專(zhuān)利名稱(chēng)：野生紅土雞樅菌人工馴化母種的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明公開(kāi)ー種野生菌通過(guò)人工馴化獲得母種的方法，具體地是野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法。
背景技術(shù)：
麗(Xhidemansiella radicata var. alba )是我國(guó)云南省紅土高原特有的野生菌種，子實(shí)體中等至大型，只生長(zhǎng)在我國(guó)云南省海抜1800米以上的高原地區(qū)。夏秋季常常生長(zhǎng)在呈弱酸性的紅色土壌潮濕林地上，故名紅土雞揪，屬中低溫型菌類(lèi)，野生產(chǎn)量極低，十分珍貴。其外觀怡人，味道鮮美，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高。紅土雞揪菌菇體大、菌柄粗長(zhǎng)、菌蓋表面淺褐色、菌柄白色、菇蓋厚實(shí)、品質(zhì)優(yōu)良。目前，國(guó)內(nèi)外沒(méi)有任何馴化栽培野生紅土雞揪菌子實(shí)體的先例。載止本專(zhuān)利申請(qǐng)前，在我國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)中涉及雞揪菌種植的不上10項(xiàng)，并且均沒(méi)有·獲得授權(quán)，主要問(wèn)題是菌種證明力度弱，沒(méi)有獲得保藏認(rèn)可，其提出的雞揪菌難以確認(rèn)。因紅土雞揪菌特殊的營(yíng)養(yǎng)、味道和保健作用，野生菌產(chǎn)品價(jià)格一直很高，單純采摘野生紅土雞揪菌已經(jīng)難以滿(mǎn)足市場(chǎng)的巨大需求。為此，非常有必要進(jìn)行人工馴化栽培技術(shù)開(kāi)發(fā)。本發(fā)明使野生紅土雞揪菌人工馴化栽培邁出了第一歩，進(jìn)行了野生紅土雞揪菌人エ馴化母種的技術(shù)開(kāi)發(fā)，并得以實(shí)現(xiàn)，為云南省珍貴野生菌資源的可持續(xù)利用奠定了產(chǎn)業(yè)技術(shù)基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供ー種對(duì)野生紅土雞揪菌進(jìn)行人エ馴化，首先獲得原始母種的制備方法。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案及過(guò)程是這樣的采用的技術(shù)包含單孢子雜交技術(shù)，子實(shí)體組織分離技術(shù)。制備方法過(guò)程為
⑴采集自然野外生長(zhǎng)在云南省海抜1800米以上紅土高原地區(qū)的紅土雞揪菌子實(shí)體獲得孢子；
⑵通過(guò)單孢子雜交技術(shù)篩選獲得紅土雞揪菌出菇菌株；
⑶再通過(guò)子實(shí)體組織分離進(jìn)行系統(tǒng)選育，經(jīng)過(guò)2 6年的系統(tǒng)培育，人工馴化，得到穩(wěn)定性強(qiáng)，可用于繁殖生產(chǎn)的紅土雞揪菌母種。這ー方法人工馴化的紅土雞揪菌母種繁育方法具體過(guò)程細(xì)化為
⑴制備紅土雞揪菌母種培養(yǎng)基原料，該原料所使用的各種物質(zhì)和重量組份為、香蕉30 100克、馬鈴薯50 150克、玉米粉20 50克、胡蘿卜20 50克、水1000 2000克、瓊脂10 30克；
⑵先將香蕉、馬鈴薯、玉米粉、胡羅卜等粉碎混合成泥狀物備用；再將水燒開(kāi)加入所需的瓊脂，待瓊脂溶化后，加入備用的泥狀物，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笥脵幟仕嵴{(diào)pH值5. O 6. 5，乘熱分裝在試管或其他玻璃容器中；在110 126°C下滅菌20 45分鐘，冷卻后制成培養(yǎng)基;
⑶接入人工馴化的紅土雞揪母種進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為15 26°C，培養(yǎng)7 15天菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)培養(yǎng)基表面成為成熟母種，紅土雞揪母種即制作完成；
⑷在I 4°C條件下保存?zhèn)溆茫蛘呒纯捎糜诜敝吃N。其中，制備紅土雞揪菌母種培養(yǎng)基原料，該原料所使用的各種物質(zhì)和重量組份還可為、葡萄糖2 30克、麥芽糖2 30克、磷酸ニ氫鉀I 10克、硫酸鎂O. 5 3克、硫酸鋅O. 5 5克、硫酸亞鐵O. 5 5克、磷酸ニ氫銨O. 5 3克、蛋白胨I 10克、酵母浸膏I 5克、煙酸50 150毫克、核黃素10 50毫克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調(diào)PH值； 或者蔗糖2 30克、麥芽糖2 30克、磷酸氫ニ鉀O. 5 5克、硫酸鎂O. 5 3克、硫酸鋅O. 5 5克、硫酸銨O. 5 5克、牛肉浸膏2 10克、氯化鐵30 300毫克、硫胺素20 100毫克、煙酸50 150毫克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調(diào)pH值；
或者小麥粒10 30克、玉米粉5 15克、馬鈴薯30 100克、香菇50 150克、葡萄糖10 20克、磷酸ニ氫鉀I 5克、硫酸鎂O. 5 3克、蛋白胨I 5克、酵母浸膏I
3克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調(diào)pH值。本發(fā)明的有益效果在于首次將野生紅土雞揪菌人工馴化成可繁殖的原始母種，為人工栽培紅土雞揪菌邁出了第一歩；所獲得的母種菌絲健壯、扭結(jié)力強(qiáng)、顏色潔白、生長(zhǎng)迅速和易出菇、品質(zhì)好、效率高。其開(kāi)創(chuàng)性的研發(fā)工作，為云南省珍貴野生菌資源的可持續(xù)利用奠定了產(chǎn)業(yè)技術(shù)基礎(chǔ)。


本發(fā)明主要內(nèi)容是制備方法，故無(wú)具體的附圖提供。本發(fā)明涉及的紅土雞揪菌(ifcofefflmsieWa radicata var. alba )已申報(bào)生物活性材料保存，自定義編名為FBM-001，以于2012年4月13日，在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，簡(jiǎn)稱(chēng)CGMCC進(jìn)行了保藏，保藏編號(hào)為CGMCC5970，并證明存活。
具體實(shí)施例方式下面對(duì)本發(fā)明的制備方法，給出ー些更加具體的實(shí)施方式說(shuō)明。實(shí)施例I :野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法 采用的技術(shù)包含單孢子雜交技木，子實(shí)體組織分離技木。制備方法過(guò)程為
⑴采集自然野外生長(zhǎng)在云南省海抜1800米以上紅土高原地區(qū)的紅土雞揪菌子實(shí)體獲得孢子；
⑵通過(guò)單孢子雜交技術(shù)篩選獲得紅土雞揪菌出菇菌株；
⑶再通過(guò)子實(shí)體組織分離進(jìn)行系統(tǒng)選育，經(jīng)過(guò)2 6年的系統(tǒng)培育，人工馴化，得到穩(wěn)定性強(qiáng)，可用于繁殖生產(chǎn)的紅土雞揪菌母種。這ー方法人工馴化的紅土雞揪菌母種繁育方法具體過(guò)程細(xì)化為⑴制備紅土雞揪菌母種培養(yǎng)基原料，該原料所使用的各種物質(zhì)和重量組份為、香蕉30 100克、馬鈴薯50 150克、玉米粉20 50克、胡蘿卜20 50克、水1000 2000克、瓊脂10 30克；
⑵先將香蕉、馬鈴薯、玉米粉、胡羅卜等粉碎混合成泥狀物備用；再將水燒開(kāi)加入所需的瓊脂，待瓊脂溶化后，加入備用的泥狀物，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笥脵幟仕嵴{(diào)pH值5. O 6. 5，乘熱分裝在試管或其他玻璃容器中；在110 126°C下滅菌20 45分鐘，冷卻后制成培養(yǎng)基;
⑶接入人工馴化的紅土雞揪母種進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為15 26°C，培養(yǎng)7 15天菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)培養(yǎng)基表面成為成熟母種，紅土雞揪母種即制作完成；
⑷在I 4°C條件下保存?zhèn)溆?，或者即可用于繁殖原種。上述所使用的物質(zhì)均是現(xiàn)存天然的物質(zhì)，可在市場(chǎng)中采購(gòu)使用。實(shí)施例2 :野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法 采用的技術(shù)包含單孢子雜交技木，子實(shí)體組織分離技木。制備方法過(guò)程為
⑴采集自然野外生長(zhǎng)在云南省海拔1800米以上紅土高原地區(qū)的紅土雞揪菌子實(shí) 體獲得孢子；
⑵通過(guò)單孢子雜交技術(shù)篩選獲得紅土雞揪菌出菇菌株；
⑶再通過(guò)子實(shí)體組織分離進(jìn)行系統(tǒng)選育，經(jīng)過(guò)2 6年的系統(tǒng)培育，人工馴化，得到穩(wěn)定性強(qiáng)，可用于繁殖生產(chǎn)的紅土雞揪菌母種。這ー方法人工馴化的紅土雞揪菌母種繁育方法具體過(guò)程細(xì)化為
制備紅土雞揪菌母種培養(yǎng)基原料，該原料所使用的各種物質(zhì)和重量組份為葡萄糖2 30克、麥芽糖2 30克、磷酸ニ氫鉀I 10克、硫酸鎂O. 5 3克、硫酸鋅O. 5 5克、硫酸亞鐵O. 5 5克、磷酸ニ氫銨O. 5 3克、蛋白胨I 10克、酵母浸膏I 5克、煙酸50 150毫克、核黃素10 50毫克，將它們粉碎混合均勻成泥狀物，煮開(kāi)水1000 2000克、溶入瓊脂10 30克，再放入上述泥狀物調(diào)均，用檸檬酸調(diào)pH值5. O 6. 5 ;乘熱分裝在試管或其他玻璃容器中；在110 126°C下滅菌20 45分鐘，冷卻后制成培養(yǎng)基。接入人工馴化的紅土雞揪母種進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為15 26°C，培養(yǎng)7 15天菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)培養(yǎng)基表面成為成熟母種，紅土雞揪母種即制作完成；
在I 4°C條件下保存?zhèn)溆?，或者即可用于繁殖原種。上述所使用的物質(zhì)，均是市場(chǎng)中所能夠獲得的正規(guī)商品，其規(guī)格、含量、成份均是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法，采用的技術(shù)包含單孢子雜交技術(shù)，子實(shí)體組織分離技術(shù)，其特征是制備方法過(guò)程為、 ⑴采集自然野外生長(zhǎng)在云南省海拔1800米以上紅土高原地區(qū)的紅土雞揪菌子實(shí)體獲得孢子； ⑵通過(guò)單孢子雜交技術(shù)篩選獲得紅土雞揪菌出菇菌株； ⑶再通過(guò)子實(shí)體組織分離進(jìn)行系統(tǒng)選育，經(jīng)過(guò)2 6年的系統(tǒng)培育，人工馴化，得到穩(wěn)定性強(qiáng)，可用于繁殖生產(chǎn)的紅土雞揪菌母種。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法，其特征是人工馴化的紅土雞揪菌母種繁育方法過(guò)程為、 ⑴制備紅土雞揪菌母種培養(yǎng)基原料，該原料所使用的各種物質(zhì)和重量組份為、香蕉 30 100克、馬鈴薯50 150克、玉米粉20 50克、胡蘿卜20 50克、水1000 2000克、瓊脂10 30克； ⑵先將香蕉、馬鈴薯、玉米粉、胡羅卜等粉碎混合成泥狀物備用；再將水燒開(kāi)加入所需的瓊脂，待瓊脂溶化后，加入備用的泥狀物，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笥脵幟仕嵴{(diào)pH值5. O 6. 5，乘熱分裝在試管或其他玻璃容器中；在110 126°C下滅菌20 45分鐘，冷卻后制成培養(yǎng)基; ⑶接入人工馴化的紅土雞揪母種進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為15 26°C，培養(yǎng)7 15天菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)培養(yǎng)基表面成為成熟母種，紅土雞揪母種即制作完成； ⑷在I 4°C條件下保存?zhèn)溆茫蛘呒纯捎糜诜敝吃N。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法，其特征是制備紅土雞揪菌母種培養(yǎng)基原料，該原料所使用的各種物質(zhì)和重量組份還可為、葡萄糖2 30克、麥芽糖2 30克、磷酸二氫鉀I 10克、硫酸鎂O. 5 3克、硫酸鋅O. 5 5克、硫酸亞鐵O. 5 5克、磷酸二氫銨O. 5 3克、蛋白胨I 10克、酵母浸膏I 5克、煙酸50 150毫克、核黃素10 50毫克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調(diào)PH值; 或者蔗糖2 30克、麥芽糖2 30克、磷酸氫二鉀O. 5 5克、硫酸鎂O. 5 3克、硫酸鋅O. 5 5克、硫酸銨O. 5 5克、牛肉浸膏2 10克、氯化鐵30 300毫克、硫胺素20 100毫克、煙酸50 150毫克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調(diào)pH值； 或者小麥粒10 30克、玉米粉5 15克、馬鈴薯30 100克、香菇50 150克、葡萄糖10 20克、磷酸二氫鉀I 5克、硫酸鎂O. 5 3克、蛋白胨I 5克、酵母浸膏I 3克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調(diào)pH值。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種野生紅土雞樅菌人工馴化母種的制備方法，是一種人工馴化生物技術(shù)的具體應(yīng)用。解決野生菌人工栽培的技術(shù)難題。技術(shù)方法為⑴采集自然野外生長(zhǎng)在云南省海拔1800米以上紅土高原地區(qū)的紅土雞樅菌子實(shí)體獲得孢子；⑵通過(guò)單孢子雜交技術(shù)篩選獲得紅土雞樅菌出菇菌株；⑶再通過(guò)子實(shí)體組織分離進(jìn)行系統(tǒng)選育，經(jīng)過(guò)2～6年的系統(tǒng)培育，人工馴化，得到穩(wěn)定性強(qiáng)，可用于繁殖生產(chǎn)的紅土雞樅菌母種。本發(fā)明的紅土雞樅菌母種可用于人工種植生產(chǎn)紅土雞樅菌。
文檔編號(hào)A01G1/04GK102726211SQ20121014590
公開(kāi)日2012年10月17日 申請(qǐng)日期2012年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月13日
發(fā)明者李先, 李本春, 田果廷, 肖燕, 趙榆新, 錢(qián)赟 申請(qǐng)人:云南福保農(nóng)業(yè)科技開(kāi)發(fā)有限公司