成。所述種子萌發(fā)培養(yǎng)基成分優(yōu)選為MS+芐基腺嘌呤6-BAO. lmg/L+2%蔗糖。所述增殖分化培養(yǎng)基成分優(yōu)選為MS+萘乙酸NAAO. 2mg/L+芐基腺嘌呤6_BA lmg/ L+2%鹿糖。所述壯苗培養(yǎng)基成分優(yōu)選為MS+10%香蕉+萘乙酸NAA1. 5mg/L+2%蔗糖。所述生根培養(yǎng)基成分優(yōu)選為MS+10%香蕉+萘乙酸NAA 2mg/L+吲哚丁酸IBA lmg/L+2% 鹿糖。各培養(yǎng)基PH值為5. 5-6. 0，培養(yǎng)溫度為23_25°C，光照強(qiáng)度1600-2000LX，光照時間 9-12h/d。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明通過組培技術(shù)，利用植物組織培養(yǎng)對朱砂蘭進(jìn)行繁殖時， 可發(fā)揮快繁的優(yōu)勢，短期內(nèi)獲得大量種苗；相對扦插而言，后期培養(yǎng)中植株花色也較少產(chǎn)生變異；并且植物組織培養(yǎng)作為一種無性繁殖方式，可保證幼苗整齊，既便于后期統(tǒng)一的移栽和種植管理，也能保證所長出的產(chǎn)品植株和盆栽在各個性狀上的一致。相對于以往的繁殖方式，所用培養(yǎng)基培養(yǎng)誘發(fā)時間短、出苗快、增殖頻率高，尤其出苗齊，易于操作，可進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)。


附圖I為本發(fā)明朱砂蘭組織培養(yǎng)方法的流程圖。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。(I)外植體采集10-11月是朱砂蘭蒴果成熟時期，當(dāng)蒴果外表轉(zhuǎn)為褐色，達(dá)到形態(tài)成熟而尚未開裂時采收。時間過早，種子胚發(fā)育不全影響發(fā)芽率；時間太遲，蒴果破裂，會造成不必要的損失;(2)消毒滅菌取朱砂蘭未開裂的蒴果，流水沖洗25_35min(分鐘)，在超凈工作臺上用70_75% 酒精處理25-35s (秒)后再用O. 1-0. 2%升汞液浸泡10_15min (分鐘)，倒去升汞溶液，用無菌水沖洗4-5次,每次不少于4-5min (分鐘)，后用無菌紙吸干果實表面水分；(3)播種在無菌條件下，將滅菌過的朱砂蘭種子播種在人工配制的播種培養(yǎng)基上，培養(yǎng) 30-40天，待培養(yǎng)物膨大形成原球體時，即開始下一階段；(4)增殖將上一步所得培養(yǎng)物在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的增殖培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng) 30-40天左右，膨大的原球體開始出現(xiàn)幼嫩的朱砂蘭小苗，待小苗長到常規(guī)壯苗程序所需高度時可將苗轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基上；(5)壯苗將上一步所得的朱砂蘭小苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的壯苗培養(yǎng)基上，經(jīng)過 25-35天培養(yǎng)的小苗開始出現(xiàn)2-3片葉子，形成獨立的植株，待植株長到常規(guī)生根程序所需高度時可將其轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上；(6)生根將上一步所得的朱砂蘭壯苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)30-50 天植株開始出現(xiàn)長高和5-6片葉子，在苗的基部長出多條肉質(zhì)、綠色氣生根，最后形成完整的植株，最終生根率高達(dá)80-95%。所述的種子萌發(fā)培養(yǎng)基包括MS+芐基腺嘌呤6-BA O. 1-0. 5mg/L+l_3%蔗糖。所述的增殖分化培養(yǎng)基包括MS+萘乙酸NAA O. 1-0. 3mg/L+芐基腺嘌呤
6-BA0. 8-1. 2mg/L+l-3%蔗糖。所述的壯苗培養(yǎng)基包括MS+10-15%香蕉+萘乙酸NAA l-2mg/L+l_3%蔗糖。所述的生根培養(yǎng)基包括MS+10-15%香蕉+萘乙酸NAA I. 5_2. 5mg/L+吲哚丁酸 IBA O. 8-1. 2mg/L+l-3%蔗糖。所述的MS基本培養(yǎng)基是由大量元素、微量元素和有機(jī)成分組成。所述種子萌發(fā)培養(yǎng)基成分優(yōu)選包括MS+芐基腺嘌呤6-BA O. lmg/L+2%蔗糖。所述增殖分化培養(yǎng)基成分優(yōu)選包括MS+萘乙酸NAA O. 2mg/L+芐基腺嘌呤6-BA lmg/L+2% 鹿糖。所述壯苗培養(yǎng)基成分優(yōu)選包括MS+10%香蕉+萘乙酸NAA I. 5mg/L+2%蔗糖。所述生根培養(yǎng)基成分優(yōu)選包括MS+10%香蕉+萘乙酸NAA 2mg/L+吲哚丁酸IBA lmg/L+2% 鹿糖。所述的朱砂蘭的各培養(yǎng)基PH值為5. 5-6. 0，培養(yǎng)溫度為23_25°C (度)，光照強(qiáng)度 1600-2000LX(勒克斯)，光照時間9-12h/d (小時/天)。實施例I(I)外植體采集10-11月是朱砂蘭蒴果成熟時期，當(dāng)蒴果外表轉(zhuǎn)為褐色，達(dá)到形態(tài)成熟而尚未開裂CN 102577973 A
書
明
說
4/7
時采收。時間過早，種子胚發(fā)育不全影響發(fā)芽率；時間太遲，蒴果破裂，會造成不必要的損失;(2)消毒滅菌取朱砂蘭未開裂的蒴果，流水沖洗25min，在超凈工作臺上用75%酒精處理25s后再用O. I %升汞液浸泡lOmin，倒去升汞溶液，用無菌水沖洗4次，每次不少于4min，后用無菌紙吸干果實表面水分；(3)播種MS培養(yǎng)基對種子的萌發(fā)和生長最好，蔗糖濃度1%，PH值為5. 5，6_BA(芐基腺嘌呤)濃度O. lmg/L (毫克/升)適合種子萌發(fā)和生長。在無菌條件下，將滅菌過的朱砂蘭種子播種在人工配制的播種培養(yǎng)基上。培養(yǎng)溫度為23°C，光照強(qiáng)度1600LX (勒克斯)，光照時間9h/d (小時/天)，培養(yǎng)30天，待培養(yǎng)物膨大形成原球體時，即開始下一階段；(4)增殖朱砂蘭原球體增殖分化培養(yǎng)階段的最適培養(yǎng)基為MS+NAA O. lmg/L+6-BA(6芐基腺嘌呤)0. 8mg/L+l%蔗糖，PH值為5. 5。將上一步所得培養(yǎng)物在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的增殖培養(yǎng)基上。培養(yǎng)溫度為23°C，光照強(qiáng)度1600LX，光照時間9h/d，經(jīng)過培養(yǎng)30天左右，膨大的原球體開始出現(xiàn)幼嫩的朱砂蘭小苗，待小苗長到常規(guī)壯苗程序所需高度時可將苗轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基上；(5)壯苗朱砂蘭壯苗階段的最適宜培養(yǎng)基為MS+10%香蕉+NAA lmg/L+1 %蔗糖，PH值為 5. 5 ;將上一步所得的朱砂蘭小苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的壯苗培養(yǎng)基上。培養(yǎng)溫度為23°C，光照強(qiáng)度1800LX，光照時間9h/d，經(jīng)過25天培養(yǎng)的小苗開始出現(xiàn)2_3片葉子，形成獨立的植株，待植株長到常規(guī)生根程序所需高度時可將其轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上。(6)生根朱砂蘭生根階段的培養(yǎng)基為MS+10%香蕉+NAA I. 5mg/L+IBA (卩引哚丁酸)0. 8mg/ L+1%蔗糖，PH值為5. 5。將上一步所得的朱砂蘭壯苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上； 培養(yǎng)溫度為23°C，光照強(qiáng)度1800LX，10h/d,經(jīng)過培養(yǎng)30天植株開始出現(xiàn)長高和5_6片葉子，在苗的基部長出多條肉質(zhì)、綠色氣生根，最后形成完整的植株。最終生根率為86.3%。實施例2(I)外植體采集10-11月是朱砂蘭蒴果成熟時期，當(dāng)蒴果外表轉(zhuǎn)為褐色，達(dá)到形態(tài)成熟而尚未開裂時采收。時間過早，種子胚發(fā)育不全影響發(fā)芽率；時間太遲，蒴果破裂，會造成不必要的損失;(2)消毒滅菌取朱砂蘭未開裂的蒴果，流水沖洗30min，在超凈工作臺上用75%酒精處理30s后再用O. I %升汞液浸泡15min，倒去升汞溶液，用無菌水沖洗5次,每次不少于5min，后用無菌紙吸干果實表面水分。(3)播種MS培養(yǎng)基對種子的萌發(fā)和生長最好，蔗糖濃度2%，PH值為6. 0，6_BA(芐基腺嘌呤)濃度O. lmg/L (毫克/升)適合種子萌發(fā)和生長。在無菌條件下，將滅菌過的朱砂蘭種子播種在人工配制的播種培養(yǎng)基上。培養(yǎng)溫度為25°C，光照強(qiáng)度2000LX(勒克斯)，光照時間10h/d(小時/天)，培養(yǎng)40天，待培養(yǎng)物膨大形成原球體時，即開始下一階段。⑷增殖朱砂蘭原球體增殖分化培養(yǎng)階段的最適培養(yǎng)基為MS+NAA O. 2mg/L+6_BA(6芐基腺嘌呤)lmg/L+2%蔗糖，PH值為6. O。將上一步所得培養(yǎng)物在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的增殖培養(yǎng)基上。培養(yǎng)溫度為25°C，光照強(qiáng)度2000LX，光照時間10h/d，經(jīng)過培養(yǎng)40天左右， 膨大的原球體開始出現(xiàn)幼嫩的朱砂蘭小苗，待小苗長到常規(guī)壯苗程序所需高度時可將苗轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基上。(5)壯苗朱砂蘭壯苗階段的最適宜培養(yǎng)基為MS+10%香蕉+NAA I. 5mg/L+2%蔗糖，PH值為 6.0。將上一步所得的朱砂蘭小苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的壯苗培養(yǎng)基上。培養(yǎng)溫度為25°C，光照強(qiáng)度2000LX，光照時間10h/d，經(jīng)過30天培養(yǎng)的小苗開始出現(xiàn)2_3片葉子， 形成獨立的植株，待植株長到常規(guī)生根程序所需高度時可將其轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上。(6)生根朱砂蘭生根階段的培養(yǎng)基為MS+10%香蕉+NAA 2mg/L+IBA (吲哚丁酸)lmg/L+2% 蔗糖，PH值為6. O。將上一步所得的朱砂蘭壯苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上。培養(yǎng)溫度為25°C，光照強(qiáng)度2000LX，光照時間10h/d，經(jīng)過培養(yǎng)50天植株開始出現(xiàn)長高和5_6片葉子，在苗的基部長出多條肉質(zhì)、綠色氣生根，最后形成完整的植株。最終生根率為95%。實施例3(I)外植體采集10-11月是朱砂蘭蒴果成熟時期，當(dāng)蒴果外表轉(zhuǎn)為褐色，達(dá)到形態(tài)成熟而尚未開裂時采收。時間過早，種子胚發(fā)育不全影響發(fā)芽率；時間太遲，蒴果破裂，會造成不必要的損失;(2)消毒滅菌取朱砂蘭未開裂的蒴果，流水沖洗35min，在超凈工作臺上用75%酒精處理35s后再用O. 2%升汞液浸泡15min，倒去升汞溶液，用無菌水沖洗5次,每次不少于5min，后用無菌紙吸干果實表面水分。(3)播種MS培養(yǎng)基對種子的萌發(fā)和生長最好，蔗糖濃度3%，PH值為6.0，6-BA(芐基腺嘌呤)濃度O. 5mg/L (毫克/升)適合種子萌發(fā)和生長。在無菌條件下，將滅菌過的朱砂蘭種子播種在人工配制的播種培養(yǎng)基上。培養(yǎng)溫度為25°C，光照強(qiáng)度2000LX (勒克斯)，光照時間llh/d(小時/天)，培養(yǎng)40天，待培養(yǎng)物膨大形成原球體時，即開始下一階段。(4)增殖朱砂蘭原球體增殖分化培養(yǎng)階段的最適培養(yǎng)基為MS+NAA O. 3mg/L+6_BA(6芐基腺嘌呤)I. 2mg/L+3%蔗糖，PH值為6. O。將上一步所得培養(yǎng)物在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的增殖培養(yǎng)基上。培養(yǎng)溫度為25°C，光照強(qiáng)度2000LX，光照時間llh/d，經(jīng)過培養(yǎng)40天左右，膨大的原球體開始出現(xiàn)幼嫩的朱砂蘭小苗，待小苗長到常規(guī)壯苗程序所需高度時可將苗轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基上。(5)壯苗
朱砂蘭壯苗階段的最適宜培養(yǎng)基為MS+15%香蕉+NAA 2mg/L+3 %蔗糖，PH值為 6.0。將上一步所得的朱砂蘭小苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的壯苗培養(yǎng)基上。培養(yǎng)溫度為25°C，光照強(qiáng)度2000LX，光照時間llh/d，經(jīng)過30天培養(yǎng)的小苗開始出現(xiàn)2_3片葉子， 形成獨立的植株，待植株長到常規(guī)生根程序所需高度時可將其轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上。(6)生根朱砂蘭生根階段的培養(yǎng)基為MS+15%香蕉+NAA 2. 5mg/L+IBA (吲哚丁酸)I. 2mg/ L+3%蔗糖，PH值為6. O。將上一步所得的朱砂蘭壯苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上。 培養(yǎng)溫度為25°C，光照強(qiáng)度2000LX，光照時間llh/d，經(jīng)過培養(yǎng)50天植株開始出現(xiàn)長高和 5-6片葉子，在苗的基部長出多條肉質(zhì)、綠色氣生根，最后形成完整的植株。最終生根率為 83.5%。試驗結(jié)果與分析表I不同濃度的6-BA對朱砂蘭誘導(dǎo)形成的影響
濃度mg/I」 轉(zhuǎn)綠時間/d原球莖形成時間/d增殖率/%O. I253191. 3%
O. 3273579. 15%O. 5354253. 4%
觀察MS培養(yǎng)基中，添加濃度分別為O. 1、0. 3、0. 5mg/L的激素6-BA時朱砂蘭誘導(dǎo)表現(xiàn)。朱砂蘭種子在O. lmg/L的水平上最先轉(zhuǎn)綠，形成原球莖的時間最短，增值率也比其余兩個水平的高出很多。所以朱砂蘭誘導(dǎo)最適合的6-BA水平為O. lmg/LO
表2不同濃度的6-BA對朱砂蘭增殖的影響濃度mg/L- 平均苗高/cm平均葉長/cm莖粗壯度O. 8O. 8O. 05較好
II. 3O. 2最好I. 2O. 9O. I一般觀察MS培養(yǎng)基中，添加濃度分別為O. 8、I、I. 2mg/L的激素6_BA時原球莖增殖表現(xiàn)。朱砂蘭原球莖在O. lmg/L的水平上平均植株高度最高，平均葉長最長，莖粗壯度也比其余兩個水平的好。所以朱砂蘭增殖最適合的6-BA水平為lmg/L。表3不同濃度的NAA對朱砂蘭壯苗的影響
濃度mg/L平均根長/cm平均根數(shù)/條葉長/cm生根率/%I1.43. O3. I83. 2%I. 52. O5. O5. 287. 85%2I. II. O2. 371. 6%觀察MS培養(yǎng)基中，添加濃度分別為1、1. 5、2mg/L的激素NAA時朱砂蘭壯苗表現(xiàn)。
I.5mg/L水平上根長最長，根數(shù)最多，葉長最長，生根率也比其余兩個水平的高出很多。激素
9lmg/L的NAA生根率雖然比2mg/L的高一點，但其植株的質(zhì)量不是很好，葉片有發(fā)黃的情況出現(xiàn)不利于后期的培養(yǎng)。2mg/L的NAA在生根率上，相比其它兩個的綜合水平都要低很多。表4不同濃度的NAA對朱砂蘭生根的影響
權(quán)利要求
1.朱砂蘭組織培養(yǎng)方法，其特征在于，該方法包括以下步驟(1)外植體采集10-11月是朱砂蘭蒴果成熟時期，當(dāng)蒴果外表轉(zhuǎn)為褐色，達(dá)到形態(tài)成熟而尚未開裂時采收；時間過早，種子胚發(fā)育不全影響發(fā)芽率；時間太遲，蒴果破裂，會造成不必要的損失；(2)消毒滅菌取朱砂蘭未開裂的蒴果，流水沖洗25-35min，在超凈工作臺上用70-75%酒精處理 25-35s后再用0. 1-0. 2%升汞液浸泡10-15min，倒去升汞溶液，用無菌水沖洗4-5次，每次不少于4-5min,后用無菌紙吸干果實表面水分；(3)播種在無菌條件下，將滅菌過的朱砂蘭種子播種在人工配制的播種培養(yǎng)基上；培養(yǎng)30-40 天，待培養(yǎng)物膨大形成原球體時，即開始下一階段；⑷增殖將上一步所得培養(yǎng)物在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的增殖培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)30-40 天左右，膨大的原球體開始出現(xiàn)幼嫩的朱砂蘭小苗，待小苗長到常規(guī)壯苗程序所需高度時可將苗轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基上；(5)壯苗將上一步所得的朱砂蘭小苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到人工配制的壯苗培養(yǎng)基上；經(jīng)過 25-35天培養(yǎng)的小苗開始出現(xiàn)2-3片葉子，形成獨立的植株，待植株長到常規(guī)生根程序所需高度時可將其轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上；(6)生根將上一步所得的朱砂蘭壯苗在無菌條件下轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)30-50天植株開始出現(xiàn)長高和5-6片葉子，在苗的基部長出多條肉質(zhì)、綠色氣生根，最后形成完整的植株；最終生根率高達(dá)80-95% ；所述的種子萌發(fā)培養(yǎng)基包括MS+芐基腺嘌呤6-BA 0. 1-0. 5mg/L+l-3%蔗糖；所述的增殖分化培養(yǎng)基包括MS+萘乙酸NAA 0. 1-0. 3mg/L+6芐基腺嘌呤 6-BA0. 8-1. 2mg/L+l-3%蔗糖；所述的壯苗培養(yǎng)基包括MS+10-15%香蕉+萘乙酸NAA l-2mg/L+l-3%蔗糖；所述的生根培養(yǎng)基包括MS+10-15%香蕉+萘乙酸NAA I. 5-2. 5mg/L+吲哚丁酸IBA 0. 8-1. 2mg/L+l-3*%鹿糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的朱砂蘭組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述的MS基本培養(yǎng)基是由大量元素、微量元素和有機(jī)成分組成。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的朱砂蘭組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述種子萌發(fā)培養(yǎng)基成分優(yōu)選為MS+芐基腺嘌呤6-BA 0. lmg/L+2%蔗糖。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的朱砂蘭組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述增殖分化培養(yǎng)基成分優(yōu)選為MS+萘乙酸NAAO. 2mg/L+芐基腺嘌呤6_BA lmg/L+2%蔗糖。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的朱砂蘭的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述壯苗培養(yǎng)基成分優(yōu)選為MS+10%香蕉+萘乙酸NAA I. 5mg/L+2%蔗糖。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的朱砂蘭組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述生根培養(yǎng)基成分優(yōu)選為MS+10%香蕉+萘乙酸NAA 2mg/L+吲哚丁酸IBA lmg/L+2%蔗糖。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的朱砂蘭的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，各培養(yǎng)基PH值為5.5-6. 0，培養(yǎng)溫度為23-25°C，光照強(qiáng)度1600-2000LX，光照時間9_12h/d。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種植物的組織培養(yǎng)方法，尤其是涉及朱砂蘭的組織培養(yǎng)方法，屬農(nóng)業(yè)種植技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明朱砂蘭的組織培養(yǎng)方法包括外植體采集、消毒滅菌、播種、增殖、壯苗、生根培養(yǎng)六個步驟。本發(fā)明通過組培技術(shù)，利用植物組織培養(yǎng)對朱砂蘭進(jìn)行繁殖時，可發(fā)揮快繁的優(yōu)勢，短期內(nèi)獲得大量種苗；相對扦插而言，后期培養(yǎng)中植株花色也較少產(chǎn)生變異；并且植物組織培養(yǎng)作為一種無性繁殖方式，可保證幼苗整齊，既便于后期統(tǒng)一的移栽和種植管理，也能保證所長出的產(chǎn)品植株和盆栽在各個性狀上的一致。相對于以往的繁殖方式，所用培養(yǎng)基培養(yǎng)誘發(fā)時間短、出苗快、增殖頻率高，尤其出苗齊，易于操作，可進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號A01H4/00GK102577973SQ20121006367
公開日2012年7月18日 申請日期2012年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月12日
發(fā)明者姚云芳, 岳健, 李建, 李昆華, 李江黎 申請人:云南山里紅生物科技有限公司