一種利用百合根誘導(dǎo)愈傷組織及胚狀體的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用百合根誘導(dǎo)愈傷組織及胚狀體的方法，包括以下步驟：1）選取百合無菌苗的根，接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，進(jìn)行暗培養(yǎng)，培養(yǎng)室溫度為25±2℃；2）將暗培養(yǎng)獲得的愈傷組織上的胚狀體轉(zhuǎn)接到生長和生根培養(yǎng)基上，光下進(jìn)行培養(yǎng)，每天16-20小時(shí)光照，溫度為25±2℃；3）胚狀體變綠，逐漸發(fā)育成正常植株，并生根。用本發(fā)明該特定的培養(yǎng)方法及培養(yǎng)基，可使百合根誘導(dǎo)愈傷組織的誘導(dǎo)率達(dá)100%，培養(yǎng)50天左右每個(gè)根外植體均長滿愈傷組織，胚狀體誘導(dǎo)率90%，植株生長健壯。
【專利說明】一種利用百合根誘導(dǎo)愈傷組織及胚狀體的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬植物組織培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種利用百合根誘導(dǎo)愈傷組織及胚狀體的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]百合是百合科(Iiaceae)百合屬(m)植物的統(tǒng)稱，百合不僅以其花朵大型、色彩豐富、氣味芳香而為世界各國人民所青睞，而且還具有食用和藥用價(jià)值。
[0003]百合的傳統(tǒng)繁殖方式以鱗莖、鱗片、珠芽繁殖為主，也可用種子繁殖。但這些方法繁殖系數(shù)較小，特別是經(jīng)多代繁殖以后，常造成種性退化，甚至病毒積累，影響百合的產(chǎn)量和質(zhì)量，制約了百合鱗莖和切花的大規(guī)模生產(chǎn)。
[0004]百合的組織培養(yǎng)和植株再生可通過如下三條途徑來實(shí)現(xiàn):(I)器官發(fā)生途徑，即通過外植體腋芽發(fā)育和不定芽的產(chǎn)生，形成叢生芽塊的過程；(2)愈傷組織誘導(dǎo)及再分化途徑，即外植體首先經(jīng)誘導(dǎo)形成愈傷組織，然后再經(jīng)分化形成不定芽的過程；(3)胚狀體發(fā)生途徑，即通過外植體直接誘導(dǎo)產(chǎn)生胚狀體或先形成愈傷組織，再經(jīng)愈傷組織形成胚狀體的過程。通過這三條途徑可以在一定時(shí)間內(nèi)從一個(gè)外植體繁殖出幾百個(gè)甚至千萬個(gè)具有相同遺傳性狀的小植株，為植 物的繁殖生產(chǎn)提供了一條新的途徑。因此，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，能夠迅速去除病毒和更新品種，加快百合的快速繁殖速度，縮短百合的生育周期，彌補(bǔ)種球繁育的不足，是百合商品化及產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的必然趨勢。
[0005]用于百合離體快繁的外植體有鱗片、種子、珠芽、莖段、花瓣、花絲、葉片、花藥、子房、花梗等，但是迄今還未見有用根作外植體的報(bào)道。與莖葉等其他組織培養(yǎng)相比，植物根組織培養(yǎng)相對滯后，百合根組織培養(yǎng)更為突出，但根組織培養(yǎng)具有獨(dú)特且不可代替的作用和優(yōu)點(diǎn)，故有廣泛、深入開展研究的必要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種利用百合根誘導(dǎo)愈傷組織及胚狀體的培養(yǎng)方法。通過采用含有特殊成分(6-BA細(xì)胞分裂素、PIC除草劑和水解酪蛋白)的MS培養(yǎng)基進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，針對百合根外植體，用本發(fā)明特定的培養(yǎng)方法，使百合根誘導(dǎo)愈傷組織的誘導(dǎo)率達(dá)100%，培養(yǎng)50天后每個(gè)根外植體均長滿胚性愈傷組織，胚狀體誘導(dǎo)率90%，植株生長健壯。
[0007]所述的利用百合根誘導(dǎo)愈傷組織及胚狀體的方法，包括以下步驟:
[0008]I)選取百合無菌苗的根，接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，進(jìn)行暗培養(yǎng)，培養(yǎng)室溫度為25±2°C。
[0009]2)將暗培養(yǎng)獲得的愈傷組織上的胚狀體轉(zhuǎn)接到生長和生根培養(yǎng)基上，光下進(jìn)行培養(yǎng)，每天16-20小時(shí)光照，溫度為25±2°C。
[0010]3)胚狀體變綠，逐漸發(fā)育成正常植株，并生根。
[0011]其中，上述方法中，所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基1L、蔗糖30000mg/L、瓊脂粉5000mg/L,以及由6-BA 0.5_2mg/L，PIC 0.5_2mg/L，水解酪蛋白500mg/L組成的特殊成分配置而成。
[0012]所述的生長和生根培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基1L、BA 0.2mg/L, HMI 0.2mg/L配置而成。
[0013]所述的MS培養(yǎng)基為市售常規(guī)產(chǎn)品，其成分及用量如下表1所示，其中mg/L表述每升MS培養(yǎng)基中含各成分的毫克數(shù)。
[0014]表1
【權(quán)利要求】
1.一種利用百合根誘導(dǎo)愈傷組織及胚狀體的方法，其特征在于，包括以下步驟:1)選取百合無菌苗的根，接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，進(jìn)行暗培養(yǎng)，培養(yǎng)室溫度為25±2°C；2)將暗培養(yǎng)獲得的愈傷組織上的胚狀體轉(zhuǎn)接到生長和生根培養(yǎng)基上，光下進(jìn)行培養(yǎng)， 每天16-20小時(shí)光照，溫度為25±2°C ;3)胚狀體變綠，逐漸發(fā)育成正常植株，并生根。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基1L、蔗糖 30000mg/L、瓊脂粉 5000mg/L，以及由 6-BA 0.5_2mg/L，PIC 0.5_2mg/L，水解酪蛋白 500mg/ L組成的特殊成分配置而成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生長和生根培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基 1L、BA 0.2mg/L, HMI 0.2mg/L 配置而成?！?br> 【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103563740SQ201210255956
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2012年7月23日 優(yōu)先權(quán)日:2012年7月23日
【發(fā)明者】周音, 張建軍, 陳敏敏, 謝紀(jì)紅 申請人:上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院