專利名稱：一株用于青貯玉米的乳酸菌及其使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一株青!)&用乳桿菌，具體是ー株能夠加速玉米青忙成熟并改善玉米青貯飼料品質(zhì)的用于玉米青貯植物乳桿菌及其使用方法。
背景技術(shù)：
青貯是通過乳酸發(fā)酵快速降低pH值并維持厭氧環(huán)境，以利于青貯作物長期保存的一種貯藏方式。與飼草晾曬成干草相比，飼草青貯可以大幅度縮短從收割到貯藏的時(shí)間，避免不良天氣造成的飼草損失，使青綠飼草的營養(yǎng)成分得到最大限度的保存。玉米全株青貯或玉米秸桿青貯是目前最常見的青貯飼料，它在青貯飼料中約占90 %以上，然而常規(guī)的玉米青貯存在成功率的問題，在青貯過程中存在著因乳酸菌數(shù)量不足，酸化速度過慢而引起營養(yǎng)成分損失的問題，以及開窖后的二次發(fā)酵等問題，它們都直接或間接影響青貯的質(zhì)量。所以改善玉米青貯對提高我國整個青貯飼料的質(zhì)量和供給量都有重要的作用，并會帶 來巨大的經(jīng)濟(jì)效益。乳酸菌是近年來正在推廣的青貯微生物添加剤，其主要作用是有目的地調(diào)節(jié)青貯料內(nèi)微生物組成，調(diào)控青貯發(fā)酵過程，促進(jìn)乳酸菌大量繁殖，有害菌活動受到抑制，更快地產(chǎn)生乳酸，促進(jìn)多糖與粗纖維的轉(zhuǎn)化，提高干物質(zhì)回收率，從而有效提高青貯飼料的質(zhì)量，具有較大潛力和廣闊的發(fā)展前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一株能夠加速玉米青貯成熟并改善玉米青貯飼料品質(zhì)的用于玉米青貯植物乳桿菌及其使用方法。本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。一株植物乳桿菌，其特征在于所述植物乳桿菌(Lactobacillus plantarumPs-8)是從130株植物乳桿菌中篩選出來的具有良好的耐酸性、生長能力強(qiáng)、產(chǎn)酸速度快的乳酸菌；該菌菌株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國科學(xué)院微生物研究所，分類命名植物乳桿菌Lactobacillus plantarum，保藏號=CGMCC No. 5359，保藏日期為:2011 年 10 月 28 日。所述植物乳桿菌在玉米秸桿青貯中的應(yīng)用。菌株活化將冷凍保存的L. plantarum Ps-8接種于MRS液體培養(yǎng)基中，在溫度37°C下培養(yǎng)18-22h，如此傳代培養(yǎng)2-3次得到所述的活化L. plantarum Ps-8菌種；所述的MRS液體培養(yǎng)基組成如下10g蛋白胨、5g牛肉膏、4g酵母浸粉、20g葡萄糖、2g磷酸氫ニ鉀、5gこ酸鈉、2g檸檬酸三鈉、ImL吐溫80、0. 2g硫酸鎂、0. 05g硫酸錳加入IOOOmL蒸餾水，調(diào)節(jié) pH 至 6. 5,121°C 滅菌 15min。菌液配制將上述活化的菌種離心后，加入適量的滅菌水，制成菌體懸浮液，使其含乳酸菌活菌數(shù)在I X 108cfu/mL。植物乳桿菌在玉米青貯飼料中的使用方法，其特征在于包括下列步驟青貯玉米原料選在乳熟期末至蠟熟期刈割，切碎至2-3cm，玉米原料青貯時(shí)的水分含量控制在65% -70%，稱取IOOg玉米原料裝入真空包裝塑料袋中(180X 260cm)，將上述制備的菌液以lX105cfu/g的接種量接種到玉米原料中，采用真空包裝機(jī)真空包裝后，置于儲藏室進(jìn)行發(fā)酵。青貯玉米的品質(zhì)檢測青貯玉米發(fā)酵20-30天即發(fā)酵成熟后，取出部分青貯玉米進(jìn)行感官評定、微生物組成和發(fā)酵品質(zhì)分析。本發(fā)明提供的植物乳桿菌具有下述的積極效果本發(fā)明通過乳酸菌的生長特性研究、對玉米青貯成熟和品質(zhì)的影響、乳酸菌在玉米青貯發(fā)酵過程中的動態(tài)變化，篩選出加速玉米青貯成熟和提高玉米青貯品質(zhì)等功能性強(qiáng)的菌種 L. plantarum Ps_8。本發(fā)明還涉及將本發(fā)明菌種添加到青貯玉米中發(fā)酵成熟后，青貯玉米氣味酸甜芳香、呈黃緑色、組織結(jié)構(gòu)保持良好。經(jīng)檢驗(yàn)，在發(fā)酵前期可以快速降低PH值，乳酸菌數(shù)迅速 増加，加速發(fā)酵成熟，而且乳酸和こ酸的含量也得以提高，明顯改善了青貯發(fā)酵玉米的品質(zhì)。因此本發(fā)明所述的乳酸菌具有加速玉米青貯成熟和提高玉米青貯品質(zhì)等優(yōu)點(diǎn)。


圖I本發(fā)明所述菌種的產(chǎn)酸速率圖；圖2本發(fā)明所述菌種的生長曲線圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)ー步說明；下述實(shí)施例只是說明性的，并不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無特別說明，均為常規(guī)方法。實(shí)施例I :—株植物乳桿菌，所述植物乳桿菌(L. plantarum Ps_8)是從130株植物乳桿菌中篩選出來的具有良好的耐酸性、生長能力強(qiáng)、產(chǎn)酸速度快的乳酸菌；該菌菌株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中心，保藏號=CGMCC No. 5359。 所述植物乳桿菌在玉米秸桿青貯中的應(yīng)用。菌株活化將冷凍保存的L. plantarum Ps-8接種于MRS液體培養(yǎng)基中，在溫度37°C下培養(yǎng)18-22h，如此傳代培養(yǎng)2-3次得到所述的活化L. plantarum Ps-8菌種；所述的MRS液體培養(yǎng)基組成如下10g蛋白胨、5g牛肉膏、4g酵母浸粉、20g葡萄糖、2g磷酸氫ニ鉀、5gこ酸鈉、2g檸檬酸三鈉、ImL吐溫80、0. 2g硫酸鎂、0. 05g硫酸錳加入IOOOmL蒸餾水，調(diào)節(jié) pH 至 6. 5,121°C滅菌 15min。菌液配制將上述活化的菌種離心后，加入適量的滅菌水，制成菌體懸浮液，使其含乳酸菌活菌數(shù)在I X 108cfu/mL。植物乳桿菌在玉米青貯飼料中的使用方法，包括下列步驟青貯玉米原料選在乳熟期末至蠟熟期刈割，切碎至2-3cm，玉米原料青貯時(shí)的水分含量控制在65% -70%，稱取IOOg玉米原料裝入真空包裝塑料袋中(180X 260cm)，將上述制備的菌液以IX 105cfu/g的接種量接種到玉米原料中，采用真空包裝機(jī)真空包裝后，置于儲藏室進(jìn)行發(fā)酵。
將活化的菌種離心后，加入適量的滅菌水，制成菌體懸浮液，使其含乳酸菌活菌數(shù)在lX108cfu/mL。以lX105cfu/g的接種量接種到玉米原料中，添加同體積的滅菌蒸懼水作為對照組，采用真空包裝機(jī)真空包裝后，置于儲藏室進(jìn)行發(fā)酵。分別在發(fā)酵3、7、10、15、30天時(shí)，稱取IOg青貯飼料，加入90ml滅菌水，充分震蕩，再用滅菌水以十倍稀釋法對樣品進(jìn)行梯度稀釋，分別選取適當(dāng)?shù)南♂屢?00 UL涂布于MRS固體培養(yǎng)基，30°C恒溫培養(yǎng)箱中厭氧培養(yǎng)48h后，對乳酸菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，并測定上述青貯玉米稀釋液的pH值。青貯發(fā)酵過程中的乳酸菌和PH值動態(tài)變化見表I。表I青貯玉米發(fā)酵過程中的乳酸菌和pH值動態(tài)變化
權(quán)利要求
1.一株適用于玉米青貯飼料發(fā)酵的植物乳桿菌，其特征在于所述植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum Ps_8)是從130株植物乳桿菌中篩選出來的耐酸、產(chǎn)酸能力強(qiáng)、生長速度快的得乳酸菌；該菌菌株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中心，保藏號=CGMCC No. 5359，保藏日期為:2011年10月28日。
2.植物乳桿菌的應(yīng)用，其特征在于所述植物乳桿菌在加速玉米青貯成熟和提高玉米青貯品質(zhì)中的應(yīng)用。
3.植物乳桿菌的活化和培養(yǎng)，其特征在于將冷凍保存的L.plantarum Ps-8接種于MRS液體培養(yǎng)基中，在溫度37°C下培養(yǎng)18-22h，如此傳代培養(yǎng)2_3次得到所述的活化L. plantarum Ps_8菌種；所述的MRS液體培養(yǎng)基組成如下IOg蛋白胨、5g牛肉膏、4g酵母浸粉、20g葡萄糖、2g磷酸氫ニ鉀、5gこ酸鈉、2g檸檬酸三鈉、ImL吐溫80、0. 2g硫酸鎂、 0. 05g硫酸猛加入IOOOmL蒸懼水,調(diào)節(jié)pH至6. 5,121°C滅菌15min。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的植物乳桿菌菌液的制備，其特征在于將活化的菌種離心后，加入適量的滅菌水，制成菌體懸浮液，使其含乳酸菌活菌數(shù)在I X 108cfu/mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的植物乳桿菌在玉米青貯飼料中的使用方法，其特征在于包括下列步驟青貯玉米原料選在乳熟期末至蠟熟期刈割，切碎至2-3cm，并控制水分含量在65% -70%，稱取IOOg原料裝入真空包裝塑料袋中(180X260cm)，將權(quán)利要求4制備的菌液以lX105cfu/g的接種量接種到玉米原料中，采用真空包裝機(jī)真空包裝后，置于儲藏室進(jìn)行發(fā)酵。
全文摘要
一株能夠加速玉米青貯成熟并改善玉米青貯飼料品質(zhì)的用于玉米青貯植物乳桿菌。技術(shù)方案是其特征在于所述植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum Ps-8)是從130株植物乳桿菌中篩選出來的具有良好的耐酸性、生長能力強(qiáng)、產(chǎn)酸速度快的乳酸菌；該菌菌株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中心，保藏號CGMCC No.5359，保藏日期為2011年10月28日。本發(fā)明還公開了其使用方法。
文檔編號A23K3/03GK102864094SQ20121011519
公開日2013年1月9日 申請日期2012年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月18日
發(fā)明者于潔, 高鵬飛 申請人:北京和美科盛生物技術(shù)有限公司